Профилактика стафилококка: Стафилококк у детей — причины, симптомы, диагностика и лечение стафилококка у ребенка в Москве в детской клинике «СМ-Доктор»

Содержание

Страница не найдена |

Страница не найдена |

404. Страница не найдена

Архив за месяц

ПнВтСрЧтПтСбВс

27282930   

       

       

       

     12

       

     12

       

      1

3031     

     12

       

15161718192021

       

25262728293031

       

    123

45678910

       

     12

17181920212223

31      

2728293031  

       

      1

       

   1234

567891011

       

     12

       

891011121314

       

11121314151617

       

28293031   

       

   1234

       

     12

       

  12345

6789101112

       

567891011

12131415161718

19202122232425

       

3456789

17181920212223

24252627282930

       

  12345

13141516171819

20212223242526

2728293031  

       

15161718192021

22232425262728

2930     

       

Архивы

Метки

Настройки
для слабовидящих

Стафилококковая инфекция на предприятиях общепита — профилактика

Причины возникновения стафилококковой инфекции в общепите

Стафилококковая инфекция имеет короткий инкубационный период — уже спустя пару часов после употребления недоброкачественного продукта у человека возникают боли в животе, рвота, диарея, общая слабость. Коварность этой токсикоинфекции заключается в том, что зараженные стафилококками продукты питания ничем не отличаются от нормальных продуктов — ни внешнем видом, ни вкусовыми качествами.

Чаще всего причиной возникновения стафилококковой инфекции является употребление зараженных молока и молокопродуктов, кондитерских кремовых изделий, реже мяса и рыбы.

Почему же происходит загрязнение пищевых продуктом стафилококками? Бактерии могут попадать в продукты вследствие таких причин:

  1. Гнойные заболевания сельскохозяйственных животных, например, при гнойном мастите у коровы возможно заражение молока стафилококком;
  2. Заражение продуктов сотрудниками пищевого предприятия, больных стафилококковыми заболеваниями — гнойничковыми заболеваниями кожи рук, ангиной и т.д.;
  3. Использование во время приготовления посуды, инвентаря, оборудования, обсемененных бактериями;
  4. Несоблюдение санитарных условий приготовления, транспортировки и хранения пищевых продуктов.

Гигиена рук персонала как мера профилактики стафилококковой токсикоинфекции

В предотвращении возникновения стафилококковой инфекции важная роль отводится соблюдению личной гигиены сотрудниками общественного питания. Так, регулярно сотрудники проходят медосмотр, который обязательно включает исследование мазков из ротоглотки на стафилококк. При выявлении стафилококковой инфекции сотруднику назначают соответствующее лечение и на этот период отстраняют от работы.

Ежедневно перед началом смены сотрудники проходят плановый осмотр. Ответственное лицо внимательно осматривает руки сотрудников, и в случае выявления ран, царапин, гнойничков на коже сотрудника временно отстраняют от выполнения работы, связанной с пищевыми продуктами.

Персонал обязан следить за чистотой рук. Так, после прихода на работу сотрудник первым делом переодевается в санитарную одежду и моет руки с мылом. В течение рабочего дня руки моют так часто, как это необходимо — после посещения туалета, выхода на улицу, после работы с пищевым сырьем и т.д. На пищевом объекте должны быть умывальники с мылом и одноразовыми полотенцами, настенные держатели с флаконами кожных антисептиков. Рекомендуем использовать мыло «Септолит мыло с антимикробным эффектом» с удобным дозатором, а также кожный антисептик «Септолит Антисептик».

Кроме того, во время сервировки и порционирования готовых блюд с целью предотвращения попадания в них микробов с рук сотрудники обязаны надевать одноразовые защитные перчатки для каждого вида блюд.

Дезинфекция помещения

В профилактике стафилококка не менее значимую роль играет содержание помещений заведения общественного питания в чистоте. Так, ежедневно в помещениях должна проводиться влажная уборка с применением моющих и дезинфицирующих средств. Ежедневная уборка включает мытье стен, дверей, пола.

Ежедневная уборка также включает обработку поверхностей, столов, кухонного оборудования. Такие мероприятия позволят предотвратить попадание стафилококка с перечисленных объектов в пищевые продукты. Так, после каждого технологического процесса рабочие поверхности, а также оборудование моют горячей водой с добавлением моющего средства. В конце смены рабочие поверхности и оборудование обязательно протирают ветошью, смоченной в раствор дезсредства с дальнейшим промыванием их водой.

Для предотвращения возникновения токсикоинфекций следует использовать отдельные разделочный и кухонной инвентарь для работы с пищевым сырьем и готовыми пищевыми продуктами. После каждой технологической операции использованную кухонную посуду и инвентарь моют в двухсекционных ваннах с моющими средствами. В конце дня всю посуду подвергают обеззараживанию путем погружения ее в раствор дезсредства.

Купить дезсредства для общепита можно в интернет-магазине Septolit.ru.

Вернуться к списку публикаций

ТОКСИНЫ ЗОЛОТИСТОГО СТАФИЛОКОККА И ИХ ТОКСОИДЫ: РОЛЬ В ПАТОГЕНЕЗЕ И ПРОФИЛАКТИКЕ СТАФИЛОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ

Staphylococcus aureus – патогенный микроорганизм, способный вызывать как госпитальные, так и внебольничные заболевания. Появление и последующее распространение штаммов, устойчивых ко многим антимикробным препаратам, прежде всего метициллинрезистентных госпитальных (HA-MRSA) и высоковирулентных внебольничных (CA-MRSA) штаммов, способных вызывать фатальные инфекции, является серьезной проблемой даже для стран с развитой системой здравоохранения. В связи с наличием у микроорганизма способности приобретать устойчивость ко всем вновь вводимым в лечебную практику антимикробным препаратам неотложной стала необходимость разработки новых альтернативных подходов к профилактике и лечению стафилококковых инфекций. Одним из таких подходов является использование специфических иммуннобиологических препаратов, повышающих резистентность макроорганизма к стафилококковой инфекции. История создания подобных препаратов насчитывает не одно десятилетие. В последние годы по аналогии с успехами при получении эффективных вакцин против инфекций, вызванных Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitides и Hemophilus influenzae, внимание исследователей было приковано к поверхностным антигенам S. aureus. Однако неудачи на этом пути, во многом обусловленные значительным структурным разнообразием поверхностных компонентов микробной клетки у различных генетических линий S. aureus, заставляют продолжить поиск новых молекулярных мишеней для включения в состав вакцинных препаратов. Альтернативой, по-видимому, могут стать экскретируемые продукты S. aureus, играющие ключевую роль в инфекционном процессе. В обзоре представлены современные данные о патогенетической роли и механизме действия нескольких групп стафилококковых токсинов. Приведены экспериментальные доказательства принципиальной возможности создания профилактических и лечебных препаратов на основе стафилококковых токсоидов и антитоксических иммуноглобулинов. Предлагается дизайн вакцинного препарата на основе данных о популяционном разнообразии S. aureus в РФ.

Ключевые слова: 

золотистый стафилококк, токсины, патогенез, токсоиды, иммунопрофилактика

Лечение и профилактика стафилококковой инфекции

Стафилококковая инфекция так многогранна, что подчас, опасаясь ее, мы точно не знаем, чего боимся. А между тем случаев заболевания стафилококковой инфекцией не становится меньше, несмотря на развитие медицины и постоянный поиск учеными новых мер по борьбе с этим заболеванием. Что же такое стафилококк? И чем он нам угрожает

Стафилококковую инфекцию вызывает особый микроб – золотистый стафилококк (лат. Stahpilococcus aureus). Свое название микроб получил благодаря характерному золотисто-желтому цвету, который позволяет безошибочно распознать его среди всего многообразия микрофлоры человеческого организма. Если мы рассмотрим микроб золотистого стафилококка в микроскоп, то увидим нечто, напоминающее кисть винограда.

Микроб золотистого стафилококка является постоянным жителем нашего организма. Он способен обитать в любой системе и органе нашего тела. Микроб золотистого стафилококка, наряду с другими разновидностями стафилококка, такими как сапрофитный стафилококк и эпидермальный стафилококк, относится к тем микроорганизмам, которые формируют условно-патогенную микрофлору человека. Но если сапрофитный и эпидермальный стафилококки совершенно безвредны, то золотистый стафилококк, при определенных условиях, провоцирует развитие заболеваний, которые требуют незамедлительного и серьезного лечения.

Как проявляет себя стафилококковая инфекция:

— Самым распространенным проявлением заболевания стафилококковой инфекцией является желудочно-кишечные расстройства, сопровождаемые сильнейшей диареей, тошнотой и рвотой, болями в области живота.

— Стафилококк вызывает массу кожных заболеваний, от фурункулов и абсцессов, до сильнейшего дерматита и экземы.

— Микроб золотистого стафилококка способен вызвать такие серьезные заболевания, как гнойная ангина, воспаление легких, мастит у женщин.

— У женщин стафилококк также вызывает синдром токсического шока.

— У детей стафилококк приводит к развитию сильнейшего сепсиса, дизбактериоза, кожных высыпаний.

Самые распространенные заболевания, вызванные стафилококковой инфекцией

— Конъюнктивит – глазное веко отекает и из глаза выделяется гной. Для лечения применяют промывания перманганатом калия и закапыванием в глаза раствора Альбуцида.

— Омфалит – это воспаление пупочной раны, вокруг пупка появляется отек и покраснение. Из пупочной ранки отделяется гной. Для лечения используют обработку ранки перекисью водорода, зеленкой и мазью Вишневского.

— Абсцесс – под кожей образуется гнойник, ткани вокруг которого краснеют и уплотняются. Используют хирургическое удаление гнойника и лечение антибиотиками.

— Энтероколит — расстройство стула, при котором присутствует частый водянистый стул более 10 раз в день, рвота и боли в животе. Для лечения используют антибиотики и препараты, восстанавливающие микрофлору в кишечнике.

— Сепсис — тяжелая бактериальная инфекция, протекающая на фоне иммунодефицита больного. Для лечения используется комплекс антибиотиков, антистафилококковая плазма и препараты человеческого иммуноглобулина.
 
Кто подвержен большему риску заболевания стафилококковой инфекцией

Стафилококковая инфекция часто поражает новорожденных младенцев, так как их организм еще не окреп, иммунитет не сформирован и малейшее отклонение от оптимальных условий кормления и ухода способно вызвать развитие заболевания.

У более старших детей и взрослых стафилококковая инфекция может развиться на фоне сильно сниженного иммунитета после перенесенного серьезного заболевания.

 
Пути заражения стафилококком

— От мамы к ребенку, через грудное молоко
— Внутриутробное заражение через кровь матери
— Воздушно капельный путь (золотистый стафилококк распространяется по воздуху)
— Контактный путь (золотистый стафилококк присутствует в домашней пыли, на поверхностях игрушек и мебели, на одежде и обуви людей)
— Больничный путь (в больницах, в частности в родильных домах, дети часто заражаются особым видом стафилококка, очень устойчивым к лечению)
— Пищевой путь (стафилококк часто размножается в несвежих продуктах, особенно в консервах)

В последнее время все чаще санитарные службы обнаруживают наличие стафилококка в таких распространенных продуктах питания, как сыр, глазированные сырки, рыбные консервы и замороженные морепродукты. При неправильной технологии производства пищевых продуктов в них поселяется и размножается золотистый стафилококк, вызывающий массовые пищевые отравления у людей.

Способы лечения

Золотистый стафилококк – это микроб, невероятно устойчивый к антибиотикам, и редко поддающийся лечению с их помощью. Антибиотики могут быть назначены вам лишь в том случае, если стафилококковая инфекция спровоцировала развитие сопутствующих заболеваний, которые необходимо срочно лечить.

Хорошим методом борьбы с золотистым стафилококком является курс приема бактериофаговых препаратов. Но, к сожалению, назначается он лишь в том случае, если конкретный штамм стафилококка не обладает повышенной устойчивостью к бактериофагам. В противном случае такая терапия бесполезна. Для того, чтобы проверить, сможет ли конкретный пациент быть вылечен таким способом, врач назначает исследование на фагочувствительность. В любом случае, меры лечения стафилококковой инфекции всегда индивидуальны, и требуют тщательного врачебного контроля.

К сожалению, стафилококковая инфекция не вырабатывает стойкого иммунитета, поэтому ею можно заразиться много раз. Связано это с тем, что видов микроба очень много, и при заболевании в организме происходит выработка антител только к токсинам одного определенного штамма золотистого стафилококка. Поэтому никто не застрахован от повторного заражения.

По последним данным ученых, в мире обнаружено более 30 различных видов стафилококка, причем многие из них устойчивы к самым сильным антибиотикам и практически не поддаются лечению.

Профилактика

Все меры по профилактике заболевания стафилококковой инфекцией должны быть направлены, прежде всего, на укрепление иммунитета и соблюдение санитарно гигиенических норм. Чтобы избежать опасности заражения, нужно:
— получать достаточное количество витаминов
— следить за свежестью и качеством продуктов
— соблюдать меры личной гигиены
— находясь в больницах, проявлять повышенные меры по соблюдению чистоты
— правильно ухаживать за младенцами и поддерживать идеально чистые условия в доме, где есть ребенок.

Рекомендации народной медицины

Народная медицина имеет свои способы борьбы с золотистым стафилококком. И основаны они на настоях лечебных трав. Основными травами, способными противостоять микробу, являются ромашка, календула и зверобой. Травники советуют полоскать горло настоем календулы (1 ч.л. травы заваривается 200 мл кипятка, 10 минут держится на водяной бане, настаивается час, после этого процеживается и настой для полоскания готов).

Для промывания носа и глаз, а также для полосканий, используется отвар ромашки (200 мл воды и 2 ч.л. цветков ромашки кипятить на медленном огне в течение 5-7 минут, остывшим и процеженным отваром можно пользоваться для полосканий и протираний).

Для приема внутрь в качестве лечебного чая идеально подойдет настой зверобоя (залейте 2ч.л. травы 200 мл кипятка и дайте настояться в течение 30 минут, можно пить как чай два раза в день). 

СТАФИЛОКОККОЗ У СОБАК (ДИАГНОСТИКА, ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА) | Руденко

1. Авдиенко В.А. Лечение собак при демодекозе, осложненном стафилококкозом // Ветеринария. — 2005. -№ 7. — С. 14-16.

2. Балбуцкая А.А., Скворцов В.Н., Дмитренко О.А. Чувствительность к антимикробным препаратам и гены факторов патогенности у изолятов Staphylococcus pseudintermedius, выделенных от здоровых собак // Ветеринария. — 2015. — № 8. — С. 25-27.

3. Игнатов П.Е. Стафилококкоз у собак // Ветеринария. — 1994. — № 4. — С. 48-50.

4. Костылева О.А. Течение стафилококкоза у собак и кошек // Ветеринария. — 2007. — № 1. — С. 52-53.

5. Мате Ж.Л. Пиодермит собак // Ветеринар. — 2004. -№ 5. — С. 12-18.

6. Новый ферментативный препарат ветлизостафин для лечения стафилококкозов животных / В.П. Чупрунов, В.П. Суровцев, Т.Е. Федоров [и др.] // Ветеринарная патология. — 2003. — № 2 (6). — С. 40-41.

7. Палунина В.В., Трошева Н.С. Микрофлора кожи больных дерматитом собак // Актуальные проблемы ветеринарной патологи и морфологи животных: Междунар. науч.-произ. конф. — Воронеж, 2006. — С. 749-750.

8. Применение лизостафина для лечения животных при стафилококкозах / О.И. Смотров, В.И. Суровцев, B.М. Борзенков, Ю.И. Хатюшин // Ветеринария. — 2010. -№ 11. — С. 24-27.

9. Соломоненко В.В., Головко А.Н., Ушкалов В.А. Этиологическая роль стафилококков и стрептококков в различных патологиях собак // Ветеринарна медицина: Міжвід. тематичний наук. зб. — Харків, 2000. — Вип. 78, ч. 1. — С. 267-271.

10. Стафилококковые инфекции у собак / А.Н. Головко, В.А. Ушкалов, В.Ю. Кассич [та ін.] // Проблеми ветеринарного обслуговування дрібних домашніх тварин: Матеріали 2 Міжнар. науково-практ. конф. — 1997. — C. 20-21.

11. Этиологическая роль грамположительных кокков и энтеробактерий при воспалительных патологиях кожи и слизистих у собак / О.В. Обуховская, Н.И. Келеберда, Ю.М. Обуховский // Ветеринарна медицина: Міжвід. тематичний наук. зб. — Харків, 2005. — Вип. 85, т. 2. — С. 846-850.

12. Авдосьєва І.К., Калініна О.С. Мікробіологічний моніторинг при різних патологіях собак // Науково-тєхнічний бюлетень. — Львів, 2008. — Вип. 9, № 4. — С. 289292.

13. Головко А. Ушкалов В., Соломоненко В. Етіотропна терапія собак при стафілококових і стрептококових інфекціях // Проблеми ветеринарного обслуговування дрібних домашніх тварин: Матеріали 8 Міжнар. науково-практ. конф. — 2003. — С. 11-14.

14. Методичні рекомендації щодо відбору проб біологічного матеріалу від собак і котів для діагностичних досліджень / А.М. Головко, В.О. Ушкалов, П.А. Руденко [та ін.]. — Київ, 2012. — 22 с.

15. Руденко В.Б. Мікрофлора шкіри та слизових оболонок клінічно здорових собак // Вісник Полтавської державної аграрної академії. — 2011. — № 4. — С. 177-180.

16. Стафілококоз в собак / В.О. Ушкалов, П.А. Руденко, В.Б. Руденко // Науковий вісник Луганського національного аграрного університету. — Луганськ: Елтон-2, 2011. — № 24. — С. 116-120.

17. Beware of the pet dog: a case of Staphylococcus intermedius infection / R. Kempker, D. Mangalat, T. Kongphet-Tran [et al.] // Am. J. Med. Sci. — 2009. -Vol. 338 (5). — P. 425-427.

18. Characterization of Staphylococcus pseudinter-medius isolated from diseased dogs in Lithuania / M.ruzauskas, N. Couto, A. Pavilonis [et al.] // Pol. J. Vet. — 2016. -Vol. 19 (1). — Р. 7-14.

19. Coagulase positive staphylococcal colonization of humans and their household pets / B.A. Hanselman, S.A. Kruth, J. Rousseau [et al.] // Can Vet J. — 2009. -Vol. 50 (9). — P. 954-958.

20. Evaluation of weekly bathing in allergic dogs with methicillin-resistant Staphylococcal colonization / S. Kawarai, A. Fujimoto, G. Nozawa [et al.] // Jpn. J. Vet. Res. -2016. — Vol. 64 (2). — Р. 153-158.

21. Holm B.R., Rest J.R., Seewald W. A prospective study of the clinical findings, treatment and histopathology of 44 cases of pyotraumatic dermatitis // Vet. Dermatol. -2004. — Vol. 15 (6). — Р. 369-376.

22. Krogh H.V., Kristensen S. A study of skin diseases in dogs and cats. II. Microflora of the normal skin of dogs and cats // Nord Vet. Med. — 1976. — Vol. 28 (9). — Р. 459-463.

23. Linoleic acid salt with ultrapure soft water as an antibacterial combination against dermato-pathogenic Staphylococcus spp. / H. Jang, Y. Makita, K. Jung [et al.] // J. Appl. Microbiol. — 2016. — Vol. 120 (2). — Р. 280-288.

24. Prevalence of methicillin-resistant staphylococci in canine pyoderma cases in primary care veterinary practices in Canada: A preliminary study / D. Joffe, F. Goulding, K. Langelier [et al.] // Can. Vet. J. — 2015. -Vol. 56 (10). — Р. 1084-1086.

25. What is living on your dog’s skin? Characterization of the canine cutaneous mycobiota and fungal dysbiosis in canine allergic dermatitis / C. Meason-Smith, A. Diesel, A.P. Patterson [et al.] // FEMS Microbiol. Ecol. — 2015. -Vol. 91 (12). — Р. 130-139.

26. Zoonotic transmission of Streptococcus equi subsp. zooepidemicus from a dog to a handler / Y. Abbott, E. Acke, S. Khan [et al.] // J. Med. Microbiol. — 2010. — Vol. 59 (Pt. 1). -Р. 120-123.

Антибиотикопрофилактика для предотвращения осложнений, связанных с метициллин-резистентным золотистым стафилококком (MRSA), у хирургических пациентов

Большинство бактериальных раневых инфекций после операции разрешаются естественным путем или после лечения антибиотиками.  Некоторые бактерии устойчивы к широко используемым антибиотикам, например, метициллин-резистентный золотистый стафилококк (MRSA). Инфекции, вызванные MRSA, редко возникают после операции, но они могут развиваться в ранах (инфекции области хирургического вмешательства или ИОХВ), в грудной клетке или в кровотоке (бактериемия), и могут представлять угрозу для жизни. ИОХВ, вызванные MRSA, встречаются у 1- 33% людей, перенесших операцию (в зависимости от типа операции), и могут быть причиной продления госпитализации (более длительного пребывания в стационаре).

Антибиотики могут быть использованы по отдельности или в сочетании друг с другом, и длительность их применения может различаться. Для того, чтобы определить самый лучший антибиотик(-и) или наиболее оптимальную дозу антибиотика для предотвращения развития инфекции, вызванной MRSA, после операции, мы изучили исследования, в которых антибиотики, назначенные для предотвращения развития ИОХВ, вызванной MRSA, сравнивали друг с другом или сравнивали с отсутствием лечения. Мы включили только рандомизированные контролируемые испытания (РКИ), при этом не ограничивали испытания по языковому принципу, датам публикации или размеру. Два автора обзора независимо друг от друга выявляли исследования и извлекали из них данные.

Мы выявили 12 РКИ с участием 4704 человек. В одиннадцати испытаниях сравнивали 16 превентивных (профилактических) видов лечений антибиотиками, и в одном испытании антибиотикопрофилактику сравнивали с отсутствием антибиотикопрофилактики. Как правило, не было сведений о наличии MRSA у участников перед проведением операции.

В четырех исследованиях сообщали о смертельных исходах (у 14 из 1401 участника): примерно 1% участников умерли после операции по различным причинам, но при этом не было никаких значимых различий между группами лечения. В четырех испытаниях сообщали о серьезных неблагоприятных событиях, связанных с антибиотиками, — у 561 участника они не были зарегистрированы. Ни в одном из испытаний не сообщали о качестве жизни, продолжительности пребывания в стационаре или использовании ресурсов здравоохранения. В целом, 221 ИОХВ, вызванная какой-либо бактерией, развилась у 4032 человек (6%), и 46 ИОХВ, вызванных MRSA, развились у 4704 человек (1%). Не было выявлено значимых различий в развитии ИОХВ в 15 сравнениях одного вида лечения антибиотиками с другим. При сравнении антибиотикопрофилактики амоксициллином/клавуланатом с отсутствием антибиотикопрофилактики было выявлено, что после применения амоксициллина/клавуланата частота развития ИОХВ была существенно меньше (снижение числа всех ИОХВ на 74%, и сокращение числа ИОХВ, вызванных MRSA, на 95%).

В двух испытаниях сообщали о развитии инфекции, вызванной MRSA, в ранах (ИОХВ), грудной клетке или кровотоке у 19 участников, но значимых различий в пропорции людей, у которых развилась инфекция, между двумя группами сравнения не было.

Профилактика амоксициллином/клавуланатом приводит к уменьшению пропорции людей, у которых развиваются MRSA-инфекции, по сравнению с отсутствием антибиотикопрофилактики, у людей без онкологических заболеваний, подвергающихся операции для введения пищевой трубки в желудок с помощью эндоскопии, хотя это может быть связано со снижением общего инфицирования, что предотвращает вторичное инфицирование ран MRSA. В настоящее время нет других доказательств тому, что комбинация антибиотиков с профилактической целью или увеличение продолжительности лечения антибиотиками приносит пользу людям, подвергающимся хирургическим операциям, с точки зрения уменьшения инфекций, вызванных MRSA. Необходимы хорошо разработанные РКИ для оценки различных видов лечения антибиотиками для предотвращения развития MRSA-инфекций после операции.

Импетиго у детей — причины возникновения, симптомы, профилактика

Импетиго — это заразное заболевание, отличительной чертой которого являются поверхностные пузырьково-гнойничковые высыпания. У новорожденных высыпания часто появляются в области подбородка, носогубного треугольника и рта.

Причины

У ребенка импетиго развивается вследствие проникновения возбудителей заболевания (стафилококков и стрептококков) в организм после порезов, укусов насекомых, прочих механических повреждений кожных покровов. Следует отметить, что данные микроорганизмы присутствуют на поверхности здоровой кожи и не представляют опасности при условии целостности ее защитных покровов.

Дальнейшее распространение инфекции может происходить несколькими способами: при расчесывании, контакте с носителем инфекции, использовании одежды и предметов ухода, принадлежащих больному человеку, без предварительной обработки.

Симптомы

  • Гнойничковые высыпания, которые возникают на том месте, где инфекция проникла в микротравму или волосяной фолликул.
  • Новообразования лопаются, содержимое (гнойное) подсыхает, образуются желто-коричневые корочки.
  • Корки отпадают, и на их месте открывается изъязвленная кожа, которая легко травмируется и часто кровоточит.
  • Жжение, зуд, боль.
  • Увеличение лимфатических узлов.

Для того чтобы правильно оценить клиническую картину болезни, важно определить вид импетиго: стрептококковое, кольцевидное, буллезное, стафилококковое, вульгарное и т. д. Все виды имеют сходную природу, однако визуально отличаются друг от друга.

Обнаружив у детей (особенно у новорожденных) красные пятна, гнойные пузырьки либо иные симптомы импетиго, важно без промедления обратиться к дерматологу. Болезнь, выявленная на начальной стадии, поддается лечению даже без употребления медицинских препаратов, но в случаях более тяжелых больным предписываются антибиотики (мазь, таблетки).

Профилактика

  • Тщательная гигиена.
  • Обработка раневой поверхности при повреждении кожи (порезах и царапинах).
Подробнее о детской дерматологии в клинике «ЮгМед»

Профилактика золотистого стафилококка

Золотистый стафилококк ( S. aureus ) у многих людей является нормальным обитателем кожи и носоглотки. Это не вредно и не опасно с точки зрения потенциальной инфекции у людей со здоровой иммунной системой. Однако иногда инфекция S. aureus может быть тяжелой и опасной для жизни.

Лучший профилактический метод — поддержание хорошей гигиены и регулярное и частое мытье рук. Фактически, смертельный штамм S.aureus (устойчивый к метициллину S. aureus — MRSA), устойчивый к большинству лекарств, также можно предотвратить путем принятия правильных привычек мытья рук.

Кто в опасности?

По данным Центров по контролю и профилактике заболеваний (CDC), стафилококковые инфекции, в том числе MRSA, которые приобретаются за пределами медицинских учреждений, чаще всего встречаются среди людей, у которых присутствуют 5 C. К ним относятся:

  • Переполнение
  • Контакт (частый контакт кожа к коже)
  • Кожа с повреждениями (порезы или ссадины)
  • Загрязненные предметы и поверхности,
  • Отсутствие чистоты.

Инфекции, вызванные S. aureus , также могут передаваться через зараженных или зараженных животных и домашних животных. Ключ к профилактике лежит в борьбе с этими 5 С.

Профилактика распространения инфекции S. aureus

Перенаселенность

Школы, детские сады, военные лагеря, тюрьмы и т. Д. Особенно восприимчивы к распространению и передаче инфекций S. aureus. Все сотрудники и студенты должны сообщать о незначительных или серьезных кожных и других инфекциях, чтобы предотвратить распространение.Тем, кто обращается с едой, следует быть особенно осторожными.

Контакты

Контакт кожи с кожей с инфицированным человеком можно предотвратить с помощью множества мер. К ним относятся ношение перчаток, масок и т. Д. Общественные шкафчики, душевые и т. Д. Необходимо регулярно чистить, чтобы избежать заражения.

Поврежденная кожа (порезы или ссадины)

Восприимчивым людям следует избегать косметического бритья ног и рук, чтобы предотвратить мелкие порезы и ссадины.Небольшие раны, такие как царапины, ссадины, царапины и любые трещины на коже, должны быть немедленно обработаны и очищены. Следует использовать соответствующие повязки, чтобы раны оставались чистыми, сухими и закрытыми.

Загрязненные предметы и поверхности

Личные вещи, такие как одежда, полотенца, униформа, оборудование, бритвы, не подлежат совместному использованию.

Плохая гигиена

Руки следует часто мыть водой с мылом или использовать дезинфицирующее средство для рук на спиртовой основе.Доказано, что алкоголь является эффективным дезинфицирующим средством для местного применения против MRSA. Важно регулярно принимать душ, стирать полотенца и одежду.

Дополнительная литература

Как предотвратить заражение стафилококком в здравоохранении в 2020 г.

Если вы работаете в сфере здравоохранения, у вас уже есть хорошее представление о том, как предотвратить инфекцию стафилококка, но делает ли ваша организация достаточно, чтобы минимизировать риски?

Благодаря улучшенным протоколам скрининга и профилактики, уровень инфицирования Staphylococcus aureus (стафилококк) в США неуклонно снижался за последние 15 лет.По данным Центров по контролю и профилактике заболеваний (CDC), в период с 2005 по 2013 год заболеваемость стафилококком в больницах снижалась на 17 процентов в год. Но с тех пор прогресс замедлился. В то же время количество случаев заболевания в больницах снизилось, стафилококковые инфекции стали более распространенными в сообществах.

«Несмотря на прогресс, золотистый стафилококк по-прежнему является ведущей причиной инфекций в американских медицинских учреждениях, и он по-прежнему является смертельным, особенно в связи с тем, что некоторые штаммы становятся устойчивыми к антибиотикам.В 2017 году более 119000 человек были диагностированы стафилококковой инфекцией кровотока, и 20000 человек умерли от нее.

Что еще может делать ваша организация, помимо текущих протоколов? Вот что вам нужно знать о том, как предотвратить инфекцию стафилококка.

Что такое стафилококковая инфекция?

Инфекция стафилококка вызывается S taphylococcus aureus (стафилококк), бактериями, обнаруживаемыми на коже человека и в носу. Стафилококк представляет собой метициллин-устойчивый стафилококк (MRSA) или метициллин-чувствительный стафилококк S taphylococcus aureus (MSSA).

Хотя многие люди опасаются MRSA, страшная правда заключается в том, что любой тип стафилококковой инфекции может быть смертельным, если он попадет в ваш кровоток.

Большинство инфекций стафилококка возникают на коже или под кожей и могут привести к:

  • Фурункулы: красные, набухшие карманы с гноем
  • Импетиго: болезненная сыпь с слизистыми волдырями
  • Целлюлит: инфекция, которая возникает под кожей и вызывает покраснение, отек и язвы
  • Синдром ошпаренной кожи, стафилококк: заболевание, при котором стафилококки вырабатывают токсины, вызывающие жар, сыпь и иногда волдыри

Кожные стафилококковые инфекции могут быть болезненными, но обычно не смертельными.Однако, если бактерии попадают в ваш кровоток, они могут попасть в ваше сердце и вызвать эндокардит — опасную для жизни инфекцию внутренней оболочки сердца. Staph также может вызывать смертельные инфекции других крупных органов, костей и суставов.

Поскольку стафилококковые инфекции проявляются по-разному и в разных местах, признаки и симптомы сильно различаются, равно как и лечение. Врачи часто могут осушить инфицированную область, а в более серьезных случаях удалить часть пораженного органа (например, сильно поврежденный клапан сердца).Однако для устранения этого состояния обычно необходимы антибиотики.

Учитывая, что некоторые стафилококковые инфекции стали устойчивыми к антибиотикам, как никогда важно понять, как предотвратить стафилококковую инфекцию.

Что вызывает стафилококковые инфекции?

Staph — это обычная бактерия, которую можно найти даже у здоровых людей, и обычно она не вызывает проблем. По данным CDC, примерно каждый третий человек (33 процента) носит стафилококк в носу, а двое из 100 (2 процента) переносят MRSA.Однако у большинства из этих людей инфекция никогда не развивается.

Staph может передаваться от человека к человеку и может долгое время жить на неодушевленных предметах, но чтобы вызвать инфекцию, ему нужен путь в организм. Раны, иглы, операции и испорченная еда — все это обеспечивает доступ.

Определенные люди и сообщества подвержены более высокому риску развития стафилококковой инфекции, в том числе те, кто:

  • Живут в непосредственной близости, в том числе обитатели дома престарелых
  • Стационарные больные (особенно послеоперационные)
  • Открытые раны или экзема
  • Иметь имплантируемые медицинские изделия
  • Занятия контактными видами спорта
  • Имеете основное заболевание, ослабляющее иммунную систему (например,г., ВИЧ / СПИД, рак, почечная недостаточность)
  • Инъекционные наркотики, включая запрещенные наркотики и лекарства, такие как инсулин

Рост употребления опиоидов может помочь объяснить рост внебольничных инфекций стафилококка. В 2016 году на внутривенное употребление наркотиков приходилось 9 процентов стафилококковых инфекций — по сравнению с 4 процентами в 2011 году.

5 советов по профилактике стафилококковой инфекции в здравоохранении

Вот несколько советов, которые ваша организация может использовать, чтобы остановить стафилококк:

1.Подчеркните важность правильного мытья рук.

Медицинский персонал уже должен быть знаком с надлежащими протоколами мытья рук, но дружеское напоминание никогда не повредит. Фактически, многие больницы поощряют пациентов спрашивать врачей, мыли ли они руки. Пациенты имеют право спрашивать, и, согласно Национальным институтам здравоохранения, они должны это делать, потому что правильное мытье рук — самый важный способ предотвратить инфекцию стафилококка.

Конечно, не все, кто работает в вашем медицинском учреждении, имеют медицинское образование.Опекунам, горничным, секретарям и другому вспомогательному персоналу может потребоваться краткое руководство по правильным методам. То же самое делает большинство пациентов и гостей.

Подчеркните пациентам важность мытья рук. Поощряйте их просить всех посетителей вымыть руки или использовать дезинфицирующее средство для рук медицинского класса.

2. Объясните пациентам, как предотвратить инфекцию стафилококка.

Поговорите со своими пациентами о способах предотвращения стафилококковой инфекции. Это включает в себя содержание рук в чистоте и закрытие ран, а также недопущение совместного использования предметов, соприкасающихся с кровью или кожей (например,г., иглы, бритвы, полотенца и простыни).

Также ознакомьте пациентов с предупреждающими признаками сепсиса, включая лихорадку, тошноту и рвоту, диарею, обезвоживание и низкое кровяное давление.

3. Следуйте текущим рекомендациям по профилактике стафилококковой инфекции.

Сюда входят протоколы предотвращения инфекций, связанных с устройствами и процедурами, а также протоколы обработки ран и надлежащие методы стерилизации. Контактные меры предосторожности также могут помочь сдержать распространение устойчивых инфекций.

Сама по себе эта тактика не способствовала искоренению стафилококковой инфекции в здравоохранении, но существенно изменила ситуацию.

4. Деколонизация пациентов из группы высокого риска.

CDC и другие медицинские руководства рекомендуют проводить скрининг и деколонизацию пациентов из группы высокого риска в периоды высокого риска, такие как хирургическое вмешательство, использование медицинских устройств, переливание крови и пребывание в отделении интенсивной терапии.

Деколонизация может быть достигнута с помощью антисептических салфеток медицинского класса на коже возле места операции и продуктов для деколонизации носа, таких как антисептик Nozin® Nasal Sanitizer®.

Скрининг и деколонизация могут существенно повлиять на уровень инфицирования стафилококком в вашей организации. Это помогло больницам по делам ветеранов (VA) снизить MRSA на 55 процентов и MSSA на 12 процентов в 2017 году.

5. Анализируйте свои данные, чтобы найти пробелы в ваших усилиях по профилактике стафилококка.

Какого прогресса вам еще предстоит добиться и что потребуется для устранения оставшихся уязвимостей? Чтобы ответить на эти вопросы, обратитесь к своим данным. По словам CDC, «медицинские учреждения могут сделать профилактику MRSA и MSSA приоритетом, оценивая данные об инфекциях стафилококка, осуществляя профилактические меры и оценивая прогресс.”

Деколонизация носа: недостающее звено в вашем протоколе профилактики стафилококка?

Вы не можете бороться со стафилококком, если не знаете, что он там есть. Или можно?

Универсальный скрининг — эффективный способ предотвратить распространение инфекции стафилококка. Но это не самый экономичный метод, и возможны ложноотрицательные результаты. Альтернатива — универсальная деколонизация — более быстрое, менее подверженное ошибкам и менее затратное решение.

Это может быть опасно с антибиотиками или продуктами деколонизации, которые могут стать устойчивыми к стафилококку.Но универсальная деколонизация с помощью продуктов на спиртовой основе, таких как дезинфицирующее средство для носа Nozin, снижает уровень стафилококковых инфекций на и затрат, связанных с стафилококком.

Например, одна общественная больница на 311 коек снизила инфекцию стафилококка в области хирургического вмешательства на 50,7 процента за 17 месяцев за счет введения всеобщей деколонизации. Перед этим двухэтапным многолетним клиническим испытанием больница лечила всех хирургических пациентов с помощью до / послеоперационной ванны с хлоргексидин-глюконатом (ХГГ) и предоперационной деколонизации носа с помощью повидон-йода.Пациенты с положительным результатом на MRSA были приняты меры предосторожности при контакте.

Во время клинических испытаний больница заменила продукт на основе йода продуктом на основе спирта и прекратила меры предосторожности при контакте с MRSA-положительными пациентами. Новый протокол не только сократил количество послеоперационных инфекций стафилококка вдвое, но и помог больнице сократить использование контактных мер предосторожности на 39 процентов и сэкономить 223 150 долларов за счет сокращения мер предосторожности при скрининге и контактах.

Это лишь одно из многих исследований, демонстрирующих потенциальные преимущества деколонизации носа в масштабах всей больницы.В дополнение к другим протоколам инфекционных заболеваний, всеобщая деколонизация является важным компонентом, помогающим предотвратить инфекцию стафилококка в медицинских учреждениях.

Свяжитесь с консультантом Nozin , чтобы узнать больше о деколонизации носа и запросить образцы.

Повышение эффективности профилактики смертельных стафилококковых инфекций

MSSA с началом в больнице, с другой стороны, существенно не изменилось за исследуемый период, говорит о том, что MMWR, и частота MSSA-инфекций в сообществе увеличились лишь незначительно — всего на 3.9 процентов в год с 2012 по 2017 год.

Хотя MRSA часто более известен, CDC заявил, что в его отчете подчеркивается тот факт, что всех инфекций стафилококка могут быть смертельными, и что медицинские работники и администраторы должны принимать профилактические меры для защиты своих пациентов.

Дополнительные результаты

Относительный застой в заболеваемости стафилококком, ассоциированным с населением, может быть связан с продолжающейся эпидемией опиоидов, считает CDC.

«Новые данные свидетельствуют о 16-кратном риске инвазивной инфекции MRSA среди лиц, употребляющих инъекционные наркотики; 9.2 процента случаев инвазивного MRSA в 2016 году произошло у лиц, употребляющих инъекционные наркотики », — говорится в сообщении MMWR , по сравнению с 4 процентами в 2011 году. пациенты с рецидивирующими инфекциями стафилококка.

Врачи могут помочь уменьшить инфекцию стафилококка у пациентов, употребляющих инъекционные наркотики, связав их со службами лечения наркозависимости и предоставив информацию о безопасных методах инъекций, уходе за ранами и о том, как распознать ранние признаки инфекции, говорится в сообщении агентства.

«Инфекции стафилококка представляют собой серьезную угрозу и могут быть смертельными», — сказал в пресс-релизе директор CDC Роберт Редфилд, доктор медицины. «Больницы США добились значительного прогресса, но в этом отчете говорится, что все инфекции стафилококка должны оставаться приоритетом профилактики для поставщиков медицинских услуг».

Защита пациентов от стафилококка

Риск серьезной инфекции стафилококка наиболее высок для пациентов, находящихся в стационаре в медицинских учреждениях или хирургических центрах, у пациентов, в тело которых помещены медицинские устройства, у тех, кто употребляет инъекционные наркотики, и у тех, кто вступает в тесный контакт с кем-то, у кого есть стафилококковая инфекция, CDC сказал.

«Чтобы уменьшить распространение стафилококка в обществе, каждый должен держать руки в чистоте, прикрывать раны и избегать совместного использования предметов, контактирующих с кожей, таких как полотенца, бритвы и иглы», — говорится в сообщении.

Кроме того, агентство заявило, что медицинские работники и администраторы учреждений могут защитить пациентов, выполнив рекомендации CDC по контролю за инфекциями, включая использование контактных мер предосторожности, таких как надевание перчаток и халатов, постоянный просмотр данных об инфекциях в своих учреждениях, доступных из Национальной сети безопасности здравоохранения CDC. и рассмотрение других мер вмешательства, если они не отвечают целям снижения инфицирования.

В зависимости от типа учреждения, другой уровень профилактических мер может включать обследование пациентов с высоким риском инфекции или деколонизации (специальное купание или лекарства, уменьшающие количество бактерий и других патогенов, которые люди могут переносить и распространять) в периоды высокого риска или для определенных типов. процедур, говорится в сообщении агентства.

«Мы знаем, что профилактика инфекций и борьба с ними работают, но это не универсальный подход», — сказала Афина Куртис, доктор медицинских наук, заместитель директора по работе с данными в отделе повышения качества здравоохранения CDC. выпускать.

Например, в другом MMWR , выпущенном в унисон с отчетом Vital Signs , исследователи обнаружили, что медицинские центры Департамента по делам ветеранов США снизили количество стафилококковых инфекций на 43 процента в период с 2005 по 2017 год за счет реализации многогранной программы профилактики MRSA. Программа включала скрининг на MRSA, меры предосторожности при контакте и повышенное внимание к гигиене рук и другим стратегиям профилактики инфекций.

В пресс-релизе CDC также упоминается инициатива агентства по борьбе с устойчивостью к антибиотикам, которая поддерживает академических исследователей, которые ищут новые способы защиты пациентов, в частности, от инфекций стафилококка.Эти исследователи изучают инновационные стратегии профилактики инфекций, чтобы остановить распространение многих других патогенов, обнаруженных в медицинских учреждениях.

Наконец, агентство заявило, что ожидает опубликовать дополнительные данные о бремени, которое несет MRSA, во втором отчете Antibiotic Resistance Threats в США , который планируется опубликовать в конце года.

Профилактика и борьба с инфекцией золотистого стафилококка

Как передается золотистый стафилококк ?

с.aureus — это распространенный кожный организм, длительным носителем которого, по оценкам, являются 25% людей. Из-за своего присутствия на коже он может быть основной причиной заражения фармацевтических продуктов из-за неправильного обращения или плохих асептических процессов и протоколов. Он может передаваться разными способами, например, через воздушные капли или аэрозоли, при прямом контакте с зараженными объектами (пища, вода, неодушевленные предметы) или при укусах.

Как можно обнаружить, предотвратить и контролировать Staphylococcus aureus ?

Золотистый стафилококк связан с инфекциями, связанными со здоровьем.Его диагноз основан на выполнении тестов на обнаружение и идентификацию микробов в колониях бактерий. Инфекцию Staphylococcus aureus можно предотвратить и контролировать с помощью:


● Соблюдайте правила гигиены рук

● Гигиенические условия проведения медицинских процедур и правильное применение противомикробных препаратов

● Надлежащие методы контроля окружающей среды, включая регулярный мониторинг воздуха, воды и поверхностей

● Строгая очистка и дезинфекция оборудования и окружающей среды

● В клинических условиях, при необходимости изоляция пациентов

● Тщательный мониторинг пациентов и групп риска

Как можно обнаружить присутствие Staphylococcus aureus в фармацевтических продуктах?


Присутствие таких микроорганизмов, как Staphylococcus aureus , можно определить с помощью процедур микробиологического обнаружения.Компания bioMerieux разработала решения для автоматического обнаружения, такие как SCANRDI и BACT ALERT, которые можно использовать для обнаружения бактерий, дрожжей и плесени в пищевых и фармацевтических продуктах.


Как можно контролировать Staphylococcus aureus в пищевой и фармацевтической промышленности?


Руководства по промышленному контролю (или меры контроля) содержат рекомендации о том, как лучше всего предотвратить инфекцию Staphylococcus aureus и бороться с ней. Следует соблюдать список рекомендаций, содержащихся в руководствах FDA и GMP.


Каковы риски золотистого стафилококка для пациента?


Хотя Staphylococcus aureus обычно безвреден для кожи, попав в кровоток, он может вызвать опасные для жизни заболевания. Золотистый стафилококк является основной причиной сепсиса при попадании в организм через имплантаты, хирургические разрезы и инъекционные лекарства. Определенные штаммы Staphylococcus aureus представляют особую проблему для здравоохранения, поскольку у них развилась устойчивость к антибиотикам.

В результате, фармацевтические системы и системы мониторинга должны быть спроектированы так, чтобы предотвращать и обнаруживать любое загрязнение. Лечебные действия при постоянном заражении кожными организмами, такими как Staphylococcus aureus , обычно включают переподготовку операторов для улучшения асептических методов или дополнительного улучшения процесса, чтобы уменьшить участие человека или контакт.

Как лечить заражение золотистым стафилококком ?


A Staphylococcus aureus обычно лечат соответствующими противомикробными методами, такими как удаление временных медицинских устройств (например, катетеров), если это возможно, и терапевтический мониторинг, чтобы остановить рост бактерий как можно раньше.Также могут применяться антибиотики.

Профилактика инфекций, вызываемых Staphylococcus aureus, с помощью гликопротеиновых вакцин, синтезированных в Escherichia coli | Журнал инфекционных болезней

Аннотация

Справочная информация. Золотистый стафилококк — основная причина поверхностных и инвазивных заболеваний человека, которые часто не поддаются антимикробной терапии. Вакцины могут снизить заболеваемость, смертность и экономические последствия, связанные со стафилококковыми инфекциями.Однако однокомпонентные вакцины против S. aureus не показали эффективности в клинических испытаниях.

Методы. Описана новая гликоинженерная технология для создания многокомпонентной стафилококковой вакцины. Гены, кодирующие биосинтеза капсульного полисахарида (CP) S. aureus , PglB (олигосахарилтрансфераза Campylobacter ) и белок-носитель (детоксифицированный Pseudomonas aeruginosa экзопротеин A или S.aureus α-токсин [Hla]) коэкспрессировались в Escherichia coli . Рекомбинантные белки, N-гликозилированные S. aureus серотипа 5 или 8 CP, были очищены от E. coli.

Результаты. Кролики и мыши, иммунизированные гликопротеиновыми вакцинами, продуцировали антитела, которые были активны in vitro в функциональных анализах . Активные и пассивные стратегии иммунизации, нацеленные на CP, защищают мышей от бактериемии, а вакцины, нацеленные на Hla, защищают от летальной пневмонии.Биоконъюгатная вакцина CP-Hla защищает как от бактериемии, так и от летальной пневмонии, обеспечивая эффективность широкого спектра действия против стафилококковых инвазивных заболеваний.

Выводы. Гликоинженерная технология, посредством которой полисахаридные и белковые антигены ферментативно связаны в простой производственной системе E. coli , имеет широкое применение при разработке вакцин против инкапсулированных микробных патогенов.

Золотистый стафилококк является основной причиной инвазивных инфекций человека, включая бактериемию, эндокардит, пневмонию и раневые инфекции.Метициллин-устойчивые штаммы S. aureus (MRSA) являются эндемичными в больницах, а штаммы MRSA, связанные с сообществами, распространяются по всему миру, что представляет собой серьезную глобальную проблему [1–3]. Существует острая необходимость в вакцине для предотвращения стафилококковой инфекции. Несколько вакцин были протестированы в клинических испытаниях, но конъюгаты капсульного полисахарида (CP), отдельные белковые антигены и моноклональные антитела (mAb) к липотейхоевой кислоте потерпели неудачу на различных стадиях разработки, что подчеркивает необходимость в новых вакцинах с более широкой эффективностью [4-6 ]. Вакцины S. aureus , которые вызывают как гуморальный, так и клеточно-опосредованный иммунный ответ, в настоящее время проходят оценку [7], и как α-токсин (Hla), так и CP являются ключевыми антигенами, которые рассматриваются для включения в многокомпонентную вакцину.

Капсулы серотипа 5 (CP5) или серотипа 8 (CP8) производятся примерно 75% клинических изолятов S. aureus из , и антигены CP имеют решающее значение для выживания в крови инфицированных животных [8, 9]. Капсульные антитела опсонические, опосредуют поглощение и уничтожение стафилококков нейтрофилами человека [8].Hla — это секретируемый порообразующий токсин, к которому чувствительны лимфоциты, макрофаги, альвеолярные эпителиальные клетки, легочный эндотелий и эритроциты [10]. Генетически детоксифицированный белок (Hla h45L ) дефектен по формированию пор, а антитела к Hla h45L нейтрализуют литическую активность нативного Hla [11]. Иммунизация Hla h45L защищает мышей от летальной стафилококковой пневмонии, летального перитонита и кожных инфекций [12–14].

Иммунизация консервативными антигенами стафилококкового белка, гликозилированными CP, может быть элегантной и эффективной стратегией предотвращения S.aureus , ограничивая количество отдельных компонентов вакцины, которые необходимо готовить и очищать индивидуально. Такой подход возможен за счет разработки новой технологии N-связанного гликозилирования Escherichia coli [15, 16], в которой O-антигены переносятся в определенные сайты в белке-носителе с помощью олигосахарилтранферазы PglB [15-17]. В отличие от химически конъюгированных вакцин, биоконъюгированные вакцины гомогенны с определенной молекулярной структурой, а белковые и гликановые компоненты сохраняются в нативных конформациях, что позволяет избежать денатурации основных эпитопов В-клеток [18].Продукт содержит пептид и ковалентно связанные сахарные эпитопы из одного и того же организма, что повышает его эффективность против многочисленных проявлений микробных заболеваний.

Мы приготовили гликоконъюгатные вакцины, состоящие из CP5– Pseudomonas aeruginosa экзопротеина A (Epa), CP8-Epa и CP5-Hla, и оценили их защитную эффективность против бактериемии и летальной пневмонии у мышей. В то время как CP5-Epa и CP8-Epa значительно снижали бактериемию, биоконъюгированная вакцина CP5-Hla защищала как от бактериемии, так и от летальной пневмонии.

МЕТОДЫ

Экспрессия CP5 и CP8 в

E. coli и производство биоконъюгированной вакцины

Штаммы бактерий, плазмидные конструкции, праймеры и подробности приготовления биоконъюгированной вакцины представлены в дополнительных методах. Вкратце, гены из кластера генов антигенов P. aeruginosa O11O (от wzz до wbpM ) были амплифицированы с помощью полимеразной цепной реакции и клонированы в плазмиде с S.aureus cap5HIJK или cap8HIJK . Рекомбинантные плазмиды были введены в штаммов E. coli с мутациями в экспрессии липополисахаридов и энтеробактериальных антигенов, что привело к экспрессии CP5 и CP8 в E. coli . Epa был модифицирован для детоксикации [19], замены N-концевого сигнального пептида сигнальным пептидом E. coli DsbA, добавления 2 консенсусных последовательностей гликозилирования [20] и вставки C-концевой гексагистидиновой метки.Экспрессионная плазмида для рекомбинантной экспрессии Hla h45L с 1 гликозитом и сигнальной последовательностью для периплазматической локализации была сконструирована на основе опубликованной [11, 21] и детоксифицированной версии S. aureus Hla.

Плазмиды, содержащие PglB и Epa или Hla, трансформировали в клеток E. coli , экспрессирующих СР5 или СР8. E. coli , содержащий рекомбинантные плазмиды, выращивали до логарифмической фазы, и экспрессию PglB и либо Epa, либо Hla индуцировали добавлением 1 мМ IPTG и 0.2% арабиноза. После инкубации в течение ночи при 37 ° C были собраны E. coli , и биоконъюгаты были экстрагированы осмотическим шоком или гомогенизацией под высоким давлением [15, 16]. Биоконъюгированные вакцины очищали с помощью аффинности иммобилизованного металла, анионного обмена, гидроксиапатита и эксклюзионной хроматографии, как подробно описано в дополнительных методах.

Бактериальные культуры

Штаммы S. aureus Reynolds (CP5), Reynolds (CP8) и Newman были описаны ранее [9, 22]. Штаммы S. aureus LAC и ST80 представляют собой изоляты MRSA, ассоциированные с сообществом [23, 24]. Штаммы NRS 382 (USA100) и NRS 383 (USA200) представляют собой больничные штаммы MRSA, полученные в рамках программы Network on Antimicrobial Resistance in Staphylococcus aureus , которая поддерживается Национальным институтом аллергии и инфекционных заболеваний Национальных институтов здравоохранения. (договор HHSN272200700055C) . Для исследований бактериемии и опсонофагоцитарного уничтожения (OPK) S.aureus культивировали в течение 24 часов при 37 ° C на колумбийском агаре (Difco Laboratories) с добавлением 2% NaCl [9]. Для исследований пневмонии стафилококки собирали из культур триптического соевого бульона (Difco), выращенных до логарифмической фазы роста, как описано в другом месте [25].

Анализы OPK

Кровь человека была взята у здоровых добровольцев, которые предоставили письменное информированное согласие в соответствии с установленными руководящими принципами. Стандартный анализ OPK (0.Объем 5 мл) проводили с нейтрофилами человека, как описано [26]. Тест OPK на основе микротитра был основан на методе, описанном Burton и Nahm [27]. Клетки HL-60 (ATCC) использовали после небольшого пассажа (<3 месяцев) и поддерживали в среде Roswell Park Memorial Institute 1640, содержащей L-глутамин (Mediatech), с добавлением 10% термоинактивированной фетальной телячьей сыворотки (HyClone), 100 Ед. / мл пенициллина, 100 мкг / мл стрептомицина и 0,25 мкг / мл амфотерицина (Mediatech). Клетки были дифференцированы в гранулоциты с помощью N, N-диметилформамида, как описано в другом месте [27], и их фенотип был подтвержден с помощью проточной цитометрии [27].Анализ проводили в 96-луночных планшетах, и каждая лунка (объем 80 мкл) содержала 4 × 10 5 клеток HL60, 10 3 колониеобразующих единиц (КОЕ) S. aureus , кроличий иммуноглобулин G (IgG) или сыворотка мыши и 1% сыворотка морской свинки (Cedarlane) в качестве источника комплемента (C ‘). После инкубации в течение 2 часов при 37 ° C при встряхивании клетки HL60 лизировали добавлением 20 мкл 1% Triton X-100. Образцы помещали на чашки в двух экземплярах, и эффект уничтожения определялся как уменьшение КОЕ на миллилитр через 2 часа по сравнению с концентрацией в момент времени 0.

Анализ нейтрализации Hla

Hla (4 HU / мл; Toxin Technology) инкубировали в течение 1 часа с серийными 2-кратными разведениями сыворотки от иммунизированных мышей. Добавляли равный объем промытых 2% эритроцитов кролика и инкубировали в течение 60 минут. Образцы центрифугировали при 200 × g в течение 10 минут и измеряли OD 545 нм супернатантов. Процент гемолиза каждого образца сравнивали с таковым для эритроцитов, лизированных 4 HU Hla.Титр 50% ингибирования рассчитывали с использованием нелинейной регрессии для сигмоидальных кривых с переменным наклоном (с помощью программного обеспечения Prism 4).

Исследования инфекций животных

Исследования на животных проводились в соответствии с руководящими принципами Институционального комитета по уходу и использованию животных. Мышей Swiss-Webster (приобретенных у Taconic Farms или Charles River Laboratories) вакцинировали в дни 0, 14 и 28 подкожным путем. Контрольные животные получали нерелевантную биоконъюгатную вакцину Shigella O-антиген (O1-Epa или 2a-Epa).Конъюгаты ЕРА были приготовлены с Альгидрогелем, а CP5-Hla составили с Адъю-Фос для получения конечной концентрации Al 3+ 0,06%.

Образцы крови брали у мышей перед каждой вакцинацией и перед бактериальным заражением. Сыворотки, разведенные 1: 100, тестировали с помощью иммуноферментного анализа (ELISA) на микротитровальных планшетах, покрытых очищенными CP (4 мкг / мл), связанными с поли-L-лизином [28] или нативным Hla (1 мкг / мл). Через две недели после последней вакцинации мышам внутрибрюшинно вводили S.aureus , а количественные культуры крови были выполнены через 2 часа после контрольного заражения [9]. Потерю веса и почечную инфекцию оценивали на 4-й день, а данные культивирования анализировали с помощью теста Манна-Уитни U . Мыши были инокулированы интраназальным путем для модели летальной пневмонии [25], и данные о выживаемости были проанализированы с использованием лог-рангового теста (с помощью программного обеспечения Prism 4).

Для пассивной иммунизации против бактериемии мышам внутривенно вводили кроличий IgG (300 мкг – 1 мг) за 24 часа до контрольного заражения.Образцы крови для культивирования собирали у мышей через 1-2 часа после бактериального заражения. Для пассивной иммунизации против летальной пневмонии мышам внутрибрюшинно вводили 1 мг кроличьего IgG за 24 часа (или 24 часа и 4 часа) до бактериальной инокуляции. Для исследований истощения Т-лимфоцитов активно иммунизированным мышам внутрибрюшинно вводили 500 мкг крысиного антитела против CD4 мыши (клон GK 1.5) или крысиного антитела против CD8a мыши (клон 53-6,7) за 72 часа и 24 часа до интраназального заражения. с с.aureus Ньюман. Истощение клеток CD4 + или CP8 + подтверждали проточно-цитометрическим анализом лимфоцитов селезенки.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Синтез

CP S. aureus в E. coli

CP S. aureus собираются на липиде-носителе бактериальной мембраны ундекапренилпирофосфат консервативным путем, который имеет общую гомологию с зависимым от полимеразы путем синтеза O полисахарида у грамотрицательных бактерий [29].Сборка O-антигена инициируется переносом фосфата сахара от донора дифосфата уридина на ундекапренилфосфат. Связанный с липидами О-антиген собирается на цитоплазматической стороне внутренней мембраны за счет последовательного действия различных гликозилтрансфераз. Затем гликолипид переворачивается в периплазматическое пространство и полимеризуется. Путем замены O-антигена лигазы WaaL на олигосахарилтрансферазу PglB полимеризованный O-антиген может быть перенесен на выбранный белок-носитель, а не на липидное ядро ​​A [16, 30].

Для синтеза S. aureus CP5 или CP8 в штамме E. coli , дефицитном по продукции O-антигена, мы сконструировали химерные генетические кластеры на основе плазмид, содержащие гены с известной функцией из S. aureus и P. aeruginosa. (рисунок 1 A ). Кластеры генов были разработаны на основе аналогичных структур CP S. aureus и антигена P. aeruginosa O11, поскольку каждый из них содержит дисахарид FucNAc как часть повторяющейся единицы трисахарида [31, 32].Было предсказано, что в сочетании с генами биосинтеза моносахаридов E. coli ферменты, кодируемые этими генами, будут синтезировать ундекапренилпирофосфат-связанный полимер CP5 или CP8, состоящий из повторяющихся трисахаридных единиц (рис. 1 B ). Рекомбинантные плазмиды трансформировали в штамм E. coli с делецией в O-антиген-лигазе WaaL, и бактериальные гликолипиды экстрагировали. Полисахариды были высвобождены из липида-носителя путем мягкой кислотной обработки, помечены 2-аминобензамидом (2-AB) и разделены с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии.Отдельные повторяющиеся субъединицы CP5 (фиг.2 A ) и CP8 (фиг.2 B ) были собраны и охарактеризованы с использованием MALDI-Q TOF / TOF-анализа. Основной ион, наблюдаемый при отношении массы к заряду 794,3, подвергали тандемной масс-спектрометрии. Ряд фрагментных ионов соответствовал ожидаемым ионам Na-аддукта одиночных повторяющихся единиц CP5 и CP8, содержащих 2-AB на восстанавливающем конце (рис. 2 C и 2 D ). Чтобы показать, что субъединицы CP5 и CP8 были полимеризованы и перенесены в липид A, протеиназа K переваривала экстракты целых клеток из E.coli , экспрессирующие WaaL, получали и разделяли электрофорезом в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE). Сконструированные клеток E. coli синтезировали полимер CP5 или CP8, визуализированный окрашиванием серебром и распознаваемый на вестерн-блоттинге с S. aureus CP5- или CP8-специфической антисывороткой, соответственно (Рисунок 2 E и 2 F ) .

Рисунок 1.

Синтез капсульных полисахаридов типа 5 (CP5) и 8 (CP8) Staphylococcus aureus в Escherichia coli.Созданы кластеры искусственных генов A , которые кодируют ферменты, ответственные за экспрессию CP5 или CP8 в E. coli . Они включают гены, клонированные из локуса S. aureus cap5 или cap8 (синий) и локуса Pseudomonas aeruginosa O11 LPS (красный). B , Биосинтез полимера CP5 или CP8, демонстрирующий ферментативную сборку, транспорт и полимеризацию активированных дифосфатом уридина предшественников сахара, опосредованных ферментами из S.aureus (синий), P. aeruginosa (красный) и E. coli (черный). Ферменты, выделенные жирным шрифтом, использовали для синтеза и сборки полимеров CP5 и CP8 в E. coli .

Рисунок 1.

Синтез капсульных полисахаридов типа 5 (CP5) и 8 (CP8) Staphylococcus aureus в Escherichia coli. Созданы кластеры искусственных генов A , которые кодируют ферменты, ответственные за экспрессию CP5 или CP8 в E. coli .Они включают гены, клонированные из локуса S. aureus cap5 или cap8 (синий) и локуса Pseudomonas aeruginosa O11 LPS (красный). B , Биосинтез полимера CP5 или CP8, демонстрирующий ферментативную сборку, транспорт и полимеризацию предшественников сахара, активированных дифосфатом уридина, опосредованные ферментами из S. aureus (синий), P. aeruginosa (красный) и E. coli (черный). Ферменты, выделенные жирным шрифтом, были использованы для синтеза и сборки полимеров CP5 и CP8 в E.coli .

Рисунок 2.

Производство Staphylococcus aureus типа 5 (CP5) и 8 капсульных полисахаридов (CP8) в Escherichia coli. Показаны структуры A и B , структуры повторяющихся единиц S. aureus CP5 и CP8. Гликолипиды экстрагировали из рекомбинантной E. coli и метили 2-аминобензамидом (2-AB) после высвобождения кислоты из липидного носителя; таким образом, восстанавливающий конец повторяющихся субъединиц CP5 и CP8 несет 2-AB.Был проведен тандемный масс-спектрометрический анализ MALDI-TOF / TOF пиков элюирования с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с отношением массы к заряду 794,3. Паттерны фрагментации CP5 ( C ) и CP8 ( D ) показаны стрелками, указывающими на соответствующие моносахариды. Обработанные протеиназой К лизаты целых клеток из клеток E. coli , экспрессирующих CP S. aureus , получали и разделяли электрофорезом в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE). E и F , полимеры CP5 ( E ) и полимеры CP8 ( F ) визуализировали окрашиванием серебром и вестерн-блоттингом с антителами к CP5 или CP8. Очищенные биоконъюгаты из E. coli , экспрессирующие CP5-Epa ( G ), CP8-Epa ( H ) или CP5-Hla ( I ), разделяли с помощью SDS-PAGE и окрашивали кумасси синим (CB ). После переноса на нитроцеллюлозу биоконъюгаты определяли по их реакционной способности с сывороточными антителами к экзопротеину A Pseudomonas aeruginosa (Epa), CP5, CP8 или α-токсину (Hla).

Рис. 2.

Производство Staphylococcus aureus типа 5 (CP5) и 8 капсульных полисахаридов (CP8) в Escherichia coli. Показаны структуры A и B , структуры повторяющихся единиц S. aureus CP5 и CP8. Гликолипиды экстрагировали из рекомбинантной E. coli и метили 2-аминобензамидом (2-AB) после высвобождения кислоты из липидного носителя; таким образом, восстанавливающий конец повторяющихся субъединиц CP5 и CP8 несет 2-AB. MALDI-TOF / TOF тандемный масс-спектрометрический анализ пиков элюирования с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с отношением массы к заряду 794.3 были выполнены. Паттерны фрагментации CP5 ( C ) и CP8 ( D ) показаны стрелками, указывающими на соответствующие моносахариды. Обработанные протеиназой К лизаты целых клеток из клеток E. coli , экспрессирующих CP S. aureus , получали и разделяли электрофорезом в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE). E и F , полимеры CP5 ( E ) и полимеры CP8 ( F ) визуализировали окрашиванием серебром и вестерн-блоттингом с антителами к CP5 или CP8.Очищенные биоконъюгаты из E. coli , экспрессирующие CP5-Epa ( G ), CP8-Epa ( H ) или CP5-Hla ( I ), разделяли с помощью SDS-PAGE и окрашивали кумасси синим (CB ). После переноса на нитроцеллюлозу биоконъюгаты определяли по их реакционной способности с сывороточными антителами к экзопротеину A Pseudomonas aeruginosa (Epa), CP5, CP8 или α-токсину (Hla).

Ферментативный синтез

биоконъюгированных вакцин S. aureus в E.кишечная палочка

Для получения вакцин S. aureus в E. coli липидно-связанные CP экспрессировали в присутствии антигена-носителя белка и PglB. Это позволило перенести полисахарид от липида-носителя к остаткам Asn в пределах консенсусной последовательности D-X-N-X-S / T [20] белкового антигена. Клетки E. coli , экспрессирующие кластеры генов CP5 или CP8, Epa, содержащие 2 консенсусные последовательности гликозилирования, и PglB. Вызывали экспрессию Epa и PglB, и гликозилированный Epa экстрагировали и очищали.SDS-PAGE выявил лестницу полос от 90 до 170 кДа, которые реагировали с антителами к Epa и CP5 (фиг.2 G ) или Epa и CP8 (фиг.2 H ), что указывает на вариабельное гликозилирование Epa с S. aureus антигенов CP.

Система вакцины второго поколения была разработана для гликозилирования антигена стафилококкового белка (Hla) в E. coli . Hla h45 L , содержащий консенсусную последовательность гликозилирования по аминокислоте 130, была сконструирована. E.coli , несущие гены, кодирующие биосинтез CP5, Hla , h45L и PglB. Экспрессия Hla , h45L и PglB была индуцирована, и CP5-Hla h45L был очищен. Гликоконъюгат CP5-Hla h45L , подвергнутый SDS-PAGE, выявил лестницу полос от 55 до 70 кДа, которые реагировали с антителами к Hla и CP5 (фигура 2 I ). Это открытие подтверждает, что Hla h45L может быть гликозилирован CP5.

Иммуногенность биоконъюгатных вакцин у мышей

Мышей иммунизировали CP5-Epa, CP8-Epa или CP5-Hla h45L .Вакцина CP5-Epa показала оптимальную иммуногенность при 0,2–1 мкг CP5 / мышь (фиг. 3 A ), а CP8-Epa продемонстрировала хорошую иммуногенность при 0,2 мкг CP8 (фиг. 3 B ). CP5-Hla h45L был иммуногенным при концентрациях CP5 0,2 и 2 мкг / мышь (фиг. 3 C ). Поскольку оптимальная доза Hla h45L составляла 20 мкг / мышь (рис. 3 D ), для дальнейшей оценки была выбрана вакцина 2 мкг CP5–20 мкг Hla h45L .

Рисунок 3.

Staphylococcus aureus гликоконъюгатные вакцины были иммуногенными для мышей. Уровни антиген-специфических антител в сыворотке мышей, иммунизированных фосфатно-солевым буфером (PBS), Hla или составами биоконъюгированной вакцины, определяли с помощью иммуноферментного анализа (ELISA) при разведении сыворотки 1: 100. A , Уровни антител против CP5 у контрольных мышей или мышей, получавших возрастающие дозы биоконъюгированных вакцин, конъюгированных с Epa. B , Уровни антител к CP8 у мышей, иммунизированных CP8-Epa или 2a-Epa. C , Уровни антител к CP5 у контрольных мышей, мышей, получавших CP5-Hla, и мышей, получавших только Hla. D , Уровни антител к Hla у контрольных мышей, мышей, получавших CP5-Hla, и мышей, получавших только Hla. Индекс ELISA рассчитывается путем деления OD при 405 нм тестируемой сыворотки (разведенной 1: 100) на OD при 405 нм контрольной высокотитровой сыворотки, которую разбавляют и включают в каждый анализ.

Рисунок 3.

Staphylococcus aureus гликоконъюгатные вакцины были иммуногенными для мышей.Уровни антиген-специфических антител в сыворотке мышей, иммунизированных фосфатно-солевым буфером (PBS), Hla или составами биоконъюгированной вакцины, определяли с помощью иммуноферментного анализа (ELISA) при разведении сыворотки 1: 100. A , Уровни антител против CP5 у контрольных мышей или мышей, получавших возрастающие дозы биоконъюгированных вакцин, конъюгированных с Epa. B , Уровни антител к CP8 у мышей, иммунизированных CP8-Epa или 2a-Epa. C , Уровни антител к CP5 у контрольных мышей, мышей, получавших CP5-Hla, и мышей, получавших только Hla. D , Уровни антител к Hla у контрольных мышей, мышей, получавших CP5-Hla, и мышей, получавших только Hla. Индекс ELISA рассчитывается путем деления OD при 405 нм тестируемой сыворотки (разведенной 1: 100) на OD при 405 нм контрольной высокотитровой сыворотки, которую разбавляют и включают в каждый анализ.

Биоконъюгатные вакцины вырабатывают функциональные антитела

В присутствии фагоцитирующих клеток HL60 и сывороточного комплемента кроличий IgG, повышенный до CP5-Epa или CP5-Hla h45L , был опсоническим для CP5 + S.aureus штаммов Рейнольдса и Ньюмана (рис. 4 A ). Концентрация IgG ≥1 мкг / мл приводила к гибели ≥50% стафилококкового инокулята. Аналогичным образом, сыворотка мышей, иммунизированных CP5-Epa или CP5-Hla h45L , показала активность OPK против CP5-продуцирующего S. aureus (дополнительная фигура 1 A ). Кроличьи антитела к CP5-Epa также были опсоническими для штаммов S. aureus Reynolds (CP5) и Newman, когда нейтрофилы человека были включены в качестве источника фагоцитарных клеток (фиг. 4 B и 4 C ).Штаммы MRSA USA100 и USA200 (оба CP5 + ) также были убиты в присутствии антител CP5-Epa, человеческих нейтрофилов и сывороточного комплемента (Фиг.4 D и 4 E ). Антитела СР5 не опсонические для Рейнольдса (СР8) (рис. 4F). Штамм Рейнольдса (CP ) был убит нейтрофилами и комплементом без добавления антител (фигура 4 F ). IgG кролика CP8-Epa был опсоническим для штамма S. aureus Reynolds (CP8) и штамма MRSA ST80 (фиг. 4 G ) в концентрациях ≥1 мкг / мл.Аналогичным образом, мышиная антисыворотка против CP8-Epa показала хорошую опсоническую активность (дополнительная фигура 1 B ) против штаммов CP8 + S. aureus .

Рисунок 4.

Staphylococcus aureus гликоконъюгатные вакцины выявляли функциональные антитела. A , кроличий иммуноглобулин G (IgG; 10, 1 или 0,1 мкг / мл) к CP5-Epa или CP5-Hla h45L был опсоническим для серотипа 5 S. aureus штаммов Рейнольдса (CP5) и Ньюмана в Анализы опсонофагоцитарного уничтожения (OPK) HL-60 (n = 3), тогда как антитела к Hla и Shigella O1-Epa не были опсоническими. B – E , анализы OPK, проведенные с нейтрофилами человека, показали, что кроличьи антитела к CP5-Epa были опсоническими для Рейнольдса (CP5; B ), Ньюмана ( C ), USA100 ( D ) и USA200 (). E ) при концентрациях от 1 мкг / мл. Кроличьи антитела к контрольной вакцине биоконъюгата Shigella O1-Epa не обладали опсонической активностью. Анализы OPK выполняли, как описано (26), с CP5-Epa (показаны концентрации в мкг / мл), человеческими полиморфно-ядерными лейкоцитами (PMN) и сывороткой морской свинки в качестве источника комплемента (C ‘). F . Специфичность анализа была продемонстрирована неспособностью CP5-Epa IgG опсонизировать штамм серотипа 8 (Reynolds [CP8]) для уничтожения фагоцитов. Негативные по капсуле штаммы Рейнольдса (CP ) были убиты только PMN + C ‘(с капсульными антителами или без них). G , кроличий IgG (≥1 мкг / мл) к CP8-Epa был опсоническим для серотипа 8, штамма S. aureus Reynolds (CP8) и метициллин-устойчивого штамма S. aureus ST80. Убийство бактерий не наблюдалось в образцах без антител или с Shigella 2a-Epa IgG. H , Сыворотка мышей (n = 7–16), иммунизированных 20 мкг Hla h45L или 2 мкг CP5-20 мкг Hla h45L , нейтрализовала литическую активность Hla по отношению к эритроцитам кролика. Процент гемолиза рассчитывали по сравнению со 100% лизисом эритроцитов 4 ед / мл нативного Hla. Сыворотка мышей, иммунизированных Hla h45L , показала большую нейтрализующую активность in vitro, чем сыворотка мышей, которым вводили CP5-Hla h45L . Отсутствие перекрытия в 95% доверительных интервалах между титрами лизиса 50% указывает на различия, значимые при значении P <.05. Столбцы представляют собой стандартные ошибки среднего (SEM). Аббревиатура: КОЕ, колониеобразующие единицы.

Рисунок 4.

Staphylococcus aureus гликоконъюгатные вакцины вырабатывали функциональные антитела. A , кроличий иммуноглобулин G (IgG; 10, 1 или 0,1 мкг / мл) к CP5-Epa или CP5-Hla h45L был опсоническим для серотипа 5 S. aureus штаммов Рейнольдса (CP5) и Ньюмана в Анализы опсонофагоцитарного уничтожения (OPK) HL-60 (n = 3), тогда как антитела к Hla и Shigella O1-Epa не были опсоническими. B – E , анализы OPK, проведенные с нейтрофилами человека, показали, что кроличьи антитела к CP5-Epa были опсоническими для Рейнольдса (CP5; B ), Ньюмана ( C ), USA100 ( D ) и USA200 (). E ) при концентрациях от 1 мкг / мл. Кроличьи антитела к контрольной вакцине биоконъюгата Shigella O1-Epa не обладали опсонической активностью. Анализы OPK выполняли, как описано (26), с CP5-Epa (показаны концентрации в мкг / мл), человеческими полиморфно-ядерными лейкоцитами (PMN) и сывороткой морской свинки в качестве источника комплемента (C ‘). F . Специфичность анализа была продемонстрирована неспособностью CP5-Epa IgG опсонизировать штамм серотипа 8 (Reynolds [CP8]) для уничтожения фагоцитов. Негативные по капсуле штаммы Рейнольдса (CP ) были убиты только PMN + C ‘(с капсульными антителами или без них). G , кроличий IgG (≥1 мкг / мл) к CP8-Epa был опсоническим для серотипа 8, штамма S. aureus Reynolds (CP8) и метициллин-устойчивого штамма S. aureus ST80. Убийство бактерий не наблюдалось в образцах без антител или с Shigella 2a-Epa IgG. H , Сыворотка мышей (n = 7–16), иммунизированных 20 мкг Hla h45L или 2 мкг CP5-20 мкг Hla h45L , нейтрализовала литическую активность Hla по отношению к эритроцитам кролика. Процент гемолиза рассчитывали по сравнению со 100% лизисом эритроцитов 4 ед / мл нативного Hla. Сыворотка мышей, иммунизированных Hla h45L , показала большую нейтрализующую активность in vitro, чем сыворотка мышей, которым вводили CP5-Hla h45L . Отсутствие перекрытия в 95% доверительных интервалах между титрами лизиса 50% указывает на различия, значимые при значении P <.05. Столбцы представляют собой стандартные ошибки среднего (SEM). Аббревиатура: КОЕ, колониеобразующие единицы.

Функциональные антитела к Hla нейтрализуют его литическую активность. Как показано на Фигуре 4 H , мышиные сыворотки против Hla h45L или CP5-Hla h45L нейтрализовали in vitro литическую активность нативного Hla. Мыши, иммунизированные 20 мкг Hla h45L , показали более высокие нейтрализующие титры, чем мыши, которым вводили 2 мкг CP5-20 мкг Hla h45L .

Биоконъюгатные вакцины защищают мышей от

S.aureus Бактериемия

Мышей, вакцинированных вакциной CP5-Epa или Shigella O1-Epa, внутрибрюшинно заражали S. aureus Reynolds (CP5). Мыши, получавшие CP5-Epa, были защищены от бактериемии (фиг. 5 A ), образования почечного абсцесса (фиг. 5 B ) и потери веса (фиг. 5 C ) по сравнению с мышами, получавшими нерелевантную вакцину Shigella . Точно так же животные, иммунизированные CP8-Epa и зараженные Reynolds (CP8), показали значительное снижение бактериемии (фигура 5 D ).

Рисунок 5.

Активная иммунизация вакцинами Staphylococcus aureus гликоконъюгата защищает мышей от бактериемии, потери веса и абсцессов почек. A – C , Мыши, иммунизированные на 0, 14 и 28 дни CP5-Epa и зараженные внутрибрюшинным путем приблизительно 10 7 колониеобразующих единиц (КОЕ) S. aureus Reynolds (CP5), имели меньшее количество бактерий, извлеченных из крови ( A ; P =.0029) и почек ( B ; P <0,0001) и показали снижение потери веса ( C ; P = 0,005) по сравнению с мышами, иммунизированными Shigella O1-Epa. D , Мыши, иммунизированные 0,2 мкг CP8-Epa и зараженные 3,9 × 10 7 КОЕ Рейнольдса (CP8), показали снижение бактериемии по сравнению с контрольными мышами ( P = 0,0015). E и F, Мыши, иммунизированные 0,2 мкг CP5-20 мкг Hla h45L , были защищены от бактериемии ( E ) и потери веса ( F ), вызванной контрольным заражением приблизительно 10 7 КОЕ штаммом Рейнольдса (CP5).Горизонтальные линии представляют собой групповые медианы. Статистический анализ проводился с помощью теста Манна – Уитни U (* P <0,05, ** P <0,01 и *** P <0 0001). G , обратная корреляция ( P < .001 по непараметрическому анализу Спирмена) между уровнями мышиных антител против CP5 и уровнями бактериемии у мышей, активно иммунизированных CP5-Hla h45 L, 2a-Epa или буфером. Сыворотку мышей, полученную за 1 день до бактериального заражения, разводили 1: 100 и тестировали с помощью CP5-специфичного иммуноферментного анализа.Мышам внутрибрюшинно вводили 1 × 10 7 КОЕ S. aureus Reynolds, и через 2 часа проводили количественные культуры крови. Каждая точка представляет собой образец от 1 мыши, а нижний предел обнаружения уровней бактериемии колеблется от 5 до 20 КОЕ / мл.

Рисунок 5.

Активная иммунизация вакцинами Staphylococcus aureus гликоконъюгата защищает мышей от бактериемии, потери веса и абсцессов почек. A – C , Мыши, иммунизированные на 0, 14 и 28 дни CP5-Epa и зараженные внутрибрюшинным путем примерно 10 7 колониеобразующих единиц (КОЕ) из S.aureus Рейнольдс (CP5) имел меньше бактерий, извлеченных из крови ( A ; P = 0,0029) и почек ( B ; P <0,0001) и показал снижение потери веса ( C ; ). P = 0,005) по сравнению с мышами, иммунизированными Shigella O1-Epa. D , Мыши, иммунизированные 0,2 мкг CP8-Epa и зараженные 3,9 × 10 7 КОЕ Рейнольдса (CP8), показали снижение бактериемии по сравнению с контрольными мышами ( P = 0,0015). E и F, Мыши, иммунизированные 0,2 мкг CP5-20 мкг Hla h45L , были защищены от бактериемии ( E ) и потери веса ( F ), вызванной контрольным заражением приблизительно 10 7 КОЕ штаммом Рейнольдса (CP5). Горизонтальные линии представляют собой групповые медианы. Статистический анализ проводился с помощью теста Манна – Уитни U (* P <0,05, ** P <0,01 и *** P <0 0001). G , обратная корреляция ( P <.001 непараметрическим анализом Спирмена) между уровнями мышиных антител против CP5 и уровнями бактериемии у мышей, активно иммунизированных CP5-Hla h45 L, 2a-Epa или буфером. Сыворотку мышей, полученную за 1 день до бактериального заражения, разводили 1: 100 и тестировали с помощью CP5-специфичного иммуноферментного анализа. Мышам внутрибрюшинно вводили 1 × 10 7 КОЕ S. aureus Reynolds, и через 2 часа проводили количественные культуры крови. Каждая точка представляет собой образец от 1 мыши, а нижний предел обнаружения уровней бактериемии колеблется от 5 до 20 КОЕ / мл.

Биоконъюгированная вакцина второго поколения содержала стафилококковый анатоксин (Hla h45L ), гликозилированный CP5. CP5-Hla h45L защищал от бактериемии (фиг. 5 E ) и связанной с ней потери веса (фиг. 5 F ), вызванной контрольным заражением Рейнольдсом (CP5). Обнаружена обратная корреляция между уровнями антител к CP5 и уровнями бактериемии у отдельных мышей (фиг. 5 G ), подтверждающая, что защита опосредована вакцино-индуцированными антителами .

CP5-Hla

h45L защищает от летальной пневмонии, вызванной CP5 + и CP8 + S. aureus .

Мышей вакцинировали Hla h45L , CP5-Hla h45L , CP5-Epa или Shigella 2a-Epa и интраназально заражали штаммом Newman CP5 + . Мыши, иммунизированные Hla h45L или CP5-Hla h45L , были защищены от летальной пневмонии. Антитела против CP5 не опосредуют защиту, поскольку мыши, вакцинированные CP5-Epa, погибают от инфекции, как и мыши, которым вводили Shigella 2a-Epa (фиг. 6 A ).Вакцины Hla h45L и CP5-Hla h45L также защищали от летальной пневмонии, вызванной штаммом CP USA300 LAC (рис. 6 B ) и штаммом CP8 + MRSA ST80 (рис. 6 C ). Несмотря на то, что Hla h45L вызывал более высокий нейтрализующий ответ антител на Hla, чем CP5-Hla h45L (фиг. 4 H ), защита от пневмонии, вызванная двумя вакцинами, была эквивалентной. Таким образом, гликозилирование CP5 S.aureus Hla усилил защитный эффект биоконъюгированной вакцины, так что он защищал мышей как от бактериемии (рис. 5 E ), так и от летальной пневмонии (рис. 6 A – C ).

Рисунок 6.

Иммунизация CP5-Hla h45L защищала мышей от летальной пневмонии, спровоцированной различными изолятами Staphylococcus aureus . A – C , Мыши, иммунизированные 2 мкг CP5-20 мкг Hla h45L или 20 мкг Hla h45L , были защищены от летальной пневмонии в результате интраназального заражения 1.4 × 10 9 колониеобразующих единиц (КОЕ) S. aureus Newman ( A ; n = 15–18), 1,6 × 10 9 КОЕ LAC ( B ; n = 8) , или 6,0 × 10 8 КОЕ ST80 (C; n = 9). D . Мышей иммунизировали биоконъюгированными вакцинами в дни 0, 14 и 28. Мышам вводили моноклональные антитела к CD4 или CD8a за 72 часа и 24 часа до заражения S. aureus Newman. Контрольным животным давали забуференный фосфатом физиологический раствор (PBS).CP5-Hla h45L –иммунизированные мыши (с истощением Т-клеток или без него) показали аналогичные кривые выживаемости, тогда как мыши, иммунизированные биоконъюгатом Shigella 2a-EPA, погибли в течение 24 часов после бактериального заражения. Данные были проанализированы с помощью лог-рангового теста.

Рисунок 6.

Иммунизация CP5-Hla h45L защищала мышей от летальной пневмонии, спровоцированной различными изолятами Staphylococcus aureus . A – C , Мыши, иммунизированные 2 мкг CP5-20 мкг Hla h45L или 20 мкг Hla h45L , были защищены от летальной пневмонии в результате интраназального заражения 1.4 × 10 9 колониеобразующих единиц (КОЕ) S. aureus Newman ( A ; n = 15–18), 1,6 × 10 9 КОЕ LAC ( B ; n = 8) , или 6,0 × 10 8 КОЕ ST80 (C; n = 9). D . Мышей иммунизировали биоконъюгированными вакцинами в дни 0, 14 и 28. Мышам вводили моноклональные антитела к CD4 или CD8a за 72 часа и 24 часа до заражения S. aureus Newman. Контрольным животным давали забуференный фосфатом физиологический раствор (PBS).CP5-Hla h45L –иммунизированные мыши (с истощением Т-клеток или без него) показали аналогичные кривые выживаемости, тогда как мыши, иммунизированные биоконъюгатом Shigella 2a-EPA, погибли в течение 24 часов после бактериального заражения. Данные были проанализированы с помощью лог-рангового теста.

Т-клетки не критичны для CP5-Hla

h45L –Средняя защита от летальной пневмонии

Наши эксперименты по пассивной иммунизации (описанные ниже) и предыдущие отчеты [13, 33] предполагают, что только антитела Hla защищают от S.aureus летальная пневмония. Чтобы выяснить возможную роль Т-клеток в иммунитете к стафилококковой пневмонии, мы вакцинировали мышей CP5-Hla h45L или Shigella 2a-Epa. Животным давали 500 мкг крысиного антитела против CD4 мыши (клон GK 1.5) или крысиного антитела против CD8a мыши (клон 53-6.7) за 72 часа и 24 часа до контрольного заражения S. aureus Newman. Контрольным мышам давали забуференный фосфатом физиологический раствор. Истощение CD4 + или CP8 + Т-клеток было подтверждено с помощью проточного цитометрического анализа спленоцитов обработанных животных.Контрольные мыши, иммунизированные CP5-Hla h45L , и мыши, подвергшиеся истощению Т-клеток, показали аналогичную выживаемость в модели летальной пневмонии, тогда как мыши, вакцинированные Shigella 2a-Epa, скончались от инфекции (фиг. 6 D ). Эти результаты показывают, что Т-клетки не являются критическими для CP5-Hla h45L — опосредованной защиты от смертельной пневмонии S. aureus .

Антитела к биоконъюгатным вакцинам, защищенным от бактериемии и летальной пневмонии

За день до внутрибрюшинного введения S.aureus , мышей пассивно иммунизировали внутривенно кроличьим IgG к CP5-Epa, CP8-Epa или CP5-Hla h45L . По сравнению с антителами Shigella O1-Epa, антитела CP5-Epa были защитными против бактериемии, индуцированной Рейнольдсом (CP5; фигура 7 A ) и штаммом MRSA USA200 (фигура 7 B ). Точно так же бактериемия Рейнольдса (CP8) была значительно уменьшена за счет антител к CP8-Epa (фиг. 7 C ). Антитела к CP5-Hla h45L снижали бактериемию, индуцированную штаммом MRSA USA100 (фигура 7 D ), Newman (фигура 7 E ) и Рейнольдса (CP5; фигура 7 F ).Защита была специфичной для CP, поскольку антитела к CP5-Epa или CP5-Hla h45L уменьшали бактериемию, тогда как антитела к S. aureus Hla h45L или Shigella 2a-Epa не обеспечивали защиты (фиг. 7 F ).

Рисунок 7.

Пассивная иммунизация кроличьим иммуноглобулином G (IgG), специфичным для биоконъюгированных вакцин Staphylococcus aureus , защищала мышей от бактериемии и летальной пневмонии. A и B , Мышам вводили CP5-Epa IgG и внутрибрюшинно вводили 6 × 10 6 колониеобразующих единиц (КОЕ) S.aureus Reynolds (CP5; A ) или 7 × 10 7 КОЕ USA200 ( B ) выявило значительно меньше бактерий, выделенных из крови через 2 часа после заражения, по сравнению с мышами, которым вводили Shigella O1-Epa IgG. C . Мыши, получавшие CP8-Epa IgG, были защищены от бактериемии, индуцированной 4 × 10 7 КОЕ S. aureus Reynolds (CP8). D и E . Мыши, которым вводили CP5-Hla IgG, показали снижение бактериемии, спровоцированной S.aureus USA100 (8 × 10 7 КОЕ на мышь; D ) или Newman (9 × 10 7 КОЕ / мышь; E ). F , Мыши, пассивно иммунизированные 300 мкг CP5-Epa или CP5-Hla h45L IgG, показали аналогичное снижение бактериемии после заражения штаммом Reynolds (CP5; 4 × 10 6 КОЕ). Антитела к Hla не влияли на уровень бактериемии. Горизонтальные линии представляют медианы групп, а значения P (* <. 05, ** <. 01 и *** <.0001) определяли с помощью критерия Манна – Уитни U . G , Мыши (10 / группа), пассивно иммунизированные однократной дозой CP5-Hla 1 мг h45L IgG или Hla IgG, выживали дольше ( P = 0,0001), чем мыши, получавшие CP5-Epa IgG или O1-Epa IgG за 24 часа до интраназального заражения 6,1 × 10 8 КОЕ S. aureus Newman. H , Мышам давали 1 мг Hla IgG или CP5-Hla h45L IgG за 4 часа и 24 часа до бактериального заражения 9.7 × 10 8 КОЕ штамма Newman были защищены ( P <0,0001) от летальной пневмонии. P Значения для исследований выживаемости определялись с помощью лог-рангового теста.

Рисунок 7.

Пассивная иммунизация кроличьим иммуноглобулином G (IgG), специфичным для биоконъюгированных вакцин Staphylococcus aureus , защищала мышей от бактериемии и летальной пневмонии. A и B , Мышам вводили CP5-Epa IgG и внутрибрюшинно вводили 6 × 10 6 колониеобразующих единиц (КОЕ) S.aureus Reynolds (CP5; A ) или 7 × 10 7 КОЕ USA200 ( B ) выявило значительно меньше бактерий, выделенных из крови через 2 часа после заражения, по сравнению с мышами, которым вводили Shigella O1-Epa IgG. C . Мыши, получавшие CP8-Epa IgG, были защищены от бактериемии, индуцированной 4 × 10 7 КОЕ S. aureus Reynolds (CP8). D и E . Мыши, которым вводили CP5-Hla IgG, показали снижение бактериемии, спровоцированной S.aureus USA100 (8 × 10 7 КОЕ на мышь; D ) или Newman (9 × 10 7 КОЕ / мышь; E ). F , Мыши, пассивно иммунизированные 300 мкг CP5-Epa или CP5-Hla h45L IgG, показали аналогичное снижение бактериемии после заражения штаммом Reynolds (CP5; 4 × 10 6 КОЕ). Антитела к Hla не влияли на уровень бактериемии. Горизонтальные линии представляют медианы групп, а значения P (* <. 05, ** <. 01 и *** <.0001) определяли с помощью критерия Манна – Уитни U . G , Мыши (10 / группа), пассивно иммунизированные однократной дозой CP5-Hla 1 мг h45L IgG или Hla IgG, выживали дольше ( P = 0,0001), чем мыши, получавшие CP5-Epa IgG или O1-Epa IgG за 24 часа до интраназального заражения 6,1 × 10 8 КОЕ S. aureus Newman. H , Мышам давали 1 мг Hla IgG или CP5-Hla h45L IgG за 4 часа и 24 часа до бактериального заражения 9.7 × 10 8 КОЕ штамма Newman были защищены ( P <0,0001) от летальной пневмонии. P Значения для исследований выживаемости определялись с помощью лог-рангового теста.

Пассивная иммунизация CP5-Hla h45L IgG, вводимая внутрибрюшинно за 24 часа до интраназального бактериального заражения, обеспечивала ограниченную защиту от летальной пневмонии (фиг. 7 G ), индуцированной штаммом Newman. Однако, когда вторая доза IgG была введена за 4 часа до бактериальной инокуляции, 90% мышей, которым вводили CP5-Hla h45L , выжили после летального посева (фигура 7 H ).

ОБСУЖДЕНИЕ

Растущая распространенность инфекции S. aureus в больницах и сообществе, а также растущая устойчивость S. aureus к антибиотикам подчеркнули необходимость профилактической вакцины против этого микроба. Тем не менее, разработка эффективной вакцины против стафилококка оставалась труднодостижимой. Вакцинация однокомпонентными вакцинами на основе CPs или S. aureus поверхностного детерминанта B железа не смогла защитить пациентов от инвазивного заболевания в клинических испытаниях фазы 3 [6, 7, 34, 35].Точно так же стратегии пассивной иммунизации, направленные на фактор комкования А или липотейхоевую кислоту, не предотвращали стафилококковый сепсис у недоношенных новорожденных [7]. Текущие усилия сосредоточены на приготовлении вакцин, направленных против нескольких факторов вирулентности стафилококков. В дополнение к важности антител в опосредовании нейтрализации токсинов и уничтожения опсонофагоцитов нейтрофилами, недавно на моделях инфекций животных было показано, что иммунитет на основе Т-клеток имеет решающее значение для вакцино-опосредованной защиты, индуцированной определенными белковыми антигенами [7, 36–38]. ].

Поскольку опсонофагоцитарное уничтожение нейтрофилов является ключевым компонентом очистки хозяина от S. aureus , мы нацелены на стафилококковые ХП, которые вызывают опсонические антитела. Производство гликоконъюгатных вакцин является сложным и дорогостоящим процессом, требующим получения рекомбинантных белков, а также экстракции и очистки сложных полисахаридов. Из-за неспецифической природы химических конъюгаций химически конъюгированные вакцины неоднородны, варьируются от партии к партии и часто производятся с низким выходом.Более того, обычная конъюгация полисахаридов с белковыми антигенами требует денатурирующих химикатов, которые могут влиять на белковый носитель или некоторые лабильные полисахариды, что приводит к изменению критических эпитопов.

Мы разработали новую технологию, которая позволяет конъюгацию S. aureus CP с соответствующим белком S. aureus без риска денатурации белка. Олигосахарилтрансфераза PglB Campylobacter способна переносить олигосахарид в конкретную консенсусную последовательность белка [20], тем самым обеспечивая продукцию гликопротеинов в бактериальных клетках.Эта система гликозилирования белков функционально перенесена в E. coli [15]. Используя этот аппарат гликозилирования, различные полисахариды могут быть перенесены в рекомбинантные белки, что позволяет производить биоконъюгаты, которые можно использовать в качестве новых вакцин. Партии биоконъюгированной вакцины гомогенны, и во время производства не присутствует свободный полисахарид, чтобы ингибировать Т-клеточно-зависимые иммунные ответы. Поскольку биоконъюгат производится в E. coli , рост токсичных организмов для экстракции полисахаридов не требуется.

В этом исследовании мы продемонстрировали производство, очистку и эффективность биоконъюгированных вакцин CP5-Epa и CP8-Epa. Кроме того, мы показали, что промежуточный дисахарид антигена P. aeruginosa O11 может служить субстратом для гликозилтрансфераз S. aureus , впервые показав, что гликозилтрансферазы грамположительных и грамотрицательных бактерий могут сочетаться. Биоконъюгированные вакцины вызывали опсонические антитела у мышей и кроликов, а стратегии активной и пассивной иммунизации защищали мышей от экспериментальной бактериемии.Биоконъюгированная вакцина второго поколения (CP5-Hla h45L ) была важным доказательством концепции продукта, демонстрирующим потенциал ковалентного связывания белковых и полисахаридных антигенов одного и того же микроба. Подобно животным, которым вводили CP5-Epa, мыши, иммунизированные CP5-Hla h45L , были защищены от бактериемии, спровоцированной несколькими изолятами CP5 + S. aureus . Важно отметить, что вакцина CP5-Hla h45L также защищала мышей от летальной пневмонии, вызванной серотипом 5, серотипом 8 или капсульно-отрицательной вакциной S.aureus штаммов. Таким образом, биоконъюгированная вакцина CP5-Hla h45L проявила защитную эффективность против бактериемии (опосредованной антителами к CP5) и летальной пневмонии (опосредованной антителами Hla h45L ).

Этот новый гликоинженерный подход к разработке конъюгированной вакцины может произвести революцию в отрасли. Трехвалентная вакцина-кандидат S. aureus (описанная здесь), состоящая из CP5, CP8 и Hla h45L , вырабатывает функциональные антитела и широко защищает в различных моделях животных.Гликозилирование поверхностного белка S. aureus с помощью CP8 было выполнено, и в настоящее время он проходит производство и тестирование. Гликоинженерная технология позволяет разрабатывать четко определенные, новые и эффективные вакцины против микробных патогенов, таких как S. aureus , для которых одних белковых или полисахаридных антигенов недостаточно для обеспечения широкой защиты. Кроме того, конъюгирование капсульных антигенов с белковыми антигенами позволяет уменьшить количество вводимых компонентов по сравнению с вакциной, которая содержит отдельные капсульный конъюгат и белковые компоненты.

Банкноты

Благодарности. Мы благодарим Шеннон Бреннан, Джастина Овуми, Патрика Таварес, Сашу Келлер, Фабиан Мейер, Стефани Балада, Мишу Тоблер и Маркуса Мюллера за техническую помощь; Река Сатмари за начальную работу по синтезу вакцины; и Skip Waechter за критическое прочтение рукописи.

Отказ от ответственности. Ответственность за содержание полностью ложится на авторов и не обязательно отражает официальную точку зрения Национальных институтов здравоохранения.

Финансовая поддержка. Эта работа была поддержана GlycoVaxyn (соглашение A201436 с J. C. L.), Национальными институтами здравоохранения (грант R01 AI088754 для J. C. L.) и Китайским советом по стипендиям (для L. W.).

Возможный конфликт интересов. MW, MK, GL, AF, CA, MB, JQ, VG, PC и MS являются сотрудниками компании GlycoVaxyn, которая получила эксклюзивные всемирные права от Швейцарского федерального технологического института на свою собственную технологию и подала заявки на патенты. в Соединенных Штатах на капсульных вакцинах, биоконъюгированных с грамположительными бактериями.Дж. К. Л. является оплачиваемым консультантом по разработке вакцин для компаний Sanofi Pasteur и Pfizer и получает исследовательскую поддержку от Centegen. Все остальные авторы не сообщают о потенциальных конфликтах.

Все авторы подали форму ICMJE для раскрытия информации о потенциальных конфликтах интересов. Выявлены конфликты, которые редакция считает относящимися к содержанию рукописи.

Список литературы

1,,.

Почему MRSA, ассоциированный с сообществами, распространяется по миру и как это изменит клиническую практику?

,

Int J Antimicrob Agents

,

2009

, vol.

34

Дополнение 1

(стр.

S15

9

) 2.

Staphylococcus aureus пневмония: появление MRSA в сообществе

,

Semin Respir Crit Care Med

,

2005

, vol.

26

(стр.

643

9

) 3.

MRSA, ассоциированный с сообществом — сходство устойчивости и вирулентности

,

N Engl J Med

,

2005

, vol.

352

(стр.

1485

7

) 4« и др.

Использование конъюгированной вакцины Staphylococcus aureus у пациентов, находящихся на гемодиализе

,

N Engl J Med

,

2002

, vol.

346

(стр.

491

6

) 5,,.

Стратегии и достижения в разработке Staphylococcus aureus профилактических вакцин

,

Expert Rev Vaccines

,

2011

, vol.

10

(стр.

695

708

) 6« и др.

Эффект экспериментальной вакцины для профилактики инфекций Staphylococcus aureus после кардиоторакальной операции: рандомизированное исследование

,

JAMA

,

2013

, vol.

309

(стр.

1368

78

) 7.

Проблемы для универсальной вакцины Staphylococcus aureus

,

Clin Infect Dis

,

2012

, vol.

54

(стр.

1179

86

) 8,,,.

Staphylococcus aureus капсульный полисахарид серотипа 5 является антифагоцитарным и усиливает бактериальную вирулентность в мышиной модели бактериемии

,

Infect Immun

,

1998

, vol.

66

(стр.

5183

9

) 9,,,,,.

Staphylococcus aureus , экспрессирующие капсульные полисахариды серотипа 5 или 8, различаются по вирулентности

,

Infect Immun

,

2005

, vol.

73

(стр.

3502

11

) 10,.

Альфа-токсин Staphylococcus aureus

,

Microbiol Rev

,

1991

, т.

55

(стр.

733

51

) 11,.

Сайт-направленный мутагенез гена альфа-токсина Staphylococcus aureus : роль гистидинов в активности токсина in vitro и в модели на мышах

,

Infect Immun

,

1994

, vol.

62

(стр.

1843

7

) 12,,, et al.

Нацеливание на альфа-гемолизин посредством активной или пассивной иммунизации снижает тяжесть кожной инфекции USA300 у модели мышей

,

J Infect Dis

,

2010

, vol.

202

(стр.

1050

8

) 13,.

Вакцинная защита против Staphylococcus aureus pneumonia

,

J Exp Med

,

2008

, vol.

205

(стр.

287

94

) 14,,,,,.

Формирование абсцесса и токсичность, вызванная альфа-гемолизином на мышиной модели Staphylococcus aureus перитонеальной инфекции

,

Infect Immun

,

2012

, vol.

80

(стр.

3721

32

) 15« и др.

N-связанное гликозилирование в Campylobacter jejuni и его функциональный перенос в E. coli

,

Science

,

2002

, vol.

298

(стр.

1790

3

) 16« и др.

Разработка N-связанного гликозилирования белков с помощью различных липополисахаридных структур O-антигена в Escherichia coli

,

Proc Natl Acad Sci U S A

,

2005

, vol.

102

(стр.

3016

21

) 17,,,,,.

Разработка, конъюгация и оценка иммуногенности антигена Escherichia coli O121 O для его потенциального использования в качестве компонента вакцины против брюшного тифа

,

Glycoconj J

,

2013

, vol.

30

(стр.

511

22

) 18,,,,,.

Производство гликопротеиновых вакцин на Escherichia coli

,

Microb Cell Fact

,

2010

, vol.

9

стр.

61

19,.

Конформационная целостность рекомбинантного токсоида Pseudomonas aeruginosa экзотоксина А, содержащего делецию глутаминовой кислоты-553

,

Biochim Biophys Acta

,

1992

, vol.

1138

(стр.

162

6

) 20« и др.

Определение консенсусной последовательности бактериального сайта N-гликозилирования

,

EMBO J

,

2006

, vol.

25

(стр.

1957

66

) 21« и др.

Остатки гистидина около N-конца стафилококкового альфа-токсина как репортеры областей, которые являются критическими для олигомеризации и образования пор

,

Infect Immun

,

1994

, vol.

62

(стр.

2249

56

) 22,.

Стафилококковая коагулаза; механизм действия и антигенность

,

J Gen Microbiol

,

1952

, vol.

6

(стр.

95

107

) 23« и др.

Вспышки, связанные со здравоохранением, и внебольничные инфекции, вызванные MRSA, несущим ген лейкоцидина Panton-Valentine, на юго-востоке Германии

,

Eur J Clin Microbiol Infect Dis

,

2005

, vol.

24

(стр.

419

22

) 24« и др.

Является ли лейкоцидин Пантона-Валентайна основной детерминантой вирулентности при резистентном к метициллину заболевании Staphylococcus aureus , ассоциированном с сообществом?

,

J Infect Dis

,

2006

, т.

194

(стр.

1761

70

) 25,,,,.

Лейкоцидин Пантона-Валентайна не является детерминантом вирулентности в мышиных моделях ассоциированной с сообществом метициллин-резистентной болезни Staphylococcus aureus

,

J Infect Dis

,

2008

, vol.

198

(стр.

1166

70

) 26« и др.

Характеристика структуры и биологических функций капсульного полисахарида, продуцируемого Staphylococcus saprophyticus

,

J Bacteriol

,

2010

, vol.

192

(стр.

4618

26

) 27,.

Разработка четырехкратного мультиплексного теста на опсонофагоцитоз для пневмококковых антител против дополнительных серотипов и обнаружение серологических подтипов у Streptococcus pneumoniae серотипа 20

,

Clin Vaccine Immunol

,

2012

, vol.

19

(стр.

835

41

) 28.

Методология ELISA для полисахаридных антигенов: связывание полисахаридов с белками для адсорбции в пластиковые пробирки

,

J Immunol

,

1979

, vol.

28

(стр.

187

92

) 29,.

От пептидогликана к гликопротеинам: общие черты липид-связанного биосинтеза олигосахаридов

,

FEMS Microbiol Lett

,

1994

, vol.

119

(стр.

255

62

) 30,. ,.

Синтез вакцин с микробами

,

Разработка новых вакцин

,

2012

Wien

Springer-Verlag

(стр.

125

45

) 31,,, et al.

Характеристика локуса О-антигена серогруппы O11 Pseudomonas aeruginosa PA103

,

J Bacteriol

,

1999

, vol.

181

(стр.

4275

84

) 32.

Пересмотренные структуры капсульных полисахаридов из Staphylococcus aureus типов 5 и 8, компонентов новых гликоконъюгатных вакцин

,

Carbohydr Res

,

2005

, vol.

340

(стр.

1097

106

) 33,.

Моноклональные антитела против альфа-гемолизина обеспечивают защиту от Staphylococcus aureus pneumonia

,

Infect Immun

,

2009

, vol.

77

(стр.

2712

8

) 34,.

Прогресс в создании вакцины Staphylococcus aureus

,

Clin Infect Dis

,

2012

, vol.

54

(стр.

560

7

) 35,.

Стафилококковые вакцины и иммунотерапия

,

Infect Dis Clin North Am

,

2009

, vol.

23

(стр.

153

71

) 36« и др.

Th2-Th27 клетки опосредуют защитный адаптивный иммунитет против инфекции Staphylococcus aureus и Candida albicans у мышей

,

PLoS Pathog

,

2009

, vol.

5

стр.

e1000703

37« и др.

Иммунизация Staphylococcus aureus регулируемая железом поверхностная детерминанта B (IsdB) обеспечивает защиту через путь Th27 / IL17 в мышиной модели сепсиса

,

Hum Vaccin Immunother

,

2012

, vol.

8

(стр.

336

46

) 38,,,,,.

Роль интерлейкина-17A в клеточной защите от инфекции Staphylococcus aureus у мышей, иммунизированных фибриноген-связывающим доменом фактора слипания A

,

Infect Immun

,

2010

, vol.

78

(стр.

4234

42

) © Автор, 2013 г. Опубликовано издательством Oxford University Press от имени Общества инфекционистов Америки.Все права защищены. Для получения разрешений обращайтесь по электронной почте: [email protected]

Предотвращение образования биопленок Staphylococcus aureus с помощью антибиотиков в планшетах с 96 микротитровальными лунками и реакторах с капельным потоком: критические факторы, влияющие на результаты

  • 1

    Донлан, Р. М. и Костертон, Дж. У. Биопленки: механизмы выживания клинически значимых микроорганизмов. Clin. Microbiol. Ред. 15 , 167–193 (2002).

    CAS Статья Google ученый

  • 2

    Персиваль, С.Л., Сулеман, Л., Вуотто, К. и Донелли, Г. Инфекции, связанные со здравоохранением, медицинские устройства и биопленки: риск, толерантность и контроль. J. Med. Microbiol. 64 , 323–334, DOI: 10,1099 / jmm. 0,000032 (2015).

    Артикул PubMed Google ученый

  • 3

    Уортингтон, Р. Дж., Ричардс, Дж. Дж. И Меландер, К. Контроль малых молекул бактериальных биопленок. Org. Biomol. Chem. 10 , 7457–7474, DOI: 10.1039 / c2ob25835h (2012).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • 4

    Høiby, N., Bjarnsholt, T., Givskov, M., Molin, S. & Ciofu, O. Устойчивость бактериальных биопленок к антибиотикам. Внутр. J. Antimicrob. Агенты 35 , 322–332, DOI: 10.1016 / j.ijantimicag.2009.12.011 (2010).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 5

    Бьярнсхольт, Т., Чофу, О., Молин, С., Гивсков, М., Хойби, Н. Применение идей биологии биопленок к разработке лекарств — можно ли разработать новый подход? Nat. Rev. Drug Discov. 12 , 791–808, DOI: 10,1038 / nrd4000 (2013).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 6

    Toté, K. et al. Ингибирующая эффективность различных антибиотиков в отношении матрикса и жизнеспособной массы биопленок Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa . Внутр. J. Antimicrob. Агенты 33 , 525–531, DOI: 10.1016 / j.iantimicag.2008.11.004 (2009).

    Артикул PubMed Google ученый

  • 7

    Lebeaux, D., Chauhan, A., Rendueles, O. & Beloin, C. От in vitro до in vivo моделей инфекций, связанных с бактериальной биопленкой. Патогены 2 , 288–356, DOI: 10.3390 / pathogens2020288 (2013).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • 8

    Ценье, Т.И Нелис, Х. Дж. Модельные системы In vitro и in vivo для изучения образования микробной биопленки. J. Microbiol. Методы 83 , 89–105, DOI: 10.1016 / j.mimet.2010.08.018 (2010).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 9

    Gomes, I. B., Simões, M. & Simões, L. C. Обзор реакторов для изучения биопленок питьевой воды. Водостойкость . 62 , 63–87, DOI: 10.1016 / j.watres.2014.05.039 (2014).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 10

    Goeres, D. M. et al. Способ выращивания биопленки при низком сдвиге на границе раздела воздух-жидкость с использованием биопленочного реактора с капельным потоком. Nat. Protoc. 4 , 783–788, DOI: 10.1038 / nprot.2009.59 (2009).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 11

    Адамс, Х.и другие. Разработка лабораторной модели для оценки удаления биопленки из межзубных промежутков с помощью механической чистки зубов. Am. J. Dent. 15 , 12B – 17B (2002).

    PubMed Google ученый

  • 12

    Woods, J. et al. Разработка и применение полимикробной модели in vitro , биопленки раны. J. Appl. Микробиол . 112 , 998–1006, DOI: 10.1111 / j.1365-2672.2012.05264.х (2012).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • 13

    Fu, W. et al. Бактериофаговый коктейль для предотвращения образования биопленок с помощью Pseudomonas aeruginosa на катетерах в модельной системе in vitro . Антимикробный. Агенты Chemother. 54 , 397–404, DOI: 10.1128 / AAC.00669-09 (2010).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 14

    Агостиньо, А.M. et al. Модель in vitro для роста и анализа биопленок MRSA хронической раны. J. Appl. Микробиол . 111 , 1275–1282, DOI: 10.1111 / j.1365-2672.2011.05138.x (2011).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 15

    Маннер, С., Скогман, М., Герес, Д., Вуорела, П. и Фаллареро, А. Систематическое исследование природных и синтетических флавоноидов для ингибирования биопленок Staphylococcus aureus . Внутр. J. Mol. Sci . 14 , 19434–19451, DOI: 10.3390 / ijms141019434 (2013).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • 16

    Питтс Б., Гамильтон М. А., Зельвер Н. и Стюарт П. С. Метод скрининга на микротитрационных планшетах для дезинфекции и удаления биопленки. J. Microbiol. Методы 54 , 269–276 (2003).

    CAS Статья Google ученый

  • 17

    Аморена, Б.и другие. Анализ чувствительности к антибиотикам для Staphylococcus aureus в биопленках, разработанный in vitro . J. Antimicrob. Химер . 44 , 43–55 (1999).

    CAS Статья Google ученый

  • 18

    Симойнс, М., Перейра, М. О. и Виейра, М. Дж. Влияние различных концентраций орто-фталевого альдегида на биопленки, образованные Pseudomonas fluorescens при различных условиях потока. Биообрастание 19 , 287–295, DOI: 10.1080 / 08

  • 031000153398 (2003).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 19

    Симойнс, М., Перейра, М. О. и Виейра, М. Дж. Мониторинг эффектов обработки биоцидами биопленок Pseudomonas fluorescens , сформированных при различных режимах потока. Water Sci. Technol. 47 , 217–223 (2003).

    Артикул Google ученый

  • 20

    Симойнс, М., Перейра, М. О. и Виейра, М. Дж. Действие катионного поверхностно-активного вещества на активность и удаление бактериальных биопленок, образующихся при различных режимах потока. Водостойкость . 39 , 478–486, DOI: 10.1016 / j.watres.2004.09.018 (2005).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 21

    Букингем-Мейер, К., Герес, Д. М. и Гамильтон, М. А. Сравнительная оценка тестов эффективности дезинфицирующих средств для биопленок. Дж.Microbiol. Методы 70 , 236–244, DOI: 10.1016 / j.mimet.2007.04.010 (2007).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 22

    Treangen, T. J. et al. Полная последовательность генома штамма контроля качества Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923. Объявление генома 2 , DOI: 10.1128 / genomeA.01110-14 (2014).

  • 23

    Gupta, A. Количественная оценка биопленки и сравнительный анализ значений MIC (минимальная ингибирующая концентрация) и MBIC (минимальная ингибирующая концентрация биопленки) для различных антибиотиков против E.coli . Внутр. J. Curr. Microbiol. Приложение. Sci . 4 , 198–224 (2015).

    CAS Google ученый

  • 24

    Стюарт П. С. Противомикробная толерантность биопленок. Microbiol. Спектр . 3 , DOI: 10.1128 / microbiolspec.MB-0010-2014 (2015).

  • 25

    Høiby, N. et al. Клиническое влияние бактериальных биопленок. Внутр. J. Oral Sci . 3 , 55–65, DOI: 10.4248 / IJOS11026 (2011).

    Артикул PubMed PubMed Central Google ученый

  • 26

    Wu, H., Moser, C., Wang, H.Z., Høiby, N. & Song, Z. J. Стратегии борьбы с инфекциями бактериальной биопленки. Внутр. J. Oral Sci . 7 , 1–7, DOI: 10.1038 / ijos.2014.65 (2015).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 27

    Høiby, N.Последние достижения в лечении инфекций Pseudomonas aeruginosa при муковисцидозе. BMC Med. 9 , 32, DOI: 10.1186 / 1741-7015-9-32 (2011).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • 28

    Дэвис Д. Понимание устойчивости биопленок к антибактериальным агентам. Nat. Rev. Drug Discov. 2 , 114–122, DOI: 10.1038 / nrd1008 (2003).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 29

    Кедровский, М.Р. и Хорсвилл, А. Р. Новые подходы к лечению инфекций стафилококковой биопленки. Ann. Акад. Sci . 1241 , 104–121, DOI: 10.1111 / j.1749-6632.2011.06281.x (2011).

    CAS Статья PubMed ОБЪЯВЛЕНИЯ Google ученый

  • 30

    Raad, I. et al. Сравнительная активность даптомицина, линезолида и тигециклина против связанных с катетером метициллин-резистентных бактериальных изолятов Staphylococcus , внедренных в биопленку. Антимикробный. Агенты Chemother. 51 , 1656–1660, DOI: 10.1128 / AAC.00350-06 (2007).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • 31

    Rose, W. E., Otto, D. P., Aucamp, M. E., Miller, Z. & de Villiers, M. M. Предотвращение образования биопленок с помощью сополимерных пленок на основе метакрилата, содержащих рифампицин, кларитромицин, доксициклин по отдельности или в комбинации. Pharm. Res. 32 , 61–73, DOI: 10.1007 / с11095-014-1444-х (2015 г.).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 32

    Raad, I. et al. In vitro и ex vivo активности миноциклина и ЭДТА против микроорганизмов, встроенных в биопленку на поверхности катетера. Антимикробный. Агенты Chemother. 47 , 3580–3585 (2003).

    CAS Статья Google ученый

  • 33

    Ву, С.и другие. Бета-лактамные антибиотики стимулируют образование биопленок у нетипируемого Haemophilus influenzae за счет активации углеводного обмена. PLoS One 9 , e99204, DOI: 10.1371 / journal.pone.0099204 (2014).

    CAS Статья PubMed PubMed Central ОБЪЯВЛЕНИЯ Google ученый

  • 34

    Seoane, L. et al. Термодинамическое исследование процесса агрегации натриевой соли оксациллина в водном растворе. Коллоид. Polym. Sci. 280 , 624–629 (2002).

    CAS Статья Google ученый

  • 35

    Стодли П., Доддс И., Бойл Дж. Д. и Лаппин-Скотт Х. М. Влияние гидродинамики и питательных веществ на структуру биопленки. J. Appl. Microbiol. 85 Дополнение 1, 19S – 28S, DOI: 10.1111 / j.1365-2672.1998.tb05279.x (1998).

    Артикул PubMed Google ученый

  • 36

    Берд, Р.Б., Стюарт, У. Э. и Лайтфут, Э. Н. Течение падающей пленки в явлениях переноса 2 -е издание (изд. Кулек, П.) 42–47 (John Wiley & Sons, Inc, 2002).

  • 37

    Салек, М. М., Саттари, П. и Мартинуцци, Р. Дж. Анализ потока жидкости и напряжений сдвига стенок внутри частично заполненных планшетов с лунками для перемешивания. Ann. Биомед. Англ. 40 , 707–728, DOI: 10.1007 / s10439-011-0444-9 (2012).

    Артикул PubMed Google ученый

  • 38

    Мерритт, Дж.Х., Кадури Д. Э. и О’Тул Г. А. Выращивание и анализ статических биопленок. Curr. Protoc. Microbiol. 0 1 , Unit – 1B.1., Doi: 10.1002 / 9780471729259.mc01b01s00 (2005).

  • 39

    О’Тул, Г.А. Анализ образования биопленок на микротитровальной чашке. J. Vis. Опыт . 47 , 2437, DOI: 10,3791 / 2437 (2011).

    Артикул Google ученый

  • 40

    Oniciuc, E. A., Cerca, N. & Nicolau, A. I. Анализ состава биопленок, образованных Staphylococcus aureus , выделенными из пищевых источников. Фронт. Микробиол . 7 , 390, DOI: 10.3389 / fmicb.2016.00390 (2016).

    Артикул PubMed PubMed Central Google ученый

  • 41

    Olwoch, I. P., Greeff, O. B., Jooné, G. & Steenkamp, ​​V. Влияние природного фермента Pectinex Ultra SP-L на культуры клеток человека и бактериальные биопленки in vitro . BMC Microbiol. 14 , 251, DOI: 10.1186 / s12866-014-0251-1 (2014).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • 42

    Claessens, J. et al. Неэффективность ванкомицина и тейкопланина в искоренении и уничтожении Staphylococcus epidermidis биопленок in vitro . Внутр. J. Antimicrob. Агенты 45 , 368–375, DOI: 10.1016 / j.ijantimicag.2014.11.011 (2015).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 43

    Toté, K., Horemans, T., Vanden Berghe, D., Maes, L. & Cos, P. Ингибирующее действие биоцидов на жизнеспособные массы и матрицы биопленок Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa . Прил. Environ. Microbiol. 76 , 3135–3142, DOI: 10.1128 / AEM.02095-09 (2010).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • 44

    Fujimura, S. et al. Противомикробная эффективность комбинированного кларитромицина и даптомицина против биопленок, устойчивых к метициллину Staphylococcus aureus на титановых медицинских изделиях. J. Infect. Химер . 21 , 756–759, DOI: 10.1016 / j.jiac.2015.06.001 (2015).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 45

    Робертс А. Э., Краг К. Н., Бьярнсхольт Т. и Диггл С. П. Ограничения экспериментов in vitro и в понимании биопленок и хронической инфекции. J. Mol. Биол. 427 , 3646–3661, DOI: 10.1016 / j.jmb.2015.09.002 (2015).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 46

    Bjarnsholt, T. et al. Биопленка in vivo . Trends Microbiol. 21 , 466–474, DOI: 10.1016 / j.tim.2013.06.002 (2013).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 47

    Gomes, L.C. et al. 96-луночные микротитрационные планшеты для моделирования биообрастания в биомедицинских условиях. Биообрастание 30 , 535–546, DOI: 10.1080 / 08

  • 4.2014.8 (2014).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 48

    Abbanat, D. et al. Оценка активности in vitro цефтобипрола и компараторов в анализах стафилококковой колонии или биопленки на микротитровальном планшете. Внутр. J. Antimicrob. Агенты 43 , 32–39, DOI: 10.1016 / j.ijantimicag.2013.09.013 (2014).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 49

    Скогман, М. Э., Вуорела, П. М. и Фаллареро, А. Сочетание измерений матрикса биопленки с анализами биомассы и жизнеспособности в оценке чувствительности антимикробных препаратов против Staphylococcus aureus биопленок. J. Antibiot. (Токио) 65 , 453–459, DOI: 10.1038 / ja.2012.49 (2012).

    CAS Статья Google ученый

  • 50

    Сандберг, М., Määttänen, A., Peltonen, J., Vuorela, P. M. & Fallarero, A. Автоматизация модели 96-луночного микротитровального планшета для биопленок Staphylococcus aureus : подход к скринингу природных антимикробных соединений. Внутр. J. Antimicrob. Агенты 32 , 233–240, DOI: 10.1016 / j.ijantimicag.2008.04.022 (2008).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 51

    Sandberg, M. E. et al. Плюсы и минусы использования окрашивания резазурином для количественной оценки жизнеспособных биопленок Staphylococcus aureus в скрининговом анализе. J. Microbiol. Методы 78 , 104–106, DOI: 10.1016 / j.mimet.2009.04.014 (2009).

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 52

    Fallarero, A. et al. (+) — Дегидроабиетиновая кислота, дитерпен абиетанового типа, ингибирует Staphylococcus aureus биопленок in vitro . Внутр. J. Mol. Sci . 14 , 12054–12072, DOI: 10.3390 / ijms140612054 (2013).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

  • 53

    Питтс, Б.и другие. Повторяемый лабораторный метод проверки эффективности биоцидов против биопленок унитаза. J. Appl. Microbiol. 91 , 110–117 (2001).

    CAS Статья Google ученый

  • Профилактика и борьба с метициллин-устойчивыми инфекциями Staphylococcus aureus (MRSA) в лагере

    9 мая 2008 г.

    Кому: Операторы лагерей, директора лагерей и директора лагерей по охране здоровья, местные департаменты здравоохранения
    От: Бюро по контролю за инфекционными заболеваниями штата Нью-Йорк
    ** Бюро по охране окружающей среды и защите пищевых продуктов штата Нью-Йорк, штат Нью-Йорк,

    Консультации по вопросам здоровья: Профилактика и борьба с метициллин-устойчивыми инфекциями Staphylococcus aureus (MRSA) в лагере

    Пожалуйста, немедленно раздайте операторам детских лагерей, директорам лагерей и медицинским директорам лагерей.

    Примечание. Эта рекомендация была первоначально размещена в сети оповещений о состоянии здоровья (HAN) Департамента здравоохранения штата Нью-Йорк 27 марта 2008 г. В нее были внесены два обновления; изменения отмечены знаком «**» перед текстом выше и в пункте 5.

    Департамент здравоохранения штата Нью-Йорк предоставляет эту консультацию, чтобы помочь операторам детских лагерей, директорам и руководителям здравоохранения в профилактике и борьбе с инфекциями MRSA в условиях лагеря.В этом информационном сообщении кратко излагаются некоторые ключевые моменты:

    Тема Страница

    1. Фон
    2. Симптомы MRSA
    3. Маршруты передачи MRSA
    4. Лечение MRSA
    5. Профилактика MRSA в лагере
    6. Профилактика MRSA и легкая атлетика
    7. Экологическая чистка и дезинфекция в лагере и спортивных помещениях
    8. Дополнительная информация

    1.Справочная информация

    • В штате Нью-Йорк и по всей стране сообщения об инфекциях MRSA становятся все более распространенными в общественных местах, таких как школы и спортивные команды.
    • Инфекция
    • MRSA в детских лагерях может вызывать беспокойство у отдыхающих, персонала лагеря и родителей. Этот документ предназначен для предоставления информации об инфекциях MRSA в лагере, а также о том, как их предотвратить и контролировать.
    • Золотистый стафилококк, обычно называемый «стафилококком», — это бактерии, которые обычно переносятся на коже или в носу здоровых людей.
      • Примерно от 25% до 30% населения являются носителями стафилококковых бактерий на коже и в носу, не вызывая инфекции (также известной как колонизация).
      • Инфекция может начаться, когда бактерии стафилококка попадают в порез, царапину или другую трещину на коже. Бактерии стафилококка являются одной из самых распространенных причин кожных инфекций в США.
      • Большинство этих кожных инфекций незначительны (например, прыщи и фурункулы) и легко поддаются лечению без антибиотиков.
      • Бактерии стафилококка также могут вызывать более серьезные инфекции, такие как инфекции кровотока и пневмония, которые требуют более агрессивного лечения.
      • Некоторые бактерии стафилококка устойчивы к антибиотикам. MRSA — это тип стафилококка, устойчивый к определенному классу антибиотиков. При необходимости существует множество других антибиотиков для лечения инфекции MRSA.
      • Устойчивость к антибиотикам в целом связана с ненадлежащим использованием антибиотиков, например с чрезмерным назначением или невыполнением предписанных курсов антибиотиков. Такое ненадлежащее использование способствует распространению устойчивых к антибиотикам организмов.
    Вернуться к содержанию

    2.Симптомы MRSA

    • Колонизация стафилококком или MRSA аналогична колонизации другими естественными бактериями и относится к бессимптомному переносу MRSA на коже или в носу.
    • Большинство людей с MRSA на коже или в носу не знают, что они колонизированы, и никогда не заболевают MRSA-инфекцией.
    • Когда стафилококк или MRSA попадают в разрыв кожи, это может вызвать инфекции, которые могут выглядеть как прыщ или фурункул, а также могут быть красными, опухшими, болезненными, иметь гной или другой дренаж.
    • Более серьезные инфекции стафилококка или MRSA включают пневмонию, инфекции кровотока или тяжелые инфекции кожи или ран.
    Вернуться к содержанию

    3. Маршруты передачи MRSA

    • MRSA передается чаще всего при прямом контакте кожи с кожей.
    • MRSA также может передаваться:
      • Попадание в дренаж из инфицированных царапин, порезов или других кожных ран.
      • Контакт с личными вещами, загрязненными дренажами из инфицированных царапин, порезов или других кожных ран.Эти предметы могут включать загрязненные бинты, полотенца, мочалки, мыло, бритвы, препараты для местного применения *, спортивное или спортивное оборудование, а также униформу или другую одежду.
    • Риск передачи низкий через поверхности окружающей среды, не загрязненные кожными ранами или частым прямым контактом с кожей.
      • Здравомыслящие подходы к поддержанию чистоты поверхностей, например, их очистка в случае их загрязнения, снизят уровень всех бактерий на поверхностях окружающей среды.См. Раздел 7 для получения подробных инструкций по очистке и дезинфекции окружающей среды.
      • Использование швабры из микрофибры продемонстрировало улучшенное снижение уровня бактерий в окружающей среде по сравнению с обычными швабрами с петлей, а также может значительно сократить использование химикатов для повседневной уборки.
    Вернуться к содержанию

    4. Лечение MRSA

    • Лица, колонизированные MRSA, не нуждаются в лечении. Передачу другим можно предотвратить, соблюдая правила гигиены, включая частое мытье рук.
    • Большинство инфекций MRSA лечатся хорошим уходом за ранами и кожей.
      • Следите за тем, чтобы место было чистым и сухим.
      • Выполняйте гигиену рук до и после ухода за участком. Если мыло и вода недоступны, следует использовать дезинфицирующие средства для рук на спиртовой основе. Соблюдайте осторожность и обеспечивайте надлежащий присмотр за маленькими детьми, использующими дезинфицирующие средства на спиртовой основе.
      • Тщательно утилизируйте использованные бинты.
    • Иногда лечение предполагает использование антибиотиков.
      • Антибиотики следует использовать по усмотрению врача.
      • Если необходимы антибиотики, важно, чтобы пациент использовал лекарство точно в соответствии с указаниями, включая прохождение полного предписанного курса, даже если он / она чувствует себя лучше до того, как лекарство израсходовано.
      • Если инфекция не улучшилась в течение нескольких дней, медицинскому персоналу лагеря следует рассмотреть возможность получения консультации и направления к специалисту для оценки и лечения.
    Вернуться к содержанию

    5. Профилактика MRSA в лагере

    • Гигиена рук — самый важный фактор в предотвращении распространения MRSA.
    • Риск передачи MRSA в большинстве социальных сетей невелик.
      • Вероятно, повышен риск для тех, кто живет в одной каюте, спортивном инвентаре или одежде, как это часто бывает в лагерях.
    • Детские лагеря должны обеспечивать свободный доступ к раковинам, мылу и чистым бумажным полотенцам на всей территории лагеря, включая домики, обеденные зоны и другие места для общих собраний.
      • В ситуациях, когда доступ к раковинам ограничен (например, во время походов, прогулок, спортивных мероприятий), персонал лагеря должен иметь при себе контейнер с дезинфицирующим средством для рук на спиртовой основе. Дезинфицирующее средство для рук на спиртовой основе следует использовать в соответствии с рекомендациями производителя. Персонал лагеря должен проверить наличие аллергии на продукты перед использованием в кемпере или персонале.
    • Инфекции Staph и MRSA в лагерях можно предотвратить, если персонал и отдыхающие будут соблюдать элементарные меры гигиены.
      • Держите руки в чистоте, тщательно промывая их водой с мылом (желательно не кусковым мылом) или дезинфицирующим средством для рук на спиртовой основе (если руки не загрязнены явно, а мыло и вода недоступны). Следуйте приведенным выше рекомендациям относительно использования дезинфицирующих средств для рук на спиртовой основе.
      • Внимательно ухаживайте за кожей. Поскольку стафилококковые инфекции начинаются при попадании стафилококка в организм через разрыв кожи, сохранение кожи в здоровом и неповрежденном состоянии является важной профилактической мерой.
      • Вымойте любой порез или повреждение кожи водой с мылом и наложите чистую повязку до заживления.
      • Избегайте контакта с чужими ранами или повязками. Если сотруднику необходимо помочь с перевязкой лагеря, этот сотрудник должен сделать это под руководством / советом медицинского персонала лагеря. Им следует надеть перчатки, выбросить использованную повязку в мусор и вымыть руки и предплечья сразу после снятия перчаток. (При контакте с биологическими жидкостями соблюдайте стандартные защитные меры.)
      • Избегайте совместного использования личных вещей, таких как тканевые полотенца.
    • Жители лагеря или персонал с симптомами инфекции стафилококка или MRSA должны немедленно уведомить медицинский персонал лагеря и сделать следующее:
      • Держите раны в чистоте и наложите повязку до заживления. Меняйте повязки в соответствии с рекомендациями врача или в случае загрязнения. Быстро выбрасывайте использованные бинты или скотч в обычный мусор.
      • Мойте руки и предплечья до и после ухода за ранами, а также в течение дня. Вымойте не менее 20 секунд теплой водой с мылом (желательно не кусковым) и вытрите руки чистым бумажным полотенцем.
      • Не передавайте личные вещи, такие как полотенца, мочалки, мыло, бритвы, препараты для местного применения, униформу или одежду, которые могли соприкасаться с инфицированной раной или повязкой.
      • Принимайте все антибиотики в соответствии с предписаниями и в течение всего предписанного периода времени.
      • Отдыхающих с кожными поражениями следует направлять в лазарет для обследования.
      • Немедленно сообщайте персоналу лагеря и / или медицинскому персоналу о новых кожных язвах или фурункулах.
    • Посещение лагеря для отдыхающих и персонала с кожными инфекциями стафилококка или MRSA
      • Отдыхающих, чьи раны можно покрыть чистой сухой повязкой и которые могут поддерживать личную гигиену, не нужно исключать из лагеря или лагерной деятельности.
      • Никаких исключений из общей деятельности не требуется.
      • Участники лагеря и персонал с активными инфекциями стафилококка или MRSA должны быть исключены из процесса приготовления пищи до тех пор, пока симптомы не исчезнут и местный медицинский работник не определит, что риск передачи MRSA устранен.
      • Участники лагеря с открытыми или дренирующими ранами, включая инфекции MRSA, должны быть исключены ** из всех видов плавания и водных видов спорта.
      • Студенты с активными кожными инфекциями (e.(например, дренирование ран, фурункулов, абсцессов) не должны участвовать в деятельности, при которой возможен контакт кожи с кожей, до полного излечения инфекции.
      • Немедленно сообщайте персоналу лагеря и / или медицинскому персоналу о новых кожных язвах или фурункулах.
    • Уведомление
      • Все члены сообщества лагеря должны знать о рисках MRSA и уведомлять медицинский персонал лагеря о любых доказательствах инфекции MRSA.
      • Лагеря должны заботиться о сохранении права отдыхающих и сотрудников на неприкосновенность частной жизни и конфиденциальность в отношении этой или любой другой проблемы со здоровьем.
      • Как правило, нет необходимости сообщать всему лагерному сообществу об одной-единственной инфекции MRSA.
      • Уведомление сообщества и родителей лагеря должно основываться на консультации с NYSDOH и LHD в соответствии с установленной политикой лагеря.
    • Рекомендации для отдыхающих с подавленным иммунитетом или ВИЧ-инфекцией
      • Отдыхающие с ослабленной иммунной системой могут подвергаться риску более тяжелого заболевания, если они заразятся MRSA.
      • Эти туристы должны соблюдать те же профилактические меры, что и все остальные, для предотвращения инфекций стафилококка, и должны обращаться к своему лечащему врачу с любыми конкретными проблемами. В лагерях следует позаботиться о том, чтобы сохранить право отдыхающих на частную жизнь и конфиденциальность в отношении этой или любой другой проблемы со здоровьем.
    • Требования к отчетности при заражении MRSA
      • В соответствии с 10NYCCR 7-2.8 (d), обо всех заболеваниях кемперов и персонала, которые могут быть переданы при контакте, следует сообщать в течение 24 часов в местный отдел здравоохранения (LHD).
      • Если выявлена ​​передача инфекции в лагере, или если среди населения лагеря происходит вспышка или рост инфицирования MRSA, лагерь должен связаться с LHD.
    • Экологическая чистка, поверхности и дезинфекция
      • Подробное руководство по очистке и дезинфекции окружающей среды см. В разделе 7.
    • Наблюдение за заболеваниями
      • Персоналу лагеря важно проявлять бдительность в отношении кожных инфекций среди отдыхающих.
      • Чтобы предотвратить перерастание единичного случая в вспышку, участники лагеря и персонал лагеря должны немедленно сообщать о любых подозрениях на инфекцию медицинскому персоналу лагеря.
      • Туристов и персонал следует поощрять сообщать о любых изменениях кожи, таких как покраснение, тепло, отек, болезненность или дренаж, особенно когда они связаны с порезами, фурункулами или участками раздражения и ссадин кожи.
      • Персонал, наблюдающий открытые или обнаженные кожные поражения у отдыхающих, должен направить его в лазарет для оценки поражения.
    • Информация о лазарете лагеря
      • Владельцы лагеря должны убедиться, что персонал лазарета знаком с признаками и симптомами инфекции MRSA, базовыми методами лечения инфекций MRSA и текущими рекомендациями по профилактике и контролю MRSA.
      • В лазаретах лагеря должно быть достаточное количество окклюзионных повязок, ленты и противомикробной мази.
      • Учреждение, куда можно направить людей для обследования и лечения, должно быть определено до начала лагеря.Медицинский персонал лагеря может также захотеть назначить консультанта по инфекционным заболеваниям, если во время лагеря возникнет необходимость в консультации.
      • В лазаретах лагеря с соответствующими удобствами может потребоваться оборудование для выполнения простых разрезов и дренажа, такое как одноразовые скальпели, бетадин, марля и шовные материалы.
      • Отличный плакат под названием «Амбулаторное ведение инфекций кожи и мягких тканей в эпоху MRSA, ассоциированного с сообществами» доступен бесплатно в CDC.Медпунктам лагеря следует рассмотреть возможность просмотра и размещения информации в своих учреждениях.
    Вернуться к содержанию

    6. Профилактика MRSA и легкая атлетика

    • Практика гигиены и инфекционного контроля
      • Гигиена рук — самый важный фактор в предотвращении распространения MRSA.
      • Персонал лагеря, тренеры и инструкторы должны соблюдать надлежащую гигиену рук после контакта с игроками, особенно при смене повязок и уходе за ранами.
      • При помощи туристу или персоналу в наложении или смене повязок необходимо надевать перчатки и мыть руки сразу после снятия перчаток.
      • В ситуациях, когда доступ к раковинам ограничен, имейте при себе отдельные емкости с дезинфицирующим средством на спиртовой основе. Рекомендации по использованию дезинфицирующих средств для рук на спиртовой основе см. В 5.
      • Обеспечьте достаточное количество чистых полотенец, чтобы игрокам не приходилось ими делиться.
      • Обучить игроков правильному обращению со всеми ранениями.
      • Раны (например, порезы, царапины, ссадины) должны быть полностью и надежно закрыты в любое время, особенно во время соревнований (например, перевязаны и используются защитные рукава).
      • Особые указания для игроков:
        • Не делитесь полотенцами (даже в стороне во время игр), мочалками, мылом, бритвами, препаратами для местного применения или другими предметами личной гигиены с другими игроками.
        • Примите душ с мылом как можно скорее после КАЖДОЙ тренировки или игры.
        • Избегайте контакта с дренажными очагами и загрязненными предметами (например, повязками) от других людей.
        • Выполняйте гигиену рук после использования многоцелевого оборудования (например, весового оборудования) и после контакта с потенциально загрязненными предметами (например, раны другого человека, инфицированная кожа или загрязненные повязки).
    Вернуться к содержанию

    7. Экологическая чистка и дезинфекция в лагере и спортивных помещениях

    • Меры борьбы при текущем строительстве и ремонте транспортных средств
      • Если подтвержденные случаи MRSA среди населения лагеря не были выявлены, следуйте обычным процедурам, основанным на здравом смысле, для уборки лагеря.
      • Выполняйте регулярные процедуры очистки и обслуживания оборудования и материалов, которые могут использоваться совместно, например, защитных очков или одежды.
      • Также можно рассмотреть возможность использования дезинфицирующих средств (см. Описание ниже) на общих поверхностях и оборудовании в рамках регулярного технического обслуживания.
        • Большинство дезинфицирующих средств требуют тщательной очистки поверхностей перед нанесением дезинфицирующего средства. Правильная очистка снижает уровень бактерий на поверхностях, находящихся в окружающей среде.
      • При стирке загрязненного белья стирайте с помощью стирального порошка в горячей воде (минимум 160ºF), добавьте одну чашку отбеливателя, если температура воды не 160ºF, и высушите в горячей сушилке. При обращении с грязным бельем рекомендуется надевать перчатки.
      • Регулярно (хотя бы раз в день) очищайте и дезинфицируйте детские кроватки и используйте защитные подушки.
    • Если у населения лагеря подтверждена инфекция MRSA
      • Продезинфицируйте ограниченные участки, например поверхности, которые могут контактировать с открытыми или плохо покрытыми инфекциями, используя зарегистрированный в штате Нью-Йорк продукт, эффективный против MRSA (см. Следующий раздел непосредственно ниже).
        • Окружающие поверхности и совместно используемое оборудование, где вероятен прямой контакт с кожей нескольких пользователей, включают спортивный инвентарь, уличное оборудование, тренажеры, седла для верховой езды и т. Д.
    • Не рекомендуется проводить широкомасштабную дезинфекцию всего учреждения при возникновении единичной инфекции MRSA.
    • Рекомендации по использованию зарегистрированных дезинфицирующих или дезинфицирующих средств
      • Дезинфицирующие средства — это пестицидные продукты, регулируемые U.S. Агентство по охране окружающей среды (EPA) и Департамент охраны окружающей среды штата Нью-Йорк (DEC).
      • Регулярное использование дезинфицирующих средств сопряжено с риском.
        • Многие активные ингредиенты дезинфицирующих средств могут обжечь или раздражать кожу и глаза, а в некоторых случаях могут вызвать раздражение дыхательных путей.
        • Примите меры для уменьшения воздействия применяемых дезинфицирующих средств, насколько это возможно, и соблюдайте все инструкции и меры предосторожности, указанные на этикетке.
    Вернуться к содержанию

    8. Дополнительная информация

    Дополнительную информацию о MRSA можно найти в Интернете на следующих сайтах:

    Вернуться к содержанию

    Законы и правила штата Нью-Йорк
    Дата вступления в силу: 29.09.2004
    Название: Раздел 7-2.8 (d) — Медицинские требования

    (d) Обо всех травмах, заболеваниях и заболеваниях, о которых следует сообщать, о всех травмах, полученных в лагере и о персонале, необходимо сообщать начальнику службы здравоохранения лагеря и регистрировать в медицинском журнале.Все травмы или заболевания кемпера и персонала, которые приводят к смерти или которые требуют реанимации, госпитализации или введения адреналина, воздействия кемпера и персонала на животных, потенциально инфицированных бешенством, травмы глаза, головы, шеи или позвоночника кемпера, требующие направление в больницу или другое учреждение для лечения, травмы кемпера, когда жертва получает ожоги второй или третьей степени на пяти или более процентах тела, травмы кемпера, связанные с переломами или вывихами костей, разрывы кемпера, требующие наложения швов, физическое или сексуальное насилие в кемпере Обвинения и все заболевания отдыхающих и персонала, которые могут передаваться через воду, пищу, воздух или передаваться через контакт, должны быть сообщены в течение 24 часов должностному лицу, выдающему разрешение.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *