Гемолиз в сыворотке крови: Гемолиз, хилез и иктеричность. Зачем пересдавать анализ крови

Содержание

Гемолиз, хилез и иктеричность. Зачем пересдавать анализ крови

Почему не получился анализ и нужен повторный забор крови?

Ваш питомец чувствует себя не хорошо, и вы пошли с ним на прием к ветеринарному врачу. У питомца взяли кровь на исследование. Однако, из лаборатории пришел запрос на повторный забор материала (крови) по причине гемолиза или хилеза. Давайте кратко попробуем разобраться, зачем так необходим повторный забор крови.

Кровь животных имеет красный цвет, так как в ней циркулирует большое количество красных клеток крови – эритроцитов. Клетки не вечны и завершает жизненный цикл эритроцитов физиологический гемолиз. В результате освобождается гемоглобин, который в последующем идет на синтез новых эритроцитов.


1 — норма и иктеричность; 2 — норма и хилез; 3 — норма и гемолиз

Что такое гемолиз?

При определенных патологиях (болезнях) происходит патологический гемолиз. То есть клетки разрушаются гораздо быстрее, чем нужно. Такие процессы происходят при инфекционных заболеваниях, отравлениях растительными или синтетическими ядами, гемолитических анемиях, аутоиммунных заболеваниях, после переливания неподходящей донорской крови. Крайне редко гемолиз может возникать по причине нарушения преаналитического этапа забора крови.

Отличительным признаком гемолиза является прозрачная сыворотка красного цвета после центрифугирования крови. Эта окраска сыворотки ведет к искажению истинных значений биохимических показателей. Поэтому лаборант просит повторить отбор материала. Чтобы удостоверится в истинном патологическом гемолизе у животного.

Что такое хилез/липемия?

Такую пометку делают на бланках результатов

Хилез – это физическое помутнение сыворотки из-за присутствия большого количества жиров (триглицеридов и хиломикронов).

С такой ситуацией можно столкнутся, если кровь взяли у животного после кормления, либо питомец принимает курс специфичных лекарственных препаратов. Во всех других случаях стойкий хилез указывает на нарушение обмена веществ у питомца, в том числе возможны эндокринологические проблемы.

Что такое иктеричность?

Так же в бланках результатов анализов можно встретить в комментариях термин «иктеричность».

Этот термин обозначает окраску сыворотки или плазмы крови от ярко желтого до оранжевого цвета. Такое изменение характерно для тяжелых болезней животных и не требует повторного взятия крови.

Лаборатория стремится сделать анализы максимально качественно, чтобы лечащий ветеринарный врач смог быстро и качественно помочь вашим питомцам! Вышеописанные патологии зачастую не дадут корректного результата. Именно поэтому приходит просьба о повторном заборе крови.

Здоровья вам и вашим питомцам!
Отделение хирургии МВЦ «ПиК»

Процент проб сыворотки крови с гемолизом у разных групп пациентов Текст научной статьи по специальности «Науки о здоровье»

33. Niesor F.J., Magg C., Ogawa N. et al. Modulating cholesteryl ester transfer protein activity maintains efficient pre-betta-HDL formation and increases reverse cholesterol transport. J. Lipid. Res. 2010; 51(12): 3443-54.

34. Crook M.A. A place for assaying serum apolipoprotein AI and B? Ann. Clin. Biochem. 2011; 48(5): 485-6.

35. Titov V.N. The high content of palmitic fatty acids in the diet — the main reason for the increase of LDL cholesterol and artery intima atheromatosis. Ateroskleroz i dislipidemii. 2012; 3: 48-57. (in Russian)

36. Hopkins P.N. Molecular biology of atherosclerosis. Physiol. Rev. 2013; 93(3): 1317-42.

37. Dmitriev L.F., Titov V.N. Lipid peroxidation in relation to ageing and the role of endogenous aldehydes in diabetes and other age-related diseases. Ag. Res. Rev. 2010; 9(2): 200-10.

38. Goldberg I.J., Bornfeldt K.E. Lipids and the endothelium: bidirec-

tional interactions. Curr. Atheroscler. Rep. 2013:15(11): 365-71.

39. Welty F.K. How do elevated triglycerides and low HDL-cholesterol affect inflammation and atherothrombosis? Curr. Cardiol. Rep. 2013; 15(9): 400-12.

40. Saito H., Dhanasekaran P., Nguyen D. et al. Domain structure and lipid interaction in human apolipoproteins A-I and E, a general model. J. Biol. Chem. 2003; 278: 23227-32.

41. Watanabe S., Tsuneyama K. Eicosapentaenoic acid attenuates hepatic accumulation of cholesterol esters but aggravates liver injury and inflammation in mice fed a cholate-supplemented high-fat diet. J. Toxicol. Sci. 2013; 38(3): 379-90.

42.

Zhao C., Dahlman-Wright K. Liver X receptor in cholesterol metabolism. J. Endocrinol. 2010; 204: 233-40.

Received 26.06.14

© МОшКИН А.в., 2015 УДК 616.15-097.35-073.27

Мошкин А.в.

ПРОЦЕНТ ПРОБ СЫВОРОТКИ КРОВИ С ГЕМОЛИЗОМ У РАЗНЫХ ГРУПП ПАЦИЕНТОВ

ФГБНУ НИИ нейрохирургии им. акад. Н.Н.Бурденко, РФ, 125047, г. Москва

Большинство ошибок в процессе лабораторного исследования происходит на преаналитическом этапе. Процент проб сыворотки крови с гемолизом широко используется как индикатор качества взятия и доставки проб крови в лабораторию. Цель работы — проанализировать долю проб с гемолизом в разных группах стационарных и амбулаторных пациентов. Доля проб с гемолизом была рассчитана в соответствии с последней рекомендацией рабочей группы IFCC «Laboratory Errors and Patient Safety» как процент проб со свободным гемоглобином более 0,5 г/л от общего количества проб сыворотки, которые исследовались на биохимическом анализаторе, способном измерять индекс гемолиза.

Из 14170 образцов сыворотки крови в 199 (1,40%) был обнаружен гемолиз. Обнаружен большой разброс результатов у разных групп пациентов. У детей до 7 лет, проходивших лечение в стационаре, доля гемолиза составила 2,44%%, у больных отделения реанимации — 2,38%. У взрослых больных клиники этот индикатор качества колебался от 0,31 до 1,59%. В двух группах амбулаторных пациентов этот показатель был 0,36% (сотрудники клиники, диспансеризация) и 1,81% (амбулаторные больные). Такой разброс затрудняет межлабораторное сравнение качества по этому индикатору. Необходимо продолжать усилия по гармонизации индикаторов качества в лабораторной медицине.

Ключевые слова: преаналитическая фаза; индикаторы качества; гемолиз.

Для цитирования: Клиническая лабораторная диагностика. 2015; 60(6): 14-17.

Moshkin A.V.

THE PERCENTAGE OF BLOOD SERUM TESTS WITH HEMOLYSIS IN DIFFERENT GROUPS OF PATIENTS The N. N. Burdenko research institute of neurosurgery, Moscow, Russia

In the process of laboratory analysis most of the errors occur at the pre-analytical .stage. The percentage of blood .serum tests with hemolysis is largely applied as an indicator of quality of sampling and transport of blood tests in laboratory. The study was carried out to analyze percentage of tests with hemolysis in different groups of in- and out-patients. The percentage of tests with hemolysis was estimated according actual recommendation of IFCC working group «Laboratory Errors and Patient Safety» as percentage of tests with free hemoglobin more than 0.5 g/l of total amount ofserum tests analyzed on biochemical analyzer capable to measure hemolysis index. The hemolysis was identified in 199 (1.4%) out of 14 170 samples. The large dispersion of results in different groups of patient was established. In children younger than 7 years treated in hospital percentage of hemolysis amounted to 2.

44%, in patients of reanimation department — 2.38%. In adult patients of hospital this indicator of quality rangedfrom 0.31% to 1.59%. In two groups of out-patients this indicator amounted to 0.36% (clinic personnel, dispensarization) and 1.81% (outpatients). Such a dispersion complicates inter-laboratory comparison of quality according this particular indicator. The necessity is substantiated to apply more efforts concerning harmonization of indicators of quality in laboratory medicine.

Keywords: pre-analytical stage; indicators of quality; hemolysis

Citation: KlinicheskaiaLaboratornaiaDiagnostika. 2015; 60 (6): 14-17.

Введение. В середине 2014 г. рабочая группа IFCC «Laboratory Errors and Patient Safety» (WG-LEPS) опубликовала статью, посвященную гармонизации индикаторов каче-

Для корреспонденции: Мошкин Алексей Владимирович, [email protected] ru

For correspondence: MoshkinA.V., [email protected]

ства в лабораторной медицине, в которой значительно расширен их список, а главное для большинства индикаторов даны более или менее четкие определения [1]. Но даже дополненные рекомендации WG-LEPS сняли только часть вопросов по практическому применению индикаторов качества в лабораторной медицине.

Процент проб сыворотки крови с гемолизом широко используют как индикатор качества взятия и доставки проб кро-

ви в лабораторию (внелабораторная часть преаналитического этапа). Но все равно остается непонятным, имеет ли смысл рассчитывать этот индикатор по лаборатории в целом? Можно ли при межлабораторном сравнении пользоваться общими критериями для оценки качества по этому индикатору [2]?

В статье сделана попытка ответить на эти вопросы и сопоставить данные последних исследований.

Материалы и методы. Для взятия крови использовались иглы двух производителей: игла двусторонняя Vacuette® 21Gx1 1/2″(0,8х38 мм, зеленая, Greiner Bio One, Австрия, кат. № 450076) и иглы с прозрачной камерой Vacutainer® Flashback (BD, США, 0,-7х25 мм, кат. № 301747 и 0,8х25 мм, кат. № 301746). Для взятия крови у детей и взрослых пациентов с тонкими венами преимущественно пользовались иглой-бабочкой Vacuette® SAFETY 23Gx3/4″ с луэр-адаптером (Greiner Bio one, Австрия, кат. № 450084).

После взятия крови в пробирки Vacuette® с активатором свертывания и разделительным гелем (Greiner Bio one, Австрия, кат. № 454071) и центрифугирования (10 мин, 1650 g) эти же пробирки использовали для проведения исследований на биохимическом анализаторе VITROS 5.1FS (Ortho-Clinical Diagnostics, США). Технология Microsensor®, реализованная в этом анализаторе, позволяет измерять индекс гемолиза (HI) в каждой пробе сыворотки крови [3]. Согласно определению WG-LEPS [1], если биохимический анализатор позволяет измерять HI, для расчета процента проб с гемолизом следует брать пробы с HI > 50, что соответствует концентрации свободного гемоглобина в сыворотке крови более 0,5 г/л.

В работе использованы результаты измерения HI в 14 170 пробах сыворотки крови (6647 мужчин в возрасте от 2 мес до 86 лет и 7523 женщины в возрасте от 1 мес до 95 лет). Основную массу наблюдений составили пациенты клинических отделений стационара, отдельные группы составили взрослые амбулаторные пациенты и сотрудники клиники (см. таблицу).

Результаты и обсуждение. Из 14 170 проб сыворотки крови, использованных для проведения исследований на биохимическом анализаторе, в 918 (465 женщин и 453 мужчины) концентрация свободного гемоглобина в сыворотке крови была от 0,15 до 3,39 г/л, что составило 6,48% от общего числа проб.

Минимальный гемолиз (диапазон концентрации свободного гемоглобина от 0,15 до 0,5 г/л) обнаружен в 719 пробах (363 женщины и 356 мужчин). Разброс доли минимального гемолиза у разных групп пациентов нашей клиники большой — от 9,81% у пациентов двух детских отделений стационара до 1,97% проб сыворотки крови, взятой у сотрудников клиники в основном при прохождении диспансеризации. В199 (1,40%) пробах примерно в равной мере у мужчин и женщин (97 против 102) концентрация свободного гемоглобина была более 0,5 г/л.

В предыдущей публикации обсуждалось возможное использование частоты минимального гемолиза как индикатора качества взятия и доставки проб в лабораторию [4]. В данной статье хотелось обсудить возможные причины разброса индикатора, рекомендованного WG-LEPS [1], у разных групп пациентов нашей клиники.

По опубликованным данным, в большинстве лабораторий доля проб сыворотки крови с гемолизом составляет около 1% [5-8]. Наши результаты показывают, что процент проб с гемолизом в лаборатории в целом без анализа его частоты у разных групп пациентов скорее сродни известной притче о средней температуре по больнице. Так, в нашей клинике доля проб с гемолизом по лаборатории в целом составила 1,40%, тогда как у пациентов двух детских отделений и у пациентов отделения реанимации она была чуть ли не вдвое выше (см. таблицу). Очевидно, для оценки качества взятия крови в отделениях реанимации и интенсивной терапии нельзя опираться на уровень индикатора, установленный по лаборатории в целом. При сопоставлении этого показателя в разных ЛПУ для таких отделений стационаров надо создавать отдельную

Годы

Процент проб с гемолизом (> 0,5 г/л) у пациентов разных возрастных групп.

группу сравнения и использовать иные критерии для оценки качества. Это, по-видимому, касается детских ЛПУ и детских клинических отделений.

Исключив больных, находящихся на лечении в отделении реанимации, в оставшейся группе провели анализ процента проб с гемолизом у пациентов разных возрастных групп и получили труднообъяснимый результат. Гемолиз у детей младше трех лет в нашем исследовании встречался реже, чем у детей следующей возрастной группы (см. рисунок). У пациентов старше 7 лет в условиях нашей клиники частота гемолиза становится сопоставимой с таковой у пациентов других возрастных групп.

Используя известный алгоритм [2, 4] легко установить целевой индикатор качества взятия крови в условиях нашей клиники. Медиана процента проб с гемолизом составила 1,00% (приемлемый уровень качества), соответственно оптимальный уровень качества по этому индикатору будет 0,80%. Обращает на себя внимание шестикратный разброс доли проб с гемолизом у взрослых пациентов клиники (см. таблицу). В наших условиях этот индикатор в основном связан с качеством работы конкретной процедурной сестры конкретного клинического отделения. Маршрут доставки проб крови в нашей клинике прост и мало отличается по протяженности для всех групп пациентов. Разумно принять рассчитанный оптимальный уровень качества (0,80%) как целевое значение. Остается малое — провести мероприятия по улучшению

Процент гемолиза у разных групп пациентов

Группа пациентов Число проб Доля проб с гемолизом > 0,5 г/л,%

Детские отделения 1601 2,44

Отделение реанимации 2399 2,38

Амбулаторные пациенты 554 1,81

7-е отделение 958 1,59

9-е отделение 1133 1,57

8-е отделение 1545 1,23

6-е отделение 845 1,18

3-е отделение 1093 0,82

5-е отделение 852 0,82

10-е отделение 990 0,71

Сотрудники 1115 0,36

4-е отделение 953 0,31

качества взятия крови и зафиксировать смещение процента проб с гемолизом в неблагополучных клинических отделениях к целевому значению индикатора.

В недавно опубликованном исследовании показано, что в крупной лаборатории в ответ на регулярные мероприятия по улучшению качества этот показатель снизился в целом по лаборатории с 1,69% в 2009 г до 1,04% в 2013 г [7]. Данные Е.В. Тивановой [9] также подтверждают возможность использовать процент проб с гемолизом в качестве инструмента для мониторинга и управления преаналитическим качеством на внелабораторном этапе и прежде всего процессом взятия крови из вены. Автор этой публикации отметил, что после дополнительного обучения персонала в неблагополучных по этому индикатору ЛПУ доля проб с уровнем свободного гемоглобина более 0,5 г/л по лаборатории в целом снизилась с 2,73 до 2,19%, одновременно увеличилось число ЛПУ, входящих в зону оптимального и приемлемого качества по этому индикатору. Здесь же показано отсутствие зависимости этого индикатора от удаленности контрагента от основной лаборатории [9], хотя в другом исследовании найдена связь между продолжительностью транспортировки проб и частотой гемолиза [6].

Данные, приведенные в публикации О.И.Леонтьевой [5], также подтверждают чувствительность этого индикатора. Даже при визуальной оценке доля гемолиза в пробах, взятых собственным персоналом (0,7%), была примерно в 6 раз ниже, чем в пробах, доставленных в лабораторию диагностического центра из других ЛПУ (4,5%). Сходные результаты получили О.А. Клименкова и соавт. [10]. В их работе у детей процент образцов из собственного процедурного кабинета с HI > 50 (гемолиз > 0,5 г/л), измеренном на биохимическом анализаторе, был намного ниже (0,4%), чем в пробах, доставленных из большинства ЛПУ-контрагентов (1,9-12,6%). Но авторы не указали возраст пациентов и не провели сравнение HI у детей разного возраста.

Очевидно, основной источник гемолиза — процедура взятия крови из вены. Разумеется, нельзя забывать и о других факторах, которые могут влиять на частоту гемолиза, в частности, качество используемых систем для взятия венозной крови. К сожалению, не во всех публикациях авторы указывают, какие именно системы, с иглой какого диаметра используются в ЛПУ [7-10]. И это несмотря на то что в общих рекомендациях хорошей практики взятия крови из вены [11], к ним предъявляются определенные требования: диаметр иглы для венепункции должен быть не меньше 23G; использование пробирки с разделительным гелем, по возможности меньшего объема (3 или 5 мл).

В заключение обратим внимание на еще одно интересное наблюдение. В отличие от пациентов клинических отделений стационара кровь у амбулаторных пациентов и у сотрудников нашей клиники берут разные медицинские сестры в разных процедурных кабинетах. Чем объяснить пятикратную разницу в частоте гемолиза между сотрудниками клиники (0,36%) и амбулаторными пациентами (1,81%), как не максимально тщательным проведением взятия крови процедурными сестрами у своих коллег? Можно ли достичь такого уровня качества взятия крови для пациентов? Вероятно, можно, учитывая, что процедурная сестра одного из клинических отделений уже работает на высоком уровне качества по этому индикатору -0,31% проб сыворотки крови с гемолизом (см. таблицу).

Выводы. 1. Процент проб с гемолизом прежде всего зависит от проведения взятия крови из вены в ЛПУ или лаборатории и служит индикатором качества этой важной составляющей внелабораторной части преаналитической стадии лабораторного исследования.

2. Процент проб с гемолизом — чувствительный индикатор качества работы конкретного процедурного кабинета (процедурной сестры) и, возможно, качества и длительности доставки проб крови из конкретного кабинета (пункта взятия, ЛПУ) в лабораторию, где будет проведено исследование.

3. Необходимы дальнейшие усилия по гармонизации измерения этого индикатора и подходов к оценке качества. В

частности, при межлабораторном сопоставлении процент гемолиза по лаборатории в целом без выделения отдельных групп сравнения (отделения реанимации и интенсивной терапии, собственный процедурный кабинет и ЛПУ-контрагенты, дети до 7 лет и пациенты старшего возраста) скорее всего даст весьма грубую оценку качества взятия и доставки проб.

4. При проведении мониторинга и оценки мероприятий по улучшению качества лучше использовать собственные целевые значения процента проб с гемолизом. К данным других публикаций пока следует относиться как к сугубо ориентировочным.

ЛИТЕРАТУРА

1. Plebani M., Astion M.L., Barth J.H., Chen W., de Oliveira Galoro C.A., Escuer M.I. et al. Harmonization of Quality Indicators in Laboratory Medicine. A Preliminary Consensus. Clin. Chem. Lab. Med. 2014; 52 (7): 951-8.

2. Sciacovelli L., O’Kane M., Skaik Y.A., Caciagli P., Pellegrini C., Da Rin G. et al. Quality Indicators in Laboratory Medicine: from theory to practice. Preliminary data from the IFCC Working Group Project Laboratory Errors and Patient Safety. Clin. Chem. Lab. Med. 2011; 49 (5): 835-44.

3. Мошкин А.В. Оценка степени гемолиза на биохимическом анализаторе VITROS 5.1FS — возможный индикатор качества взятия и транспортировки проб крови. Лаборатория. 2011; 3: 18-9.

4. Мошкин А.В. Индекс гемолиза как индикатор внелабораторной части преаналитического этапа лабораторного исследования. Клиническая лабораторная диагностика. 2012; 11: 63-4.

5. Леонтьева О.И., Мирошниченко И.А., Мошкин А.В., Свещин-ский М.Л., Скороходова Т. Г., Стериополо Н.А. и др. Первый опыт оценки качества управления лабораторными процессами. Лаборатория. 2014; 5: 26-8.

6. Lippi G., Chance J. J., Church S., Dazzi P., Fontana R., Giavarina D. at al. Preanalytical quality improvement: from dream to reality. Clin. Chem. Lab. Med. 2011; 49 (7): 1118-9.

7. Sciacovelli L., Aita1 A., Padoan A., M. Plebani. Quality Indicators in Laboratory Medicine: The Experience of a Large Laboratory. Clin. Chem. Lab. Med. 2014; 52, Special Suppl., S166.

8. Zaine S., Ong L., Saw S., Sethi S. Impact of Pre-analytical Errors in a Diagnostic Laboratory. Clin. Chem. Lab. Med. 2014; 52, Special Suppl., S1137.

9. Тиванова Е.В. Как измерить преаналитическое качество: алгоритм оценки и мониторинга. Медицинский алфавит. Современная лаборатория. 2014; 2: 56-9.

10. Клименкова О.А, Желтякова О.В, Берестовская В.С, Гудимова И.В, Ларичева Е. С. Ошибки, которые совершать нельзя. К вопросу о преаналитическом качестве в педиатрической практике. Медицинский Алфавит. Современная лаборатория. 2013; 4: 16-21.

11. Lippi G., Cervellin G., Favaloro E.J., Plebani M. In Vitro and In Vivo Hemolysis. Berlin/Boston: De Gruyter; 2012, 70.

Поступила 30.12.14

REFERENCES

1. Plebani M., Astion M.L., Barth J.H., Chen W., de Oliveira Galoro C.A., Escuer M.I. et al. Harmonization of Quality Indicators in Laboratory Medicine. A Preliminary Consensus. Clin. Chem. Lab. Med 2014; 52 (7): 951-8.

2. Sciacovelli L., O’Kane M., Skaik Y.A., Caciagli P., Pellegrini C., Da Rin G. et al. Quality Indicators in Laboratory Medicine: from theory to practice. Preliminary data from the IFCC Working Group Project Laboratory Errors and Patient Safety. Clin. Chem. Lab. Med. 2011; 49 (5): 835-44.

3. Moshkin A.V. Hemolysis index on biochemical analyzer VITROS 5.1 FS as a possible indicator of quality blood sampling and transportation of samples to the laboratory. Laboratoriya. 2011; 3: 18-9. (in Russian)

4. Moshkin A.V. Hemolysis index as quality indicator for extra-laboratory part of preananlytical phase. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2012; 11: 63-4. (in Russian)

5. Leont’eva O.I., Miroshnitsenko I.A., Moshkin A.V., Sveschinsky M.L., Skorokhodova T.G., Steriopolo N.A. et al. The first experience

assessment of quality of laboratory management. Laboratoriya. 2014; 5: 26-8. (in Russian)

6. Lippi G., Chance J. J., Church S., Dazzi P., Fontana R., Giavarina D. at al. Preanalytical quality improvement: from dream to reality. Clin. Chem. Lab. Med. 2011; 49 (7): 1118-9.

7. Sciacovelli L., Aita1 A., Padoan A., M. Plebani. Quality Indicators in Laboratory Medicine: The Experience of a Large Laboratory. Clin. Chem. Lab. Med. 2014; 52, Special Suppl., S166.

8. Zaine S., Ong L., Saw S., Sethi S. Impact of Pre-analytical Errors in a Diagnostic Laboratory. Clin. Chem. Lab. Med. 2014; 52, Special Suppl., S1137.

9. Tivanova E.V. Preanalytical Quality: how to measure? Practical recommendation. Meditsinskiy alfavit. Sovremennaya laboratoriya. 2014; 2: 56-9. (in Russian)

10. Klimenkova O.A., Zheltyakova O.B., Berestovskaya V.S., Gudimova I.V., Laricheva E.S. Errors that cannot be done. The preanalytical quality in the pediatric practice. Meditsinskiy alfavit. Sovremennaya laboratoriya. 2013; 4: 16-21. (in Russian)

11. Lippi G., Cervellin G., Favaloro E.J., Plebani M. In Vitro and In Vivo Hemolysis. Berlin/Boston: De Gruyter; 2012, 70.

Received 30.12.14

© КОЛЛЕКТИв АвТОРОв, 2015

УДК 616.366-089.87-06-07:616.36-008.8

Леонтьев А.С.1,2 , Короткевич А.Г.2, Репникова Р.в.3, Мерзляков М.в.4, Сафронова ГА1, Архипова СБ.1, Фаев А.А.1

ВЫЯВЛЕНИЕ ИЗМЕНЕНИЙ В ОБЛАСТИ БОЛЬшОГО ДУОДЕНАЛЬНОГО СОСОЧКА И МИКРОХОЛЕЛИТИАЗА КАК МЕТОД ПРОФИЛАКТИКИ

постхолецистэктомического синдрома после миниинвазивной

ХОЛЕЦИСТэКТОМИИ

Муниципальное ЛПУ «Городская клиническая больница № 29», 654038, г. Новокузнецк, Россия; 2ГБОУ ДПО «Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», 654005, г. Новокузнецк, Россия; 3ГБОУ вПО «Кемеровская ГМА Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», 650056, г. Кемерово, Россия;4ГБУЗ «Кемеровская областная клиническая больница», 650066, г. Кемерово, Россия

В статье опубликованы результаты эндоскопических и лабораторных исследований желчи у 90 пациентов, перенесших миниинвазивную холецистэктомию. Выявлено существенное количество эндоскопически диагностируемых изменений в области большого дуоденального сосочка, что составило у 64,4% обследованных, а также наличие микрохолелитиаза и нерастворимых преципитатов в исследуемой желчи у 83,3% пациентов. Полученные данные свидетельствуют о необходимости выполнения предоперационной эндоскопической диагностики изменений в области большого дуоденального сосочка, а также и в послеоперационном периоде, дополняя это исследованием нативного препарата желчи.

Ключевые слова: миниинвазивная холецистэктомия; микрохолелитиаз; большой дуоденальный сосочек; папиллит; дисфункция сфинктера Одди.

Для цитирования: Клиническая лабораторная диагностика. 2015; 60(6): 17-20. LeontievA.S.12, KorotevichA.G.2, RepnikovaR.V.3, MerzliakovM.V.4, Safronova G.A.1, ArkhipovaS.V.1, FaievA.A.1 THE IDENTIFICATION OF ALTERATIONS IN THE AREA OF GREAT DUODENAL PAPILLA AND MICRO-CHOLELITHIASIS AS A TECHNIQUE OF PREVENTION OF POSTCHOLECYSTECTOMY SYNDROME AFTER MINI-INVASIVE CHOLECYSTECTOMY

1The municipal clinical hospital № 29, 654038 Novokuznetsk, Russia; 2The Novokuznetsk state institute of advanced training of physicians of the Federal agency of health care and social development, 654005 Novokuznetsk, Russia: 3The Kemerovo state medical academy of the Federal agency of health care and social development, 650056 Kemerovo, Russia: 4The Kemerovskaia oblast clinical hospital, 650066 Kemerovo,

The article presents the results of endoscopic and laboratory analyses of bile in 90 patients after mini-invasive cholecystectomy. The .significant amount of endoscopic diagnosed alterations in the area of major duodenal papilla that amounted to 64.4%% of examined patients and also occurrence of micro-cholelithiasis and insoluble precipitates in analyzed bile of 83.3% of patients. The derived data testifies necessity of application ofpre-operational endoscopic diagnostic of alterations in the area ofmajor duodenal papilla and in post-operative period as well completing it by analysis of native bile preparation.

Keywords:

citation: Klinicheskaia Laboratornaia Diagnostika. 2015; 60 (6): 17-20.

Введение. Желчно-каменная болезнь (ЖКБ) является одним из самых распространенных заболеваний органов пищеварительной системы на планете, им страдает в среднем 15% населения [1, 2]. Распространение ЖКБ подвержено тендерным различиям: количество заболевших женщин доходит до

Для корреспопдепции: Леонтьев Антон Сергеевич, [email protected]

For correspondence: LeontyevA.S., [email protected]

17%, а мужчин — до 8%. Ситуация примечательна тем, что часть пациентов находится в репродуктивном и трудоспособном возрасте [3], что в свою очередь представляет значимую социально-экономическую проблему. В Российской Федерации количество заболевших достигает 20% от всего населения, при этом известно, что 30% всех вызовов скорой медицинской помощи приходится на долю пациентов, имеющих ЖКБ. Неуклонно увеличивается и число пожилых пациентов с ЖКБ, которые составляют до 60% от всех пациентов стационарных отделений общей хирургии [4].

Гемолиз крови

Разрушение (растворение) красных кровяных телец с выходом гемоглобина в жидкую часть крови.[ …]

При доброкачественном течении и нервной форме изменения гематологических и биохимических показателей незначительны и с выздоровлением рыб восстанавливаются.[ …]

Пробу крови объемом 1 мл разбавляли дистиллированной водой до объема 5 мл, добавляли 0,1 мл 40%-ного раствора №ОН, и экстрагировали 5 мл гекса-на.[ …]

Действуют на печень.[ …]

К физиологическому раствору добавляли 1% крови крысы. Полученную суспензию эритроцитов инкубировали при комнатной температуре в течение 15—18 час. Дальнейшее исследование проводили методом изотонического щелочного гемолиза. В стандартных условиях эритроциты находились в щелочном растворе несколько часов, за это время в них диффундировал водный раствор, эритроциты набухали, достигали критических размеров и лопались. Этот момент четко фиксировался изменением оптической плотности водной системы.[ …]

Определение динитроортокрезола в сыворотке крови колориметрическим методом (И. Д. Гадаскина, В. А. Филов, 1971). Чувствительность метода 0,38 мкг вещества в 0,25 мл сыворотки. Следы гемолиза и наличие билирубина в сыворотке не влияют на результаты исследования. Цельная кровь и плазма дают худшие результаты, чем сыворотка.[ …]

Особого внимания требуют процедуры отбора проб крови. Образцы следует отбирать в емкости из химически стойкого стекла с соблюдением необходимых мер предосторожности; для предотвращения загрязнения тканевой жидкостью и гемолиза существенно, чтобы отбирались пробы только свободно вытекающей крови. На состав образца влияет и положение человека в ходе отбора пробы В положении “лежа” внеклеточная жидкость устремляется в кровеносные сосуды, разбавляя тем самым белки плазмы крови [90). При этом изменения концентраций определяемых компонентов могут достигать 20% и давать ошибочные представления. В большинстве случаев рекомендуется хранить пробы при +4 «С (для летучих соединений при -20 °С). При необходимости хранения проб длительное время возникает проблема их стабильности вследствие процессов коагуляции. Поскольку негомогенность, вызываемая коагуляцией, может быть серьезным источником ошибок, то к пробе крови следует немедленно после отбора добавлять определенное количество антикоагулянта. Естественно, что последний не должен содержать загрязняющих веществ. Надежным способом получения правильных результатов является лио-фильная сушка образцов.[ …]

Многочисленными опытами было доказано, что если смешать кровь животных разных видов, то наступает реакция агглютинации (склеивание) эритроцитов или их гемолиз (растворение). Диалогичные явления могут наблюдаться пли отсутствовать при смешении кровн животных одного вида, что объясняется совместимостью или несовместимостью их групп крови. Различия по группам крови зависят от наличия или отсутствия эритроцитар-ных антигенных, или, как их иначе называют, кровяных, факторов. Антигенные факторы располагаются па поверхности эритроцитов и представляют собой белковые соединения или соединения полисахаридов, обусловливающие образование антител. Каждый антиген имеет свое специфическое антитело, с которым он взаимодействует.[ …]

У погибающих рыб наблюдается сморщивание эритроцитов (в первом случае) или гемолиз их (во втором). Сопоставляя костистых рыб и селяхий, можно сказать, что первые обладают более совершенным физиологическим приспособлением переносить изменения осмотического давления крови, чем последние. Например, морской угорь долгое время живет после переноса его из морской воды в воду, содержащую только /ю морской воды. Причем депрессия крови-почти не меняется.[ …]

Будучи красителями, нитрофенолы придают желтушную окраску кожным покровам. Действуя на кровь, они приводят к гемолизу эритроцитов и метгемоглобинооб-разованию. Цианоз кожи и слизистых оболочек, вызываемый нитрофенолами, в сочетании с желтушной окраской придает бронзовую окраску коже рук, лица, особенно вокруг рта и носа, волосам (особенно у блондинов). Эта окраска, будучи обусловлена ксантопротеиновой реакцией, несмываема. Даже в неярко выраженных случаях отравления отмечается многократное увеличение содержания метгемоглобина в крови (вместо нормальных 3,%).[ …]

Общий характер действия на организм. Поражает нервную систему, желудочно-кишечный тракт, почки. Вызывает раздражение верхних дыхательных путей и кожи. Характерны изменения в крови: гемолиз эритроцитов, появление телец Гейнца, анемия. При воздействии паров или пыли вызывает помутнение хрусталика (катаракту).[ …]

Каждое показание соответствует количеству гемолизиро-вавшихея эритроцитов к моменту отсчета. Как показывают эксперименты, длительность гемолиза составляет 4,5—6 мин. для крови рыб и 10—20 мин. для крови млекопитающих.[ …]

Токсическое действие. Нитро- и аминосоединения ра механизму своего действия и картине вызываемых ими отравлений весьма сходны. При остром отравлении проявляется непосредственное влияние на центральную нервную систему и на кровь (гемолиз, метгемоглобинообразование). Ядовитость не возрастает параллельно увеличению числа введенных нитрогрупп. Поэтому ацетанилид С6Н5МНСОСНз, фенилгликоколь СбНбЫНСНгСООН и сульфаниловая кислота Н2НСбН45020Н не обладают токсическими свойствами других нитро- и аминосоединений бензольного ряда.[ …]

Картина хронического отравления и вызывающие его концентрации. Концентрации 2—5 мг/л при ежедневных 2-часовых опытах ведут в период пребывания животных в затравочной камере к раздражению слизистых оболочек и проявлениям наркотического действия. Температура тела стойко снижается. В крови уменьшается количество эритроцитов; наблюдается гемолиз. При отравлении 4—5 мг/л животные погибают в течение месяца. Концентрации 2 мг/л при той же ежедневной длительности воздействия в течение 80 дней и 0,05—0,08 мг/л в течение 5 месяцев гибели крыс не вызывали. Воздействие 1—2 мг/л паров в течение 3—6 месяцев вызывало, по данным Бирюкова, опухоли печени (?).[ …]

Из неспецифических гуморальных факторов защиты наиболее весомое место занимает система комплемента. Являясь важнейшим гуморальным гомеостатическим механизмом, система комплемента играет важную роль как при защите от инфекции, так и в патогенезе иммунных реакций [84-87]. Титр комплемента в сыворотке крови экспериментальных животных определяли методом 50%-го гемолиза в соответствии с методическими рекомендациями [88]. Измерение оптической плотности проводили на фотометре Titertek Multiscan (Flow Labor, Англия).[ …]

Сахарная свекла (Beta vulgaris ssp .rapacea var. altissima), спаржа (Asparagus officinalis), шпинат (Spinacia deracea) и красная свекла содержат сапонины — вещества, относящиеся к гликозидам (не содержащим азота) и обладающие ярко выраженной склонностью к ценообразованию в водных растворах. Обычно они мало сорбируются в кишечнике, но если последний воспален или сильно раздражен, например из-за чрезмерного приема слабительных средств, то сорбируемость сапонинов может значительно увеличиться. В результате гемоглобин выделяется вместе с мочой, могут также наблюдаться желтуха и нарушение кровообращения.[ …]

Влияние других попадающих в воду растворимых соединений как органических, так и неорганических, также довольно разнообразно. Правда, в большинстве случаев они, в первую очередь, воздействуют на ход газообмена. Поэтому, чем медленнее идет у рыбы процесс газообмена, тем медленнее сказываются токсические свойства того или иного растворенного в воде вещества. С понижением температуры, вызывающим замедление газообмена, действие токсических веществ, как правило, понижается. Другие вещества, как, например, фенолы, вызывают у рыб паралич нервно-мускульного аппарата и гемолиз крови. Амиловый спирт нарушает координацию движений у рыбы и также вызывает полупараличное состояние.[ …]

Отмеченные различия в работе кардиореспираторного аппарата у свободноплавающей и обездвиженной трески свидетельствуют не только о меньшей устойчивости стрессированных рыб к температурным нагрузкам. Вероятно, быстрый перепад температуры на 14°С действительно оказался экстремальным воздействием, хотя резервные возможности системы транспорта газов у рыб не были полностью исчерпаны. Возможно, выживание рыб в данных условиях лимитировал другой фактор. Так, для некоторых костистых рыб, в том числе для пузанковой сельди, была установлена зависимость массовой гибели рыб в естественных водоемах при быстром изменении температуры от повышенной концентрации калия, обусловленной гемолизом эритроцитов [602]. Гиперкалиемия выявлена при такой температуре, когда сердце продолжало нормально функционировать. Содержания К+ в крови было на 100% выше исходного после кратковременного нагревания воды до 30°С. Характерно, что перепад температуры от 16 до 26°С за 4 ч вызывал шок и гиперкалиемию у рыб, а медленное повышение температуры с 16 до 31°С за 5 сут не сопровождалось сдвигами электролитного равновесия [602]. Сублетальное нагревание воды вызывало у радужной форели снижение концентрации К+ в крови [602].[ …]

Определение свободного гемоглобина плазмы (гаптоглобин) в сыворотке крови в Санкт-Петербурге

Описание анализа

Гаптоглобин является одним из основных элементов, который связывает гемоглобин в крови. Его основная функция – предотвращение любых видов повреждений почечных канальцев и сохранение необходимого уровня железа в крови благодаря исключению экскреции гемоглобина.

Лабораторный анализ на концентрацию гаптоглобина позволяет обнаружить в организме острые воспалительные процессы, нефротические изменения, генетические отклонения, появление злокачественных опухолей или начинающийся некроз тканей – уровень белка может как снижаться, так и увеличиваться. Этот белок относится к острофазным элементам, но изменения его показателей не настолько закономерны, как у других белков. Исследование проводится с использованием сыворотки крови методом иммунотурбидиметрии.

 

Показания к проведению

Анализ применяется в случае:

  • контроля за процедурой переливания крови пациенту;

  • необходимости диагностики гемолитического состояния больного.

 

Факторы, влияющие на результаты анализа

Точность лабораторного анализа может быть нарушена из-за проведенного гемолиза, хилеза пробы, употребления андрогенов или кортикостероидов во время медикаментозной терапии.

 

Врач, назначающий исследование

Направление на анализ можно получить у неонатолога, педиатра, терапевта, онколога, гематолога, ревматолога.

Подготовка к анализу

Забор материала у пациента производится исключительно натощак, прием еды перед исследованием следует ограничить – ничего жареного, жирного, никакого алкоголя за 8 часов до процедуры. С утра при необходимости можно выпить воды. Прием лекарственных препаратов нежелателен на время забора крови, но в особых ситуациях следует в точности указать дозировку и количество употребляемых лекарств.

Нежелательно совмещать проведение анализа и другие диагностические процедуры – флюорографию, ректальный осмотр, физиотерапию, УЗИ-диагностику.

 

Интерпретация результатов

После получения на руки окончательных результатов лабораторных анализов обязательно проконсультируйтесь с профильным врачом. Не занимайтесь самодиагностикой, показатели могут немного отличаться в зависимости от использованного оборудования в лаборатории. Референсные значения нормального уровня гаптоглобина в крови:

  • для детей до 1 месяца 0,1-3,0 г/л;

  • 2 месяца-14 лет 0,2-3,0 г/л;

  • для взрослых 0,3-3,0 г/л.

 

Определение холестерина в сыворотке крови в Санкт-Петербурге

Описание анализа

Холестерин – обязательное вещество в организме человека. С его помощью синтезируются некоторые гормоны, витамин D, желчные кислоты. При превышении допустимых границ он начинает оседать на стенках сосудов, приводя к их сужению. Это способствует развитию многих сердечнососудистых заболеваний.

Биоматериалом для проведения тестирования является сыворотка крови (используется венозная кровь). Методом для определения результатов является колориметрический фотометрический тест. Исследование проводится в течение 1 дня (в расчет не принимается день забора).

 

 

Показания к проведению

  • Оценивается предрасположенность к возникновению ишемической болезни сердца.

  • Выявление липидного дисбаланса, оценка эффективности терапии.

  • Дисфункции, заболевания почек, печени.

  • Эндокринные нарушения.

 

Факторы, влияющие на результат исследования

Понижать или повышать результаты могут гемолиз, хилез пробы, проведение лекарственной терапии некоторыми типами препаратов.

 

Интерпретация результатов исследования

Референсные значения зависят от возраста пациента. Для детей до 14 лет они находятся в пределах 1,3-5,2 ммоль/л, для взрослых – 2,8-7,1 ммоль/л. Оценка, расшифровка результатов – обязанность, прерогатива лечащего врача. Он применяет эти данные в комплексе с другими исследованиями. Недопустимо самостоятельно начинать прием препаратов без назначений специалиста, основываясь только на тестировании.

 

Врач, назначающий исследование

При оценке состояния пациента тестирование могут назначать терапевты, кардиологи.

Интерпретация результатов

Референсные значения зависят от возраста пациента. Для детей до 14 лет они находятся в пределах 1,3-5,2 ммоль/л, для взрослых – 2,8-7,1 ммоль/л. Оценка, расшифровка результатов – обязанность, прерогатива лечащего врача. Он применяет эти данные в комплексе с другими исследованиями. Недопустимо самостоятельно начинать прием препаратов без назначений специалиста, основываясь только на тестировании.

Методический подход к интерпретации результатов биохимических исследований

Паспорт статьи:

Если врач получает результат, выходящий за пределы УДК 619: 616-076

Полное название: Методический подход к интерпретации результатов биохимических исследований

Автор: Е.Б. Бажибина, ветеринарная лабораторная служба «ВЕТТЕСТ» (Москва)

 Ключевые слова: биохимические анализаторы, биохимические показатели крови, коэффициенты пересчета.

Сокращения: АлАТ — аланинаминотрасфераза, АсАТ — аспартатаминотрансфераза, ГГТ — гамма-глутамилтрансфераза, КФКкреатинфосфокиназа, ЛДГлактатдегидрогеназа, СДГ — сорбидолдегидрогеназа, СИ — Система Интернациональная, ЩФ — щелочная фосфатаза

 Summary:

Methodical approach to interpreting of  the biochemical studies  results  

EB Bazhibina, veterinary laboratory service «VETTEST» (Moscow)

The article is devoted to the evaluation of the biochemical analysis results of blood serum, provided that the laboratories equipped with different hardware, using different methods, comparing the reference values ​​from different laboratories and units of measurement. 

С появлением на отечественном рынке автоматического оборудования биохимический анализ сыворотки крови мелких домашних животных прочно вошел в повседневную практику ветеринарного врача. Сегодня постановка диагноза и мониторинг животных с заболеваниями внутренних органов (острая/хроническая почечная недостаточность, гепатит, панкреатит; эндокринологические патологии, нарушения минерального обмена и многое другое) практически невозможны без биохимического исследования.

При условии проведения анализов в одной лаборатории и, что особенно важно, возможности получения консультации врача-лаборанта по интерпретации полученного результата и особенностям проведения исследования (влияние артефактов, включающих физиологическое состояние животного, забор материала, транспортировку и т.д.) практикующий врач, как правило, не испытывает затруднений,

В действительности же нам приходится иметь дело с пациентами, поступающими на прием с целым рядом исследований, проведенных в разных лабораториях, отличающихся по приводимым в бланках результата анализа референсным значениям, в зависимости от используемого оборудования, применяемых методик, контроля качества. В данной статье мы рассмотрим вопросы оценки практикующим врачом результатов анализов биохимического исследования сыворотки крови, с учетом проведения этих исследований в различных лабораториях, отличающихся используемым оборудованием, методиками и т.д. Насущным вопросом все также остается сравнение референсных значений* показателей крови, полученных из различных лабораторий и разные единицы измерения предоставляемых результатов.

Общие положения

По нашим наблюдениям, первое, на что обращают внимание врачи, оценивая результаты биохимического анализа, соответствуют ли показатели крови данным, полученным при клиническом исследовании пациента. Это неверный диагностический путь, поскольку выводы на основании такого сравнения полностью зависят от квалификации врача-клинициста. Необходимо придерживаться тактики комплексной постановки диагноза, согласно которой важно учитывать результаты широкого спектра исследований — клинического (осмотр, аускультация и т. д.), инструментального (ультразвукового, рентгенологического и т. д.), лабораторного (клинический и биохимический анализы крови, клинический анализ мочи), а также данных анамнеза.

Суммируя опыт коллег и свой собственный, можно сказать, что для оценки результатов биохимических исследований необходимо учитывать следующее:

  1. Референсные значения, принятые в лаборатории; единые коэффициенты пересчета (см. приложение).
  2. Физиологические данные пациента: возраст, пол, порода, стадия полового цикла, особенности поведения в момент забора крови и пр.
  3. Потенциальное воздействие терапевтических препаратов и иных факторов на показатели крови.
  4. Соблюдение правил транспортировки образца крови, точные данные о дате/времени взятия образца и проведения исследования.
  5. Отметки в бланке результатов о наличии в образце крови отклонений, способных исказить результат исследований: гемолиз, гиперлипидемия и др.
  6. Особенности методов и оборудования, на котором проведено исследование.
  7. Регулярный внешний контроль качества работы оборудования и соблюдение внутреннего регламента лаборатории, репутация в профессиональной среде.
  8. Возможность обращения в лабораторию, предоставившую результаты исследований, для получения консультации у специалиста о потенциальных причинах изменений показателей крови. Необходимо учитывать, что в задачи врача-лаборанта входит выявление и описание показателей крови, но не постановка диагноза, являющаяся прерогативой врача-клинициста

Референсные значения, принятые в лаборатории, единые коэффициенты пересчета

Референсные значения всех показателей каждая лаборатория определяет с учетом имеющегося оборудования, используемых методик и соответствующих калибровочных и контрольных материалов, а также справочных данных по всем параметрам крови и результатов контрольных исследований крови здоровых животных, проведенных для апробации каждого вида анализа. Существуют международные единицы (СИ) для характеристики параметров крови (ГОСТ 8.417-2002), принятые Международной Метрической Конвенцией. Результаты исследований, предназначенные для оценки врачами-клиницистами, надежные лаборатории предоставляют в единицах, сопоставимых с данными других лабораторий или приводят пересчетные коэффициенты.

Физиологические факторы, влияющие на биохимические показатели крови

К этим факторам относят возрастные, половые и породные особенности. Самые существенные различия в нормальных значениях показателей связаны с возрастом животных. Отклонения от средневидовой нормы (принятой в литературе) у молодых и старых животных могут составлять 25…100 % и более.

Наиболее значимые различия в физиологических параметрах крови выявляют при сравнении молодых и взрослых животных.

Изменения нормальных значений биохимических показателей крови, ассоциированные с возрастом и полом, обусловлены различиями в активности обменных процессов, в гормональном фоне, функциональной зрелости организма.

Возраст. У молодых животных по сравнению со взрослыми из-за относительно невысокой ферментативной активности печени, более высокого содержания плазмы на единицу объема крови, ускоренного синтеза белка сниженызначениямногих параметров белкового и ферментативного обменов (рис. 1): АлАТ, АсАТ, фибриноген, общий белок, альбумин, амилаза. Пониженное содержание мочевины обусловлено сочетанием ускоренного анаболизма белка и возрастной полидипсии и полиурии. Концентрация креатинина снижена вследствие малой массы тела [23] Любое увеличение содержания мочевины и креатинина в сыворотке следует рассматривать в соотношении с удельным весом мочи [13]. Низкая концентрация холестерина в крови животных в возрасте до 6 мес обусловлена высокой скоростью его расходования, что вызвано ускоренным ростом тканей, половым развитием и синтезом стероидных гормонов.

У молодых собак (у кошек в меньшей степени) повышены (относительно средневидовых норм) значения показателей минерального обмена — концентрация кальция и фосфора (вследствие активного роста скелета и высокой активности гормона роста). Активность ЩФ и ГГТ у щенков до 10-дневного возраста выше, чем у взрослых в 20…25 раз (могут достигать 8760 U/L (Ед/л) и 3558 U/L соответственно). Активность данных ферментов возрастает в течение 24 ч после рождения и отражает интенсивность поглощения молозива, богатого ферментами, в то же время тканевые факторы в молозиве могут стимулировать эндогенный синтез ЩФ и ГГТ. Поэтому в первые дни жизни данные показатели нельзя использовать в диагностике расстройств гепатобилиарной системы. ЩФ и ГГТ могут служить критерием потребления щенками молозива. Начиная с 2-х недельного возраста щенка активность ЩФ и ГГТ в сыворотке крови снижается до 176…541 U/L и 4…77 U/L, соответственно, и в возрасте 4-х недель доходит до 135…201 U/L и 2…7 U/L, соответственно [5].

Значения ЩФ могут превышать норму в 2…2,5 раза в период активного роста, особенно у собак крупных пород, за счет высокой активности костного изофермента. У котят в сыворотке крови увеличение активности ЩФ и ГГТ, в отличие от щенков, после приема молозива не наблюдают.

Более высокими у молодых животных, вследствие роста синтеза иммуноглобулинов, бывают показатели, связанные с иммунным статусом (глобулины, лимфоциты).

Во взятой натощак крови уровень желчных кислот у щенков и котят в возрасте 2-х мес не имеет существенных отличий от взрослых животных. Однако во взятой натощак крови и сыворотке после приема пищи отмечена гипераммониемия(до 365 и 568 µmol/L (мкмоль/л) соответственно) у здоровых щенков ирландского волкодава от 6-недельного возраста с нормализацией концентрации аммиака в 3…4-месячном возрасте [13]. Диапазон физиологических концентраций натрия, калия, хлора у молодых собак и кошек соответствует нормам для взрослых животных [9].

Рис.1. Динамика изменений биохимических показателей в крови молодых животных

 

Пол и порода

Традиционно разные условия содержания и кормления животных, выведение пород в разных географических местностях накладывают отпечаток на метаболические процессы в организме и даже определяют предрасположенность к некоторым заболеваниям на генетическом уровне. У самок ниже концентрация холестерина, а также активность большинства ферментов (АлАТ, КФК), но выше содержание фосфора и желчных кислот [4].

Существование породной вариабельности у кошек подтверждены многими исследователями и наблюдением врачей-клиницистов. Выявлена породная предрасположенность к определенным заболеваниям (например, кошки бирманской породы чаще заболевают вирусным инфекционным перитонитом или сахарным диабетом) [14, 17, 20, 21]. Достоверно доказано, что у бирманских кошек более широкий референсный интервал креатинина [10]. При исследовании у кошек разных пород содержания глюкозы, мочевины, креатинина, протеина, альбумина, кальция, фосфора, натрия, калия, хлора, активности АлАТ, ЩФ наиболее значимые различия были выявлены в содержании креатинина, глюкозы, общего белка у кошек таких пород, как бирманская, шартрез, мейн-кун и персидская. У здоровых кошек данных пород средние значения показателей были сопоставимы с референсными, а верхние границы показателей увеличены на 20…25 % [10, 12, 15].

Породные различия у собак более выражены, чем у кошек, что объясняется большими колебаниями в массе тела (от чихуахуа до ирландского волкодава), условиями содержания (комнатные собачки, гончие, охотничьи, сторожевые и т.д.). При исследовании стерилизованных собак среднего возраста (маламут, хаски, голден ретривер, английский сеттер) отмечено, что средние значения показателей примерно одинаковые, зато значения верхней и нижней границы существенно различаются (разброс):

  • креатинин: маламут и голден ретривер — до 133 µmol/L, референсные значения у всех исследуемых пород — 88…106 µmol/L;
  • мочевина: английский сеттер — до 11,4 mmol/L, среднее значение по всем породам — 2,9…8,9 mmol/L [6];
  • магний: голден ретривер — нижняя граница 0,58 mmol/L, среднее значение 0,62…0,9 mmol/L;
  • глобулин: маламут — до 45 g/l, референсные значения 24…38 g/l;
  • ЩФ: хаски — до 203U/L, сеттер — до 117 U/L, референсные значения 10…92 U/L. По данным зарубежных коллег, эти породы склонны к гепатопатиям и холестазу [18]; завышенные значения ЩФ могут быть связаны с атипичным адренокортицизмом, к которому склонны собаки породы сеттер [24];
  • ГГТ: сеттер — до 11,0 U/L, норма 1…6 U/L;
  • глюкоза: хаски — до 7,2 mmol/L, среднее значение 4,2…6,4 mmol/L;
  • холестерин: маламут — до 9,38 mmol/L, сеттер — до8,73, средние значения 3,55…8,75 mmol/L;
  • амилаза: ретривер — до 1158 U/L, сеттер —до 1293, средние значения 162…974 U/L.

Существуют данные по увеличению активности АлАТ, АсАТ и ГГТ у гончих с возрастом и в зависимости от физической нагрузки [16].

У собак породы бернский зиненхунд при сравнении 21 биохимического показателя от принятых референсных значений отличались ЩФ — до 464 U/L, референсные до 174 U/L, амилаза — 285…1255 U/L, референсные 186…798 U/L; холестерин — 5,29…10,08 mmol/L, референсные 3,5…6,99 mmol/L[11]. Надо отметить, что более высокая активность амилазы без соответствующего повышения активности липазы малоинформативна, а более высокая концентрация холестерина может быть истолкована как предрасположенность к нефропатиям. Кроме того, собаки породы зинненхунд предрасположены к злокачественному гистиоцитозу, течение которого негативно влияет на печень, об этом может свидетельствовать и повышение активности ЩФ [22].

У собак породы борзая значительно выше значения креатинина (до 186 µmol/L) и КФК, причем повышение значений этих показателей находятся в прямой зависимости от физической нагрузки [8]. Активность печеночных ферментов — АлАТ, АсАТ, ЩФ у них также значительно выше, чем референсные значения для собак в целом, увеличено рСО2 без явных признаков алкалоза. У активно работающих собак снижены показатели кальция, фосфора, тиреодных гормонов (Т4 и Т4свободный), но повышена концентрация глюкозы по сравнению с референсными значениями [16].

Наилучший способ выявить отклонения от физиологических норм у каждого конкретного животного — это оценивать параметры крови в динамике (при регулярном диспансерном исследовании, начиная с молодого возраста).

Различия результатов биохимического анализа в зависимости от оборудования

До 70 % ошибок, искажающих результаты исследований, связаны с преаналитическим этапом (табл.). Присутствие в сыворотке посторонних частиц искажает результаты фотометрии, т. к. метаболиты разрушенных клеток, пигменты, крупномолекулярные соединения могут вступать в реакцию с определяемым веществом или компонентами рабочего реактива, влиять на активность ферментов [1, 25].

 Погрешности преаналитического этапа

Фактор воздействия

Возможные погрешности при анализе

Прием пищи менее чем за 8 ч до взятия крови

Липемия (хилез)

Встряхивание крови в процессе взятия, при хранении, транспортировке

Гемолиз

Прием лекарственных препаратов (доза, длительность применения, индивидуальная чувствительность)

Изменение физиологических параметров

 

 Хилез — помутнение сыворотки/плазмы крови, обусловленное содержанием в ней большого количества жиров; ведет к завышению значений печеночных трансфераз; глюкозы, билирубина, холестерина, триглицеридов, желчных кислот, амилазы и др; к занижению значений натрия, хлора, ГГТ.

Гемолиз — избыточный выход гемоглобина в сыворотку крови вследствие разрушения эритроцитов; ведет к завышению значений билирубина, КФК, альбумина, протеина, АлАТ; к занижению показателей ЩФ, желчных кислот, амилазы, ГГТ и т.д.

Прием лекарственных препаратов может сопровождаться изменением течения патологических процессов и сдвигами определенных показателей, относительно физиологической нормы. Например: сульфаниламиды приводят к повышению концентрации билирубина, преднизолон — глюкозы; фенобарбитал — увеличению активности печеночных транфераз; цефалоспорины обусловливают положительную реакцию на глюкозу в моче [2].

Напомним, что билирубинемия — повышенное содержание билирубина в крови, отражает патологические процессы, происходящие в организме, сопровождающиеся значительным разрушением функциональных элементов печени (гепатоцитов), увеличением активности печеночных трансфераз, содержания пигментов печени и понижением количества синтезируемых в печени веществ (альбумина, холестерина и др.). Наличие повышенного содержания билирубина в крови – характеризует патологические процессы происходящие в организме, а не ошибки преаналитического этапа.

 Автоматическое оборудование для биохимического анализа

Существует несколько типов биохимических анализаторов, принципиально различающихся по применяемым методикам. В зависимости от используемых реагентов различают биохимические анализаторы на жидких реагентах, или «жидкая химия», и использующие «сухую» химию, которые в свою очередь подразделяются на «сухую» стриповую и «сухую» слайдовую. Каждый из этих типов имеет свои особенности, преимущественно касающиеся технических аспектов установленных методик, оценки получаемых результатов, возможных погрешностей под действием различных внешних факторов.

Анализаторы, основанные на использовании сухих реагентов в качестве «стрипов», малоинтересны для биохимического анализа крови. Их недостатки: высокая погрешность результатов, большое число факторов, способных повлиять на результат, невозможность достойного контроля качества и низкая сопоставимость результатов. Примером могут служить анализаторы для клинического исследования мочи и портативные глюкометры.

Анализаторы, использующие жидкие реагенты, широко распространены в медицине человека и достаточно давно применяются в ветеринарной медицине. Анализаторами этого типа оснащены крупные лаборатории и научно-исследовательские центры. Принцип работы большинства фотометров и биохимических анализаторов «жидкой» химии основан на турбидиметрическом методе (измерение интенсивности света, прошедшего через анализируемую суспензию). Основные погрешности, сопутствующие данному методу (при условии качественной калибровки) могут быть связаны с частичным отражением света от поверхностей кюветы. Статистически доказанная погрешность — уменьшение значений около 9,2 %, что учитывают в методиках [1]. Многоразовое использование кювет и роторов обусловливает погрешность при исследовании минерального состава сыворотки крови (за счет примесей воды). К увеличению значений плотности исследуемого раствора (сыворотки, мочи) приводят и различные примеси органического и неорганического происхождения (разрушенные клетки, белки, жиры, частицы шерсти и пыли), которые уменьшают интенсивность регистрируемого фотодиодом проходящего света, а при пересчете увеличивают значение определяемого параметра (рис. 2).

Рис.2. Принцип трансмиссионной спектроскопии, используемой в «жидкостных» анализаторах

 Анализаторы «сухой» химии получают все большее распространение и в медицине и в ветеринарии, что обусловлено изобретением и внедрением слайдовой технологии, позволяющей минимизировать артефакты (хилез, остатки разрушенных клеток, загрязнение пробы микрочастицам пыли и т. д.). Слайдовая технология биохимического исследования сыворотки крови незаменима в условиях небольших клиник и кабинетов, при возникновении экстренных состояний, когда нет возможности и время на доставку проб в лабораторию и необходимо быстрое получение результатов исследований.

Принцип слайдовой технологии основан на измерении и оценке отраженного (а не проходящего, как в «жидкостных» анализаторах) света. Технология слайда предусматривает несколько слоев, через которые проходит исследуемый образец. После распределения образца на первом слое, на втором происходит фильтрация крупномолекулярных соединений. Таким образом, на реакционный слой попадают только компоненты с малой молекулярной массой. Третий слой — индикационный (реакционный), где происходит реакция и с которого считываются данные по изменению окраски и оптической плотности, исключая, таким образом, воздействие многих артефактов (рис.3, 4). Измеренная оптическая плотность преобразуется в значение концентрации на основе калибровочной кривой, имеющейся в памяти анализатора.

 

    

Рис. 3. Принцип рефлектометрической (отражательной) спектроскопии стриповой (а) и слайдовой (б) технологий 

Рис.4 Расположение слоев слайда

Для практикующего ветеринарного врача могут быть интересны некоторые принципиальные отличия анализаторов, использующих для исследований «сухую» и «жидкую» химию (табл. 2)

Сравнительные параметры анализаторов «сухой» и «жидкой» химии (Таблица №2)

Анализаторы на «жидкой» химии

Анализаторы на «сухой» химии

Обладают достаточной точностью при соблюдении строгого внутри- и межлабораторного контроля качества

Обладают высокой точностью за счет заводской калибровки и подготовки реагентов, исключающей «человеческий фактор»

Широкая доступность калибровочных и контрольных материалов

Более широкие пределы линейности* измерения, нежели в жидкостных анализаторах

Лабильность в хранении реагентов

Строгие ограничения в хранении реагентов

Низкая стоимость реагентов (себестоимость анализа)

Высокая стоимость расходных материалов (себестоимость анализа)

При значениях, превышающих линейность метода*, погрешность исследования возрастает за счет ручного разведения образца

При многоразовом использовании кювет и роторов может увеличиться погрешность измерения минерального состава сыворотки крови за счет примесей воды

Технология «слайда» позволяет исключить погрешности измерения оптической плотности, связанные с загрязнением пробы посторонними крупномолекулярными частицами и жировыми каплями

Невозможно исключить артефициальное изменение параметров исследования при гемолизе и гипербилирубинемии

Можно исследовать любые прозрачные и полупрозрачные среды (сыворотка крови, плазма, моча, выпотные жидкости)

Можно исследовать сыворотку крови, мочу, цельную кровь

* Линейность методаинтервалы значений показателя, при которых производитель реагентов гарантирует достоверный результат. Ряд биохимических показателей имеет значительные различия линейности в зависимости от установленных на анализаторе методик. Так, линейность метода подсчета концентрации глюкозы Human до 22,9 ммоль/л, Idexx до 38,1 ммоль/л; ЩФ Human до 700 U/L, Idexx до 2000 U/L

* линейности установленной методики — надо иметь в виду, что при подсчете данного показателя сыворотка была разведена и, следовательно, погрешность измерения увеличилась.

 Мы постарались осветить некоторые аспекты биохимического анализа крови, способные влиять на получаемый результат. Для контроля результатов некорректно дублировать анализ в другой лаборатории, особенно спустя несколько дней, т. к. там могут быть принципиально другие оборудование и установленные методики. В качестве рекомендации хочется напомнить, что уточнить «непонятные» можно с помощью дифференциальных (дополнительных) тестов или процедур (пример: при превышающей физиологические норму глюкозе рекомендуют исследовать фруктозамин или гликерированный гемоглобин; при повышении почечных показателей — функциональные тесты почечной фильтрации: фракционной экскреции электролитов, скорости клубочковой фильтрации и прочее).

 ПРИЛОЖЕНИЕ

Коэффициенты пересчета единиц

Показатели

Коэфф пересчета в ед. СИ

Единицы СИ

Глюкоза

mg/dl х 0,0555

mmol/L

Мочевина

mg/dl х 0,166

mmol/L

Креатинин

mg/dl х 88,4

µmol/L

Общ.билирубин

mg/dl х17,2

µmol/L

Прямой билирубин

mg/dl х 17.2

µmol/L

Мочевая к-та

mg/dl х59,3

µmol/L

ЛДГ

U/L

U/L

АсАТ

U/L

U/L

АлАТ

U/L

U/L

α-Амилаза

U/L

U/L

Липаза

U/L

U/L

КФК

U/L

U/L

СДГ

U/L

U/L

ГГТ

U/L

U/L

ЩФ

U/L

U/L

Общий белок

g/dl х10

g/l

Альбумин

g/dl х10

g/l

Глобулин

g/dl х10

g/l

Фибриноген

g/dl х10

g/l

Холестерин

mg/dl х0,026

mmol/L

Триглицериды

mg/dl х0,0114

mmol/L

Кальций

mg/dl х0,25

mmol/L

Фосфор

mg/dl х0,32

mmol/L

Магний

mg/dl х0,412

mmol/L

Железо

vg/dl х0,179

µmol/L

Калий

mmol/L

mmol/L

Натрий

mmol/L

mmol/L

Хлор

mg/dl х0,282

mmol/L

 

Библиография

  1. Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. — М.: МЕДпресс-информ, 2009.
  2. Меньшиков В.В. Критерии оценки методик и результатов клинических лабораторных исследований. — М.: Лабора, 2011.
  3. Словарь-справочник.— М.: Издательство стандартов, 1990.
  4. Butterwick R.F., McConnell M., et al. Influence of age and sex on plasma lipid and lipoprotein concentrations and associated enzyme activities in cats // Am J Vet Res, 2001; 62: 331—336.
  5. Center S.A., Randolph J.F., et al. Effect of colostrum ingestion on gamma-glutamyltransferase and alkaline phosphatase activities in neonatal pups // Am J Vet Res, 1991; 52: 499—504.
  6. Concordet D., Vergez F., Trumel C., et al. A multicentric retrospective study of serum/plasma urea and creatinine concentrations in dogs using univariate and multivariate decision ruled to evaluate diagnostic efficacy // Vet Clin Pathol., 2008; 37: 96—103.
  7. Driscoll C.A., (этот источник должен быть №7) Menotti-Raymond M., Roca A.L., et al. The Near Eastern origin of cat domestication // Science, 2007; 27: 519—523.
  8. Dunlop M.M. (этот номер 8), Sanchez-Vazquez M.J., Freeman K.P., Gibson G., Sacchini F., Lewis F. Determination of serum biochemistry reference intervals in a large sample of adult greyhounds // J Small Anim Pract. Год, Номер, страницы?
  9. Fettman M.J. and Allen T.A. Developmental aspects of fluid and electrolyte metabolism and renal function in neonates // Comp Contin Ed Pract Vet, 1991; 13: 392—403,.
  10. Gunn-Moore (этот должен быть после Fettman MJ) D.A., Dodkin S.J., Sparkes A.H. An unexpectedly high prevalence of azotemia in Birman cats (letter) // J Feline Med Surg, 2002; 4: 165—166.
  11. Jubb K.V.F. The Pancreas. In: Jubb KVF, Kennedy PC, Palmer N, eds. Pathology of Domestic Animals. — San Diego, CA: Academic Press Inc.; 1993.
  12. Harper E.J., Hackett R.M., Wilkinson J., et al. Age-related variations in hematologic and plasma biochemical test results in Beagles and Labrador Retrievers // J Am Vet Med Assoc, 2003; 3: 223.
  13. Hoskins J.D. Veterinary Pediatrics. Dogs and Cats from Birth to Six Months. — WB Saunders Company, Philadelphia, 2001.
  14. Lederer R., Rand J.S., Jonsson N.N., et al. Frequency of diabetes mellitus and breed predisposition in domestic cats in Australia // Vet J, 2009; 179: 254—258.
  15. Lipinski M.J., Froenicke L., Baysac K.C., et al. The ascent of cat breeds: Genetic evaluations of breed and worldwide randombreed populations // GenomiАcs, 2008; 91: 12—21.
  16. Lowseth L.A., Gillett N.A., Gerlach R.F., Muggenburg B.A. The effects of aging on hematology and serum chemistry values in the beagle dog // Vet Clin Pathol., 1990; 19: 13—19.
  17. .McCann T.M., Simpson K.E., Shaw D.J., et al. Feline diabetes mellitus in the UK: The prevalence within an insured cat population and a questionnaire-based putative risk factor analysis // J Feline Med Surg, 2007; 9: 288—299.
  18. Nestor D.D., Holan K.M., Johnson C.A., Schall.W., Kaneene J.B. Serum alkaline phosphatase activity in Scottish Terriers versus dogs of other breeds // J Am Vet Med Assoc., 2005, 7.
  19. Pesteanu-Somogyi L.D., Radzai C., Pressier B.M. Prevalence of feline infectious peritonitis in specific cat breeds // J Feline Med Surg, 2006; 8: 1—5.
  20. Whincup P.H., Gilq J.A., Owen C.G., et al. British South Asians aged 13–16 years have higher fasting glucose and insulin levels than Europeans // Diabet Med, 2005; 22: 1275—1277.
  21. Reusch C., Hoerauf A., Lechner J., et al. A new familial glomerulonephropathy in Bernese mountain dogs // Vet Rec., 1994; 134: 411—415.
  22. Zandvliet M.M.J.M. and Rothuizen J. Transient hyperammonemia due to urea cycle enzyme deficiency in Irish wolfhounds // J Vet Intern Med, 2007; 21: 215—218,.
  23. .Zimmerman K., Panciera D., Panciera R. Hyperalkaline phosphatemia in Scottish Terriers caused by atypical adrenal cortical disease [abstract] // Vet Clin Pathol., 2007; 36: 312.
  24. http://biokhimija.ru/rabota/obrabotka-krovi.html

 

 

Лактатдегидрогеназа (S-LDH) – SYNLAB Eesti

Лактатдегидрогеназа – внутриклеточный энзим, который находится в цитоплазме всех клеток организма, больше всего в сердечной и скелетных мышцах, эритроцитах, почечной и печеночной тканях, меньше – в легких, гладких мышцах и мозге. Внутриклеточно активность энзима примерно в 500 раз больше, чем в сыворотке крови.

LDH является неспецифичным показателем тканевого повреждения – активность его в крови увеличена при всех состояниях, сопровождающихся увеличением проницаемости клеточной мембраны.

Показания:

Подкрепляющее исследование при диагностике поражения сердца, печени, эритропоэза, почек, скелетных мышц, мозга и диагностике легочных заболеваний.

Метод анализа: Фотометрия

Референтные значения:

<1 мес 135-630 U/L
1-12 мес  135-375 U/L
1-4 л  135-305 U/L
5-11 л  120-245 U/L
 >12 л 120-246 U/L

 

Интерпретация результата:

Высокие значения LDH:

  • Гематологические заболевания: мегалобластические и гемолитические анемии, острые лейкемии, лимфомы, хронические миело¬пролиферативные заболевания
  • Инфаркт сердечной мышцы: от начала инфаркта LDH увеличивается в течение 10-12, максимально за 48-72 часа, умеренно увеличенная активность сохраняется до 10-14 дней
  • Заболевания печени (гепатиты, некрозы), поражение легких (эмболия легких, саркоидоз), злокачественные опухоли, заболевания почек и мышц
  • Физиологическое увеличение активности LDH: последний триместр беременности
  • NB! Возникший при взятии крови гемолиз и предшествующая анализу сильная физическая нагрузка могут привести к ложно-положительным результатам. Также важно учитывать, что у одного и того же человека может быть несколько причин подъема LDH.

Обнаружение и лечение гемолиза с использованием показателей сыворотки

Выявление и лечение гемолиза с использованием индексов сыворотки

Большинство обнаруженных клинических лабораторных ошибок происходит на преаналитической фазе тестирования. Гемолиз — одна из наиболее распространенных преаналитических ошибок, часто приводящая к отбраковке образцов из-за помех. Гемолиз, определяемый как высвобождение гемоглобина и других внутриклеточных компонентов из эритроцитов в сыворотку или плазму, происходит при повреждении клеточной мембраны.

Большинство случаев гемолиза начинается с разрушения эритроцитов in vitro во время сбора крови. Это включает в себя травму вены во время пункции, недостаточное высыхание спирта на очищенном участке перед венепункцией, использование иглы неправильного размера, недостаточное наполнение трубок, чрезмерное время наложения жгута и забора шприцев. Другие причины гемолиза in vitro включают неправильное обращение с пробами, транспортировку и хранение. Различные патологические состояния могут вызывать гемолиз in vivo, включая аутоиммунную гемолитическую анемию, реакции переливания крови, механический разрыв эритроцитов из-за искусственных сердечных клапанов и использование вспомогательных устройств для желудочков.

Гемолиз влияет на точность и надежность рутинного химического анализа двумя различными механизмами. Первый — это высвобождение аналитов, которые в высоких концентрациях содержатся в эритроцитах. На два аналита, на которые сильно влияет гемолиз, являются калий и лактатдегидрогеназа, концентрация которых в эритроцитах более чем в 20 и 150 раз выше, чем в сыворотке крови, соответственно.

Второй механизм, с помощью которого гемолиз влияет на точность и надежность теста, связан с вмешательством самого гемоглобина.Из-за своего красного цвета гемоглобин поглощает свет от 340–440 нм до 540–580 нм, что позволяет ему мешать проведению анализов в широком диапазоне длин волн. Спектрофотометрическое измерение прямого билирубина является распространенным примером такого рода помех. Однако существует множество механизмов вмешательства гемоглобина, которые могут вызывать положительную или отрицательную систематическую ошибку в анализах.

Обычно лаборатории обнаруживают гемолиз путем визуального осмотра сыворотки или плазмы. Образцы светло-розового оттенка указывают на небольшой гемолиз, тогда как образцы темно-красного цвета представляют собой грубый гемолиз.Однако даже при наличии обученных наблюдателей визуальная оценка степени гемолиза может быть очень субъективной и ненадежной.

К счастью, сывороточные индексы на современных химических анализаторах позволяют проводить автоматические полуколичественные оценки гемолиза, желтухи и липемии, тем самым значительно улучшая процесс оценки целостности образцов. Например, индекс гемолиза (HI) на анализаторе Roche cobas c 501 использует двухцветные пары длин волн (600/570 нм) и формулы расчета, которые включают поправки для компенсации спектрального перекрытия из-за липемии.

Производители тестов указывают пределы HI для конкретных инструментов и тестов в своих инструкциях по применению. Лаборатории могут использовать правила промежуточного программного обеспечения для установки и настройки пороговых значений HI в сыворотке для каждого аналита. Это позволяет лабораторным технологам легко идентифицировать образцы с клинически значимыми интерференциями, предотвращать автоматическую проверку результатов и вмешиваться по мере необходимости. В зависимости от процедур лаборатории вмешательства могут включать повторный сбор образца, поиск альтернативного негемолизированного образца, собранного в то же время, или сообщение результатов с пояснительным комментарием, который четко указывает, как гемолиз повлияет на результаты.

Хотя предельные значения HI, предоставленные производителем, служат отправной точкой для определения приемлемости образца, они обычно определяются с использованием отдельных концентраций аналита. В нашей лаборатории мы установили пороги гемолиза, зависящие от концентрации аналита, для анализов с низкими пределами гемолиза, таких как аспартатаминотрансфераза (AST). В случае AST мы увеличиваем порог HI по мере увеличения активности AST в образце, потому что требуется больший гемолиз, прежде чем мы увидим клинически значимое смещение.Внедрив эти пороговые значения HI, зависящие от концентрации аналита, мы значительно снизили уровень брака и повторного сбора образцов из-за гемолиза.

В клинических лабораториях обычно встречаются гемолизированные образцы, которые при неправильном обращении влияют на надежность результатов пациентов. Следовательно, лабораториям необходимы надежные, систематические процессы для идентификации этих образцов и для последовательного количественного определения степени гемолиза. Благодаря автоматическому обнаружению гемолиза с использованием HI и алгоритмов на основе правил лаборатории могут легко это сделать.Кроме того, установив пороговые значения гемолиза, зависящие от концентрации, лаборатории могут добиться значительного снижения показателей отбраковки и повторного сбора образцов. Эти изменения предлагают дополнительные преимущества, в том числе сокращение времени выполнения работ и экономию средств за счет сокращения сбора крови.

Брук Кацман, доктор философии, работает научным сотрудником по клинической химии в клинике Мэйо в Рочестере, штат Миннесота. + Электронная почта: [электронная почта защищена]


Никола Бауманн, доктор философии, со-директор Центральной клинической лаборатории и директор централизованной обработки данных в клинике Мэйо в Рочестере, штат Миннесота.
+ Электронная почта: [электронная почта защищена]

Что такое гемолиз и как его предотвратить

Что это такое и как это предотвратить.
Красный такой красивый цвет … если только он не окрашивает сыворотку или плазму взятого вами образца. Тогда это некрасиво. Это уродливо, потому что обычно это означает, что время, потраченное на рисование образца, было потрачено впустую, и рисование придется повторять. Но это больше, чем убийца времени. Необходимость вспомнить гемолизированный образец, который не может предоставить врачу точные и полезные результаты, откладывает лечение, диагностику и / или прием столь необходимых лекарств.В критических ситуациях время — это не просто деньги, это может быть сама жизнь. Сообщается, что гемолиз является причиной номер один брака биологических образцов. Фактически, из-за гемолиза отбраковывается в шесть раз больше образцов, чем по второй по распространенности причине — недостаточному объему образца. Но прежде чем овладеть искусством предотвращения гемолиза, мы должны понять, как это происходит. «Хемо», конечно же, означает кровь; «лизис» означает разрыв или разрушение клеток. Итак, гемолиз — это буквально разрушение кровяных телец, в частности красных кровяных телец.При разрыве эритроцитов они разливают свое содержимое, в основном гемоглобин, в окружающую среду. Гемоглобин — это респираторный пигмент, который имеет ненасытную страсть к кислороду и покрывает каждую молекулу, которую он может удерживать, проходя через легкие, а затем сбрасывает его в ткани, где он необходим для клеточных функций. Гемоглобин также делает кровь красной. Естественно, когда лопаются эритроциты, это окрашивает жидкую часть крови. Если эритроциты лопаются во время сбора образцов, анализируемая кровь отличается от крови, циркулирующей в организме пациента.Он такой же другой, как день и ночь. Поскольку красные кровяные тельца содержат в 23 раза больше калия, чем жидкая часть крови, при разрыве красных кровяных телец во время сбора образец, отправляемый на анализ, насыщается калием. Фактически, в нем так много калия, что, если его протестировать и сообщить, результаты могут вызвать у врача явную панику, вынуждая его или ее отреагировать на приказы, которые могут быть в конечном итоге неблагоприятными для пациента. Или, если у пациента уровень калия в крови на самом деле слишком низкий, гемолиз может поднять образец до нормального диапазона и привести к бездействию, когда необходимо принять меры. Но гемолиз влияет не только на калий. На эти другие тесты влияет отправка гемолизированных образцов на анализ: ЛДГ, АСТ, АЛТ, фосфор, магний, аммиак, эритроциты, гемоглобин и гематокрит. Не только эти аналиты, но практически все, что можно проверить. Это потому, что гемоглобин — это жидкий белок, который разбавляет исследуемую сыворотку или плазму. Чем больше гемолиз, тем больше разведение. Достаточно сказать, что гемолиз просто отвратителен. Так как же те, кто собирает образцы, не позволяют лаборатории сообщать о неточных результатах? Проверьте свою практику, чтобы свести к минимуму эти семь основных причин:
  • Избегайте рисования линий — устройства для внутривенного введения печально известны тем, что вызывают гемолиз эритроцитов.Если вы не используете такое устройство, как PIVO, вместо этого выполните венепункцию;
  • Избегайте интенсивного перемешивания — думайте о красных клетках как о хрупких кристаллических шарах, которые ломаются с наименьшим возмущением;
  • Избегайте чрезмерного давления вытягивания при использовании шприца — эритроциты не переносят чрезмерную турбулентность из-за сильного извлечения поршня шприца;
  • Не удаляйте сгустки — образуя сгустки для удаления фибрина, одновременно с этим неизбежно разрываются эритроциты;
  • Установите иглу правильно — игла, частично закупоренная стенкой вены, представляет собой иглу, которая гемолизирует эритроциты;
  • Предварительно нагрейте места проколов кожи — это снижает потребность в чрезмерном сдавливании ткани, гемолизирующей эритроциты;
  • Заполните пробирки полностью — чрезмерная концентрация антикоагулянта при недостаточном заполнении пробирок плохо влияет на хрупкие мембраны эритроцитов.

Использование этих и других методов может свести к минимуму вероятность гемолиза образцов. Поскольку точные результаты начинаются с коллектора, те, кто берет образцы крови, находятся в лучшем положении для убедитесь, что пациенты получают лечение в соответствии с результатами, которые не откладываются или не изменяются из-за гемолиза.

Настоящее искусство гемолиза состоит в том, чтобы в первую очередь его избежать.

Примечание. Чтобы получить красиво оформленный PDF-файл с этой статьей для публикации в вашем учреждении, посетите нашу страницу «Бесплатные материалы».


Дополнительные материалы, которые помогут вам уменьшить проблему гемолиза:

Solutions to Hemolysis in Point-of-Care Testing

Cindy Brawley, MT (AMT), MHA

Cindy Brawley, MT (AMT), MHA , менеджер по диагностическим продуктам в США в SARSTEDT, Inc. Она ранее работал старшим медицинским технологом, а затем менеджером по работе с населением и стратегией амбулаторной системы здравоохранения в Children’s Healthcare Atlanta.

В: Каковы последствия гемолиза в образцах пациентов?

A: Гемолиз может привести к ошибочным результатам и, возможно, вызвать неправильный диагноз, неправильное лечение пациента или его отсутствие.Всего лишь 5-процентный гемолиз может поднять уровень калия с 4,0, что нормально, до 7,0, что обычно требует лечения. Это может привести к ошибочному диагнозу, потому что, если у пациента низкий уровень калия и образец гемолизирован, результат может быть нормальным, и лечение этого гипокалиемического состояния не предусмотрено.

В: Как узнать, есть ли у вас гемолизированный образец в лаборатории?

A: При химическом тестировании кровь центрифугируется для отделения клеток от плазмы или сыворотки.Гемолиз происходит, когда красные кровяные тельца разрываются и выделяют гемоглобин в плазму или сыворотку, что чаще всего происходит на этапе преаналитического тестирования. Вы можете визуально увидеть красный цвет гемоглобина в плазме или сыворотке, и большинство лабораторных химических анализаторов могут измерить уровень гемолиза. Когда уровень гемолиза мешает сообщению об измеренном анализируемом веществе, например, о калии, индикатор прибора будет отмечать результаты, на которые он влияет. Во многих лабораториях также есть промежуточное программное обеспечение, которое предотвращает попадание ошибочных или помеченных результатов в электронную медицинскую карту пациента, предотвращая неправильный диагноз или лечение.Воспоминание об образце необходимо для обеспечения тестирования и регистрации качественного образца.

В: Как узнать, что гемолиз произошел при тестировании в месте оказания медицинской помощи?

A: При тестировании на месте вы не знаете, что образец гемолизирован, потому что это цельная кровь. Вы не видите отделенную от клеток плазму или сыворотку, поэтому нет визуальной подсказки и индикаторов гемолиза в приборах POC. Если кровь гемолизирована и результат попадает прямо в электронную историю болезни пациента, результат есть.Ни коллекционер, ни врач не подозревают, что образец гемолизирован. Если клиническая картина не соответствует, исследование необходимо повторить в лаборатории. Иногда по клинической картине нельзя сказать, что возникла проблема с качеством пробы крови.

В: Что можно сделать для выявления гемолиза при тестировании в месте оказания медицинской помощи?

A: Сборы по месту оказания медицинской помощи выполняют самые разные люди. Медсестры, респираторные терапевты, флеботомисты и фельдшеры как в кабинетах врачей, так и в больницах собирают и проводят анализы в местах оказания медицинской помощи.Как мы можем стандартизировать этот процесс? Важно установить параметры для подтверждения качества вашего тестирования в месте оказания медицинской помощи путем регулярного параллельного тестирования в лаборатории для выявления преаналитических ошибок, которые могут возникнуть на этапе сбора.

Инструменты, используемые для взятия крови, и процесс дозирования картриджей в местах оказания медицинской помощи могут быть основной причиной некачественных образцов. Обычной практикой является сбор крови из линии пациента с помощью откачанной трубки, а затем перенос крови в картридж POC с помощью одноразовой пипетки для переноса; оба шага могут вызвать сдвигающее усилие, что приведет к гемолизу.Также может быть сложно правильно дозировать картриджи POC с помощью пипетки для переноса. Распространенные проблемы, такие как переполнение, недостаточное заполнение и пузыри, могут вызвать код ошибки и отсутствие результата. Тест нужно повторить, а картридж потрачен впустую.

SARSTEDT разработал комплект для оказания медицинской помощи с учетом этих проблем. Он включает пробирку S Monovette ® с антикоагулянтом для забора крови путем венепункции или из внутривенного катетера с использованием техники щадящей аспирации, которая сводит к минимуму силу сдвига на эритроциты и, следовательно, угрозу гемолиза.Пробирка в виде шприца собирает небольшой объем крови — 1,1 миллилитра. Затем прикрепляется дозирующий наконечник, и картридж POC дозируется с помощью небольшого поворота поршня для вытеснения крови в картридж. Это полностью закрытая система без открытия пробирок с кровью , что сводит к минимуму воздействие крови.

Помехи | eClinpath

Помехи — это такие вещества, как липиды, свободный гемоглобин и билирубин (также глобулины и лекарственные препараты), которые влияют на результаты клинических патологических тестов по мере их проведения.Они считаются аналитическими переменными, потому что они напрямую влияют на выполнение теста (и результаты) различными способами, но также являются предварительными аналитическими переменными, поскольку некоторые (липиды, свободный гемоглобин, лекарственные препараты) в некоторой степени поддаются контролю и могут быть сведены к минимуму путем сбора образцов и умение обращаться. В этом разделе мы рассмотрим влияние трех наиболее распространенных факторов, влияющих на клинические патологические исследования: липемии, гемолиза и желтухи. Также приводится краткое изложение потенциальных эффектов этих помех на результаты гематологических и клинических биохимических тестов.Влияние этих переменных на клинические патологические тесты зависит от метода (для всех тестов, включая гемостаз). См. Результаты отдельных тестов для получения более подробной информации о том, как эти помехи влияют на результаты, с помощью методов, используемых в Корнельском университете. С нашим химическим анализатором мы также даем рекомендации относительно того, как эти преаналитические переменные влияют на наши результаты. Из этих вмешательств наиболее распространенным является гемолиз (в основном связанный со сбором или преаналитический, но может быть вызван внутрисосудистой гемолитической анемией) (Whipple et al 2020).

Липемия

Липемия (лактесценция) вызывается повышенным содержанием триглицеридов (обычно в виде хиломикронов и нечасто из-за высоких концентраций липопротеинов очень низкой плотности). Липемия обычно является артефактом после приема пищи (кровь, собранная у животных, не голодавших), и ее можно свести к минимуму путем сбора крови у голодного животного (минимум, 12 часов голодания). Фактически, липемия у голодающего животного указывает на наличие основного заболевания, например сахарный диабет, панкреатит, липидоз печени (лошади), новообразования (лошади).

Помехи при гематологических исследованиях

Липемия мешает гематологическим исследованиям по следующему механизму — рассеянию света. Это влияет на следующие результаты:

  • Гемоглобин и связанные с гемоглобином индексы : приводит к ложно завышенным показаниям абсорбции гемоглобина, что приводит к ложно завышенным измерениям. Это будет проявляться в виде высокого среднего клеточного гемоглобина (MCH) и средней концентрации клеточного гемоглобина (MCHC), поэтому эти результаты часто аннулируются.Это вмешательство в значительной степени преодолевается с помощью гематологического анализатора в Cornell Univesrity, который непосредственно измеряет содержание гемоглобина в эритроцитах (корпускулярный гемоглобин, CH и концентрацию корпускулярного гемоглобина, CHCM) с помощью рассеяния лазерного света. В липемических образцах мы обычно сообщаем эти значения с анализатора (рассчитанный гемоглобин, CH, CHCM), когда липемия ложно увеличивает стандартное измерение гемоглобина (MCH, MCHC).
  • Общий белок по рефрактометру : Большие липиды, такие как хиломикроны, преломляют свет, ложно увеличивая измерение общего белка с помощью этого метода.
  • Количество тромбоцитов : При тяжелой липемии большие липидные молекулы могут ошибочно считаться анализатором как тромбоциты, что приводит к ложному увеличению количества тромбоцитов.

Помехи при химическом тестировании

Липемия мешает проведению биохимических тестов по следующим механизмам:

  • Рассеяние света: Приводит к ложно увеличенным показаниям оптической плотности некоторых аналитов, особенно тех, которые являются конечными реакциями, которые не пропускаются, например.грамм. общий билирубин, что приводит к высокой концентрации билирубина. Это зависит от метода (липемия минимально влияет на результаты билирубина на анализаторе, используемом в Корнельском университете).
  • Объемное вытеснение / исключение растворителя : Это ложно снижает значения некоторых аналитов, например электролиты (в основном натрий и хлорид, количество которых уменьшается на пропорционально , но также и на калий в меньшей степени).

    Объемное вытеснение химических компонентов крупными частицами (липидом, белком)

  • Гемолиз : Гемолиз эритроцитов усиливается при наличии липемии.Это может повлиять на результаты отдельных тестов (особенно на конечные реакции, которые не пропускаются), потому что гемоглобин будет поглощать на длинах волн, используемых для обнаружения реакций в анализаторе.

В Корнельском университете мы обычно стараемся свести к минимуму артефактные изменения в лабораторных результатах, вызванные липемией. Это достигается охлаждением и центрифугированием плазмы / сыворотки на высокой скорости, в результате чего образуется жировой слой в верхней части образца. Плазма с меньшей липемией под жировым слоем отсасывается из пробирки и используется для анализа.Методы химической очистки ненадежны и могут повлиять на лабораторные результаты другими способами, поэтому они обычно не используются для очистки липемической плазмы. Обратите внимание, что измерения триглицеридов необходимо проводить на образцах без фальсификации, поскольку в противном случае значения будут ложно уменьшены, если жировой слой не будет включен в анализ. См. Результаты отдельных тестов, чтобы получить более подробную информацию о том, как липемия влияет на результаты, с методами, используемыми в Корнельском университете.

Гемолиз

Гемолиз обычно представляет собой артефакт in vitro из-за плохой техники венепункции, липемии, замораживания образцов цельной крови, отсроченного отделения сыворотки или плазмы от клеток, отсроченной подачи образца и некоторых антикоагулянтов (фторид-оксалат).Красные кровяные тельца также более хрупкие в липемических образцах и имеют тенденцию легче лизироваться в этих образцах, даже если кровь хранится или с ней правильно обращаются. Однако гемолиз может происходить in vivo при внутрисосудистом гемолизе с некоторыми типами гемолитических анемий (например, инфекция Babesia, , окислительное повреждение). Артефактный лизис эритроцитов может имитировать внутрисосудистый гемолиз, и может быть очень трудно отличить in vitro, от in vivo, , внутрисосудистый гемолиз (особенно в лаборатории, где мы видим только образец, а не пациента).Однако, если у животного анемия и гемоглобинурия, вероятен истинный in vivo внутрисосудистый гемолиз, то есть патологическая гемолитическая анемия. в прошлом, когда были доступны переносчики кислорода на основе гемоглобина (такие как оксиглобин), они существенно влияли на результаты, полученные с помощью гематологических и химических анализаторов (для получения дополнительной информации о HBOC см. контролируемые преаналитические переменные), однако эти продукты не являются дольше использовал.

Помехи при гематологических исследованиях

Гемолиз ( in vitro, или in vivo, внутрисосудистый) мешает гематологическим тестам по следующему механизму путем лизиса эритроцитов и светорассеяния.Это влияет на следующие результаты:

  • Гематокрит (HCT), объем упакованных клеток (PCV) и количество эритроцитов: При гемолизе in vitro и эти результаты будут ложно низкими, поскольку лизированные эритроциты не включены в подсчет или измерение PCV (помните, что HCT — это рассчитанный результат, зависящий от количества MCV и RBC, которые измеряются непосредственно анализатором). При внутрисосудистом гемолизе in vivo и эти результаты отражают наличие интактных эритроцитов, способных переносить кислород (истинная мера способности переносить кислород).
  • Индексы, связанные с гемоглобином : Поскольку автоматизированные анализаторы намеренно лизируют эритроциты для измерения гемоглобина, измерение гемоглобина одинаково с гемолизом или без него ( in vitro или in vivo внутрисосудистое). При гемолизе in vitro и (артефактный) гемоглобин является наиболее точным показателем кислородной способности животного, и HCT можно оценить, умножив гемоглобин на 3 (поскольку гемоглобин обычно составляет 1/3 эритроцитов) .При истинном внутрисосудистом гемолизе in vivo HCT, количество эритроцитов или PCV являются более точным измерением кислородной способности животного, поскольку лизированные эритроциты и свободный гемоглобин не могут переносить кислород. Независимо от этого, in vitro или in vivo внутрисосудистый гемолиз приводит к более высокому результату гемоглобина по сравнению с количеством HCT и RBC и показателями, связанными с этими измерениями, средним клеточным гемоглобином (MCH) и средней концентрацией клеточного гемоглобина (MCHC). ложно высокий и может быть отменен.Средний объем клеток (MCV) напрямую измеряется автоматическими анализаторами и не зависит от этих типов гемолиза (если это не рассчитанное значение из PCV).
  • Общий белок по рефрактометру : In vitro или in vivo При внутрисосудистом гемолизе линия рефрактометра размывается, что затрудняет чтение. Гемоглобин, как белок, также может вносить некоторый вклад в измерение показателя преломления.
  • Количество тромбоцитов : При in vitro, или in vivo, , внутрисосудистом гемолизе, призрачные эритроциты могут ошибочно считаться анализатором как тромбоциты, ложно увеличивая количество тромбоцитов и средний объем тромбоцитов.

Помехи при химическом тестировании

Гемолиз ( in vitro, или in vivo, внутрисосудистый) мешает проведению биохимических тестов по следующим механизмам:

  • Повышенная абсорбция: Высвобожденный гемоглобин увеличивает абсорбцию в спектральном диапазоне гемоглобина. Многие химические реакции основаны на измерении изменения оптической плотности около оптической плотности гемоглобина. Это можно компенсировать с помощью кинетических реакций (которые измеряют скорость изменения оптической плотности) или реакций с закрытыми конечными точками (которые в наибольшей степени подвержены гемолизу).
  • Подавление реакций : Высвобожденный гемоглобин может напрямую ингибировать химические реакции.
  • Высвобождение внутриклеточных компонентов, которые непосредственно измеряются: Высвобождение компонентов или ферментов, обнаруженных в высоких концентрациях в эритроцитах, приведет к ложному увеличению результатов этих тестов, например калий (который высок в лошадях, верблюжьих, некоторых породах крупного рогатого скота и азиатских породах собак, таких как акита, сиба-ину), АСТ, ЛДГ, магний и, возможно, железо (хотя железо находится в гемовом кольце внутри гемоглобина, гемовое железо не должны вступать в реакцию с реагентом в анализе железа — во внутренних исследованиях мы не наблюдали прямой корреляции между гемолизом и значениями железа у некоторых домашних животных).Обратите внимание, что уровень фосфата может увеличиваться при in vitro, или in vivo, внутрисосудистого гемолиза при хранении образца, поскольку органические фосфаты со временем превращаются в неорганические фосфаты.
  • Высвобождение мембранных или внутриклеточных компонентов, которые участвуют в реакциях : Высвобождение ферментов, которые участвуют в химических реакциях, например аденилаткиназа или глюкозо-6-фосфат будут повышать активность креатинкиназы (CK) сыворотки, потому что они участвуют в реакции (не измеряются напрямую).
  • Выделение воды : Выделение воды из красных кровяных телец может привести к разбавлению компонентов сыворотки.

Влияние внутрисосудистого гемолиза i n vitro или in vivo на результаты тестов зависит от вида.

  • Свинья : Ди Мартино и др. 2015 вызвали гемолиз в эритроцитах свиней (Landrace x Large White pigs) при перемешивании и обнаружили, что это оказывает следующее влияние на аналиты сыворотки, полученные на автоанализаторе Cobas 501:
    • Умеренный гемолиз (коррелирующий с концентрацией гемоглобина 36 мг / дл или <50 единиц гемолитического индекса) незначительно снижал уровень глюкозы (среднее снижение примерно на 7%, гексокиназный метод) и повышал уровень калия (медиана 1.3 мэкв / л), фосфат (медиана увеличения на 5%), магний (медиана, 6%), AST (медиана изменения, 10 ед / л), GGT (медиана изменения, 9 ед / л, метод Саса), общий билирубин ( медиана 47%), ЛДГ (медиана изменения 69 Ед / л) и мочевой кислоты (медиана изменения 50%, уриказный метод).
    • Умеренный гемолиз (коррелирующий с концентрацией гемоглобина 72 мг / дл или <100 единиц гемолитического индекса) привел к дальнейшему снижению глюкозы (медиана, 10%) и увеличению калия (медиана, 1,9 мэкв / л), фосфатов (медиана, 9%), магний (медиана, 10%), AST (медиана, 20 Ед / л), ALT (медиана, 4 Ед / л), ALP (медиана, 7 Ед / л), GGT (медиана, 24 Ед / л) ), общий билирубин (медиана, 250%), ЛДГ (медиана, 124 Ед / л) и мочевая кислота (медиана, 100%).
    • Более тяжелый гемолиз (коррелирует с концентрацией гемоглобина 127 мг / дл или гемолитическим индексом> 100) снижает уровень глюкозы (медиана, 14%), азота мочевины (медиана, 10%, уреазный метод), креатинина (медиана, 10%, ферментативный метод), холестерин (медиана, 10%, метод CHOD-PAP) и повышенный уровень фосфатов (медиана, 20%), магния (медиана, 10%), AST (медиана, 34 Ед / л), АЛТ (медиана, 7 Ед. / Л), ЩФ (медиана, 14 Ед / л), ГГТ (медиана, 60 Ед / л), общий билирубин (медиана 650%), ЛДГ (медиана, 220 Ед / л), железо (медиана, 15%) и мочевой кислота (в среднем 200%).Было заметно влияние калия (не поддается измерению).
    • NEFA и липаза также были увеличены при гемолизе (однако Корнелл использует разные методы для обоих этих аналитов).
    • Гаптоглобин и С-реактивный белок (СРБ) были увеличены при гемолизе от умеренного до тяжелого, как определено в этом исследовании.
    • Изменений связано со следующим:
      • Аналитическое вмешательство: CRP, гаптоглобин, креатинин, холестерин, GGT, NEFA, общий билирубин, железо, липаза, ALP.
      • Клеточное высвобождение: калий, фосфат, магний, мочевина, АЛТ, АСТ, ЛДГ, мочевая кислота.
      • Разведение: глюкоза, натрий (умеренное снижение), альбумин (умеренное снижение).

Электрофорезная интерференция

Гемоглобин может мигрировать в раннюю бета-область трассировки, что приводит к увеличению фракций бета-глобулина. Комплекс гемоглобин-гаптоглобин также может мигрировать в этой области. Если гемолиз тяжелый, в этой фракции можно увидеть высокий почти моноклональный спайк (с несколько широким основанием), который может быть ошибочно интерпретирован как моноклональный иммуноглобулин.

Иктер

Icterus оказывает минимальное влияние или не влияет на гематологические результаты, включая белок плазмы, измеренный с помощью рефрактометрии (Gupta & Stockham 2014).

Помехи при химическом тестировании

Интерференция билирубина возникает из-за его спектральных свойств и его способности химически реагировать с другими реагентами (что приводит к снижению значений аналита). Это особенно влияет на концентрации креатинина и общего белка (Gupta & Stockham, 2014), которые снижаются при высоких концентрациях билирубина (> 15 и> 10 мг / дл общего билирубина, соответственно).

Кузова Heinz

У кошек с такими заболеваниями, как диабетический кетоацидоз, отравление луком и лимфома, большое количество телец Хайнца (> 50% из 1000 эритроцитов) может мешать спектрофотометрическим измерениям гемоглобина, ложно повышая концентрацию гемоглобина (HgB) по отношению к красной крови. количество клеток (RBC) и гематокрит (Hct), что приводит к ложному увеличению MCH (= HgB / RBC) и MCHC (= HgB / HCT). С гематологическими анализаторами на основе ADVIA количество лейкоцитов по умолчанию из анализатора (из канала базофилов) может быть ошибочно увеличено в редких случаях (Dondi et al 2019, Johnson et al 2020).У двух кошек с большим количеством крупных тел Хайнца ADVIA испытывал трудности с отличием ретикулоцитов от зрелых эритроцитов, что приводило к ложному снижению процента ретикулоцитов и абсолютному количеству ретикулоцитов (Johnson et al 2020). При использовании анализатора Sysmex XT-2000iV большое количество крупных тел Хайнца у одной кошки было связано с слегка ложно увеличенным количеством лейкоцитов и совокупностью событий между событиями эритроцитов и тромбоцитов в оптическом объеме клетки по флуоресцентному методу (с РНК-связыванием). краситель, полиметин) цитограмма тромбоцитов (тромбоциты-O), которая ложно увеличивала количество ретикулоцитов (% и абсолютное) и количество тромбоцитов (Johnson et al 2020).

Какова роль измерения гаптоглобина в сыворотке в диагностике гемолитической анемии?

  • Шах А. Приобретенная гемолитическая анемия. Индийский журнал J Med Sci . 2004 декабрь 58 (12): 533-6. [Медлайн]. [Полный текст].

  • Хейли К. Врожденная гемолитическая анемия. Мед Клин Норт Ам . 2017 Март 101 (2): 361-374. [Медлайн].

  • Coetzer TI. Нарушения мембран эритроцитов. Каушанский К., Лихтман М.А., Прчал Дж.Т., Леви М.М., Пресс О.В., Бернс Л.Дж., Калиджури М.А., ред. Гематология Вильямса . 9 изд. Нью-Йорк, Нью-Йорк: образование Макгроу-Хилл; 2016. 661-88.

  • Lichtman MA. Гемолитическая анемия в результате заражения микроорганизмами. Каушанский К., Лихтман М.А., Прчал Дж.Т., Леви М.М., Пресс О.В., Бернс Л.Дж., Калиджури М.А., ред. Гематология Вильямса . 9 изд. Нью-Йорк, Нью-Йорк: Образование Макгроу Хилл; 2016. 815-22.

  • Herrmann PC. Заболевания эритроцитов в результате действия химических и физических агентов.Каушанский К., Лихтман М.А., Прчал Дж.Т., Леви М.М., Пресс О.В., Бернс Л.Дж., Калиджури М.А., ред. Гематология Вильямса . 9 изд. Нью-Йорк, Нью-Йорк: образование Макгроу-Хилл; 2016. 809-14.

  • Сингх А., Мандал А., Патель А., Мишра С. Аутоиммунная гемолитическая анемия — спектр проявления у детей. J Clin Диагностика Рес . 2017 11 (9) сентября: SR01-SR02. [Медлайн]. [Полный текст].

  • Kong JT, Schmiesing C. Скрытое злоупотребление нафталином перед анестезией: нафталиновые шарики, ингалянты и их лечение. Acta Anaesthesiol Scand . 2005 Январь 49 (1): 113-6. [Медлайн].

  • ,

    переулок DR, Youse JS. Кумбс-положительная гемолитическая анемия, вторичная по отношению к укусу паука-отшельника: обзор литературы и обсуждение лечения. Кутис . 2004 декабрь 74 (6): 341-7. [Медлайн].

  • Packman CH, Leddy JP. Приобретенная гемолитическая анемия из-за аутоантител, реагирующих на тепло. Beutler E, Lichtman MA, Coller BS, Kipps TJ, eds. Гематология Вильямса .5-е изд. Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Макгроу Хилл; 1995. 667-84.

  • Gallagher PG. Нарушения мембран эритроцитов. Hoffman R, Benz EJ Jr, Silberstein LE, Heslop H, Weitz J, Anastasi J, ред. Гематология: основные принципы и практика . 6-е изд. Нью-Йорк, Нью-Йорк: Черчилль Ливингстон; 2013. 592-613.

  • Цена EA, Schrier SL. Внешние неиммунные гемолитические анемии. Hoffman R, Benz EJ Jr, Silberstein LE, Heslop H, Weitz J, Anastasi J, ред. Гематология: основные принципы и практика .6-е изд. Нью-Йорк, Нью-Йорк: Черчилль Ливингстон; 2013. 628-38.

  • Ягер У., Лехнер К. Аутоиммунная гемолитическая анемия. Hoffman R, Benz EJ Jr, Silberstein LE, Heslop H, Weitz J, Anastasi J, ред. Гематология: основные принципы и практика . 6-е изд. Нью-Йорк, Нью-Йорк: Черчилль Ливингстон; 2013. 614-17.

  • Berentsen S, Randen U, Tjønnfjord GE. Аутоиммунная гемолитическая анемия, опосредованная холодовыми агглютининами. Гематол Онкол Клин Норт Ам .2015 июн.29 (3): 455-71. [Медлайн].

  • Rink BD, Gonik B, Chmait RH, O’Shaughnessy R. Гемолиз матери после внутривенного введения иммуноглобулинов при аллоиммунной тромбоцитопении у плода и новорожденного. Акушерский гинекол . 2013 февраль 121 (2, часть 2, приложение 1): 471-3. [Медлайн].

  • Майер Б., Лео А., Херцигер А., Хубен П., Шеммер П., Салама А. Внутрисосудистый иммунный гемолиз, вызванный контрастным веществом иомепролом. Переливание крови .2013 24 января [Medline].

  • Ачарья Д., Макгиффин, округ Колумбия. Гемолиз после восстановления митрального клапана. J Card Surg . 2013 13 января. 1-4. [Медлайн].

  • Ренар Д., Росселе А. Лекарственная гемолитическая анемия: фармакологические аспекты. Трансфус Клин Биол . 2017 Сентябрь 24 (3): 110-114. [Медлайн].

  • Чиао Е.Ю., Энгельс Е.А., Крамер Дж. Р., Пиц К., Хендерсон Л., Джордано Т. П. и др. Риск иммунной тромбоцитопенической пурпуры и аутоиммунной гемолитической анемии среди 120 908 ветеранов США с вирусной инфекцией гепатита С. Арк Интерн Мед. . 2009 23 февраля. 169 (4): 357-63. [Медлайн]. [Полный текст].

  • Замвар В., МакКлин П., Одека Е., Ричардс М., Дэвисон С. Инфекция вируса гепатита Е с неиммунной гемолитической анемией. J Педиатр Гастроэнтерол Нутр . 2005 Февраль 40 (2): 223-5. [Медлайн].

  • Найк Р. Теплая аутоиммунная гемолитическая анемия. Гематол Онкол Клин Норт Ам . 2015 июн.29 (3): 445-53. [Медлайн].

  • Mayer B, Yürek S, Kiesewetter H, Salama A.Аутоиммунная гемолитическая анемия смешанного типа: дифференциальный диагноз и критический обзор зарегистрированных случаев. Переливание крови . 2008 окт. 48 (10): 2229-34. [Медлайн].

  • Hill A, Hill QA. Аутоиммунная гемолитическая анемия. Образовательная программа по гематологии и соц. Гематол . 2018 30 ноября 2018 (1): 382-389. [Медлайн].

  • Sanz J, Arriaga F, Montesinos P, Ortí G, Lorenzo I, Cantero S и др. Аутоиммунная гемолитическая анемия после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток у взрослых пациентов. Пересадка костного мозга . 2007 май. 39 (9): 555-61. [Медлайн].

  • Морейра М., Брас Р., Гонсалвес Д., Аленкоао И., Иноченсио Г., Родригес М. и др. Фетальная спленомегалия: обзор. Ультразвук Q . 2017 29 ноября. [Medline].

  • Джордж JN. Тромботическая тромбоцитопеническая пурпура и гемолитико-уремические синдромы: обзор патогенеза (Опыт Оклахомского реестра TTP-HUS, 1989-2007). Почки Интенсивное .2009 Февраль S8-S10. [Медлайн].

  • Lechner K, Obermeier HL. Микроангиопатическая гемолитическая анемия, связанная с раком: клинические и лабораторные особенности в 168 зарегистрированных случаях. Медицина (Балтимор) . 2012 июл.91 (4): 195-205. [Медлайн].

  • Либман HA, Weitz IC. Аутоиммунная гемолитическая анемия. Мед Клин Норт Ам . 2017 Март 101 (2): 351-359. [Медлайн].

  • Audia S, Bach B, Samson M, Lakomy D, Bour JB, Burlet B и др.Венозные тромбоэмболические события при теплой аутоиммунной гемолитической анемии. PLoS Один . 2018.13 (11): e0207218. [Медлайн]. [Полный текст].

  • Серегина Е.А., Полетаев А.В., Бондарь Е.В., Вуймо Т.А., Атауллаханов Ф.И., Сметанина Н.С. Система гемостаза у детей с наследственным сфероцитозом. Тромб Рес . 2019 5 февраля. 176: 11-17. [Медлайн].

  • Quintanilla-Bordás C, Castro-Izaguirre E, Carcelén-Gadea M, Marín M. Первый зарегистрированный случай лекарственно-индуцированной гемолитической анемии, вызванной диметилфумаратом, у пациента с рассеянным склерозом. Переливание крови . 2019 31 января. [Medline].

  • Фелан М.П., ​​Рейнекс Э.З., Берриочоа Дж. П., Шольд Д. Д., Хусти Ф. М., Чемберлин Дж. И др. Влияние использования вакуумных пробирок для забора крови меньшего объема и меньшего объема на гемолиз в образцах крови из отделения неотложной помощи. Ам Дж. Клин Патол . 2017 г. 1. 148 (4): 330-335. [Медлайн].

  • Дхингра К.К., Джайн Д., Мандал С., Хурана Н., Сингх Т., Гупта Н. Синдром Эванса: исследование шести случаев с обзором литературы. Гематология . 2008 г. 13 (6): 356-60. [Медлайн].

  • Гарратти Г. Иммунная гемолитическая анемия, связанная с отрицательными стандартными серологическими исследованиями. Семин Гематол . 2005 июл. 42 (3): 156-64. [Медлайн].

  • Камесаки Т., Оямада Т., Омине М., Одзава К., Каджи Э. Пороговое значение связанного с эритроцитами IgG для диагностики аутоиммунной гемолитической анемии, отрицательной по Кумбсу. Ам Дж. Гематол . 2009 Февраль 84 (2): 98-101. [Медлайн]. [Полный текст].

  • Kamesaki T, Toyotsuji T, Kajii E. Характеристика прямой отрицательной антиглобулиновой аутоиммунной гемолитической анемии: исследование 154 случаев. Ам Дж. Гематол . 2013 Февраль 88 (2): 93-6. [Медлайн].

  • Moraes ML, Lima LR, Vicentini-Oliveira JC, de Souza AVG, Oliveira ON, Deffune E, et al. Иммуносенсор для диагностики аутоиммунной гемолитической анемии (AIHA) на основе иммобилизации моноклональных антител на слое фиброина шелка. Дж. Наноси Нанотехнологии . 1 июля 2019 г. 19 (7): 3772-3776. [Медлайн].

  • Феррер Г., Наварро А., Ходжсон К. и др. Экспрессия микроРНК при хроническом лимфолейкозе с развитием аутоиммунной гемолитической анемии. Лимфома лейк . 2013 29 января. [Medline].

  • Юбински П.Т., Рашид Н. Успешное лечение пациента с синдромом Эванса, опосредованным смешанными теплыми и холодными антителами, и непереносимостью глюкозы. Рак крови у детей .2005 Сентябрь 45 (3): 347-50. [Медлайн].

  • Birgens H, Frederiksen H, Hasselbalch HC, Rasmussen IH, Nielsen OJ, Kjeldsen L, et al. Рандомизированное исследование фазы III, сравнивающее монотерапию глюкокортикоидами с глюкокортикоидами и ритуксимабом у пациентов с аутоиммунной гемолитической анемией. Br J Haematol . 2013 ноябрь 163 (3): 393-9. [Медлайн].

  • Go RS, Винтерс JL, Кей NE. Как я лечу аутоиммунную гемолитическую анемию. Кровь . 2017 июн 1.129 (22): 2971-2979. [Медлайн].

  • Berentsen S, Tjønnfjord GE. Диагностика и лечение аутоиммунной гемолитической анемии, опосредованной холодовыми агглютининами. Кровь Ред. . 2012 май. 26 (3): 107-15. [Медлайн].

  • Dierickx D, Kentos A, Delannoy A. Роль ритуксимаба у взрослых с аутоиммунной гемолитической анемией с тепловыми антителами. Кровь . 2015 21 мая. 125 (21): 3223-9. [Медлайн]. [Полный текст].

  • Маклеод К., Флиман Н., Киркхэм Дж., Багуст А., Боланд А., Чу П. и др.Деферасирокс для лечения перегрузки железом, связанной с регулярными переливаниями крови (трансфузионный гемосидероз) у пациентов, страдающих хронической анемией: систематический обзор и экономическая оценка. Оценка медицинских технологий . 2009 13 января (1): iii-iv, ix-xi, 1-121. [Медлайн]. [Полный текст].

  • Берк-младший. Низкие дозы подкожного рекомбинантного эритропоэтина у детей с хронической почечной недостаточностью. Ассоциация педиатрической нефрологии Австралии и Новой Зеландии. Педиатр Нефрол . 1995 Октябрь 9 (5): 558-61. [Медлайн].

  • Арбах О., Функ Р., Зайбт Ф., Салама А. Эритропоэтин может улучшить анемию у пациентов с аутоиммунной гемолитической анемией, связанной с ретикулоцитопенией. Transfus Med Hemother . 2012 июн. 39 (3): 221-223. [Медлайн]. [Полный текст].

  • Schettler V, Wieland E. Отчет о случае лечения дарбэпоэтином пациента с серповидноклеточной анемией и хронической почечной недостаточностью, подвергающимся регулярным процедурам гемодиализа, которые вызывают дозозависимое увеличение интервалов переливания крови. Циферблат Тер Афера . 2009 Февраль 13 (1): 80-2. [Медлайн].

  • Болл AM, Уинстед ПС. Терапия рекомбинантным человеческим эритропоэтином у тяжелобольных Свидетелей Иеговы. Фармакотерапия . 2008 28 ноября (11): 1383-90. [Медлайн].

  • Tchernia G, Delhommeau F, Perrotta S, Cynober T., Bader-Meunier B, Nobili B и др. Терапия рекомбинантным эритропоэтином как альтернатива переливанию крови младенцам с наследственным сфероцитозом. Гематол Дж . 2000. 1 (3): 146-52. [Медлайн].

  • Хосоно С., Хосоно А., Мугишима Х., Накано И., Минато М., Окада Т. и др. Успешная терапия рекомбинантным эритропоэтином для новорожденных с анемией и наследственным сфероцитозом. Педиатр Интерн. . 2006 апр. 48 (2): 178-80. [Медлайн].

  • Моррисон Дж. Ф., Нойфельд Е. Дж., Грейс РФ. Использование средств, стимулирующих эритропоэтин, по сравнению с поддерживающей терапией у новорожденных с наследственным сфероцитозом: опыт единого центра. евро J Haematol . 2014 августа 93 (2): 161-4. [Медлайн]. [Полный текст].

  • Balestracci A, Martin SM, Toledo I, Alvarado C, Wainsztein RE. Ранний эритропоэтин при постдиарейном гемолитико-уремическом синдроме: исследование случай-контроль. Педиатр Нефрол . 2014 21 августа [Medline].

  • Наирц М., Зоннвебер Т., Шролл А., Терл I, Вайс Г. Плейотропные эффекты эритропоэтина при инфекции и воспалении. Микробы заражают .2012 марта, 14 (3): 238-46. [Медлайн]. [Полный текст].

  • Бьенвеню А.Л., Пико С. Церебральная малярия: защита эритропоэтином. Методы Мол Биол . 2013. 982: 315-24. [Медлайн].

  • Гамильтон Дж. У., Джонс Ф. Г., МакМуллин М. Ф. Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа Гвадалахара — случай хронической несфероцитарной гемолитической анемии в ответ на спленэктомию и роль спленэктомии в этом заболевании. Гематология . 2004 9 августа (4): 307-9.[Медлайн].

  • Reynaud Q, Durieu I., Dutertre M, Ledochowski S, Durupt S, Michallet AS, et al. Эффективность и безопасность ритуксимаба при аутоиммунной гемолитической анемии: метаанализ 21 исследования. Аутоиммунная версия . 2015 Апрель 14 (4): 304-13. [Медлайн].

  • Как диагностируется гемолитическая анемия? | HOA

    Ваш врач диагностирует гемолитическую анемию на основании вашего медицинского и семейного анамнеза, медицинского осмотра и результатов анализов.

    Привлечено специалистов

    Врачи первичного звена, например семейный врач или педиатр, могут помочь диагностировать и лечить гемолитическую анемию.Ваш лечащий врач также может направить вас к гематологу. Это врач, специализирующийся на диагностике и лечении заболеваний и расстройств крови.

    Также могут быть задействованы врачи и клиники, специализирующиеся на лечении наследственных заболеваний крови, таких как серповидноклеточная анемия и талассемия.

    Если ваша гемолитическая анемия передается по наследству, вы можете проконсультироваться с генетическим консультантом. Консультант может помочь вам понять ваш риск рождения ребенка с этим заболеванием. Он или она также может объяснить доступные вам варианты.

    Медицинские и семейные истории

    Чтобы выяснить причину и степень тяжести гемолитической анемии, ваш врач может задать подробные вопросы о ваших симптомах, личной истории болезни и истории болезни вашей семьи.

    Он или она может спросить:

    • У вас или у кого-либо из членов вашей семьи были проблемы с анемией
    • Вы недавно перенесли какое-либо заболевание или заболевание
    • Какие лекарства Вы принимаете, а какие
    • Вы подверглись воздействию определенных химикатов или веществ
    • У вас есть искусственный сердечный клапан или другое медицинское устройство, которое может повредить ваши эритроциты

    Физический осмотр

    Ваш врач проведет медицинский осмотр, чтобы проверить наличие признаков гемолитической анемии.Он или она попытается выяснить, насколько серьезно это состояние и что его вызывает.

    Экзамен может включать:

    • Проверка на желтуху (желтоватый цвет кожи или белков глаз)
    • Прослушивание своего сердца на предмет учащенного или нерегулярного сердцебиения
    • Прослушивание учащенного или неравномерного дыхания
    • Пощупывание живота, чтобы проверить размер селезенки
    • Проведение тазового и ректального исследования на предмет внутреннего кровотечения

    Диагностические тесты и процедуры

    Многие тесты используются для диагностики гемолитической анемии.Эти тесты могут помочь подтвердить диагноз, найти причину и выяснить, насколько серьезным является состояние.

    Общий анализ крови

    Часто первым тестом, используемым для диагностики анемии, является общий анализ крови (ОАК). Общий анализ крови измеряет многие части вашей крови.

    Этот тест проверяет уровень гемоглобина и гематокрита (hee-MAT-oh-crit). Гемоглобин — это богатый железом белок в красных кровяных тельцах, который переносит кислород в организм. Гематокрит — это показатель того, сколько красных кровяных телец занимают в вашей крови.Низкий уровень гемоглобина или гематокрита — признак анемии.

    Нормальный диапазон этих уровней может варьироваться в зависимости от расовых и этнических групп населения. Ваш врач может объяснить вам результаты ваших анализов.

    Общий анализ крови также проверяет количество эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов в вашей крови. Аномальные результаты могут быть признаком гемолитической анемии, другого заболевания крови, инфекции или другого состояния.

    Наконец, общий анализ крови смотрит на средний корпускулярный (кор-ПУС-кюляр) объем (MCV).MCV — это мера среднего размера ваших эритроцитов. Результаты могут указывать на причину вашей анемии.

    Другие анализы крови

    Если результаты общего анализа крови подтверждают наличие у вас анемии, вам могут потребоваться другие анализы крови, чтобы выяснить, какой у вас тип анемии и насколько она серьезна.

    Количество ретикулоцитов. Подсчет ретикулоцитов (re-TIK-u-lo-site) измеряет количество молодых эритроцитов в крови. Тест показывает, вырабатывает ли ваш костный мозг эритроциты с правильной скоростью.

    Люди, страдающие гемолитической анемией, обычно имеют высокое количество ретикулоцитов, потому что их костный мозг усердно работает, чтобы заменить разрушенные эритроциты.

    Мазок периферической крови. Для этого теста ваш врач посмотрит на ваши эритроциты через микроскоп. Некоторые виды гемолитической анемии изменяют нормальную форму эритроцитов.

    Тест Кумбса. Этот тест может показать, вырабатывает ли ваше тело антитела (белки) для разрушения эритроцитов.

    Гаптоглобин, билирубин и функциональные тесты печени. При разрушении эритроцитов они выделяют гемоглобин в кровоток. Гемоглобин соединяется с химическим веществом, называемым гаптоглобином. Низкий уровень гаптоглобина в кровотоке — признак гемолитической анемии.

    Гемоглобин расщепляется на соединение, называемое билирубином. Высокий уровень билирубина в кровотоке может быть признаком гемолитической анемии. Высокий уровень этого соединения также наблюдается при некоторых заболеваниях печени и желчного пузыря.Таким образом, вам могут потребоваться функциональные тесты печени, чтобы выяснить, что вызывает высокий уровень билирубина.

    Электрофорез гемоглобина. Этот тест проверяет различные типы гемоглобина в крови. Это может помочь диагностировать тип анемии, который у вас есть.

    Обследование на пароксизмальную ночную гемоглобинурию (ПНГ). При ПНГ в красных кровяных тельцах отсутствуют определенные белки. Тест на ПНГ может обнаружить эритроциты, в которых отсутствуют эти белки.

    Тест на осмотическую хрупкость. Этот тест ищет более хрупкие эритроциты, чем обычно. Эти клетки могут быть признаком наследственного сфероцитоза (наследственный тип гемолитической анемии).

    Тестирование на дефицит глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (G6PD) . При дефиците G6PD в красных кровяных тельцах отсутствует важный фермент, называемый G6PD. Тест на дефицит G6PD ищет этот фермент в образце крови.

    Анализ мочи

    Анализ мочи будет определять наличие свободного гемоглобина (белка, переносящего кислород в кровь) и железа.

    Анализы костного мозга

    Анализы костного мозга показывают, здоров ли ваш костный мозг и производит ли оно достаточное количество клеток крови. Два исследования костного мозга — это аспирация (as-pi-RA-shun) и биопсия.

    Для аспирации костного мозга ваш врач удаляет небольшое количество жидкости костного мозга через иглу. Образец исследуют под микроскопом, чтобы проверить наличие дефектных клеток.

    Биопсия костного мозга может быть сделана одновременно с аспирацией или после нее. Для этого теста ваш врач удаляет небольшое количество ткани костного мозга через иглу.Ткань исследуется, чтобы проверить количество и тип клеток в костном мозге.

    Вам могут не понадобиться анализы костного мозга, если анализы крови показывают причину гемолитической анемии.

    Тесты на другие причины анемии

    Поскольку у анемии много причин, вам могут быть предложены тесты на такие состояния, как:

    • Почечная недостаточность
    • Отравление свинцом
    • Дефицит витаминов или железа

    Тестирование новорожденных на серповидно-клеточную анемию и дефицит G6PD

    Все штаты требуют скрининга на серповидно-клеточную анемию как часть своих программ скрининга новорожденных.Некоторые государства также требуют проверки на дефицит G6PD. Эти унаследованные типы гемолитической анемии можно обнаружить с помощью обычных анализов крови.

    Как можно раньше диагностировать эти состояния, чтобы дети могли получить надлежащее лечение.

    Источник: Национальный институт сердца, легких и крови, Национальные институты здравоохранения.

    Определение порога гемолиза, повышающего концентрацию цинка в плазме и сыворотке.

    Abstract

    Предпосылки: Концентрация цинка в плазме или сыворотке (PZC или SZC) является основным показателем статуса цинка, но для точного отбора проб необходимо контролировать гемолиз, чтобы предотвратить утечку цинка из эритроцитов.Не установлено, сколько гемолиза может происходить без изменения концентраций PZC / SZC. Цель: Это исследование определяет уровень гемолиза, который может значительно повысить уровень PZC / SZC. Методы: Эффект гемолиза на PZC / SZC оценивался с использованием стандартных гематологических переменных и содержания минералов. Затем рассчитанный порог гемолиза сравнивали с результатами исследования in vitro и опроса населения. Гемолиз оценивали с помощью концентраций гемоглобина и железа, прямой спектрофотометрии и визуальной оценки плазмы или сыворотки.Концентрации цинка и железа определяли спектрометрией с индуктивно связанной плазмой. Результаты: Было подсчитано, что 5% -ное увеличение PZC / SZC является результатом лизиса 1,15% эритроцитов в цельной крови, что соответствует ~ 1 г гемоглобина / л, добавленному в плазму или сыворотку. Точно так же добавление искусственного гемолизата к контрольной плазме in vitro вызывало 5% -ное увеличение PZC, когда концентрация гемоглобина достигала 1,18 ± 0,10 г / л. Кроме того, образцы сыворотки из обследования питания населения были оценены на гемолиз и проанализированы на предмет изменений в SZC; образцы с гемолизом в пределах 1-2.5 г гемоглобина / л показали предполагаемое увеличение SZC на 6% по сравнению с негемолизированными образцами. Каждый подход показал, что увеличение PZC / SZC на 5% происходит при ~ 1 г гемоглобина / л в плазме или сыворотке. Эту концентрацию гемоглобина можно легко определить непосредственно с помощью химического анализа гемоглобина или косвенно с помощью прямой спектрофотометрии или сопоставления с цветовой шкалой. Выводы: Пороговое значение гемоглобина 1 г / л рекомендуется для измерений PZC / SZC, чтобы избежать увеличения содержания цинка, вызванного гемолизом.Использование этого порогового значения может улучшить оценку цинка для мониторинга статуса цинка и вмешательств в отношении питания.

    Многие научные публикации, созданные UC, находятся в свободном доступе на этом сайте из-за политики открытого доступа UC. Сообщите нам, насколько этот доступ важен для вас.

    Основное содержание

    Загрузить PDF для просмотраПросмотреть больше

    Дополнительная информация Меньше информации

    Закрывать

    Введите пароль, чтобы открыть этот PDF-файл:

    Отмена Ok

    Подготовка документа к печати…

    Отмена

    .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *