Онкомаркеры жкт какие: Лабораторные маркеры рака толстой кишки

Содержание

CA-242 (углеводный антиген СА-242, опухолевый маркёр CA-242, Tumor marker CA-242)

Исследуемый материал Сыворотка крови

Метод определения иммуноферментный анализ

Клетки злокачественных новообразований в процессе своей жизнедеятельности продуцируют особые вещества, которые попадают в жидкие среды организма в повышенном количестве. В нормальных клетках эти вещества либо отсутствуют, либо присутствуют в очень малых количествах. Такие вещества, связанные с опухолями (опухолевые маркёры), могут быть определены иммунологическими методами с использованием специфических антител, направленных против иммуногенных участков соответствующих опухолевых маркёров. В комплексе с другими методами обследования, исследование их концентрации используют для обнаружения наличия опухоли в организме, для изучения стадии заболевания и/или контроля эффективности лечения.

Одним из таких современных маркёров злокачественных опухолей желудочно-кишечного тракта является углеводный антиген CA 242. Он был выявлен, как ассоциированный с опухолями антиген, благодаря моноклональным антителам (mAbs CA 242), формировавшимся при иммунизации мышей клетками колоректальной аденокарциномы — рака толстого кишечника человека. Присутствие CA 242 обнаружено на апикальной поверхности клеток протоков поджелудочной железы человека и на клетках слизистой толстого кишечника. Химическое строение СА 242 точно неизвестно, но показано, что его эпитоп (антигенная детерминанта, часть макромолекулы антигена, которая распознаётся иммунной системой) является углеводным антигеном, аналогично таким опухолевым маркёрам, как CA 19-9 и CA 50 (маркёры рака поджелудочной железы). В сыворотке CA 242 появляется на тех же макромолекулярных комплексах, что и CA 50, и CA 19-9. Таким образом, CA 242 связан (но не идентичен) с CA 19-9.

У большинства здоровых людей и у пациентов с доброкачественными заболеваниями уровень CA 242 обычно низкий. При обследовании здоровых людей CA 242 ниже уровня 20 Ед/мл имели 93% из них. Повышенный уровень этого маркёра характерен для пациентов со злокачественными опухолями желудочно-кишечного тракта. Определение CA 242 может быть использовано в качестве дополнительного теста в диагностике и при наблюдении пациентов с установленным диагнозом таких опухолей, а также при подозрении на них.

Исследование CA 242 не следует использовать в качестве замены какого-либо стандартного клинического обследования таких пациентов, а лишь в дополнение к принятым в настоящее время клиническим и лабораторным методам.

Показано, что комплексное определение опухолевых маркеров РЭА (см. №141), СА 19-9 (см. №144) и СА 242 повышает чувствительность и специфичность лабораторного исследования при диагностике рака толстого кишечника и прямой кишки и помогает оценить стадию процесса у пациентов с установленным диагнозом колоректального рака. Нормальный уровень всех этих маркёров при колоректальном раке исключает у пациента IV стадию заболевания (отдалённое метастазирование) и с вероятностью более 85% свидетельствует об отсутствии метастатического поражения регионарных лимфатических узлов. 

Важно! Тест не рекомендован для применения в целях скрининга, в связи с недостаточной чувствительностью и специфичностью.

 

Литература

  1. Курыгин А.А. с соавт. Дооперационный прогноз метастазирования рака желудка и толстой кишки с помощью опухолевых маркёров. Медицинский академический журнал, 2009, №4, с. 121-129.
  2. Hadlund C. et al. CA 242, a new tumour marker for pancreatic cancer: a comparison with CA 19-9, CA 50 and CEA. Br. J. Cancer, 1994, 70, p.487-492.
  3. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics. 4 ed. Ed. Burtis C.A., Ashwood E.R., Bruns D.E. Elsevier. New Delhi, 2006, p.2412.
  4. Материалы фирмы-производителя.

Что такое онкомаркеры и о чем свидетельствуют их показатели

Онкомаркеры — это особенные специфические белки/антигены, образующиеся в крови. В норме они выделяются клетками в незначительном количестве и выполняют в организме разнообразные функции. Однако при наличии злокачественного процесса концентрация этих веществ резко возрастает – онкомаркер может выделяться как самими опухолевыми клетками, так и здоровыми тканями, окружающими новообразование.

 

Ценностью исследования уровня онкомаркеров является возможность обнаружить патологический процесс задолго до появления первых проявлений заболевания. Кроме того, подобный анализ нередко ставит окончательную точку в сложных диагностических ситуациях.

 

Анализы крови на онкомаркеры обладают высокой информативностью при соблюдении рекомендаций перед сдачей:

  • употребление алкоголя и курения до проведения анализа не рекомендуются;
  • анализ проводят с утра натощак, приём пищи следует осуществлять за 8-12 часов до проведения забора крови;
  • пить жидкость можно в неограниченных количествах;
  • от приёма медикаментозных препаратов и различных медицинских манипуляция следует отказаться, а также уведомить о них своего врача;
  • повышенная физическая активность также не рекомендуется;
  • при проведении анализа у женщин также учитывают менструальный цикл женщины: анализ проводят в определённые дни.

Различные маркеры характеризуют различные опухоли. В некоторых случаях несколько маркеров характеризуют одну и ту же форму рака, тогда для повышения достоверности результатов одновременно проводят анализ нескольких опухолевых маркеров. Также один и тот же онкомаркер может свидетельствовать о нескольких формах рака.

 

  • ПСА или простато-специфический антиген. Вырабатывает злокачественная опухоль простаты. Нормальное содержание — до 4 нг на мл. Количество 4-10 нг на мг свидетельствует об угрозе развития рака простаты, а превышение 10 нг на мл считается патологическим. 

    Значительное повышение уровня ПСА в сыворотке иногда обнаруживается при гипертрофии предстательной железы, а также при воспалительных её заболеваниях. Также, следует учитывать, что пальцевое ректальное исследование, цистоскопия, колоноскопия, трансуретральная биопсия, лазерная терапия, задержка мочи могут вызвать более или менее выраженный и длительный подъём уровня ПСА. Влияние этих процедур на уровень ПСА максимально выражено на следующий день после их проведения, причём наиболее значительно — у больных с гипертрофией простаты. Исследование ПСА в таких случаях рекомендуется проводить не ранее чем через 7 дней после проведения перечисленных процедур. Уровень ПСА повышается при доброкачественных и злокачественных заболеваниях предстательной железы. При этом при карциноме простаты больше увеличивается доля связанной фракции, поэтому соотношение между свободным и общим ПСА уменьшается.

  • РЭА или раково-эмбриональный антиген. Норма онкомаркера — до 5 нг/мл, 5-8 мг на мл рассматривается как пограничное состояние, а патологией является содержание этого онкомаркера в количестве выше 8 нг/мл. В данном случае возможно развитие рака легких, рака прямой или толстой кишки, желудка, яичников, рак груди, щитовидной или поджелудочной железы.

    Определение содержания РЭА в сыворотке крови человека имеет диагностическое значение, и может быть использовано для мониторинга терапии, выявления рецидивов и недиагносцируемых метастазов рака различных локализаций и органной специфичности.

  • Онкомаркер СА-125 вырабатывается раковой опухолью яичника. Норма — до 30 МЕ/мл. Уровень 30-40 МЕ/мл означает высокий риск развития рака, при содержании этого онкомаркера в количестве больше 40 МЕ/мл врач уже предполагает наличие раковой опухоли яичника.

    Определение содержания СА-125 в сыворотке крови человека может быть использовано для диагностики рака яичников и динамического контроля его уровня с целью оценки эффективности проводимой терапии, раннего выявления метастазов, а также прогнозирования течения заболевания.  Неонкологическая патология: повышение уровня СА-125 в крови наблюдается при вовлечении в процесс серозных оболочек — перитоните, перикардите, плеврите разной этиологии. Более высокое увеличение уровня СА-125 в крови наблюдается иногда при различных доброкачественных гинекологических опухолях (кисты яичников), а также при воспалительных процессах, вовлекающих придатки, и доброкачественной гиперплазии эндометрия.

  • СА-19-9 — вырабатывается при развитии рака поджелудочной железы. Норма — до 30 МЕ/мл, опасные значения — 30-40 МЕ/мл, выше 40 МЕ/мл — развивается раковое новообразование.

    Уровень CА 19-9 повышается при злокачественных новообразованиях: рак поджелудочной железы; рак желчного пузыря и желчных путей; рак мочевого пузыря; первичный рак печени; рак желудка; рак прямой кишки; рак сигмовидной кишки; рак молочной железы; рак яичников; рак матки. Неонкологическая патология, которая сопровождается повышением уровня CА 19-9: цирроз печени; холецистит; муковисцидоз; гепатиты; желчекаменная болезнь.

  • СА-15-3 — онкомаркер рака груди. Норма — не более 38 МЕ/мл.

    Повышение уровня CA 15-3 наблюдается при злокачественных новообразованиях: рак молочной железы; бронхогенный рак; рак желудка; рак печени; рак поджелудочной железы; рак яичников; рак шейки матки; рак матки; рак эндометрия. Неонкологическая патология: доброкачественные заболевания молочных желез; цирроз печени; беременность в III триместре; аутоиммунные заболевания.

Важно помнить! Отклонение результатов от нормы не всегда является показателем онкологии. Уровень многих индикаторных соединений способен повышаться при воспалительных процессах, травмах органов, гормональных сбоев. В таком случае медицинским специалистом учитывается не только непосредственное повышение уровня онкомаркеров, но и степень данного увеличения, клинические симптомы, взаимосвязь с результатами других методов исследований и анализами. На основе всей этой диагностической картины и определяется причина патологических изменений.

«Онкомаркеры при раке желудка» – Яндекс.Кью

Онкомаркеры — это особые вещества, которые выявляются в анализах крови или мочи у пациентов со злокачественными новообразованиями. На заре изучения этого направления предполагалось, что онкомаркеры будут использоваться для ранней диагностики и скрининга рака.

На деле все оказалось намного сложнее, например повышение уровня многих онкомаркеров не связано со злокачественными процессами, и более того, может проявляться в норме у здоровых людей. Также было выявлено, что у многих пациентов с уже установленным диагнозом злокачественного новообразования, уровень онкомаркеров остается в норме или повышается незначительно.

На сегодняшний день определение онкомаркеров для ранней диагностики используется для ограниченного количества нозологий. В основном их применяют для дополнительной диагностики и динамического наблюдения эффективности лечения и прогрессирования заболевания.

Какие онкомаркеры используются для диагностики рака желудка

CA-19-9

Этот маркер вырабатывается эпителиальными клетками органов желудочно-кишечного тракта. Соответственно, при опухолях, происходящих из этих клеток, уровень СА19-9 существенно повышается. Больше всего показатели изменяются при раке поджелудочной железы, но могут увеличиваться и при раке толстой кишки, печени, желчных протоков и желчного пузыря, панкреатитах, муковисцидозах. Таким образом, учитывая низкую чувствительность и специфичность, данный показатель для самостоятельной диагностики и мониторинга не применяется.

РЭА

РЭА (раково-эмбриональный антиген) — белок, тканевой маркер онкопатологии. Используется при диагностике опухолей толстой кишки, но может быть результативен и при раке желудка. В норме его показатели крайне низки, но при наличии злокачественного новообразования, его уровень резко увеличивается.

СА 72-4

СА 72-4 — это гликопротеин, который располагается на поверхности эпителия органов ЖКТ во время внутриутробного развития человека. У взрослых людей он появляется при колоректальном раке, раке желудка и других злокачественных опухолях. Однако у 6,7% пациентов его увеличение было выявлено и при наличии доброкачественных опухолей.

Чувствительность при раке желудка составляет 40-46%, причем чем выше показатель онкомаркера, тем больше распространен злокачественный процесс, т.е. имеется корреляция со стадией. После радикального удаления рака, показатель СА 72-4 приходит в норму в течение 3-4 недель. Что касается метастазов, то данный онкомаркер рака желудка более чувствителен, чем РЭА или СА 19-9. Определение СА 72-4 проводится для оценки шансов на выживание у больных с установленным диагнозом карциномы желудка. Чем выше показатель онкомаркера, тем выше стадия заболевания.

Что показывают онкомаркеры при раке желудка

В целом, анализы на онкомаркеры рака желудка не отличаются высокой чувствительностью и специфичностью. Это значит, что нормальные значения результатов не гарантируют отсутствие опухоли, а повышенные результаты не означают наличие именно рака. Однако при повышении уровня онкомаркера в десятки раз, вероятность этого увеличивается.

Диагностическая ценность исследования онкомаркеров увеличивается при одновременном исследовании нескольких показателей, например СА 19-9 и РЭА, либо СА 72-4 и РЭА. Но для самостоятельной диагностики рака желудка их использовать все равно нельзя.

СА 19-9

Референсные значения онкомаркера СА19-9 находятся в пределах 0-34 Ед/мл. Такие показатели наблюдаются у 95% здоровых людей.

Повышение уровня онкомаркера может свидетельствовать о следующих заболеваниях:

  • Рак поджелудочной железы. Чем выше уровень СА 19-9, тем более распространен патологический процесс. Наибольшая концентрация наблюдается при наличии отдаленных метастазов, т.е. на 4-й стадии заболевания.
  • Рак желудка.
  • Рак толстой кишки.
  • Карцинома печени.
  • Рак желчных протоков и желчного пузыря.
  • Рак яичников.

Помимо этого, повышение уровня данного онкомаркера наблюдается при некоторых доброкачественных заболеваниях:

  • Гепатит.
  • Цирроз печени.
  • Панкреатит.
  • Желчно-каменная болезнь.
  • Муковисцидоз.

РЭА

Референсные значения РЭА следующие:

  • Для некурящих людей ниже 3,8 нг/мл.
  • Для курящих — 0-5,5 нг/мл.

Это нормальные уровни РЭА, характерные для здоровых людей, но такой результат возможен и при наличии опухоли, нечувствительной к данному тесту.

Повышение уровня данного онкомаркера может наблюдаться как при злокачественных, так и доброкачественных заболеваниях. Злокачественные опухоли:

  • Рак толстой кишки.
  • Рак желудка.
  • Рак легких.
  • Рак молочной и поджелудочной железы.

Неонкологические заболевания:

  • Цирроз печени.
  • Гепатиты.
  • Кишечные полипы.
  • Хронические воспалительные заболевания кишечника, например, язвенный колит.
  • Некоторые заболевания легких, в том числе туберкулез.
  • Аутоиммунные патологии.

СА 72-4

Референсные значения онкомаркера СА 72-4 0-6,9 Ед/мл. Нормальный показатель анализа характерен для здоровых людей, повышение его значения наблюдается в следующих случаях:

  • Рак желудка.
  • Некоторые формы рака яичника.
  • Колоректальный рак.
  • Рак легких.
  • Гепатиты.
  • Цирроз печени.
  • Киста яичника.
  • Воспаления органов ЖКТ.

Показания к назначению анализа на онкомаркеры желудка

  • Дополнительный метод диагностики заболевания.
  • Отслеживание динамики патологического процесса (прогрессирование заболевания).
  • Контроль лечения.
  • Контроль развития рецидивов.

Подготовка к анализу на онкомаркеры рака желудка

Анализы на онкомаркеры рака желудка сдаются строго натощак, последний прием пищи должен быть не ранее чем за 8 часов до забора крови.

Для исследования берется венозная кровь посредством венепункции. Другой подготовки не требуется.

Надежность и достоверность результатов анализа на онкомаркеры при раке желудка

Надежность и достоверность результатов будет зависеть от следующих аспектов:

  • Особенности забора материала и манипуляции с ним до доставки в лабораторию.
  • Используемые для проведения анализа диагностические системы и оборудование.
  • Наличие сопутствующих заболеваний, которые могут приводить к увеличению концентрации исследуемых онкомаркеров.

Для получения достоверных результатов рекомендуется сдавать анализы в аккредитованных лабораториях, в которых налажены преаналитические и аналитические этапы проведения исследований, а также проведение внутрилабораторного и внешнего контроля качества.

Интерпретация результатов онкомаркеров при раке желудка

Назначать и интерпретировать результаты анализов на онкомаркеры должен врач, который имеет опыт диагностики и лечения рака желудка. Интерпретация осуществляется на основании данных обследования, анамнеза и клинической картины. Изолированное использование онкомаркеров для скрининга или обнаружения рака желудка недопустимо.

Нормальные значение онкомаркеров желудка не гарантируют отсутствие злокачественных опухолей. Такие результаты могут быть при ранней стадии рака, когда уровень маркера еще не повысился, либо есть опухоли, которые вообще не приводят к повышению его уровня.

Повышенные результаты также требуют дополнительного обследования, поскольку могут свидетельствовать о наличии опухоли другой локализации, либо неонкологического заболевания. В сомнительных случаях исследование на онкомаркеры рака желудка назначают в динамике. Нарастание его уровня свидетельствует о наличии прогрессирующего заболевания, уменьшение уровня маркера — о выздоровлении.

Изначально очень высокие показатели онкомаркеров, особенно если их значение превышено в несколько раз, с высокой долей вероятности говорит о наличии злокачественного процесса, но не гарантирует этого на 100% и тем более не позволяет установить вид новообразования.

Наибольшей информативностью при раке желудка обладает динамическое исследование онкомаркеров. Снижение их уровня говорит об эффективно проведенном лечении, нормализация показателей отмечается после радикально проведенной операции.

Если после проведенного лечения уровень онкомаркера начинает расти, это свидетельствует либо о рецидиве заболевания, либо о его прогрессировании. Если показатели увеличиваются в десятки раз, это может свидетельствовать об отдаленных метастазах.

Причины рака желудка

Как и почему развивается рак желудка, до конца не ясно. Но было доказано воздействие некоторых факторов, при которых вероятность возникновения опухоли повышается. Сюда относят:

  • Хронический атрофический гастрит, особенно на фоне гиперпластических процессов эпителия. Данное заболевание обнаруживалось у 60% больных раком желудка. При этом имело значение локализация процесса. Например, при расположении атрофии в антральной части желудка, риски развития рака увеличиваются в 18 раз, а при тотальном поражении органа — в 90 раз.
  • Инфицирование Helicobacter Pylory. Вероятность развития рака желудка у таких пациентов выше в 3-4 раза по сравнению с общепопуляционными показателями.
  • Особенности питания. Содержание в рационе большого количества острых, пряных, маринованных, соленых блюд, фастфуда, копченостей и жиров статистически значимо увеличивает вероятность развития опухолей ЖКТ, в том числе и желудка.
  • Наличие аденоматозных полипов. Такие новообразования имеют относительно высокий риск малигнизации, поэтому их рекомендуют своевременно удалять.
  • Курение.
  • Наличие язвенной болезни желудка в анамнезе. При расположении язвы в теле желудка увеличивается риск развития злокачественного новообразования в 2 раза.
  • Наличие операций на желудке в анамнезе. Увеличивает риск развития рака в 4 раза.
  • Болезнь Менетрие, которая характеризуется гипертрофической гастропатией или гиперпластическим гигантоскладчатым гастритом.
  • Пьянство и алкоголизм.
  • Пернициозная анемия. Анемия со злокачественным течением, которая развивается из-за невозможности усвоения витамина В 12. также она сопровождается иммунодефицитными состояниями, что увеличивает риск развития злокачественной опухоли на 10%.
  • Наследственная предрасположенность. Наличие злокачественных опухолей желудка у ближайших кровных родственников увеличивает риск развития рака данной локализации на 5-20%. Есть мнение, что именно от этого заболевания в свое время богибли Наполеон Бонапарт и его отец.
  • Иммунодефицитные состояния.
  • Работа с канцерогенными веществами.

Запись на консультацию круглосуточно +7 (495) 255-53-51

Материал предоставлен www.euroonco.ru

Онкомаркер СА -242. Диагностика рака ЖКТ в Запорожье в МЦ «ШЕКИ»

Онкомаркер СА 242 применяется для диагностики онкологических процессов в толстом и тонком кишечнике, а также в поджелудочной железе. Специфичность данного маркера, позволяет выявить заболевание на ранних сроках течения болезни. При доброкачественных изменениях в ЖКТ, данный маркер может увеличить концентрацию, но очень незначительно. По сравнению, с другими онкомаркерами рака ЖКТ, маркер СА 242 имеет более высокую чувствительность и дает более точную прогностическую картину. Сдать анализ на онкомаркер СА 242 в Запорожье можно быстро и по доступной цене, в лаборатории медицинского центра «ШЕКИ». Нередко врачи рекомендуют сдавать онкомаркер СА 242 в дуэте с РЭА – раковый эмбриональный антиген, что увеличивает точность диагностики.

Причины рака ЖКТ

Желудочно-кишечный тракт включает в себя целую систему органов, онкомаркер СА 242 позволяет с высокой долей вероятности диагностировать рак поджелудочной железы, толстого кишечника и прямой кишки. Точных причин, вызывающих злокачественные изменения клеток, достоверно выявить пока не удалось, но факторы, приводящие к риску возникновения патологических процессов уже известны:

  • Малоподвижный образ жизни
  • Богатая углеводами и животными жирами диета
  • Генетическая предрасположенность
  • Злоупотребление алкоголем и курением
  • Плохая экологическая обстановка
  • Работа на вредном производстве
  • Инфекция Хеликобактер Пилори
  • Хронические заболевания ЖКТ
  • Пожилой возраст

Симптомы онкопроцессов в желудочно-кишечном тракте

Симптоматика онкологической патологии в ЖКТ весьма неспецифичны и напоминают симптомы многих других заболеваний, поэтому важно не спутать рак с другими патологиями и начать лечение. Помимо клинических анализов и аппаратной диагностики, врачи назначают анализ на онкомаркер СА 242, позволяющий отличить доброкачественные патологические процессы от злокачественных, определить стадию заболевания, если выявлен рак, и контролировать процесс лечения.  К общим симптомам, которые характерны для онкологических процессов в ЖКТ относятся:

  • Потеря веса без видимых причин
  • Хроническая усталость, слабость
  • Наличие крови в стуле
  • Нарушение работы кишечника – частые диареи, запоры, которые не поддаются действию клизм и слабительных препаратов
  • Тошнота и болевые ощущения в животе
  • Рвота

Профилактика онкологических процессов в желудочно-кишечном тракте

К профилактическим мерам онкологии в ЖКТ относятся, прежде всего, изменение образа жизни в сторону здорового:

  • Здоровое питание с большим количеством клетчатки, витаминов, свежих фруктов и овощей, рыбы, молочных продуктов, диетического мяса
  • Исключение из рациона питания продуктов, богатых консервантами
  • Увеличение физической активности
  • Бросить курить и не злоупотреблять алкогольными напитками
  • Раз в пять лет (для людей старше 50 лет), при наличии жалоб на плохое самочувствие, делать колоноскопию, УЗИ и другие аппаратные исследования, на усмотрение врача.
  • Если есть риски наследственной онкопатологии, то проводить регулярно специальные обследования (колоноскопию)
  • Сдавать кровь на онкомаркер СА 242

Опухолевые маркеры: Рак толстой кишки (РТК)

Определяющим клиническими ОМ при РТК является раково-эмбриональный антиген РЭА (СЕА) и комплиментарный маркер СА19.9.

РЭА – гликопротеид, располагающийся в периферических слоях клеточной мембраны. Физиологическое значение РЭА точно неизвестно, возможно, что белок усиливает внутриклеточное сцепление молекул. Диагностическое и прогностическое значение обсуждается уже третье десятилетие. Клетки, экспрессирующие маркер, стимулируют метастазирование, связываясь с рецепторами РЭА в легких и печени. У 40% больных РТК не выявляется. Неспецифичен, так как образуется при раке молочной железы, легкого, яичников, при гидронефрозе и желчнокаменной болезни, у курильщиков.

Маркер СА19.9 имеет прогностическое значение: при уровне свыше 37 ед/мл риск смерти после операции в ближайшие 3 года возрастает в 4 раза.

Цитокератиновые антигены СК17 и СК18 экспрессируются при РТК у 28%. Указывают на наихудший прогноз для выживаемости. Являются мишенью для моноклональных антител.

У 865 больных РТК определяется сиалозил-Тн антиген, коррелирует с плохой выживаемостью. Антиген не выделяется нормальной слизистой, за исключением гиперпластического полипа.

Диагноз. Верхняя граница нормы для некурящих составляет 2.5-5.0 нг/мл; для здоровых курильщиков – 7-10.0 нг/мл. Несмотря на то, что 70-90% пациентов с аденокарциномой кишечника имеют повышенный уровень РЭА в крови, его чувствительность при ранних стадиях заболевания достигает лишь 20%. Положительные значения РЭА у пациентов с симптомами не могут рассматриваться как показатель злокачественного роста, поскольку различные доброкачественные состояния связаны с повышенными уровнями РЭА. Однако доброкачественные патологии редко вызывают значительное повышение (выше 10 нг/мл) маркера и не вызывают резкого прогрессивного увеличения его концентрации, как это наблюдается при раке. У пациентов с соответствующими симптомами и значениями РЭА выше 20 нг/мл имеется высокая вероятность рака.

Прогноз. Определение РЭА у пациентов с РТК до операции может использоваться в качестве прогностического индикатора в дополнение к патологическому стадированию и планированию объёма хирургического вмешательства. Показано, что повышенные значения РЭА до операции связаны с высоким риском рецидива и плохим прогнозом. На последней конференции Американский объединённый комитет по раку предложил включить РЭА в систему стадирования TNM для колоректального рака.

Мониторинг. После радикального удаления опухоли концентрация РЭА в крови, если она была повышенной до операции, должна снижаться до нормальных значений в соответствии с периодом полужизни. Если уровень РЭА не снижается до нормы, то вероятно, что имеет место неполная резекция опухоли, либо скрытые метастазы. Повышение уровня РЭА является первым подозрительным в отношении рецидива сигналом, который предсказывает рецидив в 80% случаев. Этот факт является основанием для проведения ревизионной лапаротомии даже при незначительном повышении уровня маркера и несмотря на то, что другие диагностические процедуры могут быть отрицательными. Наибольшая чувствительность РЭА показана при метастазах РТК в печень и забрюшинные л/узлы, невысокая чувствительность – при локальных, перитонеальных или лёгочных включениях.

Уровень РЭА не коррелирует с размерами опухоли, в большей степени зависит от дифференцировки: при недифференцированном раке часто негативен.

Медленное повышение уровней РЭА связано с локорегиональным рецидивом, тогда как быстрое повышение обычно означает метастазы в печень. Использование РЭА в мониторинге пациентов способствует увеличению интервалов между радиологическими исследованиями и уменьшению числа этих исследований, хотя и не может полностью их заменить.

Контроль эффективности терапии. В случае метастатического заболевания РЭА точно отражает активность болезни и позволяет клиницисту распознать и прервать неэффективную терапию. Для оценки ответа, по рекомендациям ASCO и EGTM, РЭА должен определяться перед началом терапии и затем с регулярными интервалами в 2-3 месяца в течение, по крайней мере, первых двух лет после постановки диагноза (табл.1).

Таблица 1. Время после хирургического лечения первичного РТК и порядок обследования.

  До 2 лет 3-4 года Более 4 лет
Определение РЭА Каждые 2 мес. Каждые 4 мес. Раз в год
Осмотр врача Каждые 3-6 мес. Каждые 6-12 мес. Раз в год
Реакция кала
на скрытую кровь
Каждые 3-6 мес. Каждые 6-12 мес. Раз в год
Колоноскопия Раз в год Раз в 3 года Раз в 3 года
Сигмоскопия Каждые 6 мес. Каждые 6-12 мес. Каждые 6-12 мес.
Рентгеноскопия
грудной клетки
2 раза в год Раз в год Раз в год

Прогрессирование болезни может быть документировано посредством двух последовательных определений РЭА, превышающих ДК, даже в отсутствии других подтверждающих критериев. Существует мнение, что прогностическое значение РЭА достаточно высоко и позволяет исключить необходимость подтверждающего тестирования.

Опухолевые маркеры (онкомаркеры) – что это такое?

21.03.2018 Опухолевые маркеры (онкомаркеры) — вещества различной природы, которые находясь в жидких средах (моча, кровь и другие) организма человека в определенных концентрациях указывают на наличие опухоли в нем.
Значение онкомаркеров для диагностики зависит от их специфичности и чувствительности. Специфичность — процент отрицательных результатов онкомаркеров в анализах у здоровых лиц. Чувствительность — процент положительных показателей онкомаркеров в анализах у онкологических больных. Однако, на сегодняшний день, нет ни одного маркера опухолевого роста, который на 100% встречался бы только у больных онкологическими заболеваниями. 
Опухолевые маркеры могут повышаться и при воспалительных заболеваниях различного происхождения, доброкачественных процессах в организме и т. д. 

Онкомаркер СА 125 — ранняя диагностика рака яичников.
Онкомаркер СА 125 — белок, который синтезирует мезотелий серозных оболочек: плевры, перикарда, брюшины. У женщин этот белок секретирует эндометрий матки, поэтому его концентрация в крови изменяется во время менструального цикла. 
Верхней границей нормы СА 125 для 94% здоровых лиц является уровень менее 35 ЕД/мл. У женщин в менопаузе дискриминационный уровень составляет менее 20 ЕД/мл. Уровень СА 125 у пациентов с раком яичников после лечения должен быть менее 10 ЕД/мл.
Онкомаркер СА 125, в основном, применяется для ранней диагностики рака яичников у женщин менопаузального возраста и у женщин, у которых в семье наблюдались случаи рака яичников. А для молодых женщин он имеет низкую специфичность и чувствительность. У них возможны другие причины повышения этого опухолевого маркера:

1. Раковые заболевания (рак эндометрия матки, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак легких, колоректальный рак, рак желудка, первичный рак печени, метастазы в печень.
2. Другие болезни. 
● Заболевания, с вовлечением серозных оболочек (плеврит, перитонит, перикардит).
● Воспалительные заболевания органов малого таза, пневмония, гепатит, панкреатит, цирроз, почечная недостаточность. В данном случае онкомаркер СА 125, как и многие другие опухолевые маркеры, выступает в качестве белка воспаления.
● Кисты яичников и доброкачественные опухоли.
● Эндометриоз различных локализаций.
3. Беременность, менструация.
Онкомаркер СА 125 применяется еще и для определения рецидива рака яичников: стойкое повышение его уровня у пациентов в ремиссии означает рецидив заболевания. СА 125 также применяется для оценки эффективности лечения рака яичников. В клинико-диагностической лаборатории МБУЗ «ЦРБ» Волгодонского района можно пройти исследование на онкомаркер СА 125.

Онкомаркер РЭА (раково-эмбриональный антиген)
Онкомаркер РЭА относится к антигенам плода, у которого он продуцируется в слизистых оболочках кишечника и желудка. После рождения синтез его снижается. Дискриминационный уровень РЭА менее 3–5 нг/мл, у курящих возможен уровень менее 10 нг/мл.
Онкомаркер РЭА, в первую очередь, — маркер рака ободочной кишки и рака прямой кишки. Он отражает объём раковой опухоли перед операцией, а также прогноз и пятилетнюю выживаемость больных после лечения. Также РЭА повышается при аденогенных опухолях (опухоли из железистой ткани): рак желудка, аденокарцинома легких, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак яичников, рак предстательной железы, рак эндометрия. И других заболеваниях печени, легких, желудочно-кишечного тракта.
Опухолевые маркеры РЭА, СА 19-9 и СА 72-4 в совокупности имеют высокую чувствительность для опухолей желудочно-кишечного тракта. РЭА — чувствительный маркер метастазов аденогенных опухолей в кости, легкие, печень.

Онкомаркер РЭА также применяется для оценки эффективности лечения больных аденогенными опухолями.
Онкомаркер SCC (антиген плоскоклеточного рака)
Онкомаркер SCC — маркер плоскоклеточного рака, является белком, который синтезируют эпителиальные клетки кожи, бронхов, шейки матки, пищевода, анального канала. Верхняя граница нормы (дискриминационный уровень) — 1,5 нг/мл.
Онкомаркер SCC повышается при наличии опухолей из плоского эпителия: рак шейки матки, рак языка, рак головы и шеи, рак пищевода, рак легких, рак гортани, рак влагалища, рак вульвы и других заболеваний: заболевания кожи (экзема, псориаз, красный плоский лишай), хроническая печёночная недостаточность, туберкулёз, хроническая почечная недостаточность. Поэтому показания к его определению следующие:

1. Оценка эффективности терапии пациентов плоскоклеточным раком с изначально повышенным SCC.
2. Мониторинг пациентов плоскоклеточным раком для диагностики рецидивов.

Онкомаркер АФП (альфа-фетопротеин)
Онкомаркер АФП — антиген плода, транспортный белок печени плода. Верхняя граница нормы менее 15 нг/мл.
Онкомаркер АФП применяется для диагностики гепатоцеллюлярного рака, а также для мониторинга пациентов. АФП также повышается при наличии метастазов других опухолей в печени.У этих больных он используется для оценки эффективности лечения.
Повышенные уровни АФП бывают и у больных с опухолями яичников (хорионэпителиомы, тератомы, опухоли эндодермального синуса, дисгерминомы) и яичка. У этих больных АФП применяется для определения рецидивов.
Также онкомаркер АФП применяется для диагностики гепатоцеллюлярного рака у больных с циррозом печени, хроническими гепатитами.
Онкомаркер ХГЧ (хорионический гонадотропин человека)
Онкомаркер ХГЧ — гормон, синтезируемый плацентой и хорионом. Дискриминационный уровень ХГЧ в крови у мужчин и небеременных женщин менее 5 МЕ/мл, пограничные значения составляют 5–10 МЕ/мл.
Онкомаркер ХГЧ применяется для диагностики беременности, пузырного заноса (уровень ХГЧ достигает больших значений, иногда более 1.000.000 МЕ/мл), хориокарциномы (также сильное повышение уровня ХГЧ). А также для оценки эффективности терапии и с целью диагностики рецидивов у больных трофобластической болезнью.

Онкомаркер СА 19-9
Онкомаркер СА 19-9 — белок плода, синтезируемый клетками эпителия желудочно-кишечного тракта. Дискриминационный уровень СА 19-9 равен 37 ЕД/мл. У взрослых он содержится в скудных концентрациях в железистом эпителии внутренних органов, поэтому его повышение означает наличие в организме человека аденогенных опухолей различной локализации: рак поджелудочной железы, рак желудка, рак желчного пузыря, рак яичников, колоректальный рак, рак пищевода, рак печени, метастатический рак печени. Или других заболеваний: цирроз печени, гепатиты, жёлчнокаменная болезнь, холецистит, панкреатит, холестаз, эндометриоз, муковисцидоз, миома матки.
Онкомаркер СА 19-9 чаще повышается при раке поджелудочной железы (76-81% случаев), для него он опухолевый маркер выбора. При раке печени (51-74% случаев), при раке желудка, колоректальном раке. СА 19-9 повышается в 4179% случаев рака яичников. Поэтому данный опухолевый маркер применяется для диагностики данных заболеваний, оценки эффективности лечения и определения прогрессирования болезни.
Онкомаркер СА 19-9 также широко применяется для мониторинга пациентов с эндометриозом для оценки лечения и определения рецидивов заболевания. 
Онкомаркер СА 72-4
Онкомаркер СА 72-4 — белок плода, синтезируемый эпителием желудочно-кишечного тракта (ЖКТ). У взрослых людей находится в скудных концентрациях в эпителии ЖКТ. Верхняя граница нормы равна 5,3 ЕД/мл.
Онкомаркер СА 72-4 повышается чаще при раке желудка (2979% случаев) и для него он является опухолевым маркером выбора. Он также применяется при раке желудка для диагностики рецидивов. 
Для рака яичников чувствительность СА 72-4 составляет 7178% и он также считается маркером выбора для этого заболевания.
Маркер опухолевого роста СА 72-4 повышается и при других онкологических заболеваниях: рак поджелудочной железы, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак легких, рак эндометрия.
Онкомаркер СА 15-3
Онкомаркер СА 15-3 связан с раком молочной железы. Верхняя граница нормы (дискриминационный уровень) у небеременных женщин равна 28 ЕД/мл. У беременных женщин в 3 триместре беременности он может повышаться до 50 ЕД/мл.
Чувствительность СА 15-3 зависит от стадии рака молочной железы, на ранних стадиях болезни он обладает низкой чувствительностью (около 20%), поэтому не применяется для ранней диагностики рака молочной железы. А при распространенном процессе чувствительность составляет 84%. Поэтому онкомаркер СА 15-3 применяется для оценки эффективности лечения рака молочной железы и диагностики рецидивов заболевания.
Онкомаркер UBC (антиген рака мочевого пузыря)
Онкомаркер UBC — растворимый в воде фрагмент цитокератинов 18 и 8, синтезируемых эпителиальными клетками. При росте рака мочевого пузыря их синтез увеличивается и их можно определять в моче. В моче концентрацию опухолевого маркера UBC корригируют по отношению к концентрации креатинина. Верхняя граница нормы составляет 0,00049 мкг/мкмоль креатинина.
Онкомаркер UBC применяется в диагностике рака мочевого пузыря, для оценки эффективности терапии и выявления рецидивов, так как чувствительность его у пациентов с раком мочевого пузыря 61-86%, а специфичность 94%.

Онкомаркер CYFRA 21-1
Онкомаркер CYFRA 21-1 – белок эпителия, является маркером раковых болезней. Верхняя граница его нормы равна 2,3 нг/мл.
Онкомаркер CYFRA 21-1 применяется для диагностики рака легких, оценки эффективности лечения, наблюдения за больными с раком легких и больными с другими раковыми заболеваниями: рак шейки матки, рак мочевого пузыря, рак пищевода, рак яичников, рак молочной железы, рак прямой кишки.

Онкомаркер TU M2-PK
Онкомаркер Tu M2-PK — белок-фермент синтеза АТФ при низкой концентрации кислорода, что бывает в опухолевых клетках, то есть он отражает метаболизм опухолей в целом. Верхняя граница нормы равна 17 ЕД/мл, пограничная зона составляет 17–20 ЕД/мл.
Онкомаркер Tu M2-PK повышается при раке почки, раке легких, раке пищевода, колоректальном раке, раке желудка, раке молочной железы, раке поджелудочной железы. Но особенно высокую специфичность (89%) и чувствительность (79%) он имеет к раку почки, поэтому он применяется для мониторинга пациентов с раком почки для определения эффективности противоракового лечения и раннего выявления рецидивов.

Онкомаркер НСЕ (нейронспецифическая енолаза)
Онкомаркер НСЕ — белок-фермент, синтезирующийся в легочной и нервной тканях. Верхняя граница нормы равна 12,5 нг/мл.
Онкомаркер НСЕ имеет большую чувствительность (45–86%) и специфичность для рака легких и используется для диагностики рака легких и для оценки эффективности терапии. Также он применяется для диагностики нейроэндокринных опухолей, карциноидов, феохромоцитомы, рака почки, семином.

Онкомаркер ТГ (тиреоглобулин)
Онкомаркер ТГ — белок-предшественник гормонов щитовидной железы. Верхняя граница нормы опухолевого маркера ТГ равна 60 нг/мл. 
Онкомаркер ТГ характерен для рака щитовидной железы, но и для других заболеваний этого органа: тиреотоксикоза, тиреоидита, токсической аденомы щитовидной железы. Поэтому он применяется для выявления метастазов и рецидивов заболевания у больных раком щитовидной железы, а также для определения первичного очага при наличии метастазов в легких и костях опухолей с неизвестной локализацией.

Онкомаркер BONE TRAP
Онкомаркер Bone TRAP белок-фермент остеокластов (клеток разрушающих костную ткань). Верхняя граница нормы для женщин до 45 лет — 1,1–3,9 ЕД/мл, для женщин 45– 55 лет — 1,1–4,2 ЕД/мл, а для женщин в менопаузе — 1,4–4,2 ЕД/мл, для мужчин — 1,5–4,7 ЕД/мл.
Онкомаркер Bone TRAP — опухолевый маркер метастазов в кости рака молочной железы и рака предстательной железы, а также маркер наличия множественной миеломы в костях. Поэтому его применяют для диагностики метастазов в кости. Также он дает оценку эффективности лечения костных метастазов.
Онкомаркер Bone TRAP применяется еще и при остеопорозе, гиперпаратиреозе, болезни Педжета.
Опухолевые маркеры в соответствии с локализацией опухолевого процесса представлены ниже:

Онкомаркеры молочной железы: СА 15-3, TPS, РЭА, СА 72-4.
Онкомаркеры яичников: СА 125, СА 19-9, СА 72-4, АФП, ХГЧ.
Онкомаркеры матки: SCC, CYFRA 21-1, РЭА, TPS, СА 125, СА 19-9, СА 72-4.
Онкомаркеры желудка: СА 72-4, СА 19-9, РЭА.
Онкомаркеры кишечника: СА 72-4, СА 19-9, РЭА, Tu M2-PK
Онкомаркеры легких: CYFRA 21-1, РЭА, НСЕ, Tu M2-PK, SCC, СА 72-4.
Онкомаркеры поджелудочной железы: СА 19-9, СА 242, Tu M2-PK.
Онкомаркеры пищевода: SCC, Tu M2-PK.


сдать анализ в клинике Городской Медицинский Центр

Проблемы с кишечником возникают у людей по разным причинам: из-за некачественных продуктов питания, чрезмерного употребления пищи, приема некоторых медикаментов и так далее. Хорошо, если дискомфорт носит временный характер и легко поддается лечению. К сожалению, такие проблемы могут быть вызваны и онкологическим заболеванием, которое во многих случаях протекает бессимптомно до определенной стадии. Злокачественные опухоли кишечника занимают третье место среди всех онкологических заболеваний. Поэтому с целью ранней диагностики опухолевых образований стоит сдавать анализ крови на онкомаркеры кишечника.

Что могут показать онкомаркеры

Онкомаркеры – это белки определенного патологического типа, содержащиеся в крови. Такие белки, но в малом количестве, находятся в крови даже здорового человека. Если же в организме развивается злокачественная опухоль, то концентрация онкомаркера резко увеличивается. Раковая опухоль системы желудочно-кишечного тракта очень опасна в силу скрытого течения заболевания. На первых порах пациент не наблюдает никаких изменений, его ничего не беспокоит, а с появлением жалоб и различного рода симптомов, как правило, диагностируется уже запущенная стадия рака. Что показывает анализ на онкомаркеры кишечника? По результатам такого исследования врач может определить предварительный диагноз, установить стадию и локализацию заболевания. Этот анализ также применяется с целью контроля за результатами лечения, когда злокачественная опухоль кишечника уже диагностирована и лечится, либо с целью наблюдения за отсутствием рецидива после оперативного вмешательства.

Виды онкомаркеров

На ранних этапах развитие опухоли в кишечнике определить крайне сложно. Нужно обращать внимание на появление таких симптомов, как частые запоры и вздутие живота. Это первые сигналы для обращения к врачу и прохождения анализа на онкомаркеры кишечника. В клинической практике используется порядка 20 онкомаркеров для выявления опухолей в организме человека. Среди них выделяют две разновидности патологических белков:

  • неспецифические. Они подтверждают факт наличия опухоли в организме, но не определяют конкретное место ее образования;
  • специфические. Такие онкомаркеры выявляют не только раковую опухоль, но и место ее локализации в организме человека.

Онкомаркеры для выявления рака кишечника

Для выявления рака кишечника используются специфические и неспецифические виды онкомаркеров:

  • СА 242 – углеводный антиген. Позволяет определить раковую опухоль желудочно-кишечного тракта, а именно толстой и прямой кишки, еще на начальной стадии;
  • РЭА – раково-эмбриональный антиген. Определяет степень поражения и динамику развития опухоли в прямой кишке, с его помощью проводится наблюдение метастазов после операционного вмешательства и определяется риск рецидива;
  • СА 19-9 и СА 72-4 – неспецифические онкомаркеры, используемые для прогноза течения заболевания;
  • Тумор-М2-пируваткиназа – онкомаркер выбора. Этот фермент вырабатывается клетками злокачественной опухоли, обладает 70%-ной специфичностью при онкологии кишечника. Определяют этот онкомаркер в крови и кале, причем его концентрация напрямую зависит от стадии развития заболевания.

Как правильно подготовиться к исследованию

Для получения достоверных данных анализа на онкомаркеры кишечника пациенту рекомендуется провести предварительную подготовку и соблюдать установленные правила.

  • В первую очередь рекомендуется на протяжении недели не употреблять в пищу копченую, жареную, жирную, сладкую и соленую пищу, исключить из рациона алкоголь и другие напитки за исключением негазированной воды, отказаться от курения и приема некоторых медицинских препаратов.
  • За сутки до анализа исключить физические нагрузки.
  • Результат будет более точным, если забор крови из вены провести с самого утра натощак (с момента последнего приема пищи должно пройти не менее 12 часов, за 6 часов до сдачи крови не следует пить кофе, чай и другие напитки).
  • Результат анализа готов через 1–2 дня, при положительных результатах делается предварительное заключение о наличии ракового заболевания и месте образования опухоли.

Допустимые значения онкомаркеров

Следует помнить, что превышение значения белка в крови не означает окончательное подтверждение наличия раковой опухоли кишечника. Впоследствии нужны будут еще дополнительные исследования для точной диагностики с помощью магнитно-резонансных и ультразвуковых аппаратов. Норма содержания различных видов онкомаркеров в крови:

  • СА 19-9 – до 37 МЕ/мл;
  • СА 72-4 – до 4 МЕ/мл;
  • СА 242 – в диапазоне 0–30 МЕ/мл;
  • РЭА – до 3 нг/мл.

Концентрация различных онкомаркеров может возрастать при наличии воспалительных заболеваний. Для выявления раковой опухоли в толстом кишечнике рассматриваются значения показателей СА 19-9, СА 242 и РЭА в совокупности. Поскольку условия проведения и используемая аппаратура для подобных анализов в разных клиниках отличаются, то также могут отличаться и получаемые результаты. Для корректного наблюдения за изменением показателей рекомендуется делать анализы в одной и той же лаборатории.

Кому нужно сдавать анализ на онкомаркеры

Рекомендуется пройти полное медицинское обследование и сдать анализ крови на онкомаркеры кишечника при появлении таких симптомов, как:

  • потеря веса,
  • отсутствие аппетита,
  • постоянное ощущение дискомфорта в животе,
  • частые запоры,
  • вздутие живота.

Исследование крови с помощью комбинированного анализа специфических и неспецифических белков позволяет увеличить вероятность постановки правильного диагноза. Комбинацию необходимых онкомаркеров указывает в направлении врач-онколог в зависимости от цели забора анализа: для простого установления наличия опухоли, определения места образования злокачественной опухоли или наблюдения за поведением новообразования после лечения. Если у пациента ранее были положительные результаты такого анализа, то исследование рекомендуется повторять на постоянной основе с целью исключения развития новообразования. Если больной проходит лечение, то для сравнения результатов анализа по прошествии времени и для установления эффективности выбранного метода лечения также необходимо повторять обследование на онкомаркеры.

Где сдать анализ на онкомаркеры кишечника

Мы предлагаем пройти такое обследование в нашем Городском медицинском центре. Современное оборудование, квалифицированный персонал и приемлемые цены наших услуг – это те преимущества, благодаря которым пациенты снова обращаются в клинику при необходимости. Результаты анализа будут готовы в течение одного дня. Они отправляются по электронной почте, что экономит время пациента, ведь нет надобности приезжать в клинику за результатами. Если у вас нет возможности посетить нашу лабораторию, то можно вызвать медсестру на дом, а итоговые показатели точно также получить по электронной почте.

Онкомаркеры для диагностики, мониторинга рецидивов и прогноза у пациентов с раком верхних отделов желудочно-кишечного тракта

Оценить ценность комбинированного обнаружения сывороточных CEA, CA19-9, CA24-2, AFP, CA72-4, SCC, TPA и TPS для клинической диагностики рака верхних отделов желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) и проанализировать эффективность этих опухолей. маркеры (TM) в оценке лечебных эффектов и прогноза. В этом исследовании приняли участие 573 пациента с раком верхних отделов ЖКТ в период с января 2004 г. по декабрь 2007 г.Уровни CEA, CA19-9, CA24-2, AFP, CA72-4, SCC, TPA и TPS в сыворотке крови исследовали до операции и каждые 3 месяца после операции с помощью ELISA. Чувствительность CEA, CA19-9, CA24-2, AFP, CA72-4, SCC, TPA и TPS составляла 26,8%, 36,2%, 42,9%, 2,84%, 25,4%, 34,6%, 34,2% и 30,9% соответственно. . Комбинированное обнаружение CEA + CA199 + CA242 + CA724 имело более высокую чувствительность и специфичность при раке желудка (GC) и раке сердца, в то время как CEA + CA199 + CA242 + SCC было лучшей комбинацией диагностики рака пищевода (EC).Повышение предоперационных CEA, CA19-9 и CA24-2, SCC и CA72-4 было значимо связано с патологическими типами (p <0,05) и стадией TNM (p <0,05). Корреляционный анализ показал, что CA24-2 значимо коррелировал с CA19-9 (r = 0,810, p <0,001). Уровни CEA, CA19-9, CA24-2, CA72-4 и SCC, очевидно, снизились через 3 месяца после операции. Когда происходили метастазы и рецидивы, уровни ТМ значительно повышались. При многофакторном анализе высокие предоперационные CA72-4, CA24-2 и SCC служили прогностическими факторами для карциномы сердца, GC и EC, соответственно.комбинированное обнаружение CEA + CA199 + CA242 + SCC оказалось наиболее экономичной и практичной стратегией в диагностике ЭК; CEA + CA199 + CA242 + CA724 оказался лучшим индикатором оценки рака сердца и GC. CEA и CA19-9, CA24-2, CA72-4 и SCC, исследованные в послеоперационном периоде во время последующего наблюдения, были полезны для обнаружения раннего рецидива опухоли и метастазов, а также для оценки прогноза. AFP, TPA и TPS не имеют существенного значения в диагностике пациентов с раком верхних отделов ЖКТ.

Обычных онкологических маркеров

Онкомаркер — это все, что присутствует в раковых клетках или других клетках организма или продуцируется ими в ответ на рак или определенные доброкачественные (доброкачественные) состояния, которые предоставляют информацию о раке, например, насколько он агрессивен, можно ли его лечить с помощью таргетная терапия, или реагирует ли она на лечение.См. Информационный бюллетень по опухолевым маркерам для получения дополнительной информации.

Ниже перечислены опухолевые маркеры, которые широко используются, в основном, для определения лечения или для постановки диагноза рака. Новые опухолевые маркеры часто становятся доступными и не могут быть отражены в этом списке.

В этот список не входят многие опухолевые маркеры, которые тестируются с помощью иммунофенотипирования и иммуногистохимии, чтобы помочь диагностировать рак и различать различные типы рака. Некоторые опухолевые маркеры, перечисленные ниже, являются мишенями для таргетной терапии при множественных раковых заболеваниях, но служат онкомаркерами только для подгруппы раковых заболеваний.

Перестройки и сверхэкспрессия гена ALK

Типы рака или онкоподобные состояния: Немелкоклеточный рак легкого, анапластическая крупноклеточная лимфома, гистиоцитозы
Что анализировали: Опухоль
Как использовали: Чтобы помочь определить лечение и прогноз

Альфа-фетопротеин (AFP)

Типы рака: Рак печени и опухоли половых клеток
Что проанализировано: Кровь
Как используется: Для диагностики рака печени и отслеживания реакции на лечение; для оценки стадии, прогноза и ответа на лечение опухолей половых клеток

Перестройка гена В-клеточного иммуноглобулина

Тип рака: В-клеточная лимфома
Что анализировали: Кровь, костный мозг или опухолевая ткань
Как использовалось: Для помощи в диагностике, оценки эффективности лечения и проверки на рецидив

BCL2 генная реаранжировка

Типы рака: Лимфомы, лейкемии
Что анализируется: Кровь, костный мозг или опухолевые ткани
Как используется: Для диагностики и планирования терапии

Бета-2-микроглобулин (B2M)

Типы рака: Множественная миелома, хронический лимфолейкоз и некоторые лимфомы
Что анализировали: Кровь, моча или спинномозговая жидкость
Как используется: Для определения прогноза и отслеживания реакции на лечение

Бета-хорионический гонадотропин человека (Бета-ХГЧ)

Типы рака: Хориокарцинома и опухоли половых клеток
Что анализировали: Моча или кровь
Как использовалось: Для оценки стадии, прогноза и ответа на лечение

Опухолевый антиген мочевого пузыря (BTA)

Типы рака: Рак мочевого пузыря и рак почки или мочеточника
Что анализировали : Моча
Как использовалось: В качестве эпиднадзора с цитологическим исследованием и цистоскопией пациентов, у которых уже был выявлен рак мочевого пузыря

BRCA1 и BRCA2 мутации гена

Типы рака: Рак яичников и груди
Что анализировали: Кровь и / или опухоль
Как использовалось: Чтобы помочь в выборе лечения

Ген слияния BCR-ABL (Филадельфийская хромосома)

Типы рака: Хронический миелоидный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз и острый миелогенный лейкоз
Что анализировали: Кровь или костный мозг
Как использовалось: Для подтверждения диагноза, прогнозирования ответа на таргетную терапию, помощи в выборе лечения и мониторинга статус болезни

Мутации BRAF V600

Типы рака или раковые состояния: Меланома кожи, болезнь Эрдхейма-Честера, гистиоцитоз клеток Лангерганса, колоректальный рак и немелкоклеточный рак легкого
Что анализировали: Опухоль
Как использовали: Чтобы помочь в выборе лечения

Комплект C / CD117

Типы рака: Желудочно-кишечная стромальная опухоль, меланома слизистой оболочки, острый миелоидный лейкоз и заболевание тучных клеток
Что анализировали: Опухоль, кровь или костный мозг
Как используется: Для помощи в диагностике и выбора лечения

CA15-3 / CA27.29

Тип рака: Рак молочной железы
Что проанализировано: Кровь
Как использовалось: Для оценки эффективности лечения или рецидива рака

CA19-9

Типы рака: Рак поджелудочной железы, желчного пузыря, желчных протоков и желудка
Что анализировали: Кровь
Как использовали: Чтобы оценить эффективность лечения

CA-125

Тип рака: Рак яичников
Что анализировали: Кровь
Как использовали: Для помощи в диагностике, оценке реакции на лечение и оценке рецидива

CA 27.29

Тип рака: Рак груди
Что анализировали: Кровь
Как использовали: Для обнаружения метастазов или рецидивов

Кальцитонин

Тип рака: Медуллярный рак щитовидной железы
Что проанализировано: Кровь
Как использовалось: Чтобы помочь в диагностике, проверить эффективность лечения и оценить рецидив

Карциноэмбриональный антиген (CEA)

Типы рака: Колоректальный рак и некоторые другие виды рака
Что проанализировано: Кровь
Как используется: Чтобы отслеживать эффективность лечения рака и проверять, вернулся ли рак или распространился

CD19

Типы рака: В-клеточные лимфомы и лейкемии
Что проанализировано: Кровь и костный мозг
Как используется: Для помощи в диагностике и выбора лечения

CD20

Тип рака: Неходжкинская лимфома
Что проанализировано: Кровь
Как используется: Для определения лечения

CD22

Типы рака: В-клеточные лимфомы и лейкемии
Что проанализировано: Кровь и костный мозг
Как используется: Для помощи в диагностике и выбора лечения

CD25

Тип рака: Неходжкинская (Т-клеточная) лимфома
Что было проанализировано: Кровь
Как использовалось: Для определения лечения

CD30

Типы рака: Классическая лимфома Ходжкина, В-клеточные и Т-клеточные лимфомы
Что анализировали:
Опухоль
Как использовали: Для определения лечения

CD33

Тип рака: Острый миелоидный лейкоз
Что анализировали: Кровь
Как использовали: Для определения лечения

Хромогранин A (CgA)

Тип рака: Нейроэндокринные опухоли
Что анализировали: Кровь
Как использовали: Для помощи в диагностике, оценке реакции на лечение и оценке рецидива

Делеция 17p хромосомы

Тип рака: Хронический лимфолейкоз
Что проанализировано: Кровь
Как используется: Для определения лечения

Хромосомы 3, 7, 17 и 9p21

Тип рака: Рак мочевого пузыря
Что анализировали: Моча
Как использовали: Для помощи в мониторинге рецидива опухоли

Циркулирующие опухолевые клетки эпителиального происхождения (CELLSEARCH)

Типы рака: Метастатический рак молочной железы, простаты и колоректального рака
Что проанализировано: Кровь
Как используется: Для информирования о принятии клинических решений и оценки прогноза

Фрагмент цитокератина 21-1

Тип рака: Рак легкого
Что анализировали: Кровь
Как использовали: Для помощи в мониторинге рецидива

Перестройка или экспрессия гена Cyclin D1 ( CCND1 )

Типы рака: Лимфома, миелома
Что анализировали: Опухоль
Как использовали: Для помощи в диагностике

дез-гамма-карбоксипротромбин (DCP)

Тип рака: Гепатоцеллюлярная карцинома
Что анализировали: Кровь
Как использовали: Для контроля эффективности лечения и выявления рецидивов

Мутация гена DPD

Типы рака: Рак молочной железы, толстой кишки, желудка и поджелудочной железы
Что анализировали: Кровь
Как использовалось: Для прогнозирования риска токсической реакции на терапию 5-фторурацилом

Мутация гена EGFR

Тип рака: Немелкоклеточный рак легкого
Что анализировали: Опухоль
Как использовали: Чтобы помочь определить лечение и прогноз

Рецептор эстрогена (ER) / рецептор прогестерона (PR)

Тип рака: Рак молочной железы
Что анализировали: Опухоль
Как использовали: Чтобы помочь в выборе лечения

FGFR2 и FGFR3 мутации гена

Тип рака: Рак мочевого пузыря
Что анализировали: Опухоль
Как использовали: Чтобы помочь в выборе лечения

Фибрин / фибриноген

Тип рака: Рак мочевого пузыря
Что анализировали: Моча
Как использовали: Для отслеживания прогрессирования и реакции на лечение

FLT3 мутации гена

Тип рака: Острый миелоидный лейкоз
Что анализировали: Кровь
Как использовали: Для определения лечения

Гастрин

Тип рака: Гастринпродуцирующая опухоль (гастринома)
Что проанализировано: Кровь
Как используется: Для помощи в диагностике, контроля эффективности лечения и выявления рецидивов

НЕ4

Тип рака: Рак яичников
Что проанализировано: Кровь
Как использовалось: Для планирования лечения рака, оценки прогрессирования заболевания и отслеживания рецидивов

Амплификация гена HER2 / neu или сверхэкспрессия белка

Типы рака: Рак груди, яичников, мочевого пузыря, поджелудочной железы и желудка
Что анализировали: Опухоль
Как использовали: Для определения лечения

5-HIAA

Тип рака: Карциноидные опухоли
Что анализировали: Моча
Как используется: Для помощи в диагностике и наблюдении за заболеванием

IDh2 и IDh3 мутации гена

Тип рака: Острый миелоидный лейкоз
Что анализировали: Костный мозг и кровь
Как использовали: Для определения лечения

Иммуноглобулины

Типы рака: Множественная миелома и макроглобулинемия Вальденстрема
Что проанализировано: Кровь и моча
Как используется: Для диагностики заболевания, оценки реакции на лечение и поиска рецидивов

IRF4 генная реаранжировка

Типы рака: Лимфома
Что анализируется: Опухоль
Как используется: Для помощи в диагностике

JAK2 генная мутация

Тип рака: Определенные типы лейкемии
Что анализировали: Кровь и костный мозг
Как использовали: Для помощи в диагностике

Мутация гена KRAS

Типы рака: Колоректальный рак и немелкоклеточный рак легкого
Что анализировали: Опухоль
Как использовалось: Чтобы помочь в выборе лечения

Лактатдегидрогеназа

Типы рака: Опухоли зародышевых клеток, лимфома, лейкемия, меланома и нейробластома
Что анализировали: Кровь
Как использовалось: Для оценки стадии, прогноза и реакции на лечение

Нестабильность микроспутника (MSI) и / или дефект восстановления несоответствия (dMMR)

Типы рака : Колоректальный рак и другие солидные опухоли
Что проанализировано: Опухоль
Как используется: Для руководства лечением и выявления лиц с высоким риском определенных предрасполагающих к раку синдромов

MYC Экспрессия гена

Типы рака: Лимфомы, лейкемии
Что проанализировано: Опухоль
Как используется: Для помощи в диагностике и выбора лечения

MYD88 генная мутация

Типы рака: Лимфома, макроглобулинемия Вальденстрема
Что проанализировано: Опухоль
Как используется: Для помощи в диагностике и выбора лечения

Миелопероксидаза (МПО)

Тип рака: Лейкемия
Что анализируется: Кровь
Как используется: Для помощи в диагностике

Нейрон-специфическая энолаза (NSE)

Типы рака: Мелкоклеточный рак легкого и нейробластома
Что проанализировано: Кровь
Как используется: Для помощи в диагностике и оценки реакции на лечение

НТРК Слияние генов

Тип рака: Любая солидная опухоль
Что анализировали: Опухоль
Как использовалось: Для определения лечения

Ядерный матричный белок 22

Тип рака: Рак мочевого пузыря
Что анализировали: Моча
Как использовали: Для отслеживания реакции на лечение

мРНК PCA3

Тип рака: Рак простаты
Что анализировали: Моча (полученная после пальцевого ректального исследования)
Как использовалась: Для определения необходимости повторной биопсии после отрицательной биопсии

Ген слияния PML / RARα

Тип рака: Острый промиелоцитарный лейкоз (APL)
Что проанализировано: Кровь и костный мозг
Как используется: Для диагностики APL, для прогнозирования реакции на полностью транс-ретиноевую кислоту или мышьяк терапия триоксидом для оценки эффективности терапии, контроля минимальной остаточной болезни и прогнозирования раннего рецидива

Кислая фосфатаза простаты (PAP)

Тип рака: Метастатический рак простаты
Что было проанализировано: Кровь
Как использовалось : Для диагностики низкодифференцированной карциномы

Лиганд запрограммированной смерти 1 (PD-L1)

Типы рака: Немелкоклеточный рак легкого, рак печени, рак желудка, рак желудочно-пищеводного перехода, классическая лимфома Ходжкина и другие агрессивные подтипы лимфомы
Что анализировали: Опухоль
Как использовали: Помочь определить лечение

Простатспецифический антиген (ПСА)

Тип рака: Рак простаты
Что анализировали: Кровь
Как использовалось: Для помощи в диагностике, оценки реакции на лечение и поиска рецидивов

ROS1 генная реаранжировка

Тип рака: Немелкоклеточный рак легкого
Что анализировали: Опухоль
Как использовали: Для определения лечения

Растворимые пептиды, родственные мезотелину (SMRP)

Тип рака: Мезотелиома
Что анализировали: Кровь
Как использовали: Для отслеживания прогрессирования или рецидива

Рецептор соматостатина

Тип рака: Нейроэндокринные опухоли, поражающие поджелудочную железу или желудочно-кишечный тракт (GEP-NET)
Что проанализировано: Опухоль (с помощью диагностической визуализации)
Как используется: Для определения лечения

Перестройка гена Т-клеточного рецептора

Тип рака: Т-клеточная лимфома
Что проанализировано: Костный мозг, ткань, биологические жидкости, кровь
Как используется: Для помощи в диагностике; иногда для выявления и оценки остаточной болезни

Терминальная трансфераза (TdT)

Типы рака: Лейкемия, лимфома
Что анализировали: Опухоль, кровь
Как использовали: Для помощи в диагностике

Активность фермента тиопурин-S-метилтрансферазы (TPMT) или TPMT генетический тест

Тип рака: Острый лимфобластный лейкоз
Что проанализировано: Кровь и щечный мазок
Как использовался: Для прогнозирования риска тяжелой токсичности костного мозга (миелосупрессии) при лечении тиопурином

Тиреоглобулин

Тип рака: Рак щитовидной железы
Что анализировали: Кровь
Как использовалось: Для оценки реакции на лечение и поиска рецидива

UGT1A1 * 28 вариант гомозиготности

Тип рака: Колоректальный рак
Что анализировали: Кровь и щечный (щечный) мазок
Как использовался: Для прогнозирования токсичности терапии иринотеканом

Катехоламины в моче: VMA и HVA

Тип рака: Нейробластома
Что анализировали: Моча
Как использовали: Для помощи в диагностике

Активатор плазминогена урокиназы (uPA) и ингибитор активатора плазминогена (PAI-1)

Тип рака: Рак груди
Что анализировали: Опухоль
Как использовали: Чтобы определить агрессивность рака и направить лечение

Геномный тест FoundationOne CDx (F1CDx)

Тип рака: Любая солидная опухоль
Что анализировали: Опухоль, кровь
Как использовали: В качестве сопутствующего диагностического теста для определения лечения

Геномный тест Guardant360 CDx

Тип рака: Любая солидная опухоль
Что анализируется: Кровь
Как используется: В качестве сопутствующего диагностического теста для определения лечения и для определения общего профиля мутаций опухоли

5-белковая подпись (OVA1)

Тип рака: Рак яичников
Что анализировали: Кровь
Как использовали: Для предоперационной оценки тазовой массы при подозрении на рак яичников

Сигнатура 17-гена (тест Oncotype DX GPS)

Тип рака: Рак простаты
Что анализировали: Опухоль
Как использовалось: Для прогнозирования агрессивности рака простаты и помощи в лечении

Сигнатура 21 гена (Oncotype DX)

Тип рака: Рак груди
Что анализировали: Опухоль
Как использовалось: Для оценки риска отдаленного рецидива и помощи в планировании лечения

46-генная подпись (Prolaris)

Тип рака: Рак простаты
Что анализировали: Опухоль
Как использовалось: Для прогнозирования агрессивности рака простаты и помощи в лечении

70-генная подпись (Mammaprint)

Тип рака: Рак груди
Что анализировали: Опухоль
Как использовали: Для оценки риска рецидива

Диагностические и прогностические маркеры стромальных опухолей желудочно-кишечного тракта в Норвегии

Пациенты и образцы

Материал исследования состоял из выбранных блоков ткани из архивов отделений патологии Норвегии.Случаи были отобраны путем оценки записей в Регистре рака Норвегии для мезенхимальных опухолей и низкодифференцированных карцином желудочно-кишечного тракта за 30-летний период (1973–2002 гг.). Всего было проанализировано 3672 отчета, и все отчеты с четкими доказательствами того, что происхождение опухоли не было мезенхимальным, были дисквалифицированы (на основе результатов иммуногистохимического окрашивания и других методов, представленных во время первичной диагностики). Таким образом было идентифицировано в общей сложности 1192 случая кандидатных мезенхимальных опухолей, и были запрошены слайды и блоки по всем этим случаям.Материал находился во всех 20 отделениях патологии Норвегии. В самых крупных отделениях местный патологоанатом исследовал случаи, и был направлен единый репрезентативный блок. Из двух больниц мы не получили материалов, которые составили 92 случая. В 129 случаях (11%) блоки не были обнаружены, а в 102 случаях (10%) блоки не содержали достаточно материала для дальнейших исследований. Были изготовлены новые слайды из оставшихся 869 случаев и окрашены гематоксилином и эозином (H&E), а гистология пересмотрена первым автором.В общей сложности 187 случаев с несовместимыми гистологическими признаками были дополнительно оценены последним автором, и 146 из этих случаев были исключены из исследования, потому что они почти наверняка были не мезенхимальными опухолями (на основе окрашивания H&E), а скорее карциномами или лимфомами. Шестнадцать дел прошли дополнительную независимую экспертизу, и три дела были исключены. Всего 720 случаев были оценены как представляющие истинные мезенхимальные опухоли желудочно-кишечного тракта, но для создания микрочипов тканей еще 69 случаев не содержали достаточно материала для требуемых дублирующих экстракций ядра (блоки, содержащие только небольшой прикус или биопсию ядра).651 оставшийся случай из реестра рака были объединены в пять микрочипов тканей. Для всех случаев собирались данные о возрасте, дате смерти (если применимо), хирургическом лечении, локализации первичной опухоли, размере опухоли и других злокачественных новообразованиях в анамнезе. Общая выживаемость и метастатический статус при обращении регистрировались во время оценки записей. Восемь пациентов лечились с помощью STI-571 (Glivec ® ), поскольку эта когорта в значительной степени предшествовала использованию этого препарата. Региональный комитет по этике медицинских исследований Северной Норвегии одобрил исследование.

Конструирование тканевых микрочипов

В каждом случае выбирали предметное стекло с репрезентативной жизнеспособной опухолью и присоединяли к соответствующему фиксированному формалином блоку, залитому парафином. Дубликаты 0,6-мм ядер были взяты из репрезентативной опухолевой ткани и вставлены в парафиновый блок реципиента для создания тканевого микроматрицы с использованием микротканевого массива Beecher Instruments. 26 Завершенные блоки-реципиенты были разрезаны на 4 мкм м и перенесены на силанизированные стеклянные слайды.Всего было изготовлено пять блоков получателей.

Гистологическая оценка

Полноразмерные слайды, которые использовались для выбора репрезентативных ядер тканевых микрочипов, использовали для гистологической оценки. Число митозов подсчитывали в 50 последовательных полях с высоким увеличением. Дополнительные параметры регистрировались во всех случаях и включали наличие морфологии веретенообразных и / или эпителиоидных клеток. Фокальная или диффузная атипия была включена в обзор и определена, как ранее описано Miettinen et al. 4 Также оценивались другие параметры, такие как некроз, изъязвление, инвазия слизистой оболочки и кровотечение. Опухоли были классифицированы в соответствии с опубликованной консенсусной системой стратификации групп риска, основанной на максимальном размере опухоли и количестве митозов на 50 полей с высоким увеличением. 10

Иммуногистохимическое окрашивание и оценка

Срезы массивов окрашивали H&E для подтверждения присутствия репрезентативной опухоли в каждом ядре. Дополнительные срезы окрашивали панелью антител с использованием автоматического иммуногистохимического красителя Ventana (Tucson, AZ, USA) в соответствии с инструкциями производителя.

Использовали следующие антитела: c-KIT (поликлональный, разведение 1: 200; Dako), гладкомышечный актин (клон 1A4, разведение 1: 200; Dako), S100 (поликлональный, разведение 1: 2000; Dr A Marks, Университет Торонто), CD34 (QB End / 10, разведение 1:25; Cell Marque), десмин (D33, разведение 1: 200; Dako), виментин (V9, разведение 1:10 000; Biogenx), коктейли цитокератина CK (AE1 / AE3, разведение 1.200; Dako-CAM 5.2, разведение 1,50; Becton / Dickinson-Polyclonal, разведение 1: 1000; Dako), MIB1 (SP6, разведение 1: 200; Labvision), L1 (IgG, клон UJ127, разведение 1:50; NeoMarkers), p16 (разведение 1: 500; MTM Laboratories AG, Гейдельберг, Германия) и PKC theta (pT538 клон 19, разведение 1:20; BD Transduction Labs).Иммуноокрашивание проводили с помощью системы определения авидин-биотин. Хромогеном был раствор гидрохлорида диаминобензидина с перекисью водорода (Ventana Gen II, Dab basic). Случаи клинического положительного контроля для всех маркеров были включены в каждую серию окрашивания. Ядра тканей оценивали на основе процента положительных опухолевых клеток, окрашиваемых выше фона, как полностью отрицательные, слабо окрашенные (<10%), умеренно положительные (10-50%) или сильно положительные (> 50%).

Результаты заносились в электронную таблицу Microsoft Excel.Результаты оценки были разделены на отрицательные (0 или 1) или положительные (2 или 3) категории, а неинтерпретируемые результаты были исключены из дальнейшего рассмотрения (т. Е. Они не использовались для расчетов чувствительности и специфичности). Противоречивые результаты оценки для повторяющихся ядер, когда они присутствовали, консолидировались как более высокая интерпретируемая оценка. 27 Для облегчения анализа многочисленных ядер тканей, окрашенных с помощью иммуногистохимии, были собраны цифровые изображения с использованием прибора BLISS (Bacus Laboratories, Ломбард, Иллинойс, США; http: // bacuslabs.com). Результаты подсчета были объединены с помощью Deconvoluter и представлены в Treeview. 28

Статистический анализ

SPSS для Windows (версия 14.0) использовался для статистического анализа. Кривые выживаемости были построены с использованием методов Каплана – Мейера, значимость которых оценивалась с помощью лог-ранговых тестов и основывалась на общей выживаемости в течение 20 лет. Многовариантный анализ был проанализирован с использованием регрессионной модели Кокса. Для корреляций использовался тест Пирсона χ 2 .

Раковый антиген 72-4 для мониторинга прогрессирующих опухолей желудочно-кишечного тракта, легких, молочной железы и яичников

Abstract

Предпосылки: Раковый антиген CA72-4 — это опухолевый маркер, уровень которого повышен в различных аденокарциномах человека. Используя DRG TM-CA72-4, мы количественно оценили повышение CA72-4 по сравнению с текущими одобренными Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США опухолевыми маркерами при различных типах рака. Материалы и методы. В период с марта 2013 г. по август 2016 г. мы провели проспективное одноцентровое исследование с участием 96 пациентов с различными местнораспространенными, неоперабельными или метастатическими формами рака, экспрессирующими CA72-4.Количественное определение CA72-4 выполняли в соответствии с инструкциями производителя с использованием набора для иммуноферментного анализа DRG TM-CA72-4, и рассчитывали уровни положительности. Результаты: экспрессия CA72-4 варьировала в зависимости от места происхождения опухоли, с самыми высокими показателями положительности, обнаруженными при злокачественных новообразованиях поджелудочной железы и яичников. У некоторых пациентов также отмечена корреляция с клинической активностью. Заключение: CA72-4 может играть потенциальную роль в качестве дополнения к обычным биомаркерам при мониторинге заболеваний карциномы поджелудочной железы, яичников и толстой кишки.

При лечении метастатического и рецидивирующего рака жизненно важно оценить ответ на противоопухолевую терапию. Наиболее часто используемая методология — это серийное измерение размера опухоли при физикальном осмотре или визуализирующих исследованиях с использованием критериев оценки ответа в критериях солидных опухолей (RECIST). В качестве дополнения к прямому измерению поражений несколько опухолевых маркеров, включая карциноэмбриональный антиген (CEA), раковый антиген 19-9 (CA19-9) и раковый антиген 125 (CA125), получили одобрение Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) для мониторинг различных злокачественных новообразований желудочно-кишечного тракта и гинекологии.Эти опухолевые маркеры вместе с раковым антигеном 27-29 (CA27-29), используемые для мониторинга рака груди, представляют собой белки, выделяемые раковыми клетками, и их легко измерить в лаборатории с помощью антител.

Полезность серийного измерения CA19-9, CEA и CA125 для прогнозирования ответа на лечение при раке поджелудочной железы, толстой кишки и яичников была подтверждена в нескольких исследованиях (1-4). Частые последовательные измерения могут быть легко получены и могут предупредить врача о необходимости своевременной оценки пациента на предмет неэффективности лечения, что позволяет провести более раннее вмешательство.Кроме того, опухолевые маркеры иногда могут иметь большую точность при оценке ответа, поскольку исследования изображений с использованием критериев RECIST не являются полностью надежными, поскольку они не всегда позволяют дифференцировать жизнеспособную опухоль от остаточного фиброза или рубцевания. Тем не менее, их полезность для мониторинга опухолей ограничена их непоследовательным и непостоянным повышением при различных злокачественных новообразованиях, необходимостью относительно большого количества опухолей, чтобы вызвать повышение, частыми ложноположительными повышениями при доброкачественных состояниях и отсутствием убежденности со стороны онкологическое сообщество принимает увеличение или уменьшение онкомаркера как суррогат прогрессирования заболевания или ответа.Таким образом, остается неудовлетворенной потребность в разработке новых биомаркеров для оценки опухолевой нагрузки и ответа на терапию. В то время как быстро развивающиеся исследования с использованием анализа циркулирующей опухолевой ДНК, а также протеомики продолжаются, мы продолжаем полагаться на традиционные методы, такие как измерение концентраций аномальных белков, выделяемых различными типами рака.

В дополнение к обычным опухолевым маркерам CEA, CA27-29, CA19-9 и CA125 существует еще один опухолевый маркер, связанный с опухолью гликопротеин 72 (TAG-72), разработанный много лет назад и применяемый во всем мире, который так и не получил одобрения FDA США.Это муциноподобный гликопротеиновый комплекс с массой 48 кДа, идентифицированный с помощью моноклонального антитела B72.3, мышиного антитела, продуцируемого против обогащенной мембраной фракции из метастазов карциномы молочной железы человека в печени (5). Антиген CA72-4 является антигенной детерминантой гликопротеина TAG-72, который также распознается моноклональными антителами B72.3 и CC-49 (6). Этот антиген был обнаружен во множестве аденокарцином человека, включая колоректальную, желудочную, яичниковую, молочную железу и легкие, однако он редко экспрессируется в доброкачественных и нормальных тканях взрослого человека (7-9).

В то время как CA125, CEA и CA19-9 в настоящее время являются стандартными онкомаркерами для рака яичников, желудочно-кишечного тракта (, т. Е. желудка, толстой и тонкой кишки) и рака поджелудочной железы, соответственно, CA72-4 остается потенциально лучшим биомаркером для этих типов рака.

Набор DRG TM CA72.4 иммуноферментный иммуносорбент (ELISA) представляет собой твердофазный сэндвич-анализ с использованием антитела CC-49, разработанный DRG International (Нью-Джерси, США) и утвержденный как отдельный анализ для использования в индивидуальная больничная и лабораторная обстановка.Используя анализ ELISA DRG TM CA72-4, текущее исследование было направлено на i) количественную оценку скорости повышения опухолевого маркера CA72-4 в каждом типе рака по сравнению со скоростью повышения других текущих одобренных FDA биомаркеров опухоли, и ii ) коррелируют уровни CA72-4 с клиническими исходами у пациентов с поддающимся измерению заболеванием.

Материалы и методы

Участники исследования. Мы провели проспективное одноцентровое исследование с участием 96 пациентов с различными гистологически подтвержденными, первично-местнораспространенными или метастатическими раками с поддающимся измерению заболеванием, которые, как известно, экспрессируют CA72-4 (рис. 1).Пациенты были включены в исследование в период с марта 2013 г. по август 2016 г. Информированное письменное согласие было получено от всех лиц до включения в исследование, и исследование было одобрено Наблюдательным советом учреждения (№ 12040).

Сыворотка крови была собрана у пациентов, проходящих курс лечения, с интервалами в 3-4 недели для измерения CA72-4 вместе с другими одобренными FDA маркерами для локальных злокачественных новообразований. В исследование были включены пациенты со следующими характеристиками: возраст 18 лет и старше, de novo или ранее диагностированная метастатическая или рецидивирующая неоперабельная карцинома яичников, неплоскоклеточный рак легкого, аденокарцинома поджелудочной железы, желудка, грудь, желчный пузырь, желчный, ампулярный, колоректальный, желудочный, желудочно-пищеводный переход или пищевод (Таблица I).В исследовании наблюдались только пациенты с определяемым уровнем CA72-4 при включении или у которых обнаруживаемый уровень развился во время первых четырех последовательных заборов крови. Пациенты с более чем четырьмя последовательными отрицательными определениями CA72-4 были исключены из последующих заборов крови CA72-4 и классифицированы в группу CA72-4-отрицательных, но за ними наблюдали клинически и с установленными опухолевыми маркерами в качестве коррелятов на основе клинических показаний (, например, ). CA19-9 для поджелудочной железы, CA27-29 для груди и CEA для рака желудка).

Таблица I.

Демографические данные и данные о зачислении.

Количественное определение CA72-4 в сыворотке крови. Вкратце, собирали цельную кровь посредством венепункции и давали возможность свернуться. Сыворотку отделяли центрифугированием при комнатной температуре в течение 1 часа или раньше, а образцы замораживали при -20 ° C для дальнейшей обработки. Количественное определение CA72-4 проводили с использованием набора DRG TM-CA 72-4 ELISA в соответствии с инструкциями производителя. Калибровочная кривая из пяти точек была построена для каждого планшета ELISA, с низким и высоким контролем, включенным в каждый прогон, чтобы гарантировать надежность результатов анализа.Предел обнаружения теста составил 0,8 Ед / мл. Калибраторы, контроли и каждый образец пациента тестировали в двух экземплярах на планшете для ELISA, чтобы вычислить среднее значение внутри цикла, стандартное отклонение и коэффициент вариации для каждого образца пациента. Двадцать микролитров соответствующего образца (калибратора, контроля или пациента) добавляли в каждую лунку планшета, покрытого антигеном, размещая дубликаты образцов горизонтально рядом с их совпадающей парой. После того, как все образцы для тестирования были перенесены в планшет, в каждую лунку добавляли 100 мкл ферментного конъюгата с помощью многоканальной пипетки.Образец и конъюгат смешивали в каждой лунке в течение минимум 10 секунд, после чего сразу же проводили 2-часовую инкубацию при комнатной температуре. По завершении первого периода инкубации планшет промывали пять раз по 400 мкл разбавленного промывочного раствора на лунку. После промывки планшета в каждую лунку добавляли 100 мкл субстрата, и планшеты инкубировали дополнительно в течение 30 минут при комнатной температуре, чтобы обеспечить развитие цвета в лунках. В конце второго периода инкубации в каждую лунку добавляли 100 мкл стоп-раствора и оптическую плотность считывали на спектрофотометре при 450 нм.Результаты были рассчитаны с использованием 4-параметрической аппроксимации кривой Марквардта на основе среднего значения оптической плотности для каждой пары образцов. Положительность была определена как значение более 0,8 Ед / мл или 4,0 Ед / мл на основании систематического обзора предыдущих исследований (10–12). Установленные уровни онкомаркеров CEA, CA19-9, CA27-29 и CA125 определяли согласно существующим коммерческим лабораторным методам.

Результаты

Всего в исследование было включено 96 пациентов за 4-летний период. Средний возраст пациентов с положительными и отрицательными анализами CA72-4 составлял 65 лет.5 против 65,0 лет соответственно ( p = 0,34). Из всех CA72-4-положительных пациентов 33% составляли мужчины, а из отрицательных пациентов 40% составляли мужчины ( p = 0,53).

Используя 0,8 Ед / мл в качестве порогового значения для положительности для CA72-4 в нашем анализе, мы обнаружили, что 55,2% (53/96) пациентов были положительными, а 44,8% (43/96) были отрицательными для этой опухоли. маркер на момент зачисления. Использование ранее сообщенного уровня 4 Ед / мл в качестве порогового значения для положительного результата снизило частоту положительного результата до 33.3% (32/96) и увеличение количества негативных отзывов до 66,7% (64/96) при зачислении. Используя 0,8 Ед / мл в качестве порогового значения, 30,2% (13/43) CA72-4-отрицательных пациентов развили определяемые уровни CA72-4 в их сыворотке во время первых четырех заборов крови против 16/64 (25,0 %) с использованием порогового значения 4 Ед / мл.

Данные для каждого участка обрезки представлены в Таблице II. Используя 0,8 Ед / мл в качестве порогового значения, самый высокий уровень положительности для CA72-4 был обнаружен при раке поджелудочной железы (82%, 27/33), в то время как в настоящее время установленные FDA маркеры, такие как CA19-9, были положительными у 84.У 8% (28/33) пациентов при использовании 4U / мл этот показатель снизился до 58% (19/33). Самые низкие показатели положительности не различались при использовании 0,8 Ед / мл или 4 Ед / мл в качестве отсечки: 1/2 пациентов с опухолями желудка / пищеводно-пищеводного соединения, 2/5 с опухолями желчного пузыря / желчных путей, в то время как положительность CA72-4 в рак легких снизился с 2/4 для 0,8 Ед / мл до 0/4 для 4 Ед / мл, хотя было зарегистрировано очень мало патентов с этими типами рака. Другие участки высокой положительности включали яичники при 64,3% (18/28) для 0,8 Ед / мл против 57% (16/28) для пороговых значений 4 Ед / мл, однако это включало как муцинозный, так и немуцинозный подтипы. .Общая положительная реакция на CA72-4 среди всех пациентов всех категорий составила 68% (66/96) при 0,8 Ед / мл и 50% (48/96) при 4 Ед / мл.

Обсуждение

Опухолевые биомаркеры играют решающую роль в мониторинге ответа на терапию и в наблюдении после лечения различных злокачественных новообразований желудочно-кишечного тракта и гинекологии (13). Несмотря на то, что клиническая ценность одобренных FDA опухолевых маркеров, таких как CEA, CA19-9 и CA125, была установлена, отсутствуют адекватные данные, подтверждающие одобрение FDA CA72-4 в качестве потенциального биомаркера, и его измерение считается только экспериментальным и исследовательским.Здесь мы кратко рассмотрим природу валидированных в настоящее время онкомаркеров и обсудим потенциальную роль CA72-4 в арсенале.

CEA. CEA — гликопротеин, заякоренный на поверхности онкофетальных клеток, 180 кДа, был впервые выделен в 1965 году исследователями из Университета МакГилла из экстрактов тканей толстой кишки человека (14). В Было обнаружено, что гликопротеин с периодом полураспада около 7 дней экспрессируется в тканях желудочно-кишечного тракта и слизистой оболочки во время внутриутробного развития плода, но лишь минимально экспрессируется во взрослой ткани (15, 16).Дальнейшие исследования показали, что он также сверхэкспрессируется в аденокарциномах различного происхождения, включая желудок, печень, легкие, поджелудочную железу, яичники и простату (17-24). Было показано, что при раке толстой кишки специфичность и чувствительность CEA варьируются в зависимости от прогрессирующей стадии опухоли, при этом специфичность находится в диапазоне от 37% до 86% при запущенном заболевании, что обеспечивает полезные средства мониторинга заболевания (25-27). РЭА также может быть повышен при доброкачественных заболеваниях, таких как воспалительное заболевание кишечника, панкреатит и у курильщиков, что ограничивает его полезность при ранней стадии рака и у пациентов с такими состояниями (28-31).

Таблица II.

Данные о распределении заболеваний для CA72-4 с использованием 0,8 и 4 Ед / мл в качестве пороговых значений для положительного результата.

CA125. Кодируемый геном MUC16 , CA125 является членом семейства гликопротеинов муцинов и в норме экспрессируется в развивающейся эпителиальной выстилке полостей тела плода и женских половых путей. Белок был впервые обнаружен доктором Робертом Бастом и другими исследователями из Гарвардской медицинской школы в 1981 году после того, как было обнаружено, что мышиные моноклональные антитела обладают реактивностью с эпителиальной карциномой яичников человека, но не с доброкачественными тканями человека (32).CA125 также связан со злокачественными новообразованиями эндометрия, маточной трубы, молочной железы, легких, пищевода, желудка, печени и поджелудочной железы (33–37). Повышение уровня CA125 также наблюдалось при незлокачественных состояниях, таких как менструация, поздняя беременность, эпизоды серозного раздражения, такие как эндометриоз, доброкачественные фолликулярные кисты яичников, а также состояния, связанные с воспалением, такие как воспалительные заболевания органов малого таза, перитонит, асцит, перикардит и др. плевральный выпот (38). Было обнаружено, что экспрессия CA125 является положительной у 83% пациентов с распространенным эпителиальным раком яичников, но только у 50% пациентов с болезнью 1 стадии, что ограничивает его роль в скрининге рака яичников в общей популяции.

CA19-9. CA19-9 был утвержден как сывороточный онкомаркер для пациентов с распространенным раком поджелудочной железы. Однако повышение также было продемонстрировано при злокачественных новообразованиях пищевода, желудка, желчного пузыря, желчных путей и поджелудочной железы (39). Сообщалось об использовании 37 Ед / мл в качестве порогового значения для верхнего предела нормы, чувствительности и специфичности 81% и 90% соответственно у пациентов с раком поджелудочной железы со специфичностью, увеличивающейся почти до 100% при пороговом значении 1000 Ед / мл (3).Значения более 1000 Ед / мл также имели значение для ведения и прогнозирования ответа на терапию. Например, пациенты с уровнем CA19-9 более 1000 Ед / мл на момент постановки диагноза имели больше шансов иметь неоперабельное заболевание (40). Анализ биомаркеров в крупных исследованиях 3 фазы рака поджелудочной железы показал, что снижение CA19-9 по крайней мере на 90% коррелировало с увеличением выживаемости (41-43). Прогностические исследования Reni et al. показал, что базальное значение CA19-9 при запущенном заболевании поджелудочной железы коррелирует с выживаемостью (44, 45).Анализ результатов надира CA19-9 в ответ на терапию повлиял на общую выживаемость, при этом пациенты показали выживаемость 6,5, 10 и 16,7 месяцев для увеличения или уменьшения CA19-9 на <50%, снижения на 50-89% и более. снижение соответственно на 89%. Кроме того, более недавнее исследование также показало, что снижение CA19-9 на 8 недель может быть более предсказуемым для выживаемости по сравнению с радиологическим ответом, что делает надежное измерение маркеров опухолей важным инструментом в ведении пациентов (41).

Несмотря на полезность CA19-9 для мониторинга рака поджелудочной железы и желчных путей, его сверхэкспрессия при доброкачественных воспалительных заболеваниях, таких как холедохолитиаз, острый и хронический панкреатит, дивертикулит, тиреоидит Хашимото, ревматоидный артрит и невоспалительные состояния, такие как механическая желтуха, кисты яичников. а сердечная недостаточность может приводить к высокому уровню ложноположительных результатов, составляющему 10-30%, что ограничивает его полезность при метастазировании у пациентов с этими состояниями (46). Другие ограничения CA19-9 включают его зависимость от фукозилтрансферазы для синтеза, фермента, отсутствующего у 5% населения, который также необходим для синтеза антигена Льюиса группы крови человека.В результате измерение CA19-9 у пациентов с нулевой группой крови по Льюису может привести к потенциальному ложноотрицательному результату, что еще больше ограничит его полезность (47).

CA72-4. Онкомаркер CA72-4 был впервые описан доктором Джеффри Шломом в начале 1980-х годов как новый антиген, реагирующий на мышиные антитела, продуцируемые мышами, которые были иммунизированы мембранно-обогащенными фракциями метастатических клеток карциномы молочной железы человека (5). Из них несколько моноклональных антител, включая B72.3, были идентифицированы как имеющие преимущественное связывание с клетками карциномы человека с сохранением нормальных тканей взрослого человека (5).

Развитие тестирования моноклональных антител в конце 1980-х годов позволило продолжить разработку новых методов идентификации, которые облегчили дальнейшее обнаружение и характеристику CA72-4 (48). Первоначальные исследования показали повышение уровня CA72-4 в сыворотке до 40% пациентов с колоректальным раком и 42,6% пациентов с раком желудка, причем повышение уровней достоверно коррелировало с поздними стадиями заболевания (12, 49). Кроме того, было обнаружено, что примерно 50% пациентов с раком толстой кишки с неопределяемым уровнем СЕА действительно были положительными на СА72-4.Продольные исследования послеоперационных пациентов, у которых не было начального повышения уровня СЕА в крови, показали раннее повышение уровня СА72-4 до клинических проявлений рецидива заболевания (50). В 1994 г. исследование по дальнейшему изучению полезности CA72-4, проведенное исследователями из Массачусетской больницы общего профиля, показало, что CA72-4 по-разному экспрессируется как при доброкачественных, так и при злокачественных кистозных поражениях поджелудочной железы (51). Из 19 пациентов с нехарактерными кистами поджелудочной железы аспирация жидкости показала, что внутрикистозные уровни CA72-4 были повышены у всех пяти пациентов с цистаденокарциномами, со средним уровнем CA72-4 более 10 000 Ед / мл по сравнению с 3.8 Ед / мл у пациентов с псевдокистами, <3 Ед / мл в серозных цистаденомах и 44,2 Ед / мл у пациентов с доброкачественными муцинозно-кистозными новообразованиями. CA72-4 в жидкости кисты поджелудочной железы рассматривался как новый многообещающий маркер для дифференциации муцинозных цистаденокарцином от псевдокист с промежуточными уровнями CA72-4, предполагающими наличие доброкачественных муцинозных кистозных новообразований (51). Совсем недавно предоперационная оценка CA72-4 у пациентов с раком желудка показала корреляцию между уровнями CA72-4 в сыворотке и наличием метастазов в лимфатические узлы, в то время как повышение в перитонеальной жидкости соответствовало как T, так и N стадии заболевания (52), (53) предполагая возможную роль в стадировании некоторых злокачественных новообразований желудочно-кишечного тракта.

Несмотря на эти ранние исследования, указывающие на возможную роль CA72-4 в мониторинге запущенных заболеваний, тестирование на CA72-4 не получило широкого распространения в США. Исследования, проведенные на пациентах из Японии и Восточной Азии со злокачественными новообразованиями желудочно-кишечного тракта, сочетающими CA72-4 с CEA и CA19-9, показали полезную корреляцию заболеваний с чувствительностью до 74% без ухудшения специфичности (54). Обнаруживаемые уровни CA72-4 также были обнаружены у пациентов с опухолями множественного происхождения, включая рак легкого (36%), яичников (24%, из которых более половины имели болезнь IV стадии) и толстой кишки (40%) ( 50).Сообщалось о чувствительности до 40% у пациентов с колоректальной карциномой и карциномой желудка и 50% при раке яичников с общей специфичностью более 95% (55). Кроме того, математические модели, сочетающие предоперационные измерения биомаркеров опухоли в сыворотке крови, показали дальнейшее повышение чувствительности и специфичности при обнаружении рака яичников на ранней стадии, демонстрируя клиническую ценность в комбинированном анализе нескольких биомаркеров у пациентов с раком яичников (56). Измерение CA72-4 также показало хорошую корреляцию с бременем заболевания и позволяет прогнозировать рецидив заболевания (50).

В нашем исследовании мы использовали метод на основе ELISA, который можно использовать в амбулаторных лабораториях или больницах для надежного измерения уровня CA72-4 у пациентов с различными злокачественными новообразованиями. Хотя несколько анализов на основе ELISA для обнаружения CA72-4 в настоящее время уже доступны и активно используются в клинической практике, они получили одобрение только в странах за пределами Северной Америки. Наше исследование подтверждает потенциальное использование и роль CA72-4 в мониторинге и надзоре за различными желудочно-кишечными и гинекологическими злокачественными новообразованиями, особенно панкреатического и яичникового происхождения, у населения Северной Америки.Мы обнаружили, что частота положительности CA72-4 при раке поджелудочной железы на уровне порогового значения обнаружения 0,8 Ед / мл была сопоставима с одобренным FDA CA19-9 в нашей когорте, 82% против 85% соответственно. с использованием анализа ELISA на антитела против CC-49. Увеличение порога обнаружения до 4 Ед / мл, как описано в ранее опубликованных исследованиях, снизило процент положительных результатов до 58%. Мы также обнаружили, что CA72-4 был повышен примерно у 64% пациентов с прогрессирующими злокачественными новообразованиями яичников, подтверждая существующие показатели положительности примерно 80% для CA125 в той же популяции.

Конкретный пример соответствия уровня CA72-4 с CA19-9 в клиническом исходе и ответе на терапию проиллюстрирован 60-летним пациентом с метастатическим раком поджелудочной железы. У этого пациента первоначально наблюдалось снижение уровней CA19-9 и CA72-4, что коррелировало с клиническим и радиологическим ответом после начала системной химиотерапии. Оба биомаркера оставались стабильными в течение примерно 6 месяцев, после чего было обнаружено повышение CA72-4 (от 0,8 Ед / мл до 4,6 Ед / мл) и CA19-9 (от 177 Ед / мл до 1734 Ед / мл), что указывает на прогрессирование заболевания.Было отмечено продолжающееся повышение обоих биомаркеров, при этом уровни CA72-4 и CA19-9 достигли пика в 15 и 30 раз по сравнению с исходным уровнем, соответственно, на момент смерти. В то время как клинические исходы в нашем исследовании были основаны на оценке исследователя, будущие исследования со стандартизованными показателями, такими как критерии RECIST и инструменты качества жизни, связанные со здоровьем, могут обеспечить более точные результаты.

Другой пример полезности CA72-4 — у пациентов с раком поджелудочной железы, которые не экспрессируют CA19-9.Примером этого является 67-летний мужчина с широко распространенным метастатическим раком поджелудочной железы с нормальным уровнем CA19-9, несмотря на огромную опухолевую нагрузку. У этой пациентки оставался нормальный уровень CA19-9 на протяжении всего клинического курса, что коррелировало с уровнем CA72-4. Интересно, что у нее была обнаружена положительная группа крови A, что является неожиданным открытием, поскольку у пациентов этой группы крови не известно, что на фукозилирование, необходимое для продукции CA19-9, а также на синтез антигена Льюиса, не влияет.

В качестве предостережения, CA72-4 может временно и ложно повышаться у некоторых пациентов с обструкцией желчевыводящих путей. Примером этого был случай пациента с запущенным раком поджелудочной железы, вызывающим обструкцию желчных путей с заметным повышением CA19-9 при поступлении. Пациенту был установлен билиарный стент с последующей химиотерапией, что привело к снижению CA19-9. Через три месяца было отмечено резкое повышение уровня CA72-4 (с 2 Ед / мл до 14,53 Ед / мл). Визуализация брюшной полости выявила миграцию стента, вызывающую рецидивирующую обструкцию желчевыводящих путей, что потребовало замены стента.Снижение CA72-4 наблюдалось при продолжении нормализации значений. Интересно, что уровень CA19-9 у пациента не изменился и продолжал снижаться в условиях обструкции желчевыводящих путей, что подчеркивает важность и потенциальную ценность комбинированного тестирования CA19-9 и CA72-4 у пациентов, склонных к обструкции желчных путей.

В заключение, с помощью этого проспективного исследования мы продемонстрировали, что уровень онкомаркера CA72-4 варьирует при различных метастатических раковых опухолях желудочно-кишечного и гинекологического происхождения, с самыми высокими показателями положительности, обнаруженными при карциномах поджелудочной железы, яичников и толстой кишки.Это многолетнее исследование, несмотря на ограниченный размер выборки, демонстрирует, что CA72-4 имеет значимую корреляцию с активностью заболевания и потенциально может быть полезным дополнением к обычным биомаркерам при мониторинге различных желудочно-кишечных и гинекологических злокачественных новообразований.

Благодарности

Методология анализа ELISA, использованная в исследовании, была разработана DRG International, Inc (Нью-Джерси, США). Исследование было частично поддержано компанией DRG International, которая предоставила нам наборы для ELISA, реагенты, инструмент для ELISA и предоставила финансовую поддержку техническому персоналу для проведения анализов.

  • Получено 1 мая 2017 г.
  • Исправление получено 16 мая 2017 г.
  • Принято 19 мая 2017 г.
  • Copyright © 2017, Международный институт противораковых исследований (д-р Джордж Дж. Делинасиос), Все права зарезервировано

Нейроэндокринная опухоль желудочно-кишечного тракта: Диагноз

НА ЭТОЙ СТРАНИЦЕ: Вы найдете список общих тестов, процедур и сканирований, которые врачи используют для поиска причины медицинской проблемы.Используйте меню для просмотра других страниц.

Врачи используют множество тестов, чтобы найти или диагностировать НЕТ желудочно-кишечного тракта. Они также проводят тесты, чтобы узнать, распространился ли рак на другую часть тела, откуда он начался. Если это происходит, это называется метастазированием. Например, визуализационные тесты могут показать, распространился ли рак. Визуальные тесты показывают изображения внутренней части тела. Врачи также могут провести тесты, чтобы узнать, какое лечение лучше всего.

При большинстве видов рака биопсия — единственный надежный способ для врача узнать, есть ли опухоль в какой-либо части тела.При биопсии врач берет небольшой образец ткани для исследования в лаборатории. Если биопсия невозможна, врач может предложить другие тесты, которые помогут поставить диагноз.

В этом разделе описаны варианты диагностики СЕТИ желудочно-кишечного тракта. Не все тесты, перечисленные ниже, будут использоваться для каждого человека. Ваш врач может учитывать следующие факторы при выборе диагностического теста:

  • Тип подозреваемого рака

  • Ваши признаки и симптомы

  • Ваш возраст и общее состояние здоровья

  • Результаты ранее проведенных медицинских обследований

Большинство НЭО желудочно-кишечного тракта обнаруживаются неожиданно, когда людям делают рентген или медицинскую процедуру по причинам, не связанным с опухолью.Например, многие СЕТИ аппендикса обнаруживаются во время операции по удалению аппендикса, называемой аппендэктомией. Сети желудка и двенадцатиперстной кишки, верхней части тонкой кишки, обычно обнаруживаются во время эндоскопии (см. Ниже).

Если врач подозревает НЕТ желудочно-кишечного тракта, он запросит полный медицинский и семейный анамнез и проведет тщательное медицинское обследование. Кроме того, для диагностики СЕТИ желудочно-кишечного тракта можно использовать следующие тесты:

  • Анализы крови / мочи. Врачу могут потребоваться образцы вашей крови и мочи для проверки аномального уровня гормонов и других веществ. Гормон — это вещество, которое может вызывать симптомы. Гормон серотонин, нейромедиатор, участвующий в поведении и депрессии, вырабатывается некоторыми сетями. Некоторые анализы крови проверяют наличие опухолевых маркеров, которые представляют собой белки, которые могут указать, растет ли опухоль. Хромогранин А является обычно измеряемым онкомаркером для НЭО, но одного его измерения недостаточно для постановки диагноза, и его нельзя использовать отдельно, чтобы проверить, вернулась ли НЭО, что называется рецидивом, или начала расти или распространяться, что называется прогрессией. .

  • Биопсия. Биопсия — это удаление небольшого количества ткани для исследования под микроскопом, которое обычно требуется для диагностики НЭО. Затем патолог анализирует образцы, взятые во время биопсии. Патолог — это врач, который специализируется на интерпретации лабораторных тестов и оценке клеток, тканей и органов для диагностики заболеваний.

  • Молекулярное исследование опухоли. Ваш врач может порекомендовать провести лабораторные анализы образца опухоли для выявления конкретных генов, белков и других факторов, уникальных для опухоли.Результаты этих тестов могут помочь определить варианты лечения. Это тестирование менее полезно при НЭО, чем при других формах рака.

  • Эндоскопия. Эндоскопия позволяет врачу увидеть слизистую оболочку верхних отделов пищеварительной системы с помощью тонкой гибкой трубки с подсветкой, называемой эндоскопом. Человек может получить успокоительное, если зонд вводится через рот по пищеводу в желудок и тонкий кишечник. Седация дает лекарство, чтобы стать более расслабленным, спокойным или сонным.Если обнаружено отклонение от нормы, будет выполнена биопсия.

    Колоноскоп — это эндоскоп, который вводится через задний проход в толстую кишку. Его можно использовать для диагностики опухоли в нижнем отделе пищеварительного тракта.

  • Эндоскопическое УЗИ. Ультразвук использует звуковые волны для создания изображения внутренних органов. Эта процедура часто проводится одновременно с эндоскопией верхних отделов. Во время эндоскопического ультразвукового исследования аппарат, излучающий звуковые волны, называемый преобразователем, вводится в верхний пищеварительный тракт через рот.Эндоскопическое УЗИ может показать увеличенные лимфатические узлы, что может помочь врачу найти опухоль или выяснить стадию заболевания.

  • Рентген. Рентген — это способ получить изображение структур внутри тела. Иногда СЕТЬ желудочно-кишечного тракта может не обнаруживаться на рентгеновском снимке из-за ее размера или местоположения, поэтому врач может также порекомендовать другие типы сканирования.

  • Рентгеновские снимки бария. Во время проглатывания бария человек проглатывает жидкость, содержащую барий, которая покрывает слизистую оболочку пищевода, желудка и кишечника.Затем делается серия рентгеновских снимков. Барий делает аномалии более заметными на рентгеновском снимке. Если есть отклонения от нормы, эндоскопическая биопсия может помочь поставить диагноз рака.

    A Бариевая клизма может быть сделана перед рентгенологическим исследованием внутренней поверхности толстой кишки. Во время этого теста раствор бария вводится через задний проход и проходит через толстую кишку. Затем делают рентген.

  • Компьютерная томография (КТ или CAT). Компьютерная томография позволяет делать снимки внутренней части тела с использованием рентгеновских лучей, сделанных под разными углами. Компьютер объединяет эти изображения в подробное трехмерное изображение, на котором видны любые аномалии или опухоли. Для измерения размера опухоли можно использовать компьютерную томографию. Кроме того, компьютерная томография используется, чтобы увидеть, распространилась ли опухоль на печень, и найти НЕТ в забрюшинных (область за брюшной полостью) лимфатических узлах. Иногда перед сканированием наносят специальный краситель, называемый контрастным веществом, чтобы улучшить детализацию изображения.Этот краситель можно вводить пациенту в вену или давать в виде таблетки или жидкости для проглатывания.

  • Магнитно-резонансная томография (МРТ). МРТ использует магнитные поля, а не рентгеновские лучи, для получения детальных изображений тела. МРТ можно использовать для измерения размера опухоли. Перед сканированием наносится специальный краситель, называемый контрастным веществом, для создания более четкого изображения. Этот краситель можно вводить пациенту в вену или давать в виде таблетки или жидкости для проглатывания.

  • Ядерная медицина. Во время этого теста небольшое количество радиоактивного препарата, называемого индикатором, вводится в вену пациента. Затем тело сканируется, чтобы показать, где в нем скопилась радиоактивность. Есть несколько доступных методов визуализации ядерной медицины в NET, в том числе 2 типа ПЭТ-КТ-сканирований.

    • Позитронно-эмиссионная томография (ПЭТ) или ПЭТ-КТ ( обновлено 09/2020, ). ПЭТ-сканирование обычно сочетается с компьютерной томографией (см. Выше), называемой ПЭТ или ПЭТ-КТ-сканированием.Три типа индикаторов, используемых в ПЭТ-сканировании, включают галлий-68 ( 68 Ga) DOTATATE, медь-64 ( 64 Cu) DOTATATE и ( 18 F) фтордезоксиглюкозу (FDG). 68 Ga DOTATATE PET — это первичное сканирование, используемое для изучения медленно растущих сетей (классы 1 и 2, см. Классы). ПЭТ-сканирование с ФДГ иногда используется для быстрорастущих НЕТ (степень 3). ПЭТ-сканер 64 Cu DOTATATE — это новейший индикатор, который будет доступен для обнаружения СЕТЕЙ.

После проведения диагностических тестов ваш врач вместе с вами ознакомится со всеми результатами.Если диагноз — рак, эти результаты также помогают врачу описать опухоль. Это называется постановкой.

Следующий раздел в этом руководстве — Этапы и классы . Он объясняет систему, которую используют врачи для описания степени заболевания. Используйте меню, чтобы выбрать другой раздел для чтения в этом руководстве.

Онкомаркеров — Лабораторные тесты онлайн

Источники, использованные в текущем обзоре

(4 ноября 2015 г.) Национальный институт рака.Онкомаркеры. Доступно в Интернете по адресу https://www.cancer.gov/about-cancer/diagnosis-staging/diagnosis/tumor-markers-fact-sheet. По состоянию на январь 2019 г.

(7 ноября 2018 г.) MedlinePlus. Тесты на онкомаркеры. Доступно в Интернете по адресу https://medlineplus.gov/lab-tests/tumor-marker-tests/. По состоянию на январь 2019 г.

(май 2018 г.) Cancer.Net. Тесты на онкомаркеры. Доступно в Интернете по адресу https://www.cancer.net/navigating-cancer-care/diagnosing-cancer/tests-and-procedures/tumor-marker-tests. По состоянию на январь 2019 г.

(15 декабря 2016 г.) Американское онкологическое общество. Обнаружение рака на поздней стадии. Доступно в Интернете по адресу https://www.cancer.org/treatment/understanding-your-diagnosis/advanced-cancer/diagnosis.html?_ga=2.53018408.183357977.1547479715-898534326.1504274905. По состоянию на январь 2019 г.

Учебник Титца по клинической химии и молекулярной диагностике, шестое издание. Сент-Луис, штат Миссури. Авторские права © 2018 by Elsevier. Глава 31, Онкомаркеры.

Источники, использованные в предыдущих обзорах

Томас, Клейтон Л., Редактор (1997). Циклопедический медицинский словарь Табера. Компания F.A. Davis, Филадельфия, Пенсильвания [18-е издание].

Пагана, Кэтлин Д. и Пагана, Тимоти Дж. (2001). Справочник Мосби по диагностическим и лабораторным тестам, 5-е издание: Mosby, Inc., Сент-Луис, Миссури.

САУ (19 июля 2000 г.). Онкомаркеры. Американское онкологическое общество, профилактика и раннее обнаружение [он-лайн информация]. Доступно на сайте http://www.cancer.org.

САУ (8 июля 1999 г.). Тестирование биопсийных и цитологических образцов на рак.Американское онкологическое общество, профилактика и раннее обнаружение [он-лайн информация]. Доступно на сайте http://www.cancer.org.

NCI (27 апреля 1998 г.). Онкомаркеры. Национальный институт рака, Факты о раке [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://cis.nci.nih.gov/fact/5_18.htm.

Basquet, C.R. (1995). Рак и женщины. Американская ассоциация женщин-врачей [Выдержка в Интернете из «Полная книга здоровья женщин Американской ассоциации женщин», под редакцией Эппс, Р. и Стюарт, С.]. Доступно в Интернете по адресу http://www.amwa-doc.org/publications/WCHealthbook/canceramwa-ch47.html.

Чек, W. (1998 июль) Достижение соглашения по опухолевым маркерам. CAP Today, В новостях [Электронный журнал]. Доступно в Интернете по адресу http://www.cap.org/captoday/archive/1998/julycover.html.

Последние достижения (11 марта 2002 г.). Профили генов выявляют слабые места раковых клеток. Институт рака Дана-Фарбер [Электронный журнал]. Доступно в Интернете по адресу http://www.dana-farber.org/res/research/geneprofiles.жерех

ASCO (17 мая 1996 г.). Руководство по клинической практике использования онкомаркеров при раке молочной железы и колоректальном раке. Американское общество клинической онкологии [Онлайн-рекомендации]. Доступно в Интернете по адресу http://www.asco.org/prof/pp/html/guide/tumor/m_tumor1.htm.

(1999, последнее обновление) Тесты на онкомаркеры. Университет здравоохранения Айовы, Комплексный онкологический центр Холдена, Виртуальная больница, помощник ученика [онлайн-информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.vh.org/Patients/IHB/Cancer/Tumormarker.html.

Американское онкологическое общество. Онкомаркеры. Доступно в Интернете по адресу http://www.cancer.org/docroot/PED/content/PED_2_3X_Tumor_Markers.asp?sitearea=PED. По состоянию на 15 октября 2009 г.

Американское онкологическое общество. Что такое онкомаркеры? Доступно в Интернете по адресу http://www.cancer.org/treatment/understandingyourdiagnosis/examsandtestdescriptions/tumormarkers/tumor-markers-what-are-t-m. По состоянию на ноябрь. 2013.

Американское онкологическое общество. Что нового в исследованиях онкомаркеров? Доступно в Интернете по адресу http: // www.race.org/treatment/understandingyourdiagnosis/examsandtestdescriptions/tumormarkers/tumor-markers-whats-new. По состоянию на ноябрь. 2013.

Американское онкологическое общество. Специфические онкомаркеры. Доступно в Интернете по адресу http://www.cancer.org/treatment/understandingyourdiagnosis/examsandtestdescriptions/tumormarkers/tumor-markers-specific-markers. По состоянию на ноябрь. 2013.

Национальный институт рака. Онкомаркеры. Доступно в Интернете по адресу http://www.cancer.gov/cancertopics/factsheet/Detection/tumor-markers.По состоянию на ноябрь 2013 г.

Национальная всеобъемлющая онкологическая сеть. Онкомаркер. Доступно в Интернете по адресу http://www.nccn.com/component/glossary/Glossary-1/T/Tumor-marker-484/. По состоянию на ноябрь 2013 г.

Национальная всеобъемлющая онкологическая сеть. Отчет рабочей группы NCCN: Оценка клинической полезности онкологических маркеров в онкологии. Доступно в Интернете по адресу http://www.nccn.org/JNCCN/supplements/PDF/TumorMarkers_Task_Force_Report.full.pdf. По состоянию на ноябрь 2013 г.

Cancer.Net. Понимание маркеров опухоли.Доступно в Интернете по адресу http://www.cancer.net/all-about-cancer/cancernet-feature-articles/treatments-tests-and-procedures/understanding-tumor-markers. По состоянию на ноябрь 2013 г.

Национальная академия клинической биохимии. Руководство по лабораторной медицине: использование онкомаркеров в клинической практике: требования к качеству. Доступно на сайте http://www.aacc.org. По состоянию на ноябрь 2013 г.

Открытие опухолевых маркеров рака желудка с помощью протеомики

Abstract

Рак желудка (РЖ) имеет высокий уровень заболеваемости и смертности среди различных видов рака во всем мире.Разработка неинвазивных диагностических методов или технологий для отслеживания возникновения GC является неотложной, и рассматривается поиск надежных биомаркеров. Это исследование направлено на непосредственное обнаружение дифференциальных биомаркеров в тканях GC с помощью двумерного дифференциального гель-электрофореза (2D-DIGE) и дальнейшая проверка экспрессии белка с помощью вестерн-блоттинга (WB) и иммуногистохимии (IHC). Пары GC тканей (ткани рака желудка и прилегающие нормальные ткани), полученные в результате хирургического вмешательства, исследовали для 2D-DIEG.Пять белков были подтверждены WB и IHC, включая регулируемый глюкозой белок 78 (GRP78), глутатион-s-трансферазу pi (GSTpi), аполипопротеин AI (ApoAI), альфа-1-антитрипсин (A1AT) и гастрокин-1 (GKN-1). Среди результатов, GRP78, GSTpi и A1AT были значительно повышены и подавлены соответственно у пациентов с раком желудка. Более того, GRP78 и ApoAI коррелировали с A1AT для экспрессии белков. Это исследование предполагает, что эти белки могут быть кандидатами в надежные биомаркеры рака желудка.

Образец цитирования: Wu J-Y, Cheng C-C, Wang J-Y, Wu D-C, Hsieh J-S, Lee S-C, et al. (2014) Открытие опухолевых маркеров рака желудка с помощью протеомики. PLoS ONE 9 (1): e84158. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084158

Редактор: Сальваторе В. Пиццо, Медицинский центр Университета Дьюка, Соединенные Штаты Америки

Поступила: 19 августа 2013 г .; Одобрена: 12 ноября 2013 г .; Опубликован: 3 января 2014 г.

Авторские права: © 2014 Wu et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: Работа поддержана грантами NSC96-3111-P-042A-004-Y, NSC100-2314-B-037-040 и Национальным научным советом Китайской Республики. Эта работа также была поддержана больницей Медицинского университета Гаосюн (KMUH97-7R32, KMUH98-8R33).Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Несмотря на то, что распространенность рака желудка снижается и меняется географически, он остается одним из наиболее распространенных видов рака в азиатских странах и занимает четвертое место по частоте встречаемости рака (9% всех онкологических заболеваний) во всем мире.Стандартизированные по возрасту коэффициенты заболеваемости (ASR) превышают 20 на 100 000 в странах с высоким риском, таких как Китай, Япония и Корея [1], [2], [3]. Это также вторая ведущая причина смерти от рака у обоих полов во всем мире (737 000 смертей, 9,7% от общего числа). В Восточной Азии уровень смертности оценивается примерно в 28,1 на 100 000 у мужчин и 13,0 на 100 000 у женщин, тогда как в Северной Америке он составляет примерно 2,8 и 1,5 соответственно [4].

Пятилетняя выживаемость колеблется от 90% до менее 5%, в основном в зависимости от стадии диагноза [5], [6].Если рак желудка можно обнаружить и лечить на ранних стадиях, пятилетняя выживаемость будет лучше, чем 90%; однако при ранней стадии рака желудка нет явных или специфических симптомов. Таким образом, раннее выявление рака желудка становится более трудным. В странах риска, таких как Япония, они были хорошими индикаторами атрофического гастрита, а не диагностическими маркерами рака желудка [7] — [9].По сути, эндоскопия стала многообещающим инструментом, частота обнаружения которой в 2,7–4,6 раза выше, чем при исследованиях с барием [10]. Однако ранняя диагностика рака желудка с помощью эндоскопии зависит от профессиональных навыков.

Сообщалось о некоторых неинвазивных биомаркерах для диагностики или последующего наблюдения при опухолях желудочно-кишечного тракта и печени. Например, альфа-фетопротеин (AFP) является одним из клинически полезных биомаркеров для диагностики и последующего наблюдения гепатоцеллюлярной карциномы (HCC). AFP был повышен выше 20 нг / мл в одном исследовании у более чем 70% пациентов с HCC. [11].Согласно выводам конференции Европейской ассоциации по изучению печени (EASL) Барселона-2000, ГЦК можно диагностировать без биопсии в тех случаях, когда уровень АФП превышает 400 нг / мл с узелком размером более 2 см, что свидетельствует о наличии артериальной крови. гиперваскуляризация у пациентов с циррозом [12]. Инколоректальная карцинома (CRC), уровень предоперационного карциноэмбрионального антигена (CEA) является весьма значимым прогностическим фактором, и Американское общество клинической онкологии (ASCO) рекомендует проводить его дооперационное тестирование. предоставить прогностическую информацию [13].Серийное повышение CEA указывает на более высокую вероятность рецидива CRC. Однако надежных биомаркеров рака желудка не существует.

Таким образом, поиск надежных биомаркеров рака желудка очень важен для клинической практики. Это исследование было направлено на обнаружение надежных белковых биомаркеров в совпадающих тканях (опухоли и прилегающих нормальных тканях) с помощью двухмерного разностного гель-электрофореза (2D-DIGE) и идентификации белков с помощью матричной масс-спектрометрии с лазерной десорбцией / ионизацией и визуализацией (MALDI). -IMS).

Материалы и методы

Образцы тканей

Образцы тканей были получены после подписания информационных согласий. Парные образцы, включающие опухоль и прилегающие нормальные ткани пациентов, были взяты при эндоскопической биопсии или хирургическом вмешательстве. Степень опухоли была определена патологами в соответствии с системой Американской объединенной комиссии по стадированию рака (AJCCS) при окрашивании метиленовым синим. Клиническая информация о пациентах была записана, в том числе возраст, пол, тип опухоли, инвазия и выживаемость.Кроме того, концентрация РЭА в сыворотке также измерялась радиоактивным иммуноанализом при рутинной медицинской диагностике. Лица, участвовавшие в настоящем исследовании, дали письменное информированное согласие на публикацию этих подробностей. Больница Хо Мемориал (KMUH-IRB-980382).

Двухмерный гель-электрофорез

Одна (таблица 1) пара образцов тканей промытаомогенизирована (PRO 200, Bertec, Тайвань) в умеренном объеме буфера для лизиса (50 мМ трис-HCl, 8М мочевины, 4% (мас. / Об.) 3 — [(3- Холамидопропил) диметиламмонио] -1-пропансульфонат и pH 8.5). Отдельные 50 мкг образца белка метили 400 пмоль cy3 или cy5 отдельно в течение 30 минут (фиг. 1B). Кроме того, объединенную смесь образцов (100 мкг) одновременно метили 800 пмоль cy2 в качестве внутреннего стандарта. Впоследствии реакции мечения останавливали инкубацией 1 мкл 10 мМ лизинового буфера в течение 30 минут, затем однократного объема буфера для образца (8 М мочевины, 20 мМ дитиотреитола, 4% (мас. / Об.) 3 — [(3 -Холамидопропил) диметиламмонио] -1-пропансульфонат, 0,5% (об. / Об.) IPG-буфер и немного бромфенолового синего).Первое разделение, изоэлектрическое фокусирование, выполняли с использованием колпачка для нанесения на полоски геля (7 см, pI 4–7) при 20 ° C и выдерживании под напряжением 15000 вольт-часов (система IPGphor, GE Healthcare). После уравновешивания с додецилсульфатом натрия проводили второе разделение с использованием гелэлектрофореза 4–12% додецилсульфат натрия-полиакриламид. Изображения гелей были получены (Typhoon TRIO Variable Mode Imager, GE Healthcare) с использованием лазеров 488, 532 и 633 нм с фильтром излучения 520, 532 и 670 нм соответственно.Все изображения были проанализированы с помощью программного обеспечения DeCyder 6.5 (GE Healthcare) для выбора дифференциальных белков, которые были выбраны в зависимости от расположения ниже значимого значения 0,05 в соответствии с тестом Student t .

Рис. 1. Результаты 2D-DIGE для парных образцов тканей.

Дифференциальные белки представлены в гелях. (слева): нормальный; (справа): рак. Тридцать шесть белков были отобраны с помощью статистической программы DeCyder, но только пятнадцать белков были идентифицированы методами PMF или PFF.Условия геля: pI: 4-7; гель: 4–12%. Аналитические диапазоны составляли от pI 4 до 7 для изоэлектрического фокусирования и от 4% до 12% градиент геля для гельэлектрофореза додецилсульфат-полиакриламид натрия.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084158.g001

Триптическое расщепление в геле

Гели, окрашенные Sybro Ruby (сигма), впоследствии были обесцвечены 10% метанолом и 7% уксусной кислотой в деионизированной воде в течение ровно 30 мин. Гели с видимыми пятнами под ультрафиолетовым трансиллюминатором (Spectroline) были использованы для поиска интересных белков. вручную.Эти гелевые частицы промывали 100 мкл 25 мМ бикарбоната аммония в 50% ацетонитриле в течение 15 минут, а затем дважды промывали 200 мкл 25 мМ бикарбоната аммония в деионизированной воде в течение 15 минут, а затем добавляли достаточное количество ацетонитрила для усадки частицы геля. После высыхания отдельные частицы геля повторно инкубировали с 3 мкл 20 нг / мкл трипсина в 25 мМ бикарбонате аммония при 4 ° C в течение 1 часа, а затем добавляли 3 мкл 25 мМ бикарбоната аммония для переваривания белков при 56 ° C в течение 1 часа. 1 час.После переваривания в геле к растворам добавляли 2 мкл 100% ацетонитрила с 1% трифторуксусной кислоты, а затем образцы обрабатывали ультразвуком в течение 10 минут для высвобождения пептидов из частиц геля.

Масс-спектрометрический анализ для идентификации белков

Каждый раствор белка, расщепленный трипсином, смешивали 1-1 с 10 мг / мл α-циано-4-гидроксикоричной кислоты, растворенной в 50% ацетонитриле / 0,1% трифторуксусной кислоте, и наносили на мишень AnchorChip MALDI (Bruker Daltonics GmbH, Бремен, Германия. ) до высыхания.Пептиды анализировали с помощью MALDI-TOF / TOF UltraflexIII (Bruker Daltonics) при 20 кВ с положительной моделью, а данные пиков переносили в программное обеспечение FlexAnalysis ™ 3.0 (Bruker Daltonics) для расширенных расчетов и калибровки. MASCOT 2.2 (Matrix Science) использовали для сопоставления пептидов с базой данных NCBI или Swiss-Prot для идентификации белков. Настройка ограничивалась параметрами таксономии человека. Между тем, карбамидометилцистеин использовался в качестве фиксированной модификации, а окисленный метионин — в качестве переменной модификации.Вероятность (P) была основана на балле косяка, рассчитанном из -10 × Log (P). Уровень белка выше 56 был значимым ( p <0,05). Более того, один из основных пептидных пиков, появляющихся в спектре, был использован для подтверждения идентичного результата путем идентификации аминокислотной последовательности, что называется методом снятия отпечатков пальцев пептидного фрагмента.

Вестерн-блоттинг

Пары образцов ткани гомогенизировали (Pro 200, Bertec) в буфере для лизиса (10 мМ фосфата натрия, 0.9% хлорида натрия, 1% тритона-X100, pH 7,4) и инкубировали при встряхивании при 4 ° C в течение 1 часа. После избавления от осажденных гранул высокоскоростным центрифугированием (10000 об / мин, 5 минут) пипетированные супернатанты добавляли к буферу для образцов (10 мМ фосфата натрия, 0,9% хлорида натрия, 8 М мочевины, 30% глицерина, 2 % додецилсульфата натрия, 0,1% β-меркаптоэтанола и 0,1% бромфенолового синего) в соотношении 1: 1 и кипятили при 100 ° C в течение 5 минут для денатурации белка. Приблизительно 20 мкг каждого образца белка загружали на отдельную сетку 4– 12% -ный электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE, Invitrogen).Систему сухого блоттинга iblot (Invitrogen) использовали для преобразования белков в мембрану из поливинилиденфторида (PVDF) на основе ионов, протекающих вместе с медным электродом. После использования 0,5% молока для блоттинга PVDF-мембраны в течение 30 минут добавляли индивидуальное первичное антитело (2 мкг / мл) для инкубации в течение 2 часов при встряхивании. Согласованные вторичные антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) (2 мкг / мл), инкубировали в течение 1 часа при последовательном встряхивании. Между процессами инкубации многократная промывка буфером PBS (10 мМ фосфат натрия, pH 7.4 и 0,9% хлорида натрия) передон. Была выполнена система обнаружения ECL (Millipore), и изображения были получены с помощью Imaging System (Gel Doc XR System, Bio-Rad) в зависимости от умеренного времени исследования.

Иммуногистохимия

Иммуногистохимия выполнялась с использованием стандартного метода окрашивания на основе пероксидазы. Образцы ткани вырезали с помощью криостата (HM525, Microm). Свежие срезы тканей (10 мкм) на предметных стеклах, покрытых лизином, сушили на нагревателе при 37 ° C и последовательно погружали в 75%, 95% и 100% этанол для 1 минута для фиксации белка.Вкратце, активность эндогенной пероксидазы гасили 3% перекисью водорода в течение 10 минут. Эпизод антигена был выявлен путем погружения предметного стекла в 10 мМ цитратной кислоты в кипящую воду на 25 минут. Последовательные инкубации с индивидуальным первичным антителом и вторичными антителами, конъюгированными с HRP, проводили в течение 1 часа при встряхивании. Набор AEC (Sigma) использовался для окрашивания тканей, и операция выполнялась в соответствии с прилагаемым руководством. Вкратце, смешанный раствор 2.5 M ацетатного буфера, хромогенного AEC (3-амино-9-этилкарбазол) и 3% перекиси водорода проводили мгновенно и последовательно инкубировали с предметными стеклами ткани. Окрашивающие предметные стекла наблюдали и получали под микроскопом (BX51, Olympus).

Статистический анализ

Статистическое программное обеспечение SPSS было выполнено для расчета значимости согласно критерию Стьюдента t и корреляции между GRP78, GSTpi, A1AT, ApoAI и GKN-1. Значимое различие (значение p ) было приемлемым как меньше 0.5.

Результаты

Обнаружение биомаркеров на основе 2D-DIGE

Ткани рака желудка были проанализированы с помощью 2D-DIGE и сравнены с парными нормальными тканями для поиска предполагаемых биомаркеров рака желудка. Предполагаемыми кандидатами были различия в экспрессии протеина более чем в 1,2 раза. Изображение геля представляло собой расположение белков, помеченных cy-красителями (рис. 1). Можно идентифицировать пятнадцать белков, включая регулируемый глюкозой белок 78 (GRP78), родственный белок теплового шока 71 кДа (HSC70), белок дисульфид-изомераза A3 (PDIA3), бета-субъединица митохондриальной АТФ-синтазы (ATPB), белок, связанный с дисульфид-изомеразой белка. 5 (PDIRP5), гастриксин, глутатион-s-трансфераза pi (GSTpi), аполипопротеин AI (ApoAI), альфа-1-антитрипсин (A1AT) и гастрокин-1 (GKN-1).В 3 дублированных повторах некоторые идентичные белки были обнаружены в разных местах геля и исключены из-за подозрения на посттрансляционную модификацию. Наконец, пять белков, включая GRP78, GSTpi, ApoAI, A1AT и GKN-1, были подтверждены и дополнительно подтверждены как предполагаемые маркеры рака желудка. Подробное сравнение стереокартинок и увеличенных изображений геля показано на Рисунке 2.

Рис. 2. Детальное сравнение нормальной и опухолевой тканей из 2D-DIGE.

Отобранные предполагаемые белки были представлены в виде стереокартинок и изображений гелей в увеличенном масштабе.Эти белки были выбраны в соответствии со значимой разницей ниже 0,05 ( p <0,05). Кроме того, дублированная идентификация ATPB, PDIRP5, ApoAI и GSTpi на соседних точках показала, что они имели другую модификацию.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084158.g002

Вестерн-блоттинг и статистический анализ

Двенадцать пар тканей пациентов с раком желудка были использованы в качестве группы проверки. У четырех пациентов была стадия I, у 3 пациентов была стадия II, у 2 пациентов была стадия III и у 3 пациентов была стадия IV.Клиническая информация представлена ​​в таблице 1. Пять белков (GRP78, GSTpi, ApoAI, A1AT и GKN-1) были подтверждены вестерн-блоттингом. Среди результатов GRP78 и GSTpi были значительно повышены, в то время как A1AT значительно подавлялся в желудке. раковые ткани по сравнению с нормальными тканями (рис. 3). Что касается GSTpi, девять из 12 пациентов (75%) имели повышенную экспрессию белка в опухолевых тканях; с другой стороны, у 10 из 12 пациентов (83%) экспрессия белка A1AT снижена. Что касается взаимосвязи между экспрессией белка и клиническими стадиями, GRP78 имеет тенденцию к увеличению от стадии I к стадии IV, хотя статистической значимости найти не удалось.Экспрессия GSTpi и A1AT не коррелировала с клиническими стадиями (рис. 4).

Рисунок 3.

(A) С помощью вестерн-блоттинга 12 пар рака желудка и нормальных тканей использовали для проверки предполагаемых белков, включая GRP78, GSTpi, A1AT, ApoAI и GKN-1. (B) GSTpi и GRP78 были значительно сверхэкспрессированы в тканях рака желудка. Отмечена пониженная экспрессия A1AT, ApoAI и GKN-1. ** p <0,01. * p <0,05.

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0084158.g003

Рис. 4. Корреляция между клиническими стадиями рака желудка и экспрессией белков.

Хотя GRP78 и GSTpi были увеличены на разных стадиях рака желудка, статистической значимости обнаружить не удалось. В GRP78 была обнаружена тенденция увеличения с увеличением клинической стадии.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084158.g004

Интересно, что экспрессия белка GRP78 в этих парах тканей соответствовала таковой ApoAI (r 2 : -0.61, p <0,01) и A1AT (r 2 : -0,49, p <0,05) (рис.5). Между тем, экспрессия белка ApoAI коррелировала с экспрессией A1AT (r 2 : 0,62, p <0,01, фиг. 4). Результаты показали, что эти три предполагаемых биомаркера, GRP78, ApoAI и A1AT, были связаны друг с другом в экспрессии белка. Напротив, GSTpi и GKN-1, по-видимому, не зависели от экспрессии белка.

Рис. 5. Корреляция между выбранными белками.

GRP78 в этих 12 парах тканей экспрессировался коррелятивно с экспрессией ApoAI (r2: -0,61) и A1AT (r2: -0,49) по отдельности. Между тем, ApoAI экспрессировался коррелятивно с экспрессией A1AT (r2: 0,62). Однако GSTpi и GKN-1 казались независимыми. ** р <0,01. * р <0,05.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084158.g005

Иммуногистохимия

Несмотря на то, что GRP78, GSTpi и A1AT статистически значительно различаются, тенденция экспрессии других белков была такой же, как и в эксперименте 2D-DIGE.Иммуногистохимия использовалась для подтверждения полученных результатов эксперимента вестерн-блоттинга. GRP78, GSTpi, ApoAI, GKN-1 и A1AT были проверены на тканях рака желудка и незлокачественных тканях, как показано на фиг. 6. Экспрессия белков в парах тканей соответствовала результатам вестерн-блоттинга. В частности, активированные белки GRP78 и GSTpi были специфически локализованы на клетках аденокарциномы желудка. С другой стороны, белки с пониженной регуляцией, включая ApoAI и A1AT, присутствовали в нормальных железах желудка.Другой белок с пониженной регуляцией, GKN-1, проявился на слизистой оболочке желудочной ткани.

Рис. 6. Иммуногистохимические окрашивания использовали для определения местоположения предполагаемых белков.

Активированные белки GRP78 и GSTpi были специфически локализованы на клетках аденокарциномы желудка. Напротив, белки с пониженной регуляцией, включая ApoAI и A1AT, присутствовали в нормальных железах желудка. Другой белок с пониженной регуляцией, GKN-1, появляется на слизистой оболочке желудочной ткани.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084158.g006

Обсуждение

Важно иметь биомаркеры для диагностики и последующего наблюдения рака желудка. Однако карциноэмбриональный антиген (CEA), углеводный антиген (CA19-9) и CA72-4 обычно не используются в клинической практике. Исследование было направлено на выявление предполагаемых биомаркеров путем сравнения дифференциальных белков между подобранным раком и нормальными тканями. После этого эти предполагаемые биомаркеры были исследованы в группе проверки.Пять предполагаемых белков, включая GRP78, GSTpi, ApoAI, A1AT и GKN-1, были идентифицированы с помощью двумерного дифференциального гель-электрофореза (2D-DIGE) и матричной лазерной десорбции / ионизационной масс-спектрометрии (MALDI-IMS) и проверены в лаборатории. 12 клинических пациентов.Среди пяти предполагаемых белков, GRP78 и GSTpi были значительно активированы и специфически усилены в раковых клетках с помощью вестерн-блоттинга и иммуногистохимии. Напротив, A1AT значительно подавлялся и имел положительную и отрицательную корреляцию с экспрессией ApoAI и GRP78.

Многие предполагаемые биомаркеры рака желудка были предложены в предыдущих исследованиях. Высокие уровни GSTpi при карциномах желудка были продемонстрированы [14]. Экспрессия GSTpi также коррелировала со стадией рака желудка, где повышенный GSTpi был обнаружен в 50% на стадиях I или II, и 80% — у пациентов с раком желудка стадии III или IV [15]. Предыдущее исследование показало, что у GSTpi-положительных пациентов была меньше пятилетней выживаемости без признаков заболевания (49,0%) по сравнению с GSTpi-отрицательными пациентами (75,0%). GSTpi был маркером прогностической значимости [16].В настоящем исследовании также была продемонстрирована сверхэкспрессия GSTpi у 75% пациентов с раком желудка. Однако степень сверхэкспрессии GSTpi не коррелировала с клиническими стадиями (рис. 4).

Сверхэкспрессия белка GRP78 также была описана как предполагаемый биомаркер рака желудочно-кишечного тракта. Сверхэкспрессия GRP78 может быть обнаружена и связана со стадией и прогнозом аденокарциномы пищевода [17] и колоректального рака [18]. Это один из белков клеточного ответа на стресс, который играет важную роль в биологии опухолей, такой как регуляция апоптоза и поддержание внутриклеточного баланса кальция [19], [20].Сообщалось также, что сверхэкспрессия GRP78 при иммуногистохимии в образцах рака желудка и метастатических лимфатических узлах обратно коррелировала с выживаемостью пациентов [21]. Однако методы, использованные в настоящем исследовании, отличались от отчета Чжана. Мы исследовали белки-кандидаты с помощью 2D-DIGE для разделения дифференциальных белков и MALDI-TOF / TOF для идентификации пептидов в подходящих раковых и нормальных тканях. В нашем исследовании сверхэкспрессия GRP78 была увеличена и имела тенденцию корреляции с клиническими стадиями, хотя нет статистическая значимость из-за ограничения количества случаев.

Подавление белков может играть важную роль в канцерогенезе. В настоящем исследовании три белка, ApoAI, A1AT и GKN-1, подавлялись в нормальных тканях желудка по сравнению с тканями рака желудка. О взаимосвязи ApoAI и рака желудка не сообщалось. ApoAI является одним из основных белковых компонентов холестерина липопротеинов высокой плотности (HDL-C) и играет главную роль в поддержании транспорта холестерина и атеропротекторного эффекта HDL-C [22]. Аполипопротеины, такие как ApoAI, могут модулировать индуцированный липополисахаридом воспалительный ответ в сепсис [23].В настоящем исследовании возможно, что снижение ApoAI является отражением хронического воспаления, которое является причиной канцерогенеза. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы продемонстрировать связь между снижением ApoAI и нарушением регуляции воспаления.

Хотя повышенный уровень A1AT на начальных стадиях и корреляция с прогрессированием стадий рака желудка наблюдали Bernacka K. и др. [24], ограниченные данные могут объяснить повышение A1AT как онкомаркера рака желудка. Вместо этого в нашем исследовании было обнаружено снижение A1AT при раке желудка.A1AT обладает противовоспалительной активностью in vitro и способствует подавлению синтеза провоспалительных цитокинов, таких как интерлейкин-8, TNF-альфа, интерлейкин-1 бета [25]. Сообщалось, что генетические факторы хозяина, которые влияют на интерлейкин-1-бета, могут определять фенотип заболевания, вызванного инфекцией H. pylori [26]. Возможно, что пониженный уровень A1AT подавляет эффект подавления провоспалительных цитокинов. [25]. В нашем исследовании корреляция между снижением A1AT и ApoA1 считалась индикатором хронического воспаления.

Гастрокин-1 (GKN-1), обладающий некоторыми митогенными эффектами на эпителиальные клетки кишечника (IEC-6), подавлялся в ткани рака желудка по сравнению с подобранной нормальной слизистой оболочкой желудка в нашем исследовании. Восстановление слизистой оболочки желудка после повреждения может быть затруднено, если GKN-1 подавляется [27], [28]. Сообщалось, что GKN1 связан с апоптотическими сигналами, которые важны для восстановления тканей во время неопластической трансформации [29]. Данные настоящего исследования также предполагают, что пониженный уровень GKN-1 может быть обнаружен в тканях рака желудка.

Метод

, основанный на протеомике, для идентификации белков, связанных с апоптозом, при раке желудка был ранее описан Bai Z. et al [30]. Тем не менее, белки дифференциальной экспрессии в настоящем исследовании не были идентичны отчету Bai, предполагающему ENO1, GRP78, GRP94, PPIA. , PRDX1 и PTEN в качестве потенциальных биомаркеров рака желудка. Что касается развития рака желудка, это сложный процесс, который демонстрирует взаимодействия между хозяином, окружающей средой и бактериями, такими как Helicobacter pylori .Один фактор или белок не могут предсказать возникновение и прогрессирование рака желудка. В настоящем исследовании было обнаружено, что пять предполагаемых белков по-разному экспрессируются в совпадающих тканях (опухоли и прилегающей нормальной ткани). У двух из них (GRP78 и GSTpi) была повышенная регуляция, а для других (ApoAI, A1AT и GKN-1) — пониженная. Потребуются дальнейшие исследования, чтобы выяснить, как эти белки являются биомаркерами для выявления рака желудка.

Вклад авторов

Эксперимент задумал и спроектировал: Дж.Y. Wu CCC WMW. Проведены эксперименты: CCC. Проанализированы данные: SCL. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: J.Y. Wu J.Y. Ван DCW JSH. Написал статью: J.Y. Ву.

Список литературы

  1. 1. Паркин Д.М., Брей Ф., Ферли Дж., Пизани П. (2005) Глобальная статистика рака, 2002. CA Cancer J Clin 55: 74–108.
  2. 2. Фок К.М., Талли Н., Моайеди П., Хант Р., Адзума Т. и др. (2008) Азиатско-Тихоокеанский консенсус по профилактике рака желудка. J Gastroenterol Hepatol 23: 351–365.
  3. 3. Torpy JM, Lynm C, Glass RM (2010) Страница пациента JAMA. Рак желудка. JAMA 303: 1771.
  4. 4. Ферли Дж. Ш., Брей Ф., Форман Д., Мазерс С., Паркин Д. М.. GLOBOCAN 2008 v2.0, Заболеваемость раком и смертность во всем мире: онкологическая база МАИР № 10 [Интернет]. Лион, Франция: Международное агентство по изучению рака.
  5. 5. Сант М., Капокачча Р., Вердеккья А., Эстев Дж., Гатта Дж. И др. (1998) Выживаемость женщин с раком груди в Европе: изменение в зависимости от возраста, года постановки диагноза и страны.Рабочая группа EUROCARE. Int J Cancer 77: 679–683.
  6. 6. Howlader N, Ries LA, Mariotto AB, Reichman ME, Ruhl J, et al. (2010) Улучшенные оценки коэффициентов выживаемости при раке на основе популяционных данных. J Natl Cancer Inst 102: 1584–1598.
  7. 7. Мики К., Морита М., Сасадзима М., Хосина Р., Канда Е. и др. (2003) Полезность скрининга рака желудка с использованием метода определения сывороточного пепсиногена. Am J Gastroenterol 98: 735–739.
  8. 8. Мики К. (2006) Скрининг рака желудка с использованием метода анализа сывороточного пепсиногена.Рак желудка 9: 245–253.
  9. 9. Насроллахзаде Д., Агчели К., Сотудех М., Шакери Р., Перссон Э.С. и др. (2011) Точность и пороговые значения пепсиногенов I, II и гастрина 17 для диагностики атрофии фундального отдела желудка: влияние гастрита. PLoS One 6: e26957.
  10. 10. Таширо А., Сано М., Кинамери К., Фудзита К., Такеучи Ю. (2006) Сравнение методов массового скрининга рака желудка в Японии. World J Gastroenterol 12: 4873–4874.
  11. 11. Befeler AS, Di Bisceglie AM (2002) Гепатоцеллюлярная карцинома: диагностика и лечение.Гастроэнтерология 122: 1609–1619.
  12. 12. Bruix J, Sherman M, Llovet JM, Beaugrand M, Lencioni R, et al. (2001) Клиническое лечение гепатоцеллюлярной карциномы. Выводы конференции Barcelona-2000 EASL. Европейская ассоциация изучения печени. J Hepatol 35: 421–430.
  13. 13. Локер Дж., Гамильтон С., Харрис Дж., Джессап Дж. М., Кемени Н. и др. (2006) Обновление рекомендаций ASCO 2006 по использованию онкомаркеров при раке желудочно-кишечного тракта. Дж. Клин Онкол 24: 5313–5327.
  14. 14. Цуцуми М., Сугисаки Т., Макино Т., Мияги Н., Накатани К. и др. (1987) Онкофетальная экспрессия плацентарной формы глутатион-S-трансферазы в карциномах желудка человека. Jpn J Cancer Res 78: 631–633.
  15. 15. Niitsu Y, Takahashi Y, Saito T., Hirata Y, Arisato N и др. (1989) Сывороточная глутатион-S-трансфераза-пи как онкомаркер злокачественных новообразований желудочно-кишечного тракта. Рак 63: 317–323.
  16. 16. Монден Н., Абэ С., Суто И., Хисикава Ю., Кинугаса С. и др.(1997) Прогностическое значение экспрессии металлотионеина, глутатион-S-трансферазы-пи и Р-гликопротеина при радикально удаленном раке желудка. Онкология 54: 391–399.
  17. 17. Langer R, Feith M, Siewert JR, Wester HJ, Hoefler H (2008) Экспрессия и клиническое значение регулируемых глюкозой белков GRP78 (BiP) и GRP94 (GP96) в аденокарциномах пищевода человека. BMC Cancer 8: 70.
  18. 18. Takahashi H, Wang JP, Zheng HC, Masuda S, Takano Y (2011) Сверхэкспрессия GRP78 и GRP94 участвует в колоректальном канцерогенезе.Histol Histopathol 26: 663–671.
  19. 19. Liu H, Miller E, van de Water B, Stevens JL (1998) Белки стресса эндоплазматического ретикулума блокируют индуцированное окислителем увеличение Ca2 + и гибель клеток. J Biol Chem 273: 12858–12862.
  20. 20. Литтл Э., Рамакришнан М., Рой Б., Газит Г., Ли А.С. (1994) Белки, регулируемые глюкозой (GRP78 и GRP94): функции, регуляция генов и применения. Crit Rev Eukaryot Gene Expr 4: 1–18.
  21. 21. Zhang J, Jiang Y, Jia Z, Li Q, Gong W и др.(2006) Связь повышенной экспрессии GRP78 с увеличением метастазов в лимфатических узлах и плохим прогнозом у пациентов с раком желудка. Clin Exp Metastasis 23: 401–410.
  22. 22. Tall AR (2008) Пути оттока холестерина и другие потенциальные механизмы, участвующие в атерозащитном эффекте липопротеинов высокой плотности. J Intern Med 263: 256–273.
  23. 23. Berbee JF, Havekes LM, Rensen PC (2005) Аполипопротеины модулируют воспалительную реакцию на липополисахарид.J Endotoxin Res 11: 97–103.
  24. 24. Bernacka K, Kuryliszyn-Moskal A, Sierakowski S (1988) Уровни альфа-1-антитрипсина и альфа-1-антихимотрипсина в сыворотке крови пациентов с раком желудочно-кишечного тракта во время диагностики. Рак 62: 1188–1193.
  25. 25. Pott GB, Chan ED, Dinarello CA, Shapiro L (2009) Альфа-1-антитрипсин является эндогенным ингибитором производства провоспалительных цитокинов в цельной крови. J Leukoc Biol 85: 886–895.
  26. 26. Эль-Омар Э.М., Кэррингтон М., Чоу У.Х., Макколл К.Э., Лещ Дж. Х. и др.(2000) Полиморфизм интерлейкина-1, связанный с повышенным риском рака желудка. Природа 404: 398–402.
  27. 27. Lacy ER, Morris GP, Cohen MM (1993) Быстрое восстановление поверхностного эпителия слизистой оболочки желудка человека после острого поверхностного повреждения. J Clin Gastroenterol 17 Suppl 1S125–135.
  28. 28. Подольский Д.К. (1997) Исцеление эпителия: решение проблемы с двух сторон. J Gastroenterol 32: 122–126.
  29. 29. Риппа Э., Ла Моника Дж., Аллокка Р., Романо М.Ф., Де Пальма М. и др.(2011) Сверхэкспрессия гастрокина 1 в клетках рака желудка индуцирует Fas-опосредованный апоптоз. J. Cell Physiol 226: 2571–2578.
  30. 30. Бай З, Йе Й, Лян Б., Сюй Ф., Чжан Х. и др. (2011) Идентификация на основе протеомики группы белков и биомаркеров апоптоза при раке желудка. Int J Oncol 38: 375–383.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *