Как применять арбидол взрослым: Арбидол инструкция по применению: показания, противопоказания, побочное действие – описание Arbidol капс. 100 мг: 5, 10, 20 или 40 шт. (3331)

Содержание

Арбидол® Максимум — капсулы, 200 мг, инструкция, способ применения и дозы, побочные действия, отзывы о препарате — Энциклопедия лекарств РЛС

Внутрь, до приема пищи. Разовая доза взрослым и детям старше 12 лет — 200 мг (1 капс.).

Для неспецифической профилактики и лечения гриппа и других ОРВИ

Неспецифическая профилактика гриппа и других ОРВИ

— в период эпидемии гриппа и других ОРВИ — 200 мг (1 капс.) 2 раза в неделю в течение 3 нед;

— при непосредственном контакте с больными гриппом и другими ОРВИ — 200 мг (1 капс.) 1 раз в день в течение 10–14 дней.

Лечение гриппа и других ОРВИ

— при неосложненном течении — 200 мг (1 капс.) 4 раза в сутки (каждые 6 ч) в течение 5 сут;

— при развитии осложнений (бронхит, пневмония и др.) — 200 мг (1 капс.) 4 раза в сутки (каждые 6 ч) в течение 5 сут, затем разовую дозу 1 раз в неделю в течение 4 нед.

Комплексная терапия острых кишечных инфекций ротавирусной этиологии у детей старше 12 лет — 200 мг (1 капс.

) 4 раза в сутки (каждые 6 ч.) в течение 5 сут.

Для неспецифической профилактики и лечения тяжелого острого респираторного синдрома (ТОРС)

— неспецифическая профилактика ТОРС (при контакте с больным) — 200 мг (1 капс.) 1 раз в день в течение 12–14 дней;

— лечение ТОРС — 200 мг (1 капс.) 2 раза в день в течение 8–10 сут.

В комплексной терапии хронического бронхита, пневмонии и герпетической инфекции — 200 мг (1 капс.) 4 раза в сутки (каждые 6 ч) в течение 5–7 сут, затем разовую дозу 2 раза в неделю в течение 4 нед.

Профилактика послеоперационных осложнений —200 мг (1 капс.) за 2 сут. до операции, затем на 2-е и 5-е сут после операции.

Капсулы, 200 мг. По 10 капс. в контурной ячейковой упаковке из пленки ПВХ и фольги алюминиевой печатной лакированной.

1 или 2 контурные упаковки помещают в пачку из картона.

ОАО «Фармстандарт-Лексредства». 305022, Россия, Курск, ул. 2-я Агрегатная, 1а/18.

Тел. /факс: (4712) 34-03-13.

www.pharmstd.ru

www.arbidol.ru

Лотошинская ЦРБ

Специфическая профилактика гриппа и ОРВИ зачастую оказывается неэффективной, поскольку не всегда производители вакцин способны предугадать мутацию циркулирующего вируса. Поэтому в качестве мер дополнительной профилактики гриппа и ОРВИ рекомендуется использовать некоторые препараты и лекарственные средства. О них вы сможете узнать из этого материала.

Меры профилактики гриппа и ОРВИ

Меры профилактики гриппа и ОРВИ включают в себя повышение защитных сил организма. После перенесенного гриппа, как известно, страдает иммунная система. Часто возникает повторное инфицирование бактериями или другими вирусами.

Как быстро восстановить иммунитет? Восстановить работу иммунной системы помогут любые витаминные комплексы, а также препараты, действие которых направлено на стимулирование иммунитета (ликопид, иммунал и другие).

Чтобы справиться с интоксикацией в период болезни и после, нужно пить больше жидкости: соков, компотов, морсов и т. д. Пользу принесут также живые натуральные витамины, которые содержатся в свежих овощах, фруктах, зелени, проростках, кисломолочных продуктах.

Профилактика ОРВИ заболеваний

Профилактика ОРВИ заболеваний включает в себя и правила личной гигиены.

1. Если кто-то в семье начал чихать, не дожидайтесь, когда и у вас потечет из носа. Немедленно приступайте к профилактике.

2. Во время эпидемии гриппа желательно принимать аскорбиновую кислоту.

3. Профилактический курс ремантадина, арбидола или лейкоцитарного интерферона значительно снизит риск заражения вирусной инфекцией.

4. Если приходится ухаживать за больным членом семьи, то в течение 5 дней болезни защитите себя трехслойной марлевой маской. И обязательно проветривайте комнату не менее 2 раза в день, а можно и чаще.

Препараты для профилактики гриппа и ОРВИ

Противовирусные препараты применяются для профилактики и лечения ОРВИ, гриппа. Эти средства призваны помочь иммунной системе противостоять инфекции. Рассмотрим препараты для профилактики гриппа.

Из современных противовирусных препаратов хорошо зарекомендовали себя тамифлю, реленза, арбидол, анаферон, кагоцел, римантадин, агри, гриппферон, интерферон, оциллококцинум. Эти лекарства отличаются друг от друга составом, способом действия и дозировкой.

Например, препарат тамифлю имеет доказанную эффективность против свиного гриппа. Для профилактики вирусных инфекций применяется по 75 мг в течение 4—6 недель.

Реленза представляет собой ингалятор, что не совсем подходит для аллергиков, астматиков и детей, склонных к частым ларингитам и фарингитам. Кроме того, при ингаляции важно правильно делать вдох, поэтому маленьким детям это средство лучше не использовать.

Эти препараты можно использовать для профилактики ОРВИ.

Средства для профилактики гриппа

Для профилактики гриппа средства нужно выбирать еще более тщательно.

Самый распространенный отечественный препарат арбидол, к сожалению, не имеет научно доказанных исследований, хотя у россиян он считается эффективным противовирусным средством. Также замечено, что польза арбидола повышается, если применять его одновременно с кагоцелом.

Кагоцел стимулирует выработку у человека собственного интерферона в организме, способствуя, таким образом, борьбе с вирусом. Однако у детей до 6 лет препарат не применяется, так как может внести дисбаланс в несовершенную иммунную систему маленького ребенка.

Римантадин необходимо строго рассчитывать по весу, и он непосредственно защищает от вируса гриппа. Но это средство плохо влияет на печень.

Анаферон, агри, оциллококцинум, афлубин являются гомеопатическими препаратами комплексного действия и способствуют повышению защитных сил организма. Принимать их надо с осторожностью, потому как возможна индивидуальная непереносимость.

Лекарство для профилактики гриппа и ОРВИ

Существуют и другие лекарства для профилактики гриппа.

Оксолиновая мазь — это один из первых противовирусных препаратов, появившихся на российском рынке. Сейчас применяется в основном для профилактики. Мазь необходимо закладывать в нос 2 раза в день.

Интерферон наряду с оксолинкой также «ветеран» российского фармацевтического рынка. Его неоспоримый плюс — низкая цена, но широкомасштабных исследований по его эффективности не проводилось.

Виферон (в свечах) используется с первых часов болезни, губительно действуя на вирусы и положительно — на иммунитет. Его применяют, начиная с грудного возраста и вплоть до старости.

Гриппферон — рекомбинантный, то есть синтетический интерферон, является более надежным и безопасным. Для профилактики его закапывают в нос 2 раза в день, для лечения — 5 раз в день.

Гриппферон закапывается в нос и применяется в основном для лечения. Но препарат может быть использован и для профилактики (не на протяжении всей эпидемии, а только на время тесного контакта с больным — как правило, около 5 дней). Гриппферон можно закапывать всем: и взрослым, и детям (старше 1 года). Это лекарство для профилактики ОРВИ можно использовать по такой же схеме.

 

Также необходимо иметь в аптечке жаропонижающие средства: парацетамол (наиболее предпочтителен), аспирин (не давать маленьким детям!), нурофен, анальгин.

ТОП 16 противовирусных препаратов — рейтинг хороших средств 2021

Вирусные инфекции не только доставляют массу неудобств, но и увеличивают риск развития осложнений в виде бронхита или пневмонии, негативно отражающихся на здоровье и еще хуже, приводящих к летальному исходу. Антибиотики неэффективны против вирусных инфекций. Их прием возможен только при присоединении бактериальной флоры при ОРВИ или гриппе.

При сезонных эпидемиях назначаются лекарства, которые также эффективны против герпеса, гепатита и ВИЧ. Мы предлагаем рейтинг, который поможет разобраться, какое противовирусное средство лучше купить. Обратите внимание, что он носит исключительно рекомендательный характер и не может быть рассмотрен в качестве основы для приобретения медикаментов. Предварительная консультация с врачом является обязательной.

Классификация противовирусных препаратов

Какое лекарство лучше принимать, зависит от особенностей заболевания. Для начал следует изучить классификацию по принципу действия:

  • Прямое. Активные вещества, входящие в состав, оказывают воздействие непосредственно на сам вирус.
  • Непрямое. Иммуномодуляторы активизируют защитные функции организма. Являются более эффективными.

Вирус представляет собой неклеточный инфекционный агент, который может размножаться исключительно в живых клетках. При проникновении в организм человека его активность начинается не сразу. До момента «активации» вирионы (вирусные частицы) можно уничтожить путем разрушения белковой оболочки.

В соответствии с принципом борьбы лекарства против вирусов делят на те, которые:

  • Препятствуют размножению. Подавляют активность вируса, обладая схожим эффектом с нуклеиновыми кислотами.
  • Блокируют активные белки. Проникают через клеточную оболочку вирионов, уничтожая вирусные частицы.

Многие считают, что такие медикаменты имеют эффект «плацебо», т. к. результат замечают не все. Это связано с неправильным выбором препарата или с тем, что лечение было начато слишком поздно. Каждое средство разрабатывается для борьбы с конкретным вирусом, что обязательно нужно учитывать при выборе.


Причины развития вирусных заболеваний

Существуют следующие группы вирусных заболеваний, которые разделены в зависимости от органа и системы, пораженного патогенными микроорганизмами:

  • Респираторные (ОРЗ) – поражение слизистых органов дыхания. Чаще всего развиваются у детей, пожилых людей и лиц с ослабленным иммунитетом.
  • Желудочно-кишечные – инфицирование системы пищеварения (ротавирус чаще всего наблюдается у детей, коронавирус и аденовирус у новорожденных, норовирус у взрослых и подростков, астровирус у детей до 3-х лет).
  • Кожи и слизистых оболочек – возникают при инфицировании ВПЧ и герпеса при контакте здорового человека с больным.
  • Печени – к этой группе можно отнести желтую лихорадку, Эпштейн-Барр и гепатит.

Вирусными заболеваниями можно заразиться воздушно-капельным путем, через предметы быта, парентерально (через кровь). Также инфицирование может происходить трансплацентарно (при беременности и во время родов).

Рейтинг противовирусных препаратов

В ТОПе представлен список лучших средств для взрослых и детей. Для каждого медикамент даны основные характеристики, преимущества и недостатки (при наличии).

№1 – «Арбидол Максимум» (капсулы)


Возглавляет рейтинг. Разработан на основе умифеновира гидрохлорида, который специфически подавляет in vitro вирусы, а также возбудители острых респираторных инфекций.

Особенности заключаются в следующем:

  • предотвращает проникновение патогена в клетки организма человека;
  • обладает умеренным иммуномодулирующим действием;
  • оказывает интерферон-индуцирующую активность.

Терапевтическая эффективность заключается в уменьшении длительности и тяжести течения заболевания. «Арбидол Максимум» облегчает симптомы и снижает риск осложнений.

№2 – «Арбидол» (капсулы)

Хороший противовирусный препарат назначается для профилактики и лечения ОРВИ у взрослых и детей. Используется в комплексной терапии ротавирусных инфекций острого типа, бронхита, пневмонии и герпеса. В целях профилактики показан для предупреждения инфекционных осложнений после хирургического вмешательства.
«Арбидол» — лучший вариант для детей в возрасте от 6 лет и старше. Случаи передозировки отмечены не были. Среди побочных реакций в редких случаях отмечается возникновение аллергической реакции.

№3 – «Тамифлю» (капсулы)

Активное вещество – осельтамивира фосфат (пролекарство). Активный метаболит эффективен против вируса гриппа А и В. Предотвращает проникновение патогена в эпителиальные клетки дыхательных путей, исключая дальнейшее распространение в организме.
«Тамифлю» сокращает время выделения вируса из организма и способствует смягчению симптомов. Принимать можно детям в возрасте от 1 года для профилактики и лечения.

№4 – «Амиксин» (таблетки)

Незаменим против широкого спектра болезней вирусной этиологии (туберкулез, гепатит, хламидийные инфекции, герпес, пневмония и пр.). Представляет сбой низкомолекулярный синтетический индуктор интерферона.
Основан на ингибировании трансляции вирус-специфических белков. В результате наблюдается подавление репродукции патогена в инфицированных клетках. Биодоступность «Амиксина» составляет 60%.

№5 – «Ингавирин» (капсулы)

Хороший противовирусный препарат при простуде, который также обладает противовоспалительным эффектом. Результативен в отношении, парагриппа, аденовируса, коронавируса и пр.
Эффективность заключается в следующем:

  • ускоряет элиминацию патогена;
  • уменьшает длительность заболевания;
  • снижает риск возможных осложнений.

«Ингавирин» работает на уровне инфицированных клеток, стимулируя факторы врожденного иммунитета. В крови повышает уровень интерферона до физиологических границ, стимулируя способность лейкоцитов. Имеет низкий уровень токсичности и высокий профиль безопасности.

№6 – «Кагоцел» (таблетки)

Активное вещество представлено натриевой солью сополимера, которая способствует образованию поздних интерферонов, принимающих участие в ответе организма. Преимуществом является отсутствие токсичности, мутагенности и тератогенности.
«Кагоцел» является лучшим лекарством от гриппа для взрослых и детей от 3-х лет. В случае передозировки достаточно обеспечить обильное питье и вызвать рвоту. В сочетании с антибиотиками дает аддитивный эффект (взаимное усиление).

№7 – «Лавомакс» (таблетки в оболочке)

Содержит тилорон, который является активным индуктором синтеза интерферона. Обладает иммуномодулирующим действием и подавляет репродукцию патогенных клеток.

Назначается при цитомегаловирусе, остром гепатите, ветряной оспе, опоясывающем лишае. Также эффективен при гриппе, острых инфекций верхних дыхательных путей и пр. Ингибирует трансляцию вирус-специфических белков в инфицированных клеточных структурах, подавляя репродукцию вирусов.

№8 – «Нобазит» (таблетки в пленочной оболочке)

Активное вещество – энисамия йодид, является индуктором синтеза интерферонов. Эффективно подавляет возбудителей различных инфекций за счет того, что оказывает непосредственное влияние на проникновение вирусов через мембраны клеточных структур.

Особенности «Нобазита»:

  • в 3-4 раза повышает концентрацию эндогенного интерферона в плазме крови;
  • увеличивает резистентность организма к различным вирусам;
  • снижает симптоматику и сокращает длительность болезни.

Хороший и недорогой противовирусный препарат назначается в комплексной терапии (усиливает иммуномодуляторы и антибиотики).

№9 – «Триазавирин» (капсулы)

Разработан на основе синтетического аналога пуриновых нуклеозидов. Эффективен против РНК-содержащих вирусов. Выступает в роли ингибитора синтеза вирусных РНК и репликатора геномных ферментов.

В случае необходимости назначается вместе с симптоматическими средствами. Принимать следует с осторожностью, т. к. существует вероятность передозировки. При беременности не назначается.

№10 – «Эргоферон» (таблетки рассасываемые)

Хорошие противовирусные таблетки оказывают противовоспалительное, антигистаминное, иммуномодулирующее действие. Эффективность «Эргоферона» клинически и экспериментально доказана. Активные вещества обладают единым механизмом, повышая функциональную активность рецепторов, вызывая выраженный иммунотропный ответ.

«Эргоферон» — лучший противовирусный препарат от гриппа, коронавируса пр. Принимать можно детям с 6-месячного возраста. При необходимости сочетается с симптоматическими средствами.

№11 – «Виферон» (гель для наружного и местного применения)

В состав входит интерферон альфа-2b (рекомбинантный человеческий). Предназначен для наружного применения. Дополнительно обладает антипролиферативным и иммуномодулирующим свойством.

Благодаря гелевой основе обеспечивается пролонгированное действие. Используется преимущественно в составе комплексной терапии.

№12 – «Гриппферон» (назальный спрей)

Средство используется для местного применения. Назначается для лечения и профилактики ОРВИ и гриппа у взрослых и детей. Не рекомендуется сочетать с каплями, обладающими сосудосуживающим действием.

Спрей «Гриппферон» допустимо использовать при беременности и в период грудного вскармливания. Среди побочных реакций – местные аллергические.

№13 – «Арепливир» (таблетки)

Содержит фавипиравир, обладающий активностью против новой коронавирусной инфекции COVID-19. Механизм заключается в избирательном ингибировании РНК-зависимой РНК-полимеразы, которые участвуют в репликации вируса.

Назначается для лечения коронавирусной инфекции, вызванной SARS-CoV-2. Лучший противовирусный препарат при ковиде показан к приему после лабораторного подтверждения диагноза при наличии характерной клинической картины. При беременности не используется, т. к. вызывает гибель эмбриона.

№14 – «Ингарон» (лиофилизат для приготовления раствора)

Содержит интерферон гамма, который вызывает ярко выраженную иммунную активность. Используется интраназально. Назначается для лечения гепатита С и В, СПИД/ВИЧ, туберкулеза легких, и пр. Беременным женщинам принимать противопоказан. Назначается детям старше 7 лет.

№15 – «Циклоферон» (таблетки с кишечнорастворимой оболочкой)

Содержит меглюмина акридонацетат, который представляет собой индуктор синтеза интерферонов. Эффективен против герпеса, гриппа и ОРИ.
Имеет широкий спектр биологической активности:

  • противовоспалительная;
  • иммуномодулирующая;
  • противовирусная.

«Циклоферон» подавляет вирус на ранних сроках (от 1 до 5 дней) инфицирования, повышая резистентность организма относительно бактериальных и вирусных инфекций.

№16 – «Римантадин Актитаб» (таблетки)

Используется в целях профилактики и лечения гриппа А у детей и взрослых. Является производным адамантана. Следует принимать с осторожностью т. к. возможно развитие побочных реакций.

При терапии «Римантадином» возможно обострение хронических заболеваний. Профилактический прием рекомендован после контакта с заболевшими людьми для предотвращения распространения инфекции.

Выводы

Рейтинг противовирусных препаратов по эффективности 2021 года включает средства от таких фирм, как Оболенское ФП (Россия), Фармаклон НПП (Россия), Italfarmaco (Италия) и др. Производители рекомендуют соблюдать рекомендации по приему, указанные в инструкции по применению.

Самое лучшее лекарство поможет выбрать врач после проведения комплексного обследования. Самолечение при вирусных заболеваниях недопустимо. Рейтинг противовирусных препаратов предложен для получения общей информации, а не в рекомендательных целях.

Список литературы:
https://www.vidal.ru/drugs/clinic-group/234
https://www.rlsnet.ru/fg_index_id_630.htm
https://www.eurolab-portal.ru/medicine/drugs/pharmaction/120/
https://www.lsgeotar.ru/protivovirusniye-preparati.html

Триазавирин рекомендован для профилактики и лечения COVID-19

Подробности
5 мая 2020 года Ученым Советом Уральского государственного медицинского университета утверждены методические рекомендаций «О применении препарата Триазавирин для лечения и постэкспозиционной профилактики новой коронавирусной инфекции — COVID-19».

 

В связи с развитием эпидемии новой коронавирусной инфекции в России и на территории Свердловской области, ростом числа заболевших, в том числе медицинских работников, решения об организации медицинской помощи и защите медицинского персонала должны приниматься оперативно, в том числе с учетом наработанного эмпирического опыта.

 

Методические рекомендации отражают мнение экспертов по использованию отечественного противовирусного препарата Триазавирин в этиотропной терапии и постэкспозиционной (постконтактной) профилактике новой коронавирусной инфекции — COVID-19, основанное на собственном опыте и научно-исследовательских данных при лечении инфекций, вызываемых РНК-содержащими вирусами.

 

При проведении клинических и пострегистрационных исследований препарата Триазавирин была показана эффективность и высокий профиль безопасности при лечении гриппа и других ОРВИ. Препарат продемонстрировал широкий спектр противовирусной активности. На базе Научно-исследовательского испытательного института военной медицины Минобороны России и Научно-исследовательского института гриппа Минздрава России показана эффективность применения препарата Триазавирин в отношении вирусов гриппа А и В (включая пандемические штаммы), респираторно­синцитиального вируса, парагриппа, краснухи, клещевого энцефалита и лихорадки Западного Нила как по схемам профилактики, так и лечения. В рамках других исследований установлена клиническая эффективность Триазавирина в группах больных гриппом и ОРВИ, имеющих фоновую неблагоприятную патологию и относящихся к группам риска по тяжелому и осложненному течению болезни. Выявлено, что применение Триазавирина одинаково эффективно при поздних сроках обращения больных за медицинской помощью.

 

С учетом собранной и проанализированной информации, которая свидетельствует об эффективности и безопасности препарата при лечении заболеваний, вызываемых различными РНК-содержащими вирусами, Ученый Совет УГМУ рекомендуют противовирусный препарат Триазавирин для лечения и профилактики новой коронавирусной инфекции COVID-19. Экспертами составлены схемы применения постконтактной профилактики для медицинских работников, оказывающих помощь больным с новой коронавирусной инфекцией, и в очаге (семейный, в учреждении закрытого типа) COVID-19, а также для лечения взрослых больных COVID-19. Схемы изложены в методических рекомендациях.

 

инструкция по применению, аналоги, состав, показания

Фармакодинамика
Противовирусное средство, оказывает иммуномодулирующее и противогриппозное действие, специфически подавляет вирусы типа А и В, коронавирус, ассоциированный с тяжелым острым респираторным синдромом (ТОРС). Препятствует контакту и проникновению вирусов в клетку, подавляя слияние липидной оболочки вируса с клеточными мембранами. Обладает интерферониндуцирующим действием, стимулирует гуморальные и клеточные реакции иммунитета, фагоцитарную функцию макрофагов, повышает устойчивость организма к вирусным инфекциям. Снижает частоту развития осложнений, связанных с вирусной инфекцией, а также обострений хронических бактериальных заболеваний.
Терапевтическая эффективность при вирусных инфекциях проявляется в снижении выраженности общей интоксикации и клинических явлений, сокращении продолжительности болезни.
Относится к малотоксичным препаратам. Не оказывает какого-либо отрицательного воздействия на организм человека при пероральном применении в рекомендуемых дозах.
Фармакокинетика
Быстро абсорбируется и распределяется по органам и тканям. Максимальная концентрация в плазме крови при приеме в дозе 50 мг достигается через 1,2 ч, в дозе 100 мг – через 1,5 ч. Метаболизируется в печени. Период полувыведения равен 17-21 ч. Около 40 % выводится в неизменном виде, в основном с желчью (38,9 %) и в незначительном количестве почками (0,12 %). В течение первых суток выводится 90 % от введенной дозы.

Перед применением лекарственного средства проконсультируйтесь с вашим лечащим врачом.
Внутрь, до приема пищи. Разовая доза: детям от 3 до 6 лет – 50 мг, от 6 до 12 лет – 100 мг, старше 12 лет и взрослым – 200 мг (2 таблетки по 100 мг или 4 таблетки по 50 мг).
Для неспецифической профилактики
• При непосредственном контакте с больными гриппом и другими острыми респираторными вирусными инфекциями:
— детям от 3 до 6 лет – по 50 мг, от 6 до 12 лет – по 100 мг, старше 12 лет и взрослым – по 200 мг один раз в день в течение 10-14 дней.
• Для предупреждения обострений хронического бронхита, рецидива герпетической инфекции в период эпидемии гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций:
— детям от 3 до 6 лет – по 50 мг, от 6 до 12 лет – по 100 мг, старше 12 лет и взрослым – по 200 мг два раза в неделю в течение 3 недель.
• Для профилактики тяжелого острого респираторного синдрома (при контакте с больными):
— детям от 6 до 12 лет – по 100 мг, взрослым и детям старше 12 лет – по 200 мг один раз в день (до еды), в течение 12-14 дней.
• Профилактика послеоперационных осложнений:
— детям от 3 до 6 лет – по 50 мг, от 6 до 12 лет – по 100 мг, старше 12 лет и взрослым – по 200 мг за 2 суток до операции, затем на 2 и 5 сутки после операции.
Для лечения
• Грипп, другие острые респираторные вирусные инфекции без осложнений:
— детям от 3 до 6 лет – по 50 мг, от 6 до 12 лет – по 100 мг, старше 12 лет и взрослым – по 200 мг 4 раза в сутки (каждые 6 часов) в течение 5 суток.
• Грипп, другие острые респираторные вирусные инфекции с развитием осложнений (бронхит, пневмония и др.):
— детям от 3 до 6 лет – по 50 мг, от 6 до 12 лет – по 100 мг, старше 12 лет и взрослым – по 200 мг 4 раза в сутки (каждые 6 часов) в течение 5 суток, затем разовую дозу 1 раз в неделю в течение 4 недель.
• Тяжелый острый респираторный синдром:
— детям старше 12 лет и взрослым – по 200 мг 2 раза в день в течение 8-10 суток.
• В комплексном лечении хронического бронхита, герпетической инфекции:
— детям от 3 до 6 лет – по 50 мг, от 6 до 12 лет – по 100 мг, старше 12 лет и взрослым – по 200 мг 4 раза в сутки (каждые 6 часов) в течение 5-7 суток, затем разовую дозу 2 раза в неделю в течение 4 недель.
• Комплексная терапия острых кишечных инфекций ротавирусной этиологии у детей старше 3 лет:
— детям от 3 до 6 лет – по 50 мг, от 6 до 12 лет – по 100 мг, старше 12 лет – по 200 мг 4 раза в сутки (каждые 6 часов) в течение 5 суток.
Если у Вас возникли сомнения или вопросы, обратитесь к своему лечащему врачу.

Исследовательские противовирусные препараты для лечения COVID-19

Фарм США . 2021;46(2):29-35.

АННОТАЦИЯ: Пандемия COVID-19 поставила перед мировым исследовательским сообществом величайшую проблему своего поколения. Количество безопасных и эффективных терапевтических средств ограничено, и в настоящее время проводятся сотни клинических испытаний. Ремдесивир — единственный противовирусный препарат, который в настоящее время одобрен FDA для лечения COVID-19. В этой статье обсуждается механизм действия современных исследуемых противовирусных препаратов, доказательства их эффективности и клинические испытания, которые в настоящее время проводятся в США.

Пандемия коронавирусной болезни 2019 (COVID-19) по-прежнему представляет беспрецедентную проблему для поиска эффективных лекарств для профилактики и лечения. Заболевание вызывает коронавирус тяжелого острого респираторного синдрома 2 (SARS-CoV-2), бета-коронавирус, генетически сходный с коронавирусом SARS-CoV и ближневосточного респираторного синдрома (MERS-CoV). 1 Текущее ведение пациентов в основном основано на контроле симптомов и опыте лечения подобных вирусов.В настоящее время проводятся сотни клинических испытаний новых и перепрофилированных агентов, в основном с акцентом на противовирусные препараты и иммуномодуляторы. Некоторые исследуемые противовирусные препараты рассматриваются здесь.

Вирус SARS-CoV-2 представляет собой одноцепочечный РНК-оболочечный вирус с тремя типами белков на оболочке, включая шиповидный белок (S-белок), оболочечный белок и мембранный белок. 2 S-белок играет важную роль в распознавании и связывании клетки-хозяина, а также обеспечивает слияние оболочки вируса с клеточной мембраной.Активация его расщепления опосредуется членом 2 подсемейства трансмембранных протеаз серина (TMPRSS2). S-белок в SARS-CoV и SARS-CoV-2 распознает и связывается с одним и тем же рецептором хозяина, рецептором ангиотензинпревращающего фермента 2 (ACE 2). 1 Эти рецепторы обычно экспрессируются на эпителиальных клетках альвеол, трахеи, бронхов и бронхиальных серозных желез дыхательных путей. 3 Таким образом, ингибиторы TMPRSS2 или ингибиторы АПФ являются потенциальными терапевтическими средствами для лечения COVID-19.

Как только S-белок связывается с клеткой-хозяином, вирус проникает в клетку посредством эндоцитоза, при котором образуются лизосомы, а РНК высвобождается и транслируется в вирусные полимеразные белки, регулируемые родственной протеазой и рН. 2 Ингибиторы эндосомального подкисления, такие как хлорохин, и ингибиторы слияния мембран, такие как арбидол, могут оказаться полезными для блокирования этой стадии. 2

РНК завершает транскрипцию и трансляцию вирусных белков, репликация РНК происходит в цитоплазме.Аналоги нуклеозидов, такие как ремдесивир, ингибиторы протеазы, такие как лопинавир/ритонавир (LPVr), и ингибиторы протеазы 3CLpro SARS-CoV-2 (для процессинга полипротеинов, транслируемых с вирусной РНК), такие как пиридинсодержащие кетоамиды, могут блокировать этот процесс. Наконец, РНК объединяется с белковыми оболочками для создания новых частиц коронавируса, которые высвобождаются из организма хозяина через аппарат Гольджи для заражения новых клеток. 2  

В настоящее время проводится несколько текущих клинических испытаний, многие из которых сосредоточены на перепрофилировании установленных противовирусных терапий, особенно тех, которые показали предшествующую эффективность против MERS-CoV и SARS-CoV. ТАБЛИЦА 1 представляет собой снимок некоторых текущих испытаний в США. 4

Remdesivir (Veklury): Remdesivir — это широко на основе антивирусного препарата, ориентированного на целевую целевую. Он ингибирует репликацию вируса за счет преждевременного прекращения транскрипции РНК, тем самым нарушая репродуктивную способность вируса. 3 В мае 2020 года ремдесивир был одобрен Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) в соответствии с разрешением на экстренное применение (EUA) для лечения госпитализированных пациентов с COVID-19.Позже EUA была расширена, чтобы охватить пациентов с нетяжелым заболеванием. 5

Было проведено рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование для изучения времени до выздоровления у госпитализированных пациентов с COVID-19, получавших ремдесивир (нагрузочная доза 200 мг в 1-й день и 100 мг в день до 9 дней). дополнительные дни). 6 Результаты показали, что ремдесивир имел более короткое время до выздоровления, чем плацебо ( P <0,001), и что ремдесивир, возможно, предотвращал прогрессирование более тяжелого респираторного заболевания.Также были получены данные из рандомизированного открытого исследования, в котором оценивалась различная продолжительность приема ремдесивира, и открытого исследования, в котором оценивалась различная продолжительность приема ремдесивира по сравнению со стандартным лечением (SoC). 7,8 В этих испытаниях не было зафиксировано существенной разницы между 5-дневным курсом и 10-дневным курсом.

На основании этих результатов ремдесивир был одобрен FDA для лечения COVID-19 у взрослых и детей в возрасте 12 лет и старше с массой тела не менее 40 кг и требующих госпитализации. 9 Рекомендуемая доза — однократная нагрузочная доза ремдесивира 200 мг в 1-й день с последующей поддерживающей дозой ремдесивира 100 мг один раз в день со 2-го дня, вводимой в течение 30–120 минут. Применение ремдесивира противопоказано пациентам с клинически значимыми реакциями гиперчувствительности на ремдесивир или любые компоненты препарата в анамнезе. Наиболее частыми побочными эффектами, отмечаемыми при приеме ремдесивира, являются тошнота и повышение результатов тестов на аланинаминотрансферазу (АЛТ) и аспартатаминотрансферазу (АСТ).Ремдесивир тестируется для использования в расширенных популяциях, а также в комбинированной терапии (, ТАБЛИЦА 1, ).

Молнупиравир: Молнупиравир (MK-4482 [ранее EIDD-2801]; Merck) является пролекарством аналога рибонуклеозида EIDD-1931. Это пероральный противовирусный агент на клинической стадии, который оказывает свое действие путем внесения ошибок копирования во время репликации вирусной РНК вируса SARS-CoV-2. 10 Это экспериментальная молекула, коммерчески недоступная в США.S. Препарат был испытан в рандомизированном, двойном слепом, плацебо-контролируемом, первом исследовании на людях фазы I, предназначенном для оценки его безопасности, переносимости и фармакокинетики после перорального приема здоровыми добровольцами. Два рандомизированных, плацебо-контролируемых, двойных слепых клинических исследования фазы II/III проводятся для оценки эффективности и безопасности молнупиравира у взрослых участников с COVID-19 ( ТАБЛИЦА 1 ).

Рибавирин: Рибавирин является аналогом гуанозина, который препятствует работе полимераз, что приводит к деградации РНК. 11 Обладает широким спектром противовирусной активности против РНК- и ДНК-вирусов. Рибавирин одобрен FDA для лечения хронического вирусного гепатита С (ХГС) в комбинации с пегинтерфероном альфа-2а (ПЕГАСИС) у пациентов в возрасте 5 лет и старше с компенсированным заболеванием печени, ранее не получавших интерферон-альфа, и у взрослых пациентов с ХГС, коинфицированных ВИЧ. 12 Рекомендуемая доза составляет 800 мг перорально ежедневно в течение 48 недель. Противопоказан беременным женщинам и мужчинам, партнерши которых беременны, пациентам с гемоглобинопатиями и при одновременном применении с диданозином. Наиболее распространенные побочные эффекты, связанные с применением рибавирина, включают утомляемость/астению, лихорадку, миалгию и головную боль. Рибавирин может взаимодействовать с другими аналогами нуклеозидов и азатиоприном.

Одно исследование показало эффективность рибавирина как потенциального агента против SARS-CoV-2. 13 Рибавирин в настоящее время проходит испытания для оценки его эффективности в качестве компонента тройной терапии ( ТАБЛИЦА 1 ).

Фавипиравир (Avigan): Фавипиравир трифосфат представляет собой аналог пуринового нуклеозида, который конкурентно ингибирует вирусную РНК-зависимую РНК-полимеразу, останавливая репликацию вируса. 14 Активен против гриппа А и В, а также против некоторых возбудителей вирусной геморрагической лихорадки и SARS-CoV-2 in vitro. 14

Фавипиравир коммерчески недоступен в США, но одобрен для лечения новых эпидемических штаммов гриппа, которые не реагируют на стандартную противовирусную терапию в Японии. 14

На ранних стадиях пандемии было проведено небольшое открытое нерандомизированное контролируемое исследование пациентов с COVID-19 в Китае, в котором сравнивали фавипиравир с контрольной группой, получавшей LPVr.В исследовании отмечено значительное сокращение времени до элиминации вируса SARS-CoV-2 у пациентов, получавших фавипиравир, по сравнению с контрольной группой. 15 Другое открытое, проспективное, рандомизированное, многоцентровое исследование, проведенное в Китае, сравнило влияние фавипиравира и умифеновира на частоту клинического выздоровления через 7 дней у взрослых с пневмонией, вызванной COVID-19. Было обнаружено, что в группе, принимавшей фавипиравир, частота клинического выздоровления в течение 7 дней была выше, чем в группе, принимавшей умифеновир. 16 Наиболее частыми побочными эффектами были нарушения ферментов печени, психические симптомы, желудочно-кишечные симптомы и повышение уровня мочевой кислоты в сыворотке, что связано с удлинением интервала QT и тератогенными эффектами.

Ингибиторы протеазы

Лопинавир и ритонавир (Калетра): Репликация SARS-CoV-2 включает расщепление полипротеинов на РНК-зависимую РНК-полимеразу и геликазу. Это достигается с помощью двух протеаз: 3-химотрипсиноподобной протеазы (3CLpro) и папаиноподобной протеазы (PLpro). 17 Лопинавир является ингибитором протеазы 3CLpro in vitro, но быстро метаболизируется ферментной системой цитохрома Р450. Таким образом, он не достигает достаточной биодоступности при пероральном введении. 18 Ритонавир, другой ингибитор протеазы, ингибирует этот метаболический эффект и поэтому назначается одновременно для увеличения периода полувыведения лопинавира.

LPVr продается как Kaletra. Он одобрен FDA для лечения ВИЧ 1 типа у взрослых и детей. 19 Рекомендуемая суточная доза для взрослых составляет 800/200 мг в один или два приема. Применение Калетры противопоказано пациентам с известной повышенной чувствительностью к любому из ее компонентов. Существует возможность лекарственного взаимодействия с препаратами, клиренс которых сильно зависит от CYP3A, или с индукторами CYP3A. Часто сообщаемые побочные эффекты включают диарею, тошноту, рвоту, гипертриглицеридемию и гиперхолестеринемию. Применение Калетры не рекомендуется в период лактации.

LPVr ранее продемонстрировал благоприятный клинический ответ со снижением частоты неблагоприятных клинических исходов на 21-й день, снижением вирусной нагрузки через 48 часов, снижением использования стероидов и снижением частоты внутрибольничных инфекций при SARS-CoV. 20

На основании этого он был протестирован при лечении SARS-CoV-2. Однако серия открытых испытаний не показала существенной клинической пользы. Исследование LOTUS China было первым опубликованным рандомизированным контролируемым исследованием LPVr. 21 Исследование среднего размера, в котором изучалась комбинация лопинавира и ритонавира при SARS-CoV-2. В общей сложности 199 пациентов получали либо LPVr 400/100 мг два раза в день в течение 14 дней в дополнение к SoC, либо только SoC. Исследование не выявило существенных различий во времени до клинического улучшения или 28-дневной летальности. 21 Однако пациенты в исследуемой группе имели более короткое пребывание в отделении интенсивной терапии (средняя разница 5 дней) и более короткое время от рандомизации до выписки из больницы (средняя разница 1 день). 21 Исследование не выявило существенных различий в других исходах, таких как продолжительность кислородной терапии, продолжительность госпитализации и время от рандомизации до смерти. Авторы пришли к выводу, что лечение LPVr не имело значительного положительного эффекта при лечении пациентов с SARS-CoV-2. 21

Рандомизированное исследование по оценке терапии COVID-19 (RECOVERY) — это рандомизированное, контролируемое, открытое исследование, в котором изучается эффективность лечения LPVr, гидроксихлорохином, кортикостероидами (низкими дозами дексаметазона), азитромицином, реконвалесцентной плазмой, синтетическими нейтрализующими препаратами. антитела или тоцилизумаб предотвращают смерть пациентов с COVID-19. Группа LPVr этого исследования была остановлена, так как она не показала улучшения исходов у пациентов, поступивших в больницу с COVID-19, с точки зрения 28-дневной смертности, продолжительности пребывания в больнице или риска перехода на инвазивную искусственную вентиляцию легких или смерти. 22

Исследование SOLIDARITY — это международное рандомизированное клиническое исследование, в котором оценивается влияние лечения COVID-19 на три важных исхода у пациентов с COVID-19: смертность, потребность во вспомогательной вентиляции легких и продолжительность пребывания в больнице. Промежуточные опубликованные результаты показывают, что ремдесивир, гидроксихлорохин, LPVr и интерферон не оказали положительного влияния на измеряемые исходы у госпитализированных пациентов. 23

Возможно, обычные дозы LPVr не достигают концентрации препарата в плазме, необходимой для ингибирования репликации SARS-CoV-2. 24 Кроме того, ни одно из исследований с опубликованными результатами не было слепым.

Ингибиторы эндосомального закисления

Хлорохин и гидроксихлорохин (плаквенил): клеточные мембраны. 2,4 Кроме того, хлорохин ингибирует гликозилирование клеточного рецептора ACE-2 и, следовательно, ингибирует связывание SARS-CoV-2 с клеткой-хозяином.

Оба эти агента являются противомалярийными средствами, одобренными FDA; гидроксихлорохин также одобрен FDA для лечения ревматоидного артрита и красной волчанки. 25 Они имеют узкое терапевтическое окно и токсикологические последствия, включая ретинопатию, нейромиопатию и кардиомиопатию после длительного применения. 26

Исследования in vitro показали положительный эффект хлорохина и гидроксихлорохина против SARS-CoV-2. 27 Этот эффект наблюдался клинически в большом ретроспективном когортном исследовании, проведенном для оценки роли терапии гидроксихлорохином отдельно и в комбинации с азитромицином у госпитализированных пациентов с COVID-19. 28 Однако многие рандомизированные клинические испытания показали обратное. 29 Принимая во внимание потенциальную токсичность, связанную с использованием этих агентов, хлорохин и гидроксихлорохин не рекомендуется использовать у пациентов с COVID-19. 17,30-33 В исследовании TriACT изучается использование гидроксихлорохина в комбинации с рибавирином и нитазоксанидом у пациентов с COVID-19 ( ТАБЛИЦА 1 ).

Нитазоксанид (Алиния): Нитазоксанид является противомикробным пролекарством широкого спектра действия, которое быстро превращается в активные метаболиты тизоксанид и конъюгаты тизоксанида. 34 Эффективен против различных гельминтозов, протозойных, бактериальных и вирусных инфекций, одобрен FDA для перорального лечения диареи, вызванной Cryptosporidium parvum или Giardia lamblia . 35 Рекомендуемая доза для взрослых составляет 500 мг нитазоксанида каждые 12 часов в течение 3 дней во время еды. Его применение противопоказано пациентам с известной гиперчувствительностью к нитазоксаниду или любому из его компонентов. Применение нитазоксанида связано с болью в животе, головной болью, хроматурией и тошнотой.

Было показано, что нитазоксанид ингибирует репликацию широкого спектра респираторных вирусов в клеточных культурах, включая SARS-CoV-2. 36 Раннее многоцентровое рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование, в котором изучалось разрешение симптомов COVID-19 у пациентов, получавших 500 мг нитазоксанида три раза в день в течение 5 дней, не выявило различий в разрешении симптомов между тестовая и контрольная группы. 37 Однако исследовательская группа отметила, что нитазоксанид значительно снижает вирусную нагрузку и является безопасным в вводимых дозах.

Ингибиторы слияния мембран

Умифеновир (Арбидол): Умифеновир — ненуклеозидный противовирусный препарат, который ингибирует контакт, адгезию и слияние вирусной липидной оболочки путем связывания и активации белка гемагглютинина в белке гемагглютинина. Он также демонстрирует иммуномодулирующий эффект, побуждая организм вырабатывать интерферон. 2

Умифеновир используется в Китае и России для лечения гриппа и связан с легкими побочными эффектами, такими как тошнота, дискомфорт в животе и головная боль.Ранние исследования показали, что умофеновир может ингибировать инфекцию SARS-CoV-2 in vitro; однако дальнейшие исследования дали противоречивые результаты. 38

В то время как одно ретроспективное исследование не смогло продемонстрировать улучшение прогноза у пациентов с COVID-19, другое исследование показало, что умифеновир имел тенденцию улучшать частоту выписки и снижать уровень смертности. 39,40

Ретроспективное исследование по оценке противовирусных эффектов и безопасности LPVr и умифеновира у пациентов с COVID-19 показало, что группы умифеновира имели более короткую вирусную нагрузку, чем группа LPVr ( P <.01). 38 Однако другое исследование, сравнивающее монотерапию LPVr или умифеновиром с SoC у пациентов с COVID-19 легкой и средней степени тяжести, не показало статистической разницы между группами лечения. 41 Необходимы более сильные рандомизированные исследования, чтобы определить место терапии умифеновиром у пациентов с COVID-19; тем не менее, в настоящее время в США такие исследования не проводятся.Он одобрен FDA в качестве перорального антигельминтного средства для лечения стронгилоидоза кишечного тракта и онхоцеркоза. 42 Известно, что ивермектин обладает противовирусной активностью in vitro, ингибируя импортин a/b-опосредованный ядерный транспорт и, таким образом, предотвращая проникновение вирусных белков в ядро ​​хозяина для изменения функции клетки-хозяина. Недавно он продемонстрировал активность in vitro против SARS-CoV-2, обеспечив 5000-кратное снижение вирусной РНК через 48 часов после однократного добавления. 43 Ретроспективное обсервационное когортное исследование показало, что ивермектин был связан с более низкой смертностью при лечении COVID-19, чем SoC (15% против25,2%; P = 0,03), особенно у пациентов с тяжелым поражением легких (38,8% против 80,7%; P = 0,001). 34 Частота успешной экстубации существенно не отличалась. 44

Фармацевты играют важную роль не только в обеспечении регулярных поставок одобренных или находящихся на испытаниях лекарств, но и в управлении индивидуальной терапией пациентов, поскольку все больше препаратов получают одобрение для использования у пациентов с COVID-19. Предстоит проделать значительный объем работы для создания безопасных и эффективных методов лечения пациентов.Тем временем фармацевты могут продолжать самообразование, следя за новыми разработками в этой области и опираясь на информацию, представленную в этой статье.

Содержание этой статьи предназначено только для информационных целей. Содержимое не предназначено для замены профессиональной консультации. Вы полагаетесь на любую информацию, представленную в этой статье, исключительно на свой страх и риск.

ССЫЛКИ

1. Сандерс Дж.М., Моноуг М.Л., Джо
2.Ван Д., Ли З., Лю Ю. Обзор безопасности, клинического применения и противовирусных исследований терапевтических средств против COVID-19. J Заразить общественное здравоохранение . 2020;13(10):1405-1414.
3. Abd El-Aziz TM, Stockand JD. Недавний прогресс и проблемы в разработке лекарств против коронавируса COVID-19 (SARS-CoV-2) — обновленная информация о статусе. Infect Genet Evo л. 2020;83:104327.
4. НИЗ. Клинические испытания.gov. http://www.clinicaltrials.gov. По состоянию на 19 ноября 2020 г.
5. Пресс-релиз FDA.Обновление COVID-19: FDA расширяет разрешение на экстренное использование Веклюри (ремдесивир), чтобы включить всех госпитализированных пациентов для лечения COVID-19. www.fda.gov/news-events/press-announcements/covid-19-update-fda-broadens-emergency-use-authorization-veklury-remdesivir-include-all-hospitalized. 28 августа 2020 г. По состоянию на 18 ноября 2020 г.
6. Beigel JH, Tomashek KM, Dodd LE, et al. Ремдесивир для лечения Covid-19 – окончательный отчет. N Английский J Med . 2020;383(19):1813-1826.
7.Goldman JD, Lye DCB, Hui DS, et al. Ремдесивир в течение 5 или 10 дней у пациентов с тяжелой формой Covid-19. N Английский J Med . 2020;383(19):1827-1837.
8. Spinner CD, Gottlieb RL, Criner GJ, et al. Влияние ремдесивира по сравнению со стандартной терапией на клиническое состояние через 11 дней у пациентов с COVID-19 средней степени тяжести: рандомизированное клиническое исследование. ЯМА . 2020;324(11):1048-1057.
9. Веклюры [вкладыш]. Фостер-Сити, Калифорния: Gilead Sciences; 2020 г. www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2020/214787Orig1s000lbl.пдф. По состоянию на 18 ноября 2020 г.
10. Сеннимо Д. Лечение и лечение коронавирусной болезни 2019 г. (COVID-19). Медскейп. 16 ноября 2020 г. По состоянию на 17 ноября 2020 г. https://emedicine.medscape.com/article/2500114-treatment#showall.
11. Khalili JS, Zhu H, Mak NSA, et al. Новое лечение коронавируса рибавирином: основа для оценки COVID-19. Дж Мед Вирол . 2020;92(7):740-746.
12. Copegus [вкладыш]. Южный Сан-Франциско, Калифорния: Genentech USA; 2011.www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2011/021511s023lbl. pdf. По состоянию на 17 ноября 2020 г.
13. Эльфикий А.А. Анти-ВГС, нуклеотидные ингибиторы, перепрофилированные против COVID-19. Науки о жизни . 2020;248:117477.
14. Coomes EA, Haghbayan H. Фавипиравир, противовирусный препарат для лечения COVID-19? J Antimicrob Chemother . 2020;75(7):2013-2014.
15. Cai Q, Yang M, Liu D, et al. Экспериментальное лечение COVID-19 фавипиравиром: открытое контрольное исследование. Инжиниринг (Пекин) .2020;6:1192-1198.
16. Chen C, Huang J, Zhang Y, et al. Сравнение фавипиравира и арбидола при COVID-19: рандомизированное клиническое исследование. www.medrxiv.org/content/medrxiv/early/2020/04/15/2020.03.17.20037432.full.pdf. medRxiv; 2020. По состоянию на 10 ноября 2020 г.
17. NIH. Рекомендации по лечению COVID-19. www.covid19treatmentguidelines.nih.gov/. По состоянию на 10 ноября 2020 г.
18. Lythgoe MP, Mid
19. Калетра [вкладыш]. Северный Чикаго, Иллинойс: AbbVie Inc.; 2016. www.accessdata. fda.gov/drugsatfda_docs/label/2016/021251s052_021906s046lbl.пдф. По состоянию на 13 ноября 2020 г.
20. Chu CM, Cheng VC, Hung IF, et al. Роль лопинавира/ритонавира в лечении атипичной пневмонии: первоначальные вирусологические и клинические данные. Грудная клетка . 2004;59(3):252-256.
21. Cao B, Wang Y, Wen D, et al. Испытание лопинавира-ритонавира у взрослых, госпитализированных с тяжелой формой Covid-19. N Английский J Med . 2020;382(19):1787-1799.
22. Совместная группа «ВОССТАНОВЛЕНИЕ». Лопинавир-ритонавир у пациентов, госпитализированных с COVID-19 (ВОССТАНОВЛЕНИЕ): рандомизированное, контролируемое, открытое, платформенное исследование. Ланцет . 2020;396(10259):1345-1352.
23. Pan H, Peto R, Karim QA, et al. Исследовательский консорциум ВОЗ «Солидарность». Перепрофилирование противовирусных препаратов для лечения COVID-19 – промежуточные результаты исследования ВОЗ SOLIDARITY. medRxiv . Препринт. www.medrxiv.org/content/10.1101/2020. 10.15.20209817v1. По состоянию на 11 ноября 2020 г.
24. Schoergenhofer C, Jilma B, Stimpfl T, et al. Фармакокинетика лопинавира и ритонавира у пациентов, госпитализированных с коронавирусной болезнью 2019 (COVID-19). Энн Интерн Мед .2020;173(8):670-672.
25. Арален [вкладыш]. Бриджуотер, Нью-Джерси: Санофи-Авентис; 2017. www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2017/006002s044lbl.pdf. По состоянию на 2 ноября 2020 г.
26. Плаквенил [вкладыш]. Оквилл, Онтарио, Канада: Concordia Pharmaceuticals; 2017. www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2017/009768s037s045s047lbl.pdf. По состоянию на 3 ноября 2020 г.
27. Liu J, Cao R, Xu M, et al. Гидроксихлорохин, менее токсичное производное хлорохина, эффективно ингибирует инфекцию SARS-CoV-2 in vitro. Сотовый Дисков . 2020;6:16.
28. Аршад С., Килгор П., Чаудхри З.С. и соавт. Лечение гидроксихлорохином, азитромицином и их комбинацией у пациентов, госпитализированных с COVID-19. Int J Infect Dis . 2020;97:396-403.
29. Horby P, Mafham M, Linsell L, et al. Эффект гидроксихлорохина у госпитализированных пациентов с COVID-19: предварительные результаты многоцентрового рандомизированного контролируемого исследования. medRxiv . 2020; Препринт. www.medrxiv.org/content/10.1101/2020.15.07.20151852v1. По состоянию на 10 ноября 2020 г.
30. Cavalcanti AB, Zampieri FG, Rosa RG, et al. Гидроксихлорохин с азитромицином или без него при легкой и средней степени тяжести Covid-19 [опубликовано исправление в N Engl J Med. 2020 19 ноября; 383(21):e119]. N Английский J Med . 2020;383(21):2041-2052.
31. Furtado RHM, Berwanger O, Fonseca HA, et al. Азитромицин в дополнение к стандартному лечению по сравнению со стандартным лечением только при лечении пациентов, поступивших в больницу с тяжелой формой COVID-19 в Бразилии (COALITION II): рандомизированное клиническое исследование. Ланцет . 2020;396(10256):959-967.
32. Geleris J, Sun Y, Platt J, et al. Обсервационное исследование гидроксихлорохина у госпитализированных пациентов с Covid-19. N Английский J Med . 2020;382(25):2411-2418.
33. Розенберг Э.С., Дюфорт Э.М., Удо Т. и соавт. Связь лечения гидроксихлорохином или азитромицином с госпитальной смертностью у пациентов с COVID-19 в штате Нью-Йорк. ЯМА . 2020;323(24):2493-2502.
34. Келлени МТ. Комбинация нитазоксанид/азитромицин для лечения COVID-19: предлагаемый новый протокол для раннего лечения. Фармакол Рез . 2020;157:104874.
35. Алина [вкладыш]. Тампа, Флорида: Romark Pharmaceuticals; 2016. По состоянию на 12 ноября 2020 г. https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2016/021497s001,021498s004lbl.pdf.
36. Аль-Хорани Р.А., Кар С. Потенциальные терапевтические средства против SARS-CoV-2, нацеленные на пост-энтериальные стадии жизненного цикла вируса: всесторонний обзор. Вирусы . 2020;12(10):1092.
37. Rocco PRM, Silva PL, Cruz FF, et al. Раннее использование нитазоксанида при легкой форме заболевания Covid-19: рандомизированное плацебо-контролируемое исследование. medRxiv . 2020; Препринт. www.medrxiv.org/content/10.1101/2020.10.21.20217208v1. По состоянию на 10 ноября 2020 г.
38. Wang X, Cao R, Zhang H, et al. Препарат против вируса гриппа арбидол является эффективным ингибитором SARS-CoV-2 in vitro. Сотовый Дисков . 2020;6:28.
39. Лиан Н., Се Х., Лин С. и др. Лечение умифеновиром не связано с улучшением исходов у пациентов с коронавирусной болезнью 2019: ретроспективное исследование. Clin Microbiol Infect . 2020;26(7):917-921.
40. Ван З., Ян Б., Ли К. и др. Клинические особенности 69 случаев коронавирусной болезни 2019 года в Ухане, Китай. Клин Infect Dis . 2020;71(15): 769-777.
41. Li Y, Xie Z, Lin W, et al. Эффективность и безопасность лопинавира/ритонавира или арбидола у взрослых пациентов с COVID-19 легкой/средней степени тяжести: исследовательское рандомизированное контролируемое исследование [опубликовано в Интернете до выхода из печати, 19 мая 2020 г.]. Мед (Нью-Йорк) . 2020;10. 1016.
42. Стромектол [вкладыш]. Кенилворт, Нью-Джерси: Merck & Co., Inc. www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2008/050742s022lbl.pdf. По состоянию на 14 ноября 2020 г.
43. Caly L, Druce JD, Catton MG, et al. Одобренный FDA препарат ивермектин ингибирует репликацию SARS-CoV-2 in vitro. Противовирусный рез . 2020; июнь (178): 104787.
44. Rajter JC, Sherman MS, Fatteh N, et al. Использование ивермектина связано с более низкой смертностью у госпитализированных пациентов с коронавирусной болезнью 2019: исследование ICON [опубликовано в Интернете до печати, 13 октября 2020 г.]. Сундук . 2020;S0012-3692(20)34898-4.

Чтобы прокомментировать эту статью, обращайтесь по адресу [email protected]

 

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее распространенные причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только та информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

Сравнение эффекта арбидола плюс гидроксихлорохина и одного гидроксихлорохина при лечении заболевания COVID-19: рандомизированное клиническое исследование

Заголовок: Сравнение эффекта арбидола плюс гидроксихлорохина и одного гидроксихлорохина при лечении заболевания COVID-19: рандомизированное клиническое исследование

Объем: 16 Выпуск: 4

Автор(ы): Розита Ходашахи, Хамидреза Надери, Амин Божди, Али Акбар Хейдари, Ашраф Таванаи Сани, Мохаммад Джавад Габули, Мохаммад Реза Сарвгад, Махбубех Хаддад, Махназ Ариан, Шахрзад Джаханян, Саид Мазиди, Мазиар Мортазави Пасанд, Биньямин Хосейни, Малихех Дадгармогаддам, Али Хорсанд и Мандана Ходашахи*

Принадлежность:

  • Исследовательский центр ревматических заболеваний, Мешхедский университет медицинских наук, Мешхед, Иран

Ключевые слова: COVID-19, гидроксихлорохин, арбидол, умифеновир, вирусные заболевания, чрезвычайная ситуация.

Резюме:

Предыстория и цель: основной сложный вопрос о коронавирусной болезни 2019 г. (COVID-19) — это производство безопасных и стабильных вакцин, что является очень длительным процессом. Из-за чрезвычайная ситуация, регулярный и обширный скрининг доступных и традиционных лекарств, которые обычно используется для лечения подобных вирусных заболеваний, может быть разумным вариантом.Настоящее исследование, направленное на сравнение приема гидроксихлорохина (HCQ) плюс арбидол с использованием Только HCQ при лечении инфекции COVID-19.

Методы и материалы. Это одностороннее слепое рандомизированное контролируемое исследование было проведено в общей сложности на 100 пациентов с COVID-19 обратились в инфекционное отделение больницы имама Резы в Мешхеде, Иран, 2020 г. Пациенты были случайным образом распределены между двумя группами только HCQ и HCQ плюс арбидол. группы.

Результаты: Согласно полученным результатам, гематологические показатели, в том числе лейкоцитарная количество, уровень гемоглобина, количество лимфоцитов и количество тромбоцитов улучшились у пациентов с COVID-19 после лечения как HCQ плюс арбидол, так и только HCQ (P Вывод: Таким образом, введение как арбидола, так и гидроксихлорохина приводит к улучшению гематологические параметры.В настоящем исследовании арбидол был представлен в качестве эффективного средства для лечения средней и тяжелой степени у пациентов с COVID-19, что не только сократило время нормализации СРБ уровень, но также уменьшил продолжительность госпитализации и смертность по сравнению с теми, о которых сообщалось для ХКК.

Оценка противовирусной эффективности рибавирина, арбидола и Т-705 (фавипиравира) на мышиной модели конго-крымской геморрагической лихорадки

Аннотация

Фон

Мыши, лишенные рецептора интерферона типа I (мыши IFNAR -/- ), воспроизводят соответствующие аспекты конго-крымской геморрагической лихорадки (ККГЛ) у людей, включая поражение печени. Мы стремились охарактеризовать патологию печени у мышей IFNAR -/- , инфицированных вирусом КГЛ, с помощью иммуногистохимии и использовали модель для оценки противовирусной эффективности рибавирина, арбидола и Т-705 против вируса ККГЛ.

Методология/основные выводы

инфицированных вирусом КГЛ IFNAR -/- мышей умерли через 2-6 дней после заражения с повышенным уровнем аминотрансфераз и высокими титрами вируса в крови и органах. Основным патологическим изменением был острый гепатит с обширным мостовидным некрозом, реактивной пролиферацией гепатоцитов и легкой или умеренной воспалительной реакцией с активацией моноцитов/макрофагов.Инфицированные вирусом и апоптотические гепатоциты скопились в зонах некроза. Рибавирин, арбидол и Т-705 подавляли репликацию вируса in vitro на ≥3 логарифмических единиц (IC 50 0,6–2,8 мкг/мл; IC 90 1,2–4,7 мкг/мл). Рибавирин [100 мг/(кг×день)] не увеличивал выживаемость мышей IFNAR -/- , но продлевал время до смерти (p<0,001) и снижал уровни аминотрансфераз и титры вируса. Арбидол [150 мг/(кг×день)] не имел эффективности in vivo .Животные, получавшие Т-705 через 1 ч [15, 30 и 300 мг/(кг×день)] или до 2 дней [300 мг/(кг×день)] после заражения, выживали, не проявляли признаков заболевания и вируса в крови и органах не было. Совместное введение рибавирина и Т-705 приводило скорее к положительным, чем к побочным эффектам.

Выводы/значимость

Активированные печеночные макрофаги и клетки, происходящие из моноцитов, могут играть роль в ответе провоспалительных цитокинов при ККГЛ. Скопление инфицированных гепатоцитов в некротизированных участках без выраженного воспаления свидетельствует о вирусных цитопатических эффектах.Т-705 обладает высокой эффективностью против вируса ККГЛ in vitro и in vivo . Его эффективность in vivo превышает эффективность действующего в настоящее время стандартного препарата для лечения ККГЛ, рибавирина.

Резюме автора

Конго-крымская геморрагическая лихорадка (КГЛ) эндемична в Африке, Азии, Юго-Восточной Европе и на Ближнем Востоке. Летальность составляет 30-50%. Исследования патофизиологии и лечения КГЛ затруднены из-за отсутствия подходящей животной модели. В качестве модели заболевания мы использовали инфицированных вирусом ККГЛ трансгенных мышей с дефектом врожденного иммунного ответа.Эти мыши умирают от инфекции и проявляют признаки болезни, подобные тем, которые обнаруживаются у людей. Во-первых, мы изучали патологию печени у животных, поскольку некроз печени является характерным признаком КГЛ человека. Во-вторых, мы использовали модель для проверки эффективности противовирусных препаратов, которые находятся в клиническом применении или находятся на продвинутой стадии клинических испытаний. Помимо рибавирина, стандартного препарата для лечения ККГЛ, мы протестировали арбидол, клинически применяемый препарат против респираторных инфекций, и Т-705, новый препарат для лечения вирусной инфекции гриппа, находящийся в стадии клинической разработки.В то время как рибавирин и арбидол продемонстрировали некоторый положительный эффект, соответственно, Т-705 показал высокую эффективность в модели на животных. Эти данные обнадеживают в отношении клинической эффективности Т-705 при ККГЛ человека.

Образец цитирования: Oestereich L, Rieger T, Neumann M, Bernreuther C, Lehmann M, Krasemann S, et al. (2014) Оценка противовирусной эффективности рибавирина, арбидола и Т-705 (фавипиравира) на мышиной модели конго-крымской геморрагической лихорадки. PLoS Negl Trop Dis 8(5): е2804.https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0002804

Редактор: Сунит Кумар Сингх, Центр клеточной и молекулярной биологии (CCMB), Индия

Поступила в редакцию: 25 августа 2013 г.; Принято: 9 марта 2014 г.; Опубликовано: 1 мая 2014 г.

Авторские права: © 2014 Oestereich et al. Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания оригинального автора и источника.

Финансирование: Это исследование было поддержано грантами FP7 228292 (Европейский архив вирусов) и 260644 (Низкомолекулярные ингибиторы в сравнении с новыми и забытыми РНК-вирусами) от Европейского сообщества. Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Вирус Конго-крымской геморрагической лихорадки (CCHFV) представляет собой РНК-вирус с отрицательной цепью, принадлежащий к роду Nairovirus семейства Bunyaviridae .Вирус эндемичен в Африке, Азии, Юго-Восточной Европе и на Ближнем Востоке. Клещи Hyalomma передают вирус людям, диким животным и домашнему скоту. Люди также могут заразиться при контакте с зараженным домашним скотом. Передача от человека к человеку происходит в основном в условиях стационара. У людей вирус вызывает лихорадочное заболевание, которое может быть связано с кровотечением, некрозом печени, шоком и полиорганной недостаточностью. Другими признаками заболевания являются повышенный уровень сывороточной аспартат- и аланинаминотрансферазы (АСТ и АЛТ соответственно), тромбоцитопения и диссеминированная внутрисосудистая коагулопатия.Средняя летальность составляет 30–50%, но может быть выше при внутрибольничных вспышках [1]–[5].

Патофизиология заболевания плохо изучена. Считается, что определенную роль играют повреждение эндотелия и клеток печени, индукция провоспалительных цитокинов и нарушение регуляции каскада коагуляции [3]–[8]. Исследования патофизиологии конго-крымской геморрагической лихорадки (ККГЛ) затруднены из-за отсутствия подходящей животной модели, поскольку до сих пор не было описано ни одного млекопитающего с полностью функциональной иммунной системой, за исключением человека, у которого развивается заболевание при заражении.Первой животной моделью была неонатальная мышь [9]. Недавно были описаны две модели трансгенных мышей для ККГЛ: во-первых, мыши, лишенные преобразователя сигнала и активатора транскрипции 1 (мыши STAT1 -/- ), и, во-вторых, мыши, лишенные рецептора интерферона типа I (альфа/бета) (IFNAR). -/- мышей) [10]–[12]. Обе мыши с нокаутом дефектны по врожденному иммунному ответу, быстро умирают от инфекции CCHFV и воспроизводят соответствующие аспекты CCHF человека. В суррогатных моделях КГЛ используются мыши IFNAR -/- , инфицированные вирусом Дагбе или Хазара [13], [14], двумя родственными ККГЛ найровирусами, которые, как известно, не вызывают заболевания у человека.Работа с этими моделями может выполняться на уровне биобезопасности (BSL)-2, тогда как для работы с инфекционной ККГЛ требуется оборудование BSL-4.

В настоящем исследовании мы стремились более подробно охарактеризовать патологические изменения в печени мышей, инфицированных CCHFV IFNAR -/- . Кроме того, мы использовали эту модель для оценки противовирусной эффективности рибавирина, арбидола и Т-705 (фавипиравира) против CCHFV in vivo . Эти препараты либо используются в клинической практике, либо находятся на продвинутой стадии клинических испытаний.Рибавирин ингибирует репликацию CCHFV в клеточной культуре [15] и назначается пациентам с CCHF, хотя его клиническая польза не доказана и обсуждается неоднозначно [16]–[19]. Он показывает положительные эффекты на неонатальных моделях и моделях мышей STAT1 -/- [9], [10]. В настоящее время рибавирин является единственным препаратом, доступным для лечения ККГЛ. Арбидол является противовирусным препаратом широкого спектра действия, проявляющим активность против ряда РНК-вирусов in vitro и in vivo , в первую очередь против вируса гриппа А [20]–[24].В России и Китае препарат используется в клинической практике преимущественно для профилактики и лечения острых респираторных инфекций, в том числе гриппа. Предполагается, что арбидол действует посредством гидрофобных взаимодействий с мембранами и вирусными белками, тем самым ингибируя слияние и проникновение вируса [25]–[27]. T-705 является мощным ингибитором in vitro и в животных моделях вируса гриппа, флебовирусов, хантавирусов, аренавирусов, альфавирусов, пикорнавирусов и норовирусов [28]–[35]. После превращения в Т-705-рибофуранозил-5′-трифосфат он предположительно действует как нуклеотидный аналог, который избирательно ингибирует вирусную РНК-зависимую РНК-полимеразу или вызывает летальный мутагенез при включении в вирусную РНК [36]–[40]. Т-705 (фавипиравир) в настоящее время находится на последней стадии клинических исследований для лечения вирусной инфекции гриппа.

Материалы и методы

Заявление об этике

Это исследование было проведено в строгом соответствии с рекомендациями Немецкого общества лабораторных зоотехников под наблюдением ветеринара. Протокол был одобрен Комитетом по этике экспериментов на животных города Гамбурга (разрешение № 44/11). Были приложены все усилия, чтобы свести к минимуму количество животных, используемых для экспериментов, и страдания животных во время экспериментов.Весь персонал, проводящий эксперименты на животных, прошел обучение и обучение по программе категории B или C Федерации европейских ассоциаций лабораторных животных. Эксперименты на животных в этом исследовании описаны в соответствии с рекомендациями ARRIVE [41]. Всего для этого исследования использовали 162 мыши, и все мыши были включены в анализ.

Вирусы

Штамм

ВКГЛ Afg-09 2990 был выделен в 2009 г. в нашей лаборатории от больного с фатальным течением инфекции [42] и пассирован 2 раза, прежде чем он был использован в данном исследовании.Вирусный запас выращивали на клетках Vero E6, определяли количественно с помощью иммунофокусного анализа (см. ниже) и хранили при -70°C до использования в экспериментах in vitro и in vivo .

Противовирусные соединения

Рибавирин (CAS № 36791-04-5; PubChem CID 37542) был получен от MP Biomedicals (заказ № 02196066), гидрохлорид арбидола (CAS № 131707-23-8; PubChem CID 131410) от Waterstone Technology, США ( заказ № 49823), а Т-705 (фавипиравир; CAS № 259793-96-9; PubChem CID 492405) был специально синтезирован BOC Sciences, Creative Dynamics, США.

Противовирусные и токсические испытания в клеточной культуре

Соединения растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) в концентрации около 10 мг/мл и хранили при -20°C. Конечная концентрация ДМСО в супернатанте клеточной культуры составляла 0,1%. Клетки Vero E6 выращивали в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM) (PAA Laboratories) с добавлением 5% фетальной телячьей сыворотки (FCS) и стрептомицина/пенициллина, и высевали при плотности 4×10 4 клеток на лунку 24-гн. луночный планшет за 1 день до заражения.Клетки инокулировали CCHFV при множественности заражения (MOI) 0,01 в лаборатории BSL-4. Инокулят удаляли через 1 ч и заменяли свежей средой, дополненной различными концентрациями соединения. Для экспериментов с арбидолом клетки дополнительно обрабатывали арбидолом за 18 ч до инфицирования. Концентрацию инфекционных вирусных частиц в супернатанте клеточной культуры измеряли через 2–4 дня после инфицирования (п.и.) с помощью иммунофокусного анализа. Рост и жизнеспособность клеток при обработке соединением определяли методом 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолийбромида (МТТ), как описано [43].С помощью программы Prism GraphPad 6.0 (программное обеспечение GraphPad) к данным подгоняли сигмоидальную кривую доза-реакция. Ингибирующие концентрации, снижающие титр вируса на 50%, 90% и 99% (IC 50 , IC 90 и IC 99 соответственно), и цитотоксические концентрации, снижающие рост клеток на 50 % и 90 % % (СС 50 и СС 90 соответственно) рассчитывали по сигмоидальным функциям.

Для анализа комбинаций двух препаратов была протестирована матрица концентраций 8×8.Препараты x и y были испытаны в концентрациях c  = 0; ИЦ 90 /8; ИЦ 90 /4; ИЦ 90 /2; IC 90 ; ИЦ 90 •2; ИЦ 90 •4; IC 90 •8 во всех возможных комбинациях ( c x , c y ). Значения IC 90 были получены из предыдущих экспериментов с одним лекарственным средством. Данные о комбинациях препаратов были проанализированы с использованием модели взаимодействий с лекарственными препаратами, независимой от Блисса [44].Эта модель определяется уравнением E XY = E x + y — ( E x E Y xy представляет собой аддитивный эффект лекарств x и y , предсказанный их индивидуальными эффектами E x и E y . E x = ( V OB (0,0) — V OB ( C x E Y Y = ( V OB (0,0) — V (0, C Y )) / V OB (0,0), где V obs ( c x , c y ) – наблюдаемое, т.е.е. экспериментально определенный титр вируса для ( с х , с у ). По аналогии с программой MacSynergy II [44], [45], которая оценивает антивирусные данные в соответствии с моделью независимости Блисса, был использован трехмерный подход для выявления областей, в которых наблюдаемые эффекты больше (синергия) или меньше (антагонизм), чем предсказанные E xy . С этой целью соотношение между предсказанным вирусом титер V PRES PRES ( C x , C y V ) = V (0,0) • (1- E xy ) и наблюдаемый вирус титр V SB ( C x x y y ) был рассчитан для каждой комбинации препарата ( C x , . Отношение >1 указывает на синергизм (т.е. для ( c x , c y ) титр вируса, предсказанный для аддитивного эффекта, выше, чем титр вируса, определенный экспериментально), соотношение <1 указывает на антагонизм (т.е. для ( c x , c y ) титр вируса для прогнозируемого аддитивного эффекта ниже экспериментально определенного титра вируса).

Эксперименты на мышах

IFNAR -/- мышей (фон 129Sv) [46] были выведены в помещении для животных, свободных от специфических патогенов Института Бернхарда-Нохта.Во всех экспериментах использовали самок животных в возрасте от шести до двенадцати недель (медиана веса 20 г, диапазон 15–24 г), за исключением девяти самцов, которых использовали для определения летальной дозы вируса. Ожидалось, что размер группы из 5 животных обеспечит достаточно точные оценки выживаемости, виремии и параметров клинической химии. Это позволяет выявить 80%-ную разницу в выживаемости между контрольной и лечебной группой при p (альфа) = 0,05 и мощности (1 – бета) = 0,8. Экспериментальные группы были сопоставимы по возрасту.От трех до пяти животных группы содержались вместе в обычной клетке без обогащения. У них был свободный доступ к еде и воде. Эксперименты по заражению вирусом CCHFV проводились в помещении для животных лаборатории BSL-4 с искусственными циклами свет/темнота.

От трех до десяти животных в группе (в зависимости от того, планировался ли сбор органов) заражали внутрибрюшинной (внутрибрюшинной) инъекцией от 0,3 до 10 4 очагообразующих единиц (БОЕ) ККГЛВ в 100 или 200 мкл DMEM, содержащей 2% FCS.Способ введения был выбран для облегчения сравнения с ранее описанными моделями мышей CCHF [10], [11]. После заражения мышей ежедневно контролировали на наличие признаков заболевания, измеряли массу тела и ректальную температуру тела с помощью термометра BIO-TK8851 с ректальным датчиком для мышей BIO-BRET-3 (Bioseb, Франция). Животных с тяжелыми признаками заболевания, такими как судороги, кровотечение, вздутие живота, диарея, агония или потеря веса >15% в течение 2 дней, подвергали эвтаназии. Образцы крови по 30–80 мкл на животное брали путем пункции хвостовой вены с интервалами 1–4 дня в течение 14 дней (всего ≤5 заборов крови) для клинического биохимического анализа и измерения виремии.Для забора органов, когда критерии эвтаназии были выполнены, и в конце эксперимента животных подвергали эвтаназии передозировкой изофлюрана с последующим смещением шейных позвонков. Органы собирали после смерти или на 3-й день p.i. от 2–3 животных, выбранных случайным образом из экспериментальных групп по 7–10 животных и проанализированных на инфекционный титр вируса и гистопатологические изменения. Эксперименты не повторялись.

Противовирусное и токсическое тестирование

in vivo

Рибавирин вводили один раз в день i.п. маршрут. Перед каждым применением готовили запас 10 мг/мл в 0,9% NaCl. Животные получали рибавирин в дозе 100 мг/(кг×день) (200 мкл на 20-граммовую мышь) или 200 мкл 0,9% NaCl в качестве плацебо. Доза рибавирина, смертельная для 50% мышей (LD 50 ), составляет 220 мг/(кг×день) [47]. Лечение начинали через 1 ч p.i. и продолжали до смерти или 8-го дня. Арбидол вводили один раз в сутки per os с помощью желудочного зонда. Перед каждым применением готовили суспензии 15 или 30 мг/мл в 0,5% метилцеллюлозе.Животные получали арбидол в дозе 75 или 150 мг/(кг×день) (100 мкл суспензии на 20-граммовую мышь) или 100 мкл 0,5% метилцеллюлозы в качестве плацебо. Лечение начинали за 1 день до инфицирования и продолжали до смерти или до 8-го дня. 8 дней. В этом диапазоне доз токсических эффектов не наблюдалось. Т-705 вводили два раза в день перорально с помощью желудочного зонда. Подвески 0.Ежедневно готовили 75, 1,5, 3 или 30 мг/мл в 0,5% метилцеллюлозе. Животные получали Т-705 в дозе 7,5, 15, 30 или 300 мг/(кг×день) (100 мкл суспензии два раза в день для 20-граммовой мыши) или 100 мкл 0,5% метилцеллюлозы два раза в день. Лечение начинали через 1 ч p.i. или позже и продолжались до смерти или 8-го дня.

Титрование вируса и антител

Инфекционно-вирусные частицы в образцах крови и органов определяли иммунофокусным методом. Образцы органов гомогенизировали в 500 мкл DMEM–2% FCS с использованием Lysing Matrix D (MP Biomedicals) на ударной мельнице.Клетки Vero в 24-луночных планшетах инокулировали 200 мкл серийных 10-кратных разведений образца. Посевной материал удаляли через 1 час и заменяли слоем 1% метилцеллюлоза-DMEM-6% FCS. Через 5 дней инкубации клетки фиксировали 4% формальдегидом в фосфатно-солевом буфере (PBS), промывали водой и пермеабилизировали 0,5% Triton X-100 в PBS. После промывания и блокирования 10% FCS в PBS очаги инфицированных клеток выявляли с помощью моноклонального антитела A4, специфичного к нуклеопротеину (NP) ВКГЛ [48].После промывки клетки инкубировали с меченым пероксидазой антимышиным IgG. Очаги визуализировали тетраметилбензидином и подсчитывали.

Вирусспецифические антитела в крови выявляли методом иммунофлюоресцентного анализа (ИФА) с использованием в качестве антигена клеток, инфицированных ВКГЛ штамм Afg-09 2990. Сыворотку мышей инактивировали в течение 1 ч при 60°С и тестировали в разведении 1:20.

Клиническая химия

Образцы сыворотки разбавляли 1∶10 или выше, при необходимости, в 0,9% NaCl и анализировали на активность АСТ и АЛТ с использованием имеющихся в продаже наборов для колориметрического анализа при 25°C (предел обнаружения для неразбавленной сыворотки равен 2.25 ЕД/л для АСТ и 2,65 ЕД/л для АЛТ) (Reflotron, Roche Diagnostics). Параметры измеряли для отдельных животных.

Гистология и иммуногистохимия

Легкие, почки, сердце, селезенку, головной мозг и печень собирали, фиксировали в 4% формальдегиде в PBS и заливали в парафин с использованием тканевого процессора Leica ASP300 S и станции заливки Leica EG1160 (Leica). Срезы (4 мкм) окрашивали гематоксилин-эозином (H&E) или обрабатывали для иммуногистохимии (IHC). Срезы IHC окрашивали с использованием автоматизированной системы окрашивания Ventana BenchMark XT (Ventana Medical Systems) и раствора для кондиционирования клеток 1 или 2 (Ventana) в течение 30–60 мин.Срезы инкубировали с первичными антителами, направленными против маркера В-клеток B220 (1∶400; ​​eBioscience), маркера апоптоза расщепленной каспазы-3 (1∶100; R&D Systems), маркера Т-клеток CD3 (1∶100; Dako), миелоидного происхождения. клеточный (например, макрофагальный) маркер Iba-1 (1∶2000; Wako Chemicals), индуцируемая синтазы оксида азота (iNOS), экспрессируемая активированными клетками, происходящими из моноцитов (1∶50; Abcam), и маркер клеточной пролиферации Ki67 (1∶250; Абчам) в течение 1 ч. Первичные антитела выявляли с помощью иммуноферментного полимера Histofine Simple Stain MAX PO (Nichirei Biosciences) против мышиного IgG, антикроличьего IgG или антикрысиного IgG и окрашивали субстратом 3,3′-диаминобензидина (DAB) с использованием UltraView Universal. Комплект обнаружения DAB (Ventana).Клетки контрастировали гематоксилином. ИГХ с первичными антителами, направленными против NP ВКГЛ (моноклональное антитело А4 [48], 1∶500) и маркером нейтрофилов Ly6G (1∶1000; BD Bioscience), проводили вручную. Срезы кипятили в цитратном буфере (рН 6) в течение 1 ч и инкубировали с антителами при 4°С в течение ночи. Первичные антитела выявляли с помощью иммуноферментного полимера против мышиного IgG Histofine Simple Stain AP или против крысиного IgG Histofine Simple Stain MAX PO и окрашивали субстратом Fast Red (Roche) или DAB (Sigma-Aldrich) соответственно. Для контрастного окрашивания использовали раствор гематоксилина Майера. Срезы покрывали покровным стеклом для заливки Tissue Tek (Sakura Finetek).

Статистический анализ

Статистический анализ был выполнен с помощью GraphPad 6.0 (программное обеспечение GraphPad). Непарные группы сравнивали с двусторонним U-критерием Манна-Уитни для непрерывных параметров и с двусторонним точным критерием Фишера для частот. Кривые выживаемости сравнивали с критерием логарифмического ранга (Мантела-Кокса).

Результаты

Оптимизация мышиной модели IFNAR

−/− для антивирусного тестирования

Перед тестированием противовирусных препаратов на мышиной модели IFNAR -/- мы стремились определить оптимальную инфекционную дозу для штамма Afg09-2990 ВКГЛ и охарактеризовать заболевание, вызванное этим конкретным штаммом.С этой целью мышей IFNAR -/- инфицировали внутрибрюшинно. с 0,3, 1, 3, 10, 100, 1000 и 10 000 БОЕ. Животные гибли от инфекции даже после инокуляции 0,3 БОЕ (инокулят, погибло/заражено: 0,3 БОЕ, 4/5; 1 БОЕ, 5/5; 3 БОЕ, 4/5; 10 БОЕ, 6/8; 100 БОЕ 13/. 13; 1000 БОЕ, 8/8; 10000 БОЕ, 3/3). Это указывает на то, что всего нескольких инфекционных вирусных частиц штамма Afg09-2990 ККГЛЧ достаточно, чтобы инициировать продуктивную инфекцию. Летальный исход стабильно наблюдался при ≥100 БОЕ. Поэтому модель была дополнительно охарактеризована для инокуляционных доз 10, 100, 1000 и 10000 БОЕ (рис.1). Животные, инфицированные 100 или 1000 БОЕ, погибали между 3-м и 6-м днями, а животные, инфицированные 10000 БОЕ, равномерно умирали на 2-й день. Перед смертью животные теряли около 15% массы тела (рис. 1). На 2-й день средние значения АСТ и АЛТ составляли около 300 ЕД/л и 100 ЕД/л соответственно у животных, которым вводили 100–1000 БОЕ. Оба значения были выше в группе 10 000 БОЕ (АСТ 1600 ЕД/л и АЛТ 500 ЕД/л) (рис. 1). Повышение АСТ и АЛТ указывало на повреждение клеток, в частности клеток печени. На 2-й день титр вируса в крови колебался от уровня ниже порога обнаружения в группе 10 БОЕ, через 3 log 10 БОЕ/мл в группах 100 и 1000 БОЕ, до 5 log 10 БОЕ/мл в группе 10 000 БОЕ. группа (рис.1). На 3-й день вирус был обнаружен во всех анализируемых органах (селезенке, почках, печени, сердце, легких и головном мозге) в титрах от 4 до 7 log 10 БОЕ/г независимо от дозы инокуляции (рис. 1). Максимальная концентрация вируса обнаружена в печени. Поскольку прививка с ≤10 БОЕ не всегда была летальной, а прививка с 10000 БОЕ оставляет только 2 дня между заражением и летальным исходом для терапевтического вмешательства, дальнейшие эксперименты проводились с дозой 100 или 1000 БОЕ.

Рисунок 1.Выживаемость, масса тела, АСТ, АЛТ и титр вируса в крови и органах мышей IFNAR -/- , инфицированных различными дозами вируса ККГЛ.

Мышей инокулировали внутрибрюшинно. с 10, 100, 1000 или 10 000 БОЕ вируса. Титры в органах определяли у животных, умерших от инфекции или подлежащих эвтаназии из-за тяжести заболевания. Среднее значение и стандартное отклонение показаны для веса и логарифмически преобразованных титров органов. Вертикальные столбцы на графиках АСТ и АЛТ (обратите внимание на логарифмическую шкалу оси у) и логарифмически преобразованные титры вируса в крови представляют собой средние значения. Данные для групп 100 и 1000 FFU наивных животных были объединены с соответствующими данными плацебо-контролей, показанными на рис. 5, чтобы обеспечить более надежные оценки параметров. Диапазон виремии ниже предела обнаружения иммунофокусного анализа, а также нормальный референтный диапазон АСТ и АЛТ у мышей [59] заштрихованы серым цветом. Примечания. Группа 10 FFU: у 2 выживших животных не было обнаружено ни повышения АСТ/АЛТ, ни виремии на 4-й день (значение АЛТ для одного животного не определялось). Группа 100 БОЕ: животное, погибшее на 6-й день, не показало повышения АСТ/АЛТ и виремии на 2-й и 4-й дни.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0002804.g001

Гистопатологические корреляты заболевания

Легкие, сердце, почки, мозг, печень и селезенку мышей, инфицированных CCHFV IFNAR -/- , собирали на 3-й день и оценивали на окрашенных H&E срезах. Распределение вируса во всех органах и воспалительную реакцию в печени визуализировали с помощью ИГХ. Наивные мыши IFNAR -/- служили в качестве контроля.

Печень.

В печени мышей IFNAR -/- , инфицированных CCHFV, обнаружен острый гепатит с обширным мостовидным гепатоцеллюлярным некрозом и воспалительной реакцией от легкой до умеренной (рис.2). В зонах некроза выявляли накопление НЧ ККГЛ в гепатоцитах (рис. 2) и расщепленных каспаз-3-позитивных (апоптотических) гепатоцитах (рис. 3). Пролиферация клеток, определяемая окрашиванием ядерного антигена Ki67, была увеличена. Хотя большинство Ki67-позитивных клеток можно отнести к воспалительной реакции, также была очевидна пролиферация гепатоцитов (рис. 3). Нарушена архитектура Iba-1-позитивных макрофагов (клеток Купфера) в зонах некроза; клетки показали увеличенные клеточные тела и фокальные скопления (рис.3). Кроме того, были обнаружены экспрессирующие iNOS активированные клетки, происходящие из моноцитов, которых нет в нормальной печени (рис. 3). Эти изменения предполагают активацию моноцитов/макрофагов. Количество CD3-позитивных Т-клеток, B220-позитивных В-клеток и Ly6G-позитивных гранулоцитов было несколько увеличено (рис. 3).

Рис. 2. Гистопатология и распределение вирусного антигена в печени и селезенке мышей, не подвергавшихся лечению, и мышей, инфицированных вирусом ККГЛ IFNAR -/- , и эффект лечения рибавирином и Т-705.

Животных инокулировали внутрибрюшинно. со 100 FFU CCHFV. Вверху: Печень была собрана (i) у интактных животных (ii) у животных, которые умерли от инфекции без лечения на 3-й день p.i., (iii) умерли от инфекции на 9-й день p.i. после обработки рибавирином в дозе 100 мг/(кг×день) и (iv) которых подвергали эвтаназии на 3-й день p.i. во время лечения Т-705 дозой 300 мг/(кг×сут). Лечение рибавирином или Т-705 начинали через 1 ч после введения. и продолжали до смерти или до 8-го дня. Внизу: селезенку собирали у интактных животных и животных, умерших от инфекции без лечения, на 3-й день p.я. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином и визуализировали распределение вируса ККГЛ в ткани с использованием моноклональных антител против NP ККГЛ. Гистопатологические данные репрезентативны для 2–3 животных, проанализированных на группу. Масштабная линейка = 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0002804.g002

Рис. 3. ИГХ для маркеров воспаления, апоптоза и пролиферации в печени мышей, не инфицированных IFNAR -/- и инфицированных ВКГЛ, и эффект лечения рибавирином и Т-705.

Животных инокулировали внутрибрюшинно. со 100 FFU CCHFV. Печень собирали (i) у интактных животных (ii) у животных, умерших от инфекции без лечения на 3-й день после заражения, (iii) у умерших от инфекции на 9-й день после заражения. после обработки рибавирином в дозе 100 мг/(кг×день) и (iv) которых подвергали эвтаназии на 3-й день p.i. во время лечения Т-705 дозой 300 мг/(кг×сут). Лечение рибавирином или Т-705 начинали через 1 ч после введения. и продолжали до гибели или 8-го дня. Срезы окрашивали антителами против CD3, B220, Ly6G, Iba-1, iNOS, расщепленной каспазы-3 и Ki67.Т-клетки отмечены стрелками, поскольку антитело против CD3 проявляет некоторую ложную перекрестную реактивность. Гистопатологические данные репрезентативны для 2–3 животных, проанализированных на группу. Масштабная линейка = 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0002804.g003

Селезенка.

В селезенке мышей, инфицированных вирусом КГЛ, умеренно снижено количество лимфоцитов и увеличено количество клеточного детрита в красной и белой пульпе. Кроме того, количество мегакариоцитов было снижено (рис.2). В клетках селезенки обнаруживались НП ВКГЛ, хотя сигналы были значительно менее интенсивными, чем в печени (рис. 2).

Легкие, сердце, почки и головной мозг.

Гистопатологический анализ не выявил каких-либо явных различий в тканях легких, сердца, почек и головного мозга у мышей, инфицированных CCHFV, и мышей, не подвергавшихся лечению. Уровень вирусного антигена был ниже предела обнаружения ИГХ (данные не показаны).

Таким образом, у мышей IFNAR -/- , инфицированных вирусом ККГЛ, были обнаружены патологические изменения в печени и селезенке. Основной находкой был острый гепатит с обширным некрозом, реактивной пролиферацией гепатоцитов, легкой или умеренной воспалительной реакцией и морфологическими признаками активации моноцитов/макрофагов. Зараженные CCHFV и апоптотические гепатоциты сгруппированы в зонах некроза.

Тестирование противовирусных препаратов и токсичности

in vitro

Противовирусная активность рибавирина, гидрохлорида арбидола и Т-705 в отношении штамма Afg09-2990 ВКГЛ была протестирована на клетках Vero E6. Все три соединения были способны подавлять репликацию вируса на 3-4 log 10 единиц при концентрациях ≥10 мкг/мл (рис.4). Значения IC 50 и IC 90 находились в пределах 0,6–2,8 мкг/мл и 1,2–4,7 мкг/мл соответственно. Значения IC 99 варьировались от 2,0 до 9,5 мкг/мл. Клеточная токсичность в тестовом диапазоне, измеренном тестом МТТ, была очевидна только для гидрохлорида арбидола (рибавирин CC 50 >32 мкг/мл; гидрохлорид арбидола CC 50 8,3 мкг/мл, CC 90 20 мкг/мл; T -705 CC 50 >15 мкг/мл) (рис. 4). В заключение, все три соединения показали сильное противовирусное действие против CCHFV Afg09-2990 в культуре клеток.Арбидол проявлял токсичность с терапевтическим индексом около 10.

Рисунок 4. Тестирование противовирусной активности рибавирина, гидрохлорида арбидола и Т-705 в культуре клеток.

Клетки Vero E6 инокулировали CCHFV при MOI 0,01, и соединение добавляли через 1–4 дня p.i. методом иммунофокуса. Рост и жизнеспособность клеток при обработке соединением определяли методом МТТ. Кривые доза-реакция были подогнаны к данным. На графиках показаны репрезентативные эксперименты с точками данных, представляющими среднее значение и стандартное отклонение ≥3 повторов.Значения IC 50 , IC 90 и IC 99 были рассчитаны из сигмоидальных функций 2–3 независимых экспериментов и показаны ниже графиков (среднее значение и диапазон).

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0002804.g004

Противовирусное тестирование

in vivo

Рибавирин тестировали по сравнению с группой плацебо, получавшей носитель (0,9% раствор NaCl) (рис. 5). Обе группы мышей IFNAR -/- были инфицированы 100 БОЕ CCHFV.Хотя одно животное выжило после лечения, рибавирин существенно не увеличивал выживаемость (p = 0,4). Однако препарат удлинял время до смерти (медиана 3 дня против 6 дней для плацебо по сравнению с рибавирином, p = 0,0007), снижал уровни АСТ (p = 0,001) и АЛТ (p = 0,006) на 2-й день, уменьшал титр вируса в крови на 2-й день (p = 0,0007), увеличение массы тела на 2-й и 3-й день (p = 0,03 и p = 0,002 соответственно) и снижение терминальной концентрации вируса во всех органах по сравнению с плацебо на 3-й день ( р<0.001 отдельно для каждого органа). Гистопатологический анализ органов, собранных на 3-й день у мышей, получавших рибавирин, выявил лишь небольшие диссеминированные очаги некроза; большая часть паренхимы печени напоминала наивных мышей. Заметно уменьшенный гепатоцеллюлярный некроз коррелировал с низким количеством апоптотических гепатоцитов (расщепленная каспаза-3), Т-клеток (CD3), В-клеток (В220) и активированных клеток, происходящих из моноцитов (iNOS). Вирусный антиген-положительные клетки (NP) были значительно снижены в печени и селезенке по сравнению с необработанными или получавшими плацебо мышами (данные не показаны).Однако у мышей, получавших рибавирин и умерших от инфекции на 4–9-й день, на момент смерти наблюдался обширный мостовидный гепатоцеллюлярный некроз (рис. 2). Как и у необработанных мышей, некроз сопровождался присутствием многочисленных Iba-1-позитивных макрофагов (клеток Купфера), показывающих увеличенные клеточные тела и фокальные кластеры, а также экспрессирующих iNOS активированных клеток, происходящих из моноцитов (рис. 3). Оба изменения предполагают сильную активацию моноцитов/макрофагов. Однако, в отличие от нелеченых мышей, вирусный антиген почти не обнаруживался в ткани печени леченых мышей (рис.2), что соответствует низкому титру вируса во всех органах (рис. 5, внизу). Таким образом, рибавирин снижает нагрузку CCHFV и задерживает прогрессирование заболевания, но не предотвращает терминальный некроз печени, активацию моноцитов/макрофагов и летальный исход в мышиной модели IFNAR -/- .

Рис. 5. Обработка мышей IFNAR -/- , инфицированных CCHFV, рибавирином и гидрохлоридом арбидола.

Мышей инокулировали внутрибрюшинно. с 10, 100 или 1000 БОЕ вируса. Рибавирин вводили i.п. раз в день. Животные получали рибавирин в дозе 100/(кг×день) или 0,9% NaCl в качестве плацебо. Лечение начинали через 1 ч p.i. и продолжали до смерти или 8-го дня. Арбидол вводили один раз в сутки per os с помощью желудочного зонда. Животные получали арбидол в дозе 150 мг/(кг×день) или 0,5% метилцеллюлозу в качестве плацебо. Лечение начинали за 1 день до инфицирования и продолжали до смерти или до 8-го дня. Титры органов определяли у животных, умерших от инфекции или подлежащих эвтаназии из-за тяжести заболевания.Кроме того, три животных из группы, получавшей рибавирин, были случайным образом подвергнуты эвтаназии на 3-й день p.i. для определения титра вируса в органах (данные о весе, АСТ, АЛТ и виремии, полученные от этих мышей до 3-х суток, были включены в соответствующие графики). Среднее значение и стандартное отклонение показаны для веса и логарифмически преобразованных титров органов. Вертикальные столбцы на графиках АСТ и АЛТ (обратите внимание на логарифмическую шкалу оси у) и логарифмически преобразованные титры вируса в крови представляют собой средние значения. Продолжительность лечения на графиках выживаемости, диапазон виремии ниже предела обнаружения иммунофокусного анализа, а также нормальный референсный диапазон АСТ и АЛТ у мышей [59] заштрихованы серым цветом.Примечания. Группа плацебо 100 БОЕ: животное, которое умерло на 6-й день, не показало повышения АСТ/АЛТ и виремии на 4-й день. Группа 100 БОЕ рибавирина: у выжившего животного не было обнаруживаемой виремии, но было повышение АСТ. Виремия не определялась на 11-й день. 10 Группа БОЕ арбидола: у выжившего животного не было повышения АСТ и виремии на 4-й день. Некоторые значения на 4-й, 8-й и 11-й дни не определялись из-за недостаточного количества крови.

https://doi.org/10. 1371/journal.pntd.0002804.g005

Гидрохлорид арбидола [75 и 150 мг/(кг×день)] тестировали по сравнению с группой плацебо, получавшей носитель (0,5% метилцеллюлоза) [Фиг. 5, и данные не показаны для 75 мг/(кг×день)]. Обе группы были инфицированы 1000 FFU CCHFV. Мышей предварительно обрабатывали за сутки до инокуляции. Однако препарат не влиял ни на выживаемость, ни на время выживания, ни на какой-либо другой измеряемый параметр. Даже снижение дозы прививки до 10 БОЕ не имело эффекта по сравнению с исторической контрольной группой.

Т-705 тестировали по сравнению с группой плацебо, получавшей носитель (0,5% метилцеллюлоза) (рис. 6). Все группы были инфицированы 100 БОЕ CCHFV. Первоначально тестировали высокую дозу Т-705 [300 мг/(кг×день)]. Препарат вводили с 0-го по 8-й день. Животные, получавшие плацебо, погибали между 3-м и 4-м днем. На 3-й день у них наблюдалась потеря массы тела почти на 20%, повышение температуры тела до 40°С, значения АСТ 1200–1200–400°С. 51 000 ЕД/л и значения АЛТ 260–6 700 ЕД/л. Все животные лечебной группы перенесли инфекцию и не проявляли признаков заболевания.Вирус не был обнаружен ни в крови, ни в органах на протяжении всего периода наблюдения (рис. 6 и данные не представлены). Гистопатология и IHC на 3-й день выявили в основном нормальную ткань печени с отсутствием вирусного антигена и воспалительных клеток (рис. 2 и 3).

. Рис. 6. Лечение инфицированных CCHFV мышей IFNAR -/- с помощью T-705 и эксперименты по времени добавления.

Мышей инокулировали внутрибрюшинно. со 100 БОЕ вируса. Т-705 вводили два раза в день перорально с помощью желудочного зонда.Животные получали дозу Т-705 300 мг/(кг×день) или 0,5% метилцеллюлозу в качестве плацебо. Лечение начинали через 1 час, 1 день или 2 дня p.i. и продолжали до смерти или до 8-го дня. Два животных на схему лечения подвергали эвтаназии на 3-й день p.i. определить титр вируса в органах. Для веса и температуры показаны среднее значение и стандартное отклонение. Вертикальные столбцы на графиках АСТ и АЛТ (обратите внимание на логарифмическую шкалу оси у) и логарифмически преобразованные титры вируса в крови представляют собой средние значения. Продолжительность лечения на графиках выживаемости, диапазон виремии ниже предела обнаружения иммунофокусного анализа, а также нормальный референсный диапазон АСТ и АЛТ у мышей [59] заштрихованы серым цветом.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0002804.g006

Для определения эффективности препарата на поздних стадиях инфекции были проведены эксперименты по времени добавления (рис. 6). Лечение высокой дозой препарата начинали через 1-2 дня после заражения вирусом и продолжали до 8-го дня. Выживаемость в обеих группах составила 100%, у животных почти не было признаков заболевания. Только если лечение начиналось через 2 дня после начала лечения, незначительные изменения массы тела, температуры и АСТ наблюдались на 3-й день.Вирус оставался неопределяемым в крови и органах в обеих группах времени добавления на протяжении всего периода наблюдения. Для подтверждения инфекции у животных в группах, получавших Т-705, измеряли выработку специфических антител к CCHFV через 21 день p. i. Только 1/10 (10%) животных лечили после воздействия, но 10/10 (100%) животных лечили с 1-го или 2-го дня p.i. выработали антитела, что указывает на то, что репликация вируса при постконтактной обработке Т-705 была даже недостаточной для образования антител.

Для определения наименьшей эффективной дозы Т-705 животные получали 30, 15 или 7,5 мг/(кг×день) Т-705 или 0,5% метилцеллюлозы в качестве плацебо (рис. 7). Лечение начинали через 1 ч p.i. и продолжали до смерти или до дня 8. Все животные из групп, получавших 30 и 15 мг/(кг×день), выжили и почти не проявляли признаков заболевания. Вирус был обнаружен на низком уровне только в крови одного животного из группы лечения 15 мг/(кг×день) на 11-й день (фиг. 7). Доза 7,5 мг/(кг×сут) не предотвратила летальный исход, хотя и удлинила время до смерти (p = 0.0007) и снижал уровни AST (p = 0,0007) и ALT (p = 0,004) на 3-й день. В совокупности Т-705 обладает высокой эффективностью против CCHFV в мышиной модели IFNAR -/- .

Рисунок 7. Определение минимальной эффективной дозы Т-705.

Мышей инокулировали внутрибрюшинно. со 100 БОЕ вируса. Т-705 вводили два раза в день перорально с помощью желудочного зонда. Животные получали дозу Т-705 30, 15 или 7,5 мг/(кг×день) или 0,5% метилцеллюлозу в качестве плацебо. Лечение начато через 1 час.я. и продолжали до гибели или на 8-й день. Титр вируса в органах определяли у животных, умерших от инфекции, и у 3 животных из группы 30 мг/(кг×сут), умерщвленных на 3-й день. группа 15 мг/(кг×день) (nd). Среднее значение и стандартное отклонение (или диапазон для n = 2) показаны для веса, температуры и логарифмически преобразованных титров органов. Вертикальные столбцы на графиках АСТ и АЛТ (обратите внимание на логарифмическую шкалу оси у) и логарифмически преобразованные титры вируса в крови представляют собой средние значения.Продолжительность лечения на графиках выживаемости, диапазон виремии ниже предела обнаружения иммунофокусного анализа, а также нормальный референсный диапазон АСТ и АЛТ у мышей [59] заштрихованы серым цветом. Примечания. Группа плацебо: животное, которое умерло на 5-й день, не показало ни повышения АСТ/АЛТ, ни виремии на 3-й день. время.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0002804.g007

Комбинация рибавирина и Т-705

in vitro и in vivo

Рибавирин в настоящее время используется в клинической практике для лечения КГЛ [16]–[19].Поэтому важно знать, можно ли давать Т-705 в комбинации с рибавирином и как взаимодействуют оба препарата. Сначала в культуре клеток определяли противовирусную активность 64 комбинаций рибавирина и Т-705. Матрица концентрации 8×8 была разработана на основе значений IC 90 обоих препаратов, как определено выше. Инфекционные вирусные частицы измеряли через 3 дня p.i. методом иммунофокуса, а жизнеспособность клеток определяли методом МТТ. Поверхность доза-реакция демонстрирует, что комбинации рибавирина и Т-705 проявляют сильные противовирусные эффекты с подавлением репликации вируса более чем на 5 логарифмических единиц (рис. 8А). Возможные антагонистические или синергетические эффекты оценивались с использованием модели независимости Bliss по аналогии с алгоритмами программы MacSynergy II [44], [45]. Этот анализ выявил четкие синергетические эффекты, когда препараты были объединены в концентрациях, близких к их IC50 90 . В этой области матрицы экспериментальный титр вируса был до 2 логарифмических единиц ниже, чем титр, предсказанный в соответствии с моделью независимости Блисса для аддитивного эффекта (фиг. 8B). Тест МТТ не выявил токсичности препарата на всей матрице (рис.8Б).

Рисунок 8. Тестирование противовирусной активности комбинации рибавирина и Т-705 в культуре клеток.

Клетки Vero E6 инокулировали CCHFV при MOI 0,01 и добавляли соединения Матрица комбинации лекарственных средств 1×8 была разработана, как описано в разделе «Материалы и методы». Концентрацию инфекционных вирусных частиц в супернатанте клеточной культуры измеряли через 3 дня p.i. методом иммунофокуса. Рост и жизнеспособность клеток при обработке соединением определяли методом МТТ.(A) Поверхность доза-реакция для комбинации рибавирина и Т-705. Сигмоидальные кривые доза-реакция были приспособлены к данным по одному лекарственному средству, и значения IC 50 и IC 90 для рибавирина и Т-705 были рассчитаны по функциям. (B) По аналогии с программой MacSynergy II [44], [45] был использован трехмерный подход для определения областей, в которых наблюдаемые эффекты больше (синергия) или меньше (антагонизм), чем предсказывает модель независимости Блисса. С этой целью для каждой комбинации препаратов рассчитывали соотношение между прогнозируемым титром вируса и наблюдаемым титром вируса.Отношение >1 указывает на синергизм (т.е. титр вируса, предсказанный для аддитивного эффекта, выше, чем экспериментально определенный титр вируса), соотношение <1 указывает на антагонизм (т.е. титр вируса для прогнозируемого аддитивного эффекта ниже, чем экспериментально определенный титр вируса). . Комбинации лекарственных средств, демонстрирующие явное различие между экспериментальным и прогнозируемым титром (≥4-кратное), отмечены желтым цветом, а соотношение указано красным. Значения МТТ показаны синим цветом для каждой комбинации препаратов.

https://дои.org/10.1371/journal.pntd.0002804.g008

Для проверки действия комбинации лекарственных средств in vivo животные получали Т-705 в дозе 30 или 7,5 мг/(кг×сут) в сочетании с дозой рибавирина 100 мг/(кг×д). Доза Т-705 30 мг/(кг×день), которая является защитной при однократном введении лекарственного средства, была выбрана для проверки того, влияет ли добавление рибавирина на эффективность Т-705. Чтобы выяснить, может ли комбинация двух субэффективных доз привести к эффективному лечению, одновременно вводили 7,5 мг/(кг×день) T-705 и 100 мг/(кг×день) рибавирина.Ни один из параметров в группе, получавшей 30 мг/(кг×сут) Т-705 плюс 100 мг/(кг×сут) рибавирина (рис. 9, слева), не отличался статистически значимо от параметров группы 30 мг/(кг×сут). г) группа монопрепаратов Т-705 (рис. 7). С другой стороны, комбинация дозы Т-705 7,5 мг/(кг×день) с дозой рибавирина 100 мг/(кг×день) (рис. 9 справа) улучшала выживаемость по сравнению с однокомпонентным препаратом. лечения (рис. 5 и 7), хотя увеличение не достигло статистической значимости (p = 0,08 для T-705+рибавирин по сравнению столько T-705, и p = 0,07 для T-705+рибавирин по сравнению с одним рибавирином; двусторонний точный критерий Фишера). В заключение, Т-705 и рибавирин проявляют синергетические эффекты в соответствии с моделью независимости Bliss при комбинировании в концентрациях, близких к их IC50 90 in vitro . Совместное введение обоих препаратов в модели на животных предполагает, что комбинированное лечение приводит скорее к положительным, чем к побочным эффектам.

Рисунок 9. Лечение мышей комбинацией рибавирина и Т-705.

Мышей инокулировали внутрибрюшинно. со 100 БОЕ вируса. Т-705 вводили два раза в день перорально с помощью желудочного зонда. Рибавирин вводили внутрибрюшинно. раз в день. Животные получали дозу Т-705 30 или 7,5 мг/(кг×день) в сочетании с дозой рибавирина 100 мг/(кг×день). Контрольные группы плацебо показаны на рис. 7, так как оба эксперимента проводились параллельно. Лечение начинали через 1 ч p.i. и продолжали до смерти или до 8-го дня. Для веса и температуры показаны среднее значение и стандартное отклонение.Вертикальные столбцы на графиках АСТ и АЛТ (обратите внимание на логарифмическую шкалу оси у) и логарифмически преобразованные титры вируса в крови представляют собой средние значения. Продолжительность лечения на графиках выживаемости, диапазон виремии ниже предела обнаружения иммунофокусного анализа, а также нормальный референсный диапазон АСТ и АЛТ у мышей [59] заштрихованы серым цветом. Примечания. У двух животных, умерших на 6-й день, не было обнаружено вируса в органах или крови и не было повышения уровня АСТ/АЛТ.

https://дои.org/10.1371/journal.pntd.0002804.g009

Обсуждение

В этом исследовании мы использовали IFNAR -/- мышей в качестве модели in vivo для оценки эффективности противовирусных препаратов против ККГЛ. Основным патологическим изменением у мышей, инфицированных недавно выделенным штаммом Afg09-2990 CCHFV, был острый гепатит с обширным некрозом, реактивной пролиферацией гепатоцитов, легкой или умеренной воспалительной реакцией и морфологическими признаками активации моноцитов/макрофагов.В зонах некроза обнаружены инфицированные ВКГЛ и апоптотические гепатоциты. Рибавирин, гидрохлорид арбидола и Т-705 были активны в отношении CCHFV Afg09-2990 в культуре клеток. Однако гидрохлорид арбидола был неактивен in vivo . Рибавирин был частично активен, в то время как Т-705 был высокоэффективен в мышиной модели. Последний препарат был эффективен, даже если окно для терапевтического вмешательства составляло менее 2 дней.

В прошлом были описаны три мышиные модели КГЛ: неонатальная модель мыши, STAT1 -/- мышей и IFNAR -/- мышей [9]-[12].В последних моделях используется дефект врожденного иммунного ответа, который, по-видимому, необходим для защиты мышей от продуктивной инфекции CCHFV. Во всех трех моделях мыши умирают от инфекции в течение нескольких дней. Мы предпочитаем работать с мышами IFNAR -/- , поскольку генетический дефект касается только передачи сигналов интерферона типа I, в то время как дефицит STAT1 предотвращает активацию генов из-за сигнала интерферонами типа I или типа II, а новорожденные мыши иммунологически толерантный (неонатальная толерантность).Мыши IFNAR -/- очень восприимчивы к инфекции CCHFV. Инокулят, достаточный для инициации продуктивной инфекции, очень низок — 0,3 БОЕ, что предположительно соответствует всего нескольким инфекционным вирусным частицам. Это согласуется с экспериментами на мышах AG129, лишенных рецепторов интерферона типа I и типа II, в которых инокулята 0,1 БОЕ вируса лимфоцитарного хориоменингита было достаточно для заражения животных [49].

Совсем недавно было показано, что модель IFNAR -/- имитирует признаки ККГЛ человека [12].Эти результаты расширены здесь более подробным иммуногистопатологическим анализом печени. Гистопатология, измерение вирусной нагрузки, антигенное окрашивание в различных органах и измерение АСТ и АЛТ показывают, что печень является основным органом-мишенью ККГЛ. Хотя вирус был обнаружен во всех органах, титр в печени был самым высоким и в некоторых опытах превышал 7 log 10 БОЕ/г. Более высокий титр вируса в печени по сравнению с другими органами может объяснить, почему ИГХ-анализ на вирусный антиген выявил четко положительные клетки только в печени, тогда как в других органах сигналы были слабыми или отсутствовали.В исключительных случаях значения АСТ и АЛТ достигали 10 000 ЕД/л и 1 000 ЕД/л соответственно, что свидетельствовало о массивном поражении клеток печени. Однако, хотя АЛТ специфична для этого органа, АСТ также присутствует на высоком уровне в сердце, скелетных мышцах, почках, головном мозге и эритроцитах [50]. Следовательно, высокое соотношение АСТ/АЛТ также может указывать на внепеченочное повреждение клеток. В целом, гистологические и биохимические данные совместимы с диагнозом фульминантного поражения печени. Наши результаты также согласуются с патологическими наблюдениями при ККГЛ человека; гепатоцеллюлярный некроз с гиперпластическими и гипертрофическими клетками Купфера и легкими или отсутствующими инфильтратами воспалительных клеток является выдающимся гистопатологическим признаком у людей [3].Заслуживают внимания два новых аспекта, которые могут пролить свет на патофизиологию КГЛ. Во-первых, при некротических поражениях печени кластеризуются как инфицированные ВКГЛ гепатоциты, так и апоптотические гепатоциты. Это может свидетельствовать о том, что инфицированные CCHFV клетки подвергаются апоптозу и некрозу. Поскольку воспалительная реакция была от легкой до умеренной, прямое цитопатическое действие вируса на гепатоциты может быть связано с индукцией апоптоза и некроза. Важно отметить, что эта гипотеза также была выдвинута в ранних исследованиях IHC на людях с CCHF [3].Во-вторых, в печени были обнаружены активированные Iba-1-положительные макрофаги и активированные клетки моноцитарного происхождения, экспрессирующие iNOS. Эти клетки могут играть решающую роль в сильном провоспалительном иммунном ответе после инфекции CCHFV, о чем свидетельствует значительное увеличение сывороточных провоспалительных цитокинов и молекул хемоаттрактантов у мышей IFNAR -/- и STAT1 -/- , а также у людей. [6]–[8], [10], [12].

В этом исследовании мы использовали модель мыши IFNAR -/- для тестирования противовирусных препаратов против CCHFV in vivo .Рибавирин является стандартным средством лечения ККГЛ человека, хотя его клиническая эффективность не доказана [16]–[19] – и показывает положительные эффекты на моделях новорожденных и мышей STAT1 -/- [9], [10]. Поэтому мы сначала оценили модель мыши IFNAR -/- с использованием этого препарата. Время выживания удлинялось, а выживаемость не увеличивалась, что в значительной степени соответствует результатам экспериментов по высокодозному заражению мышей STAT1 -/- [10]. Несмотря на замедление прогрессирования заболевания и снижение вирусной нагрузки в крови и органах по данным титрования вируса и ИГХ, рибавирин не смог предотвратить летальный патофизиологический каскад.Важно отметить, что развитие терминального некроза печени с заметной активацией моноцитов/макрофагов при фактическом отсутствии вируса в органе демонстрирует, что пути хозяина, как только они запускаются вирусом, опосредуют патологию и смерть независимо от присутствия триггера.

Вторым протестированным соединением был гидрохлорид арбидола, противовирусный препарат широкого спектра действия, применяемый в клинической практике против гриппа [20]–[24]. Гидрохлорид арбидола эффективно подавлял ККГЛ в культуре клеток. Однако никаких положительных эффектов на модели мышей IFNAR -/- не наблюдалось.Препарат вводили тем же путем, но в более высокой дозе, чем в предыдущих исследованиях, которые показали положительный эффект против вируса гриппа А, Коксаки В и хантаан у мышей [20], [22]. Соединение обладало значительной токсичностью при более высоких концентрациях в клеточной культуре. Возможно, что его противовирусный эффект in vitro по меньшей мере частично объясняется общим клеточно-токсическим действием, которое не обнаруживается в анализе МТТ, используемом для оценки жизнеспособности клеток. Таким образом, возможно, данные in vitro завышают истинный противовирусный эффект препарата против ККГЛ.Кроме того, арбидол чрезвычайно гидрофобен, что может снижать его пероральную биодоступность у мышей. Возможно, в будущем стоит протестировать арбидол в фармацевтических препаратах с повышенной растворимостью [51].

Важным наблюдением в нашем исследовании является сильный противовирусный эффект T-705 против CCHFV в клеточной культуре и в мышиной модели IFNAR -/- . Было показано, что это соединение высокоактивно против ряда вирусов in vitro и in vivo , включая ортомиксовирусы, аренавирусы и буньявирусы родов хантавирусов и флебовирусов [28]–[34].Таким образом, его активность против CCHFV, буньявируса рода nairovirus , не является неожиданной. Однако ввиду низкой или отсутствующей эффективности рибавирина и арбидола in vivo , оба из которых имеют почти те же значения IC 50 и IC 90 , что и Т-705, высокая эффективность in vivo T -705 удивляет. IC 50 для ККГЛ в 5–30 раз ниже, чем значения IC 50 для других буньявирусов [35], что может указывать на особую чувствительность этого вируса к Т-705.Даже если его давали за 2 дня до предполагаемого времени гибели, животные выживали и почти не проявляли признаков заболевания. При введении сразу после контакта препарат подавляет репликацию вируса ниже уровня, необходимого для образования антител. Мы могли бы уменьшить дозу в 20 раз [с 300 до 15 мг/(кг×день)], при этом препарат по-прежнему проявлял бы постэкспозиционную эффективность.

Способ действия Т-705 против CCHFV неизвестен. По аналогии с другими сегментированными вирусами с отрицательной цепью, T-705-рибофуранозил-5′-трифосфат может быть включен в формирующуюся цепь РНК и ингибировать дальнейшее удлинение цепи или индуцировать летальный мутагенез [36]–[40].Как рибавирин действует против ККГЛ, до сих пор неизвестно, хотя препарат используется в клинической практике уже несколько десятилетий. Для других вирусов было предложено несколько механизмов: он может быть включен в вирусную РНК, вызывая летальный мутагенез [52], препятствовать кэпированию [53], ингибировать вирусную РНК-полимеразу [54], [55] или ингибировать фермент клетки-хозяина инозин. монофосфатдегидрогеназа (IMPDH), приводящая к снижению уровня GTP [56]–[58]. Т-705-рибофуранозил-5′-монофосфат был в 150 раз слабее, чем рибавирин-5′-монофосфат, в своем ингибирующем IMPDH эффекте, что позволяет предположить, что IMPDH не является основным ферментом-мишенью для T-705 [39], [40].Учитывая, что механизм действия обоих препаратов плохо изучен, трудно предсказать, как они будут взаимодействовать. Однако, поскольку рибавирин является стандартным препаратом для лечения КГЛ [16]–[19], комбинированное лечение рибавирином/Т-705 было бы очевидным вариантом в клинической практике. Наши эксперименты показывают, что оба препарата не действуют антагонистическим образом in vitro и in vivo . В соответствии с моделью независимости Bliss имеются даже доказательства синергетического взаимодействия in vitro , а эксперименты на животных моделях указывают на благоприятное, а не неблагоприятное взаимодействие in vivo .В заключение, наши данные обнадеживают в отношении клинической эффективности комбинированного лечения T-705 или рибавирином/T-705 при ККГЛ человека.

Благодарности

Авторы выражают благодарность Cesar Munoz-Fontela за плодотворные обсуждения. Отделение вирусологии Института Бернхарда Нохта является сотрудничающим центром ВОЗ по справочным и исследовательским исследованиям арбовирусов и геморрагической лихорадки (DEU-115).

Вклад авторов

Задумал и разработал эксперименты: LO TR XdL SÖ SG.Проведены опыты: ЛО ТР МН МЛ СК СВ СО. Проанализированы данные: ЛО ТР МН КБ МЛ СК СО СГ. Предоставленные реагенты/материалы/инструменты для анализа: PE. Написал статью: LO TR MN CB SÖ SG.

Каталожные номера

  1. 1. Жубер Дж. Р., Кинг Дж. Б., Россоу Д. Д., Купер Р. (1985) Внутрибольничная вспышка крымско-конголезной геморрагической лихорадки в больнице Тайгерберг. Часть 3. Клиническая патология и патогенез. S Afr Med J 68: 722–728.
  2. 2. Swanepoel R, Gill DE, Shepherd AJ, Leman PA, Mynhardt JH, et al.(1989) Клиническая патология конго-крымской геморрагической лихорадки. Rev Infect Dis 11 Suppl 4: S794–800.
  3. 3. Burt FJ, Swanepoel R, Shieh WJ, Smith JF, Leman PA, et al. (1997) Иммуногистохимическая и in situ локализация вируса конго-крымской геморрагической лихорадки (ККГЛ) в тканях человека и значение для патогенеза ККГЛ. Arch Pathol Lab Med 121: 839–846.
  4. 4. Whitehouse CA (2004) Конго-крымская геморрагическая лихорадка. Противовирусные рез. 64: 145–160.
  5. 5.Эргонул О (2006) Конго-крымская геморрагическая лихорадка. Ланцет Infect Dis 6: 203–214.
  6. 6. Ergonul O, Tuncbilek S, Baykam N, Celikbas A, Dokuzoguz B (2006)Оценка сывороточных уровней интерлейкина (IL)-6, IL-10 и фактора некроза опухоли-альфа у пациентов с конго-крымской геморрагической лихорадкой. J Infect Dis 193: 941–944.
  7. 7. Саксида А., Дух Д., Врабер Б., Дедушай И., Ахмети С. и др. (2010) Взаимодействие иммунных механизмов и вирусной нагрузки в патогенезе конго-крымской геморрагической лихорадки.Clin Vaccine Immunol 17: 1086–1093.
  8. 8. Папа А., Бино С., Вело Э., Харджи А., Кота М. и др. (2006) Уровни цитокинов при конго-крымской геморрагической лихорадке. Дж. Клин Вирол 36: 272–276.
  9. 9. Tignor GH, Hanham CA (1993)Эффективность рибавирина в модели заражения вирусом конго-крымской геморрагической лихорадки (CCHF) in vivo. Противовирусные рез. 22: 309–325.
  10. 10. Бенте Д.А., Алимонти Дж.Б., Ши В.Дж., Камю Г., Строхер Ю. и др. (2010) Патогенез и иммунный ответ вируса Конго-крымской геморрагической лихорадки на мышиной модели с нокаутом STAT-1.Дж. Вирол 84: 11089–11100.
  11. 11. Берецки С., Линдегрен Г., Карлберг Х., Акерстром С., Клингстром Дж. и др. (2010) Инфекция, вызванная вирусом крымско-конголезской геморрагической лихорадки, является летальной для взрослых мышей с нокаутом рецептора интерферона I типа. Дж. Ген Вирол 91: 1473–1477.
  12. 12. Живцек М., Сафронец Д., Скотт Д., Робертсон С., Эбихара Х. и соавт. (2013)Смертельная инфекция вируса крымско-конголезской геморрагической лихорадки у мышей с нокаутом рецептора интерферона альфа/бета связана с высокими вирусными нагрузками, провоспалительными реакциями и коагулопатией.J Infect Dis 207: 1909–1921.
  13. 13. Бойд А., Фазакерли Дж. К., Бриджен А. (2006) Патогенез вирусной инфекции Дагбе у мышей дикого типа и с дефицитом интерферона. Дж. Ген Вирол 87: 2005–2009 гг.
  14. 14. Доуэлл С.Д., Финдли-Уилсон С., Рейнер Э., Пирсон Г., Пикерсгилл Дж. и др. (2012) Инфекция, вызванная вирусом хазара, является летальной для взрослых мышей с нокаутом рецептора интерферона I типа и может выступать в качестве суррогата инфекции патогенным для человека вирусом Конго-крымской геморрагической лихорадки.Дж. Ген Вирол 93: 560–564.
  15. 15. Watts DM, Ussery MA, Nash D, Peters CJ (1989) Ингибирование инфекционности вируса Конго-крымской геморрагической лихорадки in vitro с помощью рибавирина. Am J Trop Med Hyg 41: 581–585.
  16. 16. Фишер-Хох С.П., Хан Дж.А., Рехман С., Мирза С., Хуршид М. и др. (1995) Конго-крымская геморрагическая лихорадка лечилась пероральным рибавирином. Ланцет 346: 472–475.
  17. 17. Элальди Н., Бодур Х., Аскиоглу С., Челикбас А., Озкурт З. и др. (2009)Эффективность перорального лечения рибавирином при конго-крымской геморрагической лихорадке: квазиэкспериментальное исследование в Турции.Дж. Заражение 58: 238–244.
  18. 18. Ascioglu S, Leblebicioglu H, Vahaboglu H, Chan KA (2011)Рибавирин для пациентов с конго-крымской геморрагической лихорадкой: систематический обзор и метаанализ. J Antimicrob Chemother 66: 1215–1222.
  19. 19. Дуйгу Ф., Кая Т., Байсан П. (2012) Повторная оценка 400 случаев Конго-крымской геморрагической лихорадки в эндемическом районе: подходит ли лечение рибавирином? Vector Born Zoonotic Dis 12: 812–816.
  20. 20. Ши Л., Сюн Х., Хе Дж., Дэн Х., Ли К. и др.(2007)Противовирусная активность арбидола в отношении вируса гриппа А, респираторно-синцитиального вируса, риновируса, вируса Коксаки и аденовируса in vitro и in vivo. Арх Вирол 152: 1447–1455.
  21. 21. Чжун К., Ян З., Лю И., Дэн Х., Сяо Х. и др. (2009) Противовирусная активность арбидола в отношении вируса Коксаки B5 in vitro и in vivo. Арх Вирол 154: 601–607.
  22. 22. Дэн Х.И., Луо Ф., Ши Л.К., Чжун К., Лю Ю.Дж. и др. (2009)Эффективность арбидола при смертельных инфекциях, вызванных вирусом хантаан, у мышей-сосунков и in vitro.Acta Pharmacol Sin 30: 1015–1024.
  23. 23. Делогу И., Пасторино Б., Баронти С., Нугайред А., Бонне Э. и др. (2011)Противовирусная активность арбидола in vitro против вируса Чикунгунья и характеристики выбранного резистентного мутанта. Противовирусные рез. 90: 99–107.
  24. 24. Брукс М.Дж., Бурцева Е.И., Эллери П.Дж., Марш Г.А., Лью А.М. и соавт. (2012) Противовирусная активность арбидола, препарата широкого спектра действия против респираторных вирусов, варьируется в зависимости от условий испытаний.J Med Virol 84: 170–181.
  25. 25. Борискин Ю.С., Ленева И.А., Пешер Е.И., Поляк С.Дж. (2008)Арбидол: противовирусное соединение широкого спектра действия, блокирующее слияние вирусов. Curr Med Chem 15: 997–1005.
  26. 26. Ленева И.А., Рассел Р.Дж., Борискин Ю.С., Хэй А.Дж. (2009)Характеристики устойчивых к арбидолу мутантов вируса гриппа: последствия для механизма противогриппозного действия арбидола. Противовирусные рез. 81: 132–140.
  27. 27. Teissier E, Zandomeneghi G, Loquet A, Lavillette D, Lavergne JP, et al.(2011) Механизм ингибирования слияния мембран вируса с оболочкой противовирусным препаратом арбидолом. PLoS One 6: e15874.
  28. 28. Фурута Ю., Такахаши К., Фукуда Ю., Куно М., Камияма Т. и др. (2002) Активность in vitro и in vivo соединения Т-705 против вируса гриппа. Противомикробные агенты Chemother 46: 977–981.
  29. 29. Гоуэн Б.Б., Вонг М.Х., Юнг К.Х., Сандерс А.Б., Менденхолл М. и др. (2007) Активность Т-705 in vitro и in vivo против аренавирусной и буньявирусной инфекций.Противомикробные агенты Chemother 51: 3168–3176.
  30. 30. Гоуэн Б.Б., Сми Д.Ф., Вонг М.Х., Холл Дж.О., Юнг К.Х. и др. (2008) Лечение поздних стадий заболевания на модели аренавирусной геморрагической лихорадки: эффективность Т-705 и снижение токсичности предлагают альтернативу рибавирину. PLoS One 3: e3725.
  31. 31. Кисо М., Такахаши К., Сакаи-Тагава Ю., Шинья К., Сакабе С. и др. (2010) Активность Т-705 (фавипиравир) против летальных вирусов гриппа А H5N1. Proc Natl Acad Sci USA 107: 882–887.
  32. 32. Гоуэн Б.Б., Вонг М.Х., Юнг К.Х., Сми Д.Ф., Морри Д.Д. и др. (2010)Эффективность фавипиравира (Т-705) и производных пиразина Т-1106 в моделях флебовирусных заболеваний. Противовирусные рез. 86: 121–127.
  33. 33. Менденхолл М., Рассел А., Сми Д. Ф., Холл Дж. О., Скирпстунас Р. и соавт. (2011)Эффективная пероральная терапия фавипиравиром (T-705), начатая после начала клинического заболевания на модели аренавирусной геморрагической лихорадки. PLoS Negl Trop Dis 5: e1342.
  34. 34. Сафронец Д., Фалзарано Д., Скотт Д.П., Фурута Ю., Фельдманн Х. и др.(2013) Противовирусная эффективность фавипиравира в отношении двух известных этиологических агентов хантавирусного легочного синдрома. Противомикробные агенты Chemother 57: 4673–4680.
  35. 35. Фурута Ю., Говен Б.Б., Такахаши К., Шираки К., Сми Д.Ф. и др. (2013) Фавипиравир (Т-705), новый ингибитор вирусной РНК-полимеразы. Противовирусные препараты 100: 446–454.
  36. 36. Баранович Т., Вонг С.С., Армстронг Дж., Марьюки Х., Уэбби Р.Дж. и др. (2013) T-705 (фавипиравир) индуцирует летальный мутагенез в вирусах гриппа A h2N1 in vitro.Дж. Вирол 87: 3741–3751.
  37. 37. Джин З., Смит Л.К., Раджванши В.К., Ким Б., Девал Дж. (2013)Неоднозначное спаривание оснований и высокая эффективность субстрата рибофуранозил-5′-трифосфата Т-705 (фавипиравир) по отношению к полимеразе вируса гриппа А. PLoS One 8: e68347.
  38. 38. Naesens L, Guddat LW, Keough DT, van Kuilenburg AB, Meijer J, et al. (2013) Роль гипоксантингуанинфосфорибозилтрансферазы человека в активации противовирусного агента Т-705 (фавипиравир). Мол Фармакол 84: 615–629.
  39. 39. Сми Д.Ф., Херст Б.Л., Эгава Х., Такахаши К., Кадота Т. и др. (2009) Внутриклеточный метаболизм фавипиравира (Т-705) в неинфицированных и инфицированных вирусом гриппа A (H5N1) клетках. J Antimicrob Chemother 64: 741–746.
  40. 40. Фурута Ю., Такахаши К., Куно-Маекава М., Сангава Х., Уэхара С. и др. (2005) Механизм действия Т-705 против вируса гриппа. Противомикробные агенты Chemother 49: 981–986.
  41. 41. Килкенни С., Браун В.Дж., Катхилл И.К., Эмерсон М., Альтман Д.Г. (2010) Улучшение отчетности по исследованиям в области биологических наук: руководство ARRIVE по отчетности об исследованиях на животных.PLoS Биол 8: e1000412.
  42. 42. Ольшлегер С., Габриэль М., Шмидт-Чанасит Дж., Мейер М., Осборн Э. и др. (2011)Полная последовательность и филогенетическая характеристика вируса конго-крымской геморрагической лихорадки из Афганистана. Дж. Клин Вирол 50: 90–92.
  43. 43. Гюнтер С., Аспер М., Розер С., Луна Л.К., Дростен С. и др. (2004) Применение ПЦР в реальном времени для тестирования противовирусных соединений против вируса Ласса, коронавируса SARS и вируса Эбола in vitro. Противовирусные рез. 63: 209–215.
  44. 44. Greco WR, Bravo G, Parsons JC (1995) Поиск синергии: критический обзор с точки зрения поверхности отклика. Pharmacol Rev 47: 331–385.
  45. 45. Prichard MN, Shipman C Jr (1990) Трехмерная модель для анализа взаимодействий между лекарствами. Противовирусные рез. 14: 181–205.
  46. 46. Muller U, Steinhoff U, Reis LF, Hemmi S, Pavlovic J, et al. (1994) Функциональная роль интерферонов типа I и типа II в противовирусной защите. Наука 264: 1918–1921.
  47. 47. Sidwell RW, Bailey KW, Wong MH, Barnard DL, Smee DF (2005)Ингибирующее действие вирамидина на вирус гриппа in vitro и in vivo. Противовирусные рез. 68: 10–17.
  48. 48. Эммерих П., Авшич-Зупанк Т., Чиникар С., Саксида А., Томе-Болдуан С. и др. (2010) Ранняя серодиагностика острой инфекции, вызванной вирусом крымско-конголезской геморрагической лихорадки человека, с помощью новых анализов захвата. Дж. Клин Вирол 48: 294–295.
  49. 49. Чиуреа А., Кленерман П., Хунзикер Л., Хорват Э., Одерматт Б. и др.(1999) Стойкость вируса лимфоцитарного хориоменингита на очень низких уровнях у иммунных мышей. Proc Natl Acad Sci U S A 96: 11964–11969.
  50. 50. Джаннини Э.Г., Теста Р., Саварино В. (2005)Изменение ферментов печени: руководство для клиницистов. Смаж 172: 367–379.
  51. 51. Еропкин М.Ю., Соловский М.В., Смирнова М.Ю., Брязжикова Т.С., Гудкова Т.М., и соавт. (2009) Синтез и биологическая активность водорастворимых полимерных комплексов арбидола. Pharm Chem J 43: 563–567.
  52. 52.Кротти С., Мааг Д., Арнольд Дж. Дж., Чжун В., Лау Дж. И. и другие. (2000) Противовирусный рибонуклеозид рибавирин широкого спектра действия представляет собой мутаген РНК-вируса. Nat Med 6: 1375–1379.
  53. 53. Госвами Б.Б., Борек Э., Шарма О.К., Фуджитаки Дж., Смит Р.А. (1979) Противовирусный агент широкого спектра действия рибавирин ингибирует кэпирование мРНК. Biochem Biophys Res Commun 89: 830–836.
  54. 54. Эрикссон Б., Хельгстранд Э., Йоханссон Н.Г., Ларссон А., Мисиорни А. и соавт. (1977)Ингибирование полимеразы рибонуклеиновой кислоты вируса гриппа рибавиринтрифосфатом.Противомикробные агенты Chemother 11: 946–951.
  55. 55. Fernandez-Larsson R, O’Connell K, Koumans E, Patterson JL (1989)Молекулярный анализ ингибирующего действия фосфорилированного рибавирина на полимеразную реакцию вируса везикулярного стоматита in vitro. Противомикробные агенты Chemother 33: 1668–1673.
  56. 56. Streeter DG, Witkowski JT, Khare GP, Sidwell RW, Bauer RJ, et al. (1973) Механизм действия 1-бета-D-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамида (виразола), нового противовирусного средства широкого спектра действия.Proc Natl Acad Sci U S A 70: 1174–1178.
  57. 57. Leyssen P, Balzarini J, De Clercq E, Neyts J (2005) Преобладающий механизм, с помощью которого рибавирин проявляет свою противовирусную активность in vitro против флавивирусов и парамиксовирусов, опосредуется ингибированием IMP-дегидрогеназы. Дж. Вирол 79: 1943–1947.
  58. 58. Сми Д.Ф., Брей М., Хаггинс Дж.В. (2001)Исследования противовирусной активности и механизма действия рибавирина и микофеноловой кислоты против ортопоксвирусов in vitro. Antivir Chem Chemother 12: 327–335.
  59. 59. Zhou X, Hansson GK (2004)Влияние пола и возраста на диапазоны биохимических показателей сыворотки у мышей C57BL/6J. Comp Med 54: 176–178.

Чистая Группа Компаний

Уведомление о выпуске руководства по диагностике и лечению Covid-19 Пробная версия 6-го издания

4. Противовирусная терапия: интерферон-альфа (взрослым: 5 миллионов единиц или эквивалентная доза в 2 мл стерильной воды для в/в введения с помощью небулайзера, два раза в день (дважды в день)), лопинавир/ритонавир (взрослым: 200 мг/50 мг/сут). ед., 2 ед. два раза в день на курс лечения не более 10 дней), рибавирин (рекомендуется в комбинации с интерфероном или лопинавиром/ритонавиром, взрослым: 500 мг в/в, два раза в день или три раза в день (три раза в день) на курс лечения не более 10 дней). более 10 дней), хлорохина фосфат (взрослым: 500 мг 2 раза в день в течение не более 10 дней), арбидол (взрослым: 200 мг 3 раза в день в течение курса лечения не более 10 дней) могут быть вариантами противовирусного лечения COVID-19. .Следует обратить внимание на побочные реакции (такие как диарея, тошнота, рвота и нарушение функции печени), связанные с лопинавиром/ритонавиром, а также на их взаимодействие с другими препаратами. Эффективность этих препаратов для лечения COVID-19 все еще нуждается в дальнейшей оценке и подтверждении в клиническом применении. Не рекомендуется одновременное применение 3 и более противовирусных препаратов. При возникновении непереносимой токсичности прием соответствующих препаратов следует прекратить.

Уведомление о выпуске руководства по диагностике и лечению Covid-19 Пробная версия 7-го издания

4.Противовирусная терапия: интерферон-альфа (взрослым: 5 миллионов единиц или эквивалентная доза в 2 мл стерильной воды для инъекций, доставляемая с помощью небулайзера, два раза в день [2 раза в день]), лопинавир/ритонавир (взрослым: 200 мг/50 мг/единица, 2 ЕД два раза в день на курс лечения не более 10 дней), рибавирин (рекомендуется в комбинации с интерфероном или лопинавиром/ритонавиром, взрослым: 500 мг внутривенно два раза в день или три раза в день [три раза в день] на курс лечения не более 10 дней). дни), хлорохина фосфат (взрослым в возрасте 18-65 лет: 500 мг два раза в день в течение 7 дней для тех, кто весит более 50 кг; 500 мг два раза в день в день I и день 2, 500 мг один раз в день [qd] с дня 3 до дня 7 для тех, кто весит более 50 кг), и арбидол (взрослым: 200 мг три раза в день на курс лечения не более 10 дней) могут быть вариантами противовирусного лечения COVID-19.Эти препараты следует применять с вниманием к побочным реакциям и противопоказаниям, связанным с вышеперечисленными препаратами (например, хлорохин противопоказан пациентам с заболеваниями сердца), а также к их взаимодействию с другими препаратами. Эффективность этих препаратов для лечения COVID-19 все еще нуждается в дальнейшей оценке и подтверждении в клиническом применении. Не рекомендуется одновременное применение 3 и более противовирусных препаратов. При возникновении непереносимой токсичности прием соответствующих препаратов следует прекратить.Для лечения ирригации некоторые проблемы женщин должны быть приняты во внимание, в том числе неделя гестации, выбор препаратов с минимальным воздействием на плод, если это возможно, и необходимость прерывания беременности до начала лечения; и информированное согласие должно быть получено до лечения

Gale Apps — Технические трудности

Технические трудности

Приложение, к которому вы пытаетесь получить доступ, в настоящее время недоступно.Приносим свои извинения за доставленные неудобства. Повторите попытку через несколько секунд.

Если проблемы с доступом сохраняются, обратитесь за помощью в наш отдел технической поддержки по телефону 1-800-877-4253. Еще раз спасибо, что выбрали Gale, обучающую компанию Cengage.

org.springframework.remoting.RemoteAccessException: невозможно получить доступ к удаленной службе [[email protected]]; вложенным исключением является Ice.Неизвестное исключение unknown = «java.lang.IndexOutOfBoundsException: индекс 0 выходит за границы для длины 0 в java.base/jdk.internal.util.Preconditions.outOfBounds(Preconditions.java:64) в java.base/jdk.internal.util.Preconditions.outOfBoundsCheckIndex(Preconditions.java:70) в java.base/jdk.internal.util.Preconditions.checkIndex(Preconditions.java:248) в java.base/java.util.Objects.checkIndex(Objects.java:372) на Яве.база/java.util.ArrayList.get(ArrayList.java:458) в com.gale.blis.data.subscription.dao.LazyUserSessionDataLoaderStoredProcedure.populateSessionProperties(LazyUserSessionDataLoaderStoredProcedure.java:60) в com.gale.blis.data.subscription.dao.LazyUserSessionDataLoaderStoredProcedure.reQuery(LazyUserSessionDataLoaderStoredProcedure.java:53) в com.gale.blis.data.model.session.UserGroupEntitlementsManager.reinitializeUserGroupEntitlements(UserGroupEntitlementsManager.ява:30) в com.gale.blis.data.model.session.UserGroupSessionManager.getUserGroupEntitlements(UserGroupSessionManager.java:17) в com.gale.blis.api.authorize.contentmodulefetchers.CrossSearchProductContentModuleFetcher.getProductSubscriptionCriteria(CrossSearchProductContentModuleFetcher.java:244) на com.gale.blis.api.authorize.contentmodulefetchers.CrossSearchProductContentModuleFetcher.getSubscribedCrossSearchProductsForUser(CrossSearchProductContentModuleFetcher.ява:71) на com.gale.blis.api.authorize.contentmodulefetchers.CrossSearchProductContentModuleFetcher.getAvailableContentModulesForProduct(CrossSearchProductContentModuleFetcher.java:52) на com.gale.blis.api.authorize.strategy.productentry.strategy.AbstractProductEntryAuthorizer.getContentModules(AbstractProductEntryAuthorizer.java:130) на com.gale.blis.api.authorize.strategy.productentry.strategy.CrossSearchProductEntryAuthorizer.isAuthorized(CrossSearchProductEntryAuthorizer.ява:82) на com.gale.blis.api.authorize.strategy.productentry.strategy.CrossSearchProductEntryAuthorizer.authorizeProductEntry(CrossSearchProductEntryAuthorizer.java:44) на com.gale.blis.api.authorize.strategy.ProductEntryAuthorizer.authorize(ProductEntryAuthorizer.java:31) в com.gale.blis.api.BLISAuthorizationServiceImpl.authorize_aroundBody0(BLISAuthorizationServiceImpl.java:57) на com.gale.blis.api.BLISAuthorizationServiceImpl.authorize_aroundBody1$advice(BLISAuthorizationServiceImpl.ява: 61) на com.gale.blis.api.BLISAuthorizationServiceImpl.authorize(BLISAuthorizationServiceImpl.java:1) на com.gale.blis.auth._AuthorizationServiceDisp._iceD_authorize(_AuthorizationServiceDisp.java:141) в com.gale.blis.auth._AuthorizationServiceDisp._iceDispatch(_AuthorizationServiceDisp.java:359) в IceInternal.Incoming.invoke(Incoming.java:209) в Ice.ConnectionI.invokeAll(ConnectionI.java:2800) на льду.ConnectionI.dispatch(ConnectionI.java:1385) в Ice.ConnectionI.message(ConnectionI.java:1296) в IceInternal.ThreadPool.run(ThreadPool.java:396) в IceInternal.ThreadPool.access$500(ThreadPool.java:7) в IceInternal.ThreadPool$EventHandlerThread.run(ThreadPool.java:765) в java.base/java.lang.Thread.run(Thread.java:834) » org.springframework.remoting.ice.IceClientInterceptor.convertIceAccessException(IceClientInterceptor.java:365) org.springframework.remoting.ice.IceClientInterceptor.invoke(IceClientInterceptor.java:327) org.springframework.remoting.ice.MonitoringIceProxyFactoryBean.invoke(MonitoringIceProxyFactoryBean.java:71) org.springframework.aop.framework.ReflectiveMethodInvocation.proceed(ReflectiveMethodInvocation.java:186) org.springframework.aop.framework.JdkDynamicAopProxy.invoke(JdkDynamicAopProxy.java:212) com.sun.proxy.$Proxy130.authorize(Неизвестный источник) com.gale.auth.service.BlisService.getAuthorizationResponse(BlisService.java:61) com.gale.apps.service.impl.MetadataResolverService.resolveMetadata(MetadataResolverService.java:65) com.gale.apps.controllers.DiscoveryController.resolveDocument(DiscoveryController.java:57) ком.gale.apps.controllers.DocumentController.redirectToDocument(DocumentController.java:22) jdk.internal.reflect.GeneratedMethodAccessor252.invoke (неизвестный источник) java.base/jdk.internal.reflect.DelegatingMethodAccessorImpl.invoke(DelegatingMethodAccessorImpl.java:43) java.base/java.lang.reflect.Method.invoke(Method.java:566) org.springframework.web.method.support.InvocableHandlerMethod.doInvoke(InvocableHandlerMethod.ява: 215) org.springframework.web.method.support.InvocableHandlerMethod.invokeForRequest(InvocableHandlerMethod.java:142) org.springframework.web.servlet.mvc.method.annotation.ServletInvocableHandlerMethod.invokeAndHandle(ServletInvocableHandlerMethod.java:102) org.springframework.web.servlet.mvc.method.annotation.RequestMappingHandlerAdapter.invokeHandlerMethod (RequestMappingHandlerAdapter.java:895) org.springframework.web.servlet.mvc.method.annotation.RequestMappingHandlerAdapter.handleInternal (RequestMappingHandlerAdapter.java:800) org.springframework.web.servlet.mvc.method.AbstractHandlerMethodAdapter.handle(AbstractHandlerMethodAdapter.java:87) org.springframework.web.servlet.DispatcherServlet.doDispatch(DispatcherServlet.java:1038) org.springframework.web.servlet.DispatcherServlet.doService(DispatcherServlet.java:942) орг.springframework.web.servlet.FrameworkServlet.processRequest(FrameworkServlet.java:998) org.springframework.web.servlet.FrameworkServlet.doGet(FrameworkServlet.java:890) javax.servlet.http.HttpServlet.service(HttpServlet.java:626) org.springframework.web.servlet.FrameworkServlet.service(FrameworkServlet.java:875) javax.servlet.http.HttpServlet.service(HttpServlet.java:733) орг.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:227) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.apache.tomcat.websocket.server.WsFilter.doFilter(WsFilter.java:53) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.ява: 162) org.apache.catalina.filters.HttpHeaderSecurityFilter.doFilter(HttpHeaderSecurityFilter.java:126) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.servlet.resource.ResourceUrlEncodingFilter.doFilter(ResourceUrlEncodingFilter.java:63) орг.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:101) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:101) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:101) орг.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.boot.web.servlet.support.ErrorPageFilter.doFilter(ErrorPageFilter.java:130) org.springframework.boot.web.servlet.support.ErrorPageFilter.access$000(ErrorPageFilter.java:66) org.springframework.boot.web.servlet.support.ErrorPageFilter$1.doFilterInternal(ErrorPageFilter.java:105) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) org.springframework.boot.web.servlet.support.ErrorPageFilter.doFilter(ErrorPageFilter.java:123) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.ява: 162) org.springframework.boot.actuate.web.trace.servlet.HttpTraceFilter.doFilterInternal(HttpTraceFilter.java:90) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) орг.springframework.web.filter.RequestContextFilter.doFilterInternal (RequestContextFilter.java: 99) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.filter.FormContentFilter.doFilterInternal (FormContentFilter.java: 92) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.filter.HiddenHttpMethodFilter.doFilterInternal (HiddenHttpMethodFilter.ява:93) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.boot.actuate.metrics.web.servlet.WebMvcMetricsFilter.filterAndRecordMetrics(WebMvcMetricsFilter.java:154) орг.springframework.boot.actuate.metrics.web.servlet.WebMvcMetricsFilter.filterAndRecordMetrics(WebMvcMetricsFilter.java:122) org.springframework.boot.actuate.metrics.web.servlet.WebMvcMetricsFilter.doFilterInternal(WebMvcMetricsFilter.java:107) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) орг.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.springframework.web.filter.CharacterEncodingFilter.doFilterInternal (CharacterEncodingFilter.java:200) org.springframework.web.filter.OncePerRequestFilter.doFilter(OncePerRequestFilter.java:107) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.internalDoFilter(ApplicationFilterChain.java:189) org.apache.catalina.core.ApplicationFilterChain.doFilter(ApplicationFilterChain.java:162) org.apache.catalina.core.StandardWrapperValve.invoke(StandardWrapperValve.java:202) org.apache.catalina.core.StandardContextValve.invoke(StandardContextValve.java:97) org.apache.catalina.authenticator.AuthenticatorBase.invoke(AuthenticatorBase.java:542) org.apache.catalina.core.StandardHostValve.invoke(StandardHostValve.java:143) org.apache.каталина.клапаны.ErrorReportValve.invoke(ErrorReportValve.java:92) org.apache.catalina.valves.AbstractAccessLogValve.invoke(AbstractAccessLogValve.java:687) org.apache.catalina.core.StandardEngineValve.invoke(StandardEngineValve.java:78) org.apache.catalina.connector.CoyoteAdapter.service(CoyoteAdapter.java:357) org.apache.coyote.http11.Http11Processor.service(Http11Processor.java:374) орг.apache.койот.AbstractProcessorLight.process(AbstractProcessorLight.java:65) org.apache.coyote.AbstractProtocol$ConnectionHandler.process(AbstractProtocol.java:893) org.apache.tomcat.util.net.NioEndpoint$SocketProcessor.doRun(NioEndpoint.java:1707) org.apache.tomcat.util.net.SocketProcessorBase.run(SocketProcessorBase.java:49) java.base/java.util.concurrent.ThreadPoolExecutor.runWorker(ThreadPoolExecutor.java:1128) Ява.base/java.util.concurrent.ThreadPoolExecutor$Worker.run(ThreadPoolExecutor.java:628) org.apache.tomcat.util.threads.TaskThread$WrappingRunnable.run(TaskThread.java:61) java.base/java.lang.Thread.run(Thread.java:834)

Эффективность и безопасность лопинавира/ритонавира или арбидола у взрослых пациентов с COVID-19 легкой/средней степени тяжести: исследовательское рандомизированное контролируемое исследование

Ссылки

21 ноября 2001 г. · Фармакотерапия · EM Mangum, KK Graham 7 Oct 200025

2011·Journal of Medical Virology·Megan J BrooksGregory A Tannock

13 апреля 2018·PloS One·Juan PasquauUNKNOWN QoLKAMON STUDY GROUP

16 ноября 2018·Journal of Medical Virology·Ирина A Leneva2 Виктор V Maleev

,

·Nature Communications·Timothy P SheahanRalph S Baric

3 февраля 2020 г.·Lancet·Roujian LuWenjie Tan

23 февраля 2020 г.·International Journal of Antimicrobial Agents·Chih-Cheng LaiPo-Ren Hsueh

Microbe 20 Emerging 20 февраля 2020 г. и инфекции · Weilie ChenXiaoping Tang

28 февраля 2020 г. · The Lancet.Респираторная медицина · Xiaobo YangYou Shang

19 марта 2020 г. · The New England Journal of Medicine · Bin CaoChen Wang


Citations

28 июля 2020 г. · American Journal of Reproductive Immunology : AJRI Yangman 90 DilMahmood

17 августа 2020 г.·Current Opinion in Neurology·Claudia Nuñez-PeraltaJordi Díaz-Manera

31 августа 2020 г.·Обзоры медицинских исследований·Xueqing Wang, Yuanfang Guan

1 сентября 2020 г.·JAMA Internal Medicine·Francis 900 J0 30 марта 2020 г. · Клинические инфекционные заболевания: официальная публикация Американского общества инфекционистов · Juanjuan ZhaoZheng Zhang

28 августа 2020 г. · Journal of Cardiac Surgery · Amer HarkyBilal H Kirmani

1 августа 2020 г. · Journal of the American Гериатрическое общество·Joseph G Ouslander, David C Grabowski

15 сентября 2020 г.·Медицина труда·Edsel B IngNurhan Torun

15 сентября 2020 г.·Journal of Basic and Clinical Physiology and Pharm acology·Anupama M Gudadappanavar, Jyoti Benni

18 сентября 2020 г.·PLoS Medicine·Sophie JuulJanus Christian Jakobsen

21 сентября 2020 г.·Annals of Clinical and Translational Neurology·Zhiying XieYun Yuan

11 сентября 20 International Geriatric Journal of Geriatric Психиатрия · Виолетта kijowskakatarzyna szczerbińska

сентября 24, 2020 · Vox Sanguinis · Philip Kielyiain B GoSbell

SEP 25, 2020 · Plos One · Qibin Liupeng Peng

авг 19 авг, 2020 г. · Европейский журнал клинического расследования · Шубхам Миссирадеев Vibha

26 сентября 2020 г. · Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry · Linda J UrbanskiSeppo Parkkila

29 сентября 2020 г. · Emerging Microbes & Infections·Ke HongTaisheng Li

18 сентября 2020 г. · Мнение эксперта по метаболизму лекарств и токсикологии · HermidRamón C R Fernández

10 августа 2020 г.·Journal of Occupational and Environmental Medicine·Yiyao LiWilliam B Perkison

10 июня 2020 г.·Cell Death & Disease·Jun ChenTongyu Zhu

1 августа 2020 г.·BMJ: British Medical Journal·Reed Ac SiemieniukRomina Brignardello-Petersen

29 июля 2020 г.·Frontiers in Public Health·Zhiliang HuYongxiang Yi

25 июня 2020 г.·Drug Safety: the International Journal of Medical Journal Токсикология и лекарственный опыт·Вики ОсборнСаад Шакир

28 августа 2020 г.·Границы фармакологии·Малак КаддураХассан Заракет

29 июля 2020 г.·Международный журнал молекулярных наук·Рами А. Аль-ХораниХолуд Ф. Алитер

2 августа 2000 г. в области общественного здравоохранения · Waquar Ahsan Shahnaz Sultana

19 сентября 2020 г. · Медицина интенсивной терапии · Mark E MikkelsenCarla M Sevin

9 июля 2020 г. · Физика в медицине и биологии · Yupei ZhangXiaofeng Yang

18 августа 2020 г. · American Journal of Physical Медицина и реабилитация·Charles A OdonkorJulie K Silver

8 октября 2020 г.·Nature Reviews.Микробиология·Ben HuZheng-Li Shi

27 октября 2020 г.·Тенденции в области биологических наук·Xueqin DongCuirong Zhao

1 ноября 2020 г.·Клиническая и экспериментальная медицина·Maria GavriatopoulouMeletios A Dimopoulos

6 ноября 2020 г.·Maria GavriatopoulouMeletios A Dimopoulos

6 ноября 2020 г. MalinisJeffrey Topal

3 декабря 2020 г. · Тропическая медицина и инфекционные заболевания · Saad Alhumaid Mansour Tobaiqy

22 декабря 2020 г. · BMC Geriatrics · Virginie PrendkiUNKNOWN ESCMID Study Group for Infections in the Oldly (ESGIE) · Infectious Diseases

20002 Jan

and Therapy·Nicholas ReboldMichael Rybak

22 декабря 2020 г.·Frontiers in Molecular Biosciences·Wen CuiHaitao Yang

7 января 2021 г.·Infection and Drug Resistance·Abdullahi Rabiu AbubakarMainul Haque

MedicalJournal 20, 17 апреля 2020 г. ShiYuxin Shi

15 ноября 2020 г. · Экспертный обзор противоинфекционной терапии · Бетси Энн Джозеф Кевин Каллмес

23 сентября 2020 г. · BMJ Supportive & Palliative Car e·Meng WangMeichun Deng

23 февраля 2021 г. · Frontiers in Immunology · Ching-Hsuan LiuLiang-Tzung Lin

19 февраля 2021 г. · Frontiers in Pharmacology· Quiros-Roldan

2 марта 2021 г. · Frontiers in Pharmacology · Zhihong ZuoMeichun Deng

16 марта 2021 г. · Мнение экспертов по исследуемым препаратам · Binh T NgoIvan Fn Hung

19 марта 2021 г. · European Respiratory Review: an Official Journal of Respiratory Review Европейское дыхательное общество · Tobias Welteian Sabir

апреля 2, 2021 · Границы в фармакологии · zeinab abdelrahmanxiaosheng Wang

апреля 6, 2021 · Наркотики метаболизма и персонализированные терапии · ELEAZER U IKONNEEZIUCHE UGBOGU

31 авг, 2020 г.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.