Ротовирусная кишечная инфекция лечение у взрослых: СЕЗОННЫЕ КИШЕЧНЫЕ ИНФЕКЦИИ. Симптомы, лечение, профилактика — Городская Больница

Содержание

Кишечные инфекции у детей — симптомы, методы лечения, цены

Кишечная инфекция – заболевание, вызванное различными видами вирусов ( ротавирус , норовирус и другие) или бактериями ( сальмонелла, шигелла, иерсиния, стафилококк и другие), которая сопровождается местными и общими симптомами.

Попадая в организм ребенка возбудители кишечной инфекции начинают активно размножаться, в результате чего нарушается процесс пищеварения и воспаляется слизистая оболочка кишечника.

Вирусные кишечные инфекции в развитых странах занимают по распространенности второе место, после острых респираторных вирусных инфекций. А в большинстве развивающихся стран кишечная инфекция вообще стоит на первом месте. Нет ни одного человека на земле, который ни разу в жизни не переболел бы кишечной инфекцией. Возбудители кишечной инфекции могут поражать определенные отделы желудочно-кишечного тракта. Давайте поподробнее разберем эти отделы и симптоматику, которая может быть при их поражении.

1) Гастрит — воспаление слизистой оболочки желудка (боль в животе выше пупка, тошнота, многократна рвота, жидкий стул от 1 до 4-5 раз)

2) Гастроэнтерит – воспаление слизистой оболочки желудка и тонкого кишечника ( боль в области пупка, рвота, частый кашицеобразный или водянистый, пенистый стул , с непереваренными частичками пищи).

3) Энтерит – воспаление слизистой оболочки тонкого кишечника (водянистый стул, тошнота, рвота, спазмы кишечника).

4) Гастроэнтероколит – воспаление слизистой оболочки желудка, тонкого и толстого кишечника (боль в животе, при опорожнении, жидкий стул, может быть со слизью).

5) Энтероколит – воспаление слизистой оболочки тонкого и толстого кишечника (сильные боли в животе, частые позывы на опорожнение, жидкий стул со слизью, могут быть прожилки крови).

6) Колит – воспаление толстого кишечника (боли в нижней части живота, понос со слизью и прожилками крови).

Пути передачи кишечной инфекции:

  • Фекально-оральный
  • Воздушно-капельный
  • Контактно- бытовой

Симптомы кишечной инфекции у детей:

  • Повышение температуры тела
  • Общее недомогание
  • Слабость
  • Вялость
  • Сонливость
  • Головная боль или головокружения
  • Боль в животе
  • Рвота
  • Понос
  • Отказ от приема пищи

Также могут быть симптомы обезвоживания:

  • ухудшение самочувствия
  • сухость во рту
  • бледность кожных покровов
  • повышенная жажада
  • запавшие глаза
  • аномальное дыхание
  • плач без слез
  • заторможенное состояние

Теперь давайте подробнее разберем наиболее распространенные кишечные вирусные инфекции.

Ротавирусная инфекция.

Ротавирусная инфекция вызывается ротавирусом. Путь передачи фекально-оральный, контактно-бытовой или воздушно-капельный.

Инкубационный период от 1 до 5 суток, острый период 3-5 дней.

Характерно острое начало – рвота, резкое повышение температуры тела до 38-39 С, схваткообразные боли в животе, диарея до 10-15 раз в сутки, отсутствие аппетита, упадок сил, кал светлый, пенистый, моча темная, снижение или отсутствие аппетита, рвота после еды.

Иногда может сопровождаться болью в горле, насморком, коньюктивитом. Вирус может длится до 5-7 дней.

Диагностика: обнаружение антигена в кале и антитела в крови.

Лечение:

  • Диета
  • Выпаивание солевыми растворами
  • Энтеросорбенты
  • Антибактериальные препараты (при необходимости)
  • Пищеварительные ферменты
  • Жаропонижающие средства
  • Антибиотики (при присоединении бактериальной инфекции)

В любом случаем препараты назначает исключительно врач.

От ротавирусной инфекции существует прививка — Ротатек, которая защитит вашего малыша на долгое время, но применение ее возможно только в раннем детском возрасте, начиная с 2 месяцев. Делается она трехкратно.

Ротавирус может быть крайне опасен для детей до 2 лет.

Норовирусная инфекция.

Один из разновидностей энеровирусов.

Пути передачи:

  • пищевой ( немытые овощи и фрукты)
  • водный ( употреблениезараженной воды)
  • контактно-бытовой ( грязная посуда, предметы обихода, немытые руки)

Инфицированный человек заразен в период острой фазы и в течении 2 суток после.

Наиболее восприимчивы дети до 5 лет, пожилые, люди с заболеваниями кишечника и желудка, люди с ослабленным иммунитетом. Симптомы появляются через 15-48 часов после заражения: острая диарея, рвота, лихорадка, тошнота, озноб.

Признаки заболевания проходят обычно самостоятельно в течении 2-3 дней. Главная опасность это обезвоживание. Лечение обычно симптоматическое, госпитализация показана только в случае сильного обезвоживания. Назначается щадящая диета до нормализации стула, регидратационная терапия.

Теперь давайте разберемся в кишечных инфекциях, вызванных бактериями.

Ботулизм — болезнь, возникающая в результате отравления токсинами бактерий ботулизма.

Очень опасная инфекция. Поражает нервную систему, приводит к тяжелым последствиям. Возбудитель попадает в организм с пищевыми продуктами, водой или аэрозолей, содержащих ботулотоксин. Входные ворота – слизистые оболочки дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта, а так же поврежденной кожи. Инкубационный период от нескольких часов до 3-5 дней. Болезнь начинается остро с тошноты, рвоты, болей в животе и жидкого стула, затем появляется чувство распирания в желудке, повышенное газообразование, запор( что свидетельствует о начинающемся парезе кишечника).

Затем проявляются неврологические симптомы: свисает голова, нарушение зрительных функций, сухость слизистых носоглотки, скопление в ней слизи. Наступление выздоровления наступает медленно.

Диагноз ставится на основании данных лабораторных исследований. Большую роль имеет факт группового заражения у людей , употреблявших в пищу один и тот же продукт (консервы, соки домашнего приготовления, вяленые рыба и мясо, консервированные овощи и грибы).

Больные с подозрением на ботулизм нуждаются в обязательной госпитализации, в связи с необходимостью проведения специфической терапии.

Лечение – промывание желудка, кишечный диализ, введение антитоксической сыворотки, инфузионная терапия, антибактериальная терапия, а так же лечение присоединившихся осложнений.

Дизентерия.

Это инфекционное заболевание, вызванное бактериями рода Шигелла, поражающими желудочно – кишечный тракт, в основном толстую кишку. Возбудитель очень хорошо выживает во внешней среде и в зависимости от температурных условий может находиться в ней от нескольких дней до нескольких месяцев. Шигеллы могут размножаться в пищевых продуктах (салаты, фарш, вареное мясо, вареная рыба, молоко и молочные продукты). Источником инфекции являются больные и бактерионосители, выделяющие бактерию (шигеллу)во внешнюю среду с фекалиями. Длительность выделения бактерии как правило не превышает 7-10 дней( может затянуться до 3 недель). Более чувствительны к инфекции люди с А(II) группой крови. Инкубационный период от 2-3 до 7 дней. Тяжесть течения зависит от пути проникновения инфекции и способа заражения, а также количества попавших микробов в организм.

Клиника: заболевание начинается с синдрома общей интоксикации (озноб, повышение температуры тела, головная боль, снижение аппетита, утомляемость). Затем наступает поражение желудочно — кишечного тракта, проявляющееся схваткообразными болями в животе, которые усиливаются перед опорожнением кишечника. По форме течения можно разделить на 3 группы.

  • Легкую форму течения.
  • Температура тела повышается до 38 С и сохраняется, как правило 2-3 дня. Боли в животе, перед актом дефекации. Стул кашицеобразный или полужидкий, до 10-12 раз в сутки. Интоксикация сохраняется 2-3 дня, полное выздоровление наступает в течении 2-3 недель.

  • Среднетяжелая форма течения.
  • Температура тела повышается до 38-39 С и держится до 3-4 суток. У больных появляется слабость, головная боль, отсутствие аппетита, головокружения, схваткообразные боли в животе, частые ложные позывы к дефекации, стул до 20 раз в день, с прожилками крови и слизи, кожные покровы бледные, язык с белым налетом. Интоксикация сохраняется до 5 дней, полное выздоровление наступает через 30-45 дней.

  • Тяжелая форма течения.

Очень быстрое развитие интоксикации с нарушением деятельности сердечно- сосудистой системы. Повышение температуры тела 40 С и выше, сильная головная боль, резкая слабость, сильные головокружения, полное отсутствие аппетита, тошнота, рвота, боли в животе, частые позывы к дефекации и к мочеиспусканию, стул более 20 раз в сутки. Разгар болезни длится до 10 дней, выздоровление медленное, полное восстановление через 2-3 месяца.

Диагностика: выявление возбудителя в кале, обнаружение антигенов и их токсинов в слюне, моче, кале и крови. Лечение симптоматическое, подбирается индивидуально исходя из тяжести течения.

Сальмонеллез.

Сальмонеллы – группа бактерий, вызывающих инфекционные заболевания желудочно-кишечного тракта. Отравление как правило вызвано загрязненной водой или продуктами питания (особенно яйцами и птичьим мясом).

Симптоматика:

  • Спастические боли в области живота
  • Диарея
  • Рвота
  • Тошнота
  • Цвет кала темно-зеленый, с резким тухлым запахом.

Симптомы проявляются как правило в течении 1-2 суток после заражения. Выздоровление наступает через 5-7 дней.

Диагностика: определение днк вируса методом ПЦР, посев кала на выявление возбудителя, копрограмма.

Лечение:

  • выпаивание солевыми растворами маленькими порциями
  • диета
  • противорвотные средства при необходимости
  • сорбенты
  • антибиотики курсом ( вне зависимости от тяжести течения и формы)
  • полезные бактерии
  • жаропонижающие

Исход заболевания, как правило благоприятный.

Иерсиниоз — бактериальное заболевание, вызванное бактерией иерсиния, поражающее пищеварительный тракт, суставы и внутренние органы.

Симптоматика:

  • повышение температуры тела (повышается до высоких цифр, держится долго), сопровождается слабостью, мышечными болями, иногда рвотой и головной болью
  • боль в животе
  • диарея
  • стул разжиженный, может быть с примесью зелени и слизи
  • увеличиваются лимфоузлы всех групп
  • увеличивается печень, иногда селезенка
  • через 1-2 недели появляются боли в суставах

Диагностика: в первые три дня возбудителя выделяют в крови и в слизи из носоглотки, до 6 дней исследуют мочу и кал.

Лечение.

  • антибиотики (аминогликозиды, цефалоспорины, левомицетин и другие)
  • иммуномодуляторы (при рецидивах и при осложнениях)
  • сорбенты (при расстройстве кишечника)
  • антигистаминные препараты (уменьшение воспалительного процесса)
  • кортикостероидные гормоны (при тяжелом поражении суставов и при неэффективности лечения)
  • инфузионная терапия и водно-солевые растворы (при сильной интоксикации).

Прогноз болезни как правило благоприятный, но все зависит от того как быстро был обследован малыш и начато лечение. При правильном лечении ребенок полностью выздоравливает.

Принципы профилактики кишечной инфекции.

  • Соблюдение правил личной гигиены: мытье рук перед едой , после улицы и после посещения туалета.
  • Следить за чистотой рук у малышей и учить их соблюдать правила гигиены с раннего возраста.
  • Использовать для приготовления пищи и употреблять только бутилированную или кипяченную воду.
  • Обязательно мыть овощи и фрукты перед их употреблением ( можно мыть под проточной водой, если она хорошего качества, а также можно использовать специализированные средства для мытья овощей)
  • Тщательная термическая обработка продуктов перед их употреблением в пищу.
  • Использование индивидуального белья и полотенец.
  • Если вы едите на природу, необходимо иметь с собой запас чистой питьевой воды.( ни в коем случае нельзя употреблять воду из водоемов)
  • Купаться только там, где это разрешено и не допускать попадания воды в рот.

Так чем же все таки кормить ребенка при кишечной инфекции?

Давайте подробнее распишем питание.

Что можно?

Сухари из пшеничного хлеба высшего сорта. Супы на обезжиренном слабым мясном или рыбном бульоне, с добавлением слизистых отваров круп (рис, манка ), мясо протертое, паровые фрикадельки. Мясо – нежирные и нежилистые сорта индеек, кур, кроликов, ягненок. Мясо обезжиривают, удаляют сухожилия и фасции, у птицы удаляют еще и кожу. Из мяса делают – кнели, фрикадельки, паровые котлетки, суфле. Рыба – нежирные сорта, сваренные на пару или воде. Крупы- рис, овсянка, гречневая. Овощи – только в виде отваров для добавления в суп. Также можно сделать кисель или желе из черники, айвы, черемухи, груш, печеное яблочко. Отвары из шиповника, сушеной черники, черной смородины, черемухи, айвы, зеленый чай.

Что нужно исключить из меню?

Нужно исключить все молочные продукты, супы с крупами, овощами, макаронными изделиями, крепкие и жирные бульоны, жирные сорта мяса, колбасы, жирную рыбу, соленую рыбу, икру, консервы, пшено, перловую, ячневую крупу, бобовые, макаронные изделия, фрукты, овощи и ягоды в сыром и натуральном виде, сухофрукты, компоты, мед, варенье и сладости.

Для малышей до года самым оптимальным питанием при кишечной инфекции является грудное вскармливание, кормить малыша следует дробно маленькими порциями (каждые 2 часа по 50 мл). Если же малыш находится на искусственном вскармливании, то рекомендуется применение низколактозных или безлактозных смесей . Если у вашего ребенка болит живот, не стоит заниматься самолечением, а следует незамедлительно обратиться к врачу. Специалисты клиники Здоровье Детям с удовольствием окажут вашему малышу квалифицированную помощь, наши специалисты выезжают на дом и ведут прием на базе медицинского центра.


Кишечная инфекция у детей

Кишечная инфекция у детей — одна из наиболее серьезных проблем в детской практике. Кишечные инфекции распространены и охватывают детский возраст от 0 до 18. После ОРВИ они стоят на первом месте.
Сначала нужно помнить и отличать кишечную инфекцию от другой неифекционной диареи.
Данная статья будет посвящена мероприятиям при легкой степени заболевания кишечной инфекции у детей.

Лечение кишечных инфекций состоит из комплексной терапии: 
— регидрационная;
— антибактериальная;
— вспомогательная терапия;
— диетотерапия
Начинать лечиться необходимо с режимных мероприятий и организации лечебного стола. Важно помнить, что диета — первое, на что следует обратить внимание.
Зачастую при диарее назначается стол, при которой молочные продукты запрещены. В данном же случае, если мы точно знаем, что это кишечная инфекция, а не ротавирусная, то придерживаться необходимо молочно-растительной диеты.
Частота приема еды увеличивается до 6 раз в день (для грудных детей до 8 раз в день).
Пища должна быть механически щадящая.

Исключить необходимо: сладости, соки, цельное молоко, концентрированные мясные бульоны, свежие овощи и фрукты. В питание ребенка добавить больше таких продуктов: печеные яблоки, бананы, каши на воде, отварные овощи.

Для профилактики обезвоживания нужно много пить! Детям младше 2х лет — по 50-100 мл воды после каждого стула, от 2 до 10 лет  — по 100-200 мл после каждого стула. Если обезвоживание есть, лечение необходимо продолжать в стационаре!

Препараты для профилактики обезвоживания: Регидрон, Цитроглюкосолан, Гидровит и другие, Хумана Электролит и другие.
Также в комплексном лечении кишечной инфекции у детей используют антибактериальные препараты при установленном бактериальном возбудителе (Ампициллин, Цефтриаксон, Гентамицин, Эритромицин и другие). Выбор антибиотика будет зависеть от диагноза, вида возбудителя,тяжести заболевания. Перед применением необходимо проконсультироваться с врачом.  

Для улучшения состояния ребенка используется симптоматическая и вспомогательная терапия:

  • Энтеросорбенты — обволакивают слизистую кишечника и выводят токсические вещества из организма (Смекта, Энтеросгель, Полисорб и другие).
  • Пробиотики — способствуют нормализации биоценоза кишечника (Нормобакт, Бифиформ, Баксет-беби, Наринэ и другие)
  • При болях в животе назначаются спазмолитики (ношпа, тримедат).
  • Зачастую в практике педиатра используется препарат Энтерофурил. Он представляет собой кишечный антисептик широкого спектра действия, обладающий способностью уничтожать патогенные микроорганизмы в просвете кишечника и, тем самым, купировать инфекционный понос. 
  • Энтерол. Это лекарственный препарат, представляющий собой противодиарейное средство, которое регулирует состав и сбалансированность микрофлоры кишечника.

В современной медицине в патогенетической терапии зачастую используются бактериофаги. 
Установлено, что, несмотря на способ применения, бактериофаги способны быстро проникать в кровь и лимфу и выводиться через почки с мочой. Попадая в очаг воспаления, бактериофаги оказывают положительное влияние на иммунный статус.
Накоплен положительный опыт эффективности бактериофагов при лечении кишечных инфекций.
Перед применением также необходима консультация специалиста. 

Для успешного лечения кишечной инфекции у ребенка необходимы:
— осмотр педиатра или инфекциониста;
— лабораторные исследования для уточнения диагноза (кишечную инфекцию необходимо диагностировать с ротавирусной инфекцией и с неинфекционной диареей!) —  жалобы при данных заболеваниях схожи;
— правильно установленный диагноз;
— комплексное лечение;
— наблюдение в динамике.


Будьте здоровы!

 

Острые кишечные инфекции. Ротавирусная инфекция.

Острыми кишечными инфекциями называется группа (свыше 30) инфекционных заболеваний с преимущественным поражением кишечника. Возбудителями острых кишечных инфекций могут быть различные вирусы и бактерии. Кишечные инфекции на втором месте после респираторных заболеваний по частоте распространения среди всех человеческих болезней. Лето – особенно «благодатная пора» для этого вида заболеваний.

При первых же симптомах кишечной инфекции необходимо срочно обратиться за медицинской помощью! Свыше половины всех случаев кишечных инфекций приходится на детей. Ежегодно на планете умирает от кишечных инфекций около 1 млн. детей (чаще в возрасте до 2 лет). Основной причиной является сильная диарея с обезвоживанием организма.

Причины кишечных инфекций

Острые кишечные инфекции могут быть вызваны бактериями (сальмонелла, холера, стафилококк и др.), а также вирусами (напр., энтеровирусная, ротавирусная инфекция).

Заболевание передается через пищу, воду, предметы общего пользования.

Возбудители кишечных инфекций бактериальной природы вырабатывают яд энтеротоксин, который при попадании в кишечник вызывает отравление.

Виды кишечных инфекций

Выделяют следующие основные кишечные инфекции:

  • дизентерия;
  • холера;
  • сальмонеллез;
  • пищевое отравление стафилококком;
  • энтеровирусная и ротавирусная инфекция у детей и др.

Рассмотрим некоторые из них более подробно.

Пищевые отравления стафилококком

Источником стафилококковой инфекции являются больные ангиной, фарингитом, тонзиллитом, гнойными поражениями кожи. Частой причиной отравления являются такие продукты, как молоко, кефир, рыба, мясо, которые хранились или были приготовлены с нарушением гигиенических норм.

Характерные симптомы данного заболевания —  боль в животе, рвота и понос, повышение температуры до 38-39 С – возникают уже через 5-8 часов после употребления некачественного продукта.

Сальмонеллез

Основной источник заражения сальмонеллезом — крупный рогатый скот, лошади, свиньи, кошки, собаки, птицы и другие животные. Основная причина заболевания – употребление в пищу неправильно приготовленных мяса или яиц, зараженных бактерией. Возможно и заражение от больного или носителя сальмонелл.

Инкубационный период заболевания — от  5 часов до 3 суток.

Характерные симптомы — слабость, боль в животе, тошнота и рвота, повышение температуры до 38-39 С, стул до 15 раз в сутки в течение 5-8 дней (испражнения водянистые, с зеленоватым оттенком). Лечение должно проводиться в стационарных условиях.

Ротавирусная инфекция

На ротавирусную инфекцию приходится почти половина всех кишечных расстройств. Заболевание чрезвычайно заразно, передается воздушно-капельно, через грязные руки, сырую воду (хлорка бессильна перед ротавирусом). В народе ротавирусную инфекцию часто называют «кишечным гриппом» или «желудочным гриппом», поскольку среди симптомов есть признаки, свойственные гриппу – кашель, чихание.

Для ротавирусной инфекции характерно острое начало, причем дети переносят болезнь острее, чем взрослые. Основные симптомы – рвота (возможно со слизью, позывы к рвоте возникают даже при условии пустого желудка), резкий упадок сил, потеря аппетита, повышение температуры иногда выше 39 С (иногда она может держаться до 5 дней, и сбить ее очень трудно). Стул в первые сутки желтый, жидкий, а в последующие дни — глинообразный, серо-желтый. Больные жалуются на боль в горле при глотании и насморк.

У грудных детей, которые в силу возраста не могут описать своё состояние, признаком наличия боли служит плач и урчание в животе, частый жидкий стул. Малыши стремительно теряют вес, становятся раздражительными, сонливыми и плаксивыми.

Лечение кишечных инфекций

1

Гастроэнтерология в МедикСити

2

Гастроэнтерология в МедикСити

3

Дневник здоровья

За редким исключением, лечение кишечных инфекций не зависит от возбудителя заболевания и направлено на борьбу с микробами, поддержание нормального функционирования ЖКТ, устранение диареи и предотвращение обезвоживания.

При лечении ротавирусной и других инфекций требуется соблюдение диеты, обильное питье, назначение антибактериальных препаратов и энтеросорбентов. Также при необходимости принимаются меры для снижения высокой температуры.

Основу диеты при кишечных инфекциях составляют каши на воде, кисломолочные продукты, сухари из белого хлеба и крепкий несладкий чай. Нельзя употреблять цельное молоко, темный хлеб, сахар, сырые фрукты и овощи.

Обращение к врачу – обязательно условие при наличии любых симптомов кишечных инфекций. Некоторые кишечные инфекции требуют стационарного лечения!

 

Противовирусный препарат в комплексной терапии острых кишечных инфекций вирусной и вирусно-бактериальной этиологии у детей | УЧАЙКИН

1. Kapikian A. Norwalk and Norwalk-like Viruses / Viral Infections of the Gastrointestinal Tract., Ed. by Kapikian A. — 1994. — P. 471— 507.

2. Human Torovirus: A New Nosocomial Gastrointestinal Pathogen / F. Jamieson et al. // J. of Infectious Diseases. — 1998, Jan. — P. 1263—1269.

3. Etiology of community-acquired pediatric viral diarrhea: a prospective longitudinal study in hospitals, emergency departments, pediatric practices and child care centers during the winter rotavirus outbreak, 1997 to 1998 / V. Waters et al. // Pediatric infectious disease journal. — 2000. — No 9. — V. 19. — P. 843—848.

4. Enteric Adenoviruses. In: Viral Infections of the Gastrointestinal Tract / Ed. by Kapikian A. / G. Wadell, A. Allard, M. Johansson, I. Uhnoo. — 1994. — P. 519—547.

5. Морфологические критерии электронно-микроскопической диагностики коронавирусных и торовирусных гастроэнтеритов у детей и взрослых: Мат. Всероссийской научной конференции: Современные аспекты вакцинопрофилактики, химиотерапии, эпидемиологии, диагностики гриппа и других вирусных инфекций / А.К. Сироткин и др. — СПб., 2001 — С. 37.

6. Bradley Sack R., Rabbani G. Treatment of Diarrhea Disease. // Viral Infections of the Gastrointestinal Tract., Ed. by Kapikian A. — 1994 — P. 753—777.

7. Cubitt W. Caliciviruses. In: Viral Infections of the Gastrointestinal Tract / Ed. by Kapikian A. — 1994. — P. 549—569.

8. Moon H. Pathophysiology of Viral Diarrhea. In: Viral Infections of the Gastrointestinal Tract / Ed. by Kapikian A. — 1994. — P. 27— 53.

9. Изучение этиологии ОКИ у детей, госпитализированных в инфекционные отделения г. Москвы / А.Т. Подколзин и др. // Инфекционные болезни. — 2004. — No 4. — С. 85—91.

10. Битиева Р.Л. Оценка новых подходов к диагностике и терапии ротавирусной инфекции у детей: Автореф. дисс. … к.м.н. — М., 2007. — 23 с.

11. Горелов А.В. Ротавирусная инфекция у детей / А.В. Горелов, Д.В. Усенко // Вопр. современной педиатрии. — 2008. — Т. 7, No 6. — С. 76—83.

12. Новокшонов А.А. Этиопатогенетическая терапия острых кишечных инфекций вирусной этиологии у детей //Медицинский совет. —2010. — No 11—12. — С. 71—76.

13. Особенности вирусспецифического действия препарата арбидол / И.А. Ленева и др. // Арбидол. Новые данные. — М.: Мастерлек, 2004. — С. 3—13.

14. Ленева И.А. Механизм вирусспецифического действия препарата арбидол: Автореф. дисс. … д.б.н. — СПб., 2005. — 34 с.

15. Экспериментальные данные по эффективности арбидола в отношении возбудителя атипичной пневмонии (SARS) in vitro и vivo / Р.А. Хамитов и др. — М.: Мастерлек, 2004. — С. 43—46.

16. Мурадян А.Я. Роль коронавирусной инфекции в острой патологии респираторного тракта: Автореф. дисс. … к.м.н. — СПб., 2005. — 20 с.

17. Панченко Л.А. Коронавирусная кишечная инфекция (этиология, диагностика, клинико-эпидемиологические параллели у детей): Автореф. дисс. … д.м.н. — Харьков, 1994.

18. Гусева В.М. Противовирусная активность арбидола в отношении коронавирусов человека: Мат. Международ. науч. конф. Актуальные вирусные инфекции — теоретические и практические аспекты / В.М. Гусева, В.В. Зарубаева. — СПб., 2004. — С. 40.

19. Противовирусный препарат Арбидол как перспектива этиотропной терапии ротавирусной инфекции у детей / В.Ф. Учайкин и др. // Детские инфекции. — 2004. — No 3 (8). — С. 34— 39.

20. Мартынова Г.П. Опыт применения противовирусного препарата «Арбидол» в этиотропной терапии ротавирусной инфекции у детей: Мат. IV Конгресса педиатров-инфекционистов России / Г.П. Мартынова, Н.В. Коган. — М., 2005. — С. 115.

21. Осидак Л.В. Острые вирусные инфекции с сочетанным поражением респираторного и желудочно-кишечного трактов у детей: пособие для врачей / Л.В. Осидак, Е.А. Дондурей, В.П. Дриневский. — С.-Петербург, 2007. — 89 с.

22. Brooks M.J. Antiviral chemotherapeutic agents against respiratory viruses: where are we now and what’s in the pipeline / M.J. Brooks, J.J. Sasadeusz, G.A. Tannock // Curr. Opin. Pulmonary Med. — 2004. — 10. — Р. 197.

23. Antiviral Activity of Arbidol, a Broad-Spectrum Drug for Use Against Respiratory Viruses, Varies According to Test Conditions / M.J. Brooks // J Med Virol. — 2012 Jan. — 84(1): 170—181.

24. Изучение противовирусной активности отечественных противогриппозных химиопрепаратов в культуре клеток и на модели животных / И.А. Ленева и др. // Вопр. вирусологии. — 2010. — Т.55,No3.

25. Изучение чувствительности пандемических вирусов гриппа A 2009 h2N1 и высоковирулентных вирусов гриппа птиц A (H5N1) к противогриппозным химиопрепаратам / И.Т. Федякина и др. // Антибиотики и химиотерапия. — 2011. — Т. 56, No 3/4. — С. 3—9.

Ротавирусная инфекция у детей | Москва

Ротавирусная инфекция разрушает слизистую оболочку кишечника, желудка и двенадцатиперстной кишки, что приводит к дегидрации и кишечным расстройствам.

Ротавирусная инфекция в народе именуется, как кишечный грипп, с одной существенной поправкой: грипп — это все же респираторная инфекция, а ротавирусная инфекция разрушает слизистую оболочку кишечника, желудка и двенадцатиперстной кишки, что приводит к дегидрации и кишечным расстройствам.

Способ заражения — контактно-бытовой.

Ротавирусная инфекция при беременности может стать опасной для ребеночка в случае, если началось обезвоживание организма. Когда болезнь определяется на ранних ее стадиях и грамотно подбирается терапия, то можно избежать всех неприятных и летальных исходов заболевания.

Ротавирусная инфекция у детей встречается чаще, чем у взрослых в виду того, что у деток иммунная система еще не совсем окрепшая, и вирус успевает быстро и легко проникнуть в организм. Первые несколько суток после заражения ребенок может прекрасно себя чувствовать, но в какой-то момент начинается резкое обострение с явными симптомами отравления: рвота, диарея, першение в горле, повышение температуры, отек миндалин, сонливость и вялость, отсутствие аппетита, схваткообразные боли в животе. При появлении первых симптомов ротавируса поспешите обратиться к врачу для оптимального выбора комплекса дальнейших действий.

Ротавирусная кишечная инфекция лечение

В зависимости от степени тяжести болезни и возраста пациента схема лечения может быть совершенно разной, осуществляться дома или в стационаре. Основные задачи по предотвращению осложнений — это:

  • Борьба с обезвоживанием
  • Детоксикация организма, то есть уменьшение отравляющего воздействия вируса
  • Снижение жара
  • Устранение боли в кишечнике
  • Восстановление микрофлоры

Ротавирусная инфекция у детей, помимо терапии, подразумевает и соблюдение диеты во время недуга и после него. Обязательно временно исключите из рациона молочные продукты, приправы, свежие овощи, жиры, газированные напитки.

В целях профилактики возникновения данной болезни старайтесь следовать правилам личной гигиены, не пейте воду из под крана, избегайте контакта с зараженными людьми. Существует вакцинация против ротавируса, однако бытуют множество споров относительно надобности и эффективности ее проведения.

В сети клиник «Семейная» работают опытные педиатры. Для получения консультации и прохождения лечения, вы можете обратиться по телефону или записаться через онлайн форму заявки.

Запись на прием к врачу педиатру

Обязательно пройдите консультацию квалифицированного специалиста в области детских заболеваний в клинике «Семейная».

 

Чтобы уточнить цены на прием врача педиатра или другие вопросы пройдите по ссылке ниже

Ротавирус — чем опасен «кишечный грипп» и какие продукты категорически запрещены


С началом нового учебного года наступает тревожная пора для родителей, ведь впереди не только новые уроки и домашние задания, но и, к сожалению, больничные. Почему ребёнка перед садиком лучше не возить на море, чем может быть вредно промывание носа соляными растворами и когда лучше прививаться от гриппа, – об этом и многом другом рассказывает заведующая кафедрой детских инфекционных болезней ВГМУ им. Бурденко Светлана Петровна Кокорева.

– Ротавирус не зря называют кишечный грипп. Сезон ротавирусной инфекции, как и обычного гриппа – это холодное время года. Классика ротавируса – высокая температура, рвота, водянистый и обильный стул. Ротавирусная инфекция длится всего 4-5 дней, но они могут быть очень тяжёлыми. Особенно опасен ротавирус для грудных детей, а также для тех, кто плохо набирает вес, – в течение суток, а то и раньше у ребёнка может наступить обезвоживание. В любом случае при возникновении симптомов кишечной инфекции нужно сразу обращаться к врачу. А также в первые 2-3 дня соблюдать диету: нельзя молочные продукты, свежие овощи-фрукты, категорически запрещены бульоны, жирное мясо, нежелательно сладкое, чтобы избежать бродильных процессов в желудке. Можно: отварной рис, картофельное пюре без масла, белый подсушенный хлеб, печёные яблоки, бананы. И обязательно следить за выпитым. После каждого эпизода диареи детям до 2 лет давать 50-100 мл жидкости, старше 2 лет – 100-200 мл. Справиться с диареей помогают лекарства-сорбенты. Но я бы не советовала давать ребёнку столь популярный активированный уголь. Он обладает низким сорбционным эффектом, поэтому его надо принимать в огромных количествах, что не очень полезно для кишечника ребёнка. Есть более современные и действенные средства.

Кстати, похожие симптомы возникают и при норовирусе – это сравнительно новая инфекция, которую мы начали массово регистрировать в регионе с 2010 года. Норовирус вызывает рвоту, разжижение стула, но протекает не со столь выраженной диареей, как ротавирус, и часто встречается у детей в тёплое время года. 

По материалам сайта Моё-онлайн



Сравните причины, симптомы, методы лечения и многое другое

Ротавирус и норовирус — две причины вирусного гастроэнтерита, иногда называемого «желудочным гриппом»

Причины | Распространенность | Симптомы | Диагностика | Лечение | Факторы риска | Профилактика | Когда обратиться к врачу | FAQs | Ресурсы

Тошнота, рвота, диарея — большинство людей называют эти симптомы «желудочным заболеванием» или «желудочным гриппом», но медицинский термин для желудочного гриппа — вирусный гастроэнтерит.

Гастроэнтерит — это воспаление кишечника: ежегодно этим заболеванием болеют более 20 миллионов человек в США. Желудочный грипп или вирусный гастроэнтерит чаще всего вызывается вирусами. Однако вирусы, вызывающие желудочный грипп, отличаются от вирусов, вызывающих грипп (грипп, вызывающий лихорадку, боли в теле и респираторные симптомы).

Две частые причины вирусного гастроэнтерита — ротавирус и норовирус. Аденовирус, саповирус и астровирус — это другие вирусы, которые могут вызывать проблемы с желудком, но встречаются реже, чем ротавирус и норовирус.

Ротавирус — это вирус, вызывающий желудочно-кишечные симптомы, в первую очередь у младенцев и детей младшего возраста. Вакцина может предотвратить ротавирус.

Норовирус — распространенный вирус, вызывающий гастроэнтерит. Норовирус — наиболее частая причина рвоты, диареи и болезней пищевого происхождения.

В этой статье мы обсудим ротавирус и норовирус. У них много общего, а также много различий. Продолжайте читать, чтобы узнать все о ротавирусе и норовирусе.

Причины

Ротавирус

Ротавирусы — это РНК-вирусы в форме колеса, принадлежащие к семейству Reoviridae.

В большинстве случаев ротавирус передается через фекально-оральный контакт. Когда человек заражен ротавирусом, вирус выделяется со стулом. Затем вирус может заразить других. Например, человек может плохо мыть руки, а затем кладет еду в рот и / или берет в руки пищу, которую ест кто-то другой. Или кто-то может прикоснуться к зараженной поверхности (вирус может какое-то время жить на ней) и засунуть пальцы в рот. В менее распространенных случаях вирус может передаваться через чихание или кашель.

Норовирус

Норовирусы — это РНК-вирусы, принадлежащие к семейству Caliciviridae и иногда называемые вирусом Norwalk. По данным Центров США по контролю и профилактике заболеваний (CDC), если вы подозреваете, что у вас заболевание желудка, желудочный грипп или пищевое отравление, скорее всего, это вызвано норовирусом. Люди с норовирусом выделяют миллиарды микроскопических частиц с фекалиями или рвотой, которые очень заразны.

Чтобы заболеть, нужно всего несколько частиц. Пища может быть заражена норовирусом несколькими способами, например, когда у инфицированного человека есть фекалии или частицы рвоты на руках, а затем он прикасается к пище, или когда пища кладется на поверхность с частицами фекалий или рвоты.Большинство вспышек происходит в учреждениях общественного питания. Вода также может быть заражена норовирусом. Поверхности также могут инфицироваться, например, когда инфицированный человек имеет частицы фекалий или рвоты на руках и касается поверхности, или когда зараженная пища или вода помещаются на поверхность.

Ротовирус против норовируса, вызывающий
  • Вирус выделяется со стулом, а затем чаще всего распространяется через фекально-оральный контакт.
  • Плохое мытье рук и неправильное обращение с пищевыми продуктами могут привести к распространению ротавируса.
  • Прикосновение к зараженной поверхности с последующим засовыванием пальцев в рот может привести к распространению ротавируса.
  • Вирус выделяется со стулом или рвотой.
  • Норовирус может заражать пищу, воду или поверхности.
  • Большинство вспышек происходит в учреждениях общественного питания.

Распространенность

Ротавирус

В США ротавирусные вакцины очень эффективны для предотвращения ротавируса.До того, как были разработаны вакцины, ротавирус вызывал от 2 до 3 миллионов заболеваний ежегодно, при этом до 70 000 случаев требовали госпитализации. В настоящее время тяжелое заболевание, вызванное ротавирусом, в США встречается редко. Ротавирус чаще всего встречается у детей в возрасте до 5 лет.

Ежегодно во всем мире ротавирус вызывает более 125 миллионов случаев диареи у младенцев. Ежегодно более 2 миллионов детей в возрасте до 5 лет госпитализируются из-за симптомов ротавируса. Из них около полумиллиона детей умирают.

Норовирус

Ежегодно в США регистрируется около 19-21 миллиона случаев острого гастроэнтерита (воспаления желудка и / или кишечника), вызванного норовирусом. Смерть случается очень редко. Приблизительно 570-800 человек ежегодно умирают от норовируса, в основном дети младшего возраста или пожилые люди, которые подвержены сильному обезвоживанию. Норовирус может возникать в любое время года, но чаще всего встречается зимой. Вспышки норовируса произошли в различных местах, таких как рестораны, медицинские учреждения, школы, круизные лайнеры, военные корабли и курорты.Норовирус может появиться в любом возрасте.

Мировая заболеваемость малоизвестна в развивающихся странах. В промышленно развитых странах заболеваемость аналогична

в США.
Ротавирус против распространенности норовируса
  • США: Ротавирус ежегодно вызывал от 2 до 3 миллионов заболеваний до того, как были разработаны вакцины. Сейчас тяжелые заболевания редки.
  • Ротавирус в основном встречается у детей младше 5 лет.
  • Во всем мире: Ротавирус вызывает> 125 миллионов случаев диареи у младенцев во всем мире каждый год, и около 500 000 детей умирают ежегодно.
  • США: Норовирус вызывает 19–21 миллион заболеваний ежегодно. Смерть случается очень редко.
  • Норовирус может возникнуть у людей любого возраста.
  • Во всем мире: заболеваемость малоизвестна в развивающихся странах. В промышленно развитых странах заболеваемость аналогична таковой в США.С.

Симптомы

Ротавирус

Наиболее частыми симптомами ротавируса являются сильная диарея, рвота, лихорадка и / или боль в желудке. Симптомы обычно появляются через два дня после контакта с вирусом. Симптомы могут длиться от трех до восьми дней.

Другие симптомы могут включать потерю аппетита и обезвоживание. Обезвоживание может быть очень опасным для младенцев и маленьких детей. Симптомы обезвоживания включают учащенное мочеиспускание, сухость во рту, сильную жажду, головокружение при вставании, плач без слез или почти без слез, а также необычную сонливость или суетливость.

Норовирус

Наиболее частыми симптомами норовируса являются тошнота, рвота, диарея и боль в животе. Другие симптомы могут включать жар, головную боль и ломоту в теле. Симптомы обычно возникают через 12-48 часов после контакта с норовирусом. Симптомы норовируса длятся от одного до трех дней. Когда у человека много раз в день диарея или рвота, может произойти обезвоживание. Обезвоживание, вызванное норовирусом, чаще встречается у маленьких детей, пожилых людей и людей с другими заболеваниями.

Ротавирус против симптомов норовируса

Ротавирус против симптомов норовируса
  • Симптомы обычно появляются через 2 дня после заражения и длятся 3-8 дней.
  • Наиболее частыми симптомами являются тяжелая водянистая диарея, рвота, лихорадка, боль в животе.
  • Может произойти потеря аппетита и обезвоживание.
  • Обезвоживание может быть очень опасным для младенцев и маленьких детей.
  • Симптомы обычно появляются через 12-48 часов после заражения и длятся 1-3 дня.
  • Наиболее частыми симптомами являются тошнота, рвота, диарея и боль в животе.
  • Также возможны лихорадка, головная боль, ломота в теле и обезвоживание.

Диагностика

Ротавирус

Обратитесь к педиатру, если у вашего ребенка наблюдаются такие симптомы, как жар, диарея, боль в животе и / или рвота. Диагноз часто можно поставить на основании симптомов и обследования. В некоторых случаях врач может попросить образец стула.

Норовирус

В большинстве случаев врач может диагностировать норовирус по вашим симптомам. Образец кала может подтвердить диагноз, но обычно в этом нет необходимости.

Диагностика ротавируса и норовируса
  • Медицинские работники часто могут поставить диагноз на основании симптомов и обследования.
  • Можно взять образец стула.
  • Норовирус обычно можно диагностировать на основании симптомов.
  • Образец стула обычно не требуется.

Обработки

Антибиотики никогда не используются для лечения ротавирусных или норовирусных инфекций. Антибиотики предназначены только для лечения бактериальных инфекционных заболеваний и не помогают при вирусной инфекции. Обратитесь к врачу, если у вас или у человека, за которым вы ухаживаете, наблюдаются симптомы обезвоживания, такие как сухость во рту, учащенное мочеиспускание и головокружение при вставании. Маленькие дети, пожилые люди и люди с другими заболеваниями подвержены более высокому риску обезвоживания.

Ротавирус

Не существует специального лекарства для лечения ротавируса. Ротавирус может вызвать сильную диарею и рвоту, что может привести к обезвоживанию. Обильное питье помогает предотвратить обезвоживание. Растворы для пероральной регидратации могут быть полезны при легком обезвоживании, в то время как тяжелое обезвоживание может потребовать госпитализации и внутривенного введения жидкости. Также важны отдых, пребывание дома и частое мытье рук.

Норовирус

Не существует специального лекарства для лечения норовируса.Обильное питье поможет предотвратить обезвоживание. Людям с легким обезвоживанием можно пить растворы для пероральной регидратации, а тем, у кого тяжелое обезвоживание, может потребоваться внутривенное введение жидкости в больнице. Постарайтесь отдыхать, оставайтесь дома, чтобы избежать распространения инфекции, и часто мойте руки.

Лечение ротавирусом и норовирусом
  • От ротавируса нет лекарства.
  • Употребление большого количества жидкости, например раствора для пероральной регидратации, способствует легкому обезвоживанию.
  • Сильное обезвоживание может потребовать госпитализации и внутривенного введения жидкости.
  • Отдыхайте, оставайтесь дома, часто мойте руки.
  • Нет лекарства от норовирусной болезни.
  • Употребление большого количества жидкости (например, раствора для пероральной регидратации) способствует легкому обезвоживанию.
  • Сильное обезвоживание может потребовать внутривенного введения жидкости в больнице.
  • Оставайся дома и отдыхай; часто мойте руки.

Факторы риска

Ротавирус

В U.С., дети подвергаются наибольшему риску заражения ротавирусом. Дети в детских садах или школах с большим количеством маленьких детей подвергаются более высокому риску. Наиболее тяжелое заболевание встречается у непривитых детей в возрасте от 3 месяцев до 3 лет. Некоторые взрослые подвергаются более высокому риску. Взрослые группы повышенного риска — это пожилые люди, люди, ухаживающие за ребенком с ротавирусом, и люди с ослабленной иммунной системой.

Норовирус

Люди, имеющие прямой контакт с инфицированным человеком (например, медицинские работники, посетители или другие пациенты), подвергаются более высокому риску заражения норовирусом.Другими факторами риска являются употребление в пищу или питье зараженных продуктов или жидкостей, прикосновение к загрязненным предметам или поверхностям, а затем и ко рту.

Ротавирус против факторов риска норовируса
  • Дети в детских садах или школах с большим количеством детей.
  • Наиболее тяжелые случаи встречаются у детей в возрасте от 3 месяцев до 3 лет, которые не были вакцинированы.
  • Пожилые люди или взрослые с ослабленным иммунитетом и лица, ухаживающие за детьми с ротавирусом, подвергаются более высокому риску.
  • Прямой контакт с человеком, инфицированным норовирусом
  • Употребление или употребление зараженных пищевых продуктов или жидкостей
  • Прикосновение к загрязненным поверхностям или предметам с последующим засовыванием пальцев в рот.

Профилактика

Ротавирус

Самая эффективная профилактика ротавируса — вакцина против ротавируса. Большинство детей (около 90%), вакцинированных ротавирусной вакциной, будут защищены от тяжелых заболеваний, а около 70% будут полностью защищены от ротавирусной болезни.

В США доступны две ротавирусные вакцины. Первая доза должна быть введена до 15 недель, а все дозы должны быть введены к 8-месячному возрасту. Вакцины вводятся путем закапывания пероральных капель в рот ребенку.

  • RotaTeq назначается в возрасте 2, 4 и 6 месяцев (3 дозы)
  • Ротарикс назначают в возрасте 2 и 4 месяцев (2 дозы)

Хотя вакцина является лучшим средством защиты от ротавируса, мытье рук также может помочь предотвратить распространение инфекции.Однако мытье рук не заменяет вакцинацию.

Норовирус

CDC рекомендует несколько способов предотвращения норовируса. К ним относятся:

  • Мытье рук : Тщательно мойте руки (не менее 30 секунд) водой с мылом, особенно после посещения туалета, после смены подгузников, перед едой или приготовлением пищи, а также перед приемом лекарств или перед приемом лекарств. Также можно использовать дезинфицирующие средства для рук, но их не следует использовать вместо мыла и воды, поскольку они не так эффективны при удалении вирусных частиц.
  • Безопасность пищевых продуктов : Тщательно мойте продукты. Тщательно варите моллюски. От продуктов, которые могут быть заражены, следует отказаться. Больных не следует допускать к участкам, где готовят пищу.
  • Не заботиться о других во время болезни : Когда вы больны и в течение как минимум двух дней после исчезновения симптомов, не готовьте пищу для других и не заботьтесь о других.
  • Очистите и продезинфицируйте поверхности : При диарее или рвоте очистите и продезинфицируйте всю область в перчатках.Протрите бумажными полотенцами, затем продезинфицируйте чистящим средством на основе отбеливателя. Оставьте чистящее средство на пораженном участке не менее 5 минут, затем снова промойте горячей водой с мылом. Очистите и продезинфицируйте кухонную утварь и поверхности.
  • Тщательно постирайте белье. : одежду или постельное белье, которые могут быть загрязнены фекалиями или рвотными массами, следует немедленно снять или постирать. Беритесь с вещами в перчатках, стирайте их в горячей воде и сушите на максимальной температуре — мойте руки после работы с грязными вещами.
Как предотвратить ротавирус vs.норовирус
  • Вакцинация (для младенцев) — это защита номер один от ротавируса.
  • Мытье рук может помочь предотвратить распространение, но не заменяет вакцинацию.
  • Мытье рук
  • Безопасность пищевых продуктов
  • В случае болезни не заботиться о других
  • Очистить и продезинфицировать поверхности
  • Колодец для стирки

Когда обращаться к врачу по поводу ротавируса или норовируса

Если вы взрослый человек с желудочно-кишечными симптомами, обратитесь к врачу, если у вас рвота более двух дней, рвота с кровью, кровавый стул, обезвоживание или лихорадка 104 F или выше.

Если ваш ребенок болен, вызовите педиатра или обратитесь за неотложной помощью, если у вашего ребенка температура 102 F или выше, он очень вялый или капризный, испытывает боль, имеет кровь в стуле или кажется обезвоженным. Даже если симптомы не являются серьезными, всегда полезно сообщить о симптомах педиатру, чтобы они могли проконсультировать вас.

Младенцы, страдающие рвотой, обезвоживанием, кровяным стулом или сильной диареей, или необычно сонливые, должны быть немедленно осмотрены врачом или получить неотложную медицинскую помощь.У младенцев, как и у детей, даже если симптомы не являются серьезными, рекомендуется проконсультироваться с педиатром, чтобы сообщить о симптомах и получить медицинские рекомендации.

Тошнота, рвота и диарея также могут быть симптомами COVID-19 (коронавируса), поэтому вы также можете проконсультироваться со своим врачом, чтобы узнать, нужен ли вам тест на COVID, особенно если вы подвергались воздействию COVID.

Часто задаваемые вопросы о ротавирусе и норовирусе

Норовирус и ротавирус — это одно и то же?

Норовирус и ротавирус — это разные вирусы, вызывающие проблемы с желудком, такие как тошнота, рвота и диарея.Норовирус чаще встречается у взрослых, тогда как ротавирус, как правило, поражает младенцев и детей младшего возраста. Есть вакцина для предотвращения ротавируса, но нет вакцины для предотвращения норовируса. От обоих вирусов нет лекарства. Основное внимание в лечении уделяется гидратации — в тяжелых случаях может потребоваться госпитализация.

Каковы общие симптомы ротавируса?

Наиболее частыми симптомами ротавируса являются тяжелая водянистая диарея, рвота, лихорадка и боль в желудке. Симптомы длятся от трех до восьми дней.Другие симптомы могут включать потерю аппетита и обезвоживание. Обезвоживание может быть очень опасным для маленьких детей и младенцев.

В чем разница между гастроэнтеритом и норовирусом?

Когда кто-то говорит, что у него желудочный грипп, они обычно имеют в виду гастроэнтерит и испытывают такие симптомы, как тошнота, рвота и диарея. Различные вирусы могут вызывать вирусный гастроэнтерит. Норовирус — наиболее частая причина гастроэнтерита у взрослых.

В чем разница между ротавирусом ирасстройство желудка?

Желудок, или желудочный грипп, как его называют многие, также известен как вирусный гастроэнтерит. Различные вирусы могут вызывать вирусный гастроэнтерит. Ротавирус является причиной гастроэнтерита, который в основном поражает младенцев и детей младшего возраста (до 5 лет). Итак, ротавирус вызывает гастроэнтерит, но гастроэнтерит может быть вызван разными вирусами, одним из которых является ротавирус.

Как долго длится период заразности норовируса?

По данным CDC, люди с норовирусом наиболее заразны при наличии симптомов и в течение первых нескольких дней после выздоровления.Однако некоторые исследования показали, что норовирус все еще может распространяться в течение 2 недель или дольше после исчезновения симптомов.

ресурсов

  • Гастроэнтерит у детей, Американский семейный врач
  • Тошнота и рвота, Кливлендская клиника
  • Норовирус, Кливлендская клиника
  • Норовирус, Medscape
  • Норовирус, Центры США по контролю и профилактике заболеваний
  • Профилактика диарейных заболеваний, Департамент здравоохранения штата Оклахома
  • Ротавирус, Кливлендская клиника
  • Ротавирус, Medscape
  • Rotavirus, U.S. Центры по контролю и профилактике заболеваний
  • Ротавирусные инфекции, Бостонская детская больница
  • Ротавирусы, норовирусы и другие желудочно-кишечные вирусы, Национальная медицинская библиотека США
  • Ротавирусные вопросы и ответы, Коалиция действий по иммунизации
  • Желудочный грипп (гастроэнтерит), Кливлендская клиника
  • Вирусный гастроэнтерит, Национальный центр биотехнологической информации

Кишечная вирусная инфекция (ротавирус) у собак

Большинство собак в какой-то момент своей жизни подвергаются воздействию ротавируса.Ротавирус собак является частью большой группы РНК-вирусов семейства Reoviridae. Различные штаммы ротавируса поражают многие виды животных, в том числе людей, кошек, крупный рогатый скот, свиней и птиц, а также собак, и они являются одной из основных причин заболеваний, связанных с диареей, во всем мире, в первую очередь у детей. Штаммы ротавируса видоспецифичны, но нити РНК обладают способностью легко мутировать и могут довольно часто переходить от одного вида к другому. Вирус наиболее распространен в странах третьего мира, где люди живут в непосредственной близости от крупного рогатого скота и других животных.Эффект ротавируса собак обычно слабый. Щенки в возрасте до 12 недель обычно имеют симптомы водянистой диареи. Это редко приводит к летальному исходу, за исключением случаев, когда щенок особенно слаб или инфекция сочетается с другим заболеванием, таким как парвовирус собак или коронавирус. У взрослых собак ротавирус обычно не проявляется симптомами, и собаки, которые были подвержены этому заболеванию, несут антитела в фекалиях, поэтому вторичная инфекция менее серьезна. Иногда проблему может вызвать особо опасный штамм вируса, или собаки с ослабленными иммунными симптомами могут быть особенно восприимчивыми.Хотя ротавирус собак обычно не поражает людей, вирус может быть зоонозным (передаваться людям), поэтому важны надлежащие правила гигиены, особенно в отношении больших популяций инфицированных собак. В настоящее время вакцины против ротавируса у собак нет.

Ротавирусы могут вызывать инфекцию у многих животных, включая человека. Вирус редко проявляется симптомами у собак, но у щенков может наблюдаться легкая диарея, а иногда и другие симптомы. Ветеринары называют это собачьим ротавирусом.Заболевание обычно не является серьезным, и большинство симптомов проходит через 8-10 дней.

Ротавирус | История вакцин

Ротавирус — самая частая причина тяжелой диареи у детей и младенцев во всем мире. До того, как вакцина была введена в Соединенных Штатах, болезнь вызывала более 400 000 посещений врачей и 200 000 обращений в отделения неотложной помощи каждый год, что приводило к 60 смертельным исходам ежегодно среди детей младше пяти лет. Ежегодно во всем мире ротавирус убивает около 450 000 детей в возрасте до 5 лет, причем большая часть этих смертей приходится на развивающиеся страны.

Симптомы и возбудитель

Ротавирус — это двухцепочечный РНК-вирус семейства реовирусов. Под электронным микроскопом вирус имеет форму колеса, отсюда и его название ( rota в переводе с латыни означает «колесо»). Несколько видов и подтипов ротавирусов вызывают заболевания у людей.

Самый частый симптом ротавирусной инфекции — водянистая диарея. Это также может вызвать жар, боль в животе и рвоту. Осложнения ротавирусной инфекции описаны ниже.

Трансмиссия

Ротавирус распространяется фекально-оральным путем, то есть из отходов инфицированного человека в рот другого человека. Это может произойти через загрязнение рук или предметов, например игрушек. Вирус легко распространяется среди детей, а также может передаваться от детей тем, с кем они находятся в тесном контакте.

Первое заражение ротавирусом обычно вызывает острое заболевание, но более поздние инфекции вызывают более легкие симптомы и часто протекают бессимптомно (то есть не вызывают видимых симптомов).Однако бессимптомные инфекции у взрослых могут привести к передаче вируса близким контактам.

Лечение и уход

Специальных методов лечения ротавирусных инфекций не существует. Скорее, им лечат поддерживающую терапию, такую ​​как пероральная регидратация, отдых и снятие температуры.

Осложнения

Примерно в 1 из 50 случаев ротавирусной болезни у детей развивается тяжелое обезвоживание в результате диареи и рвоты. В этих случаях обычно необходима госпитализация, и детям проводят регидратацию жидкости, вводимой через назогастральный зонд или внутривенно.Своевременная регидратационная терапия обычно приводит к положительному результату, но смерть от ротавируса все еще происходит в развитых странах и, чаще, в развивающихся странах. По оценкам Всемирной организации здравоохранения, в 2008 г. (последний год, по которому имеются данные) умерло около 450 000 случаев смерти от ротавирусной болезни.

Доступные вакцины и кампании вакцинации

Первая вакцина против ротавируса, RotaShield, была лицензирована и рекомендована для плановой иммунизации детей в 1998 году.Однако Wyeth Pharmaceuticals отозвала вакцину в 1999 году из соображений безопасности. Ученые связали вакцину с редкой кишечной проблемой, называемой инвагинацией, потенциально фатальным телескопированием части кишечника.

Никакая ротавирусная вакцина не была доступна до 2006 года, когда Консультативный комитет по практике иммунизации рекомендовал плановую иммунизацию младенцев тремя дозами недавно лицензированной вакцины RotaTeq, разработанной доктором философии Х. Фредом Кларком, доктором медицины Стэнли А. Плоткиным и Полом А.Оффит, МД. Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов лицензировало другую ротавирусную вакцину, Ротарикс, для использования в Соединенных Штатах в 2008 году. Ротарикс вводят младенцам в двух дозах. Обе вакцины вводятся перорально в виде капель.

CDC тщательно отслеживает заболеваемость ротавирусными заболеваниями в Соединенных Штатах с 2000 года. Их исследования показывают, что количество положительных результатов тестов на ротавирус было значительно ниже, чем в среднем за период 2000-2006 годов. Кроме того, похоже, что количество госпитализаций по поводу острого гастроэнтерита снизилось на 16% в 2007 году и на 45% в 2008 году по сравнению с предыдущим периодом.По оценкам исследователей, вакцинация против ротавируса предотвратила около 55 000 госпитализаций в 2008 году.

Во всем мире ротавирус продолжает наносить ущерб. Около 450 000 детей в возрасте до 5 лет умирают ежегодно от ротавирусной болезни. Предпринимаются усилия по обеспечению доступности ротавирусной вакцины во всем развивающемся мире, где смертность от ротавирусной болезни более распространена. Мексика была одной из первых стран, получивших ротавирусную вакцину в 2006 году; к сезону ротавируса 2009 г. смертность от диарейных заболеваний снизилась как среди целевой группы населения для вакцинации (дети младше 11 месяцев, где уровень смертности снизился на 40%), так и среди детей в возрасте от одного до двух лет (уровень смертности упала почти на 30%).Тот факт, что смертность снизилась даже в той части населения, на которую вакцина не нацелена, говорит о том, что коллективный иммунитет принес пользу невакцинированным лицам: с меньшим количеством инфекций вначале болезнь циркулировала в популяции меньше, оставляя меньше возможностей для заражения.

Ниже приведены общие рекомендации по вакцинации против ротавируса в США:

Вакцинация против ротавируса рекомендуется для всех детей, начиная с двухмесячного возраста серией из двух или трех доз в течение многих недель, и должна быть завершена к тому времени, когда ребенку исполнится четыре месяца (для серии из двух доз). или шести месяцев (для серии из трех доз).

Источники

Центры по контролю и профилактике заболеваний. Ротавирус. Эпидемиология и профилактика болезней, предупреждаемых с помощью вакцин. Аткинсон, У., Вулф, С., Хамборски, Дж. Ред. 13-е изд. Вашингтон, округ Колумбия: Фонд общественного здравоохранения, 2015 г. (562 КБ). Дата обращения 25.01.2018.

Фейгин Р.Д., Черри Д.Д., Деммлер Г.Дж., Каплан С.Л. Справочник детских инфекционных болезней , 5 -е изд. , том 2.Филадельфия: Сондерс, 2004.

Плоткин С.А., Оренштейн В.А., Оффит П.А. Vaccines , 5 th ed. Филадельфия: Сондерс, 2008.

Ричардсон, В., Эрнандес-Пичардо, Дж., Кинтанар-Соларес, М., Эспарса-Агилар, М., Джонсон, Б., Гомес-Альтамирано, С.М., Парашар, У., Патель, М. Эффект ротавируса вакцинация в случае смерти от детской диареи в Мексике. N Engl J Med 2010 ; 362: 299-305. Дата обращения 25.01.2018.

Всемирная организация здравоохранения.Расчетная смертность от ротавируса среди детей в возрасте до 5 лет: 2013 г., 215 000. По состоянию на 25.01.2018.

Чтобы читать PDF-файлы, загрузите и установите Adobe Reader .

Последнее обновление 25 января 2018

Лечение антибиотиками

подавляет инфекцию ротавируса и повышает специфический гуморальный иммунитет | Журнал инфекционных болезней

РЕФЕРАТ

Справочная информация. Ротавирус вызывает 500 000 смертей и миллионы посещений врачей и госпитализаций в год с худшими исходами и снижением эффективности вакцины в развивающихся странах.Мы предположили, что микробиота кишечника может модулировать ротавирусную инфекцию и / или реакцию антител и, таким образом, потенциально играть роль в таких региональных различиях.

Методы. Микробиота была удалена без микробов или с использованием антибиотиков. Повышенное воздействие микробиоты было достигнуто за счет лечения низкими дозами декстрансульфата натрия (DSS). Ротавирусную инфекцию и репликацию оценивали с помощью иммуноферментного анализа (ELISA) и количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией.Диарею оценивали визуально. Гуморальные ответы на ротавирус измеряли с помощью ELISA и иммуноферментного анализа пятен.

Результаты. Устранение микробиоты отсрочило инфекцию и снизило инфекционность на 42%. Антибиотики не влияли на соотношение цепей положительного и отрицательного смысла, что позволяет предположить, что влияние оказывалось скорее на вход, чем на репликацию. Антибиотики снижали частоту и продолжительность диареи, указывая на то, что снижение уровня антигена ротавируса было биологически значимым.Несмотря на пониженный уровень антигена, антибиотики приводили к более стойкому гуморальному ответу слизистой оболочки / системному гуморальному ответу ротавируса. Повышенная стойкость антител к ротавирусу коррелировала с повышенной концентрацией специфичных для ротавируса тонкой кишки, продуцирующих иммуноглобулин А клеток, секретирующих антитела, у мышей, получавших антибиотики. И наоборот, лечение DSS нарушило выработку антител, специфичных для ротавируса.

Выводы. Удаление микробиоты привело к уменьшению ротавирусной инфекции / диареи и более устойчивому ответу антител против ротавируса, что позволяет предположить, что введение антибиотиков перед вакцинацией против ротавируса может повысить низкие показатели сероконверсии, которые коррелируют с неэффективностью вакцины в развивающихся регионах.

(См. Редакторский комментарий Бартельта и Герранта на страницах 167–70.)

Ротавирус (RV), двухцепочечный, необолочечный РНК-вирус, который преимущественно поражает эпителиальные клетки кишечника, является ведущей причиной острого гастроэнтерита в мире. маленькие дети [1]. До недавнего внедрения вакцины против RV, RV повсеместно инфицировали детей младше 5 лет. Большинство случаев разрешаются в течение 8 дней, хотя некоторые из них приводят к более серьезным осложнениям, приводящим к 2–4 миллионам госпитализаций в год во всем мире [2, 3].Тем не менее, бремя болезни правого желудочка наиболее велико в развивающихся странах, где от правого желудочка ежегодно умирает 500 000 человек [4, 5]. Такое несоответствие в бремени болезни правого желудочка обычно отражает общее состояние здоровья и питания, доступ к поддерживающей терапии и / или потенциальные коинфекции [6].

Широкое внедрение вакцин против РВ значительно снизило бремя болезни РВ в развивающихся странах. Например, в Малави, одной из наименее развитых стран мира, администрация Rotarix снизила смертность, связанную с RV, на 43%.Тем не менее, эффективность вакцины в развивающихся странах заметно ниже, чем в Европе и Америке (49% в Малави против> 95% в Европе и Америке) [2]. Большая часть этой разницы, по-видимому, связана с вакцинами, вызывающими меньший иммунный ответ, поскольку в Малави только 57% серопозитивности к иммуноглобулину A (IgA) к RV после вакцинации Rotarix, тогда как RotaTeq индуцировало 95% серопозитивность к IgA к RV в Северной и Южной Америке и Европе [ 7, 8].

Различные гипотезы могут объяснить, почему вакцины против RV менее иммуногенны в некоторых регионах.Отсутствие правильного питания, которое влияет на иммунные реакции, может быть причиной снижения эффективности вакцины. Кроме того, высокие титры трансплацентарных антител материнского происхождения и IgA грудного молока обладают потенциалом нейтрализации вакцинного штамма RV и могут снизить экспозицию антигена RV за счет предотвращения инфекционно-подобного состояния, связанного с вакциной RV. Чтобы преодолеть присутствие нейтрализующих антител, которые блокируют инфекционно-подобное состояние и последующие защитные иммунные ответы, были предложены более высокие дозы RV [9].Другая возможность заключается в том, что хроническая инфекция, например, гельминтами, подавляет иммунный ответ на вакцину против RV [5, 10]. Более общая форма последней гипотезы заключается в том, что инфекция или иммунный ответ на вакцины против RV зависит от микробиоты кишечника, которая, как считается, значительно различается между людьми в развитых и развивающихся странах. Действительно, микробиота оказывает широкое и разнообразное влияние на развитие и функцию иммунной системы [11]. Например, на моделях инфекции гриппа и лимфоцитарного хориоменингита вирус-специфические адаптивные ответы, включая ответы как Т-клеток, так и В-клеток, были уменьшены при лечении антибиотиками из-за снижения функции дендритных клеток и макрофагов [12, 13] .В случае кишечных вирусов, а именно полиовируса и реовируса, устранение микробиоты привело к относительной устойчивости к инфекции, что могло бы уменьшить выработку защитных иммунных ответов [14]. Такая способность микробиоты влиять как на вирусную инфекцию, которая необходима для иммунного ответа, так и на иммунный ответ, предполагает, что микробиота может опосредовать различия в тяжести заболевания RV и / или эффективности вакцины.

Нашей целью было изучить возможность того, что микробиота может влиять на инфекцию и / или иммунные реакции на RV.Новорожденные мыши служили моделью RV-инфекции, а взрослая модель RV-инфекции считалась аналогичной вакцинации RV, где защита от инфекции лучше всего коррелирует с уровнями кишечного анти-RV IgA [1]. Наши результаты показывают, что комменсальная микробиота способствует инфицированию RV и влияет на иммунные реакции, индуцированные RV.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Животные

Во всех экспериментах, за исключением экспериментов с использованием неонатальных мышей или мышей, свободных от микробов, использовали самцов мышей C57BL / 6 в возрасте 6–8 недель, приобретенных в Jackson Laboratories (Бар-Харбор, штат Мэн).В экспериментах с участием новорожденных мышей использовали 6-дневное потомство (самцы и самки) мышей C57BL / 6J. В экспериментах с участием стерильных мышей использовали мышей C57BL / 6, полученных путем переноса эмбрионов, как описано ранее [15]. Мышей содержали в стерильных изоляторах в Университете штата Джорджия, который одобрил все процедуры.

Вирус и прививки

Штамм EC

Mouse RV предоставлен Мэри Эстес (Медицинский колледж Бейлора). Взрослые мыши получили 10 5 доз с выделением 50% (SD 50 ) ПЖ, которым предшествовала 1.33% (мас. / Об.) Бикарбоната натрия (Sigma-Aldrich) через желудочный зонд. Новорожденные получали 2 дозы 50% диареи RV через желудочный зонд.

Антибиотики и схемы лечения антибиотиками

Взрослым мышам вводили ампициллин (Sigma-Aldrich) в концентрации 1 г / л и неомицин (Sigma-Aldrich) в концентрации 0,5 г / л в питьевой воде ad libitum за 1 неделю до инокуляции и через 1, 7 или 11 недель после инокуляции. Новорожденные получали 200 мкг ампициллина и 100 мкг неомицина в 100 мкл воды через желудочный зонд за 1 день до и через 1 день после инокуляции.Кроме того, матери получали 1 г / л ампициллина и 0,5 г / л неомицина с питьевой водой, начиная с 1 недели до родов и до тех пор, пока потомство не отняли от груди.

Заражение стерильных мышей RV

Самцов и самок стерильных мышей в возрасте 6–8 недель инокулировали и содержали в изоляторах гнотобиотиков (Park Bioservices) в течение и до 9 недель после инокуляции. Состояние отсутствия зародышей контролировали с помощью количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) для 16S рибосомной ДНК (рДНК) и фекальной культуры в инфузионном бульоне мозг-сердце (BD).

Количественное определение бактериальной нагрузки

Фекальную бактериальную ДНК выделяли с использованием набора QiAamp DNA Stool Kit (Qiagen), а рДНК 16S амплифицировали с помощью количественной ПЦР (Bio-Rad).

Обнаружение антигена фекального ротавируса

Супернатанты фекальных гомогенатов (100 мг / мл) замораживали или немедленно анализировали с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA), как описано в другом месте [16].

Количественная ПЦР с обратной транскрипцией для количественной обратной транскрипции генома двенадцатиперстной кишки (qRT-PCR)

Было собрано

образцов двенадцатиперстной кишки, промыто фосфатно-солевым буфером и гомогенизировано в TRIzol (Ambion).Дуоденальную РНК исследовали на геном RV, как описано в другом месте [17].

Одноцепочечная qRT-PCR для репликации RV

Способность к репликации

RV в образцах РНК двенадцатиперстной кишки определялась соотношением положительно-смысловой и отрицательной цепей RV, как описано в другом месте [17].

ИФА антител

Относительную продукцию и титр антител против RV в фекалиях и сыворотке анализировали, как описано ранее [18]. Уровни общего IgA измеряли, как описано в [19].

Тонкий кишечник, специфичный для RV, продуцирующий IgA, антитела-секретирующие клетки, энзим-связанный иммуноферментный анализ пятен

Целый тонкий кишечник, собственную пластинку и клетки пейеровского пятна собирали, как описано ранее [20]. Клетки наносили на фильтровальные планшеты (Millipore), покрытые очищенным резусом RV. RV-специфический IgA зондировали вторичным антителом против IgA (SouthernBiotech).

Декстран-сульфат натрия (DSS) Администрация

DSS (MP Biomedicals) разводили в питьевой воде до 1% (мас. / Об.) И вводили ad libitum за 4 дня до и через 3 дня после инокуляции RV.

Липокалин-2 ELISA

Надосадочные жидкости с фекалиями готовили, как указано выше, и липокалин-2 оценивали, как описано в другом месте [21].

Статистический анализ

Если не указано иное, данные взяты из одного эксперимента (n = 5 мышей на каждое условие), который проводился несколько раз и давал аналогичные результаты. Статистическая значимость оценивалась с помощью теста Стьюдента t .

РЕЗУЛЬТАТЫ

Удаление микробиоты задерживает инфекцию правого желудочка и облегчает заболевание, вызванное правым желудочком

Заражение взрослых мышей RV не приводит к серьезным проявлениям заболевания, но служит четко определенной моделью инфекции [1].Соответственно, пероральная инокуляция мышей C57BL / 6 в возрасте 6-8 недель 10 5 SD 50 мышиного штамма ЕС привела к тому, что антиген RV стал обнаруживаться в кале через 1-2 дня после инокуляции. Такое выделение RV, которое достигает пика через 3-4 дня после инокуляции и продолжается 6-8 дней после инокуляции, пропорционально инфекционности (т. Е. Уровню вирусного генома в лизатах кишечника) [22]. Чтобы исследовать роль микробиоты, мы вводили RV мышам, получавшим комбинацию ампициллина и неомицина за 1 неделю до инокуляции, которую они продолжали получать на протяжении всей инфекции.Количественный анализ на основе ПЦР показал, что такие антибиотики снижали бактериальную нагрузку кишечника на 99% (дополнительные данные A ). Такое снижение уровней микробиоты постоянно приводило к задержке на 1 день появления фекального антигена правого желудочка и примерно 40% снижению общего выделения правого желудочка (что определяется площадью под кривой; Рисунок 1 A ). Учитывая, что у мышей, получавших лечение антибиотиками, все еще была значительная бактериальная нагрузка в кишечнике и что антибиотики могут изменять относительные пропорции бактерий, потенциально приводя к увеличению численности некоторых видов, также использовали мышей без микробов.Свободным от зародышей мышам C57BL / 6, содержавшимся в стерильных изоляторах на протяжении всего эксперимента, и контрольным мышам, содержащимся в обычных условиях, перорально вводили стерилизованный фильтром RV. Посев кала и количественная ПЦР подтвердили отсутствие бактерий у этих мышей. Подобно мышам, получавшим антибиотики, у стерильных мышей начальное проявление инфекции задерживалось на 1 день. У свободных от зародышей мышей также наблюдается задержка клиренса ПЖ, что, вероятно, отражает их незрелую кишечную адаптивную иммунную систему [11], что важно для очищения ПЖ (Рисунок 1 B ) [18].Таким образом, задержка инфицирования правого желудочка может быть постоянным следствием удаления микробиоты. Чтобы убедиться, что пониженные уровни фекального антигена RV отражают сниженную инфекционность, мы количественно оценили уровень геномов RV в лизатах двенадцатиперстной кишки с помощью qRT-PCR. Лечение антибиотиками привело к 10-кратному сокращению геномов RV через 2 и 3 дня после инокуляции (рис. 1 C ), таким образом подтверждая, что антибиотики снижают инфекционность RV. Затем мы измерили соотношение положительных и отрицательных цепей RV, которое отражает степень активной репликации RV [17].Этот параметр существенно не отличался между контрольными мышами и мышами, получавшими антибиотики (рис. 1 D ), что позволяет предположить, что удаление микробиоты снижает проникновение вируса, а не репликацию RV.

Рисунок 1.

Удаление микробиоты снижает инфекционность ротавируса (RV). Самцов мышей C57BL6 в возрасте 6-8 недель лечили ампициллином и неомицином за 1 неделю до пероральной инокуляции 10 5 50% -ными дозами (SD 50 ) мыши штамма EC RV. A , Образцы фекалий собирали ежедневно и анализировали на антигены RV с помощью иммуноферментного анализа (ELISA). B , Самцов и самок стерильных мышей в возрасте 6–8 недель инфицировали стерилизованным фильтром RV. Образцы фекалий собирали ежедневно и анализировали на антиген RV с помощью ELISA. C , Была приготовлена ​​тотальная РНК из двенадцатиперстной кишки, и лизат клеток от мышей, обработанных антибиотиками, зондировали на РНК-мессенджер NSP3, репрезентативную для генома RV, с помощью количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (qRT-PCR). D , Готовили лизат клеток двенадцатиперстной кишки, и каждый образец анализировали на соотношение положительно-смысловых и отрицательно-смысловых цепей с помощью одноцепочечной qRT-PCR.Значение отношения положительно коррелирует с репликацией правого желудочка. * P <.05.

Рисунок 1.

Удаление микробиоты снижает инфекционность ротавируса (RV). Самцов мышей C57BL6 в возрасте 6-8 недель лечили ампициллином и неомицином за 1 неделю до пероральной инокуляции 10 5 50% -ными дозами (SD 50 ) мыши штамма EC RV. A , Образцы фекалий собирали ежедневно и анализировали на антигены RV с помощью иммуноферментного анализа (ELISA). B , Самцов и самок стерильных мышей в возрасте 6–8 недель инфицировали стерилизованным фильтром RV.Образцы фекалий собирали ежедневно и анализировали на антиген RV с помощью ELISA. C , Была приготовлена ​​тотальная РНК из двенадцатиперстной кишки, и лизат клеток от мышей, обработанных антибиотиками, зондировали на РНК-мессенджер NSP3, репрезентативную для генома RV, с помощью количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (qRT-PCR). D , Готовили лизат клеток двенадцатиперстной кишки, и каждый образец анализировали на соотношение положительно-смысловых и отрицательно-смысловых цепей с помощью одноцепочечной qRT-PCR. Значение отношения положительно коррелирует с репликацией правого желудочка.* P <.05.

Как и у людей, инфекция RV у новорожденных мышей вызывает секреторную диарею, возникающую через 2–3 дня после инокуляции и продолжающуюся 3–8 дней. Чтобы определить, влияет ли снижение инфекционности ПЖ в результате лечения антибиотиками на заболевание ПЖ, новорожденным мышам вводили антибиотики через пероральный желудочный зонд за 1 день до и через 1 день после инокуляции, а затем инокулировали ПЖ на день 0. Затем мышей ежедневно контролировали на предмет диареи, как указано. по наличию жидких, обильных каловых масс желтого цвета при легком надавливании на живот (рис. 2 A ).Лечение антибиотиками привело к снижению суточной частоты диареи на 4–8 дни после инокуляции (Рисунок 2 B ) и к снижению общей заболеваемости диареей на 34% (Рисунок 2 C ). Среди мышей, у которых развилась диарея, те, которые получали антибиотики, имели диарею примерно на 1 день меньше, чем необработанные мыши (рис. 2 D ). Таким образом, уменьшение инфицирования RV посредством удаления микробиоты привело к сокращению продолжительности диарейного заболевания.

Рисунок 2.

Лечение антибиотиками снижает диарею, вызванную ротавирусом (RV), у новорожденных мышей.Беременных самок C57BL6 лечили ампициллином и неомицином в питьевой воде ad libitum за 1 неделю до родов, и лечение продолжали до отъема потомства. Потомство обрабатывали 100 мкг неомицина и 200 мкг ампициллина в 100 мкл воды через желудочный зонд за 1 день до и через 1 день после инокуляции. Шестидневным мышам прививали 2 50% -ные дозы RV мышей от диареи, и их ежедневно наблюдали визуально на предмет диареи. A , Типичная диарея правого желудочка у новорожденных. B , Ежедневные показатели наблюдаемой диареи в дни 0–9 после инокуляции. C , Заболеваемость диареей, представленная как фракция, так и процент от общего числа инокулированных мышей. D . Из мышей, у которых наблюдались признаки диареи, усредняли количество дней, в течение которых у каждой мыши была диарея. * P <.05.

Рисунок 2.

Лечение антибиотиками снижает диарею, вызванную ротавирусом (RV), у новорожденных мышей. Беременных самок C57BL6 лечили ампициллином и неомицином в питьевой воде ad libitum за 1 неделю до родов, и лечение продолжали до отъема потомства.Потомство обрабатывали 100 мкг неомицина и 200 мкг ампициллина в 100 мкл воды через желудочный зонд за 1 день до и через 1 день после инокуляции. Шестидневным мышам прививали 2 50% -ные дозы RV мышей от диареи, и их ежедневно наблюдали визуально на предмет диареи. A , Типичная диарея правого желудочка у новорожденных. B , Ежедневные показатели наблюдаемой диареи в дни 0–9 после инокуляции. C , Заболеваемость диареей, представленная как фракция, так и процент от общего числа инокулированных мышей. D . Из мышей, у которых наблюдались признаки диареи, усредняли количество дней, в течение которых у каждой мыши была диарея. * P <.05.

Отсутствие микробиоты приводит к более стойкому ответу антител слизистой оболочки, специфичному для RV

Инфекция RV инициирует устойчивый адаптивный иммунитет, который устраняет первичную инфекцию и обеспечивает защиту от инфекции в будущем [1]. Такой индуцированный инфекцией иммунитет является основой используемых в настоящее время вакцин против РВ, которые представляют собой живые аттенуированные вирусы.Такой защитный иммунитет лучше всего коррелирует с RV-специфическим фекальным IgA, уровни которого часто параллельны уровням сывороточного иммуноглобулина G (IgG) и IgA, которые обычно измеряются в клинических исследованиях [1, 18]. Модель RV-инфекции у взрослых мышей можно рассматривать как модель RV-вакцинации, поскольку обе являются бессимптомными инфекциями, которые не приводят к диарее, но обеспечивают защитный иммунитет [1]. Принимая во внимание, что антибиотики могут снижать ответ антител на системно вводимые антигены и что снижение инфекционности, вероятно, снижает воздействие антигена, мы предположили, что лечение антибиотиками может снизить уровень антител, специфичных к RV [12, 13].Чтобы исследовать эту возможность, мы лечили мышей антибиотиками за 1 неделю до и до 11 недель после инокуляции, еженедельно собирали фекалии и сыворотку и анализировали образцы на RV-специфические IgG и IgA. Лечение антибиотиками не влияло на продукцию антител в ранние сроки после инокуляции RV, но увеличивало уровни RV-специфических антител, особенно сывороточного и фекального IgA, через 9 недель после инокуляции и позже (Рисунок 3). Такое усиление наблюдали при измерении иммунной реактивности RV при однократном разведении сыворотки или фекального супернатанта или при количественном определении титра после ряда разведений.Это повышение было специфичным для правого желудочка, поскольку, согласно другим исследованиям, лечение антибиотиками приводило к умеренному снижению общего уровня IgA (дополнительные данные A и дополнительные данные B ) [11].

Рисунок 3.

Лечение антибиотиками увеличивает устойчивость антител к ротавирусу (RV). Мышей C57BL6 лечили антибиотиками, как описано, и они продолжали принимать антибиотики до 11 недель после инокуляции. A , C и E , продукция сывороточного иммуноглобулина G (IgG; A ), сывороточного иммуноглобулина A (IgA; C ) и фекального RV IgA ( E ), как измерено по иммунной реактивности RV при однократном разведении супернатанта сыворотки или фекалий через 0, 9, 10 и 11 недель после инокуляции.Результаты отражают поздние системные ответы и ответы на антитела слизистых оболочек правого желудочка. B , D и F , титры сывороточного RV IgG ( B ), сывороточного RV IgA ( D ) и фекального RV IgA ( F ), измеренные с помощью разбавления образца, при котором OD 450 равнялась 0,2 по сравнению с контрольным образцом через 11 недель после инокуляции. * P <.05.

Рисунок 3.

Лечение антибиотиками увеличивает устойчивость антител к ротавирусу (RV).Мышей C57BL6 лечили антибиотиками, как описано, и они продолжали принимать антибиотики до 11 недель после инокуляции. A , C и E , продукция сывороточного иммуноглобулина G (IgG; A ), сывороточного иммуноглобулина A (IgA; C ) и фекального RV IgA ( E ), как измерено по иммунной реактивности RV при однократном разведении супернатанта сыворотки или фекалий через 0, 9, 10 и 11 недель после инокуляции. Результаты отражают поздние системные ответы и ответы на антитела слизистых оболочек правого желудочка. B , D и F , титры сывороточного RV IgG ( B ), сывороточного RV IgA ( D ) и фекального RV IgA ( F ), измеренные с помощью разбавления образца, при котором OD 450 равнялась 0,2 по сравнению с контрольным образцом через 11 недель после инокуляции. * P <.05.

Альтернативный подход к использованию антибиотиков для изучения микробиоты — это использование мышей, свободных от микробов, хотя есть предостережение, что у этих мышей отсутствует ассоциированная с кишечником лимфоидная ткань, которая обеспечивает адаптивный иммунитет [11].В соответствии с этим знанием и отсроченным клиренсом RV, наблюдаемым у этих мышей, у стерильных мышей наблюдалась заметная задержка продукции фекальных IgA к RV. Несмотря на отсутствие GALT, это нарушение у стерильных мышей продукции фекальных IgA против RV было преодолено со временем. Более того, аналогично мышам, получавшим антибиотики, стерильные мыши демонстрировали сывороточный ответ антител против RV, который первоначально был подобен таковому у обычных мышей, но усилился через несколько недель после инокуляции (рис. 4).Затем мы исследовали влияние антибиотиков на приобретение RV-специфических антител после патогенной (то есть вызывающей диарею) инфекции RV у новорожденных мышей. Патогенная вирусная инфекция обычно является сильным индуктором адаптивного иммунитета. Тем не менее, несмотря на сокращение продолжительности диареи, вызванной RV, лечение антибиотиками увеличивало выработку анти-RV IgA в сыворотке, при этом самые высокие титры наблюдались преимущественно в более поздние сроки после инфицирования (рис. 5). Таким образом, в отличие от нашего первоначального прогноза, удаление микробиоты привело к усилению специфичных для RV системных и слизистых антител.

Рисунок 4.

Мыши, лишенные микробов, демонстрируют усиленный сывороточный ответ антител на ротавирус (RV). Свободных от зародышей самцов и самок мышей C57BL6 инокулировали стерилизованным фильтром RV, фекалии и сыворотку собирали еженедельно вплоть до 9 недели после инокуляции, и образцы анализировали на наличие антител RV с помощью иммуноферментного анализа. За мышами еженедельно до конечной точки эксперимента наблюдали с помощью фекальной культуры на предмет отсутствия микробов. A , C и E , продукция сывороточного иммуноглобулина G (IgG; A ), сывороточного иммуноглобулина A (IgA; C ) и фекального RV IgA ( E ), как измерено по иммунной реактивности ПЖ при однократном разведении супернатанта сыворотки или фекалий через 0–9 недель после инокуляции, что отражает поздние системные и слизистые реакции антител к ПЖ. B , D и F , титры сывороточного RV IgG ( B ), сывороточного RV IgA ( D ) и фекального RV IgA ( F ), измеренные с помощью разбавления образца, при котором OD 450 равнялась 0,2 по сравнению с контрольным образцом через 9 недель после инокуляции. * P <.05. Сокращение: условно Конв.

Рисунок 4.

Мыши, лишенные микробов, демонстрируют усиленный сывороточный ответ антител на ротавирус (RV). Свободных от зародышей самцов и самок мышей C57BL6 инокулировали стерилизованным фильтром RV, фекалии и сыворотку собирали еженедельно вплоть до 9 недели после инокуляции, и образцы анализировали на наличие антител RV с помощью иммуноферментного анализа.За мышами еженедельно до конечной точки эксперимента наблюдали с помощью фекальной культуры на предмет отсутствия микробов. A , C и E , продукция сывороточного иммуноглобулина G (IgG; A ), сывороточного иммуноглобулина A (IgA; C ) и фекального RV IgA ( E ), как измерено по иммунной реактивности ПЖ при однократном разведении супернатанта сыворотки или фекалий через 0–9 недель после инокуляции, что отражает поздние системные и слизистые реакции антител к ПЖ. B , D и F , титры сывороточного RV IgG ( B ), сывороточного RV IgA ( D ) и фекального RV IgA ( F ), измеренные с помощью разбавления образца, при котором OD 450 равнялся 0.2 поверх бланка через 9 недель после инокуляции. * P <.05. Сокращение: условно Конв.

Рисунок 5.

Неонатальные мыши, получавшие лечение антибиотиками, демонстрируют повышенную продукцию сывороточного иммуноглобулина А (IgA) после инокуляции ротавируса (RV). Новорожденных лечили антибиотиками, как описано в разделе «Материалы и методы», и им прививали RV. Образцы кала и сыворотки собирали через несколько недель после инокуляции, и образцы анализировали на антитела к RV. A и C , выработка сывороточного иммуноглобулина G (IgG; A ) и RV иммуноглобулина A (IgA; C ), измеренная по иммунной реактивности RV при однократном разведении сыворотки, 4, 6, и 9 недель после инокуляции. B , Титр сывороточного IgG к RV, измеренный с помощью разведения образца, при котором OD 450 равнялась 0,2 по сравнению с контрольным образцом, через 9 недель после инокуляции. D , Титр сывороточного IgA к RV, измеренный разведением сыворотки, при котором OD 450 равняется 0,2 по сравнению с контрольным образцом, через 9 недель после инокуляции. * P <.05.

Рисунок 5.

Неонатальные мыши, получавшие лечение антибиотиками, демонстрируют повышенную продукцию сывороточного иммуноглобулина А (IgA) после инокуляции ротавируса (RV). Новорожденных лечили антибиотиками, как описано в разделе «Материалы и методы», и им прививали RV.Образцы кала и сыворотки собирали через несколько недель после инокуляции, и образцы анализировали на антитела к RV. A и C , выработка сывороточного иммуноглобулина G (IgG; A ) и RV иммуноглобулина A (IgA; C ), измеренная по иммунной реактивности RV при однократном разведении сыворотки, 4, 6, и 9 недель после инокуляции. B , Титр сывороточного IgG к RV, измеренный с помощью разведения образца, при котором OD 450 равнялась 0,2 по сравнению с контрольным образцом, через 9 недель после инокуляции. D , Титр сывороточного IgA к RV, измеренный разведением сыворотки, при котором OD 450 равняется 0,2 по сравнению с контрольным образцом, через 9 недель после инокуляции. * P <.05.

Увеличение продолжительности ответа антител на RV антибиотиками предполагает возможность включения лечения антибиотиками в кампании вакцинации. Однако, учитывая отрицательные потенциальные последствия длительного приема антибиотиков, мы затем попытались определить, может ли более короткое воздействие также усиливать образование антител к RV.Таким образом, мы сравнили эффекты двухнедельного курса антибиотиков (от 1 недели до инокуляции до 1 недели после инокуляции) с контрольными условиями (т. Е. Без антибиотиков) и с терапией антибиотиками, продолжавшейся на протяжении всего эксперимента (от 1 недели до до 7 недель). после инокуляции). У мышей, получавших только 2 недели антибиотиков, наблюдали возврат бактериальной нагрузки в фекалиях в течение 2 недель после прекращения приема антибиотиков, тогда как мыши, получавшие антибиотики на протяжении всего эксперимента, продолжали демонстрировать подавление бактерий (дополнительные данные B дополнительные данные).В то время как максимальное усиление ответа RV-специфических антител наблюдалось при поддерживаемом лечении антибиотиками, двухнедельного курса было достаточно для значительного повышения сывороточных уровней и титров анти-RV IgG и IgA (фигура 6 A D ). Дальнейший сокращенный курс антибиотиков, продолжавшийся от 2 дней до инокуляции до 3 дней после инокуляции RV, привел к тенденции к увеличению титров анти-RV IgA в кале и сыворотке, что не было статистически значимым (дополнительные данные). Мы предположили, что опосредованное антибиотиками усиление устойчивости антител слизистой оболочки связано с более устойчивыми уровнями RV-специфических секретирующих антитела клеток (ASC).Таким образом, затем мы выполнили анализ ELISPOT для количественного определения уровней RV-специфических IgA-продуцирующих ASC из собственной пластинки тонкой кишки и пейеровских бляшек. У контрольных мышей инокуляция RV привела к тому, что RV-специфические ASC переходили с неопределяемого уровня до уровня 4000 клеток на миллион lamina propria и клеток пейеровых пятен, которые затем уменьшались примерно в 40 раз к 7 неделям после инокуляции. Лечение антибиотиками не оказало значительного влияния на образование RV-специфических IgA-продуцирующих ASC через 2 недели после инокуляции.Однако через 7 недель после инокуляции лечение антибиотиками заметно повысило уровни этих клеток. Степень улучшения (примерно в 20 раз) была наибольшей у мышей, получавших антибиотики на протяжении всего эксперимента, но, тем не менее, была устойчивой (увеличение в 10 раз) у мышей, получавших 2-недельный курс антибиотиков (рис. 6 E ).

Рисунок 6.

Лечение антибиотиками приводит к большему поддержанию в кишечнике клеток, продуцирующих специфические антитела к ротавирусу (RV). Мышей C57BL6 лечили антибиотиками, как описано в разделе «Материалы и методы».Однако одна группа продолжала терапию антибиотиками только в течение 1 недели после инокуляции (всего 2 недели), тогда как другая группа мышей продолжала терапию антибиотиками на протяжении всего эксперимента (всего 8 недель). A и C , сывороточный иммуноглобулин G (IgG; A ) и сывороточный иммуноглобулин A (IgA; C ) еженедельно в течение 7 недель после инокуляции, что отражает поздние системные и слизистые реакции антител к RV. B и D , титр сывороточного RV IgG ( B ) и титр сывороточного IgA RV ( D ), измеренные разбавлением образца, при котором OD 450 равнялась 0.2 поверх бланка через 7 недель после инокуляции. E , Клетки собственной пластинки тонкой кишки (LP) и клетки Пейера (PP) выделяли и наносили на планшеты с покрытием через 2 недели и 7 недель после инокуляции. Концентрация RV-специфических, продуцирующих IgA клеток, секретирующих антитела (ASC), была рассчитана в каждой группе. * P <.05. Сокращение: UnTx, необработанный.

Рисунок 6.

Лечение антибиотиками приводит к большему сохранению в кишечнике клеток, продуцирующих специфические антитела к ротавирусу (RV).Мышей C57BL6 лечили антибиотиками, как описано в разделе «Материалы и методы». Однако одна группа продолжала терапию антибиотиками только в течение 1 недели после инокуляции (всего 2 недели), тогда как другая группа мышей продолжала терапию антибиотиками на протяжении всего эксперимента (всего 8 недель). A и C , сывороточный иммуноглобулин G (IgG; A ) и сывороточный иммуноглобулин A (IgA; C ) еженедельно в течение 7 недель после инокуляции, что отражает поздние системные и слизистые реакции антител к RV. B и D , титр сывороточного RV IgG ( B ) и титр сывороточного IgA RV ( D ), измеренные разбавлением образца, при котором OD 450 равнялась 0,2 по сравнению с контрольным образцом, через 7 недель после инокуляции. E , Клетки собственной пластинки тонкой кишки (LP) и клетки Пейера (PP) выделяли и наносили на планшеты с покрытием через 2 недели и 7 недель после инокуляции. Концентрация RV-специфических, продуцирующих IgA клеток, секретирующих антитела (ASC), была рассчитана в каждой группе.* P <.05. Сокращение: UnTx, необработанный.

Влияние на микробиоту на базальное состояние активации врожденного иммунитета может регулировать RV-специфический адаптивный иммунитет

Мы предположили, что снижение бактериальной нагрузки с помощью лечения антибиотиками снижает степень базального состояния активации врожденного иммунитета, таким образом позволяя RV-специфическим сигналам опасности более легко активировать GALT во время инфекции; это должно привести к более сильной активации вирусспецифических клеток и сохранению ASC в кишечнике.Обратной стороной этой гипотезы является то, что индукция большей степени активации врожденного иммунитета перед введением вируса может ослабить ответ антител. Чтобы проверить эту возможность, мышей подвергали воздействию DSS через питьевую воду, что нарушает целостность кишечного эпителиального барьера и приводит к увеличению воздействия на иммунные клетки микробиоты и ее продуктов. Хотя лечение DSS может привести к стойкому опасному для жизни колиту, воздействие низких уровней DSS, таких как 1,0%, приводит лишь к умеренным гистопатологическим изменениям в кишечнике, но все же вызывает легко обнаруживаемую активацию экспрессии провоспалительных генов, которую можно контролировать путем измерения уровни фекального липокалина-2 [21].Соответственно, воздействие 1,0% DSS в течение 1 недели не приводило к явным симптомам колита, но, тем не менее, индуцировало устойчивую экспрессию фекального липокалина-2 (фиг. 7 A ). Обработка DSS не изменила курс инфекционности RV (фиг. 7 B ). Более того, DSS-индуцированное воспаление низкой степени не влияло на начальное образование сывороточного RV-специфического IgG (фиг. 7 C и 7 D ). Однако лечение DSS привело к значительно более низким уровням RV-специфического фекального и сывороточного IgA через 3–9 недель после инокуляции (фиг. 7 E H ).Эти результаты предполагают, что состояние базальной активации врожденного иммунитета во время инокуляции RV может модулировать уровни RV-специфических антител. Соответственно, манипулирование этим параметром может быть способом модуляции генерации этих защитных ответов.

Рис. 7.

Повышение базальной иммунной активации снижает индуцированное ротавирусом (RV) образование антител. Мышей C57BL6 лечили декстрансульфатом натрия (DSS), как описано в разделе «Материалы и методы», и инокулировали RV. A , Экспрессию липокалина-2 в фекалиях анализировали с помощью иммуноферментного анализа. B , Образцы фекалий собирали ежедневно, и анализировали антиген RV. C , E и G , был получен супернатант сыворотки и фекалий, и сывороточный иммуноглобулин G (IgG; C ) RV, сывороточный иммуноглобулин A RV (IgA; E ) и фекальный RV IgA ( G ) продукцию, измеренную по иммунной реактивности RV при однократном разведении сыворотки или фекального супернатанта, исследовали в течение 9 недель после инокуляции. D , F и H , титры сывороточного RV IgG ( D ), сывороточного RV IgA ( F ) и фекального RV IgA ( H ), измеренные с помощью разбавления образца, при котором OD 450 равнялась 0,2 по сравнению с контрольным образцом через 9 недель после инокуляции. * P <.05.

Рис. 7.

Повышение базальной иммунной активации снижает индуцированное ротавирусом (RV) образование антител. Мышей C57BL6 лечили декстрансульфатом натрия (DSS), как описано в разделе «Материалы и методы», и инокулировали RV. A , Экспрессию липокалина-2 в фекалиях анализировали с помощью иммуноферментного анализа. B , Образцы фекалий собирали ежедневно, и анализировали антиген RV. C , E и G , был получен супернатант сыворотки и фекалий, и сывороточный иммуноглобулин G (IgG; C ) RV, сывороточный иммуноглобулин A RV (IgA; E ) и фекальный RV IgA ( G ) продукцию, измеренную по иммунной реактивности RV при однократном разведении сыворотки или фекального супернатанта, исследовали в течение 9 недель после инокуляции. D , F и H , титры сывороточного RV IgG ( D ), сывороточного RV IgA ( F ) и фекального RV IgA ( H ), измеренные с помощью разбавления образца, при котором OD 450 равнялась 0,2 по сравнению с контрольным образцом через 9 недель после инокуляции. * P <.05.

ОБСУЖДЕНИЕ

Микробиота кишечника все чаще рассматривается как модулятор многочисленных инфекционных и иммунологических процессов. Во многих случаях микробиота кишечника служит для защиты хозяина от инфекционных заболеваний, так что использование антибиотиков приводит к повышенной восприимчивости к ряду бактериальных инфекций.Кроме того, у мышей, подвергнутых удалению микробиоты, нарушена генерация иммунных ответов на некоторые вирусы [12, 13]. Таким образом, мы изначально предположили, что устранение микробиоты может повысить восприимчивость к инфекции RV. В соответствии с наблюдением, что микробиота важна для развития GALT [11], который генерирует фекальный IgA, способствующий клиренсу RV [18], у стерильных мышей обнаружено замедленное образование фекальных IgA против RV и, соответственно, задержка клиренса RV. Тем не менее, общие последствия удаления микробиоты, особенно когда они были достигнуты с помощью более клинически значимого подхода к лечению антибиотиками, по-видимому, приносили пользу хозяину.В частности, лечение антибиотиками привело к задержке инфицирования RV и снижению общей инфекционности. Такое снижение инфицирования было связано и, вероятно, привело к значительному снижению частоты и продолжительности диареи, вызванной ПЖ.

Механизм, с помощью которого устранение микробиоты замедляет инфекционность RV, не ясен, но может быть аналогичен случаю с полиовирусом, реовирусом и вирусом опухоли молочной железы мыши, которые, как недавно сообщалось, инфицируют менее эффективно в отсутствие микробиоты [14 , 23].В таких случаях наблюдали, что бактериальный ЛПС связывает вирус и способствует его проникновению [14]. Хотя наши эксперименты на сегодняшний день не продемонстрировали прямой роли бактериальных лигандов в стимулировании проникновения правого желудочка, антибиотики оказали явное влияние на вирусную нагрузку с незначительным эффектом на репликацию правого желудочка, что предполагает, что аналогичная парадигма может работать. Другая возможность заключается в том, что отсутствие бактерий может снижать экспрессию рецепторов RV, необходимых для проникновения вируса. В самом деле, известно, что микробиота способствует экспрессии некоторых Toll-подобных рецепторов [24, 25], которые, как постулируется, облегчают проникновение кишечных вирусов [14, 23].

Снижение инфекционности RV после лечения антибиотиками, вероятно, привело к уменьшению воздействия на иммунную систему антигенов RV, что, как мы прогнозировали, снизит реакцию антител на вирус. Напротив, антибиотики усиливали ответ антител, в частности, приводя к более стойкому ответу. Такие более высокие титры в более поздние моменты времени, вероятно, обеспечат более длительную и более широкую защиту от последующей инфекции гетерологичными штаммами RV. Механизм, опосредующий этот эффект, не совсем ясен, но может отражать, что так называемые сигналы опасности RV обеспечивают больший стимулирующий эффект на антигенпредставляющие межклеточные взаимодействия, когда такие сигналы возникают в контексте пониженной базальной / фоновой передачи сигналов.В подтверждение этой возможности, удаление микробиоты приводит к снижению уровней в кале иммунных воспалительных маркеров, таких как липокалин-2 (данные не показаны) и relm-β [26], где использование DSS для увеличения состояния иммунной активации до инфицирования RV. привел к менее стойкому ответу антител. В этом контексте мы предполагаем, что неспособность вакцин против RV последовательно вызывать сильные ответы антител в развивающихся странах может отражать измененный состав микробиоты, возможно, обогащенный патобионтами, что приводит к хронической иммунной активации при введении вакцины RV.Другая возможность заключается в том, что удаление микробиоты снижает функционирование регуляторных Т-клеток, что способствует усилению воспалительных Т-клеточных реакций [27]. Расшифровка таких сложных механизмов остается важной исследовательской задачей.

Предполагая, что модель мыши RV может быть переведена на человека, наше исследование имеет несколько значений для использования антибиотиков в контексте инфекции RV и вакцинации. Во-первых, учитывая, что многие клинические диагнозы инфекций основаны на симптомах, а не на лабораторном обнаружении конкретного патогена, наши результаты показывают, что решения о назначении антибиотиков не должны опасаться того, что это повысит восприимчивость к RV.Более того, наши результаты показывают, что введение вакцины против RV не нужно откладывать в том случае, если человек в настоящее время принимает антибиотики. Скорее, наше исследование предполагает, что это может быть идеальным временем для введения RV и, возможно, других пероральных вакцин. Кроме того, низкая стоимость антибиотиков может оправдывать их избирательное использование при лечении заболеваний, вызываемых RV. Возможно, с активной вспышкой RV-инфекции можно справиться путем быстрого введения антибиотиков с последующей вакцинацией RV. Это действие может снизить тяжесть возникающих инфекций и повысить эффективность вакцины.С другой стороны, включение антибиотиков в более широкую кампанию вакцинации против РВ может повысить уровень сероконверсии. Действительно, на основе предложенного нами механизма, с помощью которого антибиотики стимулируют антитела к RV, мы могли бы предположить, что эффект может быть наибольшим в регионах с низким уровнем сероконверсии, таких как Малави, которые могут иметь более высокие уровни базовой иммунной активации. Даже небольшое повышение эффективности вакцины может привести к резкому снижению бремени болезней в обществе из-за коллективного иммунитета. В случае, если наши наблюдения на мышах окажутся уместными на людях, перед крупномасштабными исследованиями необходимо тщательное рассмотрение пагубных последствий использования антибиотиков, включая повышенную восприимчивость к бактериальным инфекциям [28] и распространение устойчивых к антибиотикам бактерий [29]. использование противомикробных препаратов для борьбы с бременем болезни правого желудочка.В свете этих опасений разработка подходов к избирательному манипулированию микробиотой может предоставить лучшие средства для безопасного усиления иммунного ответа на вакцины против RV. Такие избирательные манипуляции могут принимать форму более специфически действующих антибиотиков и / или введения пробиотиков. Действительно, введение пробиотика увеличивало уровень сероконверсии в когорте финских младенцев, вакцинированных против РВ [30]. Таким образом, хотя понимание механизмов и оптимизация требуют дополнительных экспериментов, подход манипулирования микробиотой может быть полезной стратегией для борьбы с RV.

Банкноты

Благодарности. Мы благодарим Кейтлин Боханнон, Сару Блатт, Дэниела Риоса и Джейсона О за технические советы; и Раму Амару, Тимоти Деннинга и Ифора Уильямса за полезное обсуждение.

Финансовая поддержка. Работа поддержана Национальным институтом здравоохранения (грант DK083890).

Возможный конфликт интересов. Все авторы: о конфликтах не сообщалось.

Все авторы подали форму ICMJE для раскрытия информации о потенциальных конфликтах интересов. Выявлены конфликты, которые редакция считает относящимися к содержанию рукописи.

Список литературы

1

Гринберг

HB

,

Estes

MK

.

Ротавирусы: от патогенеза к вакцинации

,

Гастроэнтерология

,

2009

, т.

136

(стр.

1939

51

) 2

Patel

MM

,

Glass

R

,

Desai

R

,

Tate

JE

har,

JE

har,

JE

har,

Выполнение обещаний о ротавирусных вакцинах: как далеко мы продвинулись с момента получения лицензии?

,

Lancet Infect Dis

,

2012

, т.

12

(стр.

561

70

) 4

Эпиднадзор за ротавирусами во всем мире, 2009 г.

Morbid Mortal Wkly Rep

,

2011

, vol.

60

(стр.

514

6

) 5

Бабджи

S

,

Канг

G

.

Вакцинация против ротавируса в развивающихся странах

,

Curr Opin Virol

,

2012

, vol.

2

(стр.

443

8

) 6

Holmgren

J

,

Svennerholm

AM

.

Вакцины против инфекций слизистых оболочек

,

Curr Opin Immunol

,

2012

, vol.

24

(стр.

343

53

) 7

Мадхи

SA

,

Cunliffe

NA

,

Steele

D

и др.

Влияние ротавирусной вакцины человека на тяжелую диарею у африканских младенцев

,

N Engl J Med

,

2010

, vol.

362

(стр.

289

98

) 8

Vesikari

T

,

Matson

DO

,

Dennehy

P

и др.

Безопасность и эффективность реассортантной ротавирусной вакцины пятивалентного человека и крупного рогатого скота (WC3)

,

N Engl J Med

,

2006

, vol.

354

(стр.

23

33

) 9

Patel

M

,

Shane

AL

,

Parashar

UD

,

Jiang

B

ch,

Стекло

РИ

.

Оральные ротавирусные вакцины: насколько хорошо они будут работать там, где они больше всего нужны?

,

J Infect Dis

,

2009

, т.

200

Suppl 1

(стр.

S39

48

) 10

Cooper

PJ

,

Chico

ME

,

Losonsky

G

и др.

Лечение детей с аскаридозом альбендазолом усиливает ответ вибриоцидных антител на живую аттенуированную пероральную вакцину против холеры CVD 103-HgR

,

J Infect Dis

,

2000

, vol.

182

(стр.

1199

206

) 11

Sommer

F

,

Backhed

F

.

Кишечная микробиота — мастера развития и физиологии хозяина

,

Nat Rev Microbiol

,

2013

, vol.

11

(стр.

227

38

) 12

Ichinohe

T

,

Pang

IK

,

Kumamoto

Y

и др.

Микробиота регулирует иммунную защиту от респираторной инфекции вируса гриппа A

,

Proc Natl Acad Sci U S A

,

2011

, vol.

108

(стр.

5354

9

) 13

Abt

MC

,

Osborne

LC

,

Monticelli

LA

и др.

Комменсальные бактерии калибруют порог активации врожденного противовирусного иммунитета

,

Иммунитет

,

2012

, т.

37

(стр.

158

70

) 14

Кусс

SK

,

Best

GT

,

Etheredge

CA

и др.

Кишечная микробиота способствует репликации кишечного вируса и системному патогенезу

,

Science

,

2011

, vol.

334

(стр.

249

52

) 15

Карвалью

FA

,

Налбантоглу

I

,

Ортега-Фернандес

S

и др.

Интерлейкин-1бета (IL-1бета) способствует предрасположенности мышей с дефицитом Toll-подобного рецептора 5 (TLR5) к колиту

,

Gut

,

2012

, vol.

61

(стр.

373

84

) 16

Blutt

SE

,

Warfield

KL

,

O’Neal

CM

,

Estes

MK2 9000 Conner

MK2 9000 Conner

.

Факторы хозяина, вирусы и вакцины, определяющие защитную эффективность, индуцированную ротавирусом и вирусоподобными частицами (VLP)

,

Vaccine

,

2006

, vol.

24

(стр.

1170

9

) 17

Fenaux

M

,

Cuadras

MA

,

Feng

N

,

Jaimes

M

Внекишечное распространение и репликация гомологичного штамма ротавируса ЕС и гетерологичного ротавируса резус у мышей BALB / c

,

J Virol

,

2006

, vol.

80

(стр.

5219

32

) 18

Blutt

SE

,

Miller

AD

,

Salmon

SL

,

Metzger

000 DW

ME

,

IgA важен для очистки и критически важен для защиты от ротавирусной инфекции

,

Mucosal Immunol

,

2012

, vol.

5

(стр.

712

9

) 19

Виджай-Кумар

M

,

Aitken

JD

,

Kumar

A

и др.

Мыши с дефицитом Toll-подобного рецептора 5 обладают нарушенной регуляцией экспрессии кишечных генов и неспецифической устойчивостью к тифоидному заболеванию, вызванному сальмонеллой

,

Infect Immun

,

2008

, vol.

76

(стр.

1276

81

) 20

Denning

TL

,

Wang

YC

,

Patel

SR

,

Williams

IR

.

Макрофаги Lamina propria и дендритные клетки по-разному индуцируют регуляторные и продуцирующие интерлейкин 17 Т-клеточные ответы

,

Nat Immunol

,

2007

, vol.

8

(стр.

1086

94

) 21

Chassaing

B

,

Srinivasan

G

,

Delgado

MA

,

Young

000 AN

Виджай-Кумар

M

.

Фекальный липокалин 2, чувствительный и широко динамичный неинвазивный биомаркер кишечного воспаления

,

PLoS One

,

2012

, vol.

7

стр.

e44328

22

Feng

N

,

Franco

MA

,

Greenberg

HB

.

Мышиная модель ротавирусной инфекции

,

Adv Exp Med Biol

,

1997

, vol.

412

(стр.

233

40

) 23

Кейн

M

,

Case

LK

,

Kopaskie

K

и др.

Успешная передача ретровируса зависит от комменсальной микробиоты

,

Science

,

2011

, vol.

334

(стр.

245

9

) 24

Lundin

A

,

Bok

CM

,

Aronsson

L

и др.

Флора кишечника, Toll-подобные рецепторы и ядерные рецепторы: трехсторонняя связь, которая настраивает врожденный иммунитет в толстой кишке

,

Cell Microbiol

,

2008

, vol.

10

(стр.

1093

103

) 25

Ван

Y

,

Devkota

S

,

Musch

MW

и др.

Региональная микробиота слизистой оболочки определяет физиологическую экспрессию TLR2 и TLR4 в толстой кишке мышей

,

PLoS One

,

2010

, vol.

5

стр.

e13607

26

Wang

ML

,

Shin

ME

,

Knight

PA

и др.

Регуляция экспрессии изоформы RELM / FIZZ с помощью Cdx2 в ответ на врожденную и адаптивную иммунную стимуляцию в кишечнике

,

Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol

,

2005

, vol.

288

(стр.

G1074

83

) 27

Боллрат

J

,

Powrie

FM

.

Контролируя границы: регуляторные Т-клетки и гомеостаз кишечника

,

Semin Immunol

,

2013

, vol.

25

(стр.

352

7

) 28

Dupont

HL

.

Диагностика и лечение инфекции Clostridium difficile

,

Clin Gastroenterol Hepatol

,

2013

, vol.

11

(стр.

1216

23

) 29

Lynch

JB

.

Туберкулез с множественной лекарственной устойчивостью

,

Med Clin North Am

,

2013

, vol.

97

(стр.

553

79

) 30

Isolauri

E

,

Joensuu

J

,

Suomalainen

H

,

Luomala

M

Повышенная иммуногенность пероральной реассортантной ротавирусной вакцины D × RRV с помощью Lactobacillus casei GG

,

Vaccine

,

1995

, vol.

13

(стр.

310

2

) © Автор, 2014. Опубликовано Oxford University Press от имени Общества инфекционистов Америки. Все права защищены. Для получения разрешений обращайтесь по электронной почте: [email protected]

Ротавирус | Американская академия педиатрии

Цели

После прочтения этой статьи читатели должны уметь:

  1. Распознавать признаки и симптомы ротавирусной инфекции.

  2. Опишите, как передается ротавирус и как можно предотвратить заражение.

  3. Объясните, как бороться с обезвоживанием.

  4. Опишите другие возможные осложнения ротавирусной инфекции.

  5. Обсудите риски и преимущества симптоматического лечения рвоты и диареи.

Введение

В 1959 году Бреннер и Хорн описали новую технику электронной микроскопии, открывшую новую эру в экспериментальной и диагностической вирусологии.(1) Среди множества недавно открытых агентов ротавирус был впервые описан как возбудитель детской диареи мышей в 1963 году. Его важность в качестве патогена желудочно-кишечных заболеваний (ЖКТ) человека не была оценена до 10 лет спустя, когда Бишоп и соавторы (2) ) идентифицировал его с помощью электронной микроскопии в воспаленной слизистой оболочке шести детей, перенесших гастроэнтерит и лечившихся в Королевской детской больнице в Мельбурне, Австралия. В 1974 году Флюетт и его коллеги (3) выдвинули название «ротавирус» на основании его «колесообразного» внешнего вида (рис.).С тех пор более доступные диагностические методы привели к значительному росту знаний о вирусе, который в настоящее время известен как наиболее частая причина детской диареи.

Рисунок

Ротавирус человека под электронной микроскопией.

Бремя болезней

Ротавирус распространен повсеместно, но особенно сильно поражает детей в развивающихся странах. Во всем мире на ротавирус приходится 25% всех случаев смерти от диарейных заболеваний.У детей заболеваемость составляет от 600 000 до 900 000 смертей ежегодно или 6% всех случаев смерти детей в возрасте до 5 лет. (4) В Соединенных Штатах смертность от ротавируса является редкой, ежегодно на нее приходится менее 40 детских смертей. (4) Однако даже в Соединенных Штатах ротавирус вызывает серьезную заболеваемость и является причиной примерно 500 000 амбулаторных посещений и 50 000 госпитализаций. (4) В результате финансовое бремя для системы здравоохранения США составляет…

Модель мыши с желудочно-кишечной ротавирусной инфекцией для исследований иммунной модуляции | Virology Journal

Вирусы

Для получения большого количества вирулентного вируса эпизоотической диареи и новорожденных мышей (EDIM) 78 новорожденных мышей в возрасте 4 дней инокулировали 5 мкл EDIM 7.8 * 10 7 фокусообразующих единиц / мл, добрый подарок доктора Ричарда Уорда, Медицинский центр детской больницы Цинциннати, США. Образцы стула собирали и объединяли с 5 по 13 день, и EDIM экстрагировали генетроном (1,1,2-трихлор-1,2,2, -трифторэтан, Sigma-Aldrich, Zwijndrecht, Нидерланды). Препарат EDIM для стула содержал 400 мкг ротавируса / мл, как определено с помощью IDEIA ELISA (Dako Diagnostics, Glostrup, Дания), проверенного на основе ротавируса с известной концентрацией ротавируса.Чтобы определить, вызывает ли EDIM диарейное заболевание при пероральном введении новорожденным мышам, 7 мышей инокулировали 5 мкл EDIM (400 мкг ротавируса / мл) в возрасте 7 дней. На 2-й день после инъекции 70% мышей страдали диареей, которая увеличивалась до 100% на 5-й день и снова снижалась с 6-го дня.

Штамм резус-ротавируса (RRV), использованный в этом исследовании, также предоставлен доктором Ричардом Уордом. , выращивали на клетках MA104 почки африканской зеленой мартышки (ECACC, Солсбери, Великобритания) и концентрировали ультрацентрифугированием.Титр определяли с использованием анализа титрования в клетках MA104, что дало 50% инфекционную дозу культуры клеток (CCID 50 ), равную 1 × 10 7,7 . Запасы вируса инактивировали УФ-излучением в течение ночи при коротковолновом УФ-излучении 254 нм (УФ-кабинет CM-10; Alltech, Бреда, Нидерланды) и использовали для измерения реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) и стимуляции Т-клеток. Инактивацию ротавируса подтверждали с помощью анализа титрования в клетках MA104. Для ответов DTH исходные материалы EDIM и RRV разводили в 100 раз PBS.Для использования в экспериментах по стимуляции Т-клеток, очищенные в градиенте хлорида цезия двухслойные частицы EDIM (предоставленные доктором Ричардом Уордом) разбавляли до 1 мкг / мл, а RRV разбавляли до CCID 50 5 × 10 7 .

Обезьяний ротавирус, SA-11, (ATCC, Мидлсекс, Великобритания) выращивали в клетках MA104 и концентрировали ультрацентрифугированием. SA-11 содержал 14 мкг ротавируса / мл, как определено с помощью IDEIA ELISA, проверено на основе ротавируса с известной концентрацией ротавируса.Для определения ротавирус-специфических антител в сыворотке крови использовали SA-11 в концентрации 500 нг / мл.

Мыши

Беременных самок мышей BALB / c содержали индивидуально в стерильных клетках для микроизоляции в стандартных условиях содержания в помещении для животных Голландского института вакцин с 12-часовым циклом темноты и света. Уход за животными и их использование выполнялись в соответствии с руководящими указаниями Голландского комитета экспериментов на животных. Отлучение от грудных детенышей произошло в 21-дневном возрасте.В качестве альтернативы, детеныши, иммунизированные и зараженные до отъема, оставались со своими матерями.

Дизайн исследования

В общей сложности 91 новорожденная мышь была подвергнута перекрестному воспитанию и разделена на 4 исследовательские группы, как показано в таблице 1. Схематический дизайн модели мыши показан на рисунке 1. С 4-го по 10-й день жизни щенки группы D получали ежедневно 20 мкл PBS, содержащего специфические для ротавируса антитела, Gastrogard-R ® (любезно предоставленные доктором Рози Перейра) (1 мг / день) через желудочный зонд.На 7-й день жизни детенышей группы A, C и D через желудочный зонд инокулировали 10 мкл RRV (CCID 50 1 × 10 7,7 ), а мышей группы B инокулировали 10 мкл PBS в качестве контроля. С 8 по 14 день оценивали диарею и тяжесть заболевания. С 8 по 27 день фекалии собирали ежедневно, фекалии всех животных в одной группе объединяли каждый день. На 16-й день возраста у всех животных в одной группе был взят образец крови и объединен. В возрасте 17 дней детенышей групп B, C и D инокулировали 5 мкл EDIM (400 мкг ротавируса / мл), а мышей группы A инокулировали 10 мкл PBS в качестве контроля.На 27 день возраста ротавирус-специфическая ГЗЗ была вызвана подкожной инокуляцией ротавируса, инактивированного ультрафиолетом, в ушную раковину уха, EDIM (1 мкг / мл) в левое ухо и RRV (CCID 50 5 × 10 7 ) в правом ухе. Неинокулированным мышам сопоставимого возраста также вводили инъекции в качестве контроля. Двадцать четыре часа спустя реакцию DTH определяли путем измерения толщины уха с помощью цифрового микрометра (Mitutoyo, Veenendaal, Нидерланды) до взятия отдельных образцов селезенки и отдельных образцов крови.

Таблица 1 Дизайн исследования инокуляции мышей RRV и / или EDIM и вмешательства. Рисунок 1

Схематическое изображение модели двойной ротавирусной инфекции . На 0 день родились детеныши. С 4 по 10 день после рождения детенышей в одной группе вводили ротавирус-специфические антитела (Gastrogard-R ® ) через желудочный зонд. На 7-й день жизни детенышей инокулировали RRV через желудочный зонд. Начиная с 8-го дня, количество заболевших щенков и тяжесть заболевания подсчитывали ежедневно.С 8-го дня до конца эксперимента собирали фекалии. На 16 день собирали образец крови, и на 17 день детенышей инокулировали EDIM через желудочный зонд. На 27-й день возраста DTH, специфичный для ротавируса, был вызван подкожной инокуляцией ротавируса в ушную раковину уха, EDIM в левое ухо и RRV в правое ухо. Ответы на ГЗТ измеряли через 24 часа до сбора образцов селезенки и крови.

Диарея и оценка тяжести заболевания

Ежедневная оценка, начиная через 1 день после прививки RRV, на наличие диареи (определяемой как наличие диареи после легкой пальпации живота) проводилась для каждого животного, и результаты были представлены в виде процент животных, страдающих диареей, в каждой группе.Образцы стула собирали ежедневно, фекалии всех животных в одной группе объединяли каждый день. Тяжесть заболевания оценивалась ежедневно путем присвоения числовых значений цвету стула, где высокий балл указывает на тяжелое заболевание (желтый = 3; желто-коричневый = 2; коричневый = 1), степень загрязнения (очень загрязненный = 4; несколько загрязненный = 1; без загрязнения = 0) и консистенции (очень жидкий = 4; жидкий = 3; твердый = 1) стула. Оценка степени тяжести рассчитывалась путем деления общей оценки тяжести на общее количество животных в каждый день после иммунизации против RRV [12].

Обнаружение ротавируса в фекалиях

В соответствии с протоколом производителя использовали коммерческий набор для ELISA (IDEIA; Dako diagnostics) для обнаружения ротавируса группы А в образцах кала человека. Короче говоря, в лунки, предварительно покрытые ротавирус-специфическими поликлональными антителами, брали образцы эталонного раствора EDIM с известной концентрацией (300 нг / мл), который использовали в качестве стандартных образцов стула (разведения 5 ×, 10 ×, 50 × и 100 ×). , положительный и отрицательный контроль поставляются в наборе. Затем добавляли 100 мкл ротавирус-специфичных поликлональных антител к пероксидазе и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре.Лунки промывали 350 мкл промывочного буфера и инкубировали со 100 мкл субстрата TMB в течение 10 мин. при комнатной температуре (КТ). Реакцию останавливали добавлением 100 мкл 0,46 моль / л серной кислоты и оптическую плотность измеряли при 450 нм на считывающем устройстве для микропланшетов (BioRad, Hemel Hempstead, UK). Отсечка ELISA представляла собой среднее поглощение отрицательного контроля при 450 нм плюс коэффициент 0,1. Абсорбция положительного контроля должна быть в диапазоне, указанном на валидационной вкладке в наборе. Концентрация ротавируса в образцах выражалась в нг / мл.

In vitro Конканавалин A и ротавирус-специфическая пролиферация клеток селезенки

Клетки селезенки отдельных мышей группы A (n = 22), группы B (n = 23), группы C (= 24), группы D ( n = 22), а контрольную группу неинокулированных мышей (n = 15) изолировали с использованием клеточного фильтра 40 мкм (BD Falcon, Breda, Нидерланды) до суспензии одноклеточных. Клетки инкубировали с 5 мл ледяного буфера для лизиса (4,15 г хлорида аммония (Merck, Haarlem, Нидерланды) + 0.5 г бикарбоната калия (Sigma-Aldrich, Zwijdrecht, Нидерланды) + 18,6 мг EDTA (Sigma-Aldrich) в 500 мл воды, pH 7,3) и инкубировали в течение 5 минут на льду для лизирования эритроцитов. После инкубации 10 мл ледяной культуральной среды, RPMI-1640 (Life Technologies, Бреда, Нидерланды) + инактивированный нагреванием 10% FBS (Perbio Science, Etten-Leur, Нидерланды) + пенициллин 50 Ед / мл и стрептомицин 50 Добавляли мкг / мл (Life Technologies) + 1% пируват натрия (Life Technologies). Суспензию клеток центрифугировали 5 мин.при 400 × g и 4 ° C (Sorvall RT7, Thermo Fisher Scientific, Бреда, Нидерланды) и ресуспендировали в 2 мл ледяной культуральной среды. Для стимуляции Con A типа IV (Sigma-Aldrich) 2 × 10 5 клеток стимулировали 3 мкг / мл Con A. Для ротавирус-специфической стимуляции 1 × 10 6 клеток стимулировали 5 × 10 клеток. 7 CCID 50 УФ-инактивированные частицы RRV или 1 мкг / мл УФ-инактивированные частицы EDIM dl. Планшеты инкубировали при 37 ° C и 5% CO 2 . Пролиферирующие Con A клетки подвергали импульсному воздействию через 24 часа, а специфические для ротавируса пролиферирующие клетки через 5 дней с 0.4 мкКи / лунку тритий-тимидина (PerkinElmer, Гронинген, Нидерланды) и инкубировали в течение ночи. Клетки собирали на фильтровальные планшеты (Unifilter GF-C; PerkinElmer) и определяли радиоактивность в 25 мкл сцинтилляционной смеси (Ultima gold; PerkinElmer) в жидкостном сцинтилляционном детекторе Wallac MicroBeta (PerkinElmer). Индекс стимуляции рассчитывали как отношение количества импульсов в минуту для антиген-стимулированных культур к фоновым культурам.

Обнаружение сывороточных антител подкласса IgM, IgG и IgG к ротавирусу

Образцы сыворотки были собраны у мышей, у которых была взята кровь из орбитального синуса, и центрифугированы 10 минут при 400 × g (Sorvall RT7; Thermo Fisher Scientific).Лунки 96-луночного планшета (BD Falcon, Breda, Нидерланды) покрывали в течение ночи 100 мкл 500 нг / лунку обезьяньего ротавируса (SA-11) при 4 ° C. Как описано ранее, SA-11 является эффективным заменителем антигена EDIM в ELISA [5]. Лунки промывали 4 × 200 мкл PBS (Life Technologies) + 0,05% Tween 20 (Merck) и блокировали на 30 мин. при 37 ° C с 200 мкл буфера для анализа (PBS + 0,5% BSA (MP Biomedicals, Эйндховен, Нидерланды) + 0,05% Tween 20). В качестве контрольной сыворотки использовали сыворотки от детенышей и матерей из предыдущего эксперимента по пассажу EDIM, которые, как было показано, содержат антитела к ротавирусу.Для каждого изотипа или подкласса была выбрана своя эталонная сыворотка с наивысшим титром, протестированная в серии серийных разведений, начиная с разведения 1:10, и установлена ​​произвольная единица (AU), равная 100. На 16-й день индивидуальные образцы сыворотки были собраны и затем объединены по группам. На 28-й день были собраны отдельные образцы сыворотки и исследованы индивидуально. Серийные разведения в 100 мкл были сделаны для эталонной сыворотки и отдельных образцов сыворотки, начиная с разведения 1:10 в буфере для анализа. Лунки промывали, как описано выше, и инкубировали в течение 1 часа при 37 ° C со 100 мкл 1: 7500 козьих антимышиных IgM μ-цепей-HRP (Sigma-Aldrich) или 1: 1000 козьих антимышиных IgG-HRP (Tebu- Bio, Heerhugowaard, Нидерланды) или 1: 5000 козьих антимышиных IgG1-HRP (AbD Serotec, Дюссельдорф, Германия) или 1: 1000 козьих антимышиных IgG2a-HRP (AbD Serotec) или 1: 1000 козьих антимышиных IgG2b -HRP (AbD Serotec) или 1: 1000 козлиных антимышиных IgG3-HRP (AbD Serotec) в буфере для анализа.Планшеты промывали, добавляли 100 мкл 3,3 ‘, 5,5’-тетраметилбензидина (TMB; Perbio Science) и инкубировали в течение 10 мин при комнатной температуре. Реакцию останавливали с помощью 100 мкл 10% серной кислоты (Merck) и измеряли оптическую плотность при 450 нм на считывающем устройстве для микропланшетов (BioRad). Результаты рассчитывались относительно контрольной сыворотки и выражались в AU. Предел обнаружения: 0,15 AU для IgG и IgM, 2,5 AU для IgG1, 0,6 AU для IgG2a, 0,15 AU для IgG2b и 0,3 AU для IgG3.

Статистический анализ

Расчет мощности показал, что размер группы не менее 13 животных позволяет выявить значимые различия в оценке диареи (обнаруживаемая разница в оценке диареи = 20%, ожидаемое CV = 15%, α = 0.05, β = 0,20). Все статистические анализы были выполнены с использованием пакета статистических программ GraphPad Prism, версия 4.03. При сравнении двух групп использовался двухвыборочный t-критерий. Значения P менее 0,05 считались значимыми.

RotaTeq (Ротавирусная вакцина) Вопросы и ответы

Что такое RotaTeq?
RotaTeq — вакцина, производимая Merck and Co.Inc., (Merck) лицензирована FDA в 2006 году для профилактики ротавирусного гастроэнтерита у младенцев в возрасте от 6 до 32 недель.

Что такое ротавирус и как часто он встречается?
Заражение ротавирусом — основная причина тяжелой диареи у младенцев и детей младшего возраста в Соединенных Штатах и ​​во всем мире. В Соединенных Штатах заболевание чаще возникает зимой, причем наибольшая активность приходится на период с ноября по май. Большинство детей, будь то в США или где-либо еще, заражаются ротавирусом в возрасте до двух лет.

Иногда диарея и рвота из-за ротавирусной инфекции могут приводить к потере жидкости организма (обезвоживанию), которая в некоторых случаях может быть достаточно серьезной, чтобы потребовать госпитализации. До внедрения ротавирусной вакцины в Соединенных Штатах ротавирус приводил к примерно 55 000–70 000 госпитализаций и 20–40 детской смертности ежегодно. Однако в развивающихся странах ротавирусный гастроэнтерит является основной причиной детской смертности и, по оценкам, вызывает несколько сотен тысяч смертей ежегодно.
После того, как младенец подвергся воздействию ротавируса, симптомы проявляются примерно через 2 дня. У младенцев и детей развивается рвота и водянистая диарея, которые могут длиться 3-8 дней, часто возникают лихорадка и боли в животе. Ребенок может болеть ротавирусным гастроэнтеритом более одного раза, потому что существует много разных типов ротавирусов, но повторные инфекции, как правило, менее серьезны, чем первоначальная инфекция.

Как лечится ротавирусный гастроэнтерит?
Лечение ротавирусной инфекции в основном заключается в питье жидкостей, содержащих воду с солями и некоторыми минералами (пероральная регидратация).Такое лечение обычно бывает эффективным; однако в тяжелых случаях может потребоваться посещение отделения неотложной помощи или госпитализация, чтобы можно было заменить потерянные жидкости организма жидкостями, вводимыми через тонкую трубку, введенную в вены (внутривенная или внутривенная линия).

Как распространяется ротавирус?
Ротавирус заразен, и инфекция обычно передается от человека к человеку фекально-оральным путем. Фекально-оральная передача происходит, когда бактерии или вирусы, обнаруженные в стуле одного ребенка, проглатываются другим ребенком.Это может произойти, когда небольшое количество фекалий может быть обнаружено на таких поверхностях, как игрушки, книги, одежда и т. Д., А также на руках родителей или воспитателей; но обычно невидимы. Ротавирус также может передаваться через прием воды или пищи, загрязненных фекалиями, или через респираторные капли, которые люди чихают, кашляют, капают или выдыхают. Показатели заболеваемости среди детей в развитых и менее развитых странах схожи.

Как выдается RotaTeq?
Вакцина представляет собой жидкость, вводимую внутрь, первая доза вводится в возрасте 6–12 недель, а две дополнительные дозы вводятся с интервалами от 4 до 10 недель.Все три дозы следует завершить до достижения ребенком 32-недельного возраста. RotaTeq можно назначать недоношенным детям в зависимости от их возраста в неделях с момента рождения.

Можно ли вакцинировать детей младшего возраста или более старшего возраста с помощью RotaTeq?
Нет, вакцину следует вводить младенцам с первой дозой в возрасте 6–12 недель с последующими дозами, вводимыми с интервалами от 4 до 10 недель. Третью дозу нельзя давать после 32-недельного возраста.

Насколько эффективно RotaTeq предотвращает ротавирусный гастроэнтерит?
В целом, около 72 000 здоровых младенцев во всем мире были изучены в рандомизированных плацебо-контролируемых исследованиях, чтобы оценить безопасность RotaTeq и эффективность его действия.Данные, показывающие, насколько хорошо RotaTeq предотвращает ротавирусный гастроэнтерит, получены от почти 7000 этих младенцев из США и Финляндии. В этих исследованиях RotaTeq предотвратил 74% всех случаев ротавирусного гастроэнтерита и 98% тяжелых случаев.

Кроме того, RotaTeq снизила потребность в госпитализации по поводу гастроэнтерита, вызванного ротавирусом, на 96%.

Возможны ли побочные эффекты, связанные с использованием RotaTeq?
Во время клинических испытаний частота серьезных нежелательных явлений была аналогичной у младенцев, получавших RotaTeq, по сравнению с младенцами, не получавшими вакцину.
Следующие случаи чаще наблюдались у младенцев, получавших RotaTeq, по сравнению с теми, кто получал плацебо; диарея (24,1% у получателей RotaTeq против 21,3% у тех, кто получал плацебо), рвота (15,2% у получателей RotaTeq против 13,6% у тех, кто получал плацебо), ушная инфекция (14,5% у получателей RotaTeq против 13,0% у тех, кто получал плацебо), насморк нос и боль в горле (6,9% у получателей RotaTeq против 5,8% у тех, кто получал плацебо), хрипы и кашель (1,1% у получателей RotaTeq против 0.7% в группе плацебо).

Другая вакцина для предотвращения ротавирусной инфекции была добровольно снята с рынка производителем в 1999 году из-за случаев инвагинации, связанной с введением этой конкретной вакцины. Оценивался ли риск инвагинации с помощью RotaTeq?

Инвагинация — это редкая закупорка кишечника, возникающая, когда одна часть кишечника выдвигается в соседнюю часть.

До получения лицензии на RotaTeq было проведено большое исследование более 70 000 младенцев, специально разработанное для оценки риска инвагинации, аналогичного тому, которое было обнаружено для предыдущей ротавирусной вакцины.Результаты этого исследования не показали повышенного риска инвагинации для RotaTeq по сравнению с младенцами, получавшими плацебо. Для дальнейшего наблюдения за RotaTeq на предмет вероятности того, что он может быть связан с увеличением частоты инвагинации или других серьезных побочных эффектов, Merck провела еще одно исследование с участием более 85000 младенцев после получения лицензии. Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC) также провели большое исследование в рамках своей Программы данных по безопасности вакцин (VSD), в ходе которого оценивалась безопасность более 786 000 доз RotaTeq (309 000 первых доз).Вакцинация RotaTeq не была связана с повышенным риском инвагинации в ходе предварительного лицензирования исследования, исследования после выдачи лицензии, проведенного Merck, или исследования VSD после выдачи лицензии. Тем не менее, несколько исследований, проведенных в других странах после одобрения, показали потенциальный повышенный риск инвагинации кишечника после применения как вакцины RotaTeq, так и другой ротавирусной вакцины, Rotarix. Rotarix, производимый GlaxoSmithKline Biologicals, получил лицензию FDA в 2008 году.

Таким образом, в 2010 году FDA запустило исследование в рамках программы быстрого мониторинга безопасности иммунизации (PRISM) Mini-Sentinel Postlicensure Rapid Immunization Safety Monitoring (PRISM) для оценки потенциального риска инвагинации кишечника среди U.S. младенцы после вакцинации против ротавирусной инфекции. В исследовании PRISM повышенный риск инвагинации наблюдался в течение 21 дня после первой дозы RotaTeq, при этом большинство случаев происходило в первые 7 дней. Основываясь на этих результатах, примерно от 1 до 1,5 дополнительных случаев инвагинации происходит на 100 000 вакцинированных младенцев в США в течение 21 дня после первой дозы RotaTeq.

Что происходит при инвагинации кишечника?

Инвагинация чаще всего возникает в месте соединения тонкой кишки с толстой.Поскольку две стенки кишечника прижимаются друг к другу, это вызывает воспаление, отек и, в конечном итоге, снижение кровотока. Если это не обнаружено на ранней стадии, может возникнуть внутреннее кровотечение, отверстие в кишечнике и инфекция в брюшной полости, потому что ткань кишечника погибла из-за снижения кровотока. При своевременном обнаружении и лечении почти все пациенты полностью выздоравливают. Инвагинация может возникать спонтанно при отсутствии вакцинации и может возникать у людей любого возраста, но обычно возникает в возрасте от 5 до 9 месяцев.В США он встречается примерно у 34 из 100 000 младенцев в год.

Что FDA хочет, чтобы медицинские работники, родители и лица, осуществляющие уход, имели в виду при применении RotaTeq?

FDA считает, что преимущества вакцинации RotaTeq по-прежнему перевешивают риски, связанные с вакцинацией, включая риск инвагинации. FDA рекомендует родителям внимательно следить за своими младенцами на предмет признаков инвагинации, особенно в течение первых 7 дней после вакцинации RotaTeq или Rotarix.Эти симптомы включают боль в животе, рвоту, диарею, кровь в стуле или изменение дефекации. Важно связаться с лечащим врачом ребенка, если у ребенка появятся какие-либо из этих признаков в любое время после вакцинации, даже если с момента последней дозы вакцины прошло несколько недель.

Кого нельзя вакцинировать с помощью RotaTeq?

Младенцы с любым из следующих признаков не должны проходить иммунизацию с помощью RotaTeq:

  • аллергия на любой из ингредиентов RotaTeq
  • аллергическая реакция после приема предыдущей дозы RotaTeq
  • Тяжелый комбинированный иммунодефицит
  • инвагинация в анамнезе

Существуют ли определенные заболевания или состояния, которые следует обсудить с врачом перед введением RotaTeq?

Родители должны сообщить лечащему врачу своего ребенка обо всех следующих причинах, по которым их ребенок может не получать RotaTeq:

  • известное или предполагаемое ослабление иммунной системы, вызванное лечением, которое они принимают, например облучением или классом лекарств, называемых кортикостероидами, или такими состояниями, как ВИЧ, рак, заболевания крови (например,g., лейкоз) и трансплантат почки или другого органа (дополнительную информацию см. в утвержденной маркировке)
  • младенцев, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, если не установлено, что младенец не инфицирован ВИЧ
  • температура выше или равна 100,5 ° F (38,1 ° C)
  • перенесенная ротавирусная инфекция в анамнезе
  • активное, краткосрочное заболевание желудочно-кишечного тракта
  • повторяющиеся желудочно-кишечные проблемы, такие как частая диарея и нарушение нормального развития
  • Заболевания желудка или брюшной полости в анамнезе с рождения
  • абдоминальная хирургия в анамнезе
  • получение переливания крови или продуктов крови, включая иммуноглобулины, в течение 42 дней
  • проживает в семье с людьми, чья иммунная система ослаблена и поэтому также не может бороться с инфекциями

Каждый раз перед тем, как младенец получит дозу RotaTeq, родители должны обсудить со своим лечащим врачом любые проблемы со здоровьем, которые могут быть у их младенца, и любые лекарства, которые их младенец в настоящее время принимает или которые были прописаны.

Можно ли вводить RotaTeq с другими вакцинами?

При предварительном лицензировании RotaTeq вводили с дифтерийным и столбнячным токсоидами и бесклеточной коклюшной вакциной (DTaP), инактивированной полиовирусной вакциной (IPV), конъюгированной вакциной против гемофильной палочки типа b (Hib), вакциной против гепатита B и пневмококковым конъюгатом. Не было доказательств снижения ответа антител на вакцины, которые вводили одновременно с RotaTeq.

Как я могу сообщить в FDA о серьезных побочных эффектах RotaTeq или других вакцин?

О побочных реакциях и других проблемах, связанных с вакцинами, следует сообщать в Систему сообщений о побочных эффектах вакцин, которая поддерживается FDA и CDC.Чтобы получить копию формы отчета о вакцинах, позвоните по телефону 1-800-822-7967 или сообщите о ней по телефону http://www.vaers.hhs.gov

. .

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.