Календула химический состав: , , , , Calendula officinalis L., Flores calendulae, Asteraceae

Содержание

Календула. Применение, описание, химический состав, противопоказания и лечебные свойства календулы

Красивые цветки календулы не только радуют глаз, но и являются ценным сырьем для фармацевтической промышленности

Описание

      Календула — название растений из семейства Астровых. Дикие и натурализированные представители рода произрастают повсеместно в странах Европы, Средиземноморья, Ближнем Востоке, Средней Азии, Южной Америке и Австралии. Многие виды календулы являются лекарственными растениями, наиболее популярным из которых является календула лекарственная.

Как лекарственное растение календулу выращивают на промышленных плантациях. Кроме медицинских целей ее используют в декоративных целях и кулинарии.

Свежие молодые листья календулы добавляют в салаты, супы, блюда из мяса, рыбы, паштеты, тушенные овощные блюда, или используют как приправу к разным блюдам. Также для ароматизации и окраски блюд используют высушенные язычковые цветы. Содержащийся в них пигментный краситель придает характерный оттенок сырам, маслу, супам, соусам, изделиям из теста и другим продуктам.

Химический состав

Цветки календулы содержат полисахариды, полифенолы, горечи (до 10%), смолы (3.4%), слизи (до 4%), органические кислоты, эфирное масло (0.002%), каротиноиды (до 3%), флавоноиды, фитонциды, сапонины, тритерпендиолы (арнидиол и фарадиол), гликозид календулозид, аскорбиновую и салициловую кислоту и алкалоиды.

В надземной части растения содержатся горькие (в том числе календен) и дубильные вещества, фитонциды, тритерпеновый сапонин, а также тритерпендиолы (арнидиол и фарадиол).

В семенах содержится жирные масла (в том числе лауриновая и пальмитиновая кислоты) и алкалоиды.

В корнях календулы обнаружен инулин и ряд тритерпеновых гликозидов, являющихся производными олеаноловой кислоты.

Лечебные свойства календулы лекарственной

Препараты календулы обладают противовоспалительными, ранозаживляющими, бактерицидными, спазмолитическими, желчегонными и мочегонными свойствами, кроме того они снижают рефлекторную возбудимость, оказывают успокаивающее действие на центральную нервную систему, ускоряют процессы регенерации тканей, повышают секреторную функцию печени и желудка, и способствуют улучшению состава желчи. Их широко применяют при сердечно-сосудистых заболеваниях, сопровождающихся повышенным сердцебиением, одышкой и отеками, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, гастритах; наружно — для лечения ран и ушибов, ожогов, обморожений, долго незаживающих язв, фурункулов, бородавок. В гинекологии препараты календулы используют для лечения эрозии шейки матки и трихомонадных кольпитов, а также в климактерический период.

Настой цветков календулы применяют в качестве ранозаживляющего, противовоспалительного, спазмолитического и желчегонного средства при колитах, энтероколитах, гастритах, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, а также воспалительных заболеваниях печени и желчных путей.

Препарат «Калефлон» (экстракт цветков календулы) обладает противовоспалительным и ранозаживляющим действием. Его назначают при острых и хронических гастритах, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Настойку календулы применяют при ангинах и воспалительных заболеваниях верхних дыхательных путей, гингивитах, молочнице у детей.

Мазь календулы применяют при порезах, ранах, ушибах, фурункулезе, ожогах, обморожениях, трещинах губ и незаживающих гнойных ранах.

Противопоказания

Препараты календулы противопоказаны людям с пониженным артериальным давлением, а также при их индивидуальной непереносимости.

 

Автор: Александр Кузнецов

Статья защищена законом об авторских и смежных правах. При использовании и перепечатке материала активная ссылка на портал о здоровом образе жизни hnb.com.ua обязательна!

лекарственное растение, применение, отзывы, полезные свойства, противопоказания, формула цветка

1. Государственная Фармакопея СССР. Одиннадцатое издание. Выпуск 1 (1987), выпуск 2 (1990).

2. Государственный Реестр лекарственных средств. Москва 2004.

3. Лекарственные растения государственной фармакопеи. Фармакогнозия. (Под ред. И.А. Самылиной, В.А. Северцева). – М., «АМНИ», 1999.

4. Машковский М.Д. «Лекарственные средства». В 2 т. — М., ООО «Издательство Новая Волна», 2000.

5. «Фитотерапия с основами клинической фармакологии» под ред. В.Г. Кукеса. – М.:Медицина, 1999.

6. П.С. Чиков. «Лекарственные растения» М.: Медицина, 2002.

7. Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям (фитотерапия). – М.: VITA, 1993.

8. Маннфрид Палов. «Энциклопедия лекарственных растений». Под ред. канд. биол. наук И.А. Губанова. Москва, «Мир», 1998.

9. Турова А.Д. «Лекарственные растения СССР и их применение». Москва. «Медицина». 1974.

10. Лесиовская Е.Е., Пастушенков Л.В. «Фармакотерапия с основами фитотерапии.» Учебное пособие. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003.

11. Лекарственные растения: Справочное пособие. / Н.И. Гринкевич, И.А. Баландина, В.А. Ермакова и др.; Под ред. Н.И. Гринкевич – М.: Высшая школа, 1991. – 398 с.

12. Растения для нас. Справочное пособие / Под ред. Г.П. Яковлева, К.Ф. Блиновой. – Изд-во «Учебная книга», 1996. – 654 с.

13. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия: Учеб. пособие / Под ред. Г.П. Яковлева и К.Ф. Блиновой. – СПб.: СпецЛит, 2004. – 765 с.

14. Носов А. М. Лекарственные растения. – М.: ЭКСМО-Пресс, 2000. – 350 с.

15. Здоровая кожа и растительные средства/ Авт.-сост.: И. Пустырский, В. Прохоров. – М. Махаон; Мн.: Книжный Дом, 200. – 192 с.

16. Специи и пряности. /Текст Я. Кибала – Издательство Артия, Прага, 1986. – 224 с.

Календула лекарственная

Описание
Ноготки лекарственные, или календула лекарственная
Calendula officinalis 
 — однолетнее травянистое растение высотой до 50-60 см со специфическим ароматом. Корень стержневой, разветвленный. Стебель прямостоячий, ветвистый, в верхней части покрыт железистыми волосками. Листья очередные, светло-зеленые, покрыты волосками. Цветки золотисто-желтые или оранжевые, собранные в большие (диаметром 4-7 см) верхушечные корзинки. Цветет с июня до осенних заморозков. 
Химический состав

В цветочных корзинках ноготков лекарственных содержатся каротиноиды (до 3%) — каротин, рубиксантин, ликопин, цитроксантин, виолоксантин, флавохром, флавоксантин и др. (15 соединений). В сортах ноготков с темно-оранжевыми язычковыми цветками каротиноидов почти в 10 раз больше, чем в сортах с желтыми язычковыми цветками.

Фармакологические свойства
Настой цветков ноготков обладает противовоспалительным, антисептическим и желчегонным действием. Фитонцидные свойства настоя обусловлены эфирным маслом растения.

Несмотря на то, что бактерицидное действие растения по отношению к стрептококкам и стафилококкам выражены незначительно, в целом процессы воспаления, осложненные бактериальной флорой, при действии препаратов ноготков протекают более благоприятно, по-видимому, за счет усиления роста грануляций, улучшения эпителизации и повышения местных защитных механизмов.

Цветки календулы (ноготков) обладают спазмолитическими свойствами. Расслабляя гладкомышечные структуры таких органов, как желудок, кишечник и печень, растение также возбуждает секреторную активность, что способствует усилению желчеобразования и желчеотделения и повышению секреторной активности желудка.

Также отмечено положительное действие препаратов календулы (ноготков) при сердечно-сосудистых заболеваниях, сопровождающихся сердцебиением, одышкой, отеками. Растение, усиливая сердечную деятельность, приводит к уменьшению или исчезновению отеков.

Настойка ноготков оказывает гипотензивные и успокаивающие свойства. 

Использование календулы (ноготков) при заболеваниях желудочно-кишечного тракта связано с их высокой терапевтической эффективностью при воспалительно-дистрофических процессах слизистых оболочек и паренхиматозной ткани внутренних органов. Хорошие результаты наблюдаются при одновременном применении календулы (ноготков) с ромашкой и тысячелистником.

Большое содержание в цветках ноготков каротиноидов, флавоноидов, аскорбиновой кислоты и органических кислот обусловливает повышение метаболической функции печени, при котором улучшается состав желчи, понижается концентрация в ней билирубина и холестерина, повышается секреторная и выделительная функции. А в сочетании ноготков с препаратами ромашки улучшается желчевыделительная функция, что способствует устранению застоя желчи в желчном пузыре.

Применение
Цветки ноготков применяют как наружное средство для полосканий в стоматологии при болезнях полости рта (стоматит, гингивит, пародонтит, молочница у детей, пиорея, воспалительно-дистрофическая форма парадонтоза). В гастроэнтерологии ноготки применяются при гастритах, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, колитах, энтероколитах, при заболеваниях печени. В гинекологии – в виде спринцеваний для лечения эрозий шейки матки и трихомонадных кольпитов.

Также настой ноготков применяют в виде полосканий при лечении тонзиллитов, а в комплексе с сульфаниламидными препаратами и антибиотиками — для лечения ангин; в виде клизм – в терапии проктитов и парапроктитов.

Настойки, мази, эмульсии, свежий сок растения используют наружно при мелких ранах, порезах, ушибах, ожогах, фурункулезе, блефаритах.

В продукции «Миламед» календула входит в состав «CARDIOEXTRA».

Калорийность календула. Химический состав и пищевая ценность.

Химический состав и анализ пищевой ценности

Пищевая ценность и химический состав
«календула».

В таблице приведено содержание пищевых веществ (калорийности, белков, жиров, углеводов, витаминов и минералов) на 100 грамм съедобной части.

Нутриент Количество Норма** % от нормы в 100 г % от нормы в 100 ккал 100% нормы
Калорийность 1 кКал 1684 кКал 0.1% 10% 168400 г
Белки 0.3 г 76 г 0.4%
40%
25333 г
Углеводы 0.7 г 219 г 0.3% 30% 31286 г

Энергетическая ценность календула составляет 1 кКал.

Основной источник: Создан в приложении пользователем. Подробнее.

** В данной таблице указаны средние нормы витаминов и минералов для взрослого человека. Если вы хотите узнать нормы с учетом вашего пола, возраста и других факторов, тогда воспользуйтесь приложением «Мой здоровый рацион».

Календула: состав и полезные свойства

Цклитель Авиценна сказал, что у врача есть три «оружия» для лечения: слово, нож и растение. Календула была в арсенале лекарей в прошлые века, и до сих пор применяется для лечения в современной медицине.

Календула – красивый садовый цветок, хороший медонос и отличное лекарство.

Состав календулы

В ее состав входит эфирное масло, кислоты, смолы, альбумин, фитонциды и немного алкалоидов. Еще в ней есть сапонины и календен – горечь.

Семена насыщены жирным маслом, которое представлено кислотами и глицеридами. В химический состав входят и витамины: каротин и каротиноиды, а также аскорбиновая кислота.

Полезные свойства календулы

В медицинской практике и народной медицине о лечебных свойствах календулы известно давно. Растение применяют в виде мазей, полосканий, примочек, пластырей и спринцеваний.

Ноготки помогают заживлять раны, избавляют от фурункулов и подростковых прыщей. Календулой лечат экземы, отбеливают лицо, осветляя веснушки или пигментные пятна. Используют растение при лечении ожогов, трещин, ссадин, царапин, незаживающих ран и язв. Используют «ноготки»  в виде мазей и эмульсий при лечении ушибов, гангрены, сикоза и проблем с кожей.

Польза календулы настолько велика, что ее применяют при лечении злокачественных опухолей, при лихорадке, облысении и воспалении седалищного нерва. Ею лечат маститы, конъюнктивиты и гнойничковые заболевания.

Календула известна отхаркивающими, мочегонными и потогонными действиями. Лекарства из календулы применяют в качестве бактерицидного средства в борьбе со стафилококками и стрептококками, для полоскания горла при стоматите, ангине, фарингите и при проблемах в полости рта.

Она помогает при заболеваниях двенадцатиперстной кишки и язвенных поражениях слизистой желудка, при заболеваниях сердца и печени. Настой помогает людям, страдающим гипертонической болезнью и женщинам в период климакса.

Календула помогает при кашле, при камнях в мочевом пузыре, болезнях селезенки и спазмах желудка. В гинекологии ее используют в качестве спринцеваний: она лечит эрозию шейки матки.

Используется календула и при воспалениях прямой кишки: настои применяют в виде клизм при проктитах и парапроктитах. Для этого необходима 1 ч. л. настойки календулы и 1/4 стакана воды. При лечении, например, свищей, в сам «канальчик» свища вводят настой календулы и 3%-й раствор борной кислоты в равных пропорциях.

Растение помогает при одышке и отеках, при головных болях. Оно восстанавливает память, снимает раздражение, минимизирует боли в сердце и останавливает носовые кровотечения. Настойка из сока убирает боли. При приеме внутрь успокаивает и обеспечивает хороший сон, нормализует сердечный ритм и дыхание.

В Европе календулу применяют  для окрашивания сыров и масла. Растение используют в кулинарии, добавляют в блюда из тушеных овощей, салаты и супы.

Химический состав и свойства календулы. Календула – золотые цветки здоровья

Читайте также

Целебные свойства и химический состав

Целебные свойства и химический состав Глина — сложное вещество. В зависимости от месторождения она может иметь разнообразный состав, который наряду со вкусом, цветом, запахом определяет ее целебные свойства.Под термином «глина» обычно понимают землистый материал,

Физико-химический состав и свойства шунгита

Физико-химический состав и свойства шунгита Шунгиты представляют собой особые содержащие углерод породы и относятся к природным минералам. Структура кристаллической решетки шунгита своеобразна. Ее костяк составляет углерод, который, как мы знаем, является началом

3. Химический состав и целебные свойства золотого уса

3. Химический состав и целебные свойства золотого уса Золотой ус – сильнейший биогенный стимулятор, насыщенный биологически активными веществами, минералами и витаминами и содержащий каротиноиды, флавоноиды, стероиды, пектины, катехины, танины и никотиновую кислоту.

2. Химический состав и лечебные свойства золотого уса

2. Химический состав и лечебные свойства золотого уса Лечебный эффект от применения препаратов того или иного растения зависит от того, какие химические вещества входят в его состав.Исследования свойств золотого уса и ряда других растений семейства коммелиновых стали

2. Химический состав и лечебные свойства

2. Химический состав и лечебные свойства Химические вещества, входящие в состав того или иного растения, определяют его лечебные свойства. Исследования химического состава золотого уса и некоторых других растений из семейства коммелиновых (традесканции и зебрины) были

Химический состав цикория и его лечебные свойства

Химический состав цикория и его лечебные свойства В цветках цикория содержится гликозид цикорин, который при гидролизе расщепляется на эскулетин и глюкозу. В млечном соке есть горькие вещества лактуцин, лак-тукопикрин, тараксастерол, в плодах – протокатехиновый

Химический состав и свойства чайного гриба

Химический состав и свойства чайного гриба В настоящее время на прилавках магазинов появилось множество продуктов, в названии которых встречается слово «пробиотический». Так принято называть вещества, в состав которых входят живые бактерии, относящиеся к видам,

Химический состав и целебные свойства редьки

Химический состав и целебные свойства редьки Редька – отличный помощник в борьбе за крепкое здоровье. Ее корнеплоды богаты веществами, необходимыми для полноценной работы организма.В 100 г редьки содержатся следующие питательные вещества, витамины и

Химический состав и лечебные свойства

Химический состав и лечебные свойства Иван-чай содержит до 20 % дубильных веществ, биофлавоноиды, слизь, пектиновые вещества и витамины группы «B», «C». В цветках иван-чая содержится до 25 мг нектара на каждый цветок. Кроме того, иван-чай содержит много белка.В 100 гр. зеленой

Химический состав и целебные свойства

Химический состав и целебные свойства Целебные свойства женьшеня обусловлены его сложным химическим составом, которых до сих пор до конца не изучен. Корень растения содержит сапонины (панаксозиды), крахмал, жирные масла (до 20 %), пектиновые вещества (6–23 %), органические

Химический состав и целебные свойства

Химический состав и целебные свойства В корневищах и корнях элеутерококка содержатся крахмал, глюкоза, дубильные и пектиновые вещества, смолы, лигнановые гликозиды, жирные и эфирные масла, антоцианы, камедь, витамины и минеральные вещества. В листьях растения высоко

Химический состав и целебные свойства

Химический состав и целебные свойства Химический состав растения довольно сложен. В корневищах и корнях содержатся фенольные соединения (фенолоспирты и их гликозиды), флавоноиды (кверцетин, гиперозид, кемпферол), салидрозиды, или родиолозиды, дубильные вещества, эфирное

Химический состав и целебные свойства

Химический состав и целебные свойства В качестве лекарственного сырья используют в основном корни аралии, которые содержат крахмал, эфирное масло, углеводы, белки, небольшое количество алкалоидов, минеральные соединения, тритерпеновые сапонины, микроэлементы, смолы,

Химический состав и целебные свойства

Химический состав и целебные свойства Корни хрена содержат лизоцим, который обуславливает антибактериальные и ферментные свойства растения. Также хрен богат азотсодержащими веществами, витаминами С, В 1, В 2, В 6, В9, Е и РР, глюкозой, галактозой,

Химический состав и целебные свойства

Химический состав и целебные свойства В состав лука входят сахара (сахароза, глюкоза, фруктоза, мальтоза, рафиноза, ксилоза и арабиноза), пентозаны, эфирное масло, пектиновые и азотистые вещества (в том числе 18 аминокислот), витамин С, каротин, витамины группы В,

Химический состав и целебные свойства

Химический состав и целебные свойства В состав чеснока входят углеводы (сахароза и инулин), белки, органические кислоты, жирные и эфирные масла, витамины С, В 1, В 6и РР, минеральные вещества (калий, фосфор, натрий, кальций, магний, железо), фитонциды и другие

как выглядит растение, где растет, полезные свойства

Цветки календулы выделяются среди многих других цветущих растений сочетанием простоты, неприхотливости в выращивании и уникального химического состава. В простонародье известно другое, даже более известное название – ноготки. О полезных свойствах и применении календулы рассказано далее.

Календула: общее описание и характеристики

Как выглядит календула? Это миниатюрный садовый однолетник, длина которого варьируется от 15 до 75 см, в зависимости от сортовой принадлежности и вида. Сегодня в природе насчитывается ориентировочно 15 ботанических видов растения. Наиболее распространенными среди них выступает аптечная и лекарственная разновидность. Цветы календулы чаще всего имеют желтый или оранжевый окрас, однако селекционеры изрядно постарались и сегодня можно созерцать разнообразную гамму оттенков.

Это название — «ноготки» — цветки календулы получили из-за семян, которые своей формой похожие на человеческие ногти.

Календула

Растение календула имеет сильноветвистый стебель с мощными и мясистыми побегами. Им свойственна ребристая поверхность и насыщенный темно-зеленый окрас. Листья календулы продолговатые, основание сердцевидное.

Важно: цветет растение в конце второй или в начале третьей декады июня и до конца сентября – вплоть до первых заморозков.

Календула-трава: сорта и виды

Ученые ботаники на сегодняшний день выделяют от 12 до 20 видов ноготков. Более подробно рассмотрим основные:

  • Лекарственные ноготки – активно размножается в умеренных климатических условиях, распространены в Азии, южной части Европы и австралийском континенте. Культивируется календула в промышленных масштабах, используется в качестве лекарственного растения, а также востребована для целей пищевой промышленности. Выведено много сортов, большая часть которых применяется для декоративных целей.
  • Полевая календула – источник лекарственного сырья для производства продуктов питания, лекарственных препаратов и косметических. Относится к растениям-эндемикам, произрастает в южной и центральной части Европы.
  • Морская календула – не очень распространенная разновидность, находится под угрозой полного исчезновения, произрастает в западной части Сицилии, вдоль водоемов и моря.

Обратите внимание! Все сорта календулы делятся на низкорослые, среднерослые и высокорослые сорта.

Наиболее распространенным представителем низкорослых сортов является Фиеста Хитана. Способна достигать высоты всего в 25 см. Характерная особенность сорта – образование крупных махровых соцветий насыщенного ярко-желтого окраса. Помимо желтых цветов, могут встречаться двухцветные, кремовые и оранжевые.

К среднерослым сортовым разновидностям относится Розовый сюрприз. Высота стеблей способна варьироваться от 45 до 50 см. Характерная особенность – необычный розовый окрас цветов. Еще большой популярностью начал пользоваться сорт Родион, а все благодаря насыщенным оранжево-красным соцветиям больших размеров. Длительность цветения продолжительная.

К высокорослым сортам относится Золотой император – это декоративный сорт. Высота массивных стеблей способна достигать 70 см. Не может не привлекать агрономов своими махровыми ярко-желтыми соцветиями крупных размеров.

Все вышеописанные сорта активно применяются для декоративных целей. Они хорошо сочетаются с другими цветущими растениями на клумбе или в саду и долго стоят в букетах.

Фиеста Хитана

Химический состав, для чего применяется календула

Достаточно распространенный вопрос, а календула от чего помогает? Использование в народной и традиционной медицине календулы обусловлено большой концентрацией жизненно важных витаминов, аминокислот, макро- и микроэлементов. Активно применяют не только соцветия ноготков, но и все фрагменты надземной части.

Химический состав:

Название микроэлементаКонцентрация (мг/кг сухой массы)
Железо533
Марганец85.9
Цинк49.9
Медь15.51
Никель5.68
Хром4.75
* Кобальт
*Свинец
* Кадмий
менее 0,1

Медикаменты, в основе которых лежит календула, часто используется в качестве антисептических и противовоспалительных средств. Можно применять в виде различных пластырей с экстрактом, мазей, отваров и настоек.

Настойка календулы

Полезные свойства и противопоказания

  • В листьях ноготка содержится ударная доза аскорбиновой кислоты (витамина С), поэтому отваром из лекарственного растения удается успешно лечить ангину. Для этого потребуется 1 стаканом крутого кипятка залить 1 ст. л. сухих цветков. Настаивать напиток на протяжении часа, полоскать горло не менее 1-3 раз в день.
  • С помощью настоек удается результативно лечить заболевания органов желудочно-кишечного тракта, например, болезней двенадцатиперстной кишки, язвы и гастрита.
  • Культура применяется при бессоннице и нервном перенапряжении, а также при головокружении и сильных головных болях.
  • Используя календулу, лечат заболевания глаз. Для этого необходимо ставить аппликации (примочки) на веки.
  • Эффективно лечит болезни ротовой полости. Для этого требуется ополаскивать рот разведенным настоем календулы.
  • Календулу применяют для лечения гинекологических болезней. Ее применяют в виде спринцевания при эрозии шейки матки.
  • Она оказывает благоприятное воздействие на работу и состояние сердечно-сосудистой системы: укрепляет сосуды и нормализует артериальное давление.
  • Результативно использовать для профилактики образования опухолей (добро- и злокачественных).
  • Масло ноготка оказывает выраженное дезинфицирующее и регенерирующее действие. Используют при укусах насекомых, ссадинах и ушибах.
  • Применяется для защиты от ультрафиолетового излучения.

Важно! Все препараты, предназначенные для приема внутрь, необходимо использовать строго в соответствии с прилагаемой инструкцией по применению.

Все продукты природного происхождения, несмотря на большое количество полезных свойств, при нерациональном употреблении способны нанести вред организму. Календулу противопоказано использовать людям с пониженным артериальным давлением, а также при индивидуальной непереносимости к компонентам.

Посадка и уход

Посев семян в открытый грунт

Оптимальное время для посадки семян в открытую почву – вторая и третья декада апреля или октября. Весной приступать к посадке лучше всего, когда почва будет достаточно прогрета и просушена после талого снега.

Участок перед посадкой необходимо подготовить. Для этого за несколько недель до высадки участок, где будет расти календула, перекапывают, вносят в почву органические удобрения и минеральные (хлористый калий, суперфосфат, мочевина).

Семена календулы

Сеять посадочный материал лучше всего на глубину не более 1-2 см, интервал соблюдать 25-30 см – это в том случае, если цветущее растение выращивается для декоративных целей. Если же задача собрать лекарственное сырье, то необходим интервал 7-10 см. По истечении нескольких недель появляются первые всходы, которые по мере надобности необходимо прореживать. Лишние всходы можно перенести в другое место, растение неприхотливо и хорошо переносит пересадку. Как правило, при соблюдении всех агротехнических правил растение начинает цвести через 10 недель.

Посев ноготка на рассаду

Чтобы культура начала цвести раньше, ее рекомендуется выращивать рассадным способом. Низкорослые сорта тоже рекомендуется выращивать, используя именно этот метод. На рассаду сеют семена в третьей декаде марта – первой декаде апреля. Для этого используют общую емкость или отдельные стаканчики, наполненные плодородным грунтом. Глубина залегания семян не более 2 см, после посева емкости закрывают стеклом или полиэтиленовым пакетом и ставят в светлое, защищенное от солнца место. Оптимальная температура для полноценного развития +18-20 градусов.

Обратите внимание! Для предотвращения развития грибковых болезней и загнивания корневой системы необходимо ежедневно проветривать растения, открывая стекло или материал.

Уход за рассадой

Как правило, первые всходы появляются по истечении 6-8 дней. Как только они «проклюнутся», температуру необходимо понизить до +14-15 градусов. Уход за растением на этом этапе развития заключается в регулярном и в меру обильном поливе, внесении комплексного минерального удобрения с интервалом в неделю-две. Время пикировать рассаду подходит, когда сформируется два полноценных листочка.

Посадка рассады в открытую почву

Оптимальное время для посадки рассады в открытый грунт – середина мая. У сеянцев к этому времени должно развиться 5-6 настоящих листьев. Календула – неприхотливое и морозостойкое растение, но, несмотря на это, предварительно, перед высадкой в открытую почву рассаду лучше закалить. За неделю до высадки емкости с растениями выносят периодически на свежий воздух, причем длительность «прогулок» постепенно увеличивают.

Растение охотно произрастает на солнечных участках, но грунт должен быть питательным, влажным и в меру дренированным. Опытные агрономы высаживают растения между огородными культурами, что защищает их от болезнетворных и патогенных микроорганизмов, насекомых. Но предварительно следует ознакомиться с возможным сочетанием культур с календулой, например, рядом растущий ноготок замедляет рост базилика и редиса. Это необходимо брать во внимание при выборе участка.

Обратите внимание! При выращивании календулы на клумбе надо следить за ее размножением, поскольку она активно распространяется самосевом.

Посадка календулы в открытую почву осуществляется по схеме, которая аналогична посеву. Цветение ноготков начинается через 40-50 дней после посева.

Уход за календулой

В уходе растение неприхотливо, не отнимет ни много сил, ни финансов. Агротехника обыкновенная: полив, рыхление почвы, прополка и внесение удобрений. Но выращивание ноготка имеет одну особенность: для продления цветения необходимо язычковые цветки, которые приняли горизонтальное положение, обрывать. Эта процедура активизирует процесс формирования большого количества бутонов.

Болезни и вредители

Календулу могут поразить грибковые заболевания, например, мучнистая роса или черная пятнистость. От последнего на листьях начинают образовываться пятна темно-коричневого или черного окраса. Мучнистая роса покрывает надземную часть растения белой пеленой – налетом, который по мере прогрессирования болезни буреет. Незначительное поражение этими болезнями приводит к утрате не только декоративных качеств, но и холодостойкости. Для лечения необходимо незамедлительно опрыскать культуру и ее околоствольный круг растворами фунгицидов.

Основная причина развития болезней – чрезмерная увлажненность почвы и загущение растения.

Тля на календуле

Из вредителей для календулы наиболее опасна тля. Остальные насекомые не любят ее из-за специфического аромата. Преимущество пребывания календулы на дачном участке – она собирает на себя всю тлю, т. е. берет весь удар на себя. Бороться с насекомыми можно, используя популярные инсектициды, например, Антитлин, Акарин, Биотлин и другие.

Зная, что такое календула и как ее применять, можно получить колоссальную пользу. Это уникальное садовое растение, которое не только украшает приусадебные участки, но и при правильном подходе может оказывать весьма благоприятное воздействие на человеческий организм. Растение применяют для терапии болезней пищеварительного тракта, сердечно-сосудистой системы и органов зрения, благодаря антисептическому действию используется для обработки ран и ссадин. При правильном подходе она также способна приносить пользу и своим соседям на огороде, отпугивая вредителей. Перед выращиванием календулы агроному рекомендуется предварительно ознакомиться с ее разновидностями и особенностями выращивания.

0 0 голоса

Рейтинг статьи

Оценка биологически активных соединений цветков календулы лекарственной с помощью спектрофотометрии

Chem Cent J. 2012; 6: 35.

# 1 и 2

Моника Бутнариу

1 Кафедра химии и биохимии, Банатский университет сельскохозяйственных наук и ветеринарной медицины, Тимишоара, Калеа Арадулуи, no. 119, Тимишоара, 300645 Румыния

Кристина Жепа Корадини

2 Кафедра фитотехники, Банатский университет Банатский университет сельскохозяйственных наук и ветеринарной медицины, Тимишоара, Калеа Арадулуи, no.119, Тимишоара, 300645 Румыния

1 Кафедра химии и биохимии, Банатский университет сельскохозяйственных наук и ветеринарной медицины, Тимишоара, Калеа Арадулуи, no. 119, Тимишоара, 300645 Румыния

2 Кафедра фитотехники, Банатский университет Банатский университет сельскохозяйственных наук и ветеринарной медицины, Тимишоара, Calea Aradului, no. 119, Тимишоара, 300645 Румыния

Автор, ответственный за переписку.

# Распространяется поровну.

Поступило 01.04.2012 г .; Принято 27 апреля 2012 г.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.
Дополнительные материалы

Дополнительный файл 1 Таблица 1– Относительные уровни соединений из экстрактов C. officinalis , обладающих антиоксидантным потенциалом .

GUID: D746C5B3-F4DF-48BF-8FF5-562FD1FE1F75

Дополнительный файл 2 Таблица 2 — Спектрофотометрически определенные каротиноиды цветов C. officinalis в различных растворителях .

GUID: 60E199FB-91E7-4511-A51D-E1289B3E9C18

Аннотация

Предпосылки

Это исследование было направлено на количественное определение активных биологических соединений в цветках C. officinalis . Основываясь на действующих веществах и биологических свойствах цветков бархатцев, описанных в литературе, мы стремились получить и охарактеризовать молекулярный состав экстрактов, приготовленных с использованием различных растворителей. Антиоксидантную способность экстрактов оценивали с помощью спектрофотометрии для измерения как оптической плотности колориметрического акцептора свободных радикалов 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила (DPPH), так и общего антиоксидантного потенциала с использованием анализа восстанавливающей способности железа (FRAP).

Результаты

Спектрофотометрические анализы в ультрафиолетовой и видимой (UV-VIS) области позволили идентифицировать и охарактеризовать весь спектр фенольных и флавоноидных кислот, а высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) использовалась для идентификации и количественного определения фенольных соединений ( в зависимости от метода добычи). Метанол обеспечивает более эффективное извлечение флавоноидов, чем другие испытанные растворители.

Антиоксидантная активность метанольных экстрактов коррелировала с содержанием полифенолов.

Выводы

УФ-видимые спектры пигментов-ассимиляторов (например, хлорофиллов), полифенолов и флавоноидов, экстрагированных из цветков C. officinalis , заключались в количественной оценке соединений, которые поглощают волны с длиной волны более 360 нм.

Общие сведения

Благодаря особому составу и экономической ценности культивирование бархатцев ( C. officinalis ) продолжает расти [1], и Европейский Союз спонсировал несколько программ по изучению и использованию этого вида [2- 4].Лечебные свойства бархатцев объясняются разнообразием содержащихся в них биологически активных веществ [5]. Благодаря своим противовоспалительным, заживляющим и антисептическим свойствам экстракты C. officinalis применяются наружно для лечения различных кожных язв, экземы и конъюнктивита, а также внутрь для облегчения боли, возникающей при язве желудка и воспалении. Бархатцы известны своими спазмолитическими, расслабляющими, желчегонными, потогонными и ранимыми свойствами [6].И фенольные соединения (флавоноиды и фенольные кислоты), и сапонины в большом количестве присутствуют в ноготках [7].

C. officinalis также содержит каротиноиды и тритерпеновые спирты как в свободном, так и в этерифицированном виде [8,9]. Каротиноидные пигменты, производные C. officinalis [10] и полиненасыщенные жирные кислоты, такие как календовая кислота [5], обладают воспалительными свойствами in vivo, и ингибирующими свойствами in vitro, [11].

Бархатцы также характеризуются присутствием некоторых важных поликарбогидратов [12], которые растворимы в воде и играют роль в спаивании тканей и контроле клеточной проницаемости [13-15].Другими веществами, идентифицированными в экстрактах C. officinalis , являются белки и аминокислоты [16], насыщенные углеводороды [17], витамин C [18] и минеральные вещества [19]. Благодаря своему сильному аромату [20] эфирные масла могут привлекать насекомых, тем самым косвенно способствуя опылению [21-23].

Некоторые летучие вещества [24] представляют собой конечные продукты анаэробного биоразложения углеводов [25] и накапливаются до уровней, сопоставимых с уровнями, синтезируемыми в клетках [26].

Помимо их роли в качестве антиоксидантов [27], полифенолы (особенно флавоноиды) обладают антимикробными свойствами [28,29].

В наших предыдущих исследованиях использовалась хроматография, чтобы продемонстрировать, что календула является хорошим источником природных антиоксидантов, в частности полифенольных веществ.

Полифенолы обычно характеризуются своим специфическим хроматографическим поведением и характерными спектрами UV-VIS.

Целью данного исследования было использование спектрофотометрии для оценки содержания фенольных и флавоноидных соединений, а также активности по улавливанию радикалов в экстрактах из различных образцов календулы.Основные фенольные соединения C. officinalis , протестированные в этом исследовании, были систематически идентифицированы путем сравнения профилей ВЭЖХ образцов с профилями подлинных фенольных стандартов и опубликованными данными (информация в патентах RO122836 B1) [30]. Мы использовали ВЭЖХ для одновременного разделения, обнаружения и количественного определения фенольных соединений, хлорофиллов и каротиноидов за один проход. Наличие метода получения биоактивного профиля различных матриц растительности должно помочь удовлетворить растущие потребности в информации о биологических соединениях и их свойствах не только о цветках календулы, но и о других естественных источниках пищи.

Результаты

Спектрофотометрические анализы

Настоящее исследование описывает метод Folin-Ciocalteu (FC) для быстрого анализа и количественной оценки. Быстрый метод был проверен с точки зрения повторяемости, воспроизводимости, линейности, точности, затем был проведен оптимизированный аналитический метод для количественного определения фенольных соединений. Спектрофотометрические анализы для определения общего содержания флавоноидов и полифенолов в растительных экстрактах были адаптированы для использования с спектрофотометром UV-VIS (PG Instruments) и soft UV WIN 5.05 для измерения оптической плотности стандартных растворов (QE и GA) и оптической плотности образцов из растительных экстрактов [31]. Спектрофотометрические анализы для расчета концентраций кверцетина (QE) основывались на измерениях оптической плотности при 420 нм. Спектрофотометрическое определение содержания галловой кислоты (GA) рассчитывали при 765 нм. Линейность метода проверялась методом наименьших квадратов, который применялся в диапазоне концентраций 2-32 мкг / мл для QE и 1-10 мкг / мл для GA, с коэффициентом корреляции R 2 > 0.99. Для проверки результатов повторяющиеся калибровочные кривые сравнивали с эталонными веществами в течение трех дней подряд. Наблюдалась небольшая разница между калибровочными кривыми, построенными для QE, тогда как кривые для GA были почти идентичны. Все коэффициенты детерминации уравнений калибровочных прямых (R 2 ) были больше 0,99. Точность метода рассчитывалась путем сравнения определенного количества вещества с количеством вещества, рассчитанным на основе статистического анализа с помощью программы ORIGIN 7 (версии Standard / Professional).Для всех контрольных образцов различия между экспериментальными образцами и стандартами никогда не были статистически значимыми ( P <0,05). Точность (процентное отклонение определенной концентрации по отношению к рассчитанной концентрации) и прецизионность (стандартное отклонение / коэффициент вариации) методов всегда находились в пределах допустимых диапазонов (± 15% от среднего).

Чувствительность метода рассчитывалась с использованием 2 мкг / мл QE и 1 мкг / мл GA. В обоих случаях, когда точность и прецизионность, указанные в допустимых пределах, в таких определениях суммируются до предела количественного определения (± 20%).

Фитохимические вещества и, в частности, соединения фенольных кислот и флавоноидов, присутствующие в цветках C. officinalis , могут частично отвечать за эти преимущества для здоровья благодаря своей антиоксидантной активности. В настоящем исследовании основные цели заключаются в выделении общего количества флавоноидов и полифенольных соединений с помощью спектрофотометрических анализов в ультрафиолетовом и видимом диапазонах. Чтобы быстро различать различные образцы, флавоноиды экстрагировали из цветов путем погружения (без разрушения ткани) в растворители (метод ВЭЖХ, мы исследуем патент RO122836-B1).

Высокоэффективная жидкостная хроматография

В соответствии с международными стандартами Ассоциации по улучшению органических культур (OCIA), Международной федерации движений за органическое сельское хозяйство (IFOAM) и Национальной программы органического сельского хозяйства США, использование экологически чистых материалов Для получения таких натуральных ингредиентов необходимы дружественные процедуры экстракции, такие как мацерация.

Мы использовали объективный анализ ВЭЖХ в сочетании со спектрофотометрическими методами для исчерпывающей характеристики полифенолов, включая соединения с антиоксидантным потенциалом, такие как флаванолы, фенольные кислоты и каротиноиды, из экстракта C.лекарственный цветков. Наиболее распространенные фенольные соединения были количественно определены с помощью ВЭЖХ по сравнению с внешними стандартами известных фенольных соединений.

Общее содержание полифенолов, флавоноидов и оценка антиоксидантной активности с использованием DPPH и FRAP

Концентрации полифенолов в экспериментальных образцах варьировались в зависимости от типа растительного материала и растворителя, используемого для экстракции. Значения, определенные с использованием метода DPPH (дополнительный файл 1 и рисунок), показали, что антиоксидантная активность была значительно выше у сорта P 2 , чем у сорта P 1 .Это можно объяснить большей ферментативной активностью в первом. Измерения проводились в диапазоне длин волн от 440 до 750 нм. Все сканы, полученные с использованием экспериментальных образцов, сравнивали со сканированными изображениями, полученными с использованием чистых растворителей. Измерения проводили через 30 минут после добавления DPPH, чтобы обеспечить достаточно времени для реакции антиоксидантов с DPPH. Как показано в дополнительном файле 1, изменения оптической плотности на этой длине волны показывают, находятся ли радикалы DPPH в окисленном или восстановленном состоянии. Таким образом, эта длина волны обеспечивает прямой анализ и интерпретацию измеренного уменьшения поглощения.Гидрофильную антиоксидантную активность оценивали с использованием методов FRAP и DPPH. Антиоксидантная активность была выше в образцах из сорта P 2 , чем в образцах из сорта P 1 , возможно, из-за более высоких уровней биосинтеза в первом случае, чем во втором. Использование методов FRAP привело к одинаково малым значениям для всех трех типов экстрактов. Огромное распространение материалов и биологических жидкостей, содержащих биологически активную молекулу, не способствовало принятию общего метода, доступного для экстракции, который можно было бы применять в общих чертах и ​​принимать как стандартизированную технику.Широкий спектр используемых аналитов и растворителей не позволил нам использовать стандартную процедуру экстракции на протяжении всего исследования. Экстракция каротиноидов с использованием униполярных органических растворителей [32], этилового эфира или хлороформа включала мацерацию растительной ткани с последующим механическим встряхиванием и переносом экстрактов в кипящую водяную баню. Для полной экстракции требовалось значительное растирание; потому что униполярный растворитель не проникает через клеточную мембрану для растворения каротиноидов.

Содержание соединений с антиоксидантным потенциалом из экстрактов C. officinalis .

Поскольку свежий материал имеет высокие уровни, его необходимо сначала высушить перед экстракцией смешивающимися растворителями, такими как ацетон, метанол и этанол [33,34]. Тогда растительный материал может быть достаточно безводным, чтобы можно было проводить экстракцию с использованием неводных растворителей.

Целью этой экспериментальной части было количественное определение антиоксидантной активности с помощью спектрофотометрии (дополнительный файл 1).Мы разработали простой и эффективный метод извлечения. Он должен был идентифицировать флавоноиды в его экстрактах, определить количество и сделать прогноз его антиоксидантной способности спектрофотометрическим методом DPPH. Модель улавливания стабильного радикала DPPH является широко используемым методом для оценки способности различных образцов улавливать свободные радикалы.

Анализ пигментов

Органические экстракты содержали каротиноиды, а также некоторые отходы, такие как хлорофилл [35,36].Анализ результатов Дополнительного файла 2 показывает различия в содержании пигментов-ассимиляторов в проанализированных образцах. Более высокие количества хлорофилла b (рисунок и рисунок) предполагают способность тканей цветка улавливать световое излучение, чтобы повысить способность растений преобразовывать световую энергию в потенциальную химическую энергию. Образцы, которые производят большее количество углеводов, берутся из тканей, которые обеспечивают вещества, необходимые для развития [37].

Спектр поглощения 80% метанольных экстрактов цветов C. officinalis .

Спектры поглощения цветков C. officinalis в метаноле 80%, этаноле 96%, изопропаноле 99% и этаноле 60% .

Как сообщалось ранее [38], квантасома (комплекс между фотосинтетическими пигментами и белково-фосфорными мембранами граны) [39] включает 230 молекул хлорофилла (Chl) (160 молекул Chl a и 70 молекул Chl b ) и приблизительно 50 молекул каротиноидов.Молекулы хлорофилла a действуют как реакционные (улавливающие) центры (P 700 в фотосистеме (PS) I и P 680 в PS II). Теоретически соотношение Chl a : Chl b может варьироваться от 1: 2 до 1: 3. Из наших данных для сорта Petran (P 1 ), единственного образца, для которого соотношение между типами хлорофилла a / b хлорофилла в соотношении 1: 2 — метанольный экстракт (образец 1). Соотношение в трех других экстрактах составляло 1: 3.Для экстрактов метанола и этанола сорта Plamen (P 2 ) мы обнаружили соотношение Chl a : Chl b , равное 1: 4. Вариации относительного содержания хлорофиллов a и b могут быть связаны с нарушениями на уровне ФС II [40]. Сканирование длин волн всех экстрактов C. officinalis показано на рисунке. Специфические паттерны поглощения позволили нам идентифицировать определенные группы молекул и домены. Одна из наиболее важных функций каротиноидов — фотозащита фотосинтетического аппарата путем тушения триплетного хлорофилла, синглетного кислорода и других активных форм.

Каротиноиды являются структурными компонентами светособирающего хлорофилла a / b белковых комплексов PSII (LHCII) и PS I. Они участвуют как в стабилизации тримеров LHCII, так и в сборке мономеров LHCII [41]. Чтобы быть полезным в качестве меры клеточного антиоксидантного потенциала, поглощение на выбранной длине волны должно в основном зависеть от радикала DPPH, а не от помех, вызываемых антиоксидантами, такими как каротиноиды и полиненасыщенные жирные кислоты.Учитывая, что сигналы с длинами волн ниже 530 нм сильно зависят от каротиноидов, это может привести к неправильной интерпретации измеренного уменьшения поглощения при выборе длины волны, на которую влияют как радикал DPPH, так и абсорбционные свойства экстракта, как это происходит для экстрактов, содержащих каротиноиды. В значительной степени этот вид помех может быть устранен путем измерения оптической плотности эталонного образца, содержащего тот же экстракт, что и образец, содержащий DPPH.

Наши усилия по количественному определению общего содержания каротиноидов в экстрактах показывают важность растворителя, выбранного для экстракции образцов.Метанол извлекает каротиноидные пигменты более эффективно, чем любой из других протестированных растворителей.

Обсуждение

Мы использовали два спектрофотометрических метода, которые включают захват свободных радикалов в растворе с помощью DPPH и оценку общего антиоксидантного потенциала (FRAP), чтобы предоставить дополнительные источники доказательств различных антиоксидантных потенциалов экстрактов из C. лекарственный цветков. Сопоставляя состав фенольных соединений с антиоксидантным действием в тканях цветов, мы обнаружили, что экстракты из C.officinalis сорт Пламен (P 2 ) обладал более высоким антиоксидантным потенциалом, чем экстракты из сорта Petran (P 1 ). Связь между антиоксидантной активностью и содержанием флавоноидов не была линейной, что позволяет предположить, что антиоксидантная активность зависит от общего содержания полифенолов. Летучие органические биосоединения напрямую поддаются анализу с помощью газовой хроматографии, метода непревзойденной разделительной способности.

Флавоноиды считаются предпочтительными биосоединениями в качестве хемотаксономических маркеров растений, поскольку они демонстрируют большое структурное разнообразие и химически стабильны.

В разработанной в данной работе методологии идентификации и количественного определения основных фенольных соединений по образцам использовались более доступные методы FC для определения полифенолов.

Метод, основанный на классических нормах и стандартных рабочих процедурах, разработанных в отделе биохимии, дал каждому критерию валидации значение, соответствующее ограничениям ранее упомянутых норм.

Выводы

Антиоксидантные компоненты в экстрактах идентифицировали с помощью комбинированных методов ВЭЖХ и спектрофотометрического анализа.С помощью спектрофотометрического анализа экстрактов в УФ-видимом диапазоне мы идентифицировали определенные фенольные кислоты и флавоноиды.

Метанол позволяет более эффективно извлекать флавоноиды, чем другие исследованные растворители. Наибольшая антиоксидантная активность, связанная с содержанием полифенолов, была получена для экстрактов, приготовленных с использованием метанола. Биохимический анализ определил содержание пигментов-ассимиляторов, а также флавоноидов, которые были выражены как эквиваленты QE. После получения спектрофотометрической дозировки флавоноидов, выраженной в QE, значения включали следующие: 96.17 / 34,8 QEmg / 100 мл.

Согласно Европейской фармакопее минимальным условием качества было 0,4% общих флавоноидов, выраженных в QE. Качество сырья для бархатцев C. officinalis ( Flores Calendulae ) было обусловлено основным содержанием флавонов и полифенолов, которые накапливались в период цветения.

Методы

Образцы растений

Растения были собраны с поля на учебной базе USAMVB Timisoara.Два типа образцов растений, сорт Petran (P 1 ) и Plamen (P 2 ), были собраны и помечены на месте с использованием стандартных методов (сорта выращивались в одинаковых условиях).

Образцы растений, которые были сохранены в качестве гербарных образцов, были идентифицированы с использованием стандартного эталона для этой цели [42], по сравнению с образцами из Департамента растительных ресурсов и идентифицированы с помощью таксономистов из Департамента фитотехники растений в USAMVB Тимишоара.

Экстракция активных биологических соединений

Для экстракции использовались четыре растворителя: метанол (80%), этанол (96%), изопропанол (100%) и этанол (60%). Общий процесс мацерации в небольшом масштабе включал помещение измельченного соответствующим образом растительного материала или умеренно крупного порошка, изготовленного из него, в закрытый сосуд и добавление выбранного растворителя, чтобы дать ему достаточно времени для проникновения через клеточную стенку для растворения компонентов внутри клетки и для того, чтобы полученный раствор проник через клеточную стенку наружу.Поскольку система статична, за исключением случайного встряхивания, процесс экстракции происходит за счет молекулярной диффузии, которая очень медленная. Закрытый сосуд используется для предотвращения испарения растворителя во время периода экстракции и, таким образом, позволяет избежать вариаций от партии к партии.

В конце процесса мацерации, когда будет достигнуто равновесие, раствор фильтруют, пропуская через специальный пресс.

Концентрации активных компонентов в процеженных и сцеженных жидкостях, иногда называемых мисцеллой, идентичны, поэтому их можно комбинировать.Учитывая, что отжатая жидкость может быть мутной с коллоидными и мелкими частицами, часто требуется определенное время для коагуляции и осаждения твердых частиц.

Осевший материал фильтруют с помощью фильтр-пресса или любого другого подходящего устройства.

Метод экстракции мацерацией — самый простой неизбирательный метод. C. officinalis. цветы выдерживали в холодной среде в контакте с растворителем при комнатной температуре (17-22 ° C) в течение 14 часов, периодически перемешивая перед отделением экстракта.Дополнительный раунд (ы) мацерации повысил эффективность процесса. Экстрагированный продукт сначала смешивали с 1 / 2-2 / 3 от общего количества растворителя, после чего жидкость отделяли и высвобождали остаток.

Он вступает в контакт с остальной частью растворителя, в результате чего добывается одна девятая часть раствора. Две жидкости экстрагируют и фильтруют вместе еще через 24 часа.

Из-за относительно пониженной термостойкости природных ароматических соединений процесс проводили в присутствии антиоксиданта аскорбиновой кислоты (0.5% мас. / Об.) [43]. Скорость экстракции (1:10 г порошка цветков / мл растворителя).

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)

Полифенолсодержащие экстракты цветков C. officinalis разделяли на колонке C 18 (150 мм × 4,6 мм, 3 мкм) с подвижной фазой, состоящей из трех различных растворителей, используя аппарат Agilent 1100 HPLC. Скорость потока составляла 0,7 мл / мин, а объем впрыска составлял 20 мкл. Для первой системы разделения (тройной растворитель), которая использовалась для разделения флаванолов и фенольных кислот, исходная подвижная фаза состояла из 2% уксусной кислоты в воде / метаноле.Для разделения флавонолов во второй системе (бинарный растворитель: 0,25 мМ фосфатный буфер, pH = 2,5 / ацетонитрил) полифенольные соединения разделяли с использованием третьей системы (бинарный растворитель: 0,1% муравьиная кислота в воде / метаноле). Температуру колонки устанавливали на уровне 20 ° C.

Фенольные соединения обнаружены при 260 нм. Разделенные соединения идентифицировали путем сравнения их времени удерживания (Rt) и УФ-спектров со спектрами аутентичных стандартов. Соединения были определены количественно с использованием стандартной калибровочной кривой.

Общее содержание фенолов и флавоноидов было определено как сумма связанных идентифицированных фенольных соединений. Соединения были идентифицированы путем сравнения со стандартами каждого идентифицированного соединения с использованием Rt, профиля спектра поглощения, а также путем анализа образцов после добавления чистых стандартов [35].

Общее содержание полифенолов

Общее содержание полифенолов было рассчитано с использованием реагента FC и Na 2 CO 3 10%; Впоследствии максимальное поглощение оценивали по полученной окраске относительно калибровочной кривой.Общее содержание фенольных соединений оценивали с помощью колориметрии, основанной на химическом восстановлении смеси оксидов вольфрама и молибдена с образованием синего продукта, который сильно поглощает при 760 нм.

Образование голубых соединений, полученных из FC-реакционноспособных фенолов, не зависело от структур фенольных соединений, что позволило количественно оценить полный набор фенольных соединений из растительных экстрактов. Примерно 10 г измельченного растительного материала экстрагировали 100 мл растворителя.Общую концентрацию фенольных соединений в экстракте рассчитывали путем сравнения с кривой, построенной аналогичным образом на основе измерения, выполненного с использованием известных концентраций GA в диапазоне 0-00 мкг GA / 100 мл. Общее содержание фенолов в образцах выражали в эквивалентах GA (мг) на грамм высушенного растительного материала.

Уровни полифенолов выражали в эквивалентах мг / г GA по отношению к конечной концентрации 20 мкг / мл.

Общее содержание флавоноидов

Суммарный уровень всех флавоноидов рассчитывали реакцией с 3% -ным (мас. / Об.) Раствором AlCl 3 (безводная соль), приготовленным в этаноле.

Концентрации коррелировали со значениями абсорбции с помощью калибровочной кривой, построенной с использованием известных концентраций QE. Общее содержание флавоноидов, выраженное в мг / г (эквиваленты QE), было связано с конечной концентрацией на 20 мкг / мл.

Оценка антиоксидантной активности с использованием DPPH

Примерно 10 г измельченного растительного материала экстрагировали в 100 мл 80% -ного водного раствора этанола (или других растворителей) при комнатной температуре в течение 1 часа.

Экстракты фильтровали, и фильтры оставляли испаряться в сухой среде.

Процентную активность по улавливанию свободных радикалов определяли по формуле (1), где Ai было поглощением до добавления тестируемого экстракта, а Af было значением поглощения после 5-минутного времени реакции:

100 ⋅ (Ai — Af) / Ai

(1)

Эффект нейтрализации свободного радикала DPPH◦ был рассчитан при трех различных концентрациях метанольных и этанольных экстрактов: порции 0,05 мл экстрактов 10, 5 и 2,5 мг / мл смешивались с 2,95 мл раствора. DPPH◦ в кювете, используемой для спектрофотометрии.

По прошествии 5 минут реакции абсорбция при 420 нм сравнивалась с поглощением метанола. QE использовали в качестве положительного контроля. При концентрации 2,5 мМ QE был способен полностью нейтрализовать (уровень использованного радикала DPPH◦).

Анализ ферроредуцирующей антиоксидантной силы (FRAP)

Мы использовали простой спектрофотометрический метод для оценки антиоксидантной способности растительных экстрактов. Это включало восстановление трипиридилтриазина трехвалентного железа [Fe (III) -TPTZ] до окрашенного трипиридилтриазина двухвалентного железа [Fe (II) -TPTZ] при низком pH.

Цветной продукт сильно поглощает при длине волны 593 нм.

Анализ пигментов

Все образцы экстрагировали ацетоном. Пигменты экстрагировали из цветка C. officinalis № с использованием 80% ацетона. Мы использовали удельные коэффициенты поглощения хлорофиллов a и b и каротиноидов ( Car ) для оценки их уровней с помощью спектрофотометрии. Все хлорофиллы содержали две основные полосы поглощения излучения: одну на синей стороне или около УФ части электромагнитного спектра, а другую — на красной стороне или около ИК области электромагнитного спектра.Отсутствие значительного поглощения в зеленой части спектра придает хлорофиллам характерный зеленый или сине-зеленоватый цвет.

Этот метод определяет количество (мг) в 100 мл экстракта каротиноидов. Составы пигментов, рассчитанные в соответствии с уравнениями 2, 3 и 4:

Chl a (мкг / г сухого вещества) = (15 . 65A 666 -7 . 34A 653 )

(2 )

Chl b (мкг / г сухого вещества) = (27 . 05A 653 — 11 .

Реагенты и другие материалы

QE и GA были получены от Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури, США), тогда как все остальные реагенты были получены от Merck. Все химические вещества и реагенты были аналитической чистоты.

Статистический анализ

Все результаты спектрофотометрических определений флавонов и полифенолов были воспроизведены после установления доверительного интервала, рассчитанного как минимум для пяти определений.Статистические различия между средними значениями определяли с помощью двустороннего парного t-критерия Стьюдента.

Сокращения

DPPH: 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил; FRAP: восстановительная способность железа; UV-VIS: в ультрафиолете-видимом диапазоне; ВЭЖХ: высокоэффективная жидкостная хроматография; QE: кверцетин; GA: галловая кислота; ФК: Фолин-Чокальтеу; [Fe (III) -TPTZ]: трипиридилтриазин трехвалентного железа; [Fe (II) -TPTZ]: трипиридилтриазин двухвалентного железа; Автомобиль: каротиноиды; Chl a / Chl b : хлорофиллы a и b .

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Вклад авторов

МБ задумал исследование, участвовал в разработке и координации экспериментов и интерпретации данных, а также помог разработать рукопись. CZC произвел образцы, провел анализ данных и их интерпретацию. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

Дополнительный материал

Дополнительный файл 1:

Таблица 1– Относительные уровни соединений от C.лекарственный , обладающий антиоксидантным потенциалом .

Дополнительный файл 2:

Таблица 2 — Спектрофотометрически определенные каротиноиды цветка C. officinalis в различных растворителях .

Выражение признательности

Этот документ был опубликован в рамках проекта « Постдокторская школа сельского хозяйства и ветеринарной медицины », POSDRU / 89 / 1.5 / S / 62371, софинансируемого Европейским социальным фондом через Отраслевую оперативную программу для человека. Развитие ресурсов 2007-2013 гг.

Ссылки

  • Basch E, Bent S, Foppa I, Haskmi S, Kroll D, Mele M, Szapary P, Ulbricht C, Vora M, Yong S. Marigold ( Calendula officinalis L.): подтверждено доказательствами систематический обзор Natural Standard Research Collaboration. J Herb Pharmacother. 2006; 6: 135–59. DOI: 10.1080 / J157v06n03_08. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Календула лекарственная -L. (HTML) Plants For A Future (PFAF) http://www.pfaf.org/user/Plant.aspx?LatinName=Calendula+officinalis Получено 2011/11/04.
  • Интерактивная флора Северо-Западной Европы. Календула лекарственная. Проверено 12 августа 2011.
  • Национальные институты здравоохранения. «Календула» (HTML). Травы и пищевые добавки. Национальная медицинская библиотека США; Проверено 19 октября 2011. [Google Scholar]
  • Muley BP, Khadabadi SS, Banarase NB. Фитохимические компоненты и фармакологическая активность Календула лекарственная Linn (Asteraceae) Trop J Pharm Res. 2009. 8: 455–465. [Google Scholar]
  • Танака Т., Мацуо И., Куно И.Обзор: химия вторичных полифенолов, образующихся при переработке чая и отдельных пищевых продуктов. Int J Mol Sci. 2010; 11: 14–4. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Chakraborthy GS. Фитохимический скрининг экстракта листьев Calendula Officinalis Linn методом ТСХ. Int J Res Ayurveda Pharma. 2010; 1: 131–134. [Google Scholar]
  • Neukiron H, D’Ambrosio M, Dovia J, Guerriero A. Одновременное количественное определение восьми тритерпеноидных моноэфиров в цветках 10 разновидностей Calendula officinalis L.и характеристика нового моноэфира тритерпеноида. Фитохим Анал. 2004; 15: 30–35. DOI: 10.1002 / pca.739. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Джулиано Дж., Тавацца Р., Директто Дж., Бейер П., Тейлор М.А. Метаболическая инженерия биосинтеза каротиноидов в растениях. Trends Biotechnol. 2008. 26: 139–145. DOI: 10.1016 / j.tibtech.2007.12.003. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Кишимото С., Маока Т., Сумитомо К., Омия А. Анализ каротиноидного состава лепестков календулы ( Calendula officinalis L.) Biosci Biotechnol Biochem. 2005; 69: 2122–8. DOI: 10.1271 / bbb.69.2122. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Preethi KC, Kuttan R. Ранозаживляющая активность цветочного экстракта Calendula officinalis . J Basic Clin Physiol Pharmacol. 2009; 20: 73–9. [PubMed] [Google Scholar]
  • Preethi KC, Kuttan G, Kuttan R. Антиоксидантный потенциал Календула лекарственная Цветки in vitro и in vivo . Pharmaceutical Biol. 2006. 44: 691–697. DOI: 10.1080/13880200601009149. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Guinot P, Gargadennec A, Valette G, Fruchier A, Andary C. Первичные флавоноиды в красителе календулы: экстракция, структура и участие в процессе окрашивания. Фитохим Анал. 2008; 19: 46–51. DOI: 10.1002 / pca.1014. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Braga PC, Dal Sasso M, Culici M, Spallino A, Falchi M, Bertelli A, Morelli R, Lo Scalzo R. Антиоксидантная активность экстракта Calendula officinalis : ингибирующее действие на хемилюминесценция вспышек нейтрофилов человека и спектроскопия электронного парамагнитного резонанса.Фармакология. 2009; 83: 348–55. DOI: 10,1159 / 000217583. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Мецзомо Н., Мартинес Дж., Феррейра С.С. Экономическая жизнеспособность SFE из персика, миндаля, мяты и календулы. J Food Eng. 2011; 103: 473–479. DOI: 10.1016 / j.jfoodeng.2010.10.032. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Хэдфилд Р.А., Влахович Т.К., Хан Т. Использование календулы для лечения кожных заболеваний в подиатрической области. Голеностопный сустав стопы J. 2008; 1: 1–8. DOI: 10.1186 / 1757-1146-1-1. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Мулей Б.П., Хадабади С.С., Банарасе Н.Б.Фитохимические компоненты и фармакологическая активность Календула лекарственная Linn (Asteraceae) Tropical J Pharm Res. 2009. 8: 455–465. [Google Scholar]
  • Сильва Э. Дж. Р., Гонсалвес Э. С., Агиар Ф., Эвенсио Л. Б., Лира ММА, Коэльо MCOC, Фрага MCCA, Wanderley AG. Токсикологические исследования водно-спиртового экстракта Календулы лекарственной L. Фитотерапевтические исследования. 2007. 21: 332–336. DOI: 10.1002 / ptr.2009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Naguib NY, Khalil MY, El Sherbeny SE.Сравнительное исследование продуктивности и химических составляющих различных источников и видов растений календулы , подвергшихся воздействию двух листовых удобрений. J Appl Sci Res. 2005; 1: 176–189. [Google Scholar]
  • Халид К.А., Тейшейра да Силва Дж.А. Урожайность, содержание эфирного масла и пигмента в цветочных головках Calendula officinalis L., культивируемых в условиях солевого стресса. Sci Hort. 2010; 126: 297–305. DOI: 10.1016 / j.scienta.2010.07.023. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Паолини Дж., Барбони Т., Дежобер Дж. М., Джабу Н., Музелли А., Коста Дж.Химический состав, внутривидовые и сезонные колебания эфирных масел Calendula arvensis L. Biochem Syst Ecol. 2010; 38: 865–874. DOI: 10.1016 / j.bse.2010.07.009. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Fronza M, Heinzmann B, Hamburger M, Laufer S, Merfort I. Определение раневого эффекта экстракта календулы с использованием царапин с фибробластами 3T3. J Ethnopharmacol. 2009; 126: 463–467. DOI: 10.1016 / j.jep.2009.09.014. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Безбрадица Д., Милич-Ашкрабич Дж., Петрович С.Д., Шилер-Маринкович С.Исследование влияния растворителя на кинетику разложения каротиноидов в масляных экстрактах C. officinalis . J Serb Chem Soc. 2005. 70: 115–124. DOI: 10.2298 / JSC0501115B. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Лу С., Ли Л. Метаболизм каротиноидов: биосинтез, регуляция и не только. J Integrative Plant Biol. 2008. 50: 778–785. DOI: 10.1111 / j.1744-7909.2008.00708.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Fonseca YM, Catini CD, Vicentini FTMC, Nomizo A, Gerlach RF, Fonseca MJV.Защитный эффект экстракта Calendula officinalis против окислительного стресса, вызванного ультрафиолетом B, в коже: оценка снижения уровня глутатиона и секреции матриксной металлопротеиназы. J Ethnopharmacol. 2010; 127: 596–601. DOI: 10.1016 / j.jep.2009.12.019. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Ириани Р., Мальдонаде Д., Родригес-Амайя Б., Адилма Р., Скампарини П. Каротиноиды дрожжей, выделенные из экосистемы Бразилии. Food Chem. 2008; 107: 145–150. DOI: 10.1016 / j.foodchem.2007.07.075.[CrossRef] [Google Scholar]
  • Раал А., Кирсипуу К. Общее содержание флавоноидов в сортах Calendula officinalis L., происходящих из разных стран и возделываемых в Эстонии. Nat Prod Res. 2011; 25: 658–62. DOI: 10.1080 / 14786419.2010.528417. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Прити К., Чандран Р.К. Влияние экстракта цветков Calendula officinalis на белки острой фазы, механизм антиоксидантной защиты и образование гранулем во время термических ожогов.J Clin Biochem Nutr. 2008; 43: 58–64. DOI: 10.3164 / jcbn.2008043. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Фариа Р.Л., Кардосо Л.М., Акисуэ Дж., Перейра, Калифорния, Джункейра Дж. С., Хорхе А.О., Сантос Жуниор П.В. Противомикробная активность Calendula officinalis, Camellia sinensis и хлоргексидина против прикрепления микроорганизмов к швам после удаления непрорезавшихся третьих моляров. J Appl Oral Sci. 2011; 19: 476–82. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Butnariu M, Palicica RD.Buletinul Oficial de Proprietate Industriala, Патентные заявки. Vol. 3. ОСИМ, РО122836-Б1; 2010. Аптечная мазь на основе цветков календулы, выращенных на обогащенных цинком почвах, и способ ее приготовления; С. 1–18. [Google Scholar]
  • Preethi KC, Siveen KS, Kuttan R, Kuttan G. Ингибирование метастазирования клеток меланомы B16F-10 у мышей C57BL / 6 с помощью экстракта цветков Calendula officinalis L. Азиатский Pac J Cancer Prev. 2010; 11: 1773–9. [PubMed] [Google Scholar]
  • Луо Дж., Чжан Л., Ван М., Хе С., Ян Ю.Определение кверцетина и кемпферола в растениях Dysosma методом RP-HPLC. Чжунго Чжун Яо За Чжи. 2010; 35: 3021–3023. [PubMed] [Google Scholar]
  • Danielski L, Campos LMAS, Bresciani LFV, Hense H, Yunes RA, Ferreira SRS. Олеорезин календулы лекарственной ( Calendula officinalis L.): растворимость в SC-CO 2 и профиль состава. Chem Eng Proc. 2007. 46: 99–106. DOI: 10.1016 / j.cep.2006.05.004. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Раал А., Кирсипуу К., Муст Р., Тенно С. Содержание общих каротиноидов в Calendula officinalis L.из разных стран, выращиваемых в Эстонии. Nat Prod Commun. 2009; 4: 35–8. [PubMed] [Google Scholar]
  • Газим З., Резенде С., Фрага С., Диас Филхо Б., Накамура С., Кортез Д. Анализ эфирных масел календулы лекарственной , выращиваемой в Бразилии, с использованием трех различных процедур экстракции. Brazil J Pharm Sci. 2008. 44: 391–395. [Google Scholar]
  • Сильва Э. Дж., Коста-Сильва Дж. Х., Эвенсио Л. Б., Фрага Мдо С., Коэльо М. С., Wanderley AG. Репродуктивная оценка водно-спиртового экстракта календулы лекарственной календулы лекарственной L.у крыс линии Вистар. Phytother Res. 2009; 23: 1392–8. DOI: 10.1002 / ptr.2785. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Лич MJ. C. officinalis и заживление ран: систематический обзор. Раны. 2008. 20: 236–243. [PubMed] [Google Scholar]
  • Око О.О., Садименко А.А., Афолаян А.Дж. Влияние возраста на урожайность и состав эфирных масел Calendula officinalis . J Appl Sci. 2007. 7: 3806–3810. [Google Scholar]
  • Лю Цзинь, Ян Х, Ван К., Куанг Т., Чжан Дж., Гуй Л., Ань Х, Чанг В.Кристаллическая структура основного светособирающего комплекса шпината при разрешении 2,72 Å. Природа. 2004. 428: 287–292. DOI: 10,1038 / природа02373. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Гуськов А., Керн Дж., Габдулхаков А., Брозер М., Зуни А., Сенгер В. Фотосистема II цианобактерий с разрешением 2,9 Å и роль хинонов, липидов, каналов и хлорида. Nat Struct Mol Biol. 2009. 16: 334–342. DOI: 10.1038 / nsmb.1559. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Баллоттария М., Жирардона Дж., Далл’Остоа Л., Басси Р.Эволюция и функциональные свойства светособирающих комплексов Photosystem II у эукариот. Biochim Biophys Acta Bioenerg. 2012; 1817: 143–157. DOI: 10.1016 / j.bbabio.2011.06.005. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Европейская фармакопея. PHARMEUROPA. 2011; 23 http: //www.edqm. eu / en / News-and-General-Information-43.html Дата обращения 2015/10/15. [Google Scholar]
  • Granger KL, Gallagher RS, Fuerst EP, Alldredge JR. Сравнение методов фенольной экстракции семян и методов анализа. Методы Ecol Evol.2011; 2: 691–698. DOI: 10.1111 / j.2041-210X.2011.00120.x. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Тутин Т.Г., Хейвуд В.Х., Берджес Н.А., Валентайн Д.Х., Уолтерс С.М., Уэбб Д.А., редактор. Набор в мягкой обложке. Vol. 5. 2010. Флора европейская; п. 135. [Google Scholar]
  • Ph. Eur. Справочные стандарты. http://www.edqm.eu/en/Ph-Eur-Reference-Standards-627.html Источник 2011/10/16.
  • ВОЗ. Международные химические эталонные вещества. (ICRS) 2010. http://www.edqm.eu/en/WHO-International-Chemical-Reference-Substances-ICRS-1393.html Проверено 18 октября 2011 г.
  • ISO-14502-1: 2005; и AOAC 941.15.AOAC, 2003

Оценка биологически активных соединений цветков календулы лекарственной с использованием спектрофотометрии

Chem Cent J. 2012; 6: 35.

# 1 и 2

Моника Бутнариу

1 Кафедра химии и биохимии, Банатский университет сельскохозяйственных наук и ветеринарной медицины, Тимишоара, Калеа Арадулуи, no.119, Тимишоара, 300645 Румыния

Кристина Жепа Корадини

2 Кафедра фитотехники, Банатский университет Банатский университет сельскохозяйственных наук и ветеринарной медицины, Тимишоара, Калеа Арадулуи, no. 119, Тимишоара, 300645 Румыния

1 Кафедра химии и биохимии, Банатский университет сельскохозяйственных наук и ветеринарной медицины, Тимишоара, Калеа Арадулуи, no. 119, Тимишоара, 300645 Румыния

2 Кафедра фитотехники, Банатский университет Банатский университет сельскохозяйственных наук и ветеринарной медицины, Тимишоара, Calea Aradului, no.119, Тимишоара, 300645 Румыния

Автор, ответственный за переписку.

# Распространяется поровну.

Поступило 01.04.2012 г .; Принято 27 апреля 2012 г.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.
Дополнительные материалы

Дополнительный файл 1 Таблица 1– Относительные уровни соединений из экстрактов C. officinalis , обладающих антиоксидантным потенциалом .

GUID: D746C5B3-F4DF-48BF-8FF5-562FD1FE1F75

Дополнительный файл 2 Таблица 2 — Спектрофотометрически определенные каротиноиды C.лекарственный цветок в разных растворителях .

GUID: 60E199FB-91E7-4511-A51D-E1289B3E9C18

Аннотация

Предпосылки

Это исследование было направлено на количественное определение активных биологических соединений в цветках C. officinalis . Основываясь на действующих веществах и биологических свойствах цветков бархатцев, описанных в литературе, мы стремились получить и охарактеризовать молекулярный состав экстрактов, приготовленных с использованием различных растворителей.Антиоксидантную способность экстрактов оценивали с помощью спектрофотометрии для измерения как оптической плотности колориметрического акцептора свободных радикалов 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила (DPPH), так и общего антиоксидантного потенциала с использованием анализа восстанавливающей способности железа (FRAP).

Результаты

Спектрофотометрические анализы в ультрафиолетовой и видимой (UV-VIS) области позволили идентифицировать и охарактеризовать весь спектр фенольных и флавоноидных кислот, а высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) использовалась для идентификации и количественного определения фенольных соединений ( в зависимости от метода добычи).Метанол обеспечивает более эффективное извлечение флавоноидов, чем другие испытанные растворители.

Антиоксидантная активность метанольных экстрактов коррелировала с содержанием полифенолов.

Выводы

УФ-видимые спектры пигментов-ассимиляторов (например, хлорофиллов), полифенолов и флавоноидов, экстрагированных из цветков C. officinalis , заключались в количественной оценке соединений, которые поглощают волны с длиной волны более 360 нм.

Общие сведения

Благодаря особому составу и экономической ценности выращивание бархатцев ( C.officinalis ) продолжает расти [1], а Европейский Союз спонсировал несколько программ по изучению и эксплуатации этого вида [2-4]. Лечебные свойства бархатцев объясняются разнообразием содержащихся в них биологически активных веществ [5]. Благодаря своим противовоспалительным, заживляющим и антисептическим свойствам экстракты C. officinalis применяются наружно для лечения различных кожных язв, экземы и конъюнктивита, а также внутрь для облегчения боли, возникающей при язве желудка и воспалении.Бархатцы известны своими спазмолитическими, расслабляющими, желчегонными, потогонными и ранимыми свойствами [6]. И фенольные соединения (флавоноиды и фенольные кислоты), и сапонины в большом количестве присутствуют в ноготках [7].

C. officinalis также содержит каротиноиды и тритерпеновые спирты как в свободном, так и в этерифицированном виде [8,9]. Каротиноидные пигменты, производные C. officinalis [10] и полиненасыщенные жирные кислоты, такие как календовая кислота [5], обладают воспалительными свойствами in vivo, и ингибирующими свойствами in vitro, [11].

Бархатцы также характеризуются присутствием некоторых важных поликарбогидратов [12], которые растворимы в воде и играют роль в спаивании тканей и контроле клеточной проницаемости [13-15]. Другими веществами, идентифицированными в экстрактах C. officinalis , являются белки и аминокислоты [16], насыщенные углеводороды [17], витамин C [18] и минеральные вещества [19]. Благодаря своему сильному аромату [20] эфирные масла могут привлекать насекомых, тем самым косвенно способствуя опылению [21-23].

Некоторые летучие вещества [24] представляют собой конечные продукты анаэробного биоразложения углеводов [25] и накапливаются до уровней, сопоставимых с уровнями, синтезируемыми в клетках [26].

Помимо их роли в качестве антиоксидантов [27], полифенолы (особенно флавоноиды) обладают антимикробными свойствами [28,29].

В наших предыдущих исследованиях использовалась хроматография, чтобы продемонстрировать, что календула является хорошим источником природных антиоксидантов, в частности полифенольных веществ.

Полифенолы обычно характеризуются своим специфическим хроматографическим поведением и характерными спектрами UV-VIS.

Целью данного исследования было использование спектрофотометрии для оценки содержания фенольных и флавоноидных соединений, а также активности по улавливанию радикалов в экстрактах из различных образцов календулы. Основные фенольные соединения C. officinalis , протестированные в этом исследовании, были систематически идентифицированы путем сравнения профилей ВЭЖХ образцов с профилями подлинных фенольных стандартов и опубликованными данными (информация в патентах RO122836 B1) [30]. Мы использовали ВЭЖХ для одновременного разделения, обнаружения и количественного определения фенольных соединений, хлорофиллов и каротиноидов за один проход.Наличие метода получения биоактивного профиля различных матриц растительности должно помочь удовлетворить растущие потребности в информации о биологических соединениях и их свойствах не только о цветках календулы, но и о других естественных источниках пищи.

Результаты

Спектрофотометрические анализы

Настоящее исследование описывает метод Folin-Ciocalteu (FC) для быстрого анализа и количественной оценки. Быстрый метод был проверен с точки зрения повторяемости, воспроизводимости, линейности, точности, затем был проведен оптимизированный аналитический метод для количественного определения фенольных соединений.Спектрофотометрические анализы для определения общего содержания флавоноидов и полифенолов в растительных экстрактах были адаптированы для использования со спектрофотометром UV-VIS (PG Instruments) и soft UV WIN 5.05 для измерения оптической плотности контрольных растворов (QE и GA) и оптической плотности образцов. из экстрактов растений [31]. Спектрофотометрические анализы для расчета концентраций кверцетина (QE) основывались на измерениях оптической плотности при 420 нм. Спектрофотометрическое определение содержания галловой кислоты (GA) рассчитывали при 765 нм.Линейность метода проверялась методом наименьших квадратов, который применялся в диапазоне концентраций 2-32 мкг / мл для QE и 1-10 мкг / мл для GA, с коэффициентом корреляции R 2 > 0,99. Для проверки результатов повторяющиеся калибровочные кривые сравнивали с эталонными веществами в течение трех дней подряд. Наблюдалась небольшая разница между калибровочными кривыми, построенными для QE, тогда как кривые для GA были почти идентичны. Все коэффициенты детерминации уравнений калибровочных прямых (R 2 ) были больше 0.99. Точность метода рассчитывалась путем сравнения определенного количества вещества с количеством вещества, рассчитанным на основе статистического анализа с помощью программы ORIGIN 7 (версии Standard / Professional). Для всех контрольных образцов различия между экспериментальными образцами и стандартами никогда не были статистически значимыми ( P <0,05). Точность (процентное отклонение определенной концентрации по отношению к рассчитанной концентрации) и прецизионность (стандартное отклонение / коэффициент вариации) методов всегда находились в пределах допустимых диапазонов (± 15% от среднего).

Чувствительность метода рассчитывалась с использованием 2 мкг / мл QE и 1 мкг / мл GA. В обоих случаях, когда точность и прецизионность, указанные в допустимых пределах, в таких определениях суммируются до предела количественного определения (± 20%).

Фитохимические вещества и, в частности, соединения фенольных кислот и флавоноидов, присутствующие в цветках C. officinalis , могут частично отвечать за эти преимущества для здоровья благодаря своей антиоксидантной активности. В настоящем исследовании основные цели заключаются в выделении общего количества флавоноидов и полифенольных соединений с помощью спектрофотометрических анализов в ультрафиолетовом и видимом диапазонах.Чтобы быстро различать различные образцы, флавоноиды экстрагировали из цветов путем погружения (без разрушения ткани) в растворители (метод ВЭЖХ, мы исследуем патент RO122836-B1).

Высокоэффективная жидкостная хроматография

В соответствии с международными стандартами Ассоциации по улучшению органических культур (OCIA), Международной федерации движений за органическое сельское хозяйство (IFOAM) и Национальной программы органического сельского хозяйства США, использование экологически чистых материалов Для получения таких натуральных ингредиентов необходимы дружественные процедуры экстракции, такие как мацерация.

Мы использовали объективный анализ ВЭЖХ в сочетании со спектрофотометрическими методами для исчерпывающей характеристики полифенолов, включая соединения с антиоксидантным потенциалом, такие как флаванолы, фенольные кислоты и каротиноиды, из экстракта цветков C. officinalis . Наиболее распространенные фенольные соединения были количественно определены с помощью ВЭЖХ по сравнению с внешними стандартами известных фенольных соединений.

Общее содержание полифенолов, флавоноидов и оценка антиоксидантной активности с использованием DPPH и FRAP

Концентрации полифенолов в экспериментальных образцах варьировались в зависимости от типа растительного материала и растворителя, используемого для экстракции.Значения, определенные с использованием метода DPPH (дополнительный файл 1 и рисунок), показали, что антиоксидантная активность была значительно выше у сорта P 2 , чем у сорта P 1 . Это можно объяснить большей ферментативной активностью в первом. Измерения проводились в диапазоне длин волн от 440 до 750 нм. Все сканы, полученные с использованием экспериментальных образцов, сравнивали со сканированными изображениями, полученными с использованием чистых растворителей. Измерения проводили через 30 минут после добавления DPPH, чтобы обеспечить достаточно времени для реакции антиоксидантов с DPPH.Как показано в дополнительном файле 1, изменения оптической плотности на этой длине волны показывают, находятся ли радикалы DPPH в окисленном или восстановленном состоянии. Таким образом, эта длина волны обеспечивает прямой анализ и интерпретацию измеренного уменьшения поглощения. Гидрофильную антиоксидантную активность оценивали с использованием методов FRAP и DPPH. Антиоксидантная активность была выше в образцах из сорта P 2 , чем в образцах из сорта P 1 , возможно, из-за более высоких уровней биосинтеза в первом случае, чем во втором.Использование методов FRAP привело к одинаково малым значениям для всех трех типов экстрактов. Огромное распространение материалов и биологических жидкостей, содержащих биологически активную молекулу, не способствовало принятию общего метода, доступного для экстракции, который можно было бы применять в общих чертах и ​​принимать как стандартизированную технику. Широкий спектр используемых аналитов и растворителей не позволил нам использовать стандартную процедуру экстракции на протяжении всего исследования. Экстракция каротиноидов с использованием униполярных органических растворителей [32], этилового эфира или хлороформа включала мацерацию растительной ткани с последующим механическим встряхиванием и переносом экстрактов в кипящую водяную баню.Для полной экстракции требовалось значительное растирание; потому что униполярный растворитель не проникает через клеточную мембрану для растворения каротиноидов.

Содержание соединений с антиоксидантным потенциалом из экстрактов C. officinalis .

Поскольку свежий материал имеет высокие уровни, его необходимо сначала высушить перед экстракцией смешивающимися растворителями, такими как ацетон, метанол и этанол [33,34]. Тогда растительный материал может быть достаточно безводным, чтобы можно было проводить экстракцию с использованием неводных растворителей.

Целью этой экспериментальной части было количественное определение антиоксидантной активности с помощью спектрофотометрии (дополнительный файл 1). Мы разработали простой и эффективный метод извлечения. Он должен был идентифицировать флавоноиды в его экстрактах, определить количество и сделать прогноз его антиоксидантной способности спектрофотометрическим методом DPPH. Модель улавливания стабильного радикала DPPH является широко используемым методом для оценки способности различных образцов улавливать свободные радикалы.

Анализ пигментов

Органические экстракты содержали каротиноиды, а также некоторые отходы, такие как хлорофилл [35,36]. Анализ результатов Дополнительного файла 2 показывает различия в содержании пигментов-ассимиляторов в проанализированных образцах. Более высокие количества хлорофилла b (рисунок и рисунок) предполагают способность тканей цветка улавливать световое излучение, чтобы повысить способность растений преобразовывать световую энергию в потенциальную химическую энергию.Образцы, которые производят большее количество углеводов, берутся из тканей, которые обеспечивают вещества, необходимые для развития [37].

Спектр поглощения 80% метанольных экстрактов цветов C. officinalis .

Спектры поглощения цветков C. officinalis в метаноле 80%, этаноле 96%, изопропаноле 99% и этаноле 60% .

Как сообщалось ранее [38], квантасома (комплекс между фотосинтетическими пигментами и белково-фосфорными мембранами граны) [39] включает 230 молекул хлорофилла (Chl) (160 молекул Chl a и 70 молекул Chl b ) и приблизительно 50 молекул каротиноидов.Молекулы хлорофилла a действуют как реакционные (улавливающие) центры (P 700 в фотосистеме (PS) I и P 680 в PS II). Теоретически соотношение Chl a : Chl b может варьироваться от 1: 2 до 1: 3. Из наших данных для сорта Petran (P 1 ), единственного образца, для которого соотношение между типами хлорофилла a / b хлорофилла в соотношении 1: 2 — метанольный экстракт (образец 1). Соотношение в трех других экстрактах составляло 1: 3.Для экстрактов метанола и этанола сорта Plamen (P 2 ) мы обнаружили соотношение Chl a : Chl b , равное 1: 4. Вариации относительного содержания хлорофиллов a и b могут быть связаны с нарушениями на уровне ФС II [40]. Сканирование длин волн всех экстрактов C. officinalis показано на рисунке. Специфические паттерны поглощения позволили нам идентифицировать определенные группы молекул и домены. Одна из наиболее важных функций каротиноидов — фотозащита фотосинтетического аппарата путем тушения триплетного хлорофилла, синглетного кислорода и других активных форм.

Каротиноиды являются структурными компонентами светособирающего хлорофилла a / b белковых комплексов PSII (LHCII) и PS I. Они участвуют как в стабилизации тримеров LHCII, так и в сборке мономеров LHCII [41]. Чтобы быть полезным в качестве меры клеточного антиоксидантного потенциала, поглощение на выбранной длине волны должно в основном зависеть от радикала DPPH, а не от помех, вызываемых антиоксидантами, такими как каротиноиды и полиненасыщенные жирные кислоты.Учитывая, что сигналы с длинами волн ниже 530 нм сильно зависят от каротиноидов, это может привести к неправильной интерпретации измеренного уменьшения поглощения при выборе длины волны, на которую влияют как радикал DPPH, так и абсорбционные свойства экстракта, как это происходит для экстрактов, содержащих каротиноиды. В значительной степени этот вид помех может быть устранен путем измерения оптической плотности эталонного образца, содержащего тот же экстракт, что и образец, содержащий DPPH.

Наши усилия по количественному определению общего содержания каротиноидов в экстрактах показывают важность растворителя, выбранного для экстракции образцов.Метанол извлекает каротиноидные пигменты более эффективно, чем любой из других протестированных растворителей.

Обсуждение

Мы использовали два спектрофотометрических метода, которые включают захват свободных радикалов в растворе с помощью DPPH и оценку общего антиоксидантного потенциала (FRAP), чтобы предоставить дополнительные источники доказательств различных антиоксидантных потенциалов экстрактов из C. лекарственный цветков. Сопоставляя состав фенольных соединений с антиоксидантным действием в тканях цветов, мы обнаружили, что экстракты из C.officinalis сорт Пламен (P 2 ) обладал более высоким антиоксидантным потенциалом, чем экстракты из сорта Petran (P 1 ). Связь между антиоксидантной активностью и содержанием флавоноидов не была линейной, что позволяет предположить, что антиоксидантная активность зависит от общего содержания полифенолов. Летучие органические биосоединения напрямую поддаются анализу с помощью газовой хроматографии, метода непревзойденной разделительной способности.

Флавоноиды считаются предпочтительными биосоединениями в качестве хемотаксономических маркеров растений, поскольку они демонстрируют большое структурное разнообразие и химически стабильны.

В разработанной в данной работе методологии идентификации и количественного определения основных фенольных соединений по образцам использовались более доступные методы FC для определения полифенолов.

Метод, основанный на классических нормах и стандартных рабочих процедурах, разработанных в отделе биохимии, дал каждому критерию валидации значение, соответствующее ограничениям ранее упомянутых норм.

Выводы

Антиоксидантные компоненты в экстрактах идентифицировали с помощью комбинированных методов ВЭЖХ и спектрофотометрического анализа.С помощью спектрофотометрического анализа экстрактов в УФ-видимом диапазоне мы идентифицировали определенные фенольные кислоты и флавоноиды.

Метанол позволяет более эффективно извлекать флавоноиды, чем другие исследованные растворители. Наибольшая антиоксидантная активность, связанная с содержанием полифенолов, была получена для экстрактов, приготовленных с использованием метанола. Биохимический анализ определил содержание пигментов-ассимиляторов, а также флавоноидов, которые были выражены как эквиваленты QE. После получения спектрофотометрической дозировки флавоноидов, выраженной в QE, значения включали следующие: 96.17 / 34,8 QEmg / 100 мл.

Согласно Европейской фармакопее минимальным условием качества было 0,4% общих флавоноидов, выраженных в QE. Качество сырья для бархатцев C. officinalis ( Flores Calendulae ) было обусловлено основным содержанием флавонов и полифенолов, которые накапливались в период цветения.

Методы

Образцы растений

Растения были собраны с поля на учебной базе USAMVB Timisoara.Два типа образцов растений, сорт Petran (P 1 ) и Plamen (P 2 ), были собраны и помечены на месте с использованием стандартных методов (сорта выращивались в одинаковых условиях).

Образцы растений, которые были сохранены в качестве гербарных образцов, были идентифицированы с использованием стандартного эталона для этой цели [42], по сравнению с образцами из Департамента растительных ресурсов и идентифицированы с помощью таксономистов из Департамента фитотехники растений в USAMVB Тимишоара.

Экстракция активных биологических соединений

Для экстракции использовались четыре растворителя: метанол (80%), этанол (96%), изопропанол (100%) и этанол (60%). Общий процесс мацерации в небольшом масштабе включал помещение измельченного соответствующим образом растительного материала или умеренно крупного порошка, изготовленного из него, в закрытый сосуд и добавление выбранного растворителя, чтобы дать ему достаточно времени для проникновения через клеточную стенку для растворения компонентов внутри клетки и для того, чтобы полученный раствор проник через клеточную стенку наружу.Поскольку система статична, за исключением случайного встряхивания, процесс экстракции происходит за счет молекулярной диффузии, которая очень медленная. Закрытый сосуд используется для предотвращения испарения растворителя во время периода экстракции и, таким образом, позволяет избежать вариаций от партии к партии.

В конце процесса мацерации, когда будет достигнуто равновесие, раствор фильтруют, пропуская через специальный пресс.

Концентрации активных компонентов в процеженных и сцеженных жидкостях, иногда называемых мисцеллой, идентичны, поэтому их можно комбинировать.Учитывая, что отжатая жидкость может быть мутной с коллоидными и мелкими частицами, часто требуется определенное время для коагуляции и осаждения твердых частиц.

Осевший материал фильтруют с помощью фильтр-пресса или любого другого подходящего устройства.

Метод экстракции мацерацией — самый простой неизбирательный метод. C. officinalis. цветы выдерживали в холодной среде в контакте с растворителем при комнатной температуре (17-22 ° C) в течение 14 часов, периодически перемешивая перед отделением экстракта.Дополнительный раунд (ы) мацерации повысил эффективность процесса. Экстрагированный продукт сначала смешивали с 1 / 2-2 / 3 от общего количества растворителя, после чего жидкость отделяли и высвобождали остаток.

Он вступает в контакт с остальной частью растворителя, в результате чего добывается одна девятая часть раствора. Две жидкости экстрагируют и фильтруют вместе еще через 24 часа.

Из-за относительно пониженной термостойкости природных ароматических соединений процесс проводили в присутствии антиоксиданта аскорбиновой кислоты (0.5% мас. / Об.) [43]. Скорость экстракции (1:10 г порошка цветков / мл растворителя).

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)

Полифенолсодержащие экстракты цветков C. officinalis разделяли на колонке C 18 (150 мм × 4,6 мм, 3 мкм) с подвижной фазой, состоящей из трех различных растворителей, используя аппарат Agilent 1100 HPLC. Скорость потока составляла 0,7 мл / мин, а объем впрыска составлял 20 мкл. Для первой системы разделения (тройной растворитель), которая использовалась для разделения флаванолов и фенольных кислот, исходная подвижная фаза состояла из 2% уксусной кислоты в воде / метаноле.Для разделения флавонолов во второй системе (бинарный растворитель: 0,25 мМ фосфатный буфер, pH = 2,5 / ацетонитрил) полифенольные соединения разделяли с использованием третьей системы (бинарный растворитель: 0,1% муравьиная кислота в воде / метаноле). Температуру колонки устанавливали на уровне 20 ° C.

Фенольные соединения обнаружены при 260 нм. Разделенные соединения идентифицировали путем сравнения их времени удерживания (Rt) и УФ-спектров со спектрами аутентичных стандартов. Соединения были определены количественно с использованием стандартной калибровочной кривой.

Общее содержание фенолов и флавоноидов было определено как сумма связанных идентифицированных фенольных соединений. Соединения были идентифицированы путем сравнения со стандартами каждого идентифицированного соединения с использованием Rt, профиля спектра поглощения, а также путем анализа образцов после добавления чистых стандартов [35].

Общее содержание полифенолов

Общее содержание полифенолов было рассчитано с использованием реагента FC и Na 2 CO 3 10%; Впоследствии максимальное поглощение оценивали по полученной окраске относительно калибровочной кривой.Общее содержание фенольных соединений оценивали с помощью колориметрии, основанной на химическом восстановлении смеси оксидов вольфрама и молибдена с образованием синего продукта, который сильно поглощает при 760 нм.

Образование голубых соединений, полученных из FC-реакционноспособных фенолов, не зависело от структур фенольных соединений, что позволило количественно оценить полный набор фенольных соединений из растительных экстрактов. Примерно 10 г измельченного растительного материала экстрагировали 100 мл растворителя.Общую концентрацию фенольных соединений в экстракте рассчитывали путем сравнения с кривой, построенной аналогичным образом на основе измерения, выполненного с использованием известных концентраций GA в диапазоне 0-00 мкг GA / 100 мл. Общее содержание фенолов в образцах выражали в эквивалентах GA (мг) на грамм высушенного растительного материала.

Уровни полифенолов выражали в эквивалентах мг / г GA по отношению к конечной концентрации 20 мкг / мл.

Общее содержание флавоноидов

Суммарный уровень всех флавоноидов рассчитывали реакцией с 3% -ным (мас. / Об.) Раствором AlCl 3 (безводная соль), приготовленным в этаноле.

Концентрации коррелировали со значениями абсорбции с помощью калибровочной кривой, построенной с использованием известных концентраций QE. Общее содержание флавоноидов, выраженное в мг / г (эквиваленты QE), было связано с конечной концентрацией на 20 мкг / мл.

Оценка антиоксидантной активности с использованием DPPH

Примерно 10 г измельченного растительного материала экстрагировали в 100 мл 80% -ного водного раствора этанола (или других растворителей) при комнатной температуре в течение 1 часа.

Экстракты фильтровали, и фильтры оставляли испаряться в сухой среде.

Процентную активность по улавливанию свободных радикалов определяли по формуле (1), где Ai было поглощением до добавления тестируемого экстракта, а Af было значением поглощения после 5-минутного времени реакции:

100 ⋅ (Ai — Af) / Ai

(1)

Эффект нейтрализации свободного радикала DPPH◦ был рассчитан при трех различных концентрациях метанольных и этанольных экстрактов: порции 0,05 мл экстрактов 10, 5 и 2,5 мг / мл смешивались с 2,95 мл раствора. DPPH◦ в кювете, используемой для спектрофотометрии.

По прошествии 5 минут реакции абсорбция при 420 нм сравнивалась с поглощением метанола. QE использовали в качестве положительного контроля. При концентрации 2,5 мМ QE был способен полностью нейтрализовать (уровень использованного радикала DPPH◦).

Анализ ферроредуцирующей антиоксидантной силы (FRAP)

Мы использовали простой спектрофотометрический метод для оценки антиоксидантной способности растительных экстрактов. Это включало восстановление трипиридилтриазина трехвалентного железа [Fe (III) -TPTZ] до окрашенного трипиридилтриазина двухвалентного железа [Fe (II) -TPTZ] при низком pH.

Цветной продукт сильно поглощает при длине волны 593 нм.

Анализ пигментов

Все образцы экстрагировали ацетоном. Пигменты экстрагировали из цветка C. officinalis с использованием 80% ацетона. Мы использовали удельные коэффициенты поглощения хлорофиллов a и b и каротиноидов ( Car ) для оценки их уровней с помощью спектрофотометрии. Все хлорофиллы содержали две основные полосы поглощения излучения: одну на синей стороне или около УФ части электромагнитного спектра, а другую — на красной стороне или около ИК области электромагнитного спектра.Отсутствие значительного поглощения в зеленой части спектра придает хлорофиллам характерный зеленый или сине-зеленоватый цвет.

Этот метод определяет количество (мг) в 100 мл экстракта каротиноидов. Составы пигментов, рассчитанные в соответствии с уравнениями 2, 3 и 4:

Chl a (мкг / г сухого вещества) = (15 . 65A 666 -7 . 34A 653 )

(2 )

Chl b (мкг / г сухого вещества) = (27 . 05A 653 — 11 .

Реагенты и другие материалы

QE и GA были получены от Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури, США), тогда как все остальные реагенты были получены от Merck. Все химические вещества и реагенты были аналитической чистоты.

Статистический анализ

Все результаты спектрофотометрических определений флавонов и полифенолов были воспроизведены после установления доверительного интервала, рассчитанного как минимум для пяти определений.Статистические различия между средними значениями определяли с помощью двустороннего парного t-критерия Стьюдента.

Сокращения

DPPH: 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил; FRAP: восстановительная способность железа; UV-VIS: в ультрафиолете-видимом диапазоне; ВЭЖХ: высокоэффективная жидкостная хроматография; QE: кверцетин; GA: галловая кислота; ФК: Фолин-Чокальтеу; [Fe (III) -TPTZ]: трипиридилтриазин трехвалентного железа; [Fe (II) -TPTZ]: трипиридилтриазин двухвалентного железа; Автомобиль: каротиноиды; Chl a / Chl b : хлорофиллы a и b .

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Вклад авторов

МБ задумал исследование, участвовал в разработке и координации экспериментов и интерпретации данных, а также помог разработать рукопись. CZC произвел образцы, провел анализ данных и их интерпретацию. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

Дополнительный материал

Дополнительный файл 1:

Таблица 1– Относительные уровни соединений от C.лекарственный , обладающий антиоксидантным потенциалом .

Дополнительный файл 2:

Таблица 2 — Спектрофотометрически определенные каротиноиды цветка C. officinalis в различных растворителях .

Выражение признательности

Этот документ был опубликован в рамках проекта « Постдокторская школа сельского хозяйства и ветеринарной медицины », POSDRU / 89 / 1.5 / S / 62371, софинансируемого Европейским социальным фондом через Отраслевую оперативную программу для человека. Развитие ресурсов 2007-2013 гг.

Ссылки

  • Basch E, Bent S, Foppa I, Haskmi S, Kroll D, Mele M, Szapary P, Ulbricht C, Vora M, Yong S. Marigold ( Calendula officinalis L.): подтверждено доказательствами систематический обзор Natural Standard Research Collaboration. J Herb Pharmacother. 2006; 6: 135–59. DOI: 10.1080 / J157v06n03_08. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Календула лекарственная -L. (HTML) Plants For A Future (PFAF) http://www.pfaf.org/user/Plant.aspx?LatinName=Calendula+officinalis Получено 2011/11/04.
  • Интерактивная флора Северо-Западной Европы. Календула лекарственная. Проверено 12 августа 2011.
  • Национальные институты здравоохранения. «Календула» (HTML). Травы и пищевые добавки. Национальная медицинская библиотека США; Проверено 19 октября 2011. [Google Scholar]
  • Muley BP, Khadabadi SS, Banarase NB. Фитохимические компоненты и фармакологическая активность Календула лекарственная Linn (Asteraceae) Trop J Pharm Res. 2009. 8: 455–465. [Google Scholar]
  • Танака Т., Мацуо И., Куно И.Обзор: химия вторичных полифенолов, образующихся при переработке чая и отдельных пищевых продуктов. Int J Mol Sci. 2010; 11: 14–4. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Chakraborthy GS. Фитохимический скрининг экстракта листьев Calendula Officinalis Linn методом ТСХ. Int J Res Ayurveda Pharma. 2010; 1: 131–134. [Google Scholar]
  • Neukiron H, D’Ambrosio M, Dovia J, Guerriero A. Одновременное количественное определение восьми тритерпеноидных моноэфиров в цветках 10 разновидностей Calendula officinalis L.и характеристика нового моноэфира тритерпеноида. Фитохим Анал. 2004; 15: 30–35. DOI: 10.1002 / pca.739. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Джулиано Дж., Тавацца Р., Директто Дж., Бейер П., Тейлор М.А. Метаболическая инженерия биосинтеза каротиноидов в растениях. Trends Biotechnol. 2008. 26: 139–145. DOI: 10.1016 / j.tibtech.2007.12.003. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Кишимото С., Маока Т., Сумитомо К., Омия А. Анализ каротиноидного состава лепестков календулы ( Calendula officinalis L.) Biosci Biotechnol Biochem. 2005; 69: 2122–8. DOI: 10.1271 / bbb.69.2122. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Preethi KC, Kuttan R. Ранозаживляющая активность цветочного экстракта Calendula officinalis . J Basic Clin Physiol Pharmacol. 2009; 20: 73–9. [PubMed] [Google Scholar]
  • Preethi KC, Kuttan G, Kuttan R. Антиоксидантный потенциал Календула лекарственная Цветки in vitro и in vivo . Pharmaceutical Biol. 2006. 44: 691–697. DOI: 10.1080/13880200601009149. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Guinot P, Gargadennec A, Valette G, Fruchier A, Andary C. Первичные флавоноиды в красителе календулы: экстракция, структура и участие в процессе окрашивания. Фитохим Анал. 2008; 19: 46–51. DOI: 10.1002 / pca.1014. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Braga PC, Dal Sasso M, Culici M, Spallino A, Falchi M, Bertelli A, Morelli R, Lo Scalzo R. Антиоксидантная активность экстракта Calendula officinalis : ингибирующее действие на хемилюминесценция вспышек нейтрофилов человека и спектроскопия электронного парамагнитного резонанса.Фармакология. 2009; 83: 348–55. DOI: 10,1159 / 000217583. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Мецзомо Н., Мартинес Дж., Феррейра С.С. Экономическая жизнеспособность SFE из персика, миндаля, мяты и календулы. J Food Eng. 2011; 103: 473–479. DOI: 10.1016 / j.jfoodeng.2010.10.032. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Хэдфилд Р.А., Влахович Т.К., Хан Т. Использование календулы для лечения кожных заболеваний в подиатрической области. Голеностопный сустав стопы J. 2008; 1: 1–8. DOI: 10.1186 / 1757-1146-1-1. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Мулей Б.П., Хадабади С.С., Банарасе Н.Б.Фитохимические компоненты и фармакологическая активность Календула лекарственная Linn (Asteraceae) Tropical J Pharm Res. 2009. 8: 455–465. [Google Scholar]
  • Сильва Э. Дж. Р., Гонсалвес Э. С., Агиар Ф., Эвенсио Л. Б., Лира ММА, Коэльо MCOC, Фрага MCCA, Wanderley AG. Токсикологические исследования водно-спиртового экстракта Календулы лекарственной L. Фитотерапевтические исследования. 2007. 21: 332–336. DOI: 10.1002 / ptr.2009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Naguib NY, Khalil MY, El Sherbeny SE.Сравнительное исследование продуктивности и химических составляющих различных источников и видов растений календулы , подвергшихся воздействию двух листовых удобрений. J Appl Sci Res. 2005; 1: 176–189. [Google Scholar]
  • Халид К.А., Тейшейра да Силва Дж.А. Урожайность, содержание эфирного масла и пигмента в цветочных головках Calendula officinalis L., культивируемых в условиях солевого стресса. Sci Hort. 2010; 126: 297–305. DOI: 10.1016 / j.scienta.2010.07.023. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Паолини Дж., Барбони Т., Дежобер Дж. М., Джабу Н., Музелли А., Коста Дж.Химический состав, внутривидовые и сезонные колебания эфирных масел Calendula arvensis L. Biochem Syst Ecol. 2010; 38: 865–874. DOI: 10.1016 / j.bse.2010.07.009. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Fronza M, Heinzmann B, Hamburger M, Laufer S, Merfort I. Определение раневого эффекта экстракта календулы с использованием царапин с фибробластами 3T3. J Ethnopharmacol. 2009; 126: 463–467. DOI: 10.1016 / j.jep.2009.09.014. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Безбрадица Д., Милич-Ашкрабич Дж., Петрович С.Д., Шилер-Маринкович С.Исследование влияния растворителя на кинетику разложения каротиноидов в масляных экстрактах C. officinalis . J Serb Chem Soc. 2005. 70: 115–124. DOI: 10.2298 / JSC0501115B. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Лу С., Ли Л. Метаболизм каротиноидов: биосинтез, регуляция и не только. J Integrative Plant Biol. 2008. 50: 778–785. DOI: 10.1111 / j.1744-7909.2008.00708.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Fonseca YM, Catini CD, Vicentini FTMC, Nomizo A, Gerlach RF, Fonseca MJV.Защитный эффект экстракта Calendula officinalis против окислительного стресса, вызванного ультрафиолетом B, в коже: оценка снижения уровня глутатиона и секреции матриксной металлопротеиназы. J Ethnopharmacol. 2010; 127: 596–601. DOI: 10.1016 / j.jep.2009.12.019. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Ириани Р., Мальдонаде Д., Родригес-Амайя Б., Адилма Р., Скампарини П. Каротиноиды дрожжей, выделенные из экосистемы Бразилии. Food Chem. 2008; 107: 145–150. DOI: 10.1016 / j.foodchem.2007.07.075.[CrossRef] [Google Scholar]
  • Раал А., Кирсипуу К. Общее содержание флавоноидов в сортах Calendula officinalis L., происходящих из разных стран и возделываемых в Эстонии. Nat Prod Res. 2011; 25: 658–62. DOI: 10.1080 / 14786419.2010.528417. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Прити К., Чандран Р.К. Влияние экстракта цветков Calendula officinalis на белки острой фазы, механизм антиоксидантной защиты и образование гранулем во время термических ожогов.J Clin Biochem Nutr. 2008; 43: 58–64. DOI: 10.3164 / jcbn.2008043. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Фариа Р.Л., Кардосо Л.М., Акисуэ Дж., Перейра, Калифорния, Джункейра Дж. С., Хорхе А.О., Сантос Жуниор П.В. Противомикробная активность Calendula officinalis, Camellia sinensis и хлоргексидина против прикрепления микроорганизмов к швам после удаления непрорезавшихся третьих моляров. J Appl Oral Sci. 2011; 19: 476–82. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Butnariu M, Palicica RD.Buletinul Oficial de Proprietate Industriala, Патентные заявки. Vol. 3. ОСИМ, РО122836-Б1; 2010. Аптечная мазь на основе цветков календулы, выращенных на обогащенных цинком почвах, и способ ее приготовления; С. 1–18. [Google Scholar]
  • Preethi KC, Siveen KS, Kuttan R, Kuttan G. Ингибирование метастазирования клеток меланомы B16F-10 у мышей C57BL / 6 с помощью экстракта цветков Calendula officinalis L. Азиатский Pac J Cancer Prev. 2010; 11: 1773–9. [PubMed] [Google Scholar]
  • Луо Дж., Чжан Л., Ван М., Хе С., Ян Ю.Определение кверцетина и кемпферола в растениях Dysosma методом RP-HPLC. Чжунго Чжун Яо За Чжи. 2010; 35: 3021–3023. [PubMed] [Google Scholar]
  • Danielski L, Campos LMAS, Bresciani LFV, Hense H, Yunes RA, Ferreira SRS. Олеорезин календулы лекарственной ( Calendula officinalis L.): растворимость в SC-CO 2 и профиль состава. Chem Eng Proc. 2007. 46: 99–106. DOI: 10.1016 / j.cep.2006.05.004. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Раал А., Кирсипуу К., Муст Р., Тенно С. Содержание общих каротиноидов в Calendula officinalis L.из разных стран, выращиваемых в Эстонии. Nat Prod Commun. 2009; 4: 35–8. [PubMed] [Google Scholar]
  • Газим З., Резенде С., Фрага С., Диас Филхо Б., Накамура С., Кортез Д. Анализ эфирных масел календулы лекарственной , выращиваемой в Бразилии, с использованием трех различных процедур экстракции. Brazil J Pharm Sci. 2008. 44: 391–395. [Google Scholar]
  • Сильва Э. Дж., Коста-Сильва Дж. Х., Эвенсио Л. Б., Фрага Мдо С., Коэльо М. С., Wanderley AG. Репродуктивная оценка водно-спиртового экстракта календулы лекарственной календулы лекарственной L.у крыс линии Вистар. Phytother Res. 2009; 23: 1392–8. DOI: 10.1002 / ptr.2785. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Лич MJ. C. officinalis и заживление ран: систематический обзор. Раны. 2008. 20: 236–243. [PubMed] [Google Scholar]
  • Око О.О., Садименко А.А., Афолаян А.Дж. Влияние возраста на урожайность и состав эфирных масел Calendula officinalis . J Appl Sci. 2007. 7: 3806–3810. [Google Scholar]
  • Лю Цзинь, Ян Х, Ван К., Куанг Т., Чжан Дж., Гуй Л., Ань Х, Чанг В.Кристаллическая структура основного светособирающего комплекса шпината при разрешении 2,72 Å. Природа. 2004. 428: 287–292. DOI: 10,1038 / природа02373. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Гуськов А., Керн Дж., Габдулхаков А., Брозер М., Зуни А., Сенгер В. Фотосистема II цианобактерий с разрешением 2,9 Å и роль хинонов, липидов, каналов и хлорида. Nat Struct Mol Biol. 2009. 16: 334–342. DOI: 10.1038 / nsmb.1559. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Баллоттария М., Жирардона Дж., Далл’Остоа Л., Басси Р.Эволюция и функциональные свойства светособирающих комплексов Photosystem II у эукариот. Biochim Biophys Acta Bioenerg. 2012; 1817: 143–157. DOI: 10.1016 / j.bbabio.2011.06.005. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Европейская фармакопея. PHARMEUROPA. 2011; 23 http: //www.edqm. eu / en / News-and-General-Information-43.html Дата обращения 2015/10/15. [Google Scholar]
  • Granger KL, Gallagher RS, Fuerst EP, Alldredge JR. Сравнение методов фенольной экстракции семян и методов анализа. Методы Ecol Evol.2011; 2: 691–698. DOI: 10.1111 / j.2041-210X.2011.00120.x. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Тутин Т.Г., Хейвуд В.Х., Берджес Н.А., Валентайн Д.Х., Уолтерс С.М., Уэбб Д.А., редактор. Набор в мягкой обложке. Vol. 5. 2010. Флора европейская; п. 135. [Google Scholar]
  • Ph. Eur. Справочные стандарты. http://www.edqm.eu/en/Ph-Eur-Reference-Standards-627.html Источник 2011/10/16.
  • ВОЗ. Международные химические эталонные вещества. (ICRS) 2010. http://www.edqm.eu/en/WHO-International-Chemical-Reference-Substances-ICRS-1393.html Проверено 18 октября 2011 г.
  • ISO-14502-1: 2005; и AOAC 941.15.AOAC, 2003

Оценка биологически активных соединений цветков календулы лекарственной с использованием спектрофотометрии

Chem Cent J. 2012; 6: 35.

# 1 и 2

Моника Бутнариу

1 Кафедра химии и биохимии, Банатский университет сельскохозяйственных наук и ветеринарной медицины, Тимишоара, Калеа Арадулуи, no.119, Тимишоара, 300645 Румыния

Кристина Жепа Корадини

2 Кафедра фитотехники, Банатский университет Банатский университет сельскохозяйственных наук и ветеринарной медицины, Тимишоара, Калеа Арадулуи, no. 119, Тимишоара, 300645 Румыния

1 Кафедра химии и биохимии, Банатский университет сельскохозяйственных наук и ветеринарной медицины, Тимишоара, Калеа Арадулуи, no. 119, Тимишоара, 300645 Румыния

2 Кафедра фитотехники, Банатский университет Банатский университет сельскохозяйственных наук и ветеринарной медицины, Тимишоара, Calea Aradului, no.119, Тимишоара, 300645 Румыния

Автор, ответственный за переписку.

# Распространяется поровну.

Поступило 01.04.2012 г .; Принято 27 апреля 2012 г.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.
Дополнительные материалы

Дополнительный файл 1 Таблица 1– Относительные уровни соединений из экстрактов C. officinalis , обладающих антиоксидантным потенциалом .

GUID: D746C5B3-F4DF-48BF-8FF5-562FD1FE1F75

Дополнительный файл 2 Таблица 2 — Спектрофотометрически определенные каротиноиды C.лекарственный цветок в разных растворителях .

GUID: 60E199FB-91E7-4511-A51D-E1289B3E9C18

Аннотация

Предпосылки

Это исследование было направлено на количественное определение активных биологических соединений в цветках C. officinalis . Основываясь на действующих веществах и биологических свойствах цветков бархатцев, описанных в литературе, мы стремились получить и охарактеризовать молекулярный состав экстрактов, приготовленных с использованием различных растворителей.Антиоксидантную способность экстрактов оценивали с помощью спектрофотометрии для измерения как оптической плотности колориметрического акцептора свободных радикалов 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила (DPPH), так и общего антиоксидантного потенциала с использованием анализа восстанавливающей способности железа (FRAP).

Результаты

Спектрофотометрические анализы в ультрафиолетовой и видимой (UV-VIS) области позволили идентифицировать и охарактеризовать весь спектр фенольных и флавоноидных кислот, а высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) использовалась для идентификации и количественного определения фенольных соединений ( в зависимости от метода добычи).Метанол обеспечивает более эффективное извлечение флавоноидов, чем другие испытанные растворители.

Антиоксидантная активность метанольных экстрактов коррелировала с содержанием полифенолов.

Выводы

УФ-видимые спектры пигментов-ассимиляторов (например, хлорофиллов), полифенолов и флавоноидов, экстрагированных из цветков C. officinalis , заключались в количественной оценке соединений, которые поглощают волны с длиной волны более 360 нм.

Общие сведения

Благодаря особому составу и экономической ценности выращивание бархатцев ( C.officinalis ) продолжает расти [1], а Европейский Союз спонсировал несколько программ по изучению и эксплуатации этого вида [2-4]. Лечебные свойства бархатцев объясняются разнообразием содержащихся в них биологически активных веществ [5]. Благодаря своим противовоспалительным, заживляющим и антисептическим свойствам экстракты C. officinalis применяются наружно для лечения различных кожных язв, экземы и конъюнктивита, а также внутрь для облегчения боли, возникающей при язве желудка и воспалении.Бархатцы известны своими спазмолитическими, расслабляющими, желчегонными, потогонными и ранимыми свойствами [6]. И фенольные соединения (флавоноиды и фенольные кислоты), и сапонины в большом количестве присутствуют в ноготках [7].

C. officinalis также содержит каротиноиды и тритерпеновые спирты как в свободном, так и в этерифицированном виде [8,9]. Каротиноидные пигменты, производные C. officinalis [10] и полиненасыщенные жирные кислоты, такие как календовая кислота [5], обладают воспалительными свойствами in vivo, и ингибирующими свойствами in vitro, [11].

Бархатцы также характеризуются присутствием некоторых важных поликарбогидратов [12], которые растворимы в воде и играют роль в спаивании тканей и контроле клеточной проницаемости [13-15]. Другими веществами, идентифицированными в экстрактах C. officinalis , являются белки и аминокислоты [16], насыщенные углеводороды [17], витамин C [18] и минеральные вещества [19]. Благодаря своему сильному аромату [20] эфирные масла могут привлекать насекомых, тем самым косвенно способствуя опылению [21-23].

Некоторые летучие вещества [24] представляют собой конечные продукты анаэробного биоразложения углеводов [25] и накапливаются до уровней, сопоставимых с уровнями, синтезируемыми в клетках [26].

Помимо их роли в качестве антиоксидантов [27], полифенолы (особенно флавоноиды) обладают антимикробными свойствами [28,29].

В наших предыдущих исследованиях использовалась хроматография, чтобы продемонстрировать, что календула является хорошим источником природных антиоксидантов, в частности полифенольных веществ.

Полифенолы обычно характеризуются своим специфическим хроматографическим поведением и характерными спектрами UV-VIS.

Целью данного исследования было использование спектрофотометрии для оценки содержания фенольных и флавоноидных соединений, а также активности по улавливанию радикалов в экстрактах из различных образцов календулы. Основные фенольные соединения C. officinalis , протестированные в этом исследовании, были систематически идентифицированы путем сравнения профилей ВЭЖХ образцов с профилями подлинных фенольных стандартов и опубликованными данными (информация в патентах RO122836 B1) [30]. Мы использовали ВЭЖХ для одновременного разделения, обнаружения и количественного определения фенольных соединений, хлорофиллов и каротиноидов за один проход.Наличие метода получения биоактивного профиля различных матриц растительности должно помочь удовлетворить растущие потребности в информации о биологических соединениях и их свойствах не только о цветках календулы, но и о других естественных источниках пищи.

Результаты

Спектрофотометрические анализы

Настоящее исследование описывает метод Folin-Ciocalteu (FC) для быстрого анализа и количественной оценки. Быстрый метод был проверен с точки зрения повторяемости, воспроизводимости, линейности, точности, затем был проведен оптимизированный аналитический метод для количественного определения фенольных соединений.Спектрофотометрические анализы для определения общего содержания флавоноидов и полифенолов в растительных экстрактах были адаптированы для использования со спектрофотометром UV-VIS (PG Instruments) и soft UV WIN 5.05 для измерения оптической плотности контрольных растворов (QE и GA) и оптической плотности образцов. из экстрактов растений [31]. Спектрофотометрические анализы для расчета концентраций кверцетина (QE) основывались на измерениях оптической плотности при 420 нм. Спектрофотометрическое определение содержания галловой кислоты (GA) рассчитывали при 765 нм.Линейность метода проверялась методом наименьших квадратов, который применялся в диапазоне концентраций 2-32 мкг / мл для QE и 1-10 мкг / мл для GA, с коэффициентом корреляции R 2 > 0,99. Для проверки результатов повторяющиеся калибровочные кривые сравнивали с эталонными веществами в течение трех дней подряд. Наблюдалась небольшая разница между калибровочными кривыми, построенными для QE, тогда как кривые для GA были почти идентичны. Все коэффициенты детерминации уравнений калибровочных прямых (R 2 ) были больше 0.99. Точность метода рассчитывалась путем сравнения определенного количества вещества с количеством вещества, рассчитанным на основе статистического анализа с помощью программы ORIGIN 7 (версии Standard / Professional). Для всех контрольных образцов различия между экспериментальными образцами и стандартами никогда не были статистически значимыми ( P <0,05). Точность (процентное отклонение определенной концентрации по отношению к рассчитанной концентрации) и прецизионность (стандартное отклонение / коэффициент вариации) методов всегда находились в пределах допустимых диапазонов (± 15% от среднего).

Чувствительность метода рассчитывалась с использованием 2 мкг / мл QE и 1 мкг / мл GA. В обоих случаях, когда точность и прецизионность, указанные в допустимых пределах, в таких определениях суммируются до предела количественного определения (± 20%).

Фитохимические вещества и, в частности, соединения фенольных кислот и флавоноидов, присутствующие в цветках C. officinalis , могут частично отвечать за эти преимущества для здоровья благодаря своей антиоксидантной активности. В настоящем исследовании основные цели заключаются в выделении общего количества флавоноидов и полифенольных соединений с помощью спектрофотометрических анализов в ультрафиолетовом и видимом диапазонах.Чтобы быстро различать различные образцы, флавоноиды экстрагировали из цветов путем погружения (без разрушения ткани) в растворители (метод ВЭЖХ, мы исследуем патент RO122836-B1).

Высокоэффективная жидкостная хроматография

В соответствии с международными стандартами Ассоциации по улучшению органических культур (OCIA), Международной федерации движений за органическое сельское хозяйство (IFOAM) и Национальной программы органического сельского хозяйства США, использование экологически чистых материалов Для получения таких натуральных ингредиентов необходимы дружественные процедуры экстракции, такие как мацерация.

Мы использовали объективный анализ ВЭЖХ в сочетании со спектрофотометрическими методами для исчерпывающей характеристики полифенолов, включая соединения с антиоксидантным потенциалом, такие как флаванолы, фенольные кислоты и каротиноиды, из экстракта цветков C. officinalis . Наиболее распространенные фенольные соединения были количественно определены с помощью ВЭЖХ по сравнению с внешними стандартами известных фенольных соединений.

Общее содержание полифенолов, флавоноидов и оценка антиоксидантной активности с использованием DPPH и FRAP

Концентрации полифенолов в экспериментальных образцах варьировались в зависимости от типа растительного материала и растворителя, используемого для экстракции.Значения, определенные с использованием метода DPPH (дополнительный файл 1 и рисунок), показали, что антиоксидантная активность была значительно выше у сорта P 2 , чем у сорта P 1 . Это можно объяснить большей ферментативной активностью в первом. Измерения проводились в диапазоне длин волн от 440 до 750 нм. Все сканы, полученные с использованием экспериментальных образцов, сравнивали со сканированными изображениями, полученными с использованием чистых растворителей. Измерения проводили через 30 минут после добавления DPPH, чтобы обеспечить достаточно времени для реакции антиоксидантов с DPPH.Как показано в дополнительном файле 1, изменения оптической плотности на этой длине волны показывают, находятся ли радикалы DPPH в окисленном или восстановленном состоянии. Таким образом, эта длина волны обеспечивает прямой анализ и интерпретацию измеренного уменьшения поглощения. Гидрофильную антиоксидантную активность оценивали с использованием методов FRAP и DPPH. Антиоксидантная активность была выше в образцах из сорта P 2 , чем в образцах из сорта P 1 , возможно, из-за более высоких уровней биосинтеза в первом случае, чем во втором.Использование методов FRAP привело к одинаково малым значениям для всех трех типов экстрактов. Огромное распространение материалов и биологических жидкостей, содержащих биологически активную молекулу, не способствовало принятию общего метода, доступного для экстракции, который можно было бы применять в общих чертах и ​​принимать как стандартизированную технику. Широкий спектр используемых аналитов и растворителей не позволил нам использовать стандартную процедуру экстракции на протяжении всего исследования. Экстракция каротиноидов с использованием униполярных органических растворителей [32], этилового эфира или хлороформа включала мацерацию растительной ткани с последующим механическим встряхиванием и переносом экстрактов в кипящую водяную баню.Для полной экстракции требовалось значительное растирание; потому что униполярный растворитель не проникает через клеточную мембрану для растворения каротиноидов.

Содержание соединений с антиоксидантным потенциалом из экстрактов C. officinalis .

Поскольку свежий материал имеет высокие уровни, его необходимо сначала высушить перед экстракцией смешивающимися растворителями, такими как ацетон, метанол и этанол [33,34]. Тогда растительный материал может быть достаточно безводным, чтобы можно было проводить экстракцию с использованием неводных растворителей.

Целью этой экспериментальной части было количественное определение антиоксидантной активности с помощью спектрофотометрии (дополнительный файл 1). Мы разработали простой и эффективный метод извлечения. Он должен был идентифицировать флавоноиды в его экстрактах, определить количество и сделать прогноз его антиоксидантной способности спектрофотометрическим методом DPPH. Модель улавливания стабильного радикала DPPH является широко используемым методом для оценки способности различных образцов улавливать свободные радикалы.

Анализ пигментов

Органические экстракты содержали каротиноиды, а также некоторые отходы, такие как хлорофилл [35,36]. Анализ результатов Дополнительного файла 2 показывает различия в содержании пигментов-ассимиляторов в проанализированных образцах. Более высокие количества хлорофилла b (рисунок и рисунок) предполагают способность тканей цветка улавливать световое излучение, чтобы повысить способность растений преобразовывать световую энергию в потенциальную химическую энергию.Образцы, которые производят большее количество углеводов, берутся из тканей, которые обеспечивают вещества, необходимые для развития [37].

Спектр поглощения 80% метанольных экстрактов цветов C. officinalis .

Спектры поглощения цветков C. officinalis в метаноле 80%, этаноле 96%, изопропаноле 99% и этаноле 60% .

Как сообщалось ранее [38], квантасома (комплекс между фотосинтетическими пигментами и белково-фосфорными мембранами граны) [39] включает 230 молекул хлорофилла (Chl) (160 молекул Chl a и 70 молекул Chl b ) и приблизительно 50 молекул каротиноидов.Молекулы хлорофилла a действуют как реакционные (улавливающие) центры (P 700 в фотосистеме (PS) I и P 680 в PS II). Теоретически соотношение Chl a : Chl b может варьироваться от 1: 2 до 1: 3. Из наших данных для сорта Petran (P 1 ), единственного образца, для которого соотношение между типами хлорофилла a / b хлорофилла в соотношении 1: 2 — метанольный экстракт (образец 1). Соотношение в трех других экстрактах составляло 1: 3.Для экстрактов метанола и этанола сорта Plamen (P 2 ) мы обнаружили соотношение Chl a : Chl b , равное 1: 4. Вариации относительного содержания хлорофиллов a и b могут быть связаны с нарушениями на уровне ФС II [40]. Сканирование длин волн всех экстрактов C. officinalis показано на рисунке. Специфические паттерны поглощения позволили нам идентифицировать определенные группы молекул и домены. Одна из наиболее важных функций каротиноидов — фотозащита фотосинтетического аппарата путем тушения триплетного хлорофилла, синглетного кислорода и других активных форм.

Каротиноиды являются структурными компонентами светособирающего хлорофилла a / b белковых комплексов PSII (LHCII) и PS I. Они участвуют как в стабилизации тримеров LHCII, так и в сборке мономеров LHCII [41]. Чтобы быть полезным в качестве меры клеточного антиоксидантного потенциала, поглощение на выбранной длине волны должно в основном зависеть от радикала DPPH, а не от помех, вызываемых антиоксидантами, такими как каротиноиды и полиненасыщенные жирные кислоты.Учитывая, что сигналы с длинами волн ниже 530 нм сильно зависят от каротиноидов, это может привести к неправильной интерпретации измеренного уменьшения поглощения при выборе длины волны, на которую влияют как радикал DPPH, так и абсорбционные свойства экстракта, как это происходит для экстрактов, содержащих каротиноиды. В значительной степени этот вид помех может быть устранен путем измерения оптической плотности эталонного образца, содержащего тот же экстракт, что и образец, содержащий DPPH.

Наши усилия по количественному определению общего содержания каротиноидов в экстрактах показывают важность растворителя, выбранного для экстракции образцов.Метанол извлекает каротиноидные пигменты более эффективно, чем любой из других протестированных растворителей.

Обсуждение

Мы использовали два спектрофотометрических метода, которые включают захват свободных радикалов в растворе с помощью DPPH и оценку общего антиоксидантного потенциала (FRAP), чтобы предоставить дополнительные источники доказательств различных антиоксидантных потенциалов экстрактов из C. лекарственный цветков. Сопоставляя состав фенольных соединений с антиоксидантным действием в тканях цветов, мы обнаружили, что экстракты из C.officinalis сорт Пламен (P 2 ) обладал более высоким антиоксидантным потенциалом, чем экстракты из сорта Petran (P 1 ). Связь между антиоксидантной активностью и содержанием флавоноидов не была линейной, что позволяет предположить, что антиоксидантная активность зависит от общего содержания полифенолов. Летучие органические биосоединения напрямую поддаются анализу с помощью газовой хроматографии, метода непревзойденной разделительной способности.

Флавоноиды считаются предпочтительными биосоединениями в качестве хемотаксономических маркеров растений, поскольку они демонстрируют большое структурное разнообразие и химически стабильны.

В разработанной в данной работе методологии идентификации и количественного определения основных фенольных соединений по образцам использовались более доступные методы FC для определения полифенолов.

Метод, основанный на классических нормах и стандартных рабочих процедурах, разработанных в отделе биохимии, дал каждому критерию валидации значение, соответствующее ограничениям ранее упомянутых норм.

Выводы

Антиоксидантные компоненты в экстрактах идентифицировали с помощью комбинированных методов ВЭЖХ и спектрофотометрического анализа.С помощью спектрофотометрического анализа экстрактов в УФ-видимом диапазоне мы идентифицировали определенные фенольные кислоты и флавоноиды.

Метанол позволяет более эффективно извлекать флавоноиды, чем другие исследованные растворители. Наибольшая антиоксидантная активность, связанная с содержанием полифенолов, была получена для экстрактов, приготовленных с использованием метанола. Биохимический анализ определил содержание пигментов-ассимиляторов, а также флавоноидов, которые были выражены как эквиваленты QE. После получения спектрофотометрической дозировки флавоноидов, выраженной в QE, значения включали следующие: 96.17 / 34,8 QEmg / 100 мл.

Согласно Европейской фармакопее минимальным условием качества было 0,4% общих флавоноидов, выраженных в QE. Качество сырья для бархатцев C. officinalis ( Flores Calendulae ) было обусловлено основным содержанием флавонов и полифенолов, которые накапливались в период цветения.

Методы

Образцы растений

Растения были собраны с поля на учебной базе USAMVB Timisoara.Два типа образцов растений, сорт Petran (P 1 ) и Plamen (P 2 ), были собраны и помечены на месте с использованием стандартных методов (сорта выращивались в одинаковых условиях).

Образцы растений, которые были сохранены в качестве гербарных образцов, были идентифицированы с использованием стандартного эталона для этой цели [42], по сравнению с образцами из Департамента растительных ресурсов и идентифицированы с помощью таксономистов из Департамента фитотехники растений в USAMVB Тимишоара.

Экстракция активных биологических соединений

Для экстракции использовались четыре растворителя: метанол (80%), этанол (96%), изопропанол (100%) и этанол (60%). Общий процесс мацерации в небольшом масштабе включал помещение измельченного соответствующим образом растительного материала или умеренно крупного порошка, изготовленного из него, в закрытый сосуд и добавление выбранного растворителя, чтобы дать ему достаточно времени для проникновения через клеточную стенку для растворения компонентов внутри клетки и для того, чтобы полученный раствор проник через клеточную стенку наружу.Поскольку система статична, за исключением случайного встряхивания, процесс экстракции происходит за счет молекулярной диффузии, которая очень медленная. Закрытый сосуд используется для предотвращения испарения растворителя во время периода экстракции и, таким образом, позволяет избежать вариаций от партии к партии.

В конце процесса мацерации, когда будет достигнуто равновесие, раствор фильтруют, пропуская через специальный пресс.

Концентрации активных компонентов в процеженных и сцеженных жидкостях, иногда называемых мисцеллой, идентичны, поэтому их можно комбинировать.Учитывая, что отжатая жидкость может быть мутной с коллоидными и мелкими частицами, часто требуется определенное время для коагуляции и осаждения твердых частиц.

Осевший материал фильтруют с помощью фильтр-пресса или любого другого подходящего устройства.

Метод экстракции мацерацией — самый простой неизбирательный метод. C. officinalis. цветы выдерживали в холодной среде в контакте с растворителем при комнатной температуре (17-22 ° C) в течение 14 часов, периодически перемешивая перед отделением экстракта.Дополнительный раунд (ы) мацерации повысил эффективность процесса. Экстрагированный продукт сначала смешивали с 1 / 2-2 / 3 от общего количества растворителя, после чего жидкость отделяли и высвобождали остаток.

Он вступает в контакт с остальной частью растворителя, в результате чего добывается одна девятая часть раствора. Две жидкости экстрагируют и фильтруют вместе еще через 24 часа.

Из-за относительно пониженной термостойкости природных ароматических соединений процесс проводили в присутствии антиоксиданта аскорбиновой кислоты (0.5% мас. / Об.) [43]. Скорость экстракции (1:10 г порошка цветков / мл растворителя).

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)

Полифенолсодержащие экстракты цветков C. officinalis разделяли на колонке C 18 (150 мм × 4,6 мм, 3 мкм) с подвижной фазой, состоящей из трех различных растворителей, используя аппарат Agilent 1100 HPLC. Скорость потока составляла 0,7 мл / мин, а объем впрыска составлял 20 мкл. Для первой системы разделения (тройной растворитель), которая использовалась для разделения флаванолов и фенольных кислот, исходная подвижная фаза состояла из 2% уксусной кислоты в воде / метаноле.Для разделения флавонолов во второй системе (бинарный растворитель: 0,25 мМ фосфатный буфер, pH = 2,5 / ацетонитрил) полифенольные соединения разделяли с использованием третьей системы (бинарный растворитель: 0,1% муравьиная кислота в воде / метаноле). Температуру колонки устанавливали на уровне 20 ° C.

Фенольные соединения обнаружены при 260 нм. Разделенные соединения идентифицировали путем сравнения их времени удерживания (Rt) и УФ-спектров со спектрами аутентичных стандартов. Соединения были определены количественно с использованием стандартной калибровочной кривой.

Общее содержание фенолов и флавоноидов было определено как сумма связанных идентифицированных фенольных соединений. Соединения были идентифицированы путем сравнения со стандартами каждого идентифицированного соединения с использованием Rt, профиля спектра поглощения, а также путем анализа образцов после добавления чистых стандартов [35].

Общее содержание полифенолов

Общее содержание полифенолов было рассчитано с использованием реагента FC и Na 2 CO 3 10%; Впоследствии максимальное поглощение оценивали по полученной окраске относительно калибровочной кривой.Общее содержание фенольных соединений оценивали с помощью колориметрии, основанной на химическом восстановлении смеси оксидов вольфрама и молибдена с образованием синего продукта, который сильно поглощает при 760 нм.

Образование голубых соединений, полученных из FC-реакционноспособных фенолов, не зависело от структур фенольных соединений, что позволило количественно оценить полный набор фенольных соединений из растительных экстрактов. Примерно 10 г измельченного растительного материала экстрагировали 100 мл растворителя.Общую концентрацию фенольных соединений в экстракте рассчитывали путем сравнения с кривой, построенной аналогичным образом на основе измерения, выполненного с использованием известных концентраций GA в диапазоне 0-00 мкг GA / 100 мл. Общее содержание фенолов в образцах выражали в эквивалентах GA (мг) на грамм высушенного растительного материала.

Уровни полифенолов выражали в эквивалентах мг / г GA по отношению к конечной концентрации 20 мкг / мл.

Общее содержание флавоноидов

Суммарный уровень всех флавоноидов рассчитывали реакцией с 3% -ным (мас. / Об.) Раствором AlCl 3 (безводная соль), приготовленным в этаноле.

Концентрации коррелировали со значениями абсорбции с помощью калибровочной кривой, построенной с использованием известных концентраций QE. Общее содержание флавоноидов, выраженное в мг / г (эквиваленты QE), было связано с конечной концентрацией на 20 мкг / мл.

Оценка антиоксидантной активности с использованием DPPH

Примерно 10 г измельченного растительного материала экстрагировали в 100 мл 80% -ного водного раствора этанола (или других растворителей) при комнатной температуре в течение 1 часа.

Экстракты фильтровали, и фильтры оставляли испаряться в сухой среде.

Процентную активность по улавливанию свободных радикалов определяли по формуле (1), где Ai было поглощением до добавления тестируемого экстракта, а Af было значением поглощения после 5-минутного времени реакции:

100 ⋅ (Ai — Af) / Ai

(1)

Эффект нейтрализации свободного радикала DPPH◦ был рассчитан при трех различных концентрациях метанольных и этанольных экстрактов: порции 0,05 мл экстрактов 10, 5 и 2,5 мг / мл смешивались с 2,95 мл раствора. DPPH◦ в кювете, используемой для спектрофотометрии.

По прошествии 5 минут реакции абсорбция при 420 нм сравнивалась с поглощением метанола. QE использовали в качестве положительного контроля. При концентрации 2,5 мМ QE был способен полностью нейтрализовать (уровень использованного радикала DPPH◦).

Анализ ферроредуцирующей антиоксидантной силы (FRAP)

Мы использовали простой спектрофотометрический метод для оценки антиоксидантной способности растительных экстрактов. Это включало восстановление трипиридилтриазина трехвалентного железа [Fe (III) -TPTZ] до окрашенного трипиридилтриазина двухвалентного железа [Fe (II) -TPTZ] при низком pH.

Цветной продукт сильно поглощает при длине волны 593 нм.

Анализ пигментов

Все образцы экстрагировали ацетоном. Пигменты экстрагировали из цветка C. officinalis с использованием 80% ацетона. Мы использовали удельные коэффициенты поглощения хлорофиллов a и b и каротиноидов ( Car ) для оценки их уровней с помощью спектрофотометрии. Все хлорофиллы содержали две основные полосы поглощения излучения: одну на синей стороне или около УФ части электромагнитного спектра, а другую — на красной стороне или около ИК области электромагнитного спектра.Отсутствие значительного поглощения в зеленой части спектра придает хлорофиллам характерный зеленый или сине-зеленоватый цвет.

Этот метод определяет количество (мг) в 100 мл экстракта каротиноидов. Составы пигментов, рассчитанные в соответствии с уравнениями 2, 3 и 4:

Chl a (мкг / г сухого вещества) = (15 . 65A 666 -7 . 34A 653 )

(2 )

Chl b (мкг / г сухого вещества) = (27 . 05A 653 — 11 .

Реагенты и другие материалы

QE и GA были получены от Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури, США), тогда как все остальные реагенты были получены от Merck. Все химические вещества и реагенты были аналитической чистоты.

Статистический анализ

Все результаты спектрофотометрических определений флавонов и полифенолов были воспроизведены после установления доверительного интервала, рассчитанного как минимум для пяти определений.Статистические различия между средними значениями определяли с помощью двустороннего парного t-критерия Стьюдента.

Сокращения

DPPH: 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил; FRAP: восстановительная способность железа; UV-VIS: в ультрафиолете-видимом диапазоне; ВЭЖХ: высокоэффективная жидкостная хроматография; QE: кверцетин; GA: галловая кислота; ФК: Фолин-Чокальтеу; [Fe (III) -TPTZ]: трипиридилтриазин трехвалентного железа; [Fe (II) -TPTZ]: трипиридилтриазин двухвалентного железа; Автомобиль: каротиноиды; Chl a / Chl b : хлорофиллы a и b .

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Вклад авторов

МБ задумал исследование, участвовал в разработке и координации экспериментов и интерпретации данных, а также помог разработать рукопись. CZC произвел образцы, провел анализ данных и их интерпретацию. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

Дополнительный материал

Дополнительный файл 1:

Таблица 1– Относительные уровни соединений от C.лекарственный , обладающий антиоксидантным потенциалом .

Дополнительный файл 2:

Таблица 2 — Спектрофотометрически определенные каротиноиды цветка C. officinalis в различных растворителях .

Выражение признательности

Этот документ был опубликован в рамках проекта « Постдокторская школа сельского хозяйства и ветеринарной медицины », POSDRU / 89 / 1.5 / S / 62371, софинансируемого Европейским социальным фондом через Отраслевую оперативную программу для человека. Развитие ресурсов 2007-2013 гг.

Ссылки

  • Basch E, Bent S, Foppa I, Haskmi S, Kroll D, Mele M, Szapary P, Ulbricht C, Vora M, Yong S. Marigold ( Calendula officinalis L.): подтверждено доказательствами систематический обзор Natural Standard Research Collaboration. J Herb Pharmacother. 2006; 6: 135–59. DOI: 10.1080 / J157v06n03_08. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Календула лекарственная -L. (HTML) Plants For A Future (PFAF) http://www.pfaf.org/user/Plant.aspx?LatinName=Calendula+officinalis Получено 2011/11/04.
  • Интерактивная флора Северо-Западной Европы. Календула лекарственная. Проверено 12 августа 2011.
  • Национальные институты здравоохранения. «Календула» (HTML). Травы и пищевые добавки. Национальная медицинская библиотека США; Проверено 19 октября 2011. [Google Scholar]
  • Muley BP, Khadabadi SS, Banarase NB. Фитохимические компоненты и фармакологическая активность Календула лекарственная Linn (Asteraceae) Trop J Pharm Res. 2009. 8: 455–465. [Google Scholar]
  • Танака Т., Мацуо И., Куно И.Обзор: химия вторичных полифенолов, образующихся при переработке чая и отдельных пищевых продуктов. Int J Mol Sci. 2010; 11: 14–4. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Chakraborthy GS. Фитохимический скрининг экстракта листьев Calendula Officinalis Linn методом ТСХ. Int J Res Ayurveda Pharma. 2010; 1: 131–134. [Google Scholar]
  • Neukiron H, D’Ambrosio M, Dovia J, Guerriero A. Одновременное количественное определение восьми тритерпеноидных моноэфиров в цветках 10 разновидностей Calendula officinalis L.и характеристика нового моноэфира тритерпеноида. Фитохим Анал. 2004; 15: 30–35. DOI: 10.1002 / pca.739. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Джулиано Дж., Тавацца Р., Директто Дж., Бейер П., Тейлор М.А. Метаболическая инженерия биосинтеза каротиноидов в растениях. Trends Biotechnol. 2008. 26: 139–145. DOI: 10.1016 / j.tibtech.2007.12.003. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Кишимото С., Маока Т., Сумитомо К., Омия А. Анализ каротиноидного состава лепестков календулы ( Calendula officinalis L.) Biosci Biotechnol Biochem. 2005; 69: 2122–8. DOI: 10.1271 / bbb.69.2122. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Preethi KC, Kuttan R. Ранозаживляющая активность цветочного экстракта Calendula officinalis . J Basic Clin Physiol Pharmacol. 2009; 20: 73–9. [PubMed] [Google Scholar]
  • Preethi KC, Kuttan G, Kuttan R. Антиоксидантный потенциал Календула лекарственная Цветки in vitro и in vivo . Pharmaceutical Biol. 2006. 44: 691–697. DOI: 10.1080/13880200601009149. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Guinot P, Gargadennec A, Valette G, Fruchier A, Andary C. Первичные флавоноиды в красителе календулы: экстракция, структура и участие в процессе окрашивания. Фитохим Анал. 2008; 19: 46–51. DOI: 10.1002 / pca.1014. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Braga PC, Dal Sasso M, Culici M, Spallino A, Falchi M, Bertelli A, Morelli R, Lo Scalzo R. Антиоксидантная активность экстракта Calendula officinalis : ингибирующее действие на хемилюминесценция вспышек нейтрофилов человека и спектроскопия электронного парамагнитного резонанса.Фармакология. 2009; 83: 348–55. DOI: 10,1159 / 000217583. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Мецзомо Н., Мартинес Дж., Феррейра С.С. Экономическая жизнеспособность SFE из персика, миндаля, мяты и календулы. J Food Eng. 2011; 103: 473–479. DOI: 10.1016 / j.jfoodeng.2010.10.032. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Хэдфилд Р.А., Влахович Т.К., Хан Т. Использование календулы для лечения кожных заболеваний в подиатрической области. Голеностопный сустав стопы J. 2008; 1: 1–8. DOI: 10.1186 / 1757-1146-1-1. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Мулей Б.П., Хадабади С.С., Банарасе Н.Б.Фитохимические компоненты и фармакологическая активность Календула лекарственная Linn (Asteraceae) Tropical J Pharm Res. 2009. 8: 455–465. [Google Scholar]
  • Сильва Э. Дж. Р., Гонсалвес Э. С., Агиар Ф., Эвенсио Л. Б., Лира ММА, Коэльо MCOC, Фрага MCCA, Wanderley AG. Токсикологические исследования водно-спиртового экстракта Календулы лекарственной L. Фитотерапевтические исследования. 2007. 21: 332–336. DOI: 10.1002 / ptr.2009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Naguib NY, Khalil MY, El Sherbeny SE.Сравнительное исследование продуктивности и химических составляющих различных источников и видов растений календулы , подвергшихся воздействию двух листовых удобрений. J Appl Sci Res. 2005; 1: 176–189. [Google Scholar]
  • Халид К.А., Тейшейра да Силва Дж.А. Урожайность, содержание эфирного масла и пигмента в цветочных головках Calendula officinalis L., культивируемых в условиях солевого стресса. Sci Hort. 2010; 126: 297–305. DOI: 10.1016 / j.scienta.2010.07.023. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Паолини Дж., Барбони Т., Дежобер Дж. М., Джабу Н., Музелли А., Коста Дж.Химический состав, внутривидовые и сезонные колебания эфирных масел Calendula arvensis L. Biochem Syst Ecol. 2010; 38: 865–874. DOI: 10.1016 / j.bse.2010.07.009. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Fronza M, Heinzmann B, Hamburger M, Laufer S, Merfort I. Определение раневого эффекта экстракта календулы с использованием царапин с фибробластами 3T3. J Ethnopharmacol. 2009; 126: 463–467. DOI: 10.1016 / j.jep.2009.09.014. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Безбрадица Д., Милич-Ашкрабич Дж., Петрович С.Д., Шилер-Маринкович С.Исследование влияния растворителя на кинетику разложения каротиноидов в масляных экстрактах C. officinalis . J Serb Chem Soc. 2005. 70: 115–124. DOI: 10.2298 / JSC0501115B. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Лу С., Ли Л. Метаболизм каротиноидов: биосинтез, регуляция и не только. J Integrative Plant Biol. 2008. 50: 778–785. DOI: 10.1111 / j.1744-7909.2008.00708.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Fonseca YM, Catini CD, Vicentini FTMC, Nomizo A, Gerlach RF, Fonseca MJV.Защитный эффект экстракта Calendula officinalis против окислительного стресса, вызванного ультрафиолетом B, в коже: оценка снижения уровня глутатиона и секреции матриксной металлопротеиназы. J Ethnopharmacol. 2010; 127: 596–601. DOI: 10.1016 / j.jep.2009.12.019. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Ириани Р., Мальдонаде Д., Родригес-Амайя Б., Адилма Р., Скампарини П. Каротиноиды дрожжей, выделенные из экосистемы Бразилии. Food Chem. 2008; 107: 145–150. DOI: 10.1016 / j.foodchem.2007.07.075.[CrossRef] [Google Scholar]
  • Раал А., Кирсипуу К. Общее содержание флавоноидов в сортах Calendula officinalis L., происходящих из разных стран и возделываемых в Эстонии. Nat Prod Res. 2011; 25: 658–62. DOI: 10.1080 / 14786419.2010.528417. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Прити К., Чандран Р.К. Влияние экстракта цветков Calendula officinalis на белки острой фазы, механизм антиоксидантной защиты и образование гранулем во время термических ожогов.J Clin Biochem Nutr. 2008; 43: 58–64. DOI: 10.3164 / jcbn.2008043. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Фариа Р.Л., Кардосо Л.М., Акисуэ Дж., Перейра, Калифорния, Джункейра Дж. С., Хорхе А.О., Сантос Жуниор П.В. Противомикробная активность Calendula officinalis, Camellia sinensis и хлоргексидина против прикрепления микроорганизмов к швам после удаления непрорезавшихся третьих моляров. J Appl Oral Sci. 2011; 19: 476–82. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Butnariu M, Palicica RD.Buletinul Oficial de Proprietate Industriala, Патентные заявки. Vol. 3. ОСИМ, РО122836-Б1; 2010. Аптечная мазь на основе цветков календулы, выращенных на обогащенных цинком почвах, и способ ее приготовления; С. 1–18. [Google Scholar]
  • Preethi KC, Siveen KS, Kuttan R, Kuttan G. Ингибирование метастазирования клеток меланомы B16F-10 у мышей C57BL / 6 с помощью экстракта цветков Calendula officinalis L. Азиатский Pac J Cancer Prev. 2010; 11: 1773–9. [PubMed] [Google Scholar]
  • Луо Дж., Чжан Л., Ван М., Хе С., Ян Ю.Определение кверцетина и кемпферола в растениях Dysosma методом RP-HPLC. Чжунго Чжун Яо За Чжи. 2010; 35: 3021–3023. [PubMed] [Google Scholar]
  • Danielski L, Campos LMAS, Bresciani LFV, Hense H, Yunes RA, Ferreira SRS. Олеорезин календулы лекарственной ( Calendula officinalis L.): растворимость в SC-CO 2 и профиль состава. Chem Eng Proc. 2007. 46: 99–106. DOI: 10.1016 / j.cep.2006.05.004. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Раал А., Кирсипуу К., Муст Р., Тенно С. Содержание общих каротиноидов в Calendula officinalis L.из разных стран, выращиваемых в Эстонии. Nat Prod Commun. 2009; 4: 35–8. [PubMed] [Google Scholar]
  • Газим З., Резенде С., Фрага С., Диас Филхо Б., Накамура С., Кортез Д. Анализ эфирных масел календулы лекарственной , выращиваемой в Бразилии, с использованием трех различных процедур экстракции. Brazil J Pharm Sci. 2008. 44: 391–395. [Google Scholar]
  • Сильва Э. Дж., Коста-Сильва Дж. Х., Эвенсио Л. Б., Фрага Мдо С., Коэльо М. С., Wanderley AG. Репродуктивная оценка водно-спиртового экстракта календулы лекарственной календулы лекарственной L.у крыс линии Вистар. Phytother Res. 2009; 23: 1392–8. DOI: 10.1002 / ptr.2785. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Лич MJ. C. officinalis и заживление ран: систематический обзор. Раны. 2008. 20: 236–243. [PubMed] [Google Scholar]
  • Око О.О., Садименко А.А., Афолаян А.Дж. Влияние возраста на урожайность и состав эфирных масел Calendula officinalis . J Appl Sci. 2007. 7: 3806–3810. [Google Scholar]
  • Лю Цзинь, Ян Х, Ван К., Куанг Т., Чжан Дж., Гуй Л., Ань Х, Чанг В.Кристаллическая структура основного светособирающего комплекса шпината при разрешении 2,72 Å. Природа. 2004. 428: 287–292. DOI: 10,1038 / природа02373. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Гуськов А., Керн Дж., Габдулхаков А., Брозер М., Зуни А., Сенгер В. Фотосистема II цианобактерий с разрешением 2,9 Å и роль хинонов, липидов, каналов и хлорида. Nat Struct Mol Biol. 2009. 16: 334–342. DOI: 10.1038 / nsmb.1559. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Баллоттария М., Жирардона Дж., Далл’Остоа Л., Басси Р.Эволюция и функциональные свойства светособирающих комплексов Photosystem II у эукариот. Biochim Biophys Acta Bioenerg. 2012; 1817: 143–157. DOI: 10.1016 / j.bbabio.2011.06.005. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Европейская фармакопея. PHARMEUROPA. 2011; 23 http: //www.edqm. eu / en / News-and-General-Information-43.html Дата обращения 2015/10/15. [Google Scholar]
  • Granger KL, Gallagher RS, Fuerst EP, Alldredge JR. Сравнение методов фенольной экстракции семян и методов анализа. Методы Ecol Evol.2011; 2: 691–698. DOI: 10.1111 / j.2041-210X.2011.00120.x. [CrossRef] [Google Scholar]
  • Тутин Т.Г., Хейвуд В.Х., Берджес Н.А., Валентайн Д.Х., Уолтерс С.М., Уэбб Д.А., редактор. Набор в мягкой обложке. Vol. 5. 2010. Флора европейская; п. 135. [Google Scholar]
  • Ph. Eur. Справочные стандарты. http://www.edqm.eu/en/Ph-Eur-Reference-Standards-627.html Источник 2011/10/16.
  • ВОЗ. Международные химические эталонные вещества. (ICRS) 2010. http://www.edqm.eu/en/WHO-International-Chemical-Reference-Substances-ICRS-1393.html Проверено 18 октября 2011 г.
  • ISO-14502-1: 2005; и AOAC 941.15.AOAC, 2003

Химический состав и антимикробное действие календулы лекарственной, выращенной в химических и биологических условиях, на устойчивый к метициллину Staphylococcusaureus, выделенный из больничных инфекций

Chaleshtori S. H, Kachoie MA Химический состав и антимикробное действие календулы лекарственный, выращенный в химических и биологических условиях на устойчивом к метициллину Staphylococcusaureus, изолированном от госпитальных инфекций.Биотех Рес Азия 2016; 13 (3).

Кафедра фитотерапии, Колледж пищевых продуктов и лекарств, филиал Шахрекорд, Исламский университет Азад, Шарекорд, Иран.

РЕФЕРАТ: Реферат Применение различных видов удобрений может влиять на биологическую активность Calendula officinalis . Настоящее исследование было направлено на изучение химических компонентов и антимикробных эффектов C. officinalis , выращенных в химических и биологических условиях на устойчивых к метициллину Staphylococcus aureus .Было собрано и культивировано четыреста образцов госпитальных инфекций. Штаммы MRSA были подвергнуты дисковой диффузии и GC-Mass. Сто из 400 образцов госпитальных инфекций оказались положительными на MRSA (25%). Все изоляты также были положительными по гену mecA . В C. officinalis было обнаружено 40 различных химических компонентов. Наиболее вариабельные компоненты были обнаружены в контрольной группе (1,8-цинеол (30,456%), γ-терпинен (25,547%), терпинолен (4,584%), α-терпинеол (4.490%) и транс-β-оцинен (4,153%)). Применение биологических и химических удобрений привело к значительному увеличению уровней некоторых химических компонентов ( P <0,05). Штаммы MRSA обладают наивысшей устойчивостью к тетрациклину (95%), ампициллину (92%), пенициллину (90%). , гентамицин (88%) и ципрофлоксацин (77%). Контрольная группа имела самые высокие антимикробные эффекты, но эфирное масло C. officinalis , обогащенное обоими удобрениями, было эффективным в отношении устойчивого MRSA.Использование роста C. officinalis совместно с химическими и биологическими удобрениями было рекомендовано в качестве основного подхода к синтезу эффективных антибиотиков.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Календула лекарственная; Химические компоненты; Противомикробное действие; Устойчивый к метициллину Staphylococcus aureus; Биологическое удобрение; Химические удобрения

Введение

Золотистый стафилококк ( S.aureus ) — грамположительная кокковая бактерия и один из важнейших возбудителей различных типов госпитальных инфекций, включая системные инфекции (такие как инфекции мочевыводящих путей, дыхательных путей и крови, пневмония, синусит и пищевое отравление), а также кожные и инфекции мягких тканей (такие как раны, абсцесс, ожоги, фурунклез и импетиго) [1-3]. Как внебольничные, так и внутрибольничные инфекции, вызванные Staphylococcus aureus ( S. aureus ), увеличились за последние 20 лет, и рост заболеваемости сопровождался увеличением числа устойчивых к антибиотикам штаммов, в частности метициллина. -устойчивый S aureus (MRSA) [4, 5].Штаммы MRSA имеют глобальное значение в связи с высокой распространенностью инфекций у пациентов, госпитализированных в больницы [4, 5]. Ген устойчивости к метициллину, mecA , находится на элементе размером от 21 до 67 т.п.н., который активно присутствует во всех инфекционных штаммах бактерий [6]. Штаммы MRSA, вызываемые клиническими инфекциями, обладают высокой устойчивостью к широкому спектру антибиотиков, включая бета-лактамные антибиотики, в том числе пенициллины (метициллин, диклоксациллин, нафциллин, оксациллин и т. Д.)) и цефалоспорины и другие типы противомикробных агентов, включая эритромицин, котримоксазол, тетрациклин, пенициллин, гентамицин, цефексим и клиндамицин [7-10]. В связи с высокой распространенностью резистентности MRSA к широко используемым антибиотикам в больницах, необходимость применения и назначения новых противомикробных препаратов является существенной.

В последние годы большое внимание уделяется назначению лекарственных растений для лечения различных инфекционных заболеваний [11].Лекарственные растения — подходящие источники противомикробных агентов. Календула лекарственная ( C. officinalis ) — одно из наиболее часто используемых лекарственных растений среди иранцев, которое произрастает в регионах Средиземноморья [12]. C. officinalis , широко известный как календула, является однолетним травянистым растением и принадлежит к семейству сложноцветных. Цветки однодомны (отдельные цветки могут быть мужскими или женскими, но оба пола могут быть найдены на одном и том же растении) и опыляются пчелами.Он известен привлечением дикой природы. C. officinalis может широко применяться в качестве антисептического, противовоспалительного и рубцового, а также легкого антибактериального и противовирусного средства [11, 13-15]. Растение содержит эсквитерпеновые гликозиды, сапонины, ксантофиллы, триолтритерпены, флавоноиды, летучие вещества, δ-кадинен, α-кадинол, 1,3,5-кадинатриен и α-мууролол, которые обладают антиоксидантным и антимикробным действием [11, 13-16].

По высокой полезности посадки C.officinalis , фермеры перешли от использования различных видов сельскохозяйственных удобрений к повышению качества и количества, борьбе с вредителями и ускорению сбора урожая растений. Применение этих сельскохозяйственных удобрений и особенно биологических и химических (мочевина) удобрений может повлиять на химический состав, а также на терапевтическую активность эфирного масла, экстрагированного из C. officinalis . В некоторых случаях произошли значительные изменения в составе и эффективности лекарственных растений [17, 18].

В соответствии с высокой распространенностью штаммов MRSA в иранских случаях госпитальных инфекций, экономической, косметической и фармацевтической ценностью C. officinalis и отсутствием опубликованных данных о влиянии химических и биологических удобрений на компоненты и антимикробную активность C. officinalis , настоящее исследование было проведено для оценки химических компонентов и противомикробных эффектов различных препаратов C. officinalis на штаммы MRSA, выделенные от различных типов госпитальных инфекций в Иране.

Материалы и методы

Этические вопросы

Настоящее исследование было одобрено этическими комитетами Университета медицинских наук Бакияталлаха и больницы Хаджар, Иран. Письменное информированное согласие было получено от всех пациентов или их родителей. Письменное согласие было также подписано исследовательским отделом Исламского университета Азад в Шахрекорд (IAUSHK 110224) и этическими комитетами образовательных больниц, Тегеран, Иран.

Сбор проб и идентификация MRSA

С марта по октябрь 2015 года у госпитализированных пациентов иранских больниц было собрано в общей сложности 500 клинических образцов различных типов инфекций, которые были немедленно переведены в лабораторию в холодильнике со льдом.

Двадцать пять микролитров каждого образца высевали в бульон Мюллера-Хинтона (MHB, Merck, Германия) с добавлением 6,5% NaCl и гомогенизировали. Суспензию инкубировали 16–20 ч при 37 ° C.Один миллилитр обогащенной среды MHB добавляли к 9 мл бульона фенолового красного маннита, содержащего цефтизоксим (5 мкг / мл) и азтреонам (75 мкг / мл) (PHMB), и инкубировали в течение 16–20 часов при 37 ° C. Поверхность среды для селективного выделения MRSA ID инокулировали стерильной петлей. Чашки инкубировали в течение 24 часов при 37 ° C (когда колонии было трудно идентифицировать, инкубация затягивалась еще на 24 часа). Типичные зеленые колонии были известны как MRSA. Пять выбранных типичных колоний на чашку субкультивировали на триптон-соевом агаре (TSA, Merck, Германия).Типичные колонии тестировали с помощью теста Staphytect Plus (Oxoid), теста латексной агглютинации для обнаружения фактора слипания, белка А и некоторых полисахаридов, обнаруженных в MRSA.

ПЦР-подтверждение MRSA

Все штаммы MRSA культивировали на триптиказо-соевом бульоне (TSB) и инкубировали при 37 ° C в течение 18-24 часов. Геномную ДНК экстрагировали из бактериальных колоний с помощью набора для выделения и очистки ДНК (Cinagen, Иран) согласно инструкции производителя.Наличие штаммов MRSA подтверждено с помощью амплификации гена mecA на основе ПЦР [19]. Реакцию проводили в конечном объеме 50 мкл, содержащем 5 мкл 10 × буфера + MgCl 2 , 2 мМ dNTP, 2 единицы ДНК-полимеразы Taq, 100 нг геномной ДНК в качестве матрицы и 25 пикомолей каждого праймера (5′- AAATCAGATGGTAAAGGTTGGC-3 ‘и 5′-AGTTCTGCAGTACCGGATTTGC-3’) (533 п.н.). ПЦР выполняли с использованием термоциклера (Eppendorf Mastercycler 5330, Eppendorf-Nethel-Hinz GmbH, Гамбург, Германия) при следующих условиях: начальная денатурация в течение 1 минуты при 94 ° C и 40 циклов, включая 95 ° C в течение 30 с, 55 ° C в течение 30 с и 72 ° C в течение 1 минуты, и окончательное удлинение при 72 ° C в течение 5 минут. S. aureus ATCC 6538 использовали в качестве положительного контроля, а дистиллированную воду использовали в качестве отрицательного контроля. Пятнадцать микролитров продуктов ПЦР во всех реакциях разделяли на 1,5% агарозном геле, содержащем 0,5 мг / мл SYBR Green в буфере трис-борат-ЭДТА, при 90 В в течение 1 ч, также с использованием подходящих маркеров молекулярной массы. Продукция была исследована в ультрафиолетовом свете.

Лечение календулы лекарственной

На ферме производили различные обработки C. officinalis .После посадки растений в тех же условиях, восстание началось с различных обработок. Первая обработка C. officinalis была обработана химическим удобрением, содержащим мочевину. Вторая обработка проводилась с использованием биологических удобрений. Третья обработка была обработана как мочевиной, так и биологическими удобрениями. Контрольная группа росла в обычных условиях без каких-либо удобрений. Все остальные условия, включая процесс полива, освещение, тип почвы, температуру и влажность, были одинаковыми между обработками.После выращивания цветков C. officinalis были собраны и немедленно переданы в Центр медицинских и ароматических исследований Исламского университета Азад в Шахрекорд.

Экстракция эфирного масла

Пятьсот граммов свежих цветов каждой обработки подвергали гидродистилляции отдельно в течение 3 ч в цельностеклянном аппарате Клевенджера в соответствии с методом Британской фармакопеи [20].

ГХ-масс-анализ

Для изучения химического состава 4 различных обработок C.officinalis был использован метод ГХ-масс-анализа с использованием газового хроматографа Agilent 6890 Series II (Пало-Альто, США), соединенного с квадрупольным масс-спектрометром Agilent 5973 с режимом электронной ионизации (EI), генерируемым при 70 эВ (источник ионов при 230 ° C и линии передачи при 280 ° C). ГХ выполняли с использованием капиллярной колонки J&W DB-5 (5% дифенил- 95% диметилсиликон) (30 м x 0,25 мм внутренний диаметр x 0,25 мкм пленка), в качестве газа-носителя использовали гелий (1 мл / мин). Начальная температура была запрограммирована от 35 ° C до 60 ° C (при 1 ° C мин-1), до 170 ° C (3 ° C мин-1), до 200 ° C (8 ° C мин-1) и до 280 ° C (15 ° C мин-1) и выдерживают при 280 ° C в течение 5 мин.Порт инжектора (режим без деления потока, 0,5 мин) имел температуру 250 ° C. Индексы удерживания рассчитывались применительно к наканам. Все соединения были идентифицированы путем сравнения масс-спектров (библиотека Wiley 275) и данных индекса удерживания, найденных в литературе [21].

Противомикробные эффекты различных средств лечения Календулы лекарственной

Дисковый диффузионный метод агара был использован для скрининга антибактериальной активности C. officinalisflowers [14]. Изоляты MRSA госпитальных инфекций человека переносили на среду Nutrient Agar (NA, Merck, Германия).Бумажные диски отдельно пропитывали 25 мкл эфирного масла растений 0,5 мг / мл и помещали на чашки с засеянным агаром. Все планшеты оставляли при комнатной температуре на 30 минут для диффузии эфирного масла, затем инкубировали при 37 ° C в течение 24 часов. Чувствительность изолятов MRSA к эфирному маслу C. officinalisflowers также сравнивали с имеющимися в продаже антимикробными дисками. Чувствительность изолятов MRSA тестировали против ампициллина (10 мкг / диск), гентамицина (10 мкг / диск), пенициллина (10 мкг / диск), котримоксазола (30 мкг / диск), линкомицина (2 мкг / диск), ципрофлоксацина (5 мкг / диск), клиндамицин (2 мкг / диск), имипенем (30 мкг / диск), тетрациклин (30 мкг / диск), цефексим (5 мкг / диск) и азитромицин (15 мкг / диск) антибиотики (Oxoid, Великобритания ).Диаметр зоны ингибирования, создаваемой эфирным маслом, а также каждым диском с антибиотиками, измеряли и интерпретировали на основе протокола Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) [22]. S. aureus ATCC 25923 использовали в качестве микроорганизма для контроля качества при определении чувствительности к противомикробным препаратам.

Статистический анализ

Противомикробные эффекты C. officinalisflowers и каждого противомикробного агента были протестированы 3 раза. Результаты были перенесены в электронную таблицу Microsoft Excel (Microsoft Corp., Редмонд, Вашингтон) для анализа. Статистический анализ был выполнен с использованием программного обеспечения SPSS / 19.0 (SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс) для выявления значительной взаимосвязи между чувствительностью к антибиотикам штаммов MRSA при госпитальных инфекциях. В этом исследовании были выполнены критерий хи-квадрат и точный двусторонний критерий Фишера. Статистическая значимость оценивалась при значении P <0,05.

Результаты и обсуждение

Из 400 образцов госпитальных инфекций, собранных из образцов различных типов госпитальных инфекций в медицинских центрах и больницах Ирана, 100 образцов (25%) были положительными на присутствие MRSA.Присутствие гена mecA было идентифицировано во всех изолятах MRSA госпитальных инфекций с использованием метода ПЦР. На рисунке 1 показаны результаты гель-электрофореза для амплификации гена mecA .

Рис. 1. Гель-электрофорез продуктов ПЦР для гена mecA штаммов MRSA, выделенных от различных типов госпитальных инфекций. M: лестница из 100 п.н., 2: положительный образец для гена mecA (533 п.н.), 2: положительный контроль и 3: отрицательный контроль.

Нажмите здесь, чтобы посмотреть рисунок

Частота химических компонентов при различных обработках эфирного масла C. officinalis показана в таблице 1. Всего в эфирном масле цветков C. officinalis было обнаружено 40 различных химических компонентов. Контрольная группа C. officinalis содержала наиболее изменчивые химические компоненты: всего 1,8-цинеол (30,456%), γ-терпинен (25,547%), терпинолен (4,584%), α-терпинеол (4.490%) и транс-β-оцинен (4,153%) были наиболее часто обнаруживаемыми компонентами в контрольной группе. Повышение уровня 1,8-цинеола, транс-β-оцинена, α-копаена, α-бурбонена, α-терпинилацетата, β-бисаболена, спатуленола, α-кадинола, γ-кадинена, α-кадинена и α-бисаболола. в группе C. officinalis , обработанной навозом мочевины, 1,8-цинеолом, транс-β-оциненом, α-копаеном, α-терпинилацетатом, α-мууроленом, спатуленолом, γ-кадиненом, α-кадиненом и T- мууролол в группе, получавшей биологический навоз и, наконец, 1,8-цинеол, транс-β-оцинен, α-копаен, α-терпинилацетат, β-бисаболен, спатуленол, β-эудесмол, α-кадинол, γ-кадинен, α -кадинен и α-бисаболол в группе, получавшей как мочевину, так и биологические удобрения, были значительными ( P <0.05).

Таблица 1: Частота химического состава различных обработок эфирных масел Calendula officinalis .

Номер Химические компоненты Распределение в различных обработках (%)
Контроль * Лечение 1 Лечение 2 Лечение 3
1 α-Тужен 0.459
2 α-Пинен 3,032 0,553
3 Камфен 0,256
4 Сабинен 0,293
5 П-Пинен 0.490 0,784
6 1-октен-3-ол 0,291
7 1,8-цинеол 30,456 53,755 43,512 50,431
8 п-цимен 2.495
9 α-терпинен 0.283
10 β-кариофиллен 1,289
11 Транс-β-оцинен 4,153 7,61 11,562 15,834
12 бензолацетальдегид 1,354
13 γ-терпинен 25.547
14 цис-сабинен гидрат 2,928 3,319 2,319 1,863
15 Терпинолен 4,584 1.044 0,954 0,753
16 α-фелландрен 0,390
17 α-терпинеол 0.676 0,403 1,345 0,945
18 Карвакрол 3,146 1,343 1.060 0,877
19 Терпинен-4-ол 0,369
20 α-терпинеол 4,490 1.493 1,263 0.967
21 н-Додекан 0,279
22 Карвакрол метиловый эфир 0,301 0,412 0,287
23 α-копаен 0,318 3,425 5,759 6,996
24 α-бурбонен 0.510 1,598 1,645 2,035
25 α-терпинилацетат 0,520 1,899 2,321 3,413
26 Эвгенол 0,676 0,392 0,216 0,02
27 н-тетрадекан 3,146 1,343 1.060 0.895
28 ) E- (Кариофиллен 0,369
29 α-мууролен 2,805 2,327 4,359 3,125
30 β-бисаболен 0,622 2,880 2,985 5,612
31 ) E- (γ-бисаболен 0.301 0,412 1,534
32 Спатуленол 0,318 1,529 5,579 4.525
33 β-Евдесмол 0,510 1,598 1,765 3,456
34 α-Кадинол 0,520 1,899 2,078 2.684
35 γ-Кадинен 3,319 5,652 12,345 15,675
36 Кадина, 1,4-диен 0,950 1.044 1.887 1,345
37 α-кадинен 1,434 3,714 7.342 9,823
38 α-бисаболол 0.024 0,452 0,793 1,372
39 α-кадинол 0,616 0,845 2,564 1,231
40 Т-мууролол 0,324 1,178 2,422 4.102

В таблице 2 представлена ​​картина чувствительности к антибиотикам штаммов MRSA, выделенных при госпитальных инфекциях, против различных обработок C.officinalis эфирное масло. Мы обнаружили, что контрольная группа имела самый высокий антимикробный эффект на штаммы MRSA в клинических образцах человека, затем следовали препараты № 3 и 2. Лечение № 1 имело наименьшие антимикробные эффекты. С другой стороны, распространенность восприимчивости к MRSA по сравнению с контрольной группой, обработками № 3, 2 и 1 составляла 45%, 30%, 24% и 18% соответственно ( P <0,05). Штаммы MRSA обладали наивысшими уровнями устойчивости к лечению № 1 (41%), за которым следовали препараты № 2 (40%) и 1 (36%).Статистически значимая разница наблюдалась между типами C. officinalis и распространенностью устойчивости ( P <0,05).

Таблица 2: Профиль чувствительности к антибиотикам штаммов MRSA, выделенных при госпитальных инфекциях, против различных обработок экстрактами метанола Calendula officinalis .

Учебные группы Характер чувствительности 100 выделенных штаммов MRSA (%)
Восприимчивый Промежуточный Устойчивый
Контроль 45 (45) 30 (30) 25 (25)
Лечение 1 18 (18) 41 (41) 41 (41)
Лечение 2 24 (24) 36 (36) 40 (40)
Лечение 3 30 (30) 34 (34) 36 (36)

В таблице 3 показана чувствительность к антибиотикам штаммов MRSA, выделенных при госпитальных инфекциях, против обычно используемых антибиотиков.Мы обнаружили, что штаммы MRSA обладают наивысшими уровнями устойчивости к тетрациклину (95%), ампициллину (92%), пенициллину (90%), гентамицину (88%) и ципрофлоксацину (77%). Штаммы MRSA обладают самой высокой чувствительностью к имипенему (95%), азитромицину (76%), котримоксазолу (66%), клиндамицину (65%) и линкомицину (59%). Также наблюдалась значительная разница между типами диска с антибиотиками и структурой устойчивости к антибиотикам ( P <0,05). Чувствительность к антибиотикам препарата № 3 из C.officinalis был полностью выше, чем у тетрациклина, ампициллина, пенициллина, гентамицина, цефексима и ципрофлоксацина ( P <0,05).

Таблица 3: Профиль чувствительности к антибиотикам штаммов MRSA, выделенных при госпитальных инфекциях, против обычно используемых антибиотиков.

Антибиотики Характер чувствительности 100 выделенных штаммов MRSA (%)
Восприимчивый Промежуточный Устойчивый
Ампициллин 3 (3) 5 (5) 92 (92)
Гентамицин 3 (3) 9 (9) 88 (88)
Пенициллин 4 (4) 6 (6) 90 (90)
Котримоксазол 66 (66) 22 (22) 12 (12)
Линкомицин 59 (59) 26 (26) 15 (15)
Ципрофлоксацин 10 (10) 13 (13) 77 (77)
Клиндамицин 65 (65) 23 (23) 12 (12)
Имипенем 95 (95) 4 (4) 1 (1)
Тетрациклин 1 (1) 4 (4) 95 (95)
Цефексим 12 (12) 16 (16) 62 (62)
Азитромицин 76 (76) 14 (14) 10 (10)

Насколько нам известно, настоящее исследование является первым отчетом о распространенности химического состава и антимикробных эффектов различных обработок C.officinalis на штаммах изолятов MRSA от различных типов госпитальных инфекций. Как уже говорилось, 25% проб были положительными на MRSA, что было существенно выше. Чрезвычайное, однобокое и неизбирательное назначение метициллина, а также других типов противомикробных средств является основными причинами высокой распространенности штаммов MRSA в образцах клинических инфекций. Загрязнение больничной среды и несоблюдение личной гигиены, особенно у пациентов, являющихся носителями штаммов MRSA, является еще одной причиной высокой распространенности MRSA.Другой причиной может быть недостаток подходящего дезинфицирующего средства.

штаммов MRSA из нашего исследования обладали высочайшим уровнем устойчивости к антибиотикам тетрациклина, ампициллина, пенициллина, гентамицина, цефексима и ципрофлоксацина, что было аналогично результатам различных ранее опубликованных статей [23-29]. Все эти исследования предложили синтез, состав и применение новых противомикробных агентов для преодоления возникновения высокой устойчивости к антибиотикам у штамма MRSA клинических образцов человека и даже животных.

Мы обнаружили, что обогащение сельскохозяйственных почв химическими и биологическими удобрениями может изменить химические компоненты эфирного масла, извлеченного из них. Однако разнообразие химических компонентов и даже процент некоторых из них в контрольной группе, которая росла в нормальных условиях, были выше, чем у химических, биологических и обеих групп, но уровни некоторых конкретных компонентов были увеличены. Всего 1,8-цинеол, β-бисаболен, транс-β-оцинен, α-копаен, спатуленол, α-бурбонен, α-терпинилацетат, T-мууролол, α-мууролен, α-кадинол, γ-кадинен, α -кадинен, β-эудесмол и α-бисабололхимические компоненты были увеличены в эфирных маслах групп лечения по сравнению с контролем.Однако противомикробные эффекты контрольной группы были выше, чем у других видов лечения, но мы обнаружили, что устойчивые к антибиотикам штаммы MRSA имели более высокую чувствительность к лечению № 3, чем контрольная группа ( P <0,05). При этом антимикробный эффект контрольной группы был выше, чем у препаратов № 2 и № 1 ( P <0,05). Похоже, что применение как биологических, так и химических удобрений может улучшить противомикробные эффекты C. officinalis против MRSA.

В исследовании, проведенном Davary Panah и Farahvash (2014) [30], влияние биологических и химических удобрений было значительным ( P <0,01 и P <0,05) на все параметры C. officinalis (высота растения, диаметр стебля, эфирное масло, общий свежий вес и общий сухой вес). Y показал, что наибольшее количество эфирного масла было получено в группе, обогащенной как нитроксиновыми удобрениями, так и удобрениями на основе мочевины, что было аналогично нашим результатам.Rafiee et al. (2013) (31), Rahmani et al. (2009) (32), Bieski et al. (2013) (33), Jevdovic et al. (2013) (34) и Arab et al. (2015) (35) сообщили о схожих результатах. К сожалению, опубликованных данных о влиянии удобрений на химические компоненты эфирного масла C. officinalis нет.

В исследовании, проведенном Efstratiou et al. (2012) [14], результаты показали, что экстракты C. officinalis обладают исключительной антибактериальной активностью против Pseudomonas aeruginosa , Bacillus cereus , Escherichia coli , Staphylococcus aureus , Klebsiellaaerogenes , Enterocaliscalisoccus Клебсиеллапневмония .Chakraborthy (2008) [36] сообщил, что самые низкие значения минимальной ингибирующей концентрации (MIC) C. officinalis наблюдались для экстракта этанола, экстракта хлороформа, водного экстракта и экстракта петролейного эфира против бактерий. Они показали, что экстракты листьев C.officinalis были значительно эффективны против как грамположительных, так и грамотрицательных организмов. О подобных исследованиях высоких антимикробных эффектов препарата C. officinalis на патогенные бактерии сообщалось ранее Faria et al.(2011) [37] (Бразилия), Bissa and Bohra (2011) [38] (Индия) и Rigane et al. (2013) [39] (Тунис). Высокий антимикробный эффект препарата C. officinalis обусловлен его антимикробными химическими компонентами. Недавнее исследование показало, что тритерпеноид, такой как календулагликозид, тритерпеноидный сапонин, такой как фарадиол, асорамнетин3-O-неогесперидозид, кверцетин и изорамнетин, являются основными химическими компонентами C. officinalis , которые отвечают за антиоксидантные, противораковые, противомикробные, противомикробные и противовоспалительные свойства. ранозаживляющие эффекты [40].Фактически, внесение биологических и химических удобрений привело к увеличению уровней этих химических компонентов C. officinalis . Другие исследователи показали, что способ антимикробного действия C. officinalis может быть связан с его способностью инактивировать микробные ферменты, ингибировать ДНК-гиразу, подавлять функцию цитоплазматической мембраны [41, 42].

Результаты документированных отчетов показали, что основными соединениями календулы являются тритерпеноиды [43, 44], которые считаются наиболее важными противовоспалительными и противомикробными компонентами растения.Другие составляющие календулы, такие как сапонины, питательные микроэлементы, флавоноиды и полисахариды, также могут быть ответственны за противомикробный, противовоспалительный, антиоксидантный и ранозаживляющий эффект растения [43-45]. Антимикробная активность эфирного масла C. officinalis объясняется его основными химическими компонентами, включая цитраль (альдегид), гераниол (первичный спирт), эвгенол (фенол), ментол (вторичный спирт) и коричный альдегид (альдегид) [46] .Такие соединения, как линалоол, цитраль, гераниол или тимол, являются более антисептическими агентами в эфирном масле C. officinalis [47].

В заключение, результаты нашего исследования показали, что обогащение сельскохозяйственных земель биологическими и химическими удобрениями может улучшить лечебные и особенно противомикробные эффекты C. officinalis . Как было показано, MRSA имеет высокую распространенность, а также устойчивость к антибиотикам в Иране. Кроме того, обогащение C. officinalis как биологическими, так и химическими удобрениями оказало наибольшее влияние на антимикробную активность экстрагированного эфирного масла в отношении MRSA.Одновременное внесение обоих видов удобрений улучшило процентное содержание некоторых важных химических компонентов. Штаммы MRSA, которые имели высокий уровень устойчивости к ряду протестированных антибиотиков (тетрациклин, ампициллин, пенициллин, гентамицин, ципрофлоксацин, имипенем, азитромицин, котримоксазол, клиндамицин и линкомицин), были чувствительны к эфирному маслу, экстрагированному из лекарственного препарата C. виды удобрений. Мы рекомендовали использовать C. officinalis , выращенные в почве, обогащенной как химическими, так и биологическими удобрениями, в качестве основного подхода для синтеза и создания нового антибиотического препарата для лечения устойчивых штаммов MRSA в больнице.В соответствии с этим, продуманное назначение антибиотиков — еще один необходимый вариант предотвращения распространения штаммов MRSA.

Благодарности

Авторы выражают благодарность доктору Д. Ф. Сафарпур Дехкорди из Департамента гигиены и контроля качества пищевых продуктов Тегеранского университета, Иран, и весь персонал Центра исследований лекарственных и ароматических растений Исламского университета Азад в Шахрекорд, Иран за их важную техническую и клиническую поддержку.Настоящее исследование было поддержано Исламским университетом Азад в Шахрекорд, Иран (IAUSHK 2001394).

Список литературы

  1. Noskin GA, Rubin RJ, Schentag JJ, Kluytmans J, Hedblom EC, Smulders M, Lapetina E, Gemmen E. Бремя инфекций Staphylococcus aureus в больницах США: анализ общенациональной базы данных образцов стационарных пациентов за 2000 и 2001 гг. . Arch Intern Med 2005; 165: 1756-61.
    CrossRef
  2. Solberg CO. Распространение Staphylococcus aureus в больницах: причины и профилактика.Scand J Infect Dis2000; 32: 587-95.
    CrossRef
  3. Ли BY, Бейли Р.Р., Смит К.Дж., Мудер Р.Р., Стротмейер Е.С., Льюис Г.Дж., Уфберг П.Дж., Сонг Y, Харрисон Л.Х. Универсальный эпиднадзор за устойчивым к метициллину Staphylococcus aureus (MRSA) у взрослых при госпитализации: экономическая модель и анализ. Инфекционный контроль Hosp Epidemiol 2010; 31: 598-606.
    CrossRef
  4. Дэвид MZ, Daum RS. Связанный с сообществом метициллин-устойчивый золотистый стафилококк: эпидемиология и клинические последствия возникающей эпидемии.Clin Microbiol Rev2010; 23: 616-87.
    CrossRef
  5. Tverdek FP, Crank CW, Segreti J. Антибактериальная терапия метициллин-резистентного золотистого стафилококка в условиях интенсивной терапии. Crit Care Clin 2008; 24: 249-60.
    CrossRef
  6. Wielders CL, Fluit AC, Brisse S, Verhoef J, Schmitz FJ. Ген mecA широко распространен в популяции золотистого стафилококка. J Clin Microbiol 2002; 40: 3970-5.
    CrossRef
  7. Камеры ВЧ, Deleo FR. Волны сопротивления: золотистый стафилококк в эпоху антибиотиков.Nat Rev Microbiol2009; 7: 629-41.
    CrossRef
  8. Ся Дж, Гао Дж, Кокудо Н., Хасэгава К., Тан В. Устойчивость к антибиотикам и вирулентность метициллин-устойчивого золотистого стафилококка. Biosci Trends 2013; 7: 113-21.
  9. Камеры ВЧ. Метициллин-резистентный золотистый стафилококк. Механизмы резистентности и последствия для лечения. Postgrad Med2001; 109: 43-50.
  10. Ансари С., Непал Х.П., Гаутам Р., Раямаджи Н., Шреста С., Упадхьяй Г., Ачарья А., Чапагейн М.Л. Угроза здоровью в Непале лекарственно-устойчивого золотистого стафилококка.BMC Infect Dis 2014; 14: 157.
    CrossRef
  11. Пан С.Ю., Чжоу С.Ф., Гао Ш., Ю З.Л., Чжан С.Ф., Тан М.К., Сун Дж.Н., Ма Д.Л., Хань Ю.Ф., Фонг В.Ф., Ко К.М. Новые взгляды на открытие лекарств из лекарственных растений: выдающийся вклад CAM в современную терапию. Evid Based Complement Alternat Med 2013; 2013: 627375.
    CrossRef
  12. Арора Д., Рани А., Шарма А. Обзор фитохимии и этнофармакологических аспектов рода Calendula. Pharmacogn Rev 2013; 7: 179-87.
    CrossRef
  13. Укия М., Акихиса Т., Ясукава К., Токуда Х., Сузуки Т., Кимура Ю.Противовоспалительное, противоопухолевое и цитотоксическое действие компонентов цветков календулы (Calendula officinalis). J Nat Prod 2006; 69: 1692-6.
    CrossRef
  14. Efstratiou E, Hussain AI, Nigam PS, Moore JE, Ayub MA, Rao JR. Противомикробная активность экстрактов лепестков календулы лекарственной в отношении грибов, а также грамотрицательных и грамположительных клинических патогенов. Дополнение Ther Clin Pract 2012; 18: 173-6.
    CrossRef
  15. Butnariu M, Coradini CZ. Оценка биологически активных соединений цветков календулы лекарственной с помощью спектрофотометрии.Chem Cent J2012; 6: 35
    CrossRef
  16. Martins FS, da Conceição EC, Bandeira ES, Silva JO Junior, Costa RM. Влияние метода экстракции на восстановление рутина из Calendula officinalis L. (Asteraceae). Pharmacogn Mag 2014; 10: S569-73.
  17. 17. Pan C 1 , Zhan R, Ding P, Xu H. Влияние различных органических удобрений на рост и усвоение минеральных питательных веществ Morindar officinalis. Чжун Яо Цай 2002; 25: 699-701 ..
  18. Мохаммад Реза Хадж Сейед Хади *, Мохсен Абаргуэй Фаллах, Мохаммад Таги Дарзи.Влияние внесения азотных удобрений и биогумуса на урожай цветов и эфирное масло ромашки (Matricaria Chamomile L.). J ChemHealth Risks 2015; 5: 235–244
  19. Мураками К., Минамид В., Вада К., Накамура Е., Тераока Н., Ватанабе С. Идентификация метициллин-устойчивых штаммов стафилококков с помощью полимеразной цепной реакции. J Clin Microbiol 1991; 29: 2240-4.
  20. Британская фармакопея. Х. М. С. Офис. 2, Лондон, 1980: 109-110.
  21. Адамс РП. Идентификация компонентов эфирных масел методом газовой хроматографии / масс-спектроскопии.Иллинойс: Allured Publishing Corporation, 1995: 469.
  22. Институт клинических и лабораторных стандартов (CLSI), Стандарты эффективности тестирования чувствительности к противомикробным препаратам. Двадцать второе информационное приложение М100-С21. Уэйн Па: 2012.
  23. Токаджян С., Хаддад Д., Андраос Р., Хашва Ф., Арай Г. Токсины и устойчивость к антибиотикам у Staphylococcusaureus, выделенные из крупной больницы в Ливане. ISRN Microbiol 2011; 2011: 812049.
    CrossRef
  24. Virdis S, Scarano C, Cossu F, Spanu V, Spanu C, De Santis EP.Устойчивость к антибиотикам у Staphylococcus aureus и Coagulase Negative Staphylococci, выделенных от коз с субклиническим маститом. Vet Med Int 2010; 2010: 517060.
    CrossRef
  25. Udo EE, Al-Sweih N, Dhar R, Dimitrov TS, Mokaddas EM, Johny M, Al-Obaid IA, Gomaa HH, Mobasher LA, Rotimi VO, Al-Asar A. Наблюдение за устойчивостью к антибактериальным препаратам у Staphylococcus aureus, выделенных в Кувейте больницы. Med Princ Pract 2008; 17: 71-75.
    CrossRef
  26. Alghaithy AA, Bilal NE, Gedebou M, Weily AH.Носовое носительство и резистентность к антибиотикам изолятов Staphylococcusaureus у больничного и внебольничного персонала в Абхе, Саудовская Аравия. Trans R Soc Trop Med Hyg 2000; 94: 504-507.
    CrossRef
  27. Młynarczyk A, Młynarczyk G, uczak M, Grzesik A, Lewandowska M, Jeljaszewicz J. Устойчивость к антибиотикам штаммов Staphylococcusaureus, выделенных в двух разных больницах Варшавы. Med Dosw Mikrobiol 2001; 53: 217-225.
  28. Риджал К.Р., Пахари Н., Шреста Б.К., Непал А.К., Паудель Б., Махато П., Скалко-Баснет Н.Распространенность метициллинрезистентного Staphylococcusaureus у школьников Покхары. Nepal Med Coll J 2008; 10: 192-195.
  29. Deng JJ, Zhu JN, Yang CL, Shu M, Xiao GG, Su M, Zhou W. Клиническое распределение и лекарственная устойчивость золотистого стафилококка, выделенного у госпитализированных детей. Сычуань Да Сюэ Сюэ Бао И Сюэ Бан 2013; 44: 159-161.
  30. Давари Панах Д., Фарахваш Ф. Влияние биологических и химических удобрений на урожай календулы лекарственной в тепличных условиях. J ноябрь, прикладная наука 2014; 3: 1435-1438
  31. Рафи Х, Мехрафарин А, Кадери А, Калате Яри С., Нагди Бади Х.Фитохимические, агрономические и морфологические реакции бархатцев (Calendula officinalis L.) на некорневое применение биостимуляторов (биоактивных аминокислотных соединений). J MedPlants 2013; 12: 48-61.
  32. Рахмани Н., Данешян Дж., Алиабади Фарахани Х. Влияние азотных удобрений и режимов орошения на урожай семян календулы (Calendula officinalis L.). J Agric Biotechnol Sustainable Dev 2009; 1: 024-028.
  33. Bielski S, Szwejkowska B. Влияние удобрения на развитие и урожайность календулы лекарственной (Calendula officinalis L.). Herba Polonica 2013; 59: 5-12.
    CrossRef
  34. Евдович Р., Тодорович Г., Костич М., Протич Р., Лекич С., Живанович Т., Секански М. Влияние местоположения и применения различных минеральных удобрений на урожай семян и качество календулы лекарственной (Calendula officinalis l.). Turk J FieldCrops 2013; 18: 1-7
  35. Араб А., Замани Г. Р., Сайяри М. Х., Асили Дж. Влияние химических и биологических удобрений на морфофизиологические свойства календулы (Calendula officinalis L.). Eur J Med Plants 2015; 8: 60-68.
    CrossRef
  36. Чакраборти GS. Противомикробная активность экстрактов листьев календулы лекарственной (линн.). J Herb Med Toxicol 2008; 2: 65-66.
  37. Фариа Р.Л., Кардосо Л.М., Акисуэ Дж., Перейра, Калифорния, Жункейра Дж.С., Хорхе А.О., Сантос Жуниор П.В. Противомикробная активность календулы лекарственной, камелии китайской и хлоргексидина в отношении прикрепления микроорганизмов к швам после удаления непрорезавшихся третьих моляров. J Appl Oral Sci 2011; 19: 476-82.
    CrossRef
  38. Бисса С, Бора А.Антибактериальный потенциал календулы. J Microbiol Antimicrobial 2011; 3: 51-54.
  39. Ригане Г., Бен Юнес С., Газгази Х., Бен Салем Р. Исследование биологической активности и химического состава календулы лекарственной, произрастающей в Тунисе. Int Food Res J 2013; 20: 3001-3007.
  40. Мулей Б.П., Хдабади СС, Банарасе Н.Б. Фитохимические компоненты и фармакологическая активность Calendula officinalis Linn (Asteraceae): обзор. Trop J Pharm Res 2009; 8: 455-465.
    CrossRef
  41. Cushnie TP, Lamb AJ.Антимикробная активность флавоноидов. Int J Antimicrob Agents 2005; 26: 343 56.
    CrossRef
  42. Шах Пратибха Дж., Уильямсон Манита Т. Антибактериальная и синергетическая активность метанольного экстракта лепестков календулы лекарственной на Klebsiella pneumoniae, совместно продуцирующей ESBL и бета-лактамазу AmpC. IntJCurrMicrobiolApp Sci 2015; 44: 107-117.
  43. Арора Д., Рани А., Шарма А. Обзор фитохимии и этнофармакологических аспектов рода Calendula. Pharmacogn Rev2013; 7: 179-87.
    CrossRef
  44. Butnariu M, Coradini CZ.Оценка биологически активных соединений цветков календулы лекарственной с помощью спектрофотометрии. Chem Cent J 2012; 6: 35
    CrossRef
  45. Фариа Р.Л., Кардосо Л.М., Акисуэ Дж., Перейра, Калифорния, Жункейра Дж. С., Хорхе А.О., Сантос Жуниор П.В. Противомикробная активность календулы лекарственной, камелии китайской и хлоргексидина в отношении прикрепления микроорганизмов к швам после удаления непрорезавшихся третьих моляров. J Appl Oral Sci 2011; 19: 476-82.
    CrossRef
  46. Hartman D, Coetzee JC.Опыт двух практикующих врачей из США в использовании эфирных масел для ухода за ранами. J Wound Care 2002; 11: 317-20.
    CrossRef
  47. Брюнетон Дж. Фармакогнозия. Сарагоса, 2001: 477.
(Посещали 628 раз, сегодня 1 посещали)

Экстракт цветков календулы лекарственной | Cosmetics Info

Обзор безопасности CIR: Группа экспертов CIR рассмотрела данные по безопасности Calendula offinalis , а также данные по безопасности основных компонентов этого растения. Исследования острой токсичности показывают, что экстракт цветов относительно нетоксичен.Тесты показали минимальное раздражение кожи, отсутствие сенсибилизации или фототоксичности. Шесть сапонинов, выделенных из цветков Calendula officinalis , и экстракт цветков не были мутагенными для бактерий, а чай, полученный из календулы Calendula officinalis , не был генотоксичен для Drosophila melanogaster . Масло кориандра, которое содержит компоненты, аналогичные тем, что содержатся в цветочном масле календулы лекарственной, не оказывает никакого воздействия на развитие. Исследование канцерогенности экстракта цветков календулы лекарственной было отрицательным.

Хотя люди, страдающие аллергией на растения семейства Aster / Compositae , такие как амброзия, хризантемы и маргаритки, могут с большей вероятностью иметь аллергическую реакцию на Календула , клинические испытания косметических составов, содержащих экстракт цветов, вызвали незначительные кожные раздражение или сенсибилизация. Экспертная группа CIR рассмотрела оценки безопасности компонентов Calendula officinalis , которые включали анализ пороговых значений токсикологической опасности.Они пришли к выводу, что потенциально проблемные компоненты не присутствовали в косметических ингредиентах в достаточном количестве, чтобы это было проблемой для безопасности. На основании имеющихся данных группа экспертов CIR пришла к выводу, что экстракт календулы лекарственной, цветок календулы лекарственной, экстракт цветов календулы лекарственной, масло календулы лекарственной и масло семян календулы лекарственной безопасны при использовании в косметике и средствах личной гигиены.

Ссылка на Кодекс федеральных правил FDA для календулы http: // www.accessdata.fda.gov/scripts/cdrh/cfdocs/cfcfr/CFRSearch.cfm?fr …

Ингредиенты, производные календулы лекарственной , могут использоваться в косметике и продуктах личной гигиены, продаваемых в Европейском Союзе, в соответствии с общими положениями Регламента ЕС по косметике.

Ссылка на Регламент ЕС по косметике: http://europa.eu/legislation_summaries/consumers/product_labelling_and_packaging/co0013_en.htm

Дополнительная информация об ингредиентах, полученных из растений.

ГОРЯЧИЙ МАРИГОЛЬД (Calendula officinalis L.) — ПОЛОЖЕНИЕ В КЛАССИЧЕСКОЙ ФИТОТЕРАПИИ И НОВОЙ ДОКУМЕНТОВАННОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ

Список литературы

Агаджанян, А.А., Трчунян, А.Х. (2018). Антигипергликемические свойства травяной смеси.Chem. Биол., 52 (3), 180–186.
Александр, JTM, Sousa, LHT, Lisboa, MRP, Furlaneto, FAC, Do Val, DR, Marques, M., Vasconcelos, HC, Matos de Melo, I., Leitao, R., Brito GAC, Goes, P. ( 2018). Противовоспалительное и антирезорбтивное действие календулы лекарственной при воспалительной потере костной массы у крыс. Clin. Устное исследование, 22 (6), 2175–2185. DOI: 0.1007 / s00784-017-2308-7
Анурадха, С.Н., Вилашене, Г., Лалитамбигай, Дж., Арункумар, С. (2015). «Космецевтика»: мнение в направлении фармацевтики.Asian J. Pharm. Clin. Res., 8 (2), 64–69.
Арора, Д., Рани, А., Шарма, А. (2013). Обзор фитохимических и этнофармакологических аспектов рода Calendula. Pharmacog. Rev., 7 (14), 179. DOI: 10.4103 / 0973-7847.120520
Бако, Э., Дели, Дж., Тот, Г. (2002). ВЭЖХ исследование каротиноидного состава продуктов календулы. J. Bioch. Биофиз. Методы, 53, 241–250. DOI: 10.1016 / S0165-022X (02) 00112-4
Банакар, С.М., Вирапур, В.П., Типпесвами, Б.С., Джагадиш, Н.В., Гавимат, К.К., Альшехри, З.С. (2016). Защитный эффект экстракта цветков календулы лекарственной (L.) при язвенном колите, вызванном уксусной кислотой, у крыс. J. Herbs, Spices Med. Растения, 22 (3), 225–237. DOI: 10.1080 / 10496475.2016.11
Basch, E., Bent, S., Foppa, I., Haskmi, S., Kroll, D., Mele, M., Szapary, P., Ulbricht, C., Voa, M., Vora, M., Йонг, С. (2006). Бархатцы (Calendula officinalis L.): систематический обзор, основанный на фактических данных, проведенный Natural Standard Research Collaboration. J. Herb. Фармакотер., 6 (3–4), 135–159. DOI: 10.1080 / J157v06n03_08
Бинген, Х. фон (1155). Physica Хильдегард фон Бинген.
Буцци, М., Фрейтас, Ф. де, Баррос Винтер, М. де (2016). Терапевтическая эффективность экстракта календулы лекарственной при заживлении венозных язв ног. J. Уход за ранами, 25 (12), 732–739. DOI: 10.12968 / jowc.2016.25.12.732
Коломбо, Э., Санжиованни, Э., Д’Амброзио, М., Босисио, Э., Чокарлан, А., Фумагалли, М., Герриеро А., Харгель П., Делл’Агли, М. (2015). Биологическое фракционирование для оценки ингибирующей активности Calendula officinalis L.на транскрипцию, управляемую NF-B, в эпителиальных клетках желудка человека. Дополнение на основе доказательств. Альтерн. Med., 2, 727342. DOI: 10.1155 / 2015/727342
Корацца, М., Борги, А., Галло, Р., Шена, Д., Пигатто, П., Лауриола, М.М., Гварнери, Ф., Стнгени, Л., Винченци, К., Фоти, К., Вирджили , А. (2014). Актуальные продукты растительного происхождения: использование, кожные реакции и полезность патч-тестов. Многоцентровое итальянское исследование. Контактный дерматит, 70 (2), 90–97. DOI: 10.1111 / cod.12124
Кордова, К., Сикейра, И., Нетто, К. (2002). Защитные свойства бутанольного экстракта календулы лекарственной (календулы) против перекисного окисления липидов микросом печени крысы и действия в качестве акцептора свободных радикалов. Редокс Реп., 7 (2), 95–102. DOI: 10.1179 / 135100002125000325
CosIng — База данных косметических ингредиентов. Доступно: https://ec.europa.eu/growth/sectors/cosmetics/cosing_en [данные доступа: 06.12.2018].
Денисов-Петржик, М., Петржик, Ł. (2019). Виды Asteraceae как потенциальные экологические факторы аллергии.Environ. Sci. Загрязнение. Res. 26 (1), 1–11. DOI: 10.1007 / s11356-019-04146-w
Динда, М., Дасгупта, У., Сингх, Н., Бхаттачарья, Д., Кармакар, П. (2015). PI3K-опосредованная пролиферация фибробластов настойкой календулы лекарственной: значение для заживления ран. Фитотэр. Res., 29 (4), 607–616. DOI: 10.1002 / ptr.5293
Дюран В., Матич М., Йованович М. (2005). Результаты клинического исследования мази с экстрактом календулы лекарственной при лечении венозных язв ног.Int. J. Tissue. Реагент., 27 (3), 101–106.
EFSA — Европейское агентство по безопасности пищевых продуктов. Доступно: http://www.efsa.europa.eu/ [данные обращения: 11.11.2018].
Европейская фармакопея 9.0 (2017). Европейское управление качества лекарственных средств, Страсбург.
EMA — Европейское агентство по лекарственным средствам. Доступно: https://www.ema.europa.eu/ [данные обращения: 06.01.2019].
ESCOP — Европейский научный кооператив по фитотерапии. Доступно: http://escop.com/ [данные обращения: 20.02.2019].
Фарапур, М.Р. (2014). Антиоксидантная активность, антиноцицептивное и противовоспалительное действие водно-спиртового экстракта календулы на экспериментальных животных. Int.
J. PharmTech. Соч., 6 (5), 1640–1646.
Farmakopea Polska XI (2017). Urząd Rejestracji Produktów Leczniczych, Wyrobów Medycznych i Produktów Biobójczych, Варшава.
Фаустино, М.В., Пинто, Д.К.Г.А., Гонсалвес, М.Дж., Салгейро, Л., Сильвейра, П., Сильва, A.M.S. (2018). Полифенольный профиль видов календулы L. и противогрибковая активность in vitro.J. Funct. Продукты питания, 45, 254–267. DOI: 10.1016 / j.jff.2018.04.013
Георгиев В., Славов А., Васильева И., Павлов А. (2018). Культура растительных клеток как новая технология для производства активных косметических ингредиентов. Англ. Life Sci., 18 (11), 779–798. DOI: 10.1002 / elsc.201800066
Монографии Немецкой комиссии E, фитотерапия (1986). Цветок календулы (Calendulae flos) [краткое содержание монографии]. Доступно: https://buecher.heilpflanzen-welt.de/BGA-Commission-E-Monographs/0043.htm [данные доступа: 26.01.2019].
Gilca, M., Tiplica, G.S., Salavastru, C.M. (2018). Традиционные и этноботанические дерматологические практики в Румынии и других странах Восточной Европы. Clin. Дерматол., 36 (3), 338–352, DOI: 10.1016 / j.clindermatol.2018.03.008
Гжелак А., Янишовска В. (2002). Инициирование и ростовые характеристики суспензионных культур клеток календулы лекарственной. Растительная клетка. Культ Ткань Органа, 71, 29–40. DOI: 10.1023 / A: 1016553

2
Эрнандес-Сааведра, Д., Перес-Рамирес, И.Ф., Рамос-Гомес, М., Мендоса-Диас, С., Лоарка-Пинья, Г., Рейносо-Камачо, Р. (2016). Фитохимическая характеристика и влияние настоев Calendula officinalis, Hypericum perforatum и Salvia officinalis на сердечно-сосудистый риск, связанный с ожирением. Med. Chem. Res., 25 (1), 163–172. DOI: 10.1007 / s00044-015-1454-1
Джадун, С., Карим, С., Хасхам, М., Бин, Х., Акрам, М.Р., Хан, А.К., Малик, А., Чен, К., Муртаза, Г. (2015). Антивозрастной потенциал фармацевтических кремов с фитоэкстрактом для долголетия клеток кожи человека.Oxidative Med. Клетка. Лонгев., 2015, 1–17. DOI: 10.1155 / 2015/709628
Джон Р., Андраби К.И., Ян Н. (2017). Календула лекарственная — важное лекарственное растение с потенциальными биологическими свойствами. Proc. Indian Natl. Sci. Акад., 83 (4), 769–787. DOI: 10.16943 / ptinsa / 2017/49126
Каур, Дж., Сидху, С., Чопра, К., Хан, М.У. (2016). Календула лекарственная уменьшает острый некротический панкреатит, вызванный l-аргинином, у крыс. Pharm. Биол., 54 (12), 2951–2959. DOI: 10.1080 / 13880209.2016.1195848
Халид К.А., Сильва Дж.А.Т. (2012). Биология календулы лекарственной. Линн .: Акцент на фармакологии, биологической активности и агрономической практике. Med. Аромат. Plant Sci. Biotechnol. 6, 12–27.
Куркин В.А., Шарова О.В. (2007). Флавоноиды из цветков календулы лекарственной. Chem. Nat. Compd., 43 (2), 216–217. DOI: 10.1007 / s10600-007-0084-3
Лич, Дж. М. (2008). Календула лекарственная и заживление ран: систематический обзор. Раны, 20 (8), 236–243.
Лега, М.Р., Прасад, К.В., Сингх, С.К., Каур, К., Арора, А., Кумар, С. (2012). Индукция каротиноидных пигментов в каллусных культурах Calendula officinalis L. в ответ на уровни азота и сахарозы. Vitr. Клетка. Dev. Биол. — Завод, 48 (1), 99–106. DOI: 10.1007 / s11627-011-9402-3
Лима, М.Р., Лопес, А.П., Мартинс, К., Брито, Г.А.С., Карнейро, В.К., Гус, П. (2017). Влияние календулы лекарственной на окислительный стресс и потерю костной массы при экспериментальном пародонтите. Передний. Physiol., 8, 1–9. DOI: 10.3389 / fphys.2017.00440
Лохани, А., Мишра, А.К., Верма, А. (2018). Космецевтический потенциал эфирного масла герани и календулы: определение антиоксидантной активности и фактора защиты от солнца in vitro. J. Cosmet. Dermatol., 1–8. DOI: 10.1111 / jocd.12789
Ловецка П., Липов Ю., Тумова К., Мачуркова А. (2018). Характеристика биологически активных веществ календулы лекарственной. Curr. Pharm. Biotechnol., 19, 1167–1174. DOI: 10.2174 / 13819666180226151910
Мигель, М., Баррос, Л., Перейра, К., Кальельха, Р.С., Гарсия, П.А., Кастро, М.А., Сантос-Буэлга, К., Феррейра, I.C.F.R. (2016). Химическая характеристика и биоактивные свойства двух ароматических растений: Calendula officinalis L. (цветы) и Mentha cervina L. (листья). Food Funct., 7 (5), 2223–2232. DOI: 10.1039 / c6fo00398b
Мулей Б.П., Хадабади С.С., Банарас Н.Б. (2009). Фитохимические компоненты и фармакологическая активность Calendula officinalis Linn (Asteraceae): обзор. Троп. J. Pharm.Res., 8 (5), 455–465. DOI: 10.4314 / tjpr.v8i5.48090
Нойкирх, Х., Д’Амброзио, М., Далла Виа, Дж., Герриеро, А. (2004). Одновременное количественное определение восьми моноэфиров тритерпеноидов из цветков 10 разновидностей Calendula officinalis L. и характеристика нового моноэфира тритерпеноидов. Фитохим. Анализ., 15 (1), 30–35. DOI: 10.1002 / pca.739
Николаус, К., Юнгханс, С., Хартманн, А., Мурильо, Р., Ганзера, М., Мерфорт, И. (2017). Исследования in vitro для оценки ранозаживляющих свойств экстрактов календулы лекарственной.Ж. Этнофармакол., 196, 94–103. DOI: 10.1016 / j.jep.2016.12.006.
Низинский Б., Алсуфи А.С.М., Панчковски К., Длугош М., Шакель А. (2015). Содержание свободных и этерифицированных тритерпеноидов аборигенного календулы (Calendula officinalis) и его модификаций в культурах in vitro. Фитохим. Lett., 11, 410–417. DOI: 10.1016 / j.phytol.2014.12.017
Окох, О.О., Садименко, А.А., Афолаян, А. (2007). Влияние возраста на выход и состав эфирных масел календулы лекарственной.J. Appl. Наук, 7 (23), 3806–3810. DOI: 10.3923 / jas.2007.3806.3810
Окума, швейцарский чемпион, Андраде, ТАМ, Каэтано, ГФ, Финчи, Л.И., Масиэль, Н.Р., Топан, Дж.Ф., Чефали, ЛК, Полизелло, АКМ, Карло, Т., Роджерио, А.П., Спадаро, АКК, Исаак, VLB, Фраде , MAC, Роча-Филью, Пенсильвания (2015). Разработка эмульсии ламеллярной гелевой фазы, содержащей масло календулы (Calendula officinalis), в качестве потенциальной современной повязки на рану. Евро. J. Pharm. Sci., 71, 62–72. DOI: 10.1016 / j.ejps.2015.01.016
Паренте, Л.М.Л., Соуза Лино-младший, Р. де, Тресвензол, Л. М. Ф., Вино, М. К., Паула, Д. Р. де, Пауло, Н. М. (2012). Ранозаживляющий и противовоспалительный эффект на животных моделях Calendula officinalis L., произрастающего в Бразилии. Дополнение на основе доказательств. Альтерн. Мед., 2012, 1–7. DOI: 10.1155 / 2012/375671
Пол, С., Рахман, А., Махмуд, М., Уззал, А., Дас, З. (2018). Заживление ран пастой из календулы (Calendula officinalis) и куркумы (Curcuma longa): сравнительный подход. J. Adv. Вет. Anim. Res., 4 (4), 333. DOI: 10.5455 / javar.2017.d229
Педрам Рад, З., Мохтари, Дж., Аббаси, М. (2019). Приготовление и характеристика каркасов нанокомпозитов PCL / гуммиарабика, содержащих календула лекарственная, для заживления ран. Иран. Polym. J., 28 (1), 51–63. DOI: 10.1007 / s13726-018-0674-x
Помье, П., Гомес, Ф., Саньяч, М.П., ​​Д’Омбр, А., Кэрри, К., Монбарбон, X. (2004). Рандомизированное испытание фазы III календулы лекарственной в сравнении с троламином для профилактики острого дерматита во время облучения по поводу рака груди.J. Clin. Онкол., 22 (8), 1447–1453. DOI: 10.1200 / JCO.2004.07.063
Прити, К.С., Каттан, Р. (2009). Ранозаживляющее действие экстракта цветков Календулы лекарственной. J. Basic Clin. Physiol. Pharmacol., 20 (1), 73–79. DOI: 10.1515 / jbcpp.2009.20.1.73
Рейдер, Н., Комерики, П., Хаузен, Б.М., Фрич, П., Аберер, В. (2001). Изнанка природных лекарств: Контактная сенсибилизация к арнике (Arnica montana L.) и календулы (Calendula officinalis L.). Контактный дерматит, 45 (5), 269–272.DOI: 10.1034 / j.1600-0536.2001.450503.x
Рушковски Д., Шакель А., Янишовска В. (2005). Метаболизм [3-3H] олеаноловой кислоты в корне календулы лекарственной. Acta Physiol. Завод., 25 (4), 311–317. DOI: 10.1007 / s11738-003-0011-6
Саффари, Э., Мохаммад-Ализаде-Чарандаби, С., Адибпур, М., Миргафурванд, М., Джавадзаде, Ю. (2017). Сравнение эффектов календулы лекарственной и клотримазола на вагинальный кандидоз: рандомизированное контролируемое исследование. Women Heal., 57 (10), 1145–1160.DOI: 10.1080 / 03630242.2016
Салехи, Б., Анил Кумар, Н.В., Шенер, Б., Шарифи-Рад, М., Килич, М., Махади, Г.Б., Мехтап, К., Влайкавлевич, С., Ирити, М., Кобарфард, Ф. , Сетзер, В. Н., Аятоллахи, С. А., Ата, А., Шарифи-Рад, Дж. (2018). Лекарственные растения, применяемые при лечении вируса иммунодефицита человека. Int. J. Mol. Sci., 19 (5), 1459. DOI: 10.3390 / ijms159
Самоховец, Э., Урбанска, Л., Манка, В., Столярска, Э. (1979). Оценка действия экстрактов календулы лекарственной и эхинацеи узколистной на Trichomonas vaginalis in vitro.Wiad. Паразитол., 25 (1), 77–81.
Шафей, Н., Наини, А.Т., Джахроми, Х.К. (2015). Сравнение различных концентраций геля календулы лекарственной для заживления кожных ран. Биомед. Pharmacol. J., 8 (2), 979–992. DOI: 10.13005 / bpj / 850
Шанкар, С.М., Бардвалли, С.Г., Джотирмайи, Р., Четана, Бхушан, К., Кумар, С. (2017). Эффективность экстракта календулы лекарственной (календулы) в качестве противомикробного средства против микробов полости рта: исследование in vitro по сравнению с диглюконатом хлоргексидина.J. Clin. Диагностический журнал, 11 (10), ZC05-ZC10. DOI: 10.7860 / JCDR / 2017 / 29844.10702
Шивашаран, Б.Д., Нагаканнан, П., Типпесвами, Б.С., Вирапур, В.П., Бансал, П., Унникришнан, М.К. (2013). Защитный эффект Календулы лекарственной Линн. цветы против 3-нитропропионовой кислоты вызвали экспериментальную болезнь Хантингтона у крыс. Drug Chem. Toxicol., 36 (4), 466–473. DOI: 10.3109 / 01480545.2013.776583
Сингх, М.К., Саху, П., Нагори, К., Деванган, Д., Александр, Т.К.А., Бадвайк, Х., Трипати, Д.К. (2011). Органолептические свойства in vitro и in vivo, фармакологическая активность Calendula officinalis Linn: общий обзор. J. Chem. Pharm. Res., 3 (4), 655–663.
Торопова А.А., Бадмаев Н.С., Разуваева Ю.Г., Николаев С.М., Самбуева З.Г., Ерентуева А. (2017). Влияние экстракта календулы лекарственной на антиоксидантный и энергетический статус печени крыс с экспериментальным гепатитом. Эксп. Клин. Фармакол., 80 (7), 11–14.
Тундис, Р., Лоиццо, М.Р., Бонези, М., Меникини, Ф. (2015). Потенциальная роль природных соединений в борьбе со старением кожи. Curr. Med. Chem., 22 (12), 1515–1538. DOI: 10.2174 / 0

7322666150227151809
FDA — Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США. Доступно: https://www.fda.gov/ [данные обращения: 22.01.2019].
Укия, М., Акихиса, Т., Ясукава, К., Токуда, Х., Судзуки, Т., Кимура, Ю. (2006). Противовоспалительное, противоопухолевое и цитотоксическое действие компонентов цветков календулы (календулы лекарственной). J. Nat. Prod., 69 (12), 1692–1696. DOI: 10.1021 / np068016b
ВОЗ (2002). Монографии по избранным лекарственным растениям,
т. 2. Женева.
Викторовска, Э., Длугош, М., Янишовска, В. (2010). Значительное увеличение олеанола и накопления биотическими элиситорами в клеточных суспензионных культурах Calendula officinalis L. Enzyme Microb. Technol., 46, 14–20. DOI: 10.1016 / j.enzmictec.2009.09.002
Сюань, С.Х., Ким, Г.Ю., Ю, Дж. Ю., Ким, Дж. У., Ян, Ю. Р., Чон, Ю. Х., Чон, Ю. Дж., Ким, Р.А., Парк С. (2016). Антиоксидантные и клеточные защитные эффекты экстрактов цветков календулы лекарственной от окислительного стресса в клетках кожи человека. Прил. Chem. Eng., 27 (6), 620–626. DOI: 10.14478 / ace.2016.1093
Сюань, С.Х., Парк, Ю.М., Парк, С. (2019). Антимеланогенные и антимиграционные свойства этилацетатной фракции цветков календулы лекарственной на клетки меланомы. Photochem. Фотобиол., 95 (3), 860–866. DOI: 10.1111 / php.13064

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки вашего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в cookie-файлах может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *