Масло чайного дерева состав: Чайное дерево

Содержание

Чайное масло — состав и свойства. Польза и вред чайного масла



Свойства чайного масла

Сколько стоит чайное масло ( средняя цена за 1 бан.)?

Москва и Московская обл.

80 р.

 

Полагаем, что при упоминании масла чайного дерева многие сразу же представят себе такой всемирно известный напиток как чай и чайное дерево. Спешим вас разочаровать чайное масло производят совсем не из листьев чайного куста. Ценное масло чайного дерева вырабатывают из листьев растения Мелалеука или Melaleuca. В народе это дерево, принадлежащее к семейству Миртовых, называют не иначе как чайное дерево.

По своему биологическому строению чайное дерево относится к вечнозеленым растениям, которое близко по своим свойствам к эвкалипту. Чайное дерево произрастает в Австралии и полезные свойства чайного масла местные аборигены используют на протяжении всего своего существования на континенте.

Стоит отметить, что вид чайного масла зависит прежде всего от подвида растения мелалеука.

Состав чайного масла

Существует свыше двух сотен разновидностей чайного дерева. Базовые виды чайного масла, которые применяют в фармакологии, косметологии, ароматерапии и народной медицине изготавливают всего лишь из нескольких подвидов растения. Еще в древности были открыты уникальные свойства чайного масла, а также бесценная польза продукта для здоровья человеческого организма. Польза чайного масла обусловлена в первую очередь химическим составом соединения растительного происхождения.

Польза чайного масла

Благодаря биологически активным соединениям, которые входят в состав чайного масла продукт обладает мощными антигрибковыми, а также антибактериальными и противовирусными свойствами. Именно поэтому, масло чайного дерева австралийские аборигены используют для заживления ран, а также при лечении простудных заболеваний.

В составе чайного масла содержится натуральный антибактериальный комплекс из более ем 100 видов соединений природного происхождения.

Удивительно то, что вплоть до настоящего времени исследователи не перестают изучать химический состав чайного масла и открывать новые химические соединения, входящие в его состав. Для того, чтобы сохранить всю пользу чайное масло производят специальным методом из листьев чайного дерева.

Растительное сырье перегоняют с использованием водяного пара и получают чайное масло. Масло чайного дерева активно используют в медицинской отрасли. Особое место масло чайного дерева занимает в фармакологии, а также стоматологии. Масло чайного дерева еще в начале прошлого столетия медики использовали как действенное антисептическое средство.

Вред чайного масла

Стоит обратить внимание на обратную сторону пользы масла чайного дерева и поговорить о возможном вреде чайного масла. Справедливости ради, нужно отметить, что вред чайного масла может наступить только в случае не соблюдения предписаний врачей, а также инструкции по использованию масла. Помимо того, не стоит начинать использовать чайное масло как в профилактических так и лечебных целях без предварительной консультации с лечащим врачом.

Калорийность чайного масла 898 кКал

Энергетическая ценность чайного масла (Соотношение белков, жиров, углеводов — бжу):

Белки: 0 г. (~0 кКал)
Жиры: 99.8 г. (~898 кКал)
Углеводы: 0 г. (~0 кКал)

Энергетическое соотношение (б|ж|у): 0%|100%|0%

Рецепты с чайным маслом



Рецепты с Чайным маслом не найдены

Пропорции продукта. Сколько грамм?

в 1 чайной ложке 5 граммов
в 1 столовой ложке 17 граммов
в 1 стакане 230 граммов
в 1 банке 10 граммов

 

Аналоги и похожие продукты

Просмотров: 7344

OLEOS МАСЛО АВСТРАЛИЙСКОГО ЧАЙНОГО ДЕРЕВА+ПИХТА ПРИРОДНЫЙ АНТИСЕПТИК 30МЛ/СПРЕЙ

1. Обогащение косметических средств: с профилактической целью использовать утром и вечером обогащенный средством крем. Для этого в небольшую закрывающуюся емкость положить крем и добавить средство (2 распыления дозатора на 10 г. крема). Тщательно перемешать до получения однородной массы.

2. Для восстановления клеток эпидермиса: для восстановления пораженных участков кожи, после предварительной обработки поражённых участков кожи 3% раствором перекиси водорода (при необходимости), распылить средство на пораженный участок и наложить сверху бактерицидный лейкопластырь. Процедуру повторять дважды в день.

3. При ожогах: распылить средство на пораженный участок кожи. Процедуру повторять дважды в день.

4. При укусах насекомых нанести масло на место укуса и втереть легкими движениями. Процедуру повторять 2-3 раза в день

5. При повседневном уходе за жирным и смешенным типом кожи лица и тела:

• Для очищения кожи: распылить средство на смоченный в теплой воде и слегка отжатый ватный или марлевый тампон. Протереть им проблемный участок кожи,

• Для защиты кожи от внешнего воздействия: распылить средство на очищенный участок кожи и втереть легкими массирующими движениями.

6. При наличии проблемной кожи: делать аппликации средстве на пораженный участок кожи Для этого нанести масло на ватный диск и прикладывать к проблемному месту дважды в день на 5-10 минут

7. При наличии дефектов кожи: распылить средство непосредственно на дефект кожи, такой как. бородавка, папиллома, сухая мозоль Повторять процедуру утром и вечером.

8. Питательная маска для волос: распылить небольшое количество масла на корни волос, втереть, оставить на 25-30 минут, после чего смыть шампунем.

9. Массажное масло для укрепления ногтей: распылить средство на марлевый тампон и тщательно втереть в ногтевые пластины. Не смывать. Использовать 2-3 раза в течение дня.

10. Уход за губами: распылить средство на ватный тампон и прикладывать к пораженному участку на 15-20 минут.

11. При опрелости: распылить средство на место образования опрелости и втереть легкими движениями. Процедуру повторять 2-3 раза в день

Органическое эфирное масло чайного дерева.

(30 мл). Now Foods

100% pure tea tree oil.

 

С самого начала нужно определиться с тем, чтоэфирное масло чайного дерева не получают путем переработки чайного листа, это масло вырабатывают способом перегонки с водяным паром составляющих деревьев и кустарников мелалеуки. Melaleuca alternifolia — так называетсячайное дерево, относящееся к семейству миртовых, которое растет в Малайзии и в Австралии. Чайное дерево может быть как дикорастущим, так и культурно выращенным.Чайное дерево вырастает довольно больших размеров, является растением долгожителем и хорошо приспосабливается к колебаниям климата.

Состав эфирного масла чайного дерева

Состоит эфирное масло чайного дерева из 40%-50% монотерпенов, до 40% дитерпенов и от 3% до 15% цинеола. Если процент содержания цинеола выше, то масло может вызвать раздражение кожи. Если дитерпенов в масле более 30%, то это говорит о его высокой эффективности.

Лечебные свойства эфирного масла чайного дерева

Особенно эффективным масло чайного дерева считается в лечебных целях, именно поэтому в Австралии оно является одним из обязательных составляющих практически каждой аптечки.

Являясь прекрасным антисептиком, масло чайного дерева имеет также сильные противовоспалительное и противовирусное свойства. Этим объясняется его наличие в средствах для ингаляций и массажных составах при простудных заболеваниях, гриппе, бронхите, синусите, кашле и даже ангине. Эфирное масло чайного дереватакже способно снижать температуру тела и показано при лихорадочных состояниях. Обладая ранозаживляющим действием, эфирное масло чайного деревалечит ожоги и инфекции кожных покровов (ветряную оспу, герпес, экзему), оно нейтрализует действие ядов при укусах насекомых. Масло чайного дерева укрепляет иммунитет.

Масло чайного дерева – это прекрасный антисептик, оно обладает этим свойством даже в большей степени, чем известные масла эвкалипта и розмарина.

Помогая практически при всех простудных заболеваниях, эфирное масло чайного дерева может воздействовать как само по себе, так и сочетаясь с другими маслами. Если проблема — это грипп, ангина, отит, бронхит или кашель, то рекомендуется делать ингаляции с применением эфирного масла чайного дерева или использовать его в аромалампе. Для снижения высокой температуры показан потогонный чай смаслом чайного дерева: 3 капли масла на стакан теплой жидкости. Также во время простудного заболевания эфирное масло чайного дерева способствует стимуляции иммунной системы организма человека.

Применение эфирного масла чайного дерева

Спектр действия масла чайного дерева широк, его применяют при угревой сыпи и гнойничковой инфекции. Оно показано при дерматитах вирусных, бактериальных и паразитарных видов.

Масло применяется при лечении растяжений, ушибов, ссадин, порезов и ожогов.

Еще одним полезным свойством эфирного масла чайного дерева является то, что оно прекрасно дополняет терапию как острых, так и хронических эмоциональных расстройств. Это масло особенно показано людям с повышенной тревожностью и неустойчивой психикой. Им даже рекомендуется всегда носить с собой флакончик сэфирным маслом чайного дерева, чтобы в случае острой необходимости вдохнуть аромат этого масла, для успокоения нервов.

Не только людям подверженным стрессам, но и всем остальным в трудные жизненные периоды рекомендуется аромат чайного дерева, его можно нанести на шарф, шейный или носовой платок, на галстук и даже под воротничок рубашки. Это позволит почувствовать себя более уверенно, раскованно и свободно, а усилить действие чайного масла можно сочетая его, например, с лавандовым эфирным маслом.

С помощью аромата эфирного масла чайного дерева можно также повысить работоспособность, концентрацию внимания, снять усталость и повысить сопротивляемость организма, сокращая период реабилитации после заболеваний.

Даже на воздух эфирное масло чайного дерева влияет благотворно, дезинфицируя его и препятствуя распространению инфекции.

Эфирное масло чайного дерева можно комбинировать с другими эфирными маслами, а можно применять и самостоятельно.

В косметических целях масло чайного дерева можно использовать ежедневно дляухода за жирной кожей, оно поможет при зуде, угревой сыпи, выпадении волос,перхоти и бородавках.

Способы применения масла чайного дерева. Лечение маслом чайного дерева

Растирание на коже. При усиленном потоотделении: смешать и растереть 5 капель эфирного масла чайного дерева, 2 капли масла шалфея и 1 каплю эфирного масла розмарина.

Аромалампа. При приступах удушья и бронхиальной астме: 1 капля эфирного масла чайного дерева, 1 капля масла мелиссы, 1 капля масла розы.

Средства для волос. Обогатить шампунь можно, добавив в него от 5 до 10 капель чайного масла на один раз применения. Также можно сделать и кондиционер для волос более полезным. Этот же рецепт может помочь тем, кого беспокоит перхоть.

Если ваши волосы слишком сухие, то сделайте раствор из 3 капель эфирного масла чайного дерева и стакана горячей воды и смочите в нем расчески и щетки для волос. Можно этим же раствором опрыскать белье.

Лосьон при лечении акне: 15 капель масла чайного дерева, 25мл настоя шалфея плюс 60мл «Розовой» воды.

Лосьон для пористой и жирной кожи: в 100мл теплой (не горячей) воды растворить не более 12 капель масла чайного дерева и протереть чистую кожу лица.

При герпесе используется смесь 5 кап. масла чайного дерева и 5мл соевого масла.

Ингаляции следует проводить по следующей схеме: в свежезаваренный чай капнуть 3-5 капель чайного масла и накрыть чашку ладонями, затем выдохнут, убрать руки и образовавшийся пар вдохнуть (повторить 5 раз), после чего сделать 8-10 носовых вдохов и выдохов.

Ванна: 5 капель эфирного масла чайного дерева смешать с 10мл молока (можно меда) и влить в воду. Температура воды в самой ванне должна быть 37-38 градусов, а время принятия ванны – не более 20 минут.

Ячмень: паровая баня для лица: 2-3 капли эфирного масла чайного дерева капнуть в миску с горячей водой и парить лицо над этим составом не менее 5 минут.

Полезные свойства эфирного масла чайного дерева от укусов насекомых: 1 капля масла чайного дерева на место укуса насекомого.

Масло чайного дерева также применяют для дезодорирующих и антисептическихванночек для ног.

Перед применением необходимо обязательно проверить масло на индивидуальную непереносимость. Масло противопоказано беременным женщинам и детям до шестилетнего возраста.

Интересно, что помочь это эфирное масло может не только нам, но и братьям нашим меньшим, избавив собак и кошек от неприятного соседства – от блох.

Использование эфирного масла чайного дерева не только не повредит здоровым тканям и не вызовет раздражения, важным преимуществом эфирного масла чайного дерева является то, что оно не имеет побочных эффектов.

Маслo чайного дерева (Tea Tree Oil)

Описание

100 %-ое масло австралийского чайного дерева

Код: RU1777 

Чайное дерево на самом деле не дерево и не имеет никакого отношения к чаю. Это кустарник, ботаническое название его Мелалеука (Melaleuca alternifolia), принадлежит он к семейству Миртовые и произрастает в Австралии. Чайным деревом назвал его Д. Кук, который научился от австралийских аборигенов заваривать листья растения (напиток напоминал капитану его любимый английский чай). Листья чайного дерева, как и других растений семейства Миртовые (мирт, эвкалипт и др.), содержат эфирное масло, обладающее многими целебными свойствами, в первую очередь, антисептическим, антибактериальным, противовирусным и противогрибковым.

Бактерицидное действие масла чайного дерева обусловлено присутствием в его составе активных веществ – терпинен-4-ола и 1,8-цинеола. Способ использования масла (1 – нанесение на кожу, 2 – добавление в воду для ванны или 3 – вдыхание в ингаляции) зависит от процентного содержания этих веществ. Для первых двух способов подходит только масло высшего качества, содержащее порядка 40 % терпинен-4-ола и не более 5 % цинеола (так как цинеол оказывает раздражающее воздействие на кожу и слизистые). Австралийский стандарт запрещает применение масла чайного дерева, содержащего более 15 % цинеола.

Масло чайного дерева считают противомикробным средством широкого спектра действия. К маслу чайного дерева чувствительны грамотрицательные аэробные бактерии Citrobacter spp., Escherichia coli, Shigella sonnei, Klebsiella pheuraoniac, Proteus mirabolis, Legioneila spp., Pseudomonas aeriginosa; грамположительные аэробные бактерии Staphylococcus aureus, Staphylococcus erider-midis, Staphylococcus pneumoniae, Staphyiococcus faecalis, Staphylococcus pyrogenes, Staphylococcus agalactiae, Propionibacterium acnes, Beta haemolytic steptococcus, грибы Candida albicans, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Microsporuv canis, Microsporum gypseum, Thermoactionomycetes vulgaris. Спектр противомикробной активности масла чайного дерева установлен также и в отношении некоторых внутриклеточных возбудителей.

Масло чайного дерева обладает также иммуностимулирующим действием.

Применение (подробно о применени Масла чайного дерева, читайте здесь)

  • На раны (кроме рваных и резаных), порезы, ссадины, легкие ожоги (в том числе солнечные) нанести масло тонким слоем. Повязку можно не накладывать. Кроме ускорения заживления масло чайного дерева обеспечивает также уменьшение образования рубцов.
  • При угревой сыпи, гнойничковых поражениях кожи, грибковых заболеваниях несколько капель масла нанести на пораженную кожу и слегка втереть. Масло чайного дерева не вызывает таких побочных эффектов, как шелушение кожи, зуд и сухость.
  • При укусах и ужалении насекомых слегка протереть чистым маслом место укуса для снятия зуда и воспаления.
  • Компрессы и массаж на основе масла чайного дерева (3–5 % в композиции) помогают снять боль при миалгии, миозитах, а также после ушибов, вывихов, растяжений и других травм опорно-двигательного аппарата.
  • При пародонтозе, фарингите, стоматите и других инфекционно-воспалительных заболеваниях полости рта в раствор для полоскания добавить несколько капель масла чайного дерева (необходимо строго следовать прилагаемой инструкции, которая содержит подробные указания по приготовлению раствора).
  • С помощью этого же раствора можно избавиться от неприятного запаха изо рта.
  • Масляно-паровые ингаляции с маслом чайного дерева не только снимают симптоматические проявления простудных заболеваний (гриппа, бронхита и др.), но и оказывают противовоспалительный, смягчающий, отхаркивающий и успокоительный эффект. Добавление в ванну нескольких капель масла способствует интенсивному потоотделению, что благотворно сказывается на общем состоянии при повышенной температуре тела.
  • Лихорадка на губах проходит значительно быстрее, если смазать ее маслом чайного дерева. Так же можно ускорить течение ветрянки (обрабатывая маслом пузырьки).
  • Спринцевания раствором масла чайного дерева (а также пропитанные маслом тампоны) помогают уничтожить патогенную флору влагалища и излечить трихомонадный вагинит, кандидоз, цервицит, хронический эндоцервицит, а также устранить гиперсекрецию вагины. Для мужчин можно использовать как средство интимной гигиены органов воспроизведения в целях профилактики передачи вирусной, бактериальной и грибковой инфекции половым путем.
  • Ванны и массаж с маслом чайного дерева в качестве профилактического средства восстанавливают силы, повышают общий тонус. В ведущих европейских клиниках этот метод используют перед сложными хирургическими операциями для облегчения течения послеоперационного периода.
  • Масло чайного дерева обладает сильным инсектицидом и противопаразитарным действием против комаров, вшей, чесоточных клещей.
Масло чайного дерева должно быть в каждой аптечке – домашней, автомобильной, походной.

Рекомендации

Перед первичным применением масла чайного дерева необходимо провести кожную проб. Нанесите 1–2 капли масла на тыльную сторону запястья. Если через час в месте нанесения появилось покраснение, смойте масло холодной водой и смажьте место покраснения любым нейтральным кремом. В случае описанной повышенной чувствительности кожи не применяйте неразбавленное масло непосредственно на кожные покровы – используйте слабый раствор. Разбавляйте масло чайного дерева дистиллированной водой или масляным витамином Е.

Как и любые другие эфирные масла, беременным женщинам и детям до 6 лет масло чайного дерева применяют с осторожностью и только в разбавленном вдвое виде (в первом триместре беременности и для детей в возрасте до полутора лет от употребления масла рекомендуется воздержаться).

Решение о приеме масла чайного дерево вовнутрь принимает только врач-специалист.

Состав: 100% Australian tea tree oil (Melaleuca alternifolia).

Форма выпуска: флакон из темного стекла 15 мл.

Хранить в плотно закрытом флаконе в защищенном от света прохладном месте. Не переливать в пластмассовую емкость. Беречь от детей и домашних животных.

Предупреждение: не допускать попадания неразведенного масла на открытые раны и слизистые. Не принимать вовнутрь.

Оставьте свой комметарий или отзывы о Маслo чайного дерева (Tea Tree Oil):

Шампунь для собак и кошек с маслом чайного дерева Tea Tree Oil shampoo (ГлобалВет), фл. 150 мл

СОСТАВ И ФОРМА ВЫПУСКА
Шампунь Глобалвет в своем составе содержит двунатриевый лауретсульфосукцинат, кокамидопропилбетаин, кокамид ДЭА, глицерил изостеарат, масло чайного дерева, касторовое масло, витамин Е, ПЭГ-15, ПЭГ-40, поликватерниум-10, лимонную кислоту, бензиловый спирт, метилхлороизотиазолин, метилизотиазолин и воду. По внешнему виду представляет собой опалесцирующую вязкую жидкость белого цвета со специфическим запахом. Расфасовывают по 150 мл в полимерные флаконы.
 
СВОЙСТВА
Шампунь Глобалвет содержит натуральное масло чайного дерева, одним из важнейших компонентов которого является терпиненол, который и оказывает выраженный бактерицидный и противогрибковый эффект на коже. Масло чайного дерева применяют как антисептическое и ранозаживляющее средство, хорошо помогает при ожогах, порезах, небольших ранах и укусах насекомых. Витамин Е (токоферола ацетат) широко используется в медицинской, косметологической и пищевой промышленности в качестве природного антиоксиданта. Токоферол связывает свободные радикалы, которые вызывают преждевременное старение кожи, ускоряет регенерацию эпителия, снижает риск образования рубцовой ткани. Оказывает положительный эффект в лечении ряда кожных заболеваний: экзем, язв и лишая. Касторовое масло увлажняет и питает кожу и волосяные фолликулы. Шампунь Глобалвет при местном нанесении обладает увлажняющими и дезодорирующими свойствами, хорошо смешивается с водой, обладает превосходными пенообразующими и моющими свойствами. При регулярном использовании визуально увеличивается объем и густота шерсти, значительно улучшается состояние кожно-волосяного покрова. Шерсть становится более гладкой и блестящей, приобретая здоровый и ухоженный вид. При применении шампуня у животных не отмечается местнораздражающего, резорбтивно-токсического и сенсибилизирующего действия.
 
ПОКАЗАНИЯ
Назначают собакам и кошкам для гигиенического ухода за кожно-волосяным покровом. Для ухода за проблемной кожей животных.
 
ДОЗЫ И СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ
Шампунь в необходимом количестве нанести на влажную шерсть животного массирующими движениями до образования густой пены в течение нескольких минут. Затем тщательно промыть шерсть водой и высушить полотенцем или при помощи фена.
 
ПОБОЧНЫЕ ДЕЙСТВИЯ
При правильном использовании и дозировке побочные явления, как правило, не наблюдаются.
 
ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ
Индивидуальная повышенная чувствительность к компонентам шампуня.
 
ОСОБЫЕ УКАЗАНИЯ
При правильном использовании средства не предусмотрены.
 
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ
В сухом, защищенном от прямых солнечных лучей и недоступном для детей и животных месте, отдельно от пищевых продуктов и кормов при температуре не выше 25 ºС. Срок годности — 5 лет.

нота чайного дерева в духах

Чайное дерево имеет латинское название «Melaleuca alternifolia» и представляет собой дерево из семейства миртовых. Растение распространено в Новом Южном Уэльсе, Австралия. Это дерево предпочитает болотистые почвы, хотя возделывается как культурное растение. Его высота не превышает шести метров, оно внешне похоже на кипарис. Свойства чайного дерева известны издавна, австралийские аборигены применяли его листья для заживления ран. В Европе его узнали в 30-е годы XX века, когда стали использовать древесное растение в качестве антисептика. Масло чайного дерева в период Второй мировой войны даже включали в медицинские комплекты австралийских солдат. Аромат эфирного масла: терпкий и едкий.

Эфирное масло чайного дерева получают из листьев и цветков древесного растения путем дистилляции или перегонки с водяным паром. Его главное свойство — способность укреплять иммунную систему организма. Оно особенно ценится как сильное антисептическое средство, применяется при гриппе, катаре и герпесе. Масло чайного дерева, обладая антивирусным и бактерицидным свойствами, помогает бороться с различными инфекциями, в том числе с инфекциями мочеполовой системы.

Эфирное масло чайного дерева

В своих трудах по эфирным маслам и душистым веществам знаменитый российский учёный Станислав Амвросьевич Войткевич отмечал:

Масло чайного дерева имеет английское название — «Tea-Tree Oil» или «Ti-Tree Oil», французское — «essence d’arbe a the», немецкое — «Tea Treeol».

Название «чайное дерево» появилось у первых колонистов Австралии, которые, используя опыт аборигенов, заваривали листья «Melaleuca alternifolia» вместо чая. Коренные жители Австралии употребляли листья чайного дерева для лечения ран. Позднее было установлено, что само растение, отвары его листьев и эфирное масло обладают сильными антисептическими свойствами и могут с успехом применяться для лечения ряда тропических болезней. Небольшие деревья или кусты чайного дерева растут в диком виде в Юго-Восточной части Австралии.

В прежние годы эфирное масло получали в примитивных аппаратах с огневым обогревом. Теперь используется отгонка с острым паром, причем стараются отогнать не только легколетучую часть масла, но и сесквитерпеновые соединения. Выход масла достигает 1,8 процентов, считая на загруженное сырьё. Как показали исследования австралийских ученых, вид «Melaleuca alternifolia Maid.» имеет три физиологические формы, продуцирующие эфирные масла, сильно отличающиеся по составу.

Химический состав эфирного масла чайного дерева

В маслах чайного дерева, полученных из различных форм растения, были обнаружены следующие компоненты, определяющие медико-биологические и парфюмерные свойства: альфа-пинен- 2,1 процента, бета-пинен — 0,4 процента, мирцен — 0,4 процента, альфа-терпинен — 7,1 процента, лимонен — 1,4 процента, 1,8-цинеол — 3,0 процента, гамма-терпинен — 15,7 процента, пара-цимол — 6,2 процента, терпинелен — 3,4 процента, терпинен-4-ол — 45,4 процента, альфа-терпинеол — 5,3 процента. Количество сесквитерпеновых соединений составляет около 4 процентов.

По мнению австралийских специалистов, основным бактерицидным компонентом масла чайного дерева является терпинен-4-ол, а 1,8-цинеол при повышенных концентрациях способен вызывать раздражение кожи чувствительных людей. Поэтому австралийский стандарт на масло чайного дерева установил, что продажное масло не должно содержать больше 15 процентов 1,8-цинеола и меньше 30 процентов терпинен-4-ола. Это мнение, правда, не подтверждается результатами медико-биологических испытаний самого 1,8-цинеола, выполненными RIFM в 1975 году. Эти результаты показали, что даже 16-процентный раствор 1,8-цинеола в петролятуме не вызывает за 48 часов ни раздражения кожи человека, ни реакции сенсибилизации. Возможно, что в случае масла чайного дерева дело не только в количестве 1,8-цинеола.

Поскольку в Австралии во все большем масштабе создаются плантации чайного дерева, посадочный материал (семена) специально отбирается, чтобы устранить формы с высоким содержанием 1,8-цинеола.

Масло чайного дерева представляет собой желтоватую жидкость с пряным запахом и оттенками запаха кардамона и мускатного ореха. Для парфюмерных целей масло чайного дерева используется в небольшом количестве. Оно все больше применяется в косметических кремах, лосьонах и шампунях, а также в медицинской и зубоврачебной практике.

Оптовая цена масла чайного дерева с 1990 года выросла в три раза. В 1997 году она составила 450 французских франков за килограмм. Для подтверждения подлинности лучше всего использовать газожидкостную хроматографию.

Применение масла чайного дерева в ароматерапии

Действие эфирного масла чайного дерева на организм человека: антисептическое, бактерицидное, антибиотические, бальзамическое, инсектицидное, отхаркивающее, противовирусное, противозудное, противогрибковое, рубцующее, общестимулирующее, потогонное. Руководства по ароматерапии рекомендуют использовать это масло при герпесе, молочнице, грибковых заболеваниях. Говорят, что оно способно излечивать легочные заболевания и ослабление иммунной системы.



Вам могут нравиться ароматы

Вас могут интересовать бренды

Вам могут понравиться ноты

Масло чайного дерева серии «Природный антисептик»

Дата обновления страницы 16.11.2020

Условия хранения

В защищенном от прямого солнечного света месте, при температуре 5–15 °C

Хранить в недоступном для детей месте.

Срок годности

2 года

Не применять по истечении срока годности, указанного на упаковке.

Отзывы

Оставьте свой комментарий

Состав эфирного масла и антимикробное взаимодействие малоизученных видов чайного дерева

https://doi. org/10.1016/j.sajb.2014.01.005Get rights and content

Основные моменты

Ежемесячный состав эфирного масла за год сообщается для отдельных видов чайного дерева.

Многообещающая антимикробная эффективность была очевидна, при этом было достигнуто самое низкое значение МПК 0,06 мг/мл.

При комбинировании масел чайного дерева преобладали аддитивные эффекты.

Антагонизм в комбинациях чайного дерева не отмечен.

Abstract

Состав эфирного масла трех видов Myrtaceous ( Leptospermum petersonii , Leptospermum scoparium и Kunzea ericoides ), принадлежащих к группе чайного дерева, анализировали с использованием газа ). Основные соединения, определенные из среднего значения ± стандартное отклонение ежемесячных проб, собранных в течение одного календарного года в 90 033 л.petersonii : цитронеллаль (11,4 ± 4,3%), цитронеллол (17,5 ± 7,1%), нераль (19,7 ± 1,6%) и гераниал (34,7 ± 3,3%). Основными соединениями в L. scoparium являются эвдесма-4(14)-11-диен (11,6 ± 2,4%), α-селинен (10,4 ± 2,3%) и ( E )-метилциннамат (12,6 ± 3,8%). ). Основными соединениями в K. ericoides являются α-пинен (37,6 ± 6,3%) и p -цимол (13,5 ± 4,1%). Эфирные масла демонстрируют многообещающую антимикробную активность в отношении отдельных микроорганизмов при исследовании с использованием анализа минимальной ингибирующей концентрации.Самая высокая чувствительность была отмечена для рода Brevibacteria (наименьшее значение МПК 0,06 мг/мл), вызывающего запах ног. Когда различные эфирные масла были объединены в различных соотношениях и испытаны против Staphylococcus aureus , Pseudomonas aeruginosa и Candida albicans , был отмечен преимущественно аддитивный эффект. Химический составscoparium

Рекомендуемые статьиСсылки на статьи (0)

Copyright © 2014 Южноафриканская ассоциация ботаников. Опубликовано Elsevier B. V. Все права защищены.

Рекомендуемые статьи

Ссылки на статьи

Восприимчивость псевдомонад к маслу и компонентам Melaleuca alternifolia (чайного дерева) | Журнал антимикробной химиотерапии

Аннотация

Целью : Тридцать изолятов псевдомонас Aeruginosa , 15 изолятов псевдомонас Putida и 11 изолятов псевдомонас флуоресцен были проверены на восприимчивость к чайным деревом (TTO), эфирным маслом Melaleuca edhberifolia , а также компоненты терпинен-4-ол, α-терпинеол, цинеол, γ-терпинен и ρ-цимол.

Методы : МИК определяли микроразведением бульона в среде Мюллера-Хинтона с добавлением 0,002% (об./об.) Твин 80. об/об) или меньше. Восприимчивость к тестируемым компонентам различалась у разных видов.

Выводы : Pseudomonas spp. чувствительны к TTO и некоторым его компонентам, хотя они менее чувствительны, чем многие другие протестированные ранее бактерии.

Введение

Масло чайного дерева (ТТО), полученное из местного австралийского растения Melaleuca alternifolia (Myrtaceae), зарекомендовало себя как альтернативное местное противомикробное средство с антибактериальными, противовирусными и противогрибковыми свойствами, подтвержденными как in vitro , так и в растущем количестве клинических испытаний. 1 Хотя такие организмы, как Staphylococcus aureus (включая устойчивые к метициллину S.aureus ) и Escherichia coli относительно чувствительны к противомикробному действию ТТО и его компонентов, 1–3 с МПК 0,5% и 0,25% соответственно, один микроорганизм, который оказался более устойчивым, — это Pseudomonas aeruginosa . MIC микроразведений бульона для P. aeruginosa колеблется от 1% до 8%; однако было протестировано лишь небольшое количество штаммов с размером выборки менее 5. 4 Оппортунистический патоген, демонстрирующий высокий и растущий уровень множественной лекарственной устойчивости, 5,6 P. aeruginosa остается основным возбудителем внутрибольничных инфекций. Учитывая текущий дефицит опубликованных данных о чувствительности к ТТО у рода Pseudomonas и устойчивости к обычным антибиотикам у P. aeruginosa , целью этого исследования было выяснить четкий профиль чувствительности для P. aeruginosa . как Pseudomonas putida и Pseudomonas fluorescens .

Материалы и методы

Тридцать П.aeruginosa были получены из коллекции культур стерильных участков (SSCC) отдела микробного загрязнения Лабораторной медицины PathWest WA, Недлендс. Два изолята P. fluorescens и один изолят P. putida также были получены из SSCC. Эталонные штаммы P. fluorescens NCTC 4755 и P. putida NCTC 10936 были получены из коллекции культур кафедры микробиологии и иммунологии Университета Западной Австралии.Остальные восемь изолятов P. fluorescens и 13 изолятов P. putida были изолятами почвенного происхождения, идентифицированными в нашей лаборатории. Для выделения видов Pseudomonas были использованы шесть образцов почвы с плантации чайного дерева и два образца почвы с местных садовых грядок. Один грамм почвы смешивали с 5 мл физиологического раствора и после энергичного встряхивания образцы оставляли при комнатной температуре на 1 час. После дальнейшего встряхивания образцы последовательно разбавляли и распределяли по предварительно высушенным агаровым пластинам Pseudomonas с добавлением цетримида, фуцидина и цефалоспорина (Oxoid, Basingstoke, UK).Изоляты были идентифицированы до уровня рода с помощью серии биохимических тестов и идентифицированы до уровня вида с использованием полосок API20NE (bioMérieux, Marcy l’Étoile, Франция).

TTO (партия W/E504) любезно предоставлена ​​компанией Australian Plantations Pty Ltd, Уайралла, Новый Южный Уэльс, Австралия. Уровни компонентов, определенные с помощью хромато-масс-спектрометрического анализа, и диапазон, указанный в международном стандарте 7 (указаны в скобках), были следующими: 40,3% (>30%) терпинен-4-ол, 19. 7% (10–28%) γ-терпинен, 8,6% (5–13%) α-терпинен, 3,2% (следы–15%) 1,8-цинеол, 3,2% (1,5–5%) терпинолен, 3,1% (1,5–8 %) α-терпинеол, 2,4 % (1–6 %) α-пинен, 2,4 % (0,2–12 %) ρ-цимол, 1,6 % (след – 7 %) аромадендрен, 1,2 % (след – 8 %) δ-кадинен, 1,0% (0,5–4%) лимонен, 0,5% (след-3%) глобулол, 0,4% (след-1,5%) виридифлорол и 0,1% (след-3,5%) сабинен. Терпинен-4-ол (чистота 100%) был предоставлен SNP Natural Products (Сидней, Новый Южный Уэльс, Австралия). Цинеол (чистота 99%) и α-терпинеол (чистота 95%) были приобретены у Sigma Chemical Company (Сент-Луис, Миссури, США).γ-терпинен (чистота 97%) и ρ-цимол (чистота 99%) были приобретены у Aldrich Chemical Company (Милуоки, Висконсин, США). Терпинен-4-ол и α-терпинеол были выбраны на основании их известной противомикробной активности 2 и того факта, что они составляют ~40% ТТО. Цинеол был выбран, поскольку он обладает некоторой антимикробной активностью, а его концентрация в TTO частично изменялась в ответ на неправильное представление о том, что он вызывает раздражение кожи. 1,2 Были выбраны γ-терпинен и ρ-цимол, так как они составляют до 30% ТТО.

Чувствительность изолятов Pseudomonas к TTO, терпинен-4-олу, γ-терпинену, цинеолу, α-терпинеолу и ρ-цимолу определяли с использованием метода микроразведений в бульоне на основе рекомендаций CLSI. 8 Бульон Мюллера-Хинтона (MHB; Oxoid) был дополнен 0,002% (об./об.) Tween 80 (Sigma) (MHB-T) для улучшения диспергирования ТТО или компонентов. Исходный раствор ТТО или компонента с удвоенной конечной концентрацией готовили в MHB-T и энергично перемешивали на вортексе. Это использовали для приготовления серийных удвоенных разведений в 96-луночном планшете в диапазоне 0.03–8% (об./об.). Ночные бульонные культуры микроорганизмов в MHB регулировали в MHB-T таким образом, чтобы конечная концентрация в каждой лунке после инокуляции микротитрационного планшета составляла ~5,0 × 10 5 КОЕ/мл. Концентрации инокулята подтверждали подсчетом жизнеспособных клеток; после серийного 10-кратного разведения инокулята в стерильной дистиллированной воде четыре образца по 10 мкл из соответствующего разведения высевали на хорошо высушенные чашки с кровяным агаром. После инкубации при 37°С в течение 18–24 ч подсчитывали количество КОЕ и рассчитывали концентрацию инокулята.После 18 часов инкубации планшетов при 37°C МИК была самой низкой концентрацией ТТО, при которой лунка была чистой. Десять микролитров из каждой лунки точечно инокулировали на предварительно высушенный питательный агар (NA) и инкубировали в течение ночи при 35°C для определения MBC. МБК определяли как концентрацию ТТО или компонента, убивающую 99,9% инокулята. Эксперименты проводились не менее трех раз и выбиралось модальное значение.

Профили чувствительности изолятов к антибиотикам определяли с использованием метода разбавления агара с утвержденными пограничными значениями для определения чувствительности и резистентности. 8 Испытываемыми антибиотиками были цефепим, цефтазидим, ципрофлоксацин, гентамицин, меропенем, тикарциллин/клавуланат и тобрамицин.

Результаты и обсуждение

В таблице 1 показаны результаты чувствительности изолятов Pseudomonas к ТТО и двум из пяти протестированных компонентов масла. Различий в восприимчивости почвенных и клинических изолятов не было. И P. aeruginosa , и P. fluorescens имели значения MIC 90 и MBC 90 , равные 4% для TTO.Аналогичные значения были получены для α-терпинеола. МИК 90 и МБК 90 для терпинен-4-ола по сравнению с P. aeruginosa составляли >8%, тогда как для P. fluorescens значения составляли 2% и >8% соответственно. Изоляты P. putida имели более низкие МБК для ТТО (1%) и α-терпинеола (2%), в то время как МБК 90 для терпинен-4-ола составляло 4%. Значения MIC и MBC для γ-терпинена, цинеола и ρ-цимола превышали 8% для всех протестированных псевдомонад. Как и в предыдущих исследованиях, 2 терпинен-4-ол и α-терпинеол были наиболее активны, в то время как цинеол, γ-терпинен и ρ-цимол были менее активны.

Таблица 1

МИК и МБК микроразведений бульона (%) ТТО и компонентов против видов псевдомонад

9 9
. P. aeruginosa ( n = 30) . P. putida ( n = 15) . P. fluorescens ( n = 11) .
.
.

.

.
Масло/компонент . Микрофон 50 . Микрофон 90 . МБК 50 . МБК 90 . Микрофон 50 . Микрофон 90 . МБК 50 . МБК 90 . Микрофон 50 . Микрофон 90 . МБК 50 . МБК 90 . 90 230
Масло чайного дерева 2 4 2 4 1 1 1 1 2 4 2 4
терпинен -4-ol 2 > 8 > 8 > 8 > 8 1 2 1 4 1 2 2 > 8
α- TerpineOL 2 2 2 4 2 2 2 2 2 4 2 4
9 2 9 9
. P. aeruginosa ( n = 30) . P. putida ( n = 15) . P. fluorescens ( n = 11) .
.
.

.

.
Масло/компонент . Микрофон 50 . Микрофон 90 . МБК 50 . МБК 90 . Микрофон 50 . Микрофон 90 . МБК 50 . МБК 90 . Микрофон 50 . Микрофон 90 . МБК 50 . МБК 90 . +
Масло чайного дерева 2 4 2 4 1 1 1 1 2 4 2 4
терпинен -4-ol 2 > 8 > 8 > 8 > 8 1 2 1 4 1 2 2 > 8
α- TerpineOL 2 2 2 4 2 2 2 2 4 2 4
Таблица 1

бульон Microdilation Mics и MBC %) ТТО и компонентов против видов псевдомонад

9 9
. P. aeruginosa ( n = 30) . P. putida ( n = 15) . P. fluorescens ( n = 11) .
.
.

.

.
Масло/компонент . Микрофон 50 . Микрофон 90 . МБК 50 . МБК 90 . Микрофон 50 . Микрофон 90 . МБК 50 . МБК 90 . Микрофон 50 . Микрофон 90 . МБК 50 . МБК 90 . 90 230
Масло чайного дерева 2 4 2 4 1 1 1 1 2 4 2 4
терпинен -4-ol 2 > 8 > 8 > 8 > 8 1 2 1 4 1 2 2 > 8
α- TerpineOL 2 2 2 4 2 2 2 2 2 4 2 4
9 9 2 9 9 9049

Профили антибиотики Профили из трех видов представлены в таблице 2. Все 56 изолятов были чувствительны к цефепиму, а все изоляты P. fluorescens и P. putida были чувствительны к ципрофлоксацину, гентамицину, меропенему и тобрамицину.

Таблица 2

Профили чувствительности к антибиотикам Pseudomonas spp. определяется методом разведения в агаре (% восприимчивых)

. P. aeruginosa ( n = 30) . P. putida ( n = 15) . P. fluorescens ( n = 11) .
.
.

.

.
Масло/компонент . Микрофон 50 . Микрофон 90 . МБК 50 . МБК 90 . Микрофон 50 . Микрофон 90 . МБК 50 . МБК 90 . Микрофон 50 . Микрофон 90 . МБК 50 . МБК 90 .
Масло чайного дерева 2 4 2 4 1 1 1 1 2 4 2 4
терпинен -4-ol 2 > 8 > 8 > 8 > 8 1 2 1 4 1 2 2 > 8
α- TerpineOL 2 2 2 2 4 2 2 2 2 4 2 4
. Организм (количество протестированных изолятов) .
.
.
Антибиотик . P. aeruginosa (30) . P. fluorescens (11) . П. путида (15) . +
Цефепит 100 100 100
Цефтазидит 80 91 87
Ципрофлоксацин 80 100 100
Гентамицина 73 100 100
Меропенем 90 100 100
Ticarcillin / клавуланат 87 0 13
тобрамицина 87 100 100 
. Организм (количество протестированных изолятов) .
.
.
Антибиотик . P. aeruginosa (30) . P. fluorescens (11) . П. путида (15) .
Цефепит 100 100 100
Цефтазидит 80 91 87
Ципрофлоксацин 80 100 100
Гентамицина 73 100 100
Меропенем 90 100 100
Ticarcillin / клавуланат 87 0 13
тобрамицина 87 100 100 
Таблица 2определяется методом разведения в агаре (% восприимчивых)

. Организм (количество протестированных изолятов) .
.
.
Антибиотик . P. aeruginosa (30) . P. fluorescens (11) . П. путида (15) .+
Цефепит 100 100 100
Цефтазидит 80 91 87
Ципрофлоксацин 80 100 100
Гентамицина 73 100 100
Меропенем 90 100 100
Ticarcillin / клавуланат 87 0 13
тобрамицина 87 100 100 
. Организм (количество протестированных изолятов) .
.
.
Антибиотик . P. aeruginosa (30) . P. fluorescens (11) . П. путида (15) . 90 230
Цефепит 100 100 100
Цефтазидит 80 91 87
Ципрофлоксацин 80 100 100
Гентамицина 73 100 100
Меропенем 90 100 100
Ticarcillin / клавуланат 87 0 13
тобрамицина 87 100 100 

стр.aeruginosa и другие Pseudomonas spp. известны своей причастностью к внутрибольничным инфекциям и резистентностью к антибиотикам. Необходимы дополнительные или альтернативные методы лечения Pseudomonas кожных и раневых инфекций, которые не поддаются лечению обычными антибиотиками. TTO становится альтернативным противомикробным агентом, безопасным для местного применения. 9 Доступно большое количество продуктов, содержащих ТТО в качестве активного противомикробного агента, но имеются ограниченные данные in vitro о чувствительности псевдомонад к ТТО и отсутствуют клинические данные об эффективности этих продуктов при кожных инфекциях, связанных с Pseudomonas видыМногие продукты TTO, предназначенные для лечения ран или мытья рук, содержат 5–10% (вес/объем) TTO, и, учитывая, что MBC 90 TTO для P. aeruginosa составляет 4%, возможно, что использование такие местные агенты как при лечении ран, так и в других ситуациях мытья кожи могут быть полезными для предотвращения и снижения инфекции и передачи. Могут ли продукты TTO эффективно лечить кожные инфекции, при которых Pseudomonas spp. вовлечены, еще предстоит определить в клинических исследованиях.Вероятность того, что Pseudomonas spp. может развиться резистентность к ТТО, также остается и требует уточнения.

Декларации о прозрачности

Нет для объявления.

Большое спасибо Отделу микробиологии и инфекционных заболеваний PathWest Laboratory Medicine WA. Эта работа была поддержана стипендией доктора философии (UWA-82A) от Корпорации исследований и развития сельской промышленности (CJP).

Ссылки

1,  ,  .

Масло чайного дерева Melaleuca alternifolia : обзор противомикробных и других лечебных свойств

19

 (стр. 

50

62

)2,  .

Антимикробная активность основных компонентов эфирного масла Melaleuca alternifolia

,

J Appl Bacteriol

,

1995

, vol.

78

 (стр. 

264

9

)3,  ,  .

Антимикробная активность эфирных масел и других растительных экстрактов

,

J Appl Microbiol

,

1999

, vol.

86

 (стр. 

985

90

)4,  ,  .

In vitro активность масла Melaleuca alternifolia (чайного дерева) против бактерий и Candida spp. изоляты из клинических образцов

,

Br J Biomed Sci

,

2001

, vol.

58

 (стр. 

139

45

)5,  ,  , и др.

Надзор за полирезистентными штаммами Pseudomonas aeruginosa в городской клинической больнице третичного уровня

,

J Hosp Infect

,

2004

, vol.

57

 (стр. 

105

11

)6,  ,  .

Молекулярная эпидемиология выбранных бактерий с множественной лекарственной устойчивостью: глобальный отчет SENTRY Antimicrobial Surveillance Program

,

Diagn Microbiol Infect Dis

,

2004

, vol.

49

(стр.

29

(стр.

231

6

) 7

Международная организация по стандартизации

,

2004

8

Клинические лабораторные стандарты Институт

,

Методы разбавления Антимикробной восприимчивости к бактериям, которые растут в аэробологии: утвержденный стандарт M7- A7

2006

Вилланова, Пенсильвания, США

CLSI

9,  ,  , et al.

Обзор токсичности масла чайного дерева Melaleuca alternifolia

,

Food Chem Toxicol

,

2006

, vol.

44

 (стр. 

616

25

)

© Автор, 2006 г. Опубликовано Oxford University Press от имени Британского общества антимикробной химиотерапии. Все права защищены. Для получения разрешений обращайтесь по электронной почте: [email protected]

Масло чайного дерева Natures Aid 100% — сводка характеристик продукта (SmPC)

Эта информация предназначена для медицинских работников

Масло чайного дерева для ухода 100%

Масло чайного дерева Natures Aid 100%

Каждая капля содержит 100 % масла чайного дерева ( Melaleuca alternifolia (Maiden and Betch) Cheel)

Кожный раствор/концентрат для слизисто-орального раствора

Прозрачная бесцветная или бледно-желтая жидкость.

Традиционный растительный лекарственный препарат, используемый для лечения небольших поверхностных ран, укусов насекомых, небольших фурункулов (фурункулов и угрей легкой степени), для симптоматического лечения незначительных воспалений слизистой оболочки полости рта и для облегчения зуда и раздражения в случаях легких микоз стоп, основанный только на традиционном использовании.

Взрослые, пожилые люди и дети старше 12 лет:

Применение на коже:

Для лечения небольших поверхностных ран и укусов насекомых

1–3 капли неразбавленного эфирного масла для нанесения на пораженный участок с помощью ватной палочки 1–3 раза в день.

Продолжительность использования

Если симптомы ухудшаются или сохраняются более одной недели во время применения лекарственного средства, следует проконсультироваться с врачом или квалифицированным медицинским работником.

Для лечения небольших фурункулов (фурункулов и легких угрей)

25–30 капель эфирного масла, размешанных в 100 мл теплой воды, для применения в качестве пропитанной повязки на пораженные участки кожи.

Неразбавленное эфирное масло для нанесения на фурункул с помощью ватной палочки 2-3 раза в день.

Для облегчения зуда и раздражения при легком микозе стоп

6-10 капель эфирного масла в соответствующем объеме теплой воды, чтобы покрыть ноги. Делайте ванночки для ног от 5 до 10 минут в день.

Неразбавленное эфирное масло для нанесения на пораженный участок с помощью ватной палочки 2–3 раза в день.

Продолжительность использования

Не использовать более одного месяца.

Если симптомы ухудшаются или сохраняются во время применения лекарственного средства, следует обратиться к врачу или квалифицированному медицинскому работнику

Применение для полости рта

Для лечения незначительных воспалений слизистой оболочки полости рта

6–10 капель эфирного масла нужно смешать в 100 мл воды и использовать для полоскания рта или полоскания рта 2–3 раза в день.

Продолжительность использования

Если симптомы ухудшаются или сохраняются более пяти дней во время применения лекарственного средства, следует проконсультироваться с врачом или квалифицированным медицинским работником.

Применение у детей младше 12 лет не рекомендуется (см. Раздел 4.4. «Особые предупреждения и меры предосторожности при использовании»).

Повышенная чувствительность к действующему веществу или к канифоли.

Не превышайте указанную дозу.

Не проглатывать при использовании для полоскания рта или полоскания рта.

Не использовать перорально или в виде ингаляций.

Не использовать в глазах или ушах.

При появлении сыпи прекратите использование.

Для лечения небольших поверхностных ран и укусов насекомых

Если наблюдается лихорадка или признаки обострения кожной инфекции, следует обратиться к врачу или квалифицированному медицинскому работнику.

Если симптомы ухудшаются или сохраняются более одной недели во время применения лекарственного средства, следует проконсультироваться с врачом или квалифицированным медицинским работником.

Для лечения небольших фурункулов (фурункулов и легкой степени акне)

В случае сильного акне следует проконсультироваться с врачом или квалифицированным специалистом в области здравоохранения.

При отсутствии адекватного лечения акне может привести к образованию рубцов. Не используйте этот продукт и проконсультируйтесь с врачом или квалифицированным врачом, если: у вас обширное покраснение, просачивающиеся или инфицированные язвы на коже, инфицированные или воспаленные пятна, если кожа повреждена или пораженный участок внезапно воспалился.

Для облегчения зуда и раздражения при легком микозе стоп

Для ликвидации грибковой инфекции необходимо проконсультироваться с врачом или квалифицированным специалистом в области здравоохранения.

Если симптомы ухудшаются или сохраняются во время применения лекарственного средства, следует обратиться к врачу или квалифицированному медицинскому работнику

Для лечения незначительных воспалений слизистой оболочки полости рта

Не глотать.

Если симптомы ухудшаются или сохраняются более пяти дней во время применения лекарственного средства, следует проконсультироваться с врачом или квалифицированным медицинским работником.

Применение у детей в возрасте до 12 лет не установлено из-за отсутствия достаточных данных.

Безопасность при беременности и в период лактации не установлена. При отсутствии достаточных данных применение при беременности и в период лактации не рекомендуется.

Данные о фертильности отсутствуют.

Исследований влияния на способность управлять транспортными средствами и механизмами не проводилось.

Сообщалось о побочных кожных реакциях, включая жгучую боль, легкий зуд, ощущение жжения, раздражение, зуд, покалывание, эритему, отек (контактный дерматит) и другие аллергические реакции. Частота не известна.

Сообщалось о кожной реакции, похожей на ожог. Частота редкая (<1:1000).

При возникновении других побочных реакций, не упомянутых выше, следует проконсультироваться с врачом или квалифицированным медицинским работником.

Сообщение о предполагаемых побочных реакциях

Важно сообщать о предполагаемых нежелательных реакциях после регистрации лекарственного средства. Это позволяет осуществлять постоянный мониторинг соотношения польза/риск лекарственного средства. Медицинских работников просят сообщать о любых предполагаемых нежелательных реакциях через схему желтой карточки по адресу: www.mhra.gov.uk/yellowcard.

Нанесение на кожу

Не сообщалось

Применение для полости рта

Случайное проглатывание может вызвать угнетение центральной нервной системы и мышечную слабость.Однако у взрослых эти симптомы обычно исчезают в течение 36 часов.

В случае проглатывания следует наблюдать за пациентом и при необходимости применять стандартное поддерживающее лечение.

У детей прием внутрь масла чайного дерева требует неотложной медицинской помощи, требующей немедленной госпитализации и респираторной поддержки.

Не требуется в соответствии со статьей 16c(1)(a)(iii) Директивы 2001/83/ЕС с поправками

Не требуется в соответствии со статьей 16c(1)(a)(iii) Директивы 2001/83/ЕС с поправками

Имеющиеся данные не указывают на генотоксический потенциал масла чайного дерева .

Масло чайного дерева не было кластогенным при тесте на хромосомные аберрации в лимфоцитах человека in vitro и не было генотоксичным в микроядерном тесте in-vivo на мышах (до 1750 мг/кг). Данные теста Эймса неполные.

Тесты на репродуктивную токсичность и канцерогенность не проводились.

Неоткрытый :

2 года.

Открыт :

После вскрытия этот продукт следует использовать в течение 3 месяцев.По истечении этого времени выбросьте любой неиспользованный продукт.

Хранить в оригинальной упаковке в защищенном от света и тепла месте.

Убедитесь, что крышка плотно закрыта после каждого использования.

Необходимо правильное хранение и обращение, чтобы избежать образования продуктов окисления, которые имеют больший потенциал для сенсибилизации кожи.

10 или 25 мл янтарные стеклянные флаконы типа III с пластиковыми (полиэтилен/полипропилен) пробками, недоступными для открывания детьми, с пластиковой пипеткой.

Не все размеры упаковки могут продаваться.

Любой неиспользованный продукт или отходы следует утилизировать в соответствии с местными требованиями.

Торнтон и Росс Лтд.,

Линтуэйт,

Хаддерсфилд,

ХД7 5КХ,

Великобритания

границ | Противогрибковые, цитотоксические и иммуномодулирующие свойства масла чайного дерева и его производных компонентов: потенциальная роль в лечении кандидоза полости рта у онкологических больных

Введение

Многие методы лечения рака оказывают глубокое негативное воздействие на здоровье полости рта, вызывая серьезные осложнения (Dreizen, 1990).К ним относятся как неинфекционные, так и инфекционные побочные эффекты с возможностью системного распространения (Wingard, 1990). Грибковые инфекции полости рта, вызываемые преимущественно видами Candida , часто встречаются у пациентов, страдающих раком на всех стадиях заболевания, особенно у тех, кто получает паллиативную помощь (Sweeney et al. , 1998; Sweeney and Bagg, 2000; Davies et al., 2006). Известно, что Candida albicans образует сложные биопленки (Ramage et al., 2005; Ganguly and Mitchell, 2011), а другие Candida spp.также обладают этой способностью в разной степени, хотя она зависит от штамма (Silva et al., 2009). Такие биопленки образуются на ротовом эпителии или на поверхности внутриротовых протезов (Williams et al., 2011) и могут приводить к псевдомембранозному или эритематозному кандидозу.

Эффективность большинства противогрибковых средств значительно снижается, если дрожжи находятся в биопленке, а не в планктоне (Kuhn and Ghannoum, 2004; Lamfon et al., 2004; d’Enfert, 2006). Кроме того, в последние годы растет беспокойство по поводу растущей распространенности инфекций, вызванных дрожжевыми грибками, устойчивыми к обычно используемым противогрибковым препаратам (Bagg et al., 2003), с появлением штаммов C. albicans , устойчивых к азольным противогрибковым препаратам (Casalinuovo et al. , 2004), в дополнение к присущей многим дрожжам, не относящимся к albicans, сниженной чувствительности к лекарственным препаратам, которые могут быть отобраны с помощью чрезмерное использование противогрибковых препаратов (Davies et al., 2002; Bagg et al., 2003). Необходимо определить новые методы профилактики и лечения кандидоза полости рта у пациентов с ослабленным иммунитетом, в том числе с онкологическими заболеваниями, как для улучшения лечения установленных инфекций, так и для ограничения дальнейшего развития лекарственной устойчивости.Учитывая обширное эволюционное взаимодействие, которое существует между растениями и микроорганизмами, маловероятно, что резистентность будет причиной для беспокойства, тем не менее, клинически мы ожидаем, что природные соединения будут усиливать действие существующих противогрибковых средств, а не прямой заменой.

Одним из средств, заслуживающих внимания, является масло чайного дерева (TTO; Hartford and Zug, 2005; Carson et al., 2006), которое, как недавно сообщалось, оказывает минимальное влияние на развитие резистентности (Hammer et al. , 2012).TTO производится в виде дистиллята листьев кустарника Melaleuca alternifolia , произрастающего в Новом Южном Уэльсе, Австралия. Это сложная смесь эфирных масел, включающая около 100 компонентов, большинство из которых представляют собой монотерпены, сесквитерпены и родственные им спирты (Carson et al., 2006). Было показано, что ТТО обладает рядом терапевтических свойств, включая противовоспалительную активность (Hart et al., 2000; Koh et al., 2002; Pearce et al., 2005), и в настоящее время существует интерес к его возможному противоопухолевому действию. свойства (Боззуто и др., 2011). Однако наиболее известна его антимикробная активность в отношении широкого спектра микроорганизмов, например Staphylococcus aureus (включая MRSA; Thompson et al., 2008; Kwiecinski et al., 2009), ряда бактерий полости рта (Hammer et al. al., 2003b) и некоторые вирусы, включая вирусы простого герпеса и гриппа (Carson et al., 2001; Garozzo et al., 2011). ТТО также обладает мощной активностью против многих грибков (Hammer et al. , 2003a, 2004), включая некоторые устойчивые к азолу дрожжи (Mondello et al., 2003; Bagg et al., 2006), и есть некоторые доказательства его эффективности при лечении рефрактерного к флуконазолу кандидоза полости рта у больных СПИДом. В связи с этим открывается возможность использования препаратов ТТО для профилактики и лечения кандидозных инфекций полости рта. В настоящее время доступны средства по уходу за полостью рта, содержащие ТТО ​​(Soukoulis and Hirsch, 2004), в том числе жидкость для полоскания рта без содержания спирта. Однако сообщалось о реакциях гиперчувствительности на ТТО (Knight and Hausen, 1994; Mozelsio et al., 2003; Hammer et al., 2006; Rutherford et al., 2007), а вкусовые качества препарата в виде перорального препарата плохие. Более того, учитывая сложный химический состав ТТО, который приводит к изменчивости от партии к партии, возможность точно интерпретировать его клиническую полезность ограничена. Считается, что некоторые из отдельных компонентов ТТО обладают противомикробными свойствами (Mondello et al. , 2006) и могут быть более подходящими для разработки продуктов для ухода за полостью рта с точки зрения безопасности и консистенции.

Это исследование преследовало три цели.Первая заключалась в оценке эффективности ТТО и двух его ключевых производных [терпинен-4-ол (Т-4-ол) и α-терпинеол] против биопленок, образованных клинически разнообразной панелью из изолятов C. albicans . Во-вторых, токсикологические эффекты ТТО и производных компонентов оценивали с помощью клинически значимой оральной клеточной линии. Наконец, исследование было направлено на дальнейшее изучение ранее сообщавшихся противовоспалительных эффектов TTO.

Материалы и методы

Штаммы и условия роста

Сто клинических штаммов C.albicans , которые были выделены из самых разных групп пациентов, в том числе с протезным стоматитом (Glasgow Dental School, n = 26), получающих паллиативную помощь по поводу распространенного рака (Accord Hospice, Пейсли, n = 30), новорожденных (Королевская больница для больных детей, Глазго, n = 36) и лиц с инфекциями кровотока (Королевский лазарет Глазго, n = 8). Все штаммы регулярно содержались на агаре с декстрозой Сабуро (SAB) (Oxoid, Basingstoke, UK) при температуре 4°C и в течение неопределенного времени на гранулах Microbank (Prolab Diagnostics) при -80°C.

Противогрибковые соединения

В исследовании использовали масло чайного дерева

и семь производных масла класса ВЭЖХ, полученных от Sigma-Aldrich (Пул, Дорсет). Производные включали терпинен-4-ол (Т-4-ол), α-терпинеол, 1-8-цинеол, терпинолен, α-терпинен, γ-терпинен и p -цимол. Исходные концентрации каждого компонента готовили в среде RPMI-1640 AutoMod™ (Sigma, UK), содержащей 0,5% (об./об.) Tween ® 80 (ICI Americas, Inc.). Каждое соединение готовили в виде 4% об./об. раствора для тестирования и серийно разбавляли для тестирования как планктонной, так и сидячей чувствительности.Все процедуры проводились в ламинарном боксе (ламинарный бокс Hera Safe, Kendro, модель K515).

Тестирование чувствительности и ингибирование биопленки

Противогрибковые испытания для определения минимальных ингибирующих концентраций планктона (PMIC) проводились с использованием метода микроразведения бульона CLSI M-27A (Clinical Laboratory Standards Institute, 2008). Для тестирования чувствительности к сидячим растениям биопленки C. albicans были сформированы, как описано ранее, на полистироловых плоскодонных 96-луночных планшетах для микротитрования (Corning Incorporated, Corning, NY, USA; Ramage et al., 2001). Их обрабатывали диапазоном концентраций каждого противогрибкового соединения (0,0625–2%) в RPMI-1640, содержащем 0,5% (об./об.) TWEEN 80®. После 24-часового заражения определяли фиксированные минимальные фунгицидные концентрации (SMFC) как 50%-ное ингибирование по сравнению с необработанным контролем с использованием анализа снижения ХТТ, как описано ранее (Ramage et al., 2001). Для исследования времени элиминации C. albicans биопленки ( n = 3) выращивали в течение 24 часов, затем подвергали воздействию ТТО, Т-4-ола или α-терпинеола в концентрации 2 × МИК 90 для 2, 5, 15 и 60 мин.Метаболическую активность определяли количественно с помощью анализа XTT, а жизнеспособность биопленки оценивали как относительное снижение поглощения по сравнению с необработанными контролями. Для ингибирования изолята C. albicans ( n = 4) высевали в 96-луночные микротитровальные планшеты для роста биопленки (1 × 10 6 клеток/мл), а затем обрабатывали через 0, 1, 2 или 4 часа. после адгезии с ТТО, Т-4-олом и α-терпинеолом при 0,5 и 1 × МИК 50 . Затем клетки инкубировали еще 24 ч при 37°С. Уровни ингибирования биопленки сравнивали с необработанным контролем с использованием анализа биомассы кристаллическим фиолетовым, как описано ранее (Mowat et al., 2007). Все эксперименты, описанные выше, были выполнены в двух независимых случаях с минимум тремя клиническими изолятами в трех экземплярах.

Способ действия

Мы исследовали, взаимодействуют ли ТТО или Т-4-ол с мембраной, используя анализ поглощения йодида пропидия (PI), как сообщалось ранее (Sherry et al., 2012). PI представляет собой флуоресцентный краситель, который диффундирует через мембраны мертвых клеток и встраивается в ядерную ДНК, поэтому повышенная флуоресценция напрямую коррелирует со снижением целостности мембраны. C. albicans (3153A) выращивали в ночной питательной среде, как описано ранее, и стандартизировали до 1 × 10 7 клеток/мл в RPMI-1640 и обрабатывали ТТО, Т-4-олом или α-терпинеолом при концентрация 2 × MIC 50 в течение 10, 20, 30, 40, 50 и 60 мин. После обработки клетки центрифугировали при 10 000 об/мин для удаления соединений, промывали PBS, окрашивали 20 мкМ йодистого пропидия (PI; Sigma-Aldrich, Великобритания) и инкубировали при 37°C в течение 15 мин, чтобы краситель мог связать к ДНК.Сто микролитров каждого образца переносили на черный титрационный микропланшет (Corning Incorporated, Нью-Йорк, США) и измеряли флуоресценцию с помощью устройства для считывания микротитрационных планшетов (FluoStar Omega, BMG Labtech) при длинах волн возбуждения и испускания 535/617 нм соответственно. Необработанные данные были скорректированы на фоновую флуоресценцию, и анализ был проведен в трех повторностях. Кроме того, физический эффект этих соединений оценивали микроскопически с помощью сканирующей электронной микроскопии (СЭМ). C. albicans наклеивали на покровные стекла Thermanox™ (Nunc Inc., Thermo Fisher Scientific) в течение 2 часов в 24-луночных планшетах для тканевых культур, затем обрабатывали ТТО и Т-4-олом при 2 × MIC 50 в течение 24 часов. Клетки фиксировали с использованием 2% (масс./об.) параформальдегида, 2% (об./об.) глутаральдегида, 0,15 М какодилата натрия и 0,15% Alcian Blue (pH 7,4) и готовили для СЭМ, как описано ранее (Erlandsen et al., 2004). ). Зафиксированные и высушенные образцы биопленки покрывали напылением золота и просматривали под сканирующим электронным микроскопом JEOL JSM-6400.

Линия эпителиальных клеток полости рта

Эпителиальные клетки

OKF6-TERT2 использовали, как описано ранее (Ramage et al., 2012). Это иммортализованная клеточная линия оральных кератиноцитов человека, предоставленная Лабораторией Рейнвальда (Brigham and Woman’s Hospital, Бостон). Эти клетки были иммортализованы принудительной экспрессией теломеразы и напоминают первичные оральные кератиноциты в исследованиях цитотоксичности или экспрессии индуцибельных цитокинов и бета-дефензина (Dongari-Bagtzoglou and Kashleva, 2003). Клетки культивировали в бессывороточной среде кератиноцитов (KSFM) с добавлением 100 МЕ пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина, 25 мкг/мл экстракта бычьего гипофиза (БПЭ), 0.2 нг/мл эпидермального фактора роста (EGF) и 0,3 мМ CaCl 2 (0,4 мМ всего Ca 2+ ). Первичные перирадикулярные фибробласты (PRF, любезный подарок профессора Колина Мюррея, Университет Глазго) культивировали в стандартной среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM) с 10% фетальной телячьей сывороткой (FCS), 2 мМ L -глютамина, 100 МЕ пенициллина, и 100 мкг/мл стрептомицина. Обе клеточные линии пассировали приблизительно при 90% слиянии, используя 0,05% трипсин-ЭДТА. Эксперименты проводили с клетками между пассажами 5 и 10.

Исследования токсичности

разведения TTO и T-4-ol готовили в KSFM или DMEM с 0,25% (об./об.) Tween ® 80 для клеток OKF6 или PRF соответственно. Для оценки цитотоксичности клетки высевали в количестве 1 × 10 5 клеток на лунку на мл в KSFM или DMEM в 24-луночный культуральный планшет и выращивали до 90–100% конфлюэнтности. Затем среду удаляли и клетки подвергали воздействию 0,5 и 1 × MIC 50 каждого соединения в течение 2 минут, затем клетки осторожно промывали (×3) в сбалансированном солевом растворе Хэнкса.Жизнеспособность клеток оценивали с помощью теста XTT (0,25 мг/мл XTT и 1 мкМ менадиона в KSFM или DMEM), в котором клетки инкубировали в 5% CO 2 при 37°C в течение 2 ч, затем поглощение определяли количественно при 490 нм в автоматическом устройстве для считывания микропланшетов (Tecan Sunrise, Jencons, UK). Жизнеспособность рассчитывали на основе неэкспонированных контрольных клеток.

Исследования экспрессии цитокинов

клеток OKF6 выращивали в 12-луночных планшетах для тканевых культур, высевали и выращивали, как описано выше, и обрабатывали ТТО и Т-4-олом при 0.5 × MIC 50 в течение 2 мин, промывали, затем стимулировали зимозаном (50 мкг/мл). Также были включены контрольные среды и зимозаны. Супернатанты собирали через 4 и 24 часа и экстрагировали РНК с использованием TRIzol ® в соответствии с инструкциями производителя (Invitrogen, Пейсли, Шотландия). Тотальную РНК обрабатывали ДНКазой I (Promega, Саутгемптон, Великобритания) при 37°С в течение 30 мин. Качество и количество РНК оценивали с использованием спектрофотометра NanoDrop™ ND-1000 (Labtech International Ltd., Рингмер, Восточный Сассекс, Великобритания) перед получением кДНК с использованием обратной транскриптазы Superscript II (Invitrogen).Затем проводили количественную ПЦР с использованием аппарата для количественной ПЦР MxPro MX3000P (Stratagene, Амстердам, Нидерланды) со следующими праймерами: IL-8 (F: 5′-CAGAGACAGCAGAGCACACAA-3′; R: 5′-TTAGCACTCCTTGGCAAAAC-3′; 170 п.н.) и ген домашнего хозяйства GAPDH (F: 5′-GGTGGTGAAGACGCCAGT-3′; R: 5′-CAAGGCTGAGAACGGGAAG-3′). Каждая повторная реакция ПЦР содержала следующее: 0,5 мкл 1 мкг/мкл кДНК, 0,5 мкл прямого и обратного праймера (10 нмоль), 0,25 мкл эталонного красителя ROX, 12,5 мкл SYBR ® Green (Invitrogen) и 10.5 мкл dH 2 О. Условия проведения ПЦР: 95°С – 10 мин, 40× (94°С – 30 с, 58°С – 30 с, 72°С – 30 с) и 72°С. — 10 минут. Анализ проводили с использованием программного обеспечения Mx3000P (Stratagene), а экспрессию гена нормализовали по отношению к гену β-тублина по методу 2 -ΔΔCT . Для оценки уровней белка IL-8 проводили ELISA на оставшихся супернатантах. Наборы ELISA (R&D Systems, Abingdon, UK) использовали в соответствии с инструкциями производителя. Все анализы были оптимизированы и проверены перед использованием, при этом стандарты и образцы выполнялись как минимум в двух экземплярах.

Статистический анализ

Для оценки статистической значимости наблюдаемых изменений метаболической активности и биомассы C. albicans и уровней белка IL-8 в пероральных культуральных жидкостях кератиноцитов (данные, которые соответствуют почти нормальному распределению) однофакторный ANOVA с множественным сравнением Бонферрони было проведено пост-тестирование. ANOVA и апостериорные тесты также использовали для естественного логарифмического преобразования (для нормализации) пропорциональных данных для анализа содержания мРНК IL-8 в этих клетках. p < 0,05 считалось значимым. Анализы проводились с использованием GraphPad Prism версии 4.0 для Windows (GraphPad Software, Калифорния, США).

Результаты

ТТО и производные компоненты эффективны против

Candida albicans Биопленки

Тестированные планктонные изоляты C. albicans были чувствительны к ТТО, Т-4-олу и α-терпинеолу с МИК 50 , равной 0,5, 0,25 и 0,25%, соответственно, и МИК 90 , равной 1.0, 0,5 и 0,5% соответственно (табл. 1). Чувствительность была минимальной, что определялось диапазонами концентраций для 100 протестированных штаммов. Эти три соединения также продемонстрировали сильную активность против 69 штаммов, способных образовывать биопленки, при этом SMIC 50 для Т-4-ола и α-терпинеола не показал никаких изменений по сравнению со средней эффективной концентрацией планктона (SMFC 50 = 0,25 %). ). Однако концентрация ТТО, необходимая для проявления аналогичного эффекта, вдвое превышала концентрацию, необходимую для ингибирования планктонных клеток (SMFC 50 = 1%). Все другие протестированные соединения показали относительно низкую активность в отношении протестированных изолятов.

Таблица 1 . Профиль чувствительности Candida albican s к маслу чайного дерева и производным компонентам .

Была определена скорость уничтожения биопленки для трех наиболее эффективных компонентов (ТТО, Т-4-ол и α-терпинеол) при 2 × SMIC 50 , где наблюдалось зависящее от времени уничтожение (рис. 1).Показано, что ТТО снижает жизнеспособность биопленок в течение 2 мин на 44%, но через 5, 15 и 60 мин снижается лишь незначительно до 46, 56 и 65% соответственно. Однако и Т-4-ол, и α-терпинеол демонстрировали сравнимое и более эффективное уничтожение, быстро снижая жизнеспособность примерно на 55% через 2 мин. Эта антибиопленочная активность сохранялась, снижая жизнеспособность биопленки примерно на 61, 75 и 94% через 5, 15 и 60 мин соответственно. И Т-4-ол, и α-терпинеол показали значительно лучшую активность, чем ТТО, только через 60 мин ( p < 0.001).

Рис. 1. Candida albicans уничтожение биопленки ТТО, Т-4-олом и α-терпинеолом зависит от времени . Стандартизированные C. albicans (1 × 10 6 клеток/мл) инкубировали в плоскодонных 96-луночных планшетах в течение 24 ч, промывали в PBS и обрабатывали 2 × SMIC 50 через 2, 5, 10 , 15 и 60 мин. Метаболическую активность обработанных биопленок затем количественно определяли с использованием анализа ХТТ путем считывания при 492 нм в устройстве для считывания микротитрационных планшетов (FluoStar Omega, BMG Labtech).Для каждого анализа использовали три изолята, которые проводили в двух независимых случаях в трех экземплярах. ** р < 0,001. Столбики погрешностей представляют ± стандартную ошибку среднего значения.

Ингибирование образования биопленки оценивали для этих трех соединений при 0,5 и 1 × МИК 50 путем оценки биомассы биопленки. Для всех соединений было показано, что 1 × MIC 50 эффективно ингибирует рост биопленки при обработке через 0, 1 и 2 часа после адгезии (8.5-12% биомассы по сравнению с контролем). Через 4 часа после адгезии, когда клетки уже начали формировать гифы, обработка ТТО, Т-4-олом и α-терпинеолом дополнительно подавляла пролиферацию биопленки на 71, 74 и 82% по сравнению с контролем (рис. 2А). . Никаких существенных различий между обработками в каждый момент времени не наблюдалось. Обработка 0,5 × MIC 50 в целом была менее эффективной в отношении ингибирования роста биопленки, в первую очередь TTO, которая демонстрировала зависящее от времени снижение ингибирования, показывая 44% ингибирование клеток, обработанных через 4 часа (рис. 2B).Как Т-4-ол, так и α-терпинеол были значительно более эффективны против 1- и 2-часовых клеток ( p <0,05), ингибируя образование биопленки на >80%. Однако это ингибирование было снижено в отношении 4-часовых клеток (54 и 58% соответственно).

Рис. 2. Развитие биопленки Candida albicans ингибируется ТТО, Т-4-олом и α-терпинеолом . Стандартизированный C. albicans (1 × 10 6 клеток/мл) добавляли в плоскодонный 96-луночный планшет и обрабатывали (A) 0.5 и (B) 1 × SMIC 50 для 0, 1, 2 и 4 ч после инкубации. Затем биопленкам давали развиваться в течение 24 часов. Полученные в результате биопленки количественно определяли с использованием кристаллического фиолетового анализа, считываемого при 570 нм в ридере для микротитровальных планшетов (FluoStar Omega, BMG Labtech). Для каждого анализа использовали четыре изолята, и это выполняли в двух независимых случаях в трех экземплярах. * р < 0,05. Столбики погрешностей представляют ± стандартную ошибку среднего значения.

TTO и производные компоненты активны в отношении клеточной мембраны

Проведен анализ с помощью сканирующей электронной микроскопии клеток, обработанных TTO и T-4-ol. Было отмечено, что по сравнению с контрольными (необработанными) клетками (рис. 3Ai) оба соединения разрывали клетки, позволяя содержимому клеток просачиваться наружу, придавая вид проколов (рис. 3Aii, iii). Повреждение клеток оказалось более обширным для клеток, обработанных T-4-ol. Учитывая этот внешний вид, мы предположили, что целостность клеточной мембраны была нарушена. Поэтому мы провели эксперименты по поглощению PI, как сообщалось ранее (Sherry et al., 2012). Было показано, что для TTO поглощение PI было относительно медленным, с максимальной флуоресценцией, полученной через 30 минут (рис. 3B).Для сравнения, для Т-4-ола флуоресценция увеличивалась в зависимости от времени до 40 мин, что вдвое больше, чем у ТТО, после чего она достигала плато. Эти данные показывают кинетику, аналогичную представленным данным о времени уничтожения.

Рисунок 3. Масло чайного дерева и Т-4-ол активны в отношении клеточных мембран . (A) Адгезивные клетки (3153A) были прикреплены в течение 2 ч к покровным стеклам Thermanox™ и были (i) необработанными (контроль) или обработанными (ii) TTO или (iii) T-4 -ол при 2 × MIC 50 в течение 24 часов. Затем они были обработаны и просмотрены на SEM. (Б) C. albicans (3153A) планктонные клетки (5 × 10 7 клеток/мл) обрабатывали ТТО, Т-4-олом или α-терпинеолом в концентрации 2 × МИК 50 на 10, 20, 30, 40, 50 и 60 мин. Клетки отмывали центрифугированием, ресуспендировали в PI (20 мкМ в PBS) и инкубировали 15 мин при 37°C. Затем их переносили на черный 96-луночный планшет для количественного определения в флуоресцентном планшет-ридере (Ex 485 /Em 620 ).Каждый анализ проводили не менее чем в двух независимых случаях в трех экземплярах. Столбики погрешностей представляют ± стандартную ошибку среднего значения.

ТТО и терпинен-4-ол биологически активны в отношении клеток млекопитающих

Было исследовано влияние кратковременного воздействия (2 мин) ТТО и Т-4-ола на клеточную токсичность. Было показано, что TTO и T-4-ol были токсичны как для фибробластов, так и для эпителиальных клеток при 1 × MIC 50 , снижая жизнеспособность PRF примерно до 12%, а клеток OKF6 до 35 и 15% соответственно (рис. 4A). .При 0,5 × MIC 50 T-4-ol не проявлял токсичности (жизнеспособность 98%) в отношении PRF по сравнению с TTO (жизнеспособность 63%). Как 0,5× Т-4-ол, так и 0,5× ТТО были нетоксичны для клеток OKF6 (>100% жизнеспособности).

Рисунок 4. Масло чайного дерева и Т-4-ол биологически активны в отношении клеток млекопитающих . (A) Фибробласты PR и эпителиальные клетки OKF6 выращивали до 90–100% конфлюэнтности. Их подвергали воздействию 0,5 и 1 × MIC 50 каждого соединения в течение 2 мин.Жизнеспособность клеток оценивали с помощью анализа ХТТ после инкубации в 5% СО 2 при 37°С в течение 2 ч. Жизнеспособность рассчитывали на основе неэкспонированных контрольных клеток. Для исследования цитокинов клетки OKF6 выращивали в 12-луночных планшетах для тканевых культур, обработанных TTO и T-4-ol при 0,5 × MIC 50 в течение 2 мин, промывали, затем стимулировали зимозаном (50 мкг/мл). Клетки обрабатывали для анализа (B) qPCR, а супернатант (C) обрабатывали для анализа белка IL-8. Каждый анализ был выполнен в трех независимых случаях в трех повторностях.* р < 0,05. Столбики погрешностей представляют ± стандартную ошибку среднего значения.

Учитывая, что концентрация 1×МИК 50 является цитотоксичной, все последующие работы проводились с 0,5×МИК 50 . Транскрипционную экспрессию IL-8 оценивали с помощью количественной ПЦР с использованием зимозана в качестве мощного агониста клеточного воспаления. Как правило, более высокие уровни мРНК IL-8 наблюдались через 4 часа по сравнению с 24 часами. Предварительная обработка клеток TTO и T-4-ol не влияла на индукцию гена IL-8 по сравнению с контролем (фиг. 4B).В клетках, стимулированных зимозаном, предварительная обработка ТТО не приводила к значительному снижению экспрессии IL-8 ни через 4, ни через 24 часа ( p > 0,05). Хотя T-4-ol показал двукратное снижение экспрессии IL-8 в клетках как через 4, так и через 24 часа, хотя это снижение не было статистически значимым ( p > 0,05).

Анализ уровней белка ИЛ-8 после 4 и 24-часовой стимуляции зимозаном показал, что ни ТТО, ни Т-4-ол не способны существенно влиять на уровни ИЛ-8 в культуральных жидкостях ( p > 0.05) необработанных и стимулированных зимозаном оральных кератиноцитов (данные показаны только для зимозана). Тем не менее, значительное (50%) снижение экспрессии IL-8 наблюдалось в культуральных жидкостях обработанных ТТО клеток, стимулированных зимозаном ( p <0,05), а умеренное снижение примерно на 14% IL-8 было отмечено для T Клетки, обработанные -4-олом и стимулированные зимозаном (рис. 4С). Эти соединения не влияли на IL-8 ELISA (данные не показаны).

Обсуждение

Расширение использования обычных противогрибковых средств, таких как азолы, параллельно с более крупными группами восприимчивых людей (старение населения и более распространенная иммуносупрессивная терапия) привело к появлению полирезистентных штаммов Candida (Sanglard and Odds, 2002; Akins , 2005; Кэннон и др. , 2007; Ниими и др., 2010). Несоблюдение режима из-за токсических побочных эффектов и вкусовых качеств также может усугубить эту эскалацию тенденции. Следовательно, существует потребность в новых методах лечения этих инфекций. Наши текущие и предыдущие данные по изучению влияния ТТО на широкий спектр видов дрожжей ясно демонстрируют, что он эффективен против C. albicans планктонных и биопленочных клеток (Bagg et al., 2006).

Учитывая сложный химический состав ТТО, мы стремились исследовать ключевые отдельные компоненты для оценки конкретных действий.Т-4-ол и α-терпинеол проявляли наибольшую и сравнимую противогрибковую активность как в отношении планктонных, так и сидячих клеток, что было подтверждено другими сообщениями (Hammer et al., 2003a; Mondello et al., 2006; Terzi et al., 2007). Более того, исследования времени элиминации показали быстрый и устойчивый уровень активности обоих соединений, значительно превосходящий TTO при 2 × MIC 90 через 60 мин. Эта превосходная активность была менее очевидной во время ранних исследований ингибирования биопленки (0–2 ч), однако через 4 ч TTO показало значительное снижение его способности ингибировать рост биопленки.И Т-4-ол, и α-терпинеол имеют в своей химической структуре гидроксильные группы, что делает их умеренно растворимыми в воде. Это позволяет им диффундировать через воду, проникать в клеточные мембраны и дестабилизировать их, что приводит к осмотическому шоку (Straede et al., 2007). Это было очевидно из анализа целостности клеточной мембраны с использованием анализа поглощения PI и микроскопического исследования с помощью СЭМ.

Т-4-ол и α-терпинеол показали превосходную активность, но в остальных исследованиях ТТО сравнивали с Т-4-олом, прежде всего из-за высокой биодоступности последнего в составе ТТО ​​и его общего противогрибкового профиля (Carson et al. ., 2006). Цитотоксичность наблюдалась при уровнях МИК 50 как для ТТО, так и для Т-4-ола, тогда как при 0,5 × МИК 50 (концентрации, способные ингибировать рост C. albicans ) клетки OKF6 оставались жизнеспособными. Предыдущие отчеты продемонстрировали различные уровни цитотоксичности по отношению к первичным фибробластам и первичным эпителиальным клеткам, причем 1-часовое воздействие 0,03% TTO показало токсичность (Soderberg et al., 1996). Дальнейшие отчеты показали, что для ингибирования линии эпителиальных клеток HeLa требовалось 4-часовое воздействие 0,28% ТТО (Hayes et al., 1997). Кроме того, ранее было показано, что ТТО обладает высокой токсичностью по отношению к моноцитам и нейтрофилам, но после длительного 20-часового воздействия (Hart et al., 2000). Актуальность такой продолжительности воздействия трудно интерпретировать. В совокупности эти исследования подчеркивают важность тестируемой клеточной линии и контекста. Учитывая, что наши основные интересы заключались в разработке жидкости для полоскания рта для предотвращения роста кандидоза, а не для лечения активной инфекции, 2-минутное воздействие субингибиторных концентраций было сочтено оптимальным.

Эти данные были использованы для оценки влияния соединений на основе TTO на воспаление с использованием IL-8 в качестве биомаркера. Как транскрипционный, так и белковый анализ показали, что IL-8 регулировался обоими соединениями, при этом TTO показал снижение белка примерно на 50% через 24 часа после обработки, тогда как T-4-ol вызывал снижение только на 14%. Однако через 4 часа после обработки Т-4-ол ингибировал продукцию белка ИЛ-8 на 53% по сравнению с 16% для ТТО, хотя ни то, ни другое не было значительным. Наблюдаемые различия могут быть объяснены количественным составом ТТО, который содержит примерно 40% Т-4-ола.Предыдущее исследование LPS-стимулированных моноцитов продемонстрировало значительное подавление IL-8 0,052% T-4-ol через 40 часов (Hart et al., 2000). Расхождение с нашими данными можно объяснить различиями в концентрации и времени воздействия. Тем не менее, оба исследования показывают, что эти молекулы обладают потенциальной способностью подавлять медиаторы воспаления, которые распространены в ротовой полости пациентов, страдающих OPC. Действительно, существует in vivo доказательств, подтверждающих это. Несколько исследований на мышах показали ингибирующее действие на воспалительные процессы, включая снижение контактной гиперчувствительности (Brand et al., 2002a), уменьшение вызванного гистамином отека (Brand et al., 2002b) и блокирование воспаления, вызванного зимозаном, с помощью ингаляции TTO (Golab and Skwarlo-Sonta, 2007). У людей вызванная никелем контактная гиперчувствительность была снижена за счет местного применения 100% TTO (Pearce et al., 2005). Также было показано, что и ТТО (Koh et al., 2002), и Т-4-ол (Khalil et al., 2004) уменьшают вызванную гистамином реакцию волдырей и воспалений на коже человека. Наоборот, в других исследованиях TTO рассматривается как провоспалительная (de Groot and Weyland, 1992; Rutherford et al., 2007). Учитывая очевидные противоречивые сообщения в литературе, кажется разумным сосредоточиться на использовании наиболее биологически активного и распространенного соединения из ТТО, т. е. Т-4-ола. Это позволит исследователям точно определить медицинские преимущества чистого T-4-ола и исключить вредные эффекты, вызванные другими терпенами, входящими в состав TTO.

Таким образом, эти исследования добавили к совокупности доказательств in vitro , свидетельствующих о том, что ТТО и некоторые его отдельные компоненты, особенно Т-4-ол, проявляют сильную противомикробную эффективность против грибковых биопленок.Кроме того, это также продемонстрировало потенциальную активность ингибирования биопленки, предполагая, что этот агент может быть пригоден для использования в продуктах профилактической гигиены полости рта, таких как ополаскиватели для полости рта и чистящие средства для зубных протезов, а также для лечения установленных инфекций OPC. Использование Т-4-ола, отдельного компонента ТТО, имеет преимущества по сравнению с полным эфирным маслом с точки зрения безопасности и консистенции продукта. Оральный кандидоз является постоянной проблемой для больных раком, а также других групп людей с ослабленным иммунитетом. Перед лицом растущей резистентности к азолам и другим известным противогрибковым препаратам потребность в новых профилактических и терапевтических средствах как никогда велика. Масса лабораторных данных, накопленных в настоящее время, и разрозненные отчеты о клинической эффективности позволяют предположить, что клинические испытания компонентов ТТО, особенно Т-4-ола, заслуживают внимания.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Мы выражаем признательность за поддержку Гордона Рэймиджа через Международную ассоциацию стоматологических исследований и исследовательскую стипендию GlaxoSmithKline.

Ссылки

Бэгг, Дж., Джексон, М.С., Петрина Суини, М., Рэймидж, Г., и Дэвис, А.Н. (2006). Восприимчивость к Melaleuca alternifolia (чайное дерево) маслу дрожжей, выделенных изо рта пациентов с прогрессирующим раком. Оральная онкология. 42, 487–492.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Бэгг, Дж., Суини, М.П., ​​Льюис, М.А., Джексон, М.С., Коулман, Д., Эл, М.А., Бакстер, В., Макэндрик, С., и МакХью, С. (2003). Высокая распространенность дрожжевых грибков, отличных от albicans, и обнаружение устойчивости к противогрибковым препаратам в оральной флоре пациентов с распространенным раком. Паллиат. Мед. 17, 477–481.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Боззуто, Г., Колоне М., Токкачели Л., Стрингаро А. и Молинари А. (2011). Масло чайного дерева может бороться с меланомой. Планта Мед. 77, 54–56.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Бранд, К., Гримбалдестон, Массачусетс, Гэмбл, Дж. Р., Дрю, Дж., Финлей-Джонс, Дж. Дж., и Харт, П. Х. (2002a). Масло чайного дерева уменьшает отек, связанный с эфферентной фазой реакции контактной гиперчувствительности. Воспаление. Рез. 51, 236–244.

Полнотекстовая перекрестная ссылка

Бренд, К., Таунли, С.Л., Финлей-Джонс, Дж.Дж., и Харт, П.Х. (2002b). Масло чайного дерева уменьшает вызванный гистамином отек мышиных ушей. Воспаление. Рез. 51, 283–289.

Полнотекстовая перекрестная ссылка

Кэннон, Р. Д., Лэмпинг, Э., Холмс, А. Р., Ниими, К., Танабе, К., Ниими, М., и Монк, Б. К. (2007). Candida albicans лекарственная устойчивость еще один способ справиться со стрессом. Микробиология 153, 3211–3217.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Карсон, К.Ф., Эштон Л., Драй Л., Смит Д. В. и Райли Т. В. (2001). Melaleuca alternifolia (чайное дерево) масло-гель (6%) для лечения рецидивирующего лабиального герпеса. J. Антимикроб. Чемотер. 48, 450–451.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Казалинуово, И. А., Ди Франческо, П., и Гарачи, Э. (2004). Устойчивость к флуконазолу у Candida albicans : обзор механизмов. евро. преподобный мед. Фармакол.науч. 8, 69–77.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст

Институт клинических лабораторных стандартов. (2008). Эталонный метод для тестирования дрожжей на чувствительность к противогрибковым разбавлениям в бульоне, утвержденный стандарт – 3-е изд., документ CLSI M27-A3 . Уэйн: CLSI.

Драйзен, С. (1990). Оральные осложнения терапии рака. Описание и частота оральных осложнений. NCI Моногр. 11–15.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст

Эрландсен, С.Л., Кристич, С.Дж., Данни, Г.М., и Уэллс, К.Л. (2004). Визуализация микробного гликокаликса с высоким разрешением с помощью низковольтной сканирующей электронной микроскопии: зависимость от катионных красителей. J. Histochem. Цитохим. 52, 1427–1435.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Гароццо А., Тимпанаро Р., Стивала А., Бисиньяно Г. и Кастро А. (2011). Действие масла Melaleuca alternifolia (чайного дерева) на вирус гриппа A/PR/8: изучение механизма действия. Противовирусный рез. 89, 83–88.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Голаб, М., и Скварло-Сонта, К. (2007). Механизмы, участвующие в противовоспалительном действии вдыхаемого масла чайного дерева у мышей. Экспл. биол. Мед. (Мейвуд) 232, 420–426.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст

Хаммер, К. А., Карсон, К. Ф., и Райли, Т. В. (2003a). Противогрибковая активность компонентов масла Melaleuca alternifolia (чайного дерева). J. Appl. микробиол. 95, 853–860.

Полнотекстовая перекрестная ссылка

Хаммер К. А., Драй Л., Джонсон М., Михалак Э.М., Карсон С.Ф. и Райли Т.В. (2003b). Восприимчивость бактерий ротовой полости к маслу Melaleuca alternifolia (чайного дерева) in vitro. Пероральный микробиол. Иммунол. 18, 389–392.

Полнотекстовая перекрестная ссылка

Хаммер, К.А., Карсон, К.Ф., и Райли, Т.В. (2004). Противогрибковые эффекты масла чайного дерева Melaleuca alternifolia и его компонентов на Candida albicans , Candida glabrata и Saccharomyces cerevisiae . J. Антимикроб. Чемотер. 53, 1081–1085.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Хаммер, К.А., Карсон, К.Ф., и Райли, Т.В. (2012). Влияние эфирного масла Melaleuca alternifolia (чайного дерева) и основного монотерпенового компонента терпинен-4-ола на развитие одно- и многоступенчатой ​​устойчивости к антибиотикам и чувствительности к противомикробным препаратам. Антимикроб. Агенты Чемотер. 56, 909–915.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Харт, П.Х., Бранд, К., Карсон, К.Ф., Райли, Т.В., Прагер, Р.Х., и Финлей-Джонс, Дж.Дж. (2000). Терпинен-4-ол, основной компонент эфирного масла Melaleuca alternifolia (масло чайного дерева), подавляет выработку медиаторов воспаления активированными моноцитами человека. Воспаление. Рез. 49, 619–626.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Хейс, А. Дж., Лич, Д. Н., и Маркхэм, Дж. Л. (1997). Цитотоксичность масла австралийского чайного дерева in vitro с использованием клеточных линий человека. Дж. Эссент. Масляный Рез. 9, 572–582.

Полнотекстовая перекрестная ссылка

Халил З., Пирс А. Л., Саткунанатан Н., Сторер Э., Финлей-Джонс Дж. Дж. и Харт П. Х. (2004). Регулирование волдырей и воспалений с помощью масла чайного дерева: дополнительные исследования на людях и грызунах. Дж. Инвест. Дерматол. 123, 683–690.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Кох, К. Дж., Пирс, А. Л., Маршман, Г., Финлей-Джонс, Дж.Дж. и Харт, П. Х. (2002). Масло чайного дерева уменьшает воспаление кожи, вызванное гистамином. Бр. Дж. Дерматол. 147, 1212–1217.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Кун, Д.М., и Ганнум, Массачусетс (2004). Биопленки Candida : устойчивость к противогрибковым препаратам и новые терапевтические возможности. Курс. мнение расследование Наркотики 5, 186–197.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст

Квечински, Дж., Эйк С. и Войцик К. (2009). Влияние масла чайного дерева ( Melaleuca alternifolia ) на Staphylococcus aureus в биопленках и стационарной фазе роста. Междунар. Дж. Антимикроб. Агенты 33, 343–347.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Ламфон, Х., Портер, С.Р., Маккалоу, М., и Праттен, Дж. (2004). Восприимчивость биопленок Candida albicans , выращенных в пленочном ферментере постоянной глубины, к хлоргексидину, флуконазолу и миконазолу: продольное исследование. J. Антимикроб. Чемотер. 53, 383–385.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Монделло Ф., Де Бернардис Ф., Джироламо А., Кассоне А. и Сальваторе Г. (2006). Активность in vivo терпинен-4-ола, основного биологически активного компонента Melaleuca alternifolia Масло чиля (чайного дерева) в отношении чувствительных к азолу и резистентных к азолу патогенных для человека видов Candida . Заражение BMC. Дис. 6, 158. doi:10.1186/1471-2334-6-158

Полнотекстовая перекрестная ссылка

Монделло, Ф., Де Бернардис Ф. , Джироламо А., Сальваторе Г. и Кассоне А. (2003). In vitro и in vivo активность масла чайного дерева в отношении чувствительных к азолу и устойчивых к азолу патогенных дрожжей человека. J. Антимикроб. Чемотер. 51, 1223–1229.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Моват, Э., Батчер, Дж., Ланг, С., Уильямс, К., и Рэймидж, Г. (2007). Разработка простой модели для изучения действия противогрибковых средств на многоклеточные сообщества Aspergillus fumigatus . J. Med. микробиол. 56, 1205–1212.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Мозельсио, Н.Б., Харрис, К.Е., МакГрат, К.Г., и Грэммер, Л.К. (2003). Немедленная системная реакция гиперчувствительности, связанная с местным применением масла австралийского чайного дерева. Аллергия Астма Proc. 24, 73–75.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст

Рэймидж Г. , Ванде Валле К., Уикс Б.Л. и Лопес-Рибо, Дж. Л. (2001). Стандартизированный метод тестирования in vitro противогрибковой чувствительности биопленок Candida albicans . Антимикроб. Агенты Чемотер. 45, 2475–2479.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Рэймидж Г., Залевска А., Кэмерон Д., Шерри Л., Мюррей К., Финнеган М. Б., Лоуи З. и Джаггер Д. К. (2012). Сравнительное исследование in vitro двух методов очистки зубных протезов в качестве эффективной стратегии для ингибирования биопленок Candida albicans на поверхностях зубных протезов и индукции воспаления. J. Протезирование. doi: 10.1111/j.1532-849X.2012.00865.x

Полнотекстовая перекрестная ссылка

Резерфорд Т., Никсон Р., Тэм М. и Тейт Б. (2007). Аллергия на масло чайного дерева: ретроспективный обзор 41 случая с положительными кожными тестами за 4,5 года. Австралия. Дж. Дерматол. 48, 83–87.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Шерри Л., Хосе А., Мюррей К., Уильямс К., Джонс Б., Миллингтон О., Бэгг, Дж., и Рэймидж, Г. (2012). Фульвокислота, полученная из углеводов: исследование in vitro нового мембраноактивного антисептического агента против биопленок Candida albicans . Фронт. микробиол. 3:116. doi:10.3389/fmicb.2012.00116

Полнотекстовая перекрестная ссылка

Сильва С., Энрикес М., Мартинс А., Оливейра Р., Уильямс Д. и Азередо Дж. (2009). Биопленки видов, не относящихся к Candida albicans Candida : количественная оценка, структура и матричный состав. Мед. Микол. 47, 681–689.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Терци В., Морсия К., Фаччоли П., Вейл Г., Таккони Г. и Мальнати М. (2007). Противогрибковая активность эфирного масла чайного дерева ( Melaleuca alternifolia ) и его основных компонентов против патогенов растений in vitro. Письмо. заявл. микробиол. 44, 613–618.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст | Полный текст перекрестной ссылки

Томпсон, Г., Блэквуд Б., Макмаллан Р., Олдердайс Ф. А., Триндер Т. Дж., Лавери Г. Г. и Маколи Д. Ф. (2008). Рандомизированное контролируемое исследование гелей для душа с маслом чайного дерева (5%) по сравнению со стандартным гелем для душа для предотвращения колонизации устойчивым к метициллину Staphylococcus aureus (MRSA) у взрослых в критическом состоянии: протокол исследования. Заражение BMC. Дис. 8, 161. doi:10.1186/1471-2334-8-161

Полнотекстовая перекрестная ссылка

Уильямс, Д. В., Курияма, Т., Сильва, С., Малик, С., и Льюис, Массачусетс (2011). Биопленки Candida и кандидоз полости рта: лечение и профилактика. Пародонтолог. 2000 55, 250–265.

Полнотекстовая перекрестная ссылка

Вингард, младший (1990). Оральные осложнения терапии рака. Инфекционные и неинфекционные системные последствия. NCI Моногр. 9, 21–26.

Опубликовано Резюме | Опубликован полный текст

Влияние масла чайного дерева (Melaleuca alternifolia) на активность флуконазола в отношении устойчивых к флуконазолу штаммов Candida albicans

С.albicans эталонного штамма ATCC 10231 после воздействия на них сублетальных концентраций масла чайного дерева (ТТО) или его основного биоактивного компонента терпинен-4-ола. Для всех испытанных устойчивых к флуконазолу штаммов C. albicans TTO и минимальные ингибирующие концентрации (МИК) терпинен-4-ола были низкими, в диапазоне от 0,06% до 0,5%. 24-часовое воздействие флуконазола на устойчивые к флуконазолу штаммы C. albicans с сублетальной дозой ТТО повышало активность флуконазола против этих штаммов.В целом 62,5% изолятов были классифицированы как восприимчивые, 25,0% проявляли промежуточную восприимчивость и 12,5% были устойчивыми. Для всех протестированных клинических штаммов МИК флуконазола снизилась в среднем с 244,0  мкг/мл г/мл до среднего значения 38,46  мкг/мл г/мл, а минимальные фунгицидные концентрации (МФЦ) флуконазола снизились в среднем с 254,67  мкг/мл. μ г/мл до среднего 66,62  μ г/мл. Было обнаружено, что терпинен-4-ол более активен, чем ТТО, и значительно усиливает активность флуконазола в отношении устойчивых к флуконазолу штаммов C.albicans штаммов. Результаты этого исследования показывают, что сочетание натуральных веществ, таких как ТТО, и обычных лекарств, таких как флуконазол, может помочь в лечении сложных дрожжевых инфекций.

1. Введение

Эфирные масла представляют собой антисептические вещества, вырабатываемые растениями. Масло чайного дерева (TTO) — это эфирное масло, полученное путем перегонки с водяным паром из местного австралийского растения Melaleuca alternifolia , которое используется в медицине в качестве местного антисептика. Обладает широким спектром антимикробной активности в отношении широкого спектра бактерий, вирусов и грибков, включая дрожжи и дерматофиты.ТТО представляет собой смесь более 100 различных соединений, в первую очередь терпенов (преимущественно монотерпенов и сесквитерпенов). Физические свойства и химический состав ТТО варьируются, и поэтому важно определить международные стандарты. Австралийский стандарт на масло чайного дерева (AS 2782-1985) включает директивы, касающиеся содержания двух компонентов: минимальное содержание терпинен-4-ола должно быть не менее 30%, а максимальное содержание 1,8-цинеола должно быть менее 15 % от объема масла [1].Международный стандарт масла чайного дерева (ISO 4730:2004) включает максимальные и минимальные процентные значения для 15 наиболее важных компонентов TTO. Данному стандарту должны соответствовать ТТО, полученные паровой дистилляцией листьев и концевых ветвей Melaleuca alternifolia Cheel, Melaleuca linariifolia Smith, Melaleuca dissitiflora F. Mueller и других видов Melaleuca [2].

ТТО веками использовался в австралийской народной медицине, преимущественно для лечения ран [3, 4].В 1920-х годах Пенфолд впервые описал свойства и химический состав ТТО, а позднее подтвердил антисептические свойства ТТО и его компонентов [5–8]. В 1930-х годах появились последовательные публикации, демонстрирующие мощную антимикробную активность ТТО при использовании в ингаляционной терапии, асептической хирургии, стоматологической хирургии, дезинфекции ран и полоскании полости рта [9-11].

В настоящее время ТТО применяют в качестве местного средства для лечения различных заболеваний, преимущественно дерматозов (например, дерматозов).г., рецидивирующий лабиальный герпес, акне, пустулы, перхоть и сыпь). TTO также используется для лечения Staphylococcus aureus инфекций полости рта и глотки, вагинитов и заболеваний дыхательных путей. Многочисленные исследования подтвердили широкую антимикробную активность ТТО в отношении бактерий, грибов и вирусов, а также микроорганизмов, устойчивых к обычным препаратам [12–16]. Это важно в связи с увеличением числа трудно поддающихся лечению инфекций, поскольку ТТО можно использовать в качестве альтернативы или в сочетании с обычными лекарствами (включая антибиотики и химиотерапевтические средства).

Лечение инфекций может быть основано на монотерапии (использование одного противомикробного препарата) или комбинированной терапии (два или более препарата). Основной целью комбинированной терапии является усиление действия препаратов при снижении дозировки за счет синергизма. Когда монотерапия или комбинированная терапия, основанная на традиционных препаратах, неэффективна, более эффективной может быть комбинированная терапия, включающая натуральное средство. В нескольких недавних исследованиях сообщалось о повышенной антимикробной активности натуральных веществ в сочетании с обычными лекарствами по сравнению с обычным медикаментозным лечением [17–20].

Целью данного исследования была оценка активности флуконазола в отношении клинических штаммов , устойчивых к флуконазолу, Candida albicans и эталонного штамма C. albicans ATCC 10231 после воздействия на них сублетальных концентраций ТТО или его основного биоактивного компонента терпинена. -4-ол.

2. Материалы и методы
2.1.
Candida albicans Штаммы

В исследование были включены 32 клинических штамма Candida albicans , которые были выделены из следующих материалов: мазки из глотки и ротовой полости (), влагалища (), мокроты () или кала ().Эти штаммы выделяли из культуры на агаре Сабуро (bioMèrieux, Marcy l’Etoile, Франция) и видовую идентификацию проводили с помощью биохимического теста ID 32C (bioMèrieux, Marcy l’Etoile, Франция). Также использовали эталонный штамм C. albicans ATCC 10231, приобретенный у Oxoid Ltd. (Бейзингсток, Великобритания). Ранее мы определяли чувствительность штаммов C. albicans к флуконазолу с помощью теста Кирби-Бауэра на дисковую диффузионную чувствительность [21] с использованием дисков фильтровальной бумаги диаметром 6 мм, пропитанных 10  мк г флуконазола, полученных от DHN (Краков, Польша) и Агар YNB (дрожжевое азотное основание-Difco 0.5 %, глюкоза 3 %, агар 1,8 %, pH = 7), также полученные от DHN (Краков, Польша). Штаммы C. albicans были классифицированы как проявляющие восприимчивость (диаметр зоны задержки роста ≥18 мм), промежуточную восприимчивость (диаметр зоны задержки роста от 14 мм до 17 мм) или резистентность (диаметр зоны задержки роста <14 мм). ) к флуконазолу (данные описаны в главе 3). Величины МИК (минимальная ингибирующая концентрация) и МФК (минимальная фунгицидная концентрация) флуконазола определяли методом разбавления в бульоне в соответствии с Институтом клинических и лабораторных стандартов (документ CLSI M27-A3-2008) [22].Используя этот стандарт, штаммы C. albicans были классифицированы как проявляющие чувствительность (МИК ≤ 8  мк г/мл), промежуточную чувствительность (МИК от 9  мк г/мл до 63  мк г/мл), или резистентность (МПК ≥ 64  мкг/мл г/мл) к флуконазолу (данные представлены в главе 3).

2.2. Масло чайного дерева (TTO)

В этом исследовании мы использовали масло австралийского чайного дерева ( Melaleuca alternifolia ) с плантации четверга (Integria Healthcare, Eight Mile Plains, QLD, Австралия) серии 270930, которое соответствует стандарту ISO 4730:2004. [2] (табл. 1).ТТО был дистиллирован из специально отобранных листьев Melaleuca alternifolia , растения, произрастающего в прибрежных районах северного Нового Южного Уэльса и юго-восточного Квинсленда в Австралии. Анализ состава ТТО проводили методом газовой хроматографии по международному стандарту ISO 4730 [2]. Его проводили в следующих условиях: использовались колонка из плавленого кварца (50 м × 0,20 мм, толщина пленки 0,25  мкм мкм) и детектор пламенно-ионизационного типа, газ-носитель – водород (расход 1 мл/мин), температурная программа печи от 70°С до 220°С со скоростью 2°С/мин, температура инжектора 230°С, температура детектора 250°С, объем вводимого ТТО составлял 0,2  мк л, а коэффициент разделения составлял 1 : 100.

90 318 8 0.5-8 9249 3.2

Компоненты Содержание (%) в соответствии со стандартом ISO 4730 Содержание (%) от ТТО образца

α пинен 1 -6 2.5 2.5
Sabinene Trace-3.5 0,1 0,1 9028 α -terpinenene 5-13 8.1 8.1
Limonene 0.5-1.5 1.0
P -Cymene
4,4
1,8-кинотехника Trace-15 2.8 2,8
—terprenene 10- 28 19,6
терпинолена 1,5-5
терпинен-4-ол 30-48 41,0
α-терпинеол 1.5-8 3.0
Aromadendrene Trace-3 1,3

Ledene (син. Viridiflorene)
данные трассировки-3 Нет в наличии
δ -Cadinene TRACE- 3 данных нет в наличии
Globulol Trace-1 данные нет в наличии
Viridiflorol Trace-1 данные нет в наличии

В нашем В исследовании мы также использовали терпинен-4-ол, который был получен от Sigma-Aldrich (St.Луис, Миссури, США).

2.3. Флуконазол

В этом исследовании мы использовали противогрибковый препарат флуконазол (Польфармекс, Кутно, Польша). Структура молекулы флуконазола представлена ​​на рисунке 1.


2.4. Приготовление исходной суспензии
Candida albicans

Клетки C. albicans , культивированные в течение 24 часов на агаре Сабуро, суспендировали в солевом растворе (0,85% NaCl) и доводили до стандарта плотности 0,5 по МакФарланду (1,5 × 10 8  КОЕ/мл).Затем эту суспензию разбавляли до плотности 6 × 10 4  КОЕ/мл. Затем суспензию использовали для оценки значений MIC и MFC для TTO, терпинен-4-ола и флуконазола.

2.5. Определение значений MIC и MFC для TTO и терпинен-4-ола

Активность TTO в отношении протестированных штаммов C. albicans определяли макроразведением в бульоне с использованием общих стандартов разведения, как описано в PN-EN ISO 20776-1:2007. [24]. ТТО серийно разбавляли жидкой средой Сабуро с 10% Tween 80 до конечных концентраций ТТО от 1% до 0.0075%. Моющее средство Tween 80 помогает растворить ТТО. В каждую пробирку добавляли одинаковый объем суспензии C. albicans для получения конечной плотности 3 × 10 3   КОЕ/мл. Через 24 ч инкубации при 35°С рост клеток оценивали визуально в пробирках с ТТО и пробирке с положительным контролем (без ТТО). МИК определяли как наименьшую концентрацию ТТО, которая приводила к отсутствию видимого роста тестируемых клеточных штаммов. Значение MFC было определено как самая низкая концентрация TTO, которая не показала роста °С.albicans колонии. Эксперимент проводился трижды. Значения MIC и MFC для терпинен-4-ола определяли так же, как описано выше. MIC TTO и терпинен-4-ола использовали для расчета сублетальных доз TTO и терпинен-4-ола, используемых в следующих экспериментах.

2.6. Краткая предварительная обработка
Candida albicans 1/4 MIC TTO

Для каждого образца готовили пробирку, содержащую физиологический раствор с 10% Tween 80 и TTO до конечной концентрации 1/4 MIC TTO.Также была приготовлена ​​контрольная пробирка без ТТО. Затем в пробирки добавляли суспензию C. albicans для получения конечной плотности 3 × 10 3  КОЕ/мл. Затем суспензии инкубировали при 35°С в течение 30 минут. Затем образцы дважды промывали и центрифугировали между промывками (3000×g, 15 минут) и клетки ресуспендировали до плотности 6×10 4  КОЕ/мл. Затем суспензию использовали для определения MIC флуконазола и минимальной фунгицидной концентрации (MFC) флуконазола.Исследование проводили в трехкратной повторности.

2.7. Определение значений MIC и MFC флуконазола после кратковременной предварительной обработки
Candida albicans 1/4 MIC TTO

Активность флуконазола в отношении протестированных штаммов C. albicans определяли макроразведением в бульоне с использованием общих стандартов разведения, как описано в PN. -EN ISO 20776-1:2007 [24]. Готовили серийные параллельные разведения флуконазола от 256,0  мк г/мл до 0,125   мк г/мл в жидкой среде Сабуро, при этом включали контрольную пробирку без лекарственного средства.В каждую из пробирок добавляли одинаковый объем суспензии клеток C. albicans , предварительно обработанных 1/4 MIC TTO, и инокулят доводили до конечной плотности 3 × 10 3 КОЕ/мл. Через 24 ч инкубации при 35°С визуально оценивали рост клеток в каждой пробирке. Значение MIC определяли как наименьшую концентрацию флуконазола, при которой не наблюдалось видимого роста тестируемых штаммов. Клетки из пробирки, идентифицированные как МИК, а также несколько окружающих разведений высевали на агар Сабуро.Через 24 часа инкубации при 35°C подсчитывали колонии C. albicans (). Значение MFC определяли как наименьшую концентрацию флуконазола, при которой не наблюдалось роста колоний C. albicans . Опыт проводили в трехкратной повторности. Штаммы C. albicans были классифицированы как обладающие чувствительностью, промежуточной чувствительностью или устойчивостью к флуконазолу в соответствии с документом CLSI M27-A3-2008 [22], как описано в разделе 2.1.

2.8. Длительная предварительная обработка
Candida albicans флуконазолом и сублетальной дозой ТТО или терпинен-4-ола

Последовательные параллельные разведения флуконазола в диапазоне от 256.От 0  мкм г/мл до 0,125  мкм г/мл готовили в жидкой культуральной среде Сабуро. Были включены два положительных контроля. Все пробирки содержали 10% Tween 80, и ТТО добавляли к каждому разведению и одной из контрольных пробирок до достижения конечной концентрации 1/4 МИК ТТО. Вторая контрольная пробирка содержала только жидкую среду. Затем в каждую пробирку добавляли равный объем суспензии C. albicans до конечной плотности 3 × 10 3  КОЕ/мл. Все пробирки инкубировали при 35°С в течение 24 часов.После инкубации рост клеток в каждой пробирке оценивали визуально и определяли значения МИК и МФК флуконазола, как описано ранее. Клетки из пробирки, идентифицированные как МИК, а также несколько окружающих разведений высевали на агар Сабуро. Через 24 ч инкубации при 35°C подсчитывали колонии C. albicans и определяли значение MFC флуконазола. Опыт проводили в трехкратной повторности. Длительную предварительную обработку C. albicans флуконазолом и терпинен-4-олом проводили так же, как описано выше.

2.9. Статистические методы

Результаты представлены в виде среднего арифметического и медианы. Статистические различия между средними значениями определяли с помощью критерия Стьюдента и критерия Манна-Уитни в зависимости от того, насколько хорошо результаты коррелируют с нормальным распределением. Значения считались статистически значимыми. Для проведения статистического анализа использовали программу STATISTICA версии 10 (StatSoft, Краков, Польша).

3. Результаты

Протестированные штаммы Candida albicans были устойчивы к флуконазолу и чувствительны к низким концентрациям ТТО.Клинические штаммы C. albicans и эталонный штамм C. albicans ATCC 10231, протестированные с помощью теста на чувствительность к дисковой диффузии Кирби-Бауэра, не проявляли зоны ингибирования роста. Все изученные штамма C. albicans были классифицированы как проявляющие устойчивость к флуконазолу. Значения МИК флуконазола для 32 клинических штаммов C. albicans варьировались от 64,0  мк г/мл до 256,0  мк г/мл (среднее = 244,0 ± 47,22  мк г/мл).Наиболее распространенными значениями были 256,0  мкм г/мл (30 штаммов) и 64,0  мкм г/мл (2 штамма). Для эталонного штамма C. albicans ATCC 10231 МИК флуконазола составила 256,0  мк г/мл.

MIC TTO для 32 клинических штаммов C. albicans варьировались от 0,06% до 0,5% (среднее = 0,19 ± 0,09%). Наиболее распространенными значениями были 0,125% (15 штаммов) и 0,25% (15 штаммов). MIC TTO двух оставшихся штаммов составляли 0,06% и 0,5%. Для эталонного штамма C. albicans ATCC 10231 TTO MIC был равен 0.125%. Эти результаты показывают, что протестированные штаммы C. albicans не проявляли какой-либо перекрестной устойчивости к ТТО и флуконазолу. Значения TTO MIC использовали для расчета сублетальных доз (1/4 MIC TTO), используемых в остальной части исследования.

Кратковременная предварительная обработка 32 клинических штаммов C. albicans и эталонного штамма C. albicans ATCC 10231 с 1/4 MIC TTO не изменила значения MIC и MFC флуконазола. Воздействие 1/4 MIC TTO и флуконазола на штаммы C. albicans в течение 24 часов (длительная предварительная обработка) значительно повышало восприимчивость штаммов дрожжей к флуконазолу.Из 32 устойчивых к флуконазолу клинических штаммов C. albicans 28 штаммов (87,5%) проявляли затем высокую или промежуточную чувствительность к флуконазолу (таблица 2).

+ 9238 0

+ Candida Albicans штаммы
(= 32)
Количество (%) от Candida Albicans штаммов с указанной чувствительности к флуконазолу
Resistant восприимчивости промежуточного



штаммы не подвергаются воздействию TTO (контроль) 32 100% 0 0
штаммов, подвергающихся микрофону TTO для
30 минут
32 100% 0 0
Штаммы, подвергшиеся воздействию  MIC TTO и флуконазола в течение 24 часов 4 12.5% 8 25,0% 20 62,5% 20 62,5%


9029

Выдержка флуконазол, устойчивых C. эти штаммы. В целом 62,5% изолятов были классифицированы как восприимчивые, 25,0% проявляли промежуточную восприимчивость и 12,5% были устойчивыми. Для всех протестированных клинических штаммов средняя МИК флуконазола снизилась с 244.0  μ г/мл до 38,46  μ г/мл после такой длительной предварительной обработки, а средняя MFC флуконазола снизилась с 254,67  μ г/мл до 66,62  μ г/мл (таблица). Значения MIC и MFC для восприимчивых штаммов () и штаммов с промежуточной восприимчивостью () были статистически низкими по сравнению с аналогичными значениями, полученными для контрольного образца и для образцов, которые были предварительно обработаны ТТО только кратковременно. Для группы восприимчивых изолятов МИК флуконазола снизилась в среднем до 0.52  μ г/мл, а МФЦ флуконазола снизилась в среднем до 4,25  μ г/мл. Продолжительная предварительная обработка стандартного штамма Candida albicans ATCC 10231 1/4 MIC TTO и флуконазола не повышала чувствительность этого штамма к флуконазолу, в отличие от четырех изученных устойчивых к флуконазолу клинических штаммов C. albicans .

8 (а) Значения флуконазола ( μ г / мл) (б) Значения флуконазола MFC ( μ г / мл)
Среднее МИК

C.albicans (= 32) A C. albicans (= 20) B C. albicans (= 8) C
Control КРАТКАЯ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ С ТД Продолжительные предварительную обработку с ТТО и флуконазол Control Краткая предварительная обработка с ТТО Продолжительное предобработки ТТО и флуконазол Control Краткая предварительная обработка с ТТО Продолжительное предобработки ТТО и флуконазол

Диапазон МИК 64.0-256.0 64.0-256.0 0.125-256.0 256.0-256.0 256.0-256.0 0.125-2.67 64.0-256,0 64.0-256,0 9243 12.0-42.67
244,0 ± 47,22 244,0 ± 47,22 38,46 ± 84,35 256,0 ± 0,0 256,0 ± 0,0 0,52 ± 0,56 208,0 ± 88,88 208,0 ± 88,88 24,54 ± 11,54
< 0.0001 е
<0,0001 F
<0,0001 е
<0,0001 F
<0,0002 е
<0,0002 F

Средняя MFC

C.albicans (= 32) A C. albicans (= 20) B C. albicans (= 8) C
Control КРАТКАЯ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ С ТД Продолжительные предварительную обработку с ТТО и флуконазол Control Краткая предварительная обработка с ТТО Продолжительное предобработки ТТО и флуконазол Control Краткая предварительная обработка с ТТО Продолжительное предобработки ТТО и флуконазол

Диапазон МФЦ 213.33-256.0 256.0-256.0 0.17-256.0 256.0-256.0 256.0-256.0 0.17-23.33 213.33-256.0 256.0-256.0 14.67-213.33
254,48 ± 7,54 256,0 ± 0,0 66,62 ± 96,16 256,0 ± 0,0 256,0 ± 0,0 4,25 ± 6,19 250,67 ± 15,08 256,0 ± 0,0 127,83 ± 70,42
< 0.0001 е
<0,0001 F
<0,0001 е
<0,0001 F
<0,0003 е
<0,0002 F

Все 32 протестированных клинических штамма Candida albicans , устойчивых к флуконазолу.
b Резистентные к флуконазолу клинические штаммы Candida albicans (= 20), которые проявили чувствительность к флуконазолу после длительного предварительного лечения ТТО.
c Клинические штаммы Candida albicans , устойчивые к флуконазолу (= 8), которые проявляли промежуточную чувствительность к флуконазолу после продолжительной предварительной обработки ТТО.
: уровень статистической значимости для средних значений MIC/MFC.
: статистическая значимость по сравнению с контролем.
: статистическая значимость по сравнению с группой, которая предварительно подвергалась краткосрочному лечению.

Терпинен-4-ол, основной биологически активный компонент, присутствующий в TTO, сильно повышает активность флуконазола против резистентных к флуконазолу C.albicans штаммов. МИК терпинен-4-ола для клинических штаммов C. albicans варьировались от 0,06% до 0,25% (среднее = 0,11 ± 0,09%). Для стандартного штамма C. albicans ATCC 10231 МПК терпинен-4-ола составляла 0,06%. Тестированные штаммы C. albicans не проявляли перекрестной устойчивости к терпинен-4-олу и флуконазолу. Воздействие флуконазола и сублетальных доз (1/4 МИК) терпинен-4-ола на устойчивые к флуконазолу клинические и стандартные штаммы C. albicans в течение 24 ч значительно повышали активность флуконазола в отношении этих штаммов, и все штаммы C.albicans были классифицированы как чувствительные (МИК флуконазола снизилась до 0,125  мк мкг/мл). Мы подвели итоги этого исследования, а наиболее важные данные представлены в табличной форме (табл. 4).

0,125

Reagent C. atccans
ATCC 10231
C. albicans Клинические штаммы (= 32)
МИК MFC MFC MFC MFC MFC
Ассортимент Средняя Ассортимент Средняя Средняя


Fluconazole μ г / мл 256.0 256,0 64.0-256.0 244,0 ± 47,22 213.33-256.0 254,48 ± 7,44
ТТО% об / об 0,125 0,25 0,06-0,5 0,19 ± 0,09 0.125-0.5 0,37 ± 0,13
Флуконазол μ г / мл с сублетальная доза ТТО 256,0 256,0 0.125-256.0 38,46 ± 84,35 0.17-256.0 66.62 ± 96,16
терпинен-4-ол% об / об 0,06 0,125 0.06-0.25 0,11 ± 0,09 0.125-0.5 0,22 ± 0,19
Флуконазол μ девяносто одна тысяча пятьсот двадцать-четыре г / мл с сублетальной дозой терпинен-4-ол 0,125 0.125-0.125 0,125 ± 0,0 0.125-1.0 0,38 ± 0,42

4.Обсуждение

TTO является наиболее часто используемым эфирным маслом благодаря своим антибактериальным и противогрибковым свойствам [3, 25]. В этом исследовании мы оценили изменение активности флуконазола in vitro в отношении устойчивых к флуконазолу клинических штаммов Candida albicans , подвергшихся воздействию сублетальных концентраций ТТО или терпинен-4-ола, основного биоактивного компонента ТТО. Более ранние исследования in vitro чувствительности Candida spp. к TTO показали, что TTO высокоактивен против этих микробов, а также штаммов, устойчивых к азолам, для которых МПК TTO варьировались от 0.от 25% до 0,5% [14, 26]. Для штаммов C. albicans , которые были резистентны как к флуконазолу, так и к итраконазолу, ВТО МИК варьировала от 0,25 до 1,0%, ВТО МИК 50 составляла 0,5%, а ВТО МИК 90 составляла 1% [27]. . Другое исследование показало, что три устойчивых к флуконазолу клинических штамма C. albicans имели очень низкие МПК TTO (0,15% для двух штаммов и 0,07% для третьего штамма) [15].

Эксперименты, проведенные в этом исследовании, подтверждают результаты ранее опубликованных исследований в том смысле, что все протестированные устойчивые к флуконазолу штаммы C.albicans были чувствительны к ТТО [14, 15, 28, 29]. Определенные MIC TTO были низкими, в диапазоне от 0,06% до 0,5%. Антимикробная активность ТТО обусловлена ​​главным образом терпинен-4-олом, основным биологически активным компонентом, присутствующим в ТТО [3, 14]. Определенные значения MIC для терпинен-4-ола были очень низкими, в диапазоне от 0,06% до 0,25%. Наше исследование и другие исследования показывают, что C. albicans не проявляет перекрестной устойчивости к ТТО и азольным агентам [14, 15, 26, 27]. О клинической резистентности к ТТО не сообщалось.Многокомпонентная природа TTO может снизить вероятность спонтанного возникновения резистентности, и может потребоваться несколько одновременных мутаций, чтобы преодолеть все противомикробные действия каждого из компонентов [3]. Таким образом, ТТО можно использовать в качестве местного антисептика для эффективного лечения поверхностных микозов, вызванных устойчивыми к флуконазолу Candida spp. и другие устойчивые к азолу дрожжи. К сожалению, ТТО может быть потенциально токсичным при приеме внутрь в высоких дозах, поэтому ТТО не следует вводить перорально.Острая пероральная токсичность ТТО аналогична пероральной токсичности других распространенных эфирных масел, например, таких как эвкалиптовое масло [30, 31]. Липофильная природа ТТО, которая позволяет ему проникать во внешние слои кожи, усиливает не только антисептическое действие, но и возможность токсичности ТТО из-за кожной абсорбции. ТТО может вызывать раздражение кожи при более высоких концентрациях и может вызывать аллергические реакции у предрасположенных лиц [3, 31, 32]. Zhang и Robertson наблюдали ототоксический эффект 100% TTO [33].Токсичность ТТО зависит от дозы, и большинства нежелательных явлений можно избежать при использовании ТТО в разбавленной форме [31]. ТТО не является мутагенным или генотоксичным [34, 35].

Растет интерес не только к активности природных веществ против резистентных микробов, но и к синергическим взаимодействиям между этими веществами и традиционными лекарствами [19, 20, 36–38]. Флуконазол является одним из азольных противогрибковых средств, широко используемых как для профилактики, так и для лечения инфекций, вызванных Candida [39–41].В этом исследовании мы исследовали изменения активности флуконазола в отношении устойчивых к флуконазолу штаммов C. albicans после воздействия сублетальных концентраций ТТО или терпинен-4-ола. Мы использовали исключительно штаммы, устойчивые к флуконазолу, потому что определение синергетического лечения этих штаммов было бы особенно важно. Мы протестировали сублетальные концентрации ТТО и терпинен-4-ола, поскольку ожидали, что концентрации ниже МПК ослабят клеточную структуру, не убивая клетки, облегчая активность флуконазола и, следовательно, ингибируя C.albicans , устойчивых к флуконазолу. Наши результаты показывают, что кратковременное (0,5 ч) воздействие сублетальной концентрации ТТО (1/4 МИК ТТО) на устойчивые к флуконазолу штаммы C. albicans не влияло на противогрибковую активность флуконазола. Однако воздействие на клетки C. albicans сублетальной концентрации ТТО и последующая обработка их флуконазолом подавляли резистентность к флуконазолу у 87,5% протестированных штаммов. Эти результаты свидетельствуют о наличии синергетического взаимодействия между флуконазолом и ТТО в отношении резистентных к флуконазолу штаммов C.альбиканс . TTO использовали для пермеабилизации клеточных мембран дрожжей, заметно увеличивая восприимчивость к флуконазолу. ТТО внедряется в мембрану липидного бислоя, что нарушает ее структуру, что приводит к увеличению проницаемости и нарушению физиологической функции. ТТО также ингибирует образование зародышевых трубок или превращение мицелия у C. albicans и ингибирует дыхание у C. albicans дозозависимым образом [3]. Грибковые клетки, подвергшиеся воздействию ТТО, в конечном итоге разрушаются.Сублетальные концентрации ТТО также ослабляют Candida spp. жизнеспособность клеток [41, 42]. Механизм противогрибкового действия флуконазола иной. Было продемонстрировано, что флуконазол взаимодействует с цитохромом Р-450-зависимым ферментом С-14 α -деметилазой, который отвечает за продукцию эргостерола. Нарушение синтеза эргостерола вызывает структурно-функциональные изменения в клеточной мембране грибов, которые предрасполагают клетки грибов к повреждению. Ингибирование цитохромокислительных и пероксидативных ферментов является дополнительной противогрибковой активностью флуконазола [39].Описано несколько механизмов устойчивости к флуконазолу у изолятов C. albicans : увеличение продукции ланостерола 14 α -деметилазы, кодируемой геном ERG11 , и снижение аффинности ланостерола 14 α -деметилазы к флуконазолу из-за мутаций. в гене ERG11 и дефект в Δ5-6-десатуразе, кодируемой геном ERG3 , что приводит к потере функции эргостеринового пути. Другой механизм устойчивости к флуконазолу у 91 523 C.albicans — это активный транспорт лекарств через плазматическую мембрану с помощью «эффлюксных насосов», для чего необходима экспрессия генов CDR1/2 и MDR1 [39, 43–47]. Повреждение клеточной мембраны, вызванное TTO, может нарушить функцию «эффлюксных насосов», что делает грибковую клетку более восприимчивой к флуконазолу [48, 49].

Наши данные показывают, что существует синергетический эффект in vitro сублетальных концентраций ТТО и флуконазола против резистентных к флуконазолу C.albicans штаммов. Однако устойчивый к флуконазолу стандартный штамм C. albicans ATCC 10231 и четыре клинических штамма C. albicans не повышали чувствительность к флуконазолу. Вероятной причиной такого эффекта были различия в механизмах устойчивости этих штаммов к флуконазолу. В нашем исследовании in vitro основной компонент ТТО терпинен-4-ол был более активен, чем ТТО, и значительно усиливал активность флуконазола против всех изученных устойчивых к флуконазолу C.albicans штаммов. Монделло и др. [14], а также Ninomiya et al. [50] наблюдали, что in vivo TTO и терпинен-4-ол были одинаково эффективны против кандидоза, вызванного устойчивыми к азолу C. albicans . Механизмы, лежащие в основе синергизма между флуконазолом и ТТО, не выяснены. Ю и др. [51] подтвердили синергизм между флуконазолом и триклозаном в отношении клинических изолятов устойчивых к флуконазолу C. albicans . Лю и др. [52] наблюдали синергический эффект между флуконазолом и глабридином в отношении 915–23 C.albicans , связанные с действием глабридина на клеточную оболочку. Ахмад и др. [53] описали синергетическую активность тимола и карвакрола с флуконазолом в отношении изолятов Candida . Оба монотерпена ингибировали отток на 70–90%, демонстрируя их высокую способность блокировать помпы переносчиков лекарств.

Предыдущие исследования также оценивали активность ТТО против различных микроорганизмов в сочетании с другими антимикробными веществами. Синергический эффект наблюдался для итраконазола и ТТО в термочувствительном геле, используемом для лечения вагинального кандидоза [26].Синергические эффекты также наблюдались между эфирными маслами и ципрофлоксацином, гентамицином, цефиксимом и пристинамицином [20]. В тесте дисковой диффузии с использованием C. albicans, C. glabrata, C. tropicalis, C. krusei, C. guilliermondii и C. parapsilosis вокруг дисков, пропитанных ТТО и амфотерицином В, возникали более крупные зоны ингибирования роста, чем вокруг диски, содержащие только ТТО [17]. В исследовании Staphylococcus aureus более крупные зоны ингибирования роста возникали вокруг дисков, пропитанных ТТО и другими эфирными маслами, по сравнению с дисками, пропитанными только ТТО [54].

Синергетическое действие антимикробных веществ также было показано с использованием кривых времени-убития . Кратковременная предварительная обработка штамма Pseudomonas aeruginosa веществом, разрушающим цитоплазматическую мембрану (карбонилцианид м-хлорфенилгидразон, нонапептид полимиксина В или этилендиаминтетрауксусная кислота), усиливала бактерицидную активность ТТО, о чем свидетельствует увеличение скорости уничтожения микробов в штамме . кривые time-kill [55, 56]. Однако в исследовании с использованием метода Е-теста Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus и коагулазонегативные стафилококки (CoNS), подвергшиеся воздействию сублетальных концентраций ТТО в течение 72 часов, проявляли повышенную устойчивость к гентамицину, стрептомицину. , хлорамфеникол, тетрациклин, эритромицин, триметоприм, ампициллин, фузидиевая кислота, мупироцин, линезолид и ванкомицин [57, 58].Повышенная антимикробная активность наблюдалась при сочетании эфирных масел с их изолированными компонентами (например, терпинен-4-ол из Melaleuca alternifolia ) [59] и при сочетании ТТО с ионами серебра [60, 61].

Индекс фракционной ингибирующей концентрации (FIC), также называемый FICI, используется для определения того, являются ли два вещества синергетическими или антагонистическими. Значения FIC можно интерпретировать по-разному, однако в целом индекс FIC ниже 0,5 свидетельствует о синергизме, а индекс FIC выше 4 указывает на антагонизм [18, 19, 38, 59].Значение индекса FIC для ТТО и тобрамицина составило 0,37 для Escherichia coli и 0,62 для Staphylococcus aureus , что указывает на синергизм этих двух веществ [19]. Небольшой синергетический эффект наблюдался при обработке Candida albicans TTO и амфотерицином B и Klebsiella pneumoniae TTO и ципрофлоксацином. ТТО и ципрофлоксацин проявляют антагонистические эффекты в отношении Staphylococcus aureus [18]. Синергический эффект между ТТО и лизостафином, мупироцином, гентамицином или ванкомицином против метициллин-резистентных штаммов Staphylococcus aureus отсутствует.Фактически индекс FIC указывал на то, что ТТО и ванкомицин являются антагонистами [38].

Результаты этого исследования и других предыдущих исследований показывают, что сочетание натуральных веществ, таких как ТТО, и традиционных лекарств, таких как флуконазол, может помочь в лечении сложных дрожжевых инфекций. Однако необходимы дополнительные исследования in vitro для выявления противомикробной активности природных лекарственных веществ и выявления синергетического взаимодействия с широко используемыми противомикробными средствами.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов в связи с публикацией данной статьи.

Благодарности

Авторы хотели бы поблагодарить компанию MELALEUCA в Гливице (Польша) за любезно предоставленное в дар масло австралийского чайного дерева, полученное из Melaleuca alternifolia , компанию Polfarmex в Кутно (Польша) за любезно предоставленный флуконазол и Микробиологической лаборатории LABOMED в Гливице (Польша) за любезно предоставленные клинические штаммы Candida albicans , использованные в этом исследовании.

Австралийская ассоциация производителей чайного дерева (ATTIA)

 

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ И СМИ

Читать ВСЕ НОВОСТИ/МЕДИА »


23 ноября 2021 г. — Ученые подтверждают: эфирные масла не связаны с нарушением гормонального фона

Эпидемиологическое исследование развенчивает давний миф о том, что масла лаванды и чайного дерева вызывают эндокринные нарушения у детей. Больше &raquo&raquo


11 июня 2021 г. — Здоровье растений, Австралия

Plant Health Australia (PHA) ищет кандидатов в неисполнительные директора. Больше &raquo&raquo


19 марта 2021 г. — Консультативная группа по программе масла чайного дерева AgriFutures

AgriFutures Australia стремится расширить набор навыков своей Консультативной группы по программе масла чайного дерева, назначив двух новых членов. Больше &raquo&raquo


23 ноября 2020 г. – сотрудник по связям с промышленностью

AgriFutures Australia (AgriFutures) ищет услуги частного лица или организации для предоставления эффективных и действенных услуг по расширению и взаимодействию с отраслью, которые будут способствовать развитию более сильной и устойчивой отрасли производства масла чайного дерева.Это захватывающая возможность внести подлинные изменения и принять участие в инновационной и дальновидной отрасли. Больше &raquo&raquo


Химический состав масла чайного дерева определяется международным стандартом ISO 4730: 2017, в котором указаны уровни 15 из более чем 113 компонентов, содержащихся в чистом масле австралийского чайного дерева, а также ряд физических параметров.

Любая партия масла, продаваемая членом ATTIA, должна сопровождаться независимо проверенным сертификатом анализа, подтверждающим соответствие этим Стандартам.ATTIA также рекомендует четко указывать страну происхождения при покупке масла чайного дерева у любого поставщика.

Краткое изложение стандарта:

ISO 4730: 2017 Эфирное масло

Melaleuca , тип терпинен-4-ола (масло чайного дерева)

Эфирное масло, полученное перегонкой с паром листьев и верхушечных побегов Melaleuca alternifolia (Maiden et Betche) Cheel или M. linariifolia Sm.

В стандарте

ISO 4730: 2017 также указано энантиомерное распределение для TTO:

.

Распределение энантиомеров терпинен-4-ола: (R)(+) 67 % — 71 % и (S)(-) 29 % — 33 %.

Некоторые компоненты эфирных масел могут существовать в двух энантиомерных формах, обозначаемых как (R) или (S), D или L, или (+) или (-) изомеры. Многие энантиомеры обладают совершенно разными свойствами, поэтому их присутствие в правильной форме имеет решающее значение. Кроме того, чистые натуральные эфирные масла содержат энантиомеры в характерных соотношениях. Это соотношение нарушается добавлением примесей, включая синтетические основные компоненты с различными энантиомерными соотношениями.
Следовательно, измерение энантиомерного избытка или энантиомерного соотношения в соответствии с ISO 22972 в информационном приложении соответствующих изолятов в международных стандартах обеспечивает дополнительную меру подлинности эфирного масла.

Характеристики              Требования                                 Метод
Внешний вид Прозрачная подвижная жидкость       —
Цвет От бесцветного до бледно-желтого       —
Запах Характеристика       —
Относительная плотность (20°C) Мин: 0.885 Макс.: 0,906 ИСО 279
Показатель преломления (20°C) Мин.: 1,475 Макс.: 1,482 ИСО 280
Оптическое вращение (20° C) между +7° и +12°          ISO 592
Смешиваемость с этанолом (объемная доля) при 20°C Нет необходимости использовать более 2 объемов этанола, 85 % (объемная доля), для получения прозрачного раствора с 1 объемом эфирного масла
Температура воспламенения
(закрытый тигель)
среднее значение +59° ИСО/ТР 11018
Минимальный объем тестового образца 50 мл ИСО 201

 

Хроматографический профиль:
Компонент   Мин. %  Макс. %
α-пинен    1.00 4,00
 
Сабинен   отслеживает 3,50  
α-терпинен   6,00
12.00  
Лимонен   0,50 1,50  
п-цимол   0.50 8.00  
1,8-цинеол   следов 10.00  
γ-терпинен   14.00 28.00  
Терпинолен   1,50 5,00  
Терпинен-4-ол   35.00 48.00  
α-терпинеол   2,00
 5,00  
Аромадендрен    0,20 3,00  
Ледене (синоним виридифлорен)    0,10 3,00  
δ-кадинен   0.20 3,00  
Глобулол   отслеживает 1,00  
Виридифлорол   отслеживает 1,00  

Следы: <0,01%

Полную копию этого стандарта можно приобрести ЗДЕСЬ

 

Противомикробные и другие лечебные свойства масла чайного дерева (Melaleuca alternifolia)

Введение


Цветок Melaleuca alternifolia

Масло чайного дерева или Масло Melaleuca — это эфирное масло, получаемое из листьев Melaleuca alternifolia , произрастающих в юго-восточном Квинсленде и на северо-восточном побережье Нового Южного Уэльса, Австралия.
Название «чайное дерево» используется для ряда растений, в основном из Австралии и Новой Зеландии, из семейства Myrtaceae , родственного мирту. Хотя масло чайного дерева обычно извлекается из сорта Melaleuca alternifolia , его также можно извлекать из сорта Melaleuca dissitiflora и Melaleuca linariifolia . Использование названия, вероятно, произошло от описания капитаном Куком одного из этих кустов, который он использовал для приготовления настоя, который пили вместо чая.

Дополнительные и альтернативные лекарства , такие как масло чайного дерева ( Melaleuca ), становятся все более популярными в последние десятилетия. Это эфирное масло использовалось в Австралии почти 100 лет, но теперь оно доступно во всем мире как в чистом виде, так и в качестве активного компонента во множестве продуктов. Основное применение масла чайного дерева исторически основано на антисептических и противовоспалительных действиях масла.

В этом обзоре обобщаются последние достижения в нашем понимании антимикробной и противовоспалительной активности масла и его компонентов, а также клинической эффективности.Кратко обсуждается токсичность масла.

Композиция

Масло чайного дерева состоит из терпеновых углеводородов , в основном монотерпенов, сесквитерпенов и связанных с ними спиртов. Терпены представляют собой летучие ароматические углеводороды и могут рассматриваться как полимеры изопрена, имеющие формулу C 5 H 8 . Основополагающая статья Брофи и его коллег исследовала более 800 образцов масла чайного дерева с помощью газовой хроматографии и газовой хроматографии-масс-спектрометрии и сообщила примерно о 100 компонентах и ​​их диапазонах концентраций (см. эту таблицу).Среди более чем 98 соединений, содержащихся в масле, терпинен-4-ол отвечает за большую часть антимикробной активности (терпинен-4-ол, основной компонент эфирного масла Melaleuca alternifolia (масло чайного дерева), подавляет медиатор воспаления). продукции активированными моноцитами человека, 2000 г.).

Синтез терпинен-4-ола

Медицинское использование

Антимикробная активность

С начала 1990-х годов в научной литературе появилось много сообщений, описывающих антимикробную активность масла чайного дерева.Несмотря на то, что между методами, использованными в разных исследованиях, все еще существовали определенные расхождения, сообщаемые МИК часто были относительно схожими. В настоящее время проверена чувствительность широкого круга бактерий к маслу чайного дерева , и некоторые из опубликованных данных о чувствительности приведены в этой таблице. В то время как большинство бактерий чувствительны к маслу чайного дерева при концентрации 1,0% или менее, МПК превышает 2% для таких организмов, как комменсальные кожные стафилококки и микрококки, Enterococcus faecalis и Pseudomonas aeruginosa.Масло чайного дерева по большей части бактерицидно по своей природе, хотя оно может быть бактериостатическим при более низких концентрациях (Melaleuca alternifolia (масло чайного дерева): обзор противомикробных и других лечебных свойств, 2006).
Активность масла чайного дерева против устойчивых к антибиотикам бактерий вызвала значительный интерес, при этом наибольшее внимание до сих пор уделялось метициллинорезистентному золотистому стафилококку (MRSA). Исследования in vitro показали, что лечение маслом чайного дерева обеспечивает аналогичные показатели эрадикации по сравнению с лечением мупироцином (колонизация MRSA (ликвидация колонизации у людей без активной/инвазивной инфекции), 2011).

Лечение акне

Доказательства его эффективности при лечении различных кожных заболеваний были лишь анекдотичными, пока некоторые недавние исследования (например, Сравнительное исследование масла чайного дерева по сравнению с бензоилпероксидом при лечении акне, 1990) не доказали, что применение 5% чая масло дерева , по-видимому, так же эффективно, как 5% бензоилпероксид (Oxy-5, Benzac AC и др.), за счет уменьшения количества воспаленных и невоспаленных поражений (открытых и закрытых комедонов), хотя начало действия в случае масла чайного дерева было медленнее.Обнадеживает, что пациенты, получавшие масло чайного дерева, испытывали меньше побочных эффектов, например, оно меньше раздражало кожу лица.

Противовоспалительная активность

водорастворимых компонента масла чайного дерева могут подавлять выработку провоспалительных медиаторов активированными моноцитами человека. Многочисленные недавние исследования теперь подтверждают данные, приписывающие противовоспалительную активность маслу чайного дерева. Исследования in vitro за последнее десятилетие показали, что масло чайного дерева влияет на ряд иммунных реакций как in vitro, так и in vivo.Например, водорастворимые компоненты масла чайного дерева могут ингибировать индуцированную липополисахаридами продукцию медиаторов воспаления фактора некроза опухоли альфа (TNF-α), интерлейкина-1β (IL-1β) и IL-10 периферической кровью человека. моноцитов примерно на 50% и простагландина E2 примерно на 30% через 40 часов (масло Melaleuca alternifolia (чайного дерева): обзор антимикробных и других лечебных свойств, 2006).

Споры и выводы

Обилие данных in vitro, по-видимому, подтверждает давнее мнение о том, что масло чайного дерева обладает антимикробными и противовоспалительными свойствами.Несмотря на вышеупомянутые преимущества масла чайного дерева, в недавней литературе также появились некоторые критики. Например, в обзоре 2005 года говорится, что нет достаточных доказательств, чтобы рекомендовать рутинное использование для этой цели в клинических условиях (Эффективно ли масло чайного дерева в уничтожении колоний MRSA? Обзор, 2005).
Другие авторы считают, что, несмотря на некоторый прогресс, по-прежнему не хватает клинических данных, демонстрирующих эффективность против бактериальных, грибковых или вирусных инфекций. В настоящее время необходимы более масштабные рандомизированные клинические испытания , чтобы закрепить за собой место для применения масла чайного дерева в качестве местного лекарственного средства (терпинен-4-ол, основной компонент эфирного масла Melaleuca alternifolia (масло чайного дерева), подавляет выработку медиаторов воспаления за счет активированные моноциты человека, 2000).

Кроме того, несмотря на успехи в изучении противомикробных и противовоспалительных свойств масла чайного дерева, было проведено меньше исследований по безопасности и токсичности масла.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.

Вся информация, размещенная на сайте, носит ознакомительный характер и не является руководством к действию. Перед применением любых лекарств и методов лечения необходимо обязательно проконсультироваться с врачом. Администрация ресурса osteohondroz24.ru не несет ответственность за использование материалов, размещенных на сайте. Копирование материалов разрешается только с указанием активной ссылки на сайт.