Прополис при туберкулезе легких: Прополис при туберкулезе: польза и вред

Содержание

Прополис при туберкулезе: польза и вред

Полезные свойства прополиса. Рецепты приготовления в домашних условиях. Дозировки. Противопоказания.

Прополис при туберкулезе, как и иные природные продукты пчеловодства, это эффективное дополнение в комплексном лечении, которое способно повысить иммунную защиту организма, ускорить регенерацию (восстановление), пораженных тканей, облегчить переносимость интоксикации, вызванной обычной терапией химиопрепаратами. 

Содержание: 

  1. Настойка прополиса на спирту 
  2. Водный экстракт 
  3. Прополисное молоко 
  4. Прополис на сливочном масле 
  5. Медово-прополисная смесь 

Общие сведения  

Туберкулез (бугорчатка) известен медицине со времен Авиценны. Проявляется в процессе патологического воздействие на организм микобактерии, названной в честь ее открывателя – палочка Коха. Характеризуется специфическим инфекционным поражением. Развитие основного очага – в органах дыхания. 

На протяжении десятилетий инфекционный патоген научился быстро мутировать в организме, в результате чего, медики отмечают неблагополучную тенденцию проявления различных форм туберкулеза, в особенности его деструктивных форм. Помимо классического поражения органов дыхания, воспалительному поражению могут подвергаться: 

  • кожа и опорно-двигательный аппарат; 
  • нервная и лимфатическая системы; 
  • половые и мочевыделительные органы; 
  • весь организм в целом (милиарный туберкулез). 

Человек со здоровым иммунитетом способен легко справиться с первоначальным очагом инфекции. Но, даже самый здоровый человек не сможет справиться со слишком массивным инфекционным процессом. Промедление, либо неадекватное лечение дают возможность туберкулезу «примерить множество разнообразных масок». 

  1. Проявляясь: повреждением пищеварительных органов с признаками болей в кишечнике, нарушением периодичности испражнений и присутствием в них примесей крови, метеоризмом (вздутие живота) и критически высокой температурой. 
  2. Изолированными очагами поражения костных структур, с перспективой разрушения прилегающих тканей. 
  3. Развитием менингита и формированием туберкулом в тканевой структуре головного мозга. Для патологического процесса характерны: головные боли, нарушение сознания и чувствительности, нестабильность двигательных функций глазных яблок и психики. При поражении черепных нервных структур развивается светобоязнь, сонливость, судороги, нередко – кома. 
  4. Различными формами туберкулеза кожи. Характерная особенность – плотные подкожные узелковые образования, с последующим прорывом из-под кожи и выделением белой творожистой массы. 
  5. Туберкулезным поражением мочеполовых органов, проявляясь признаками кровавых выделений, мутной мочи с кровавыми включениями, частыми и болезненными микциями (мочеиспускание), развитием ноющих болей в нижней зоне живота, образованием болезненного вздутия мошонки с наличием экссудата (у мужчин). 

Лечение туберкулезной инфекции процесс сложный и долгий. Однако использование в терапии заболевания продуктов пчеловодства способно внести существенные коррективы в клинику заболевания, стимулировать действие антибиотикотерапии, одновременно купируя ее негативные последствия. 

Именно прополис, благодаря своим природным антибактериальным свойствам и наличию обширного ряда фармакологических особенностей, способен губительно воздействовать на патогенный возбудитель туберкулеза различной локализации. 

Лечебные свойства прополиса при туберкулезе 

Способность лечебного воздействия прополиса на организм обусловлена насыщенностью его совершенно уникальным природным составом. 

  1. Насыщенность смолами и эфирными маслами обеспечивают антибактериальный и бактерицидный эффект. Дает возможность в комплексе с основным лечением противостоять патогенному воздействию, препятствовать их резистентности (выживаемости), купируя процессы репликации (размножения). 
  2. Богатый состав органических кислот и углеводородов оказывают антисептический эффект, способствует устранению болевой симптоматики и процессам усиленного образования фагоцитарных клеток, способных купировать и выводить из организма чужеродные клетки, укрепляя иммунную защиту. 

Комплексное воздействие аминокислот, флавоноидов, дубильных веществ, витаминных и минеральных комплексов в составе прополиса, способствуют: 

  • укреплению сосудистых стенок, в пораженных туберкулезом тканях; 
  • очищению каверн от сгустков крови и подверженных некрозу тканей; 
  • обеспечению тканевого питания и быстрой регенерации; 
  • устранению воспалительных процессов в наружных и внутренних органах; 
  • выведению токсинов и клеточному обновлению. 

Несмотря на мощный бактерицидный эффект прополиса, его избирательное воздействие на патогены позволяет перорально использовать препараты на его основе без ущерба желудочной и кишечной флоры, что полностью исключает развитие дисбактериоза. 

Первые исследования свойств прополиса датированы 1960 годом. Ученые-исследователи З. X. Каримова, Л. М. Ваинер, Е. И. Радионова и К. И Севастьянова впервые собрали обширную доказательную базу эффективности лечения прополисом пациентов, даже с тяжелыми и запущенными формами заболевания, проведя исследования на базе туберкулезного диспансера. 

Прополис: лекарственные формы при туберкулезе 

В 1962 году, согласно приказу Министерства здравоохранения СССР, прополис официально включен в комплексную терапию туберкулеза, в виде различных лекарственных форм. Основанием послужило экспериментальное подтверждение: 

  • антибактериальной; 
  • обезболивающей; 
  • противовоспалительной; 
  • иммуномодулирующей и антимикробной эффективности пчелиного продукта; 
  • его антитоксических и фагоцитарных (защитных) свойств. 

Для лечения различных форм туберкулеза рекомендованы водные и спиртовые экстракты прополиса, животные и растительные масла, крема и мази на его основе. 

  1. Спиртовые экстракты прополиса (10 – 30% концентрации) предназначены для перорального (внутреннего) приема. Назначаются исключительно при ослабленной клинике течения болезни (в период ремиссии), что обусловлено: возможностью развития раздражающего эффекта при сочетании спирта с антибиотиками, токсического влияния на тканевую структуру печени, снижением фармакологических эффектов специфической терапии. 
  2. Экстракт водный (10-20%) может использоваться в любой период клиники туберкулеза в виде ингаляций. Рекомендован при диагностировании гнойного эндобронхита (поверхностного), либо в случаях обнаружения каверн в легких. 
  3. Внутренний прием животных и растительных масел с прополисом назначается в комплексе с препаратами основной терапии. Курс приема индивидуальный. В среднем – до 2 месяцев. 
  4. Крема на основе пчелиного клея эффективны при болевом синдроме. Втираются, либо используются в виде аппликаций на пораженной области. 

Если четко соблюдать врачебные рекомендации и правила приема лечебных средств с прополисом, положительный исход лечения гарантирован. Следует отметить, что монотерапию пчелиным клеем применяют только в начале развития заболевания. 

Так как признаки туберкулеза часто схожи с иными патологиями, пациенты обращаются к врачу уже в стадии запущенности болезни, либо при ее хронической клинике. В таких случаях, эффективность прополиса возможна, лишь в комплексе с препаратами основной терапии. 

Сегодня можно приобрести любые готовые лекарственные формы с прополисом. Приготовить их можно и самостоятельно, благо существует множество доступных рецептов. Рассмотрим некоторые из них. 

Рецепты домашнего приготовления и приема прополиса

Для приготовления лекарственных средств на прополисе лучше использовать свежий продукт, приобретенный у надежных продавцов. 

Приготовление: 

Настойка прополиса на спирту 

20 гр. измельченного прополиса заливают медицинским спиртом в количестве 80 мл. Оставляют настаиваться в течение 7 дней, взбалтывая емкость каждый день. После процеживания и отстаивания экстракт готов к употреблению. 

Дозировка: принимают внутрь по 20 капель раствора, смешанного с 50 мл. теплого молока за четверть часа до приема пищи. 3 раза в день на протяжении двух месяцев. 

Водный экстракт 

Водный экстракт готовиться способом непрямого контакта раствора с огнем, т.е на водяной бане. Свежий продукт тщательно измельчают при помощи кухонной терки, блендера или кофемолки, зависит от консистенции пчелиной смолы. 10 гр. порошкового прополиса заливают 100 мл. горячей воды в небольшой емкости. Накрывают крышкой, помещают в более широкую емкость с кипящей водой. Оставляют томиться на медленном огне в течении часа, периодически помешивая. После чего, дают остыть, переливают в темную посуду и помещают в прохладное место. 

Дозировка: 20-40 мл. утром, в обед и вечером за 30 мин. до еды. Курс лечения в каждом конкретном случае индивидуальный. В среднем – до года. Каждые 2 месяца – двухнедельный перерыв. 

Экстракт не готовиться из расчета на год. Стоит учитывать срок годности лекарства. Чистый экстракт без осадка сохраняет свои свойства до полутора недель. Если в растворе присутствует осадок – неделя. 

Прополисное молоко

Обоснованность применения молока с прополисом обусловлена способностью наибольшей растворимости в молоке не только его водорастворимых, но и жировых компонентов, что значительно повышает, по сравнению с водным раствором, концентрацию полезных веществ в молочной вытяжке. 

Для приготовления – 0,5 л. молока помещают в эмалированную посуду, ставят на огонь и доводят до кипения. Добавляют 50 г. измельченной пчелиной смолы. Постоянно помешивая нагревают до 70°С в течение 15 минут. Раствор фильтруют и охлаждают. На поверхности остывшей смеси может появиться затвердевший воск. Его необходимо снять, а смесь убрать в холодильник. 

Дозировка: 1 десертная ложка утром и вечером за 30 мин. до приема пиши. Длительность курса индивидуально для каждого конкретного случая. Средняя продолжительность до 3 месяцев. 

Прополис на сливочном масле 

100 гр. сливочного масла помещают в емкость, ставят на слабый огонь и доводят до кипения. В слегка остывшее масло помещают 20 гр. измельченного сырья и тщательно перемешивают. Ставят на медленный огонь на 15 минут. Огонь периодически включают и выключают, чтобы смесь не перегрелась. Готовиться лекарство при постоянном помешивании. После варки смесь процеживают. Если на дне от масла выпал водный осадок, его необходимо слить. Осадок прополиса оставляют. 

Дозировка: суточная доза приема 15 гр. Предварительно растворенное в теплом молоке масло принимают за 1 час до еды на протяжении 2 месяцев. После двухнедельного перерыва, курс повторяют. Минимальная длительность лечения 4-4,5 месяцев. 

Может использоваться, как для внутреннего приема, так и наружно (туберкулез кожи). 

Медово-прополисная смесь 

Данное средство уникально, так как может применяться перорально, наружно и для ингаляций. Клиническая эффективность препарата намного выше, чем у каждого ингредиента по-отдельности. 

10 г. крошки прополиса смешиваются со 100 г. меда. Смесь помещается на водяную баню и прогревается в течение 20 минут при температуре воды 40 - 50°С. Готовую смесь фильтруют и помещают в холодильник. 

Применение: для перорального приема – 0,5 ч. ложки 3р./ день. Для полоскания – смесь 1 :1 разводится кипяченой водой. При поражении слизистых тканей и лимфатической системы – до 3 раз в день 0,5 ч. ложки смеси удерживают во рту до окончательного растворения лекарства. Лечебный курс – от полутора до двух месяцев. 

Прополис: противопоказания 

Какие бы лестные отзыва не звучали о прополисе, следует помнить, что любой препарат имеет свои ограничения и противопоказания. К примеру, у пациентов со склонностью к аллергии на продукты пчеловодства могут проявиться признаки экземы, бронхиальной астмы или крапивницы. В виде ответной реакции организма, возможны кожные высыпания со жгучей и зудящей симптоматикой в сопровождении головных болей и повышения температуры. 

Прополис не является панацеей от туберкулеза. Он стимулирует эффективность основной терапии туберкулеза и выполняет иммуномодулирующую функцию, побуждая организм самостоятельно бороться с болезнью. Не стоит заниматься самолечением. При некоторых сопутствующих заболеваниях (патологиях поджелудочной железы, болезнях почек и печени) масляные вытяжки с прополисом могут быть разрешены в определенных дозировках, как исключение из правил. 

Прополис нативный (натуральный) и настойка прополиса высокого качества по оптимальной цене - купить

Всего комментариев: 0

Прополис при туберкулезе: польза и вред

Полезные свойства прополиса. Рецепты приготовления в домашних условиях. Дозировки. Противопоказания.

Прополис при туберкулезе, как и иные природные продукты пчеловодства, это эффективное дополнение в комплексном лечении, которое способно повысить иммунную защиту организма, ускорить регенерацию (восстановление), пораженных тканей, облегчить переносимость интоксикации, вызванной обычной терапией химиопрепаратами. 

Содержание: 

  1. Настойка прополиса на спирту 
  2. Водный экстракт 
  3. Прополисное молоко 
  4. Прополис на сливочном масле 
  5. Медово-прополисная смесь 

Общие сведения  

Туберкулез (бугорчатка) известен медицине со времен Авиценны. Проявляется в процессе патологического воздействие на организм микобактерии, названной в честь ее открывателя – палочка Коха. Характеризуется специфическим инфекционным поражением. Развитие основного очага – в органах дыхания. 

На протяжении десятилетий инфекционный патоген научился быстро мутировать в организме, в результате чего, медики отмечают неблагополучную тенденцию проявления различных форм туберкулеза, в особенности его деструктивных форм. Помимо классического поражения органов дыхания, воспалительному поражению могут подвергаться: 

  • кожа и опорно-двигательный аппарат; 
  • нервная и лимфатическая системы; 
  • половые и мочевыделительные органы; 
  • весь организм в целом (милиарный туберкулез). 

Человек со здоровым иммунитетом способен легко справиться с первоначальным очагом инфекции. Но, даже самый здоровый человек не сможет справиться со слишком массивным инфекционным процессом. Промедление, либо неадекватное лечение дают возможность туберкулезу «примерить множество разнообразных масок». 

  1. Проявляясь: повреждением пищеварительных органов с признаками болей в кишечнике, нарушением периодичности испражнений и присутствием в них примесей крови, метеоризмом (вздутие живота) и критически высокой температурой. 
  2. Изолированными очагами поражения костных структур, с перспективой разрушения прилегающих тканей. 
  3. Развитием менингита и формированием туберкулом в тканевой структуре головного мозга. Для патологического процесса характерны: головные боли, нарушение сознания и чувствительности, нестабильность двигательных функций глазных яблок и психики. При поражении черепных нервных структур развивается светобоязнь, сонливость, судороги, нередко – кома. 
  4. Различными формами туберкулеза кожи. Характерная особенность – плотные подкожные узелковые образования, с последующим прорывом из-под кожи и выделением белой творожистой массы. 
  5. Туберкулезным поражением мочеполовых органов, проявляясь признаками кровавых выделений, мутной мочи с кровавыми включениями, частыми и болезненными микциями (мочеиспускание), развитием ноющих болей в нижней зоне живота, образованием болезненного вздутия мошонки с наличием экссудата (у мужчин). 

Лечение туберкулезной инфекции процесс сложный и долгий. Однако использование в терапии заболевания продуктов пчеловодства способно внести существенные коррективы в клинику заболевания, стимулировать действие антибиотикотерапии, одновременно купируя ее негативные последствия. 

Именно прополис, благодаря своим природным антибактериальным свойствам и наличию обширного ряда фармакологических особенностей, способен губительно воздействовать на патогенный возбудитель туберкулеза различной локализации. 

Лечебные свойства прополиса при туберкулезе 

Способность лечебного воздействия прополиса на организм обусловлена насыщенностью его совершенно уникальным природным составом. 

  1. Насыщенность смолами и эфирными маслами обеспечивают антибактериальный и бактерицидный эффект. Дает возможность в комплексе с основным лечением противостоять патогенному воздействию, препятствовать их резистентности (выживаемости), купируя процессы репликации (размножения). 
  2. Богатый состав органических кислот и углеводородов оказывают антисептический эффект, способствует устранению болевой симптоматики и процессам усиленного образования фагоцитарных клеток, способных купировать и выводить из организма чужеродные клетки, укрепляя иммунную защиту. 

Комплексное воздействие аминокислот, флавоноидов, дубильных веществ, витаминных и минеральных комплексов в составе прополиса, способствуют: 

  • укреплению сосудистых стенок, в пораженных туберкулезом тканях; 
  • очищению каверн от сгустков крови и подверженных некрозу тканей; 
  • обеспечению тканевого питания и быстрой регенерации; 
  • устранению воспалительных процессов в наружных и внутренних органах; 
  • выведению токсинов и клеточному обновлению. 

Несмотря на мощный бактерицидный эффект прополиса, его избирательное воздействие на патогены позволяет перорально использовать препараты на его основе без ущерба желудочной и кишечной флоры, что полностью исключает развитие дисбактериоза. 

Первые исследования свойств прополиса датированы 1960 годом. Ученые-исследователи З. X. Каримова, Л. М. Ваинер, Е. И. Радионова и К. И Севастьянова впервые собрали обширную доказательную базу эффективности лечения прополисом пациентов, даже с тяжелыми и запущенными формами заболевания, проведя исследования на базе туберкулезного диспансера. 

Прополис: лекарственные формы при туберкулезе 

В 1962 году, согласно приказу Министерства здравоохранения СССР, прополис официально включен в комплексную терапию туберкулеза, в виде различных лекарственных форм. Основанием послужило экспериментальное подтверждение: 

  • антибактериальной; 
  • обезболивающей; 
  • противовоспалительной; 
  • иммуномодулирующей и антимикробной эффективности пчелиного продукта; 
  • его антитоксических и фагоцитарных (защитных) свойств. 

Для лечения различных форм туберкулеза рекомендованы водные и спиртовые экстракты прополиса, животные и растительные масла, крема и мази на его основе. 

  1. Спиртовые экстракты прополиса (10 – 30% концентрации) предназначены для перорального (внутреннего) приема. Назначаются исключительно при ослабленной клинике течения болезни (в период ремиссии), что обусловлено: возможностью развития раздражающего эффекта при сочетании спирта с антибиотиками, токсического влияния на тканевую структуру печени, снижением фармакологических эффектов специфической терапии. 
  2. Экстракт водный (10-20%) может использоваться в любой период клиники туберкулеза в виде ингаляций. Рекомендован при диагностировании гнойного эндобронхита (поверхностного), либо в случаях обнаружения каверн в легких. 
  3. Внутренний прием животных и растительных масел с прополисом назначается в комплексе с препаратами основной терапии. Курс приема индивидуальный. В среднем – до 2 месяцев. 
  4. Крема на основе пчелиного клея эффективны при болевом синдроме. Втираются, либо используются в виде аппликаций на пораженной области. 

Если четко соблюдать врачебные рекомендации и правила приема лечебных средств с прополисом, положительный исход лечения гарантирован. Следует отметить, что монотерапию пчелиным клеем применяют только в начале развития заболевания. 

Так как признаки туберкулеза часто схожи с иными патологиями, пациенты обращаются к врачу уже в стадии запущенности болезни, либо при ее хронической клинике. В таких случаях, эффективность прополиса возможна, лишь в комплексе с препаратами основной терапии. 

Сегодня можно приобрести любые готовые лекарственные формы с прополисом. Приготовить их можно и самостоятельно, благо существует множество доступных рецептов. Рассмотрим некоторые из них. 

Рецепты домашнего приготовления и приема прополиса

Для приготовления лекарственных средств на прополисе лучше использовать свежий продукт, приобретенный у надежных продавцов. 

Приготовление: 

Настойка прополиса на спирту 

20 гр. измельченного прополиса заливают медицинским спиртом в количестве 80 мл. Оставляют настаиваться в течение 7 дней, взбалтывая емкость каждый день. После процеживания и отстаивания экстракт готов к употреблению. 

Дозировка: принимают внутрь по 20 капель раствора, смешанного с 50 мл. теплого молока за четверть часа до приема пищи. 3 раза в день на протяжении двух месяцев. 

Водный экстракт 

Водный экстракт готовиться способом непрямого контакта раствора с огнем, т.е на водяной бане. Свежий продукт тщательно измельчают при помощи кухонной терки, блендера или кофемолки, зависит от консистенции пчелиной смолы. 10 гр. порошкового прополиса заливают 100 мл. горячей воды в небольшой емкости. Накрывают крышкой, помещают в более широкую емкость с кипящей водой. Оставляют томиться на медленном огне в течении часа, периодически помешивая. После чего, дают остыть, переливают в темную посуду и помещают в прохладное место. 

Дозировка: 20-40 мл. утром, в обед и вечером за 30 мин. до еды. Курс лечения в каждом конкретном случае индивидуальный. В среднем – до года. Каждые 2 месяца – двухнедельный перерыв. 

Экстракт не готовиться из расчета на год. Стоит учитывать срок годности лекарства. Чистый экстракт без осадка сохраняет свои свойства до полутора недель. Если в растворе присутствует осадок – неделя. 

Прополисное молоко

Обоснованность применения молока с прополисом обусловлена способностью наибольшей растворимости в молоке не только его водорастворимых, но и жировых компонентов, что значительно повышает, по сравнению с водным раствором, концентрацию полезных веществ в молочной вытяжке. 

Для приготовления – 0,5 л. молока помещают в эмалированную посуду, ставят на огонь и доводят до кипения. Добавляют 50 г. измельченной пчелиной смолы. Постоянно помешивая нагревают до 70°С в течение 15 минут. Раствор фильтруют и охлаждают. На поверхности остывшей смеси может появиться затвердевший воск. Его необходимо снять, а смесь убрать в холодильник. 

Дозировка: 1 десертная ложка утром и вечером за 30 мин. до приема пиши. Длительность курса индивидуально для каждого конкретного случая. Средняя продолжительность до 3 месяцев. 

Прополис на сливочном масле 

100 гр. сливочного масла помещают в емкость, ставят на слабый огонь и доводят до кипения. В слегка остывшее масло помещают 20 гр. измельченного сырья и тщательно перемешивают. Ставят на медленный огонь на 15 минут. Огонь периодически включают и выключают, чтобы смесь не перегрелась. Готовиться лекарство при постоянном помешивании. После варки смесь процеживают. Если на дне от масла выпал водный осадок, его необходимо слить. Осадок прополиса оставляют. 

Дозировка: суточная доза приема 15 гр. Предварительно растворенное в теплом молоке масло принимают за 1 час до еды на протяжении 2 месяцев. После двухнедельного перерыва, курс повторяют. Минимальная длительность лечения 4-4,5 месяцев. 

Может использоваться, как для внутреннего приема, так и наружно (туберкулез кожи). 

Медово-прополисная смесь 

Данное средство уникально, так как может применяться перорально, наружно и для ингаляций. Клиническая эффективность препарата намного выше, чем у каждого ингредиента по-отдельности. 

10 г. крошки прополиса смешиваются со 100 г. меда. Смесь помещается на водяную баню и прогревается в течение 20 минут при температуре воды 40 - 50°С. Готовую смесь фильтруют и помещают в холодильник. 

Применение: для перорального приема – 0,5 ч. ложки 3р./ день. Для полоскания – смесь 1 :1 разводится кипяченой водой. При поражении слизистых тканей и лимфатической системы – до 3 раз в день 0,5 ч. ложки смеси удерживают во рту до окончательного растворения лекарства. Лечебный курс – от полутора до двух месяцев. 

Прополис: противопоказания 

Какие бы лестные отзыва не звучали о прополисе, следует помнить, что любой препарат имеет свои ограничения и противопоказания. К примеру, у пациентов со склонностью к аллергии на продукты пчеловодства могут проявиться признаки экземы, бронхиальной астмы или крапивницы. В виде ответной реакции организма, возможны кожные высыпания со жгучей и зудящей симптоматикой в сопровождении головных болей и повышения температуры. 

Прополис не является панацеей от туберкулеза. Он стимулирует эффективность основной терапии туберкулеза и выполняет иммуномодулирующую функцию, побуждая организм самостоятельно бороться с болезнью. Не стоит заниматься самолечением. При некоторых сопутствующих заболеваниях (патологиях поджелудочной железы, болезнях почек и печени) масляные вытяжки с прополисом могут быть разрешены в определенных дозировках, как исключение из правил. 

Прополис нативный (натуральный) и настойка прополиса высокого качества по оптимальной цене - купить

Всего комментариев: 0

Прополис при туберкулезе: польза и вред

Полезные свойства прополиса. Рецепты приготовления в домашних условиях. Дозировки. Противопоказания.

Прополис при туберкулезе, как и иные природные продукты пчеловодства, это эффективное дополнение в комплексном лечении, которое способно повысить иммунную защиту организма, ускорить регенерацию (восстановление), пораженных тканей, облегчить переносимость интоксикации, вызванной обычной терапией химиопрепаратами. 

Содержание: 

  1. Настойка прополиса на спирту 
  2. Водный экстракт 
  3. Прополисное молоко 
  4. Прополис на сливочном масле 
  5. Медово-прополисная смесь 

Общие сведения  

Туберкулез (бугорчатка) известен медицине со времен Авиценны. Проявляется в процессе патологического воздействие на организм микобактерии, названной в честь ее открывателя – палочка Коха. Характеризуется специфическим инфекционным поражением. Развитие основного очага – в органах дыхания. 

На протяжении десятилетий инфекционный патоген научился быстро мутировать в организме, в результате чего, медики отмечают неблагополучную тенденцию проявления различных форм туберкулеза, в особенности его деструктивных форм. Помимо классического поражения органов дыхания, воспалительному поражению могут подвергаться: 

  • кожа и опорно-двигательный аппарат; 
  • нервная и лимфатическая системы; 
  • половые и мочевыделительные органы; 
  • весь организм в целом (милиарный туберкулез). 

Человек со здоровым иммунитетом способен легко справиться с первоначальным очагом инфекции. Но, даже самый здоровый человек не сможет справиться со слишком массивным инфекционным процессом. Промедление, либо неадекватное лечение дают возможность туберкулезу «примерить множество разнообразных масок». 

  1. Проявляясь: повреждением пищеварительных органов с признаками болей в кишечнике, нарушением периодичности испражнений и присутствием в них примесей крови, метеоризмом (вздутие живота) и критически высокой температурой. 
  2. Изолированными очагами поражения костных структур, с перспективой разрушения прилегающих тканей. 
  3. Развитием менингита и формированием туберкулом в тканевой структуре головного мозга. Для патологического процесса характерны: головные боли, нарушение сознания и чувствительности, нестабильность двигательных функций глазных яблок и психики. При поражении черепных нервных структур развивается светобоязнь, сонливость, судороги, нередко – кома. 
  4. Различными формами туберкулеза кожи. Характерная особенность – плотные подкожные узелковые образования, с последующим прорывом из-под кожи и выделением белой творожистой массы. 
  5. Туберкулезным поражением мочеполовых органов, проявляясь признаками кровавых выделений, мутной мочи с кровавыми включениями, частыми и болезненными микциями (мочеиспускание), развитием ноющих болей в нижней зоне живота, образованием болезненного вздутия мошонки с наличием экссудата (у мужчин). 

Лечение туберкулезной инфекции процесс сложный и долгий. Однако использование в терапии заболевания продуктов пчеловодства способно внести существенные коррективы в клинику заболевания, стимулировать действие антибиотикотерапии, одновременно купируя ее негативные последствия. 

Именно прополис, благодаря своим природным антибактериальным свойствам и наличию обширного ряда фармакологических особенностей, способен губительно воздействовать на патогенный возбудитель туберкулеза различной локализации. 

Лечебные свойства прополиса при туберкулезе 

Способность лечебного воздействия прополиса на организм обусловлена насыщенностью его совершенно уникальным природным составом. 

  1. Насыщенность смолами и эфирными маслами обеспечивают антибактериальный и бактерицидный эффект. Дает возможность в комплексе с основным лечением противостоять патогенному воздействию, препятствовать их резистентности (выживаемости), купируя процессы репликации (размножения). 
  2. Богатый состав органических кислот и углеводородов оказывают антисептический эффект, способствует устранению болевой симптоматики и процессам усиленного образования фагоцитарных клеток, способных купировать и выводить из организма чужеродные клетки, укрепляя иммунную защиту. 

Комплексное воздействие аминокислот, флавоноидов, дубильных веществ, витаминных и минеральных комплексов в составе прополиса, способствуют: 

  • укреплению сосудистых стенок, в пораженных туберкулезом тканях; 
  • очищению каверн от сгустков крови и подверженных некрозу тканей; 
  • обеспечению тканевого питания и быстрой регенерации; 
  • устранению воспалительных процессов в наружных и внутренних органах; 
  • выведению токсинов и клеточному обновлению. 

Несмотря на мощный бактерицидный эффект прополиса, его избирательное воздействие на патогены позволяет перорально использовать препараты на его основе без ущерба желудочной и кишечной флоры, что полностью исключает развитие дисбактериоза. 

Первые исследования свойств прополиса датированы 1960 годом. Ученые-исследователи З. X. Каримова, Л. М. Ваинер, Е. И. Радионова и К. И Севастьянова впервые собрали обширную доказательную базу эффективности лечения прополисом пациентов, даже с тяжелыми и запущенными формами заболевания, проведя исследования на базе туберкулезного диспансера. 

Прополис: лекарственные формы при туберкулезе 

В 1962 году, согласно приказу Министерства здравоохранения СССР, прополис официально включен в комплексную терапию туберкулеза, в виде различных лекарственных форм. Основанием послужило экспериментальное подтверждение: 

  • антибактериальной; 
  • обезболивающей; 
  • противовоспалительной; 
  • иммуномодулирующей и антимикробной эффективности пчелиного продукта; 
  • его антитоксических и фагоцитарных (защитных) свойств. 

Для лечения различных форм туберкулеза рекомендованы водные и спиртовые экстракты прополиса, животные и растительные масла, крема и мази на его основе. 

  1. Спиртовые экстракты прополиса (10 – 30% концентрации) предназначены для перорального (внутреннего) приема. Назначаются исключительно при ослабленной клинике течения болезни (в период ремиссии), что обусловлено: возможностью развития раздражающего эффекта при сочетании спирта с антибиотиками, токсического влияния на тканевую структуру печени, снижением фармакологических эффектов специфической терапии. 
  2. Экстракт водный (10-20%) может использоваться в любой период клиники туберкулеза в виде ингаляций. Рекомендован при диагностировании гнойного эндобронхита (поверхностного), либо в случаях обнаружения каверн в легких. 
  3. Внутренний прием животных и растительных масел с прополисом назначается в комплексе с препаратами основной терапии. Курс приема индивидуальный. В среднем – до 2 месяцев. 
  4. Крема на основе пчелиного клея эффективны при болевом синдроме. Втираются, либо используются в виде аппликаций на пораженной области. 

Если четко соблюдать врачебные рекомендации и правила приема лечебных средств с прополисом, положительный исход лечения гарантирован. Следует отметить, что монотерапию пчелиным клеем применяют только в начале развития заболевания. 

Так как признаки туберкулеза часто схожи с иными патологиями, пациенты обращаются к врачу уже в стадии запущенности болезни, либо при ее хронической клинике. В таких случаях, эффективность прополиса возможна, лишь в комплексе с препаратами основной терапии. 

Сегодня можно приобрести любые готовые лекарственные формы с прополисом. Приготовить их можно и самостоятельно, благо существует множество доступных рецептов. Рассмотрим некоторые из них. 

Рецепты домашнего приготовления и приема прополиса

Для приготовления лекарственных средств на прополисе лучше использовать свежий продукт, приобретенный у надежных продавцов. 

Приготовление: 

Настойка прополиса на спирту 

20 гр. измельченного прополиса заливают медицинским спиртом в количестве 80 мл. Оставляют настаиваться в течение 7 дней, взбалтывая емкость каждый день. После процеживания и отстаивания экстракт готов к употреблению. 

Дозировка: принимают внутрь по 20 капель раствора, смешанного с 50 мл. теплого молока за четверть часа до приема пищи. 3 раза в день на протяжении двух месяцев. 

Водный экстракт 

Водный экстракт готовиться способом непрямого контакта раствора с огнем, т.е на водяной бане. Свежий продукт тщательно измельчают при помощи кухонной терки, блендера или кофемолки, зависит от консистенции пчелиной смолы. 10 гр. порошкового прополиса заливают 100 мл. горячей воды в небольшой емкости. Накрывают крышкой, помещают в более широкую емкость с кипящей водой. Оставляют томиться на медленном огне в течении часа, периодически помешивая. После чего, дают остыть, переливают в темную посуду и помещают в прохладное место. 

Дозировка: 20-40 мл. утром, в обед и вечером за 30 мин. до еды. Курс лечения в каждом конкретном случае индивидуальный. В среднем – до года. Каждые 2 месяца – двухнедельный перерыв. 

Экстракт не готовиться из расчета на год. Стоит учитывать срок годности лекарства. Чистый экстракт без осадка сохраняет свои свойства до полутора недель. Если в растворе присутствует осадок – неделя. 

Прополисное молоко

Обоснованность применения молока с прополисом обусловлена способностью наибольшей растворимости в молоке не только его водорастворимых, но и жировых компонентов, что значительно повышает, по сравнению с водным раствором, концентрацию полезных веществ в молочной вытяжке. 

Для приготовления – 0,5 л. молока помещают в эмалированную посуду, ставят на огонь и доводят до кипения. Добавляют 50 г. измельченной пчелиной смолы. Постоянно помешивая нагревают до 70°С в течение 15 минут. Раствор фильтруют и охлаждают. На поверхности остывшей смеси может появиться затвердевший воск. Его необходимо снять, а смесь убрать в холодильник. 

Дозировка: 1 десертная ложка утром и вечером за 30 мин. до приема пиши. Длительность курса индивидуально для каждого конкретного случая. Средняя продолжительность до 3 месяцев. 

Прополис на сливочном масле 

100 гр. сливочного масла помещают в емкость, ставят на слабый огонь и доводят до кипения. В слегка остывшее масло помещают 20 гр. измельченного сырья и тщательно перемешивают. Ставят на медленный огонь на 15 минут. Огонь периодически включают и выключают, чтобы смесь не перегрелась. Готовиться лекарство при постоянном помешивании. После варки смесь процеживают. Если на дне от масла выпал водный осадок, его необходимо слить. Осадок прополиса оставляют. 

Дозировка: суточная доза приема 15 гр. Предварительно растворенное в теплом молоке масло принимают за 1 час до еды на протяжении 2 месяцев. После двухнедельного перерыва, курс повторяют. Минимальная длительность лечения 4-4,5 месяцев. 

Может использоваться, как для внутреннего приема, так и наружно (туберкулез кожи). 

Медово-прополисная смесь 

Данное средство уникально, так как может применяться перорально, наружно и для ингаляций. Клиническая эффективность препарата намного выше, чем у каждого ингредиента по-отдельности. 

10 г. крошки прополиса смешиваются со 100 г. меда. Смесь помещается на водяную баню и прогревается в течение 20 минут при температуре воды 40 - 50°С. Готовую смесь фильтруют и помещают в холодильник. 

Применение: для перорального приема – 0,5 ч. ложки 3р./ день. Для полоскания – смесь 1 :1 разводится кипяченой водой. При поражении слизистых тканей и лимфатической системы – до 3 раз в день 0,5 ч. ложки смеси удерживают во рту до окончательного растворения лекарства. Лечебный курс – от полутора до двух месяцев. 

Прополис: противопоказания 

Какие бы лестные отзыва не звучали о прополисе, следует помнить, что любой препарат имеет свои ограничения и противопоказания. К примеру, у пациентов со склонностью к аллергии на продукты пчеловодства могут проявиться признаки экземы, бронхиальной астмы или крапивницы. В виде ответной реакции организма, возможны кожные высыпания со жгучей и зудящей симптоматикой в сопровождении головных болей и повышения температуры. 

Прополис не является панацеей от туберкулеза. Он стимулирует эффективность основной терапии туберкулеза и выполняет иммуномодулирующую функцию, побуждая организм самостоятельно бороться с болезнью. Не стоит заниматься самолечением. При некоторых сопутствующих заболеваниях (патологиях поджелудочной железы, болезнях почек и печени) масляные вытяжки с прополисом могут быть разрешены в определенных дозировках, как исключение из правил. 

Прополис нативный (натуральный) и настойка прополиса высокого качества по оптимальной цене - купить

Всего комментариев: 0

Применение прополиса при туберкулезе легких

Доброе время суток! Меня зовут Халисат Сулейманова - я фитотерапевт. В 28 лет себя вылечила от рака матки травами (больше про мой опыт выздоровления и почему я стала фитотерапевтом читайте здесь: Моя история). Перед тем как лечиться по народным методам описанным в интернете, просьба, консультируйтесь со специалистом и лечащим врачом! Это сэкономит ваше время и деньги, поскольку заболевания разные, травы и методы лечения разные, а есть еще сопутствующие заболевания, противопоказания, осложнения и так далее. Пока добавить нечего, но если Вам нужна помощь в подборе трав и методик лечения, можете меня найти вот по контактам:

Халисат Сулейманова

Страничка Instagram: instagram.com/fitoterapevt1

Телефон:  8 918 843 47 72

Почта: [email protected]

Консультирую бесплатно.

В настоящее время не существует единого мнения о происхождении прополиса. Одни исследователи утверждают, что это ферментированная пчелками смола деревьев, другие — экстракт смолы цветочной пыльцы. Но однозначно, прополис при лечении туберкулеза легких и других заболеваний дает положительные результаты.

Полезные свойства

В древнем Египте переработанное пчелами вещество называли эликсиром жизни. Уникальность прополиса заключается в том, что любой состав будет различным. Это зависит от места обитания пчел и растений, погодных условий, времени года.

Состав смолянистого вещества до конца не изучен и выявлено ценных соединений меньше 50%. Больше 40 флавоноидов хорошо очищают организм от токсинных веществ и тяжёлых металлов, что важно для печени и желудочно-кишечной системы. При распаде бактерии Коха нужно быстрее вывести из организма отходы и в этом помогает прополис. Благодаря феруловой и бензойной кислоте уменьшается рост болезнетворных микробов. Фитонциды и глюкозиды предотвращают развитие злокачественного процесса. Мощные антивирусные и антибактериальные свойства пчелиного клея помогают подавить палочку Коха.

Положительные свойства:

  • обезболивает, обладает противовоспалительным эффектом;
  • укрепляет иммунитет;
  • помогает в лечении сердечных и сосудистых заболеваний;
  • успешно борется благодаря артепилину против бактерий, являющихся причиной рака желудка.

Удивительное свойства пчелиного клея — это сохранение эффективности до нескольких сотен лет.

Рецепты лечения туберкулеза прополисом

От этого легочного заболевания есть не мало хороших и проверенных годами средств, например способствуют выздоровлению капли Дорогова АСД 2 при туберкулезе, подробнее о приеме которых вы сможете узнать перейдя по ссылке. Но особого внимания заслуживает прополис.

Пчелиный клей применяют для лечения в различных формах, но самые эффективные способы лечения употребление внутрь и растирание прополисным маслом, ингаляции и разжевывание пчелиного клея.

Спиртовая настойка

Весьма эффективна настойка прополиса при туберкулезе легких приготовленная на спирту. Средство необходимо заморозить, в таком состоянии оно хорошо крошится. Затем измельчить и на 10 г пчелиного клея добавить 100 мл спирта. Выдержать настойку 14 дней. Рекомендуется употреблять с молоком по 2 ст.л. 5 раз за день

Водная настойка

Средство готовится на водяном пару, для этого поставить маленькую кастрюльку в большую емкость с водой. В маленькую емкость налить 100 мл воды и положить 10 г измельченного прополиса, выдержать на плите настойку час. Употреблять по 2 ст.л. за час до еды. Продолжительность терапии 10 месяцев с двухнедельным перерывом каждые 2 месяца.

Настойка в термосе

Измельченный прополис положить в термос и налить теплой ранее кипяченой воды, выдержать состав сутки.  Хранить можно несколько дней в холодильнике. Пропорция компонентов как в спиртовой настойке.

Простые способы лечения сложных заболеваний:

Компресс

Для компресса достаточно намочить хлопчатобумажный материал или марлевую ткань в водной настойке и приложить на грудь. Время процедуры 25 минут.

Кроме компресса можно сделать лепешку. Нагреть немного пчелиного клея и раскатать как блин, поместить на грудь на несколько минут.

Прополисное масло

20 г измельченного пчелиного клея соединить с 200 г масла. Масло и прополис предварительно поставить на водяной пар, выдержать состав 30 минут, периодически мешая. Когда остынет смесь добавить 2 ст.л. меда. Затем процедить и хранить в прохладном месте.

Ингаляции

В ингалятор сложить 40 г пчелиного воск и 60 г клея. Вдыхать пары в течение 15 минут на протяжении двух месяцев дважды в день.

Как принимать прополис с молоком от туберкулеза

1 л натурального молока налить в ёмкость, поставить на огонь и довести до кипения. Добавить 100 г измельченного прополиса. Необходимо чтобы клей полностью растворился, затем профильтровать через марлевую ткань и дать настояться, чтобы собрать слой воска. Употреблять трижды в сутки по 100 мл за час до приема пищи продолжительностью 2 месяца с недельным перерывом.

Молоко с овсом

К 500 г овса налить 2 л козьего молока и варить на огне пока объем не уменьшится в 2 раза. Профильтровать состав и добавить 5 г пчелиного клея. Употреблять по 40 мл через каждые 3 часа.

Средство для полоскания

Потребуется 40 капель 10% настойки прополиса и 1 ст. л. зверобоя. Приготовить отвар зверобоя и профильтровать. Затем соединить с прополисной настойкой. Полоскать средством ротовую полость в течение двух недель после еды. Можно просто жевать кусочек клея несколько раз в сутки.

Можно ли употреблять настойку прополиса при туберкулезе: заболевание относится к серьезной патологии организма и бактерии могут выработать устойчивость к лекарственным препаратам, но не к прополису, так как он оказывает комплексное укрепляющее действие на организм.

Средства на основе прополиса не имеют особых противопоказаний, не вызывают побочных действий и удобны в применении. Кроме того настойку на воде и масло можно давать детям.

Осторожность следует соблюдать тем лицам, у которых следующие заболевания:

  • астма;
  • аллергический ринит;
  • дерматит;
  • острые патологии печени.

Здоровья Вам!

Полезные статьи:

Лечение туберкулеза легких прополисом

Лечение туберкулеза легких процесс долгий и сложный, однако продукты пчеловодства способны существенно изменить течение  болезни и усилить действие антибиотиков, одновременно купируя вредные последствия от них.

Сегодня я расскажу Вам, как используется прополис для лечения туберкулеза легких.

Прополис — один из немногих природных антибиотиков, губительно действующий на возбудителя туберкулеза — палочку Коха. По силе и направленности фармакологических эффектов прополис занимает ведущее место среди продуктов пчеловодства для лечения туберкулеза любой локализации.

Лечение туберкулеза легких прополисом необходимо совмещать с медикаментозными лечебными средствами. Использовать желательно свежий прополис, приобретать его лучше всего в специализированных  интернет магазинах или у добросовестных пасечников. Собирают прополис после основного медосбора, в конце лета.

Состав прополиса

Почему лечение туберкулеза легких прополисом настолько эффективно? Это определяется набором веществ, которые входят в состав прополиса:

  • Эфирные масла, воски – оказывают противомикробное, противовирусное, ранозаживляющее воздействие.
  • Флавоноиды – биологически активные вещества, оказывающие противомикробное и ранозаживляющее действие.
  • Таниды – дубильные вещества, обладающие вяжущим свойством, оказывающие противовоспалительное действие и способствующие восстановлению тканей.
  • Терпены – углеводороды, содержащиеся в деревьях смолистых пород и некоторых растениях, оказывают ярко выраженный противогрибковый эффект.
  • Аминокислоты – основной строительный материал растительных и животных белков (аргинин, аланин, гистидин, лейцин, метионин, тирозин, триптофан, цистин и т. д.).
  • Органические кислоты, убивающие бактерии и уменьшающие болевые ощущения (коричная, бензойная и т. д.).
  • Витамины A, Е, группы В, активно воздействующие на обмен веществ в организме человека.
  • Минералы, входящие в состав клеток всех органических тканей (калий, натрий, кальций, магний, сера, фосфор, железо, цинк, медь, марганец, кремний, кобальт, фтор, селен и т. д.).
  • Микроэлементы – медь, железо, марганец, кобальт, цинк, и выделения слюнных желез пчел.

Итак, прополис:

  • Имеет антибактериальные, антимикробные, противовоспалительные и обезболивающие свойства;
  • Повышает защитные силы организма;
  • Обладает антитоксичным эффектом и хорошо переносится организмом человека.

Лечение туберкулеза легких прополисом в комплексе с настойкой восковой моли и другими продуктами пчеловодства многократно эффективнее, чем лечение только антибиотиками.

Применение прополиса при туберкулезе легких

Применять прополис внутрь можно в виде экстракта, прополисного масла или же спиртовой настойки. Внешне используют как мазь.

  • Спиртовые экстракты 10-20-30% внутрь. Применяется только в периоде ремиссии, так как содержащийся в нем спирт может давать раздражающий эффект, а при сочетании с антибактериальными препаратами спирт может оказывать токсическое воздействие на ткань печени.
  • Водный экстракт прополиса 10-20%, в отличие от спиртового экстракта, может применяться, как в период ремиссии, так и в период обострения, так как не содержит спирта. Может применяться в виде ингаляций при сопутствующем гнойном эндобронхите и наличии каверны в легком;
  • Прополис на животном или растительном масле — внутрь 1-2 месяца, запивая 1 стаканом горячего молока;
  • Кремы, содержащие прополис, втираются или наносятся аппликационно на область грудной клетки при болевом синдроме.

Рецептов с использованием прополиса великое множество. Если медикаментозное лечение туберкулеза легких не приносит облегчения, то прополис способен положительно повлиять на исход лечения, причем это происходит не только при туберкулезных заболеваниях легких и бронхов, но и при туберкулезе лимфатических узлов, почек, кишечника и т.д.

Рецепт №1

Прополисная вода

Взять свежий прополис и приготовить водный раствор при температуре 90 градусов, то есть, не доводя до кипения. На 100 мл. воды берется 10 грамм прополиса. Если необходимо большее количество водного раствора прополиса, то дозы увеличиваются пропорционально. Желательно готовить столько водного прополиса, сколько вы можете использовать в течение срока хранения (10 дней)

В этом рецепте понадобится водяная баня. Можно использовать специальную кастрюлю для заваривания трав на водяной бане. Можно воспользоваться двумя кастрюлями. Одна должна быть больше другой, так чтоб малая кастрюлька помещалась в большую кастрюлю.

  • В большую кастрюлю наливаем воду, на дно ее кладем тряпочку или подставку под горячее и ставим на огонь. Вода в ней должна закипеть.
  • В малую кастрюлю наливаем 100 мл. воды и добавляем 10 грамм измельчённого прополиса. Маленькую кастрюлю закрываем крышкой и помещаем в большую кастрюлю с кипящей водой.
  • Водную суспензию прополиса периодически помешиваем деревянной палочкой.
  • Держим кастрюлю на водяной бане около часа, потом кастрюльку достаем, раствору даем остыть при комнатной температуре.
  • Полученный водный экстракт прополиса переливаем в посуду из темного стекла. Храним в темном, прохладном месте, можно в холодильнике. Без осадка водный прополис хранится 7-10 дней, если появился осадок — 5-7 дней.

Полученная жидкость более насыщенная, желто-коричневого цвета с приятным запахом прополиса.

Принимать по 1-2 ст. л. за час до еды 3-4 раза в день. Курс лечения 4-10 месяцев. Через 2 месяца делают перерыв на 2 недели.

Рецепт №2

Спиртовая настойка:

Прополис —20 грамм

Спирт-ректификат — 80 грамм

Измельченный прополис залить спиртом-ректификатом и настаивать в течение недели, периодически взбалтывая. После процеживания через марлю и отстаивания, настой принимать внутрь по 20 капель с молоком или водой за 30 минут до еды, 3 раза в день в течение 2 месяцев.

Чтобы не возникло проблем с желудком, применять лучше с теплым молоком.

Рецепт №3

Прополисное молоко:

Один литр свежего цельного молока (желательно  деревенского, а не из магазина) кипятят. В кипящее молоко кладут измельченный порошок прополиса: на один литр молока рекомендуется 50-100 граммов. Далее смесь молока с прополисом прогревают до 70-80 градусов по Цельсию при постоянном помешивании в течение 8-10 минут, пока прополис не растворится. Полученное таким образом прополисное молоко фильтруют через несколько слоев марли. Этот напиток имеет горьковатый вкус и бурый оттенок. У остывшего молока рекомендуется снять слой образовавшегося воска, который можно будет потом применить в косметологии.

Эту смесь принимают в течение 1-2 месяцев, с перерывом  одну-две недели. Пьют это молоко три раза в день по полстакана, добавляя в стакан чайную ложку прополисного масла, за один час до еды или после полутора часов после принятия пищи.

Рецепт №4

Прополисное масло

Прополис — 10 грамм

Масло коровье — 100 грамм

К коровьему маслу, помещенному в эмалированную посуду, нагретому до 50-60 °С, добавить измельченный прополис. Полученную смесь нагреть до 70°С и выдержать при этой температуре в течение 8-10 минут при непрерывном помешивании. Затем профильтровать через один слой марли.

После охлаждения отфильтрованную массу смеси принимать по 1 ч. ложке 2-3 раза в день за 1-1,5 часа до еды с теплым молоком в течении 2-х месяцев.

После 2-3-недельного перерыва лечение туберкулеза легких по этому рецепту при необходимости повторить с увеличением нормы прополиса каждый последующий раз на 5 грамм, доводя ее до 30 грамм.

Во время лечения больному следует воздерживаться от половой жизни.

Рецепт №5

Прополисное масло с овсяным молоком

Сложить в большую эмалированную кастрюлю 50 г прополиса, 25 г мумие, 25 г сосновой живицы, 100 мл. сока алоэ и 0,5 кг. сливочного масла. Растопить смесь на медленном огне и тщательно перемешать, избегая закипания. Когда смесь полностью остынет, добавить 250 мл. меда, снова перемешать и убрать его на неделю, на нижнюю полку холодильника, пусть настоится.

Принимать прополисное масло по 1-2 ст. л. за час до еды 3-4 раза в день.

Прополисное масло запивать стаканом молока, выпаренном на овсе. Курс лечения 4-10 месяцев. Через 2 месяца приема делают перерыв на 2 недели.

Молоко, выпаренное на овсе

Овес выбирайте неочищенный, органический. 300 грамм овса перебрать от мусора, хорошо промыть и высыпать в 3-4-х литровую алюминиевую кастрюлю, влить 1,5 литра молока (желательно домашнего, в идеале, парного), поставить в духовку, нагретую до 80 С на 1,5-2 часа, чтобы выпарилась половина молока. Затем процедить через ситечко, должно получиться 700 грамм. Молоко выпаривать ежедневно свежее.

Рецепт №6

Полоскание:

Прополис (10-20% спиртовая настойка — 40 капель)

Зверобой (трава) — 1 ст. ложка

В эмалированной посуде траву зверобоя заварить 1 стаканом крутого кипятка, настаивать в течение 15-20 минут и профильтровать. К жидкой части настоя зверобоя добавить спиртовую настойку прополиса.

Полученной смесью делать полоскание по 0,5 стакана на одно полоскание, 2-3 раза в день после еды в течение 10-15 дней.

Рецепт №7

Ингаляция

Прополис — 60 грамм

Воск пчелиный — 40 грамм

Прополис и воск поместить в эмалированную посуду и поставить ее в более широкую металлическую посуду с кипящей водой.

Прополис и воск растворяются, а больной, сидя рядом, дышит лечебными парами. Ингаляции проводят по 10–15 минут утром и вечером в течение 1–2 месяцев в зависимости от степени заболевания.

Рецепт №8

Ингаляции из прополиса:

Для этого берут маленький кусочек прополиса, кладут его в небольшое количество воды в кастрюльке (можно заменить настоем дубовой коры). Эту смесь прогревают на водяной бане. Наклоняются над кастрюлькой, накрываются полотенцем и дышат в течение 15-20 минут.

Рецепт №9

Прополис детям

Прополис детям назначается с профилактической и лечебной целью. Показания и противопоказания такие же, как и у взрослых. Особенностью является то, что для детей лечение туберкулеза легких лучше проводить водным экстрактом прополиса, а при назначении спиртового экстракта пользоваться концентрацией не более 10%. Для приема внутрь детям предпочтительнее рекомендовать прополисное масло.

Считается, что единовременный прием прополиса детям не должен превышать 10 дней, после 10 дней эффективность проводимой терапии снижается. Перерыв в приеме должен быть не меньше 2-х недель.

Доза настойки прополиса или прополисной воды для детей — 1/20 дозы взрослого на год жизни ребенка, после 10 летнего возраста — 1/2 дозы взрослого.

Прополисное масло детям — по 1 чайной ложке обязательно в теплом виде за полчаса до завтрака и перед сном. Запивать молоком, выпаренном на овсе.

Лечение туберкулеза легких — рекомендации

Панацея от болезней, если и существует, то только одна — ваше желание быть здоровыми. Поэтому, используйте лечебные дары природы, но не забывайте о том, что жить нужно в согласии с ее законами.

Скорейшему выздоровлению способствует отказ от спиртных напитков, табачных изделий, а также избегание переохлаждения организма. Необходимо также внести изменения в питание.

Рекомендуется употреблять такие продукты:

  • Кипяченое коровье молоко, его можно пить в неограниченных количествах.
  • В летний период есть большое количество винограда.
  • Начать прием рыбьего жира.
  • Ввести в меню как можно большее количество белокочанной капусты.

Противопоказания

Основным противопоказанием является наличие аллергической реакции на продукты пчеловодства, а также склонность к возникновению аллергических заболеваний, таких как экзема, бронхиальная астма, крапивница и т.п. Аллергия может проявиться в виде высыпаний на коже, зуда, жжения, повышения температуры, головной боли, общей слабости организма.

Для предупреждения возникновения побочных эффектов, лечение туберкулеза легких прополисом  следует начинать с малых дозировок, и только при отсутствии симптомов непереносимости прополиса можно проводить полный лечебный курс. При появлении аллергической реакции необходимо прекратить использовать прополис и принять противогистаминные препараты.

 

 

ХОТИТЕ ПОЛУЧАТЬ НОВЫЕ СТАТЬИ БЛОГА?

Введите Ваши данные в поля формы, и Вы будете получать от меня проверенную информацию о пчелопродуктах

Вы успешно подписались на новые статьи блога

Что-то пошло не так 🙁 Попробуйте еще раз

Лечение туберкулеза легких народными средствами | Пчеловод Владимир

Лечение туберкулеза легких народными средствами: восковая моль и продукты пчеловодства

Чрезвычайно полезными для здоровья человека является не только мед, но и другие продукты пчеловодства такие как перга, прополис, маточное и трутневое молочко, забрус, сотовый мед, настойка восковой моли, пчелиная обножка, воск и пчелиный яд. Но редко какой врач назначает при лечении туберкулеза легких именно эти продукты.

Почему такие пчелопродукты, как восковая моль, которые применяли издавна наши предки, незаслуженно забытые? Это объясняется просто, рекламой пропагандируется употребление фармацевтических (химических) препаратов, ведь фармацевтика – это большой бизнес, приносящий владельцам сверхприбыли.

Я занимаюсь пчеловодством уже более 40 лет. За это время, общаясь со своими покупателями продуктов пчеловодства, получил много положительных отзывов об их лечебном воздействии. Хочу поделиться этой информацией с читателями моего сайта. Особенно поразило меня большое количество заболеваний в Украине на туберкулез легких. Мои покупатели, для профилактики и лечения туберкулеза народными средствами потребляли пчелопродукты, делились со мной информацией о том, что им помогло. Профилактика и лечение туберкулеза легких на основе анализа их информации и собственных наблюдений предусматривает:

Первое. Употреблять продукты пчеловодства, так как они являются мощными природными иммуностимуляторами, которые повышают защитные силы и сопротивляемость организма человека к различным заболеваниям.

Второе. Для лечения туберкулеза легких неободимо употреблять экстракт личинок восковой моли, ведь именно она борется с туберкулезной палочкой Коха. Лечение туберкулеза легких и лечебное воздействие восковой моли на пациента подтвердили ученые-медики И.И. Мечников и С.А. Мухин. И.И. Мечников предложил научную гипотезу о том, что многие болезнетворные вирусы и бактерии имеют защитную оболочку, которая по своим свойствам напоминает воск, который является устойчивым к химическим воздействиям. Для восковой моли воск –это основной продукт  питания, который она расщепляет своими пищеварительными ферментами. Аналогичном воздействию подвергаются болезнетворные вирусы и бактерии. Как результат – они становятся безвредными. В препарате присутствуют компоненты, стимулирующие рост и размножение клеток; способствуют заживлению туберкулезных каверн в легких в период. после болезни.

Экстракт личинок восковой моли обладает выраженным защитным действием на органы дыхания, улучшает дренажную функцию бронхов (муколитический, противовоспалительный, бронхорасширяющий эффект) и поэтому лечение туберкулеза, бронхита, бронхиальной астмы, аллергии, пневмонии становиться очень эффективны. В педиатрии экстракт применяется в лечении бронхолегочных заболеваний, в том числе и с астматическим компонентом. У больных нормализуются показатели крови, параметры иммунной системы. При применении препарата наступает быстрое и заметное улучшение состояния здоровья, устранение бронхоспазмов, исчезновение хрипов, нормализация показателей общего анализа крови (уровня эритроцитов, содержания гемоглобина и ретикулоцитов), газового состава и кислотно-щелочного равновесия, спирометричних показателей, повышение осмотической резистентности эритроцитов.  (Подробнее см. http://medperga.com.ua/ru/voskovaya-mol-0/).

Третье. Вместе с восковой молью, для лечения туберкулеза народными средствами необходимо потреблять также натуральный антибиотик – прополис в двух вариантах: натуральный (маленькую щепотку приклеить к десне в ротовой полости на трое суток) и настойку спиртовую прополиса. 20-40 капель настойки добавляют к теплому молоку или  к воде и принимают три раза в день за 60-90 минут до еды. Прополис действует как антибиотик, способствует заживлению язв и эрозии, ликвидирует воспалительные процессы, выводит токсины (подробнее см. http://medperga.com.ua/ru/propolis/).

Четвертое. Для лечения туберкулеза легких вместе с восковой молью и прополисом следует употреблять пергу, которая существенно влияет на работу сердечно-сосудистой системы. Благодаря калию, который есть в перге улучшается работа сердечной мышцы, нормализуется обмен веществ и выведение токсинов. Курс потребления перги (60-100 г) следует принимать 3 – 4 раза в день по 2 – 4 г. (подробнее см. http://medperga.com.ua/ru/perga/).

Пятое. Лечение туберкулеза народными средствами для достижения положительного и стабильного результата предусматривает потребление этих продуктов в течение 1 – 1,5. Первые признаки улучшения здоровья (стабилизация температуры до нормы и отсутствие кашля), при использовании моих рекомендаций, наступают уже через пять дней.

Еще не менее важное. Психологическое состояние человека, нужно верить и бороться с болезню. Надо активно жить, наслаждаться жизненными радостями и стремиться  к счастливому будущему.

А потому желаю Вам потреблять качественные пчелопродукты и будьте здоровы!

Заказать экстракт восковой моли СЕЙЧАС!

Информация от клиентов:

17.10.2010 г. Информация от больного туберкулезом. Олег, Донецк. Запущенная форма туберкулеза легких. Лечился настойкой восковой моли плюс прополисом в двух вариантах. Лечением туберкулеза был доволен. Улучшилось настроение и аппетит. Начал набирать вес. Шутя в телефонном разговоре сказал: «а я уж собирался умирать». Через определенный период указанные лекарства иссякли и п. Олег решил вернуться к фармацевтическим препаратам. Состояние здоровья значительно ухудшилось. Позвонил. Вновь просил прислать ему настойку восковой моли.

17.10.2010 г. Информация от больного туберкулезом. Татьяна, Волынская обл. Лечится настойкой восковой моли. Прополис использует в довольно оригинальной форме. А именно: пропитала на водяной бане измельченный прополис одежду (жилет), в которой спит. Настроение хорошее. Лечением туберкулеза легких довольна. Вновь просила прислать ей настойку восковой моли. Проанализируем этот вариант использования прополиса. По моему мнению, если использовать прополис через ротовую полость, лечебный эффект должен быть большим. Почему? Находясь в ротовой полости часть испарений прополиса попадает в легкие. Далее, попадая в органы пищеварения, проходит процесс всасывания в организм. Это всасывания на мой взгляд более эффективно, чем через кожу при использовании пропитанной прополисом жилетки. Не возражаю против использования одновременно прополиса этих двух вариантов. Думаю, что лечебный эффект усилится.

Обратите внимание. п. Татьяна ищет методы влияния на болезнь, борется, верит в свое выздоровление. Это очень важно. Лечение туберкулеза легких, результат и скорость выздоровление также сильно зависят от Вашего психологического состояния.

Прополис и лечение туберкулеза различных форм. Исседования

ПРОПОЛИС В ЛЕЧЕНИИ ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ И БРОНХОВ

Положительные данные, полученные (З. X. КАРИМОВА, К. И СЕВАСТЬЯНОВА и Л. М. ВАИНЕР, 1960) и другими авторами (И. М. РАБИНОВИЧ, 1960; B. П. КИВАЛКИНА, 1964; 3. Г. ЧАНЫШЕВ, 1960) об антимикробном действии прополиса на различные типы микобактерий туберкулеза, а также его нетоксичность, побудили провести наблюдения над действием этого препарата у группы больных в туберкулезной больнице и амбулаторно.

В ходе исследования, прошли наблюдения над 147 больными: 109 из них были больны туберкулезом легких и бронхов, 16 - туберкулезным мезаденитом, 11 - бронхоаденитом и 12 - туберкулезом почек. Больных в возрасте от 6 до 50 лет лечили в условиях стационара республиканского противотуберкулезного диспансера (40 человек) и амбулаторно (107 человек).

Больные туберкулезом легких имели следующие формы: фиброзно-кавернозный (50 человек, из которых у 8 обнаружен и туберкулез бронхов), гематогеняо-диссеминированный (40 человек, у 2 - туберкулез бронхов), очаговый туберкулез (10), инфильтративно-шеиманический туберкулез легких (111), и больные бронхо-лимфоаденитами (26 человек). У всех легочных больных были обнаружены микобактерии туберкулеза (БК) в мокроте.

Прополисом в основном лечили больных с запущенными формами туберкулеза легких. Обычно применяемые в этих случаях препараты не оказали желаемого эффекта, или же больные не могли их переносить вследствие повышенной чувствительности к ним.

Препараты прополиса больные получали 3 раза в день за час до еды. Одна группа получала только прополисовое масло (73 человека), другая - прополис в виде водно-спиртового раствора (20), третья - препарат прополиса и антибактериальные препараты (32) и четвертая группа - антибактериальные препараты и сливочное масло без прополиса. В зависимости от тяжести и формы заболевания лечение продолжалось от 4 до 10 месяцев и более.

Из 107 амбулаторных больных 101 человек лечилоя только прополисом, 6, кроме того, принимали антибактериальные препараты, но в небольшом количестве и кратковременно, и в основном, в перерывах между приемами прополиса.

Из 107 амбулаторных больных 53 принимали большое количество антибактериальных препаратов, которые не дали должного эффекта, 12 больным антибактериальные препараты нельзя было назначать, так как они оказывали нежелательное действие на весь организм.

У 50 больных с фиброзно-кавернозной формой туберкулеза, леченных 15%-ным прополисовым маслом (30) и 20%-ным водно-спиртовым раствором прополиса (20) наступило улучшение общего состояния: снизилась температура, РОЭ, прекратились кровохаркание, кашель и выделение мокроты, боли в груди, появился аппетит, нормализовался сон.

У 19 больных, принимавших прололисовое масло, каверны закрылись к 4-10 месяцу лечения.

Из 20 больных, получавших спиртовый раствор прополиса, полное закрытие каверны наступило лишь у двух, у остальных же они значительно уменьшились в размере, рассосались инфильтративные и очаговые наслоения вокруг каверны, исчезли все симптомы туберкулезной интоксикации, улучшилось общее состояние больного, стало возможным применить к ним оперативное вмешательство.

Из 40 больных с диссеминированньвм туберкулезом легких 27 лечили прополи-совьгм маслом и 13 - спиртовым раствором прополиса. В результате у 33 больных значительно уменьшились очаги диссеминации, а у 7 объективные данные остались без изменения.

У 21 больного с очаговыми инфильтративно-пневмоническими формами туберкулеза легких, наряду с улучшением общего состояния, наблюдалось обратное развитие туберкулезного процесса. Нужно однако отметить, что 5 человек наряду с прополисовым маслом лечились и антибактериальными препаратами. У нас создалось впечатление, что у этих больных применение прополиса ускорило рассасывание пораженного очага.

Все больные бронхо- и лимфоаденитами (26 человек) в возрасте от 6 до 20 лет лечились амбулаторно и получали 15%-ное прополисовое масло. Двое, имевшие ювищи, кроме того, применяли прополис, приготовленный на химически чистом жидком вазелине. У всех больных получен хороший эффект.

У 12 больных с кавернозным туберкулезом почек длительное лечение антибактериальными препаратами не дало положительного эффекта. Пяти из них предлагали оперативное вмешательство, от которого они отказались. Лечение прополисовым маслом привело к их клиническому излечению.

С апреля 1968 г. мы начали применять интратрахеально 10%-ный водный экстракт прополиса у туберкулезных больных при апецифическом поражении бронхов, которое констатировали методом бронхоскопии.

Водный экстракт прополиса готовили непосредственно перед применением: в огнеупорную стеклянную колбу наливается 100 мл дистиллированной воды и насыпается 10 г мелко нарезанного высококачественного прополиса и в водяной бане при 100° экстрагируется в течение одного часа при постоянном помешивании. По истечении часа смесь фильтруется через тонкий слой ваты, вложенной в воронку, в стеклянный сосуд. Готовый препарат имеет мутноватый светло-коричневый цвет, до применения хранится в рефрижераторе при 4°.

У четырех пациентов бронхоскопией констатировали инфильтративный туберкулез главного бронха справа продуктивного характера, у двух - такой же характер процесса слева, у шести - инфильтративно-язвеяный туберкулез нижнедолевого бронха справа продуктивного характера и инфильтративный туберкулез слизистой шпоры продуктивного характера - у 2 больных.

Вливания проводили на фоне антибактериального лечения через день. После предварительной анестезии гортани 1%-ным раствором дикаина вводили 5 мл водного экстракта прополиса. Всего больным было проведено от 25 до 38 вливаний. Пяти больным после 15 вливаний продолжили лечение водным экстрактам прополиса в виде аэрозоля. В результате у всех больных в течение 2-3 месяцев произошло гладкое заживание специфических поражений бронхов, то есть гораздо быстрее, чем при вливании антибактериальных препаратов. Следует отметить, что один из больных в течение последних двух лет страдал постоянным кровохарканьем. Приведем некоторые данные из истории болезни этого больного.

Больной М., 32 лет болен фиброзно-кавернозным туберкулезом с 1958 г., неоднократно лечился в стационаре. Получил большое количество антибактериальных препаратов. Лечился бессистемно, и процесс в легких периодически обострялся. С конца 1966 г. у него появилось кровохарканье в виде примеси к мокроте в небольшом количестве. Периодически кровохарканье усиливалось. Гемостатические средства оказались малоэффективными. Больному в начале апреля 1968. г. были начаты интратрахеальные вливания 10%-ного водного экстракта прополиса. После 10 вливаний кровохарканья у больного прекратились и более не возобновлялись.

Предварительные данные применения 10%-ного водного экстракта прополиса при туберкулезе легких, осложненном туберкулезом бронхов, дают возможность судить о положительном его влиянии.

Обобщая полученные данные, следует отметить, что прополис является хорошим дополнением в общем комплексе лечения больных, страдающих туберкулезом легких, бронхов, лимфоузлов и почек, способствует снятию ряда токсических проявлений туберкулеза, рассасыванию очаговых и инфильтративных наслоений и исчезновению БК.

При непереносимости антибактериальных препаратов, а также явлений устойчивости возбудителя к этим препаратам, применение прополиса может благоприятно повлиять на улучшение общего состояния больных в течение заболевания.

В статье использованы издания:

КАРИМОВА З. X., СЕВАСТЬЯНОВА К. И., ВАИНЕР Л. М., 1960 - Каз. мед. журнал № 1, стр. 71.

КИВАЛКИНА В. П., 1964 - Докторская диссертация.

РАБИНОВИЧ И. М., 1960 - В кн. : 2-я Лемингр адская научн. конф. по применению продуктов пчеловодства в медицине и ветеринарии.

ЧАНЫШЕВ З. И., 1960 - В кн. : 2-я Ленинградская научн. конф. по применению продуктов пчеловодства в медицине и ветеринарии.

ПРИОБРЕСТИ свежий ПРОПОЛИС в интернет магазине CLEVER-MED.COM

ПРИОБРЕСТИ ЭКСТРАКТ ПРОПОЛИСА на спирту http://clever-med.com/product/nastoyka-propolisa-s...

Исследование противотуберкулезного потенциала отдельных компонентов прополиса с использованием метода молекулярного докинга

, # 1 , # 2, 5 , 3 и 4

Али Мохаммад Тухин

1 Департамент биохимии и молекулярной биологии, Университет Дакки, Дакка, Бангладеш

Наталия Бличарска

2 Колледж Виктории, Университет Торонто, Торонто, Канада

5 Текущий адрес: Департамент фармацевтики и Биологическая химия, Школа фармацевтики UCL, Лондон, Великобритания

Джамил А.Шилпи

3 Фармацевтическая дисциплина, Школа естественных наук, Университет Кхулна, Кхулна, Бангладеш

Вероник Зайдель

4 Исследовательская группа по открытию лекарств из натуральных продуктов, Институт фармацевтики и биомедицинских наук Стратклайд, Университет Стратклайда, Глазго, Великобритания

1 Кафедра биохимии и молекулярной биологии, Университет Дакки, Дакка, Бангладеш

2 Колледж Виктории, Университет Торонто, Торонто, Канада

3 Фармацевтическая дисциплина, Школа естественных наук, Университет Хулна, Кхулна , Бангладеш

4 Natural Products Drug Discovery Research Group, Strathclyde Institute of Pharmacy and Biomedical Sciences, Strathclyde Institute of Pharmacy and Biomedical Sciences, University of Strathclyde, Glasgow, UK

5 Нынешний адрес: Департамент фармацевтической и биологической химии, Школа фармацевтики UCL, Лондон , UK

Автор, ответственный за переписку.

# Распространяется поровну.

Поступило 26.01.2018 г .; Принято 26 июня 2018 г.

Открытый доступ Эта статья находится под международной лицензией Creative Commons Attribution 4.0, которая разрешает использование, совместное использование, адаптацию, распространение и воспроизведение на любом носителе или любом формате при условии, что вы надлежащим образом укажете оригинал Автор (ы) и источник предоставляют ссылку на лицензию Creative Commons и указывают, были ли внесены изменения. Изображения или другие материалы третьих лиц в этой статье включены в лицензию Creative Commons для статьи, если иное не указано в кредитной линии для материала.Если материал не включен в лицензию Creative Commons для статьи и ваше предполагаемое использование не разрешено законодательными актами или превышает разрешенное использование, вам необходимо получить разрешение непосредственно от правообладателя. Чтобы просмотреть копию этой лицензии, посетите http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/. Эта статья цитируется в других статьях PMC.
Дополнительные материалы

Дополнительная информация

GUID: AD7FA194-9DCF-4BDA-A733-7D779A37975E

Таблица S1

GUID: 35342553-6519-4B70-86B3-77619F27F804

Таблица E

Таблица E

GUID -42B3-A145-1E11E33C121A

Таблица S3

GUID: 55D79DF2-7D6E-4581-8580-06DF853939CA

Резюме

Туберкулез человека (ТБ), вызываемый микобактериями туберкулеза, ведущая бактериальная болезнь во всем мире и срочно необходимы новые противотуберкулезные препараты.Природные средства правовой защиты уже давно играют важную роль в медицине и продолжают служить вдохновляющими моделями для разработки лекарств. Прополис, вещество, вырабатываемое пчелами естественным путем при сборе растительных смол, используется в народной медицине из-за его полезного противотуберкулезного действия. В этом исследовании мы использовали подход молекулярной стыковки для изучения взаимодействия между выбранными составляющими прополиса и четырьмя «лекарственными» белками, участвующими в жизненно важных физиологических функциях в M . tuberculosis , а именно Mt PanK, Mt DprE1, Mt PknB и Mt KasA.Оценка стыковки лигандов по отношению к каждому белку была рассчитана для оценки свободной энергии связывания, причем наилучшая оценка стыковки (наименьшее значение энергии) указывает на наивысшее предсказанное сродство лиганд / белок. Также были изучены специфические взаимодействия, чтобы понять природу межмолекулярных связей между наиболее активными лигандами и остатками сайта связывания белка. Лигнан (+) - сезамин показал лучший результат стыковки с Mt, DprE1 (-10,7 ккал / моль), в то время как пренилированный флавоноид изонимфаеол D сильно стыковался с Mt KasA (-9.7 ккал / моль). Оба соединения продемонстрировали более высокие показатели стыковки, чем контрольные ингибиторы, и представляют собой потенциально интересную основу для дальнейшей биологической оценки in vitro и разработки противотуберкулезных препаратов.

Введение

Туберкулез человека (ТБ), вызываемый Mycobacterium tuberculosis , является основной причиной смерти во всем мире от одного инфекционного агента. По оценкам, в 2016 году 10,4 миллиона человек заболели активной формой туберкулеза, что привело к 1.7 миллионов смертей. Заболеваемость туберкулезом особенно высока в развивающихся странах, где ВИЧ / СПИД и малярия ложатся тяжелым бременем на системы здравоохранения. Лечение туберкулеза - длительный процесс, включающий сложные схемы приема лекарств, с побочными эффектами и взаимодействием, и связанный с плохим соблюдением пациентом режима лечения. Это привело к появлению штаммов с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ-ТБ) и широкой лекарственной устойчивости (ШЛУ). Для лечения МЛУ-ТБ требуются дорогостоящие лекарства, а ШЛУ-ТБ часто неизлечим. Рост заболеваемости устойчивым туберкулезом за последнее десятилетие стал сегодня чрезвычайной ситуацией во всем мире 1 .Хотя в последние годы усилия по разработке лекарств активизировались: были лицензированы два новых противотуберкулезных препарата (бедаквилин и деламанид), а несколько других в настоящее время проходят клинические испытания, текущих разработок лекарств все еще недостаточно для решения такой глобальной проблемы здравоохранения. По-прежнему существует острая необходимость в открытии и разработке новых противотуберкулезных препаратов, особенно для нацеливания на лекарственно-устойчивые и неактивные штаммы M . tuberculosis , а также обеспечивает более эффективное и короткое лечение 2 .

Природные лечебные средства, полученные из растений, микробов и продуктов животного происхождения, на протяжении веков играли важную роль в медицине. Они представляют собой уникальный пул самых разнообразных химических веществ, которые эволюционировали для специфического взаимодействия с биологическими мишенями и продолжают предоставлять новые и вдохновляющие шаблоны для разработки фармацевтических препаратов 3 . В последние годы возобновился интерес к исследованию природных источников для идентификации новых противотуберкулезных агентов 4 - 8 .Прополис, также известный как пчелиный клей, представляет собой натуральное вещество, вырабатываемое пчелами в основном при сборе выделений растений, таких как смолы и липкие экссудаты на почках листьев и ранах растений. Слово прополис происходит от греческого языка, где про означает «у входа», а полис означает «община» или «город». Пчелы используют прополис в качестве строительного и ремонтного материала для заделки зазоров, сглаживания внутренних стенок в ульях и в качестве антисептического покрытия для защиты от внешнего загрязнения. Прополис имеет очень изменчивый химический состав в зависимости от географического положения, в котором он собирается.Например, прополис из регионов с умеренным климатом богат фенольными соединениями, полученными из экссудатов тополей, тогда как пчелы в тропических странах имеют в своем распоряжении различные растительные источники, что приводит к типам прополиса, богатым другими фитохимическими веществами, такими как пренилированные флавоноиды и бензофеноны, лигнаны, терпеноиды. и фенольные липиды 9 - 13 . Прополис давно используется в качестве народного средства для лечения различных заболеваний 14 .Были проведены многочисленные научные исследования его лечебных свойств, в том числе противовоспалительное 15 , иммуностимулятор 16 , антиоксидант 17 , противоопухолевый 18 , нейропротекторный 1 и антимикробная активность 12 , 20 , 21 . Интересно, что прополис использовался в качестве ингредиента в традиционных лекарствах от туберкулеза 22 - 25 .Предыдущие исследования in vitro продемонстрировали, что экстракты прополиса могут подавлять рост M . tuberculosis , а также синергетический эффект известных противотуберкулезных препаратов, таких как изониазид, рифампицин и стрептомицин 26 , 27 . Также было замечено, что прополис ингибирует развитие туберкулеза, снижая образование некроза в гранулемах M . туберкулез -инфицированные животные 28 .

Несколько ферментов, участвующих в жизненно важных физиологических функциях в M . tuberculosis были определены как новые привлекательные молекулярные мишени для разработки противотуберкулезных препаратов 29 - 32 . Здесь мы использовали управляемую стыковку с AutoDock Vina для прогнозирования взаимодействий между выбранными составляющими прополиса и четырьмя из этих основных микобактериальных ферментов, а именно пантотенаткиназой ( Mt PanK, тип 1) 33 , декапренилфосфорил-β-D -рибоза 2'-эпимераза 1 ( Mt DprE1) 34 , протеинкиназа B ( Mt PknB) 35 и β-кетоацилацил-носитель белка-синтаза I ( Mt 9 9 KasA2) 36 .Молекулярный докинг - популярный инструмент, используемый для виртуального скрининга малых молекул (лигандов) против белков (мишеней), и в нескольких исследованиях AutoDock Vina успешно использовался для изучения взаимодействия натуральных продуктов с конкретными белками-мишенями, включая микобактериальные ферменты 37 - 41 . Однако о стыковке компонентов прополиса с Mt PanK, Mt DprE1, Mt PknB и Mt KasA никогда не сообщалось.

Результаты

Составляющие прополиса, исследованные в этом исследовании, представляют собой некоторые структурно разнородные соединения, которые мы сгруппировали в четыре основные категории, а именно флавоноиды, терпеноиды, простые фенолы и разные вещества, включая птерокарпан, производное фенилэтаноида, пять стильбенов и четыре лигнана. Известные молекулы, о которых ранее сообщалось в литературе как ингибиторы целевых ферментов и для которых природа и роль остатков сайта связывания были известны из их доступных комплексов с белками, использовали в качестве контролей.Чтобы проверить условия стыковки перед виртуальным скринингом составляющих прополиса, каждый контрольный ингибитор извлекали из его совместно кристаллизованного комплекса и повторно стыковали с соответствующей мишенью с помощью программного обеспечения AutoDock Vina. Затем была рассчитана оценка стыковки для каждого соединения прополиса для оценки его свободной энергии связывания с Mt PanK, Mt DprE1, Mt PknB и Mt KasA (таблица S1 ). Значения оценки стыковки, полученные для соединений в пределах каждого фитохимического класса, сравнивали с оценками контрольных ингибиторов для каждой мишени, чтобы выбрать молекулы с наименьшими значениями энергии, которые оказались выше, чем выбранные контрольные ингибиторы по сравнению с целевыми белками.Мы наблюдали, что ни один из компонентов прополиса не показал лучших результатов, чем контрольные образцы, ни по сравнению с Mt PanK, ни с Mt PknB. Вместо этого только стыковка с Mt KasA и Mt DprE1 дала полезные оценки. Таким образом, пренилированные флаваноны изонимфеол D, изонимфеол C и изонимфеол B показали высокие показатели стыковки с Mt KasA (-9,7, -9,6 и -9,5 ккал / моль соответственно), превосходящие контрольный ингибитор тиолактомицин (-7,9 ккал / моль). .Ki изонимфеола D для Mt KasA был оценен как 0,07 мкМ (контроль - 1,62 мкМ). Изонимфеол D также показал сильное предсказанное связывание с Mt, DprE1 (-10,1 ккал / моль) по сравнению с контрольным ингибитором 0T4 (-9,2 ккал / моль). Среди терпеноидов мы наблюдали, что ацетат тритерпена β-амирина олеананового типа проявляет некоторое сродство к Mt DprE1 (-9,9 ккал / моль) и оценивается лучше, чем 0T4 (-9,2 ккал / моль). В группе простых фенольных соединений (+) - хикоровая кислота показала высокий балл связывания (-9.5 ккал / моль) для Mt KasA по сравнению с тиолактомицином (-7,9 ккал / моль). Стильбен 5 - (( E ) -3,5-дигидроксистирил) -3 - (( E ) -3,7-диметилокта-2,6-диен-1-ил) бензол-1,2-диол показал стыковочный балл с Mt KasA (-9,4 ккал / моль), который также оказался лучше, чем тиолактомицин, в то время как лигнан (+) - сезамин сильно состыковался с Mt DprE1 с баллом (-10,7 ккал / моль) и предсказал Ki (0,01 мкМ) лучше, чем 0T4 (-9,2 ккал / моль и Ki 0,18 мкМ) (таблица).

Таблица 1

Прогнозируемая аффинность связывания (оценка стыковки в ккал / моль) и константа ингибирования (Ki в мкМ) выбранных компонентов прополиса и повторно докированных контрольных ингибиторов против Mt DprE1 и Mt KasA a .

903 9034 9034 9034 9034 9034 Ki 2 9034 9034 9034
Mt DprE1 Mt KasA
Показатель стыковки Ki Показатель стыковки Ki
0,18
Контрольный ингибитор, тиолактомицин −7,9 1,62
Изонимфеол-C
Изонимфаеол D −10,1 0,04 −9 . 7 0,07
Изонимфаеол B −9,5 0.11 −9,5 0,11
β-амирина ацетат −9,9 0,05 −2 > 1,10 4 9034 9034 9034 Chicicor 0,21 −9,5 0,11
5 - (( E ) -3,5-дигидроксистирил) -3 - (( E ) -3,7-диметилокта-2,6-диен-1 -ил) бензол-1,2-диол -9,2 0,18 -9,4 0,13
(+) - Сезамин -10 . 7 0,01 −8,7 0,42

Были дополнительно изучены специфические взаимодействия, чтобы понять природу межмолекулярных связей, образованных между выбранными соединениями и остатками сайтов связывания для четырех изученных ферментов (Таблица S2 ). Позы связывания, полученные для лигандов наилучшего связывания изонимфеола D и (+) - сезамина, проверяли визуально и отображены на фиг. Мы наблюдали, что изонимфеол D показал некоторые ключевые молекулярные взаимодействия с ключевыми остатками Pro280, Phe402 и His311 из Mt KasA (рис.) и (+) - сезамин взаимодействовал с ключевыми остатками Cys387, Ser59 и Gly117 Mt DprE1 (рис.). Наилучший результат по отношению к Mt PanK наблюдался для флавоноида пинобанксин-3- ( E ) -кафеат (-10,0 ккал / моль), но взаимодействия белок-лиганд для этого соединения не исследовались, так как его рейтинг ниже, чем полученный балл. для контрольного ингибитора ZVT (-10,9 ккал / моль). Наибольшее сродство к Mt PknB наблюдалось для флавоноидов пахиподола и пинобанксин-3- ( E ) -кафеат (-9.1 ккал / моль), но этот показатель снова оказался ниже, чем оценка, полученная для контрольного ингибитора митоксантрона (-10,8 ккал / моль), и больше не исследовалась.

Молекулярные взаимодействия между изонимфеолом D и Mt KasA. Пристыкованная поза изонимфеола D в сайте связывания Mt KasA (a) , взаимодействия между изонимфеолом D и Mt KasA, показывающие ключевые водородные связи (зеленые пунктирные линии), гидрофобные связи (темно-розовые пунктирные линии) и соответствующие амино кислотные остатки (b) , 2D-график взаимодействий между изонимфеолом D и ключевыми остатками Mt KasA (c) , созданный визуализатором BIOVIA Discovery Studio.

Молекулярные взаимодействия между (+) - сезамином и Mt DprE1. Пристыкованная поза (+) - сезамина в сайте связывания Mt DprE1 (a) , взаимодействия между (+) - сезамином и Mt DprE1 показывают ключевые водородные связи (зеленые пунктирные линии), гидрофобные связи (темно-розовые пунктирные линии) и соответствующие аминокислотные остатки (b) , 2D-график взаимодействий между (+) - сезамином и ключевыми остатками Mt DprE1 (c) , созданный визуализатором BIOVIA Discovery Studio.

Обсуждение

В этом исследовании мы исследовали противотуберкулезный потенциал ряда соединений прополиса с использованием подхода управляемого молекулярного докинга с целью определения их сродства к четырем микобактериальным ферментам: Mt PanK, Mt DprE1 , Mt PknB и Mt KasA. Обоснованием выбора этих конкретных белков было то, что они являются ключевыми ферментами, необходимыми для M . tuberculosis для роста и выживания в эукариотическом хозяине.Они также участвуют во множестве основных микобактериальных путей, таких как биогенез клеточной стенки, биосинтез кофактора и передача сигнала. Они отсутствуют в клетках млекопитающих, что делает их высокоселективными и привлекательными "лекарственными" мишенями для микобактериальных заболеваний, и они представляют собой некоторые недавно утвержденные новые мишени, против которых в настоящее время нет доступных на рынке лекарств 33 - 36 . Пантотенаткиназа типа I из M . tuberculosis ( Mt, PanK) - это фермент, который катализирует первую стадию биосинтеза кофактора Коэнзима А (КоА) путем превращения пантотената (витамин B 5 ) в 4'-фосфопантотенат 33 .Серин / треониновые протеинкиназы, такие как протеинкиназа B ( Mt, PknB), которая участвует в регуляции морфологии микобактериальных клеток, играют важную роль в путях передачи сигналов и позволяют M . tuberculosis для успешного роста и выживания в пределах хозяина 35 , 42 . Поскольку клеточная стенка микобактерий представляет собой сложную структуру, состоящую из слоев пептидогликана, арабиногалактана, липоарабиноманнана и некоторых миколиновых кислот, двух ключевых белков-мишеней в M . tuberculosis биосинтез клеточной стенки, синтаза I белка-носителя β-кетоацилацила ( Mt KasA) и декапренилфосфорил-β-D-рибоза 2'-эпимераза 1 ( Mt DprE1) также были включены в это исследование 34 , 36 . Наличие миколиновых кислот - уникальная особенность клеточной стенки микобактерий. Эти жирные кислоты с очень длинной цепью, которые связаны со способностью микобактерий выживать в организме хозяина и противостоять многим антибиотикам, продуцируются благодаря активности ряда синтаз жирных кислот (FAS). Mt KasA - один из ферментов пути FAS микобактерий II типа, который встречается только у бактерий 36 . Более пристальный взгляд на взаимодействия между изонимфеолом D и Mt KasA показывает, что пренилированный хвост этого флавоноида связывается с гидрофобным карманом Mt KasA, который содержит Pro280 и Phe402. Кроме того, сильная водородная связь (расстояние контакта 2,77 Å) наблюдалась между фенольным кислородом C-4 'изонимфеола D и азотом остатка His311 в активном центре, что очень похоже на то, что ранее описывалось как режим привязка управления TLM 36 .Фермент микобактериальной клеточной стенки декапренилфосфорил-β-D-рибоза 2'-эпимераза 1 ( Mt DprE1) участвует в биосинтезе двух основных компонентов микобактериальной клеточной стенки, а именно арабиногалактана и липоарабиноманнана 43 . Cys387 в активном центре Mt DprE1 был идентифицирован как критический остаток для связывания через ковалентную связь контрольного ингибитора 0T4 (также называемого CT325) 34 . В случае (+) - сезамина наблюдаемые взаимодействия происходили не через ковалентные связи, а включали взаимодействие π-серы с Cys387 и сильные водородные связи между атомами кислорода метилендиокси и тетрагидрофурановой составляющей и Ser59 и Gly117 (расстояние контакта 3.08 и 2,94 Å соответственно).

В предыдущих исследованиях сообщалось о противотуберкулезной активности некоторых из исследуемых здесь компонентов прополиса, включая акацетин, апигенин, кверцетин, пиностробин, пиноцембрин, нарингенин, ликвиритигенин, генистеин, циклоартенол, β-амиринацетат, пимаровую кислоту, метилкофеат. , p -куаровая кислота, метилкумарат, коричная кислота, медикарпин, ресвератрол и сезамин 44 - 61 . Среди выбранных соединений, показывающих лучшие показатели стыковки, только ацетат β-амирина и сезамин ранее проявляли умеренную активность против M . tuberculosis h47Rv со значениями минимальной ингибирующей концентрации (МИК) 100 и 50 мкг / мл (213 и 141 мкМ) соответственно 53 , 61 . Насколько нам известно, не было опубликованных отчетов о противотуберкулезной активности изонимфеола D. Для контрольных ингибиторов экспериментальные данные показали значения МИК> 64 мкг / мл (эквивалент> 150 мкМ) для ZVT и 62,5 мкМ для тиолактомицина. против М . туберкулез h47Rv 33 , 62 .Активность митоксантрона (MIX) против M . туберкулез h47Rv, M . smegmatis mc 2 155 и M . aurum A + обнаружил значения МИК в диапазоне 25–400 мкМ 35 , в то время как активность 0T4 была представлена ​​в виде значений IC 50 10,4 и 4,6 мкг / мл против M . смегматис и M . bovis BCG, соответственно 34 .В дополнение к этому, ферментативные исследования также показали, что контрольные соединения ZVT и MIX ингибируют Mt PanK и Mt PknB со значениями IC 50 1,13 мкМ и 0,8 мкМ, соответственно 33 , 35 .

Целью молекулярного стыковки является использование алгоритмов оценки для оценки вероятности связывания данного соединения с белком-мишенью. Мы идентифицировали лигнан (+) - сезамин и пренилированный флавоноид изонимфаеол D из прополиса как наиболее предсказуемые лиганды связывания для Mt DprE1 и Mt KasA, соответственно.Интересно, что изонимфеол D продемонстрировал сильное предсказанное связывание с обоими ферментами, что позволяет предположить, что это особенно многообещающий агент, поскольку было продемонстрировано, что шансы на успешное обнаружение активных соединений с использованием методологий виртуального скрининга на основе структуры выше, когда одно соединение может нацеливаться на множественные белки 63 . И (+) - сезамин, и изонимфеол D показали более высокие баллы стыковки, чем те, которые были получены для известных контрольных ингибиторов целевых белков, и имели прогнозируемую активность на целевых сайтах ниже 0.1 мкМ. Однако отсутствовала корреляция между сильным предсказанным сродством (+) - сезамина к Mt DprE1 (оценка -10,7 ккал / моль и Ki 0,01 мкМ) и его наблюдаемой (умеренной) активностью в отношении целых бактериальных клеток. (МИК 141 мкМ). Ранее сообщалось, что не всегда может быть установлено прямое соответствие между результатами молекулярного докинга in silico и биологическими параметрами in vitro . Это может быть связано с тем, что некоторые соединения не способны проходить через сложную клеточную стенку микобактерий, или характеристики сайта связывания, где происходит ингибирование, отличаются in vivo 64 .Изонимфеол D и (+) - сезамин нельзя использовать как таковые в клинических условиях. Однако, как большинство биоактивных натуральных продуктов, они представляют собой некоторые потенциально интересные «хиты» 65 , которые могут быть в дальнейшем структурно оптимизированы для разработки новых противотуберкулезных препаратов, и они требуют дальнейшей биологической оценки in vitro .

Методы

Выбор лиганда

Лиганды, выбранные для этого исследования, представляли собой 78 хорошо охарактеризованных фитохимических веществ, ранее выделенных из Алжира 66 - 69 , Египта 70 - 73 , Туниса 74 , ливийский 75 , конголезский 76 , ганский 77 , кенийский 78 и нигерийский 79 прополис.Все химические структуры были получены из базы данных соединений PubChem (NCBI) (http://www.pubchem.ncbi.nlm.nih.gov).

Препарат лиганда и белка

Структура каждого лиганда была нарисована с использованием ChemOffice v.15.1 и оптимизирована геометрия с использованием минимизации энергии MM2 80 . Все вращающиеся связи, присутствующие на лигандах, считались невращающимися. Это позволило нам выполнить жесткую стыковку и минимизировать стандартные ошибки (обычно 2,85 ккал / моль), вероятно, из-за лигандов с большим количеством активных вращающихся связей 81 .Был использован метод расчета заряда Гастайгера, и частичные заряды были добавлены к атомам лиганда перед стыковкой 82 . Кристаллические структуры Mt PanK типа 1 (PDB ID: 4BFT), Mt DprE1 (PDB ID: 4FF6), Mt PknB (PDB ID: 2FUM) и Mt KasA (PDB ID: 2WGE) были получено из базы данных RCSB Protein Data Bank (PDB) (http://www.pdb.org). Структуры ингибиторов лигандов 2-хлор-N- [1- (5 - {[2- (4-фторфенокси) этил] сульфанил} -4-метил-4h-1,2,4-триазол-3-ил) этил] бензамид (ZVT) для Mt PanK, 3- (гидроксиамино) -N - [(1r) -1-фенилэтил] -5- (трифторметил) бензамид (0T4) для Mt DprE1, митоксантрон (MIX) для Mt PknB и тиолактомицин (TLM) для Mt KasA были получены из соответствующих записей PDB (http: // www.ebi.ac.uk/thornton-srv/databases/cgi-bin/pdbsum/GetPage.pl?pdbcode=index.html). Каждый белок использовался как жесткая структура, и все молекулы воды и гетероатомы были удалены с помощью BIOVIA Discovery Studio Visualizer v.4.5 (Accelrys).

Идентификация остатков сайта связывания

Предыдущие исследования были использованы для определения природы и роли остатков сайта связывания для Mt PanK типа 1 33 , Mt DprE1 34 , Mt PknB 35 и Mt KasA 36 .Конкретные аминокислоты, участвующие во взаимодействиях лиганд / белок, также были подтверждены после анализа кристаллических структур PDB, доступных для каждого целевого белка в комплексе либо с природными субстратами, либо с контрольными ингибиторами (таблица S3 ).

Подготовка и стыковка блока сетки

Все преобразования файлов, необходимые для исследования стыковки, были выполнены с использованием химического инструментария с открытым исходным кодом Open Babel v. 2.3.2 83 . Параметры сетки (таблица) были установлены таким образом, чтобы обеспечить пространство полости подходящего размера, достаточно большое для размещения каждого соединения в пределах сайта связывания каждого белка, и были определены с помощью AutoDock Tools v.1.5.6rc3 84 . Расчеты молекулярного докинга для всех соединений с каждым из белков были выполнены с использованием AutoDock Vina v. 1.1.2 81 . Чтобы проверить точность стыковки и позволить сравнение оценок стыковки, все сокристаллизованные ингибирующие лиганды повторно стыковались с соответствующими белковыми структурами. Различные ориентации лигандов были исследованы и ранжированы на основе их энергетических баллов. Наш протокол стыковки позволил создать аналогичную позу стыковки для каждого контрольного лиганда в отношении его биологической конформации в совместно кристаллизованном комплексе белок-лиганд.Мы дополнительно визуально проверили все позы связывания для данного лиганда, и только позы с наименьшим значением RMSD (просто среднеквадратичное отклонение) (порог <1,00 Å) считались для получения более высокой точности стыковки. Генетический алгоритм Ламарка использовался во время процесса стыковки, чтобы исследовать лучшее конформационное пространство для каждого лиганда с размером популяции 150 человек. Максимальное количество генерации и оценки было установлено на уровне 27 000 и 2 500 000, соответственно. Все остальные параметры были установлены по умолчанию.Поскольку активные сайты связывания и некоторые контрольные ингибиторы для наших четырех выбранных микобактериальных ферментов были хорошо охарактеризованы в предыдущих исследованиях 33 - 36 , мы решили использовать управляемый метод стыковки для повышения эффективности стыковки 37 путем отбора проб каждой конформации лиганда (включая повторную стыковку контрольных ингибиторов) в каждом сайте связывания белка и последующего ранжирования этих конформаций с использованием функции подсчета баллов для прогнозирования наилучшего сродства связывания белок-лиганд (рассчитанного как прогнозируемая свободная энергия связывания ΔG bind в ккал / моль) (Таблица S1 ).Самая низкая свободная энергия связывания (т.е. лучший результат позы стыковки с наименьшим среднеквадратичным отклонением) указывает на наивысшее предсказанное сродство лиганд / белок. Оценки стыковки Auto Dock Vina для этих выбранных компонентов прополиса, которые имеют более высокий рейтинг, чем контрольный ингибитор, в дальнейшем использовали для расчета прогнозируемых констант ингибирования (значения Ki) ​​выбранных соединений по отношению к заданной цели (таблица) 85 . Специфические межмолекулярные взаимодействия с мишенями (Таблица S2 и Рис. -) были дополнительно визуализированы с помощью BIOVIA Discovery Studio Visualizer v.4.5 (Accelrys).

Таблица 2

Параметры сетки, выбранные для целевых ферментов, на основе остатков сайтов связывания a .

Целевой белок (PDB ID) Создание сетки рецептора остатков сайта связывания Центральная сетка (точки на оси X, Y, Z) Размер (точки на оси X, Y, Z)
Mt PanK (4BFT) Gly 97, Ser 98, Val 99, Ala 100, Val 101, Gly 102, Lys 103, Ser 104, His 179, Tyr 235, Arg 238, Met 242 , Asn 277 −18.742 × −13,919 × 11,679 20 × 20 × 20
Mt DprE1 (4FF6) Gly 117, Trp 230, Val 265, Glu 336, Asn 385, Ile 386, Cys 387 14,99 −20,507 × 37,226 20 × 20 × 20
Mt PknB (2FUM) Leu 17, Gly 18, Val 25, Ala 38, Met 92, Tyr 94, Val 95, Lys 140, Met 145 , Asn 143, Met 155 61,518 × 2,429 × −25,588 21 × 20 × 20
Mt KasA (2WGE) Cys 171, Phe 237, Ala 279, Pro 280, His 311, Gly 318, His 345, Phe 402, Gly 403, Phe 404 38.342 × −1,206 × −7,033 20 × 20 × 20

Дополнительные электронные материалы

Вклад авторов

M.T.A. и В. разработал исследование. M.T.A. и Дж. проводил эксперименты. N.B., M.T.A. и В. собраны литературные данные. M.T.A. и В. проанализировали экспериментальные данные. N.B. и В. написал оригинальный текст рукописи. M.T.A. подготовил все цифры. M.T.A. и В. подготовил все таблицы. Все авторы рецензировали рукопись.

Примечания

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Сноски

Примечание издателя: Springer Nature сохраняет нейтралитет в отношении юрисдикционных претензий на опубликованных картах и ​​принадлежности к учреждениям.

Мохаммад Тухин Али и Наталья Бличарска внесли равный вклад в эту работу.

Электронный дополнительный материал

Дополнительная информация сопровождает этот документ на 10.1038 / s41598-018-30209-у.

Ссылки

2. Zumla A, et al. Лечение и ведение туберкулеза - обновленная информация о схемах лечения, испытаниях, новых лекарствах и дополнительных методах лечения. Ланцет Респир. Med. 2015; 3: 220–234. DOI: 10.1016 / S2213-2600 (15) 00063-6. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 3. Ньюман DJ, Крэгг GM. Натуральные продукты как источники новых лекарств с 1981 по 2014 год. J. Nat. Prod. 2016; 79: 629–661. DOI: 10.1021 / acs.jnatprod.5b01055. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 4. Salomon CE, Schmidt LE.Натуральные продукты, ведущие к разработке лекарств от туберкулеза. Curr. Верхний. Med. Chem. 2012; 12: 735–765. DOI: 10,2174 / 156802612799984526. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 5. Гусман Дж. Д., Гупта А., Букар Ф., Гиббонс С., Бхакта С. Антимикобактериальные препараты из природных источников: древние времена, эра антибиотиков и новые основы. Передний. Biosci. 2012; 17: 1861–1881. DOI: 10,2741 / 4024. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Дашти Ю., Гркович Т., Куинн Р.Дж. Прогнозирование ценности натуральных продуктов, исследование возможностей противотуберкулезных препаратов.Nat. Prod. Отчет 2014; 31: 990–998. DOI: 10.1039 / C4NP00021H. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 7. Сантош Р.С., Сурьянараянан Б. Растения: источник новых антимикобактериальных препаратов. Planta Med. 2014; 80: 9–21. [PubMed] [Google Scholar] 8. Chinsembu KC. Туберкулез и природная аптека предполагаемых противотуберкулезных средств. Acta Trop. 2016; 153: 46–56. DOI: 10.1016 / j.actatropica.2015.10.004. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 9. Маркучи М., Банкова В. Химический состав, растительное происхождение и биологическая активность бразильского прополиса.Curr. Верхний. Фитохим. 1999; 2: 115–123. [Google Scholar] 10. Куэста-Рубио О, Фронтана-Урибе Б.А., Рамирес-Апан Т., Карденас Дж. Полиизопренилированные бензофеноны в кубинском прополисе; биологическая активность неморосона. Z. Naturforsch. 2002. 57: 372–378. DOI: 10.1515 / znc-2002-3-429. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Рагхукумар Р., Вали Л., Уотсон Д., Фернли Дж., Зайдель В. Устойчивый к антиметициллину Staphylococcus aureus (MRSA), активность «тихоокеанского прополиса» и выделенных пренилфлаванонов. Фитотэр.Res. 2010; 24: 1181–1187. [PubMed] [Google Scholar] 13. Кардар М.Н. и др. Характеристика тритерпенов и новых фенольных липидов в камерунском прополисе. Фитохимия. 2014; 106: 156–163. DOI: 10.1016 / j.phytochem.2014.07.016. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15. Паулино Н. и др. Противовоспалительное действие биодоступного соединения артепиллина С в бразильском прополисе. Евро. J. Pharmacol. 2008. 587: 296–301. DOI: 10.1016 / j.ejphar.2008.02.067. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 16. Нассар С.А., Мохамед А.Х., Суфи Х., Наср С.М., Махран К.М.Иммуностимулирующее действие египетского прополиса на кроликов. Sci. Мир J. 2012; 2012: 6. DOI: 10.1100 / 2012/6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 17. Грегорис Э., Стеванато Р. Корреляция между полифенольным составом и антиоксидантной активностью венецианского прополиса. Food Chem. Toxicol. 2010. 48: 76–82. DOI: 10.1016 / j.fct.2009.09.018. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Teerasripreecha D, et al. In vitro Антипролиферативная / цитотоксическая активность карданола и кардола, обогащенного прополисом тайского происхождения Apis mellifera , в отношении линий раковых клеток.BMC Дополнение. Альтерн. Med. 2012; 12:27. DOI: 10.1186 / 1472-6882-12-27. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 19. Фаруки, Т. и Фаруки, А.А. Благотворное влияние прополиса на здоровье человека и неврологические заболевания. Передний . Биоски . (Elite Ed) 4 , 779–793 (2012). [PubMed] 20. Зайдель В., Пейфун Э., Уотсон Д.Г., Фернли Дж. Сравнительное исследование антибактериальной активности прополиса из разных географических и климатических зон. Фитотэр.Res. 2008; 22: 1256–1263. DOI: 10.1002 / ptr.2480. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21. Сфорцин Ю.М., Банкова В. Прополис: есть ли потенциал для разработки новых лекарств? J. Ethnopharmacol. 2011; 133: 253–260. DOI: 10.1016 / j.jep.2010.10.032. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

22. Чжан, Х. Изобретатель; Китайский лекарственный состав для лечения туберкулеза легких. Патент Китая CN 1879668 A. 2006. 20 декабря.

23. Бураев М.Е. и др. . Изобретатель; Метод комплексного лечения туберкулеза легких.Патент России RU 2429866 С1. 2011 27 сентября.

24. Порфирио да Силва, З. Изобретатель; Сироп, содержащий рифампицин, прополис и мед для лечения туберкулеза. Патент Бразилии BR 20013 A2. 2011 Apr 19.

25. Ваг, В. Д. Прополис: чудо-пчелиный продукт и его фармакологические возможности. Расширенный . Pharmacol . Sci . 2013 , 308249 (2013). [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 26. Valcic S, et al. Фитохимические, морфологические и биологические исследования прополиса из Центрального Чили.Z. Naturforsch. С. 1999; 54: 406–416. DOI: 10.1515 / znc-1999-5-617. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. Scheller S, et al. Синергизм этанольного экстракта прополиса (EEP) и противотуберкулезных препаратов в отношении роста микобактерий. Z. Naturforsch. С. 1999; 54: 549–553. DOI: 10.1515 / znc-1999-7-814. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 28. Йилдирим З. и др. Влияние водного экстракта турецкого прополиса на туберкулезную инфекцию морских свинок. Pharmacol. Res. 2004. 49: 287–292. DOI: 10.1016 / j.phrs.2003.10.007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 29. Lou Z, Zhang X. Белковые мишени для открытия лекарственного средства против Mycobacterium tuberculosis на основе структуры. Белковая клетка. 2010; 1: 435–442. DOI: 10.1007 / s13238-010-0057-3. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Джексон М., Макнил М.Р., Бреннан П.Дж. Прогресс в нацеливании на биогенез клеточной оболочки у Mycobacterium tuberculosis . Future Microbiol. 2013; 8: 855–875. DOI: 10.2217 / fmb.13.52. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 31.Мдлули К., Канеко Т., Аптон А. Открытие лекарств от туберкулеза и новые цели. Анна. Акад. Sci. 2014; 1323: 56–75. DOI: 10.1111 / nyas.12459. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 33. Bjorkelid C, et al. Структурная и биохимическая характеристика соединений, ингибирующих пантотенаткиназу Mycobacterium tuberculosis . J. Biol. Chem. 2013; 288: 18260–18270. DOI: 10.1074 / jbc.M113.476473. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34. Батт С.М. и др. Структурные основы ингибирования Mycobacterium tuberculosis DprE1 ингибиторами бензотиазинона.Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 2012; 109: 11354–11359. DOI: 10.1073 / pnas.1205735109. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 35. Wehenkel A, et al. Структура PknB в комплексе с митоксантроном, АТФ-конкурентным ингибитором, предполагает способ регуляции протеинкиназы у микобактерий. FEBS lett. 2006; 580: 3018–3022. DOI: 10.1016 / j.febslet.2006.04.046. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 36. Luckner SR, Machutta CA, Tonge PJ, Kisker C. Кристаллические структуры Mycobacterium tuberculosis KasA демонстрируют механизм действия в рамках биосинтеза клеточной стенки и его ингибирование тиолактомицином.Состав. 2009. 17: 1004–1013. DOI: 10.1016 / j.str.2009.04.012. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37. Мэн XY, Чжан Х.Х., Мезей М., Цуй М. Молекулярный докинг: мощный подход к открытию лекарств на основе структуры. Curr. Comput. Aided Drug Des. 2011; 7: 146–157. DOI: 10,2174 / 1573405677602. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 38. Сейеди С.С. и др. Вычислительный подход к изучению потенциальной активности выбранных флавоноидов против чикунгуньи. Sci. Отчет 2016; 6: 24027.DOI: 10,1038 / srep24027. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 39. Сундарраджан С., Лулу С., Арумугам М. Вычислительная оценка фитосоединений для борьбы с лекарственно-устойчивым туберкулезом с помощью многоцелевой терапии. J. Mol. Модель. 2015; 21: 247. DOI: 10.1007 / s00894-015-2785-z. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 40. Сингх С., Баджпай Ю., Линн А.М. Виртуальный скрининг на основе структуры для выявления ингибиторов фермента MurE Mycobacterium tuberculosis с использованием AutoDock Vina. Биоинформация.2014; 10: 697–702. DOI: 10.6026 / 97320630010697. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 41. Ядав А.К. и др. Скрининг флавоноидов на противотуберкулезную активность и взаимосвязь между их структурой и активностью. Med. Chem. Res. 2013; 22: 2706–2716. DOI: 10.1007 / s00044-012-0268-7. [CrossRef] [Google Scholar] 43. Brecik M, et al. DprE1 является уязвимой мишенью для противотуберкулезного препарата из-за его локализации в клеточной стенке. ACS Chem. Биол. 2015; 10: 1631–1636. DOI: 10.1021 / acschembio.5b00237. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 44.Чен Дж.Дж., Ву Х.М., Пэн К.Ф., Чен И.С., Чу С.Д. seco -Дитерпеноиды абиетана, производное фенилэтаноида и противотуберкулезные компоненты из Callicarpa pilosissima . J. Nat. Prod. 2009. 72: 223–228. DOI: 10.1021 / np800721f. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 45. Чен Л.В., Ченг М.Дж., Пэн К.Ф., Чен И.С. Вторичные метаболиты и антимикобактериальная активность корней Ficus nervosa . Chem. Биодайверы. 2010; 7: 1814–1821. DOI: 10.1002 / cbdv.2007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 46.Camacho-Corona MdR и др. Оценка некоторых вторичных метаболитов растительного происхождения в отношении чувствительной и множественной лекарственной устойчивости Mycobacterium tuberculosis . J. Mex. Chem. Soc. 2009; 53: 71–75. [Google Scholar] 47. Gua JQ, Wang Y, Franzblau SG, Montenegro G, Timmermann BN. Составляющие Quinchamalium majus с потенциальной противотуберкулезной активностью. Z. Naturforsch. С. 2004; 59: 797–802. DOI: 10.1515 / znc-2004-11-1206. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 48. Чжоу Т.Х., Чен Дж.Дж., Пэн К.Ф., Ченг М.Дж., Чен И.С.Новые флаваноны из листьев Cryptocarya chinensis и их противотуберкулезная активность. Chem. Биодайверы. 2011; 8: 2015–2024. DOI: 10.1002 / cbdv.201000367. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 49. Куэте V и др. Противомикробная активность сырых экстрактов и соединений из Ficus chlamydocarpa и Ficus cordata (Moraceae) J Ethnopharmacol. 2008; 120: 17–24. DOI: 10.1016 / j.jep.2008.07.026. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 50. Gaur R, et al. Синтез, противотуберкулезная активность и исследования на молекулярном моделировании аналогов изоликвиритигенина и ликвиритигенина, биоактивных компонентов из Glycyrrhiza glabra .Med. Chem. Res. 2015; 24: 3494–3503. DOI: 10.1007 / s00044-015-1401-1. [CrossRef] [Google Scholar] 51. Saludes JP, Гарсон MJ, Franzblau SG, Aguinaldo AM. Противотуберкулезные компоненты из гексановой фракции Morinda citrifolia Linn. (Rubiaceae) Phytother. Res. 2002. 16: 683–685. DOI: 10.1002 / ptr.1003. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 52. Акихиса Т. и др. Противотуберкулезная активность тритерпеноидов цветков сложноцветных. Биол. Pharm. Бык. 2005. 28: 158–160. DOI: 10.1248 / bpb.28.158. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 53.Биби Н. и др. In vitro противотуберкулезная активность компонентов, выделенных из Haloxylon salicornicum . Биоорг. Med. Chem. Lett. 2010. 20: 4173–4176. DOI: 10.1016 / j.bmcl.2010.05.061. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 54. Лекфром Р., Канокмедхакул С., Канокмедхакул К. Биоактивные дитерпены из надземных частей Anisochilus damageandii . Planta Med. 2010. 76: 726–728. DOI: 10.1055 / с-0029-1240656. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 55. Balachandran C, et al.Антимикробная и антимикобактериальная активность метилкофеата, выделенного из Solanum torvum Swartz. фрукты. Indian J. Microbiol. 2012; 52: 676–681. DOI: 10.1007 / s12088-012-0313-8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 56. Чжао Дж., Эвангелопулос Д., Бхакта С., Грей А.И., Зайдель В. Противотуберкулезная активность экстрактов и компонентов Arctium lappa и Tussilago farfara . J Ethnopharmacol. 2014; 155: 796–800. DOI: 10.1016 / j.jep.2014.06.034. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 57.Guzman JD, et al. 2-Гидроксизамещенные коричные кислоты и ацетанилиды являются селективными ингибиторами роста Mycobacterium tuberculosis . Med. Chem. Comm. 2014; 5: 47–50. DOI: 10.1039 / C3MD00251A. [CrossRef] [Google Scholar] 58. Хасан Н. и др. Химические компоненты корня Sesbania grandiflora и их противотуберкулезная активность. Фармацевтика. 2012; 5: 882–889. DOI: 10.3390 / ph5080882. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 59. Sun D и др. Оценка химических библиотек флавоноидов и ресвератрола показала, что абиссинон II является многообещающим антибактериальным средством.Chem. Med. Chem. 2012; 7: 1541–1545. DOI: 10.1002 / cmdc.201200253. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 60. Риверо-Круз I и др. Антимикобактериальные агенты из избранных мексиканских лекарственных растений. J. Pharm. Pharmacol. 2005; 57: 1117–1126. DOI: 10.1211 / JPP.57.9.0007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 61. Нанда Б., Наргунд Л.Г., Наргунд С.Л., Бхат К. Дизайн и синтез некоторых новых фторбензимидазолов, замещенных структурными мотивами, присутствующими в физиологически активных натуральных продуктах для противотуберкулезной активности.Iran J. Pharm. Res. 2017; 16: 929–942. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 62. Капилашрами К. и др. Ингибиторы β-кетоацил-AcpM-синтазы A (KasA) на основе тиолактомицина: открытие ингибиторов на основе фрагментов с использованием транзиторной одномерной ядерной ЯМР-спектроскопии. J. Biol. Chem. 2013; 288: 6045–6052. DOI: 10.1074 / jbc.M112.414516. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 64. Магнит и др. Выводы для противотуберкулезных соединений из библиотек ингибиторов киназ.Туберкулез (ред.) 2010; 90: 354–360. DOI: 10.1016 / j.tube.2010.09.001. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 65. Хьюз Дж. П., Рис С., Калинджян С. Б., Филпотт К. Л.. Принципы раннего открытия лекарств. Br. J. Pharmacol. 2011; 162: 1239–1249. DOI: 10.1111 / j.1476-5381.2010.01127.x. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 66. Segueni N, et al. Ингибирование стромелизина-1 производными кофейной кислоты из образца прополиса из Алжира. Planta Med. 2011; 77: 999–1004. DOI: 10.1055 / с-0030-1270713.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 67. Segueni N, Zellagui A, Moussaoui F, Lahouel M, Rhouati S. Флавоноиды из алжирского прополиса. Arabian J. Chem. 2016; 9: S425 – S428. DOI: 10.1016 / j.arabjc.2011.05.013. [CrossRef] [Google Scholar] 68. Piccinelli AL, et al. Химический состав и антиоксидантная активность алжирского прополиса. J. Agric. Food Chem. 2013; 61: 5080–5088. DOI: 10.1021 / jf400779w. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 69. Буфади Ю.М. и др. Характеристика и антиоксидантные свойства шести экстрактов алжирского прополиса: этилацетатные экстракты подавляют активность миелопероксидазы.Int. J. Mol. Sci. 2014; 15: 2327–2345. DOI: 10.3390 / ijms15022327. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 70. Эль-Бассуони А.А. Новое пренилированное соединение из египетского прополиса с антимикробной активностью. Преподобный Latinoamer. Quím. 2009; 37: 85–90. [Google Scholar] 71. Эль-Бассуони А., Абузид С. Новый пренилированный флаваноид с антибактериальной активностью из прополиса, собранного в Египте. Nat. Prod. Commun. 2010; 5: 43–45. [PubMed] [Google Scholar] 72. Абд Эль-Хади Ф.К. и др. Биоактивные метаболиты прополиса ингибируют супероксид-анион-радикал, ацетилхолинэстеразу и фосфодиэстеразу (PDE4) Int.J. Pharm. Sci. Rev. Res. 2013; 21: 338–344. [Google Scholar] 73. Ибрагим Р. и др. Выделение одиннадцати фенольных соединений из прополиса (пчелиный клей), собранного в Александрии, Египет. Planta Med. 2014; 80: PE5. [Google Scholar] 74. Мартос I, Коссентини М., Ферререс Ф., Томас-Барберан Ф.А. Флавоноидный состав тунисского меда и прополиса. J. Agric. Food Chem. 1997; 45: 2824–2829. DOI: 10,1021 / jf9609284. [CrossRef] [Google Scholar] 75. Siheri W, et al. Выделение противопротозойных соединений из ливийского прополиса.Фитотэр. Res. 2014; 28: 1756–1760. DOI: 10.1002 / ptr.5194. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 76. Папахрони Д. и др. Фитохимический анализ и биологическая оценка отобранных образцов африканского прополиса из Камеруна и Конго. Nat. Prod. Commun. 2015; 10: 67–70. [PubMed] [Google Scholar] 77. Almutairi S, et al. Новые активные пренилированные соединения против трипаносом из африканского прополиса. Фитохим. Lett. 2014; 10: 35–39. DOI: 10.1016 / j.phytol.2014.07.002. [CrossRef] [Google Scholar] 78. Петрова А, и др.Новые биологически активные соединения из кенийского прополиса. Фитотерапия. 2010. 81: 509–514. DOI: 10.1016 / j.fitote.2010.01.007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 79. Омар Р.М. и др. Химическая характеристика нигерийского красного прополиса и его биологическая активность против Trypanosoma Brucei . Фитохим. Анальный. 2016; 27: 107–115. DOI: 10.1002 / PCA.2605. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 80. Аллингер Н.Л. Конформационный анализ. 130. ММ2. Углеводородное силовое поле с использованием скручивающих членов V1 и V2.Варенье. Chem. Soc. 1977; 99: 8127–8134. DOI: 10.1021 / ja00467a001. [CrossRef] [Google Scholar] 81. Тротт О., Олсон А.Дж. AutoDock Vina: повышение скорости и точности стыковки за счет новой функции подсчета очков, эффективной оптимизации и многопоточности. J. Comput. Chem. 2010. 31: 455–461. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 82. Гастайгер Дж., Марсили М. Итерационное частичное выравнивание орбитальной электроотрицательности - быстрый доступ к атомным зарядам. Тетраэдр. 1980; 36: 3219–3228. DOI: 10.1016 / 0040-4020 (80) 80168-2.[CrossRef] [Google Scholar] 84. Моррис GM и др. AutoDock4 и AutoDockTools4: автоматическая стыковка с гибкостью выборочного рецептора. J. Comput. Chem. 2009. 30: 2785–2791. DOI: 10.1002 / jcc.21256. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 85. Шитяков С., Форстер С. Прогностическая модель In silico для определения векторно-опосредованных транспортных свойств для транспортера холина через гематоэнцефалический барьер. Adv. Прил. Биоинформа. Chem. 2014; 7: 1–14. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

Исследование противотуберкулезного потенциала выбранных компонентов прополиса с использованием подхода молекулярной стыковки

, # 1 , # 2, 5 , 3 и 4

Мохаммад Тухин Али

1 Кафедра биохимии и молекулярной биологии, Университет Дакки, Дакка, Бангладеш

Наталия Бличарска

2 Колледж Виктории, Университет Торонто

5 Текущий адрес: Департамент фармацевтической и биологической химии, Школа фармацевтики UCL, Лондон, Великобритания

Jamil A.Шилпи

3 Фармацевтическая дисциплина, Школа естественных наук, Университет Кхулна, Кхулна, Бангладеш

Вероник Зайдель

4 Исследовательская группа по открытию лекарств из натуральных продуктов, Институт фармацевтики и биомедицинских наук Стратклайд, Университет Стратклайда, Глазго, Великобритания

1 Кафедра биохимии и молекулярной биологии, Университет Дакки, Дакка, Бангладеш

2 Колледж Виктории, Университет Торонто, Торонто, Канада

3 Фармацевтическая дисциплина, Школа естественных наук, Университет Хулна, Кхулна , Бангладеш

4 Natural Products Drug Discovery Research Group, Strathclyde Institute of Pharmacy and Biomedical Sciences, Strathclyde Institute of Pharmacy and Biomedical Sciences, University of Strathclyde, Glasgow, UK

5 Нынешний адрес: Департамент фармацевтической и биологической химии, Школа фармацевтики UCL, Лондон , UK

Автор, ответственный за переписку.

# Распространяется поровну.

Поступило 26.01.2018 г .; Принято 26 июня 2018 г.

Открытый доступ Эта статья находится под международной лицензией Creative Commons Attribution 4.0, которая разрешает использование, совместное использование, адаптацию, распространение и воспроизведение на любом носителе или любом формате при условии, что вы надлежащим образом укажете оригинал Автор (ы) и источник предоставляют ссылку на лицензию Creative Commons и указывают, были ли внесены изменения. Изображения или другие материалы третьих лиц в этой статье включены в лицензию Creative Commons для статьи, если иное не указано в кредитной линии для материала.Если материал не включен в лицензию Creative Commons для статьи и ваше предполагаемое использование не разрешено законодательными актами или превышает разрешенное использование, вам необходимо получить разрешение непосредственно от правообладателя. Чтобы просмотреть копию этой лицензии, посетите http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/. Эта статья цитируется в других статьях PMC.
Дополнительные материалы

Дополнительная информация

GUID: AD7FA194-9DCF-4BDA-A733-7D779A37975E

Таблица S1

GUID: 35342553-6519-4B70-86B3-77619F27F804

Таблица E

Таблица E

GUID -42B3-A145-1E11E33C121A

Таблица S3

GUID: 55D79DF2-7D6E-4581-8580-06DF853939CA

Резюме

Туберкулез человека (ТБ), вызываемый микобактериями туберкулеза, ведущая бактериальная болезнь во всем мире и срочно необходимы новые противотуберкулезные препараты.Природные средства правовой защиты уже давно играют важную роль в медицине и продолжают служить вдохновляющими моделями для разработки лекарств. Прополис, вещество, вырабатываемое пчелами естественным путем при сборе растительных смол, используется в народной медицине из-за его полезного противотуберкулезного действия. В этом исследовании мы использовали подход молекулярной стыковки для изучения взаимодействия между выбранными составляющими прополиса и четырьмя «лекарственными» белками, участвующими в жизненно важных физиологических функциях в M . tuberculosis , а именно Mt PanK, Mt DprE1, Mt PknB и Mt KasA.Оценка стыковки лигандов по отношению к каждому белку была рассчитана для оценки свободной энергии связывания, причем наилучшая оценка стыковки (наименьшее значение энергии) указывает на наивысшее предсказанное сродство лиганд / белок. Также были изучены специфические взаимодействия, чтобы понять природу межмолекулярных связей между наиболее активными лигандами и остатками сайта связывания белка. Лигнан (+) - сезамин показал лучший результат стыковки с Mt, DprE1 (-10,7 ккал / моль), в то время как пренилированный флавоноид изонимфаеол D сильно стыковался с Mt KasA (-9.7 ккал / моль). Оба соединения продемонстрировали более высокие показатели стыковки, чем контрольные ингибиторы, и представляют собой потенциально интересную основу для дальнейшей биологической оценки in vitro и разработки противотуберкулезных препаратов.

Введение

Туберкулез человека (ТБ), вызываемый Mycobacterium tuberculosis , является основной причиной смерти во всем мире от одного инфекционного агента. По оценкам, в 2016 году 10,4 миллиона человек заболели активной формой туберкулеза, что привело к 1.7 миллионов смертей. Заболеваемость туберкулезом особенно высока в развивающихся странах, где ВИЧ / СПИД и малярия ложатся тяжелым бременем на системы здравоохранения. Лечение туберкулеза - длительный процесс, включающий сложные схемы приема лекарств, с побочными эффектами и взаимодействием, и связанный с плохим соблюдением пациентом режима лечения. Это привело к появлению штаммов с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ-ТБ) и широкой лекарственной устойчивости (ШЛУ). Для лечения МЛУ-ТБ требуются дорогостоящие лекарства, а ШЛУ-ТБ часто неизлечим. Рост заболеваемости устойчивым туберкулезом за последнее десятилетие стал сегодня чрезвычайной ситуацией во всем мире 1 .Хотя в последние годы усилия по разработке лекарств активизировались: были лицензированы два новых противотуберкулезных препарата (бедаквилин и деламанид), а несколько других в настоящее время проходят клинические испытания, текущих разработок лекарств все еще недостаточно для решения такой глобальной проблемы здравоохранения. По-прежнему существует острая необходимость в открытии и разработке новых противотуберкулезных препаратов, особенно для нацеливания на лекарственно-устойчивые и неактивные штаммы M . tuberculosis , а также обеспечивает более эффективное и короткое лечение 2 .

Природные лечебные средства, полученные из растений, микробов и продуктов животного происхождения, на протяжении веков играли важную роль в медицине. Они представляют собой уникальный пул самых разнообразных химических веществ, которые эволюционировали для специфического взаимодействия с биологическими мишенями и продолжают предоставлять новые и вдохновляющие шаблоны для разработки фармацевтических препаратов 3 . В последние годы возобновился интерес к исследованию природных источников для идентификации новых противотуберкулезных агентов 4 - 8 .Прополис, также известный как пчелиный клей, представляет собой натуральное вещество, вырабатываемое пчелами в основном при сборе выделений растений, таких как смолы и липкие экссудаты на почках листьев и ранах растений. Слово прополис происходит от греческого языка, где про означает «у входа», а полис означает «община» или «город». Пчелы используют прополис в качестве строительного и ремонтного материала для заделки зазоров, сглаживания внутренних стенок в ульях и в качестве антисептического покрытия для защиты от внешнего загрязнения. Прополис имеет очень изменчивый химический состав в зависимости от географического положения, в котором он собирается.Например, прополис из регионов с умеренным климатом богат фенольными соединениями, полученными из экссудатов тополей, тогда как пчелы в тропических странах имеют в своем распоряжении различные растительные источники, что приводит к типам прополиса, богатым другими фитохимическими веществами, такими как пренилированные флавоноиды и бензофеноны, лигнаны, терпеноиды. и фенольные липиды 9 - 13 . Прополис давно используется в качестве народного средства для лечения различных заболеваний 14 .Были проведены многочисленные научные исследования его лечебных свойств, в том числе противовоспалительное 15 , иммуностимулятор 16 , антиоксидант 17 , противоопухолевый 18 , нейропротекторный 1 и антимикробная активность 12 , 20 , 21 . Интересно, что прополис использовался в качестве ингредиента в традиционных лекарствах от туберкулеза 22 - 25 .Предыдущие исследования in vitro продемонстрировали, что экстракты прополиса могут подавлять рост M . tuberculosis , а также синергетический эффект известных противотуберкулезных препаратов, таких как изониазид, рифампицин и стрептомицин 26 , 27 . Также было замечено, что прополис ингибирует развитие туберкулеза, снижая образование некроза в гранулемах M . туберкулез -инфицированные животные 28 .

Несколько ферментов, участвующих в жизненно важных физиологических функциях в M . tuberculosis были определены как новые привлекательные молекулярные мишени для разработки противотуберкулезных препаратов 29 - 32 . Здесь мы использовали управляемую стыковку с AutoDock Vina для прогнозирования взаимодействий между выбранными составляющими прополиса и четырьмя из этих основных микобактериальных ферментов, а именно пантотенаткиназой ( Mt PanK, тип 1) 33 , декапренилфосфорил-β-D -рибоза 2'-эпимераза 1 ( Mt DprE1) 34 , протеинкиназа B ( Mt PknB) 35 и β-кетоацилацил-носитель белка-синтаза I ( Mt 9 9 KasA2) 36 .Молекулярный докинг - популярный инструмент, используемый для виртуального скрининга малых молекул (лигандов) против белков (мишеней), и в нескольких исследованиях AutoDock Vina успешно использовался для изучения взаимодействия натуральных продуктов с конкретными белками-мишенями, включая микобактериальные ферменты 37 - 41 . Однако о стыковке компонентов прополиса с Mt PanK, Mt DprE1, Mt PknB и Mt KasA никогда не сообщалось.

Результаты

Составляющие прополиса, исследованные в этом исследовании, представляют собой некоторые структурно разнородные соединения, которые мы сгруппировали в четыре основные категории, а именно флавоноиды, терпеноиды, простые фенолы и разные вещества, включая птерокарпан, производное фенилэтаноида, пять стильбенов и четыре лигнана. Известные молекулы, о которых ранее сообщалось в литературе как ингибиторы целевых ферментов и для которых природа и роль остатков сайта связывания были известны из их доступных комплексов с белками, использовали в качестве контролей.Чтобы проверить условия стыковки перед виртуальным скринингом составляющих прополиса, каждый контрольный ингибитор извлекали из его совместно кристаллизованного комплекса и повторно стыковали с соответствующей мишенью с помощью программного обеспечения AutoDock Vina. Затем была рассчитана оценка стыковки для каждого соединения прополиса для оценки его свободной энергии связывания с Mt PanK, Mt DprE1, Mt PknB и Mt KasA (таблица S1 ). Значения оценки стыковки, полученные для соединений в пределах каждого фитохимического класса, сравнивали с оценками контрольных ингибиторов для каждой мишени, чтобы выбрать молекулы с наименьшими значениями энергии, которые оказались выше, чем выбранные контрольные ингибиторы по сравнению с целевыми белками.Мы наблюдали, что ни один из компонентов прополиса не показал лучших результатов, чем контрольные образцы, ни по сравнению с Mt PanK, ни с Mt PknB. Вместо этого только стыковка с Mt KasA и Mt DprE1 дала полезные оценки. Таким образом, пренилированные флаваноны изонимфеол D, изонимфеол C и изонимфеол B показали высокие показатели стыковки с Mt KasA (-9,7, -9,6 и -9,5 ккал / моль соответственно), превосходящие контрольный ингибитор тиолактомицин (-7,9 ккал / моль). .Ki изонимфеола D для Mt KasA был оценен как 0,07 мкМ (контроль - 1,62 мкМ). Изонимфеол D также показал сильное предсказанное связывание с Mt, DprE1 (-10,1 ккал / моль) по сравнению с контрольным ингибитором 0T4 (-9,2 ккал / моль). Среди терпеноидов мы наблюдали, что ацетат тритерпена β-амирина олеананового типа проявляет некоторое сродство к Mt DprE1 (-9,9 ккал / моль) и оценивается лучше, чем 0T4 (-9,2 ккал / моль). В группе простых фенольных соединений (+) - хикоровая кислота показала высокий балл связывания (-9.5 ккал / моль) для Mt KasA по сравнению с тиолактомицином (-7,9 ккал / моль). Стильбен 5 - (( E ) -3,5-дигидроксистирил) -3 - (( E ) -3,7-диметилокта-2,6-диен-1-ил) бензол-1,2-диол показал стыковочный балл с Mt KasA (-9,4 ккал / моль), который также оказался лучше, чем тиолактомицин, в то время как лигнан (+) - сезамин сильно состыковался с Mt DprE1 с баллом (-10,7 ккал / моль) и предсказал Ki (0,01 мкМ) лучше, чем 0T4 (-9,2 ккал / моль и Ki 0,18 мкМ) (таблица).

Таблица 1

Прогнозируемая аффинность связывания (оценка стыковки в ккал / моль) и константа ингибирования (Ki в мкМ) выбранных компонентов прополиса и повторно докированных контрольных ингибиторов против Mt DprE1 и Mt KasA a .

903 9034 9034 9034 9034 9034 Ki 2 9034 9034 9034
Mt DprE1 Mt KasA
Показатель стыковки Ki Показатель стыковки Ki
0,18
Контрольный ингибитор, тиолактомицин −7,9 1,62
Изонимфеол-C
Изонимфаеол D −10,1 0,04 −9 . 7 0,07
Изонимфаеол B −9,5 0.11 −9,5 0,11
β-амирина ацетат −9,9 0,05 −2 > 1,10 4 9034 9034 9034 Chicicor 0,21 −9,5 0,11
5 - (( E ) -3,5-дигидроксистирил) -3 - (( E ) -3,7-диметилокта-2,6-диен-1 -ил) бензол-1,2-диол -9,2 0,18 -9,4 0,13
(+) - Сезамин -10 . 7 0,01 −8,7 0,42

Были дополнительно изучены специфические взаимодействия, чтобы понять природу межмолекулярных связей, образованных между выбранными соединениями и остатками сайтов связывания для четырех изученных ферментов (Таблица S2 ). Позы связывания, полученные для лигандов наилучшего связывания изонимфеола D и (+) - сезамина, проверяли визуально и отображены на фиг. Мы наблюдали, что изонимфеол D показал некоторые ключевые молекулярные взаимодействия с ключевыми остатками Pro280, Phe402 и His311 из Mt KasA (рис.) и (+) - сезамин взаимодействовал с ключевыми остатками Cys387, Ser59 и Gly117 Mt DprE1 (рис.). Наилучший результат по отношению к Mt PanK наблюдался для флавоноида пинобанксин-3- ( E ) -кафеат (-10,0 ккал / моль), но взаимодействия белок-лиганд для этого соединения не исследовались, так как его рейтинг ниже, чем полученный балл. для контрольного ингибитора ZVT (-10,9 ккал / моль). Наибольшее сродство к Mt PknB наблюдалось для флавоноидов пахиподола и пинобанксин-3- ( E ) -кафеат (-9.1 ккал / моль), но этот показатель снова оказался ниже, чем оценка, полученная для контрольного ингибитора митоксантрона (-10,8 ккал / моль), и больше не исследовалась.

Молекулярные взаимодействия между изонимфеолом D и Mt KasA. Пристыкованная поза изонимфеола D в сайте связывания Mt KasA (a) , взаимодействия между изонимфеолом D и Mt KasA, показывающие ключевые водородные связи (зеленые пунктирные линии), гидрофобные связи (темно-розовые пунктирные линии) и соответствующие амино кислотные остатки (b) , 2D-график взаимодействий между изонимфеолом D и ключевыми остатками Mt KasA (c) , созданный визуализатором BIOVIA Discovery Studio.

Молекулярные взаимодействия между (+) - сезамином и Mt DprE1. Пристыкованная поза (+) - сезамина в сайте связывания Mt DprE1 (a) , взаимодействия между (+) - сезамином и Mt DprE1 показывают ключевые водородные связи (зеленые пунктирные линии), гидрофобные связи (темно-розовые пунктирные линии) и соответствующие аминокислотные остатки (b) , 2D-график взаимодействий между (+) - сезамином и ключевыми остатками Mt DprE1 (c) , созданный визуализатором BIOVIA Discovery Studio.

Обсуждение

В этом исследовании мы исследовали противотуберкулезный потенциал ряда соединений прополиса с использованием подхода управляемого молекулярного докинга с целью определения их сродства к четырем микобактериальным ферментам: Mt PanK, Mt DprE1 , Mt PknB и Mt KasA. Обоснованием выбора этих конкретных белков было то, что они являются ключевыми ферментами, необходимыми для M . tuberculosis для роста и выживания в эукариотическом хозяине.Они также участвуют во множестве основных микобактериальных путей, таких как биогенез клеточной стенки, биосинтез кофактора и передача сигнала. Они отсутствуют в клетках млекопитающих, что делает их высокоселективными и привлекательными "лекарственными" мишенями для микобактериальных заболеваний, и они представляют собой некоторые недавно утвержденные новые мишени, против которых в настоящее время нет доступных на рынке лекарств 33 - 36 . Пантотенаткиназа типа I из M . tuberculosis ( Mt, PanK) - это фермент, который катализирует первую стадию биосинтеза кофактора Коэнзима А (КоА) путем превращения пантотената (витамин B 5 ) в 4'-фосфопантотенат 33 .Серин / треониновые протеинкиназы, такие как протеинкиназа B ( Mt, PknB), которая участвует в регуляции морфологии микобактериальных клеток, играют важную роль в путях передачи сигналов и позволяют M . tuberculosis для успешного роста и выживания в пределах хозяина 35 , 42 . Поскольку клеточная стенка микобактерий представляет собой сложную структуру, состоящую из слоев пептидогликана, арабиногалактана, липоарабиноманнана и некоторых миколиновых кислот, двух ключевых белков-мишеней в M . tuberculosis биосинтез клеточной стенки, синтаза I белка-носителя β-кетоацилацила ( Mt KasA) и декапренилфосфорил-β-D-рибоза 2'-эпимераза 1 ( Mt DprE1) также были включены в это исследование 34 , 36 . Наличие миколиновых кислот - уникальная особенность клеточной стенки микобактерий. Эти жирные кислоты с очень длинной цепью, которые связаны со способностью микобактерий выживать в организме хозяина и противостоять многим антибиотикам, продуцируются благодаря активности ряда синтаз жирных кислот (FAS). Mt KasA - один из ферментов пути FAS микобактерий II типа, который встречается только у бактерий 36 . Более пристальный взгляд на взаимодействия между изонимфеолом D и Mt KasA показывает, что пренилированный хвост этого флавоноида связывается с гидрофобным карманом Mt KasA, который содержит Pro280 и Phe402. Кроме того, сильная водородная связь (расстояние контакта 2,77 Å) наблюдалась между фенольным кислородом C-4 'изонимфеола D и азотом остатка His311 в активном центре, что очень похоже на то, что ранее описывалось как режим привязка управления TLM 36 .Фермент микобактериальной клеточной стенки декапренилфосфорил-β-D-рибоза 2'-эпимераза 1 ( Mt DprE1) участвует в биосинтезе двух основных компонентов микобактериальной клеточной стенки, а именно арабиногалактана и липоарабиноманнана 43 . Cys387 в активном центре Mt DprE1 был идентифицирован как критический остаток для связывания через ковалентную связь контрольного ингибитора 0T4 (также называемого CT325) 34 . В случае (+) - сезамина наблюдаемые взаимодействия происходили не через ковалентные связи, а включали взаимодействие π-серы с Cys387 и сильные водородные связи между атомами кислорода метилендиокси и тетрагидрофурановой составляющей и Ser59 и Gly117 (расстояние контакта 3.08 и 2,94 Å соответственно).

В предыдущих исследованиях сообщалось о противотуберкулезной активности некоторых из исследуемых здесь компонентов прополиса, включая акацетин, апигенин, кверцетин, пиностробин, пиноцембрин, нарингенин, ликвиритигенин, генистеин, циклоартенол, β-амиринацетат, пимаровую кислоту, метилкофеат. , p -куаровая кислота, метилкумарат, коричная кислота, медикарпин, ресвератрол и сезамин 44 - 61 . Среди выбранных соединений, показывающих лучшие показатели стыковки, только ацетат β-амирина и сезамин ранее проявляли умеренную активность против M . tuberculosis h47Rv со значениями минимальной ингибирующей концентрации (МИК) 100 и 50 мкг / мл (213 и 141 мкМ) соответственно 53 , 61 . Насколько нам известно, не было опубликованных отчетов о противотуберкулезной активности изонимфеола D. Для контрольных ингибиторов экспериментальные данные показали значения МИК> 64 мкг / мл (эквивалент> 150 мкМ) для ZVT и 62,5 мкМ для тиолактомицина. против М . туберкулез h47Rv 33 , 62 .Активность митоксантрона (MIX) против M . туберкулез h47Rv, M . smegmatis mc 2 155 и M . aurum A + обнаружил значения МИК в диапазоне 25–400 мкМ 35 , в то время как активность 0T4 была представлена ​​в виде значений IC 50 10,4 и 4,6 мкг / мл против M . смегматис и M . bovis BCG, соответственно 34 .В дополнение к этому, ферментативные исследования также показали, что контрольные соединения ZVT и MIX ингибируют Mt PanK и Mt PknB со значениями IC 50 1,13 мкМ и 0,8 мкМ, соответственно 33 , 35 .

Целью молекулярного стыковки является использование алгоритмов оценки для оценки вероятности связывания данного соединения с белком-мишенью. Мы идентифицировали лигнан (+) - сезамин и пренилированный флавоноид изонимфаеол D из прополиса как наиболее предсказуемые лиганды связывания для Mt DprE1 и Mt KasA, соответственно.Интересно, что изонимфеол D продемонстрировал сильное предсказанное связывание с обоими ферментами, что позволяет предположить, что это особенно многообещающий агент, поскольку было продемонстрировано, что шансы на успешное обнаружение активных соединений с использованием методологий виртуального скрининга на основе структуры выше, когда одно соединение может нацеливаться на множественные белки 63 . И (+) - сезамин, и изонимфеол D показали более высокие баллы стыковки, чем те, которые были получены для известных контрольных ингибиторов целевых белков, и имели прогнозируемую активность на целевых сайтах ниже 0.1 мкМ. Однако отсутствовала корреляция между сильным предсказанным сродством (+) - сезамина к Mt DprE1 (оценка -10,7 ккал / моль и Ki 0,01 мкМ) и его наблюдаемой (умеренной) активностью в отношении целых бактериальных клеток. (МИК 141 мкМ). Ранее сообщалось, что не всегда может быть установлено прямое соответствие между результатами молекулярного докинга in silico и биологическими параметрами in vitro . Это может быть связано с тем, что некоторые соединения не способны проходить через сложную клеточную стенку микобактерий, или характеристики сайта связывания, где происходит ингибирование, отличаются in vivo 64 .Изонимфеол D и (+) - сезамин нельзя использовать как таковые в клинических условиях. Однако, как большинство биоактивных натуральных продуктов, они представляют собой некоторые потенциально интересные «хиты» 65 , которые могут быть в дальнейшем структурно оптимизированы для разработки новых противотуберкулезных препаратов, и они требуют дальнейшей биологической оценки in vitro .

Методы

Выбор лиганда

Лиганды, выбранные для этого исследования, представляли собой 78 хорошо охарактеризованных фитохимических веществ, ранее выделенных из Алжира 66 - 69 , Египта 70 - 73 , Туниса 74 , ливийский 75 , конголезский 76 , ганский 77 , кенийский 78 и нигерийский 79 прополис.Все химические структуры были получены из базы данных соединений PubChem (NCBI) (http://www.pubchem.ncbi.nlm.nih.gov).

Препарат лиганда и белка

Структура каждого лиганда была нарисована с использованием ChemOffice v.15.1 и оптимизирована геометрия с использованием минимизации энергии MM2 80 . Все вращающиеся связи, присутствующие на лигандах, считались невращающимися. Это позволило нам выполнить жесткую стыковку и минимизировать стандартные ошибки (обычно 2,85 ккал / моль), вероятно, из-за лигандов с большим количеством активных вращающихся связей 81 .Был использован метод расчета заряда Гастайгера, и частичные заряды были добавлены к атомам лиганда перед стыковкой 82 . Кристаллические структуры Mt PanK типа 1 (PDB ID: 4BFT), Mt DprE1 (PDB ID: 4FF6), Mt PknB (PDB ID: 2FUM) и Mt KasA (PDB ID: 2WGE) были получено из базы данных RCSB Protein Data Bank (PDB) (http://www.pdb.org). Структуры ингибиторов лигандов 2-хлор-N- [1- (5 - {[2- (4-фторфенокси) этил] сульфанил} -4-метил-4h-1,2,4-триазол-3-ил) этил] бензамид (ZVT) для Mt PanK, 3- (гидроксиамино) -N - [(1r) -1-фенилэтил] -5- (трифторметил) бензамид (0T4) для Mt DprE1, митоксантрон (MIX) для Mt PknB и тиолактомицин (TLM) для Mt KasA были получены из соответствующих записей PDB (http: // www.ebi.ac.uk/thornton-srv/databases/cgi-bin/pdbsum/GetPage.pl?pdbcode=index.html). Каждый белок использовался как жесткая структура, и все молекулы воды и гетероатомы были удалены с помощью BIOVIA Discovery Studio Visualizer v.4.5 (Accelrys).

Идентификация остатков сайта связывания

Предыдущие исследования были использованы для определения природы и роли остатков сайта связывания для Mt PanK типа 1 33 , Mt DprE1 34 , Mt PknB 35 и Mt KasA 36 .Конкретные аминокислоты, участвующие во взаимодействиях лиганд / белок, также были подтверждены после анализа кристаллических структур PDB, доступных для каждого целевого белка в комплексе либо с природными субстратами, либо с контрольными ингибиторами (таблица S3 ).

Подготовка и стыковка блока сетки

Все преобразования файлов, необходимые для исследования стыковки, были выполнены с использованием химического инструментария с открытым исходным кодом Open Babel v. 2.3.2 83 . Параметры сетки (таблица) были установлены таким образом, чтобы обеспечить пространство полости подходящего размера, достаточно большое для размещения каждого соединения в пределах сайта связывания каждого белка, и были определены с помощью AutoDock Tools v.1.5.6rc3 84 . Расчеты молекулярного докинга для всех соединений с каждым из белков были выполнены с использованием AutoDock Vina v. 1.1.2 81 . Чтобы проверить точность стыковки и позволить сравнение оценок стыковки, все сокристаллизованные ингибирующие лиганды повторно стыковались с соответствующими белковыми структурами. Различные ориентации лигандов были исследованы и ранжированы на основе их энергетических баллов. Наш протокол стыковки позволил создать аналогичную позу стыковки для каждого контрольного лиганда в отношении его биологической конформации в совместно кристаллизованном комплексе белок-лиганд.Мы дополнительно визуально проверили все позы связывания для данного лиганда, и только позы с наименьшим значением RMSD (просто среднеквадратичное отклонение) (порог <1,00 Å) считались для получения более высокой точности стыковки. Генетический алгоритм Ламарка использовался во время процесса стыковки, чтобы исследовать лучшее конформационное пространство для каждого лиганда с размером популяции 150 человек. Максимальное количество генерации и оценки было установлено на уровне 27 000 и 2 500 000, соответственно. Все остальные параметры были установлены по умолчанию.Поскольку активные сайты связывания и некоторые контрольные ингибиторы для наших четырех выбранных микобактериальных ферментов были хорошо охарактеризованы в предыдущих исследованиях 33 - 36 , мы решили использовать управляемый метод стыковки для повышения эффективности стыковки 37 путем отбора проб каждой конформации лиганда (включая повторную стыковку контрольных ингибиторов) в каждом сайте связывания белка и последующего ранжирования этих конформаций с использованием функции подсчета баллов для прогнозирования наилучшего сродства связывания белок-лиганд (рассчитанного как прогнозируемая свободная энергия связывания ΔG bind в ккал / моль) (Таблица S1 ).Самая низкая свободная энергия связывания (т.е. лучший результат позы стыковки с наименьшим среднеквадратичным отклонением) указывает на наивысшее предсказанное сродство лиганд / белок. Оценки стыковки Auto Dock Vina для этих выбранных компонентов прополиса, которые имеют более высокий рейтинг, чем контрольный ингибитор, в дальнейшем использовали для расчета прогнозируемых констант ингибирования (значения Ki) ​​выбранных соединений по отношению к заданной цели (таблица) 85 . Специфические межмолекулярные взаимодействия с мишенями (Таблица S2 и Рис. -) были дополнительно визуализированы с помощью BIOVIA Discovery Studio Visualizer v.4.5 (Accelrys).

Таблица 2

Параметры сетки, выбранные для целевых ферментов, на основе остатков сайтов связывания a .

Целевой белок (PDB ID) Создание сетки рецептора остатков сайта связывания Центральная сетка (точки на оси X, Y, Z) Размер (точки на оси X, Y, Z)
Mt PanK (4BFT) Gly 97, Ser 98, Val 99, Ala 100, Val 101, Gly 102, Lys 103, Ser 104, His 179, Tyr 235, Arg 238, Met 242 , Asn 277 −18.742 × −13,919 × 11,679 20 × 20 × 20
Mt DprE1 (4FF6) Gly 117, Trp 230, Val 265, Glu 336, Asn 385, Ile 386, Cys 387 14,99 −20,507 × 37,226 20 × 20 × 20
Mt PknB (2FUM) Leu 17, Gly 18, Val 25, Ala 38, Met 92, Tyr 94, Val 95, Lys 140, Met 145 , Asn 143, Met 155 61,518 × 2,429 × −25,588 21 × 20 × 20
Mt KasA (2WGE) Cys 171, Phe 237, Ala 279, Pro 280, His 311, Gly 318, His 345, Phe 402, Gly 403, Phe 404 38.342 × −1,206 × −7,033 20 × 20 × 20

Дополнительные электронные материалы

Вклад авторов

M.T.A. и В. разработал исследование. M.T.A. и Дж. проводил эксперименты. N.B., M.T.A. и В. собраны литературные данные. M.T.A. и В. проанализировали экспериментальные данные. N.B. и В. написал оригинальный текст рукописи. M.T.A. подготовил все цифры. M.T.A. и В. подготовил все таблицы. Все авторы рецензировали рукопись.

Примечания

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Сноски

Примечание издателя: Springer Nature сохраняет нейтралитет в отношении юрисдикционных претензий на опубликованных картах и ​​принадлежности к учреждениям.

Мохаммад Тухин Али и Наталья Бличарска внесли равный вклад в эту работу.

Электронный дополнительный материал

Дополнительная информация сопровождает этот документ на 10.1038 / s41598-018-30209-у.

Ссылки

2. Zumla A, et al. Лечение и ведение туберкулеза - обновленная информация о схемах лечения, испытаниях, новых лекарствах и дополнительных методах лечения. Ланцет Респир. Med. 2015; 3: 220–234. DOI: 10.1016 / S2213-2600 (15) 00063-6. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 3. Ньюман DJ, Крэгг GM. Натуральные продукты как источники новых лекарств с 1981 по 2014 год. J. Nat. Prod. 2016; 79: 629–661. DOI: 10.1021 / acs.jnatprod.5b01055. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 4. Salomon CE, Schmidt LE.Натуральные продукты, ведущие к разработке лекарств от туберкулеза. Curr. Верхний. Med. Chem. 2012; 12: 735–765. DOI: 10,2174 / 156802612799984526. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 5. Гусман Дж. Д., Гупта А., Букар Ф., Гиббонс С., Бхакта С. Антимикобактериальные препараты из природных источников: древние времена, эра антибиотиков и новые основы. Передний. Biosci. 2012; 17: 1861–1881. DOI: 10,2741 / 4024. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Дашти Ю., Гркович Т., Куинн Р.Дж. Прогнозирование ценности натуральных продуктов, исследование возможностей противотуберкулезных препаратов.Nat. Prod. Отчет 2014; 31: 990–998. DOI: 10.1039 / C4NP00021H. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 7. Сантош Р.С., Сурьянараянан Б. Растения: источник новых антимикобактериальных препаратов. Planta Med. 2014; 80: 9–21. [PubMed] [Google Scholar] 8. Chinsembu KC. Туберкулез и природная аптека предполагаемых противотуберкулезных средств. Acta Trop. 2016; 153: 46–56. DOI: 10.1016 / j.actatropica.2015.10.004. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 9. Маркучи М., Банкова В. Химический состав, растительное происхождение и биологическая активность бразильского прополиса.Curr. Верхний. Фитохим. 1999; 2: 115–123. [Google Scholar] 10. Куэста-Рубио О, Фронтана-Урибе Б.А., Рамирес-Апан Т., Карденас Дж. Полиизопренилированные бензофеноны в кубинском прополисе; биологическая активность неморосона. Z. Naturforsch. 2002. 57: 372–378. DOI: 10.1515 / znc-2002-3-429. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Рагхукумар Р., Вали Л., Уотсон Д., Фернли Дж., Зайдель В. Устойчивый к антиметициллину Staphylococcus aureus (MRSA), активность «тихоокеанского прополиса» и выделенных пренилфлаванонов. Фитотэр.Res. 2010; 24: 1181–1187. [PubMed] [Google Scholar] 13. Кардар М.Н. и др. Характеристика тритерпенов и новых фенольных липидов в камерунском прополисе. Фитохимия. 2014; 106: 156–163. DOI: 10.1016 / j.phytochem.2014.07.016. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15. Паулино Н. и др. Противовоспалительное действие биодоступного соединения артепиллина С в бразильском прополисе. Евро. J. Pharmacol. 2008. 587: 296–301. DOI: 10.1016 / j.ejphar.2008.02.067. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 16. Нассар С.А., Мохамед А.Х., Суфи Х., Наср С.М., Махран К.М.Иммуностимулирующее действие египетского прополиса на кроликов. Sci. Мир J. 2012; 2012: 6. DOI: 10.1100 / 2012/6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 17. Грегорис Э., Стеванато Р. Корреляция между полифенольным составом и антиоксидантной активностью венецианского прополиса. Food Chem. Toxicol. 2010. 48: 76–82. DOI: 10.1016 / j.fct.2009.09.018. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Teerasripreecha D, et al. In vitro Антипролиферативная / цитотоксическая активность карданола и кардола, обогащенного прополисом тайского происхождения Apis mellifera , в отношении линий раковых клеток.BMC Дополнение. Альтерн. Med. 2012; 12:27. DOI: 10.1186 / 1472-6882-12-27. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 19. Фаруки, Т. и Фаруки, А.А. Благотворное влияние прополиса на здоровье человека и неврологические заболевания. Передний . Биоски . (Elite Ed) 4 , 779–793 (2012). [PubMed] 20. Зайдель В., Пейфун Э., Уотсон Д.Г., Фернли Дж. Сравнительное исследование антибактериальной активности прополиса из разных географических и климатических зон. Фитотэр.Res. 2008; 22: 1256–1263. DOI: 10.1002 / ptr.2480. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21. Сфорцин Ю.М., Банкова В. Прополис: есть ли потенциал для разработки новых лекарств? J. Ethnopharmacol. 2011; 133: 253–260. DOI: 10.1016 / j.jep.2010.10.032. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

22. Чжан, Х. Изобретатель; Китайский лекарственный состав для лечения туберкулеза легких. Патент Китая CN 1879668 A. 2006. 20 декабря.

23. Бураев М.Е. и др. . Изобретатель; Метод комплексного лечения туберкулеза легких.Патент России RU 2429866 С1. 2011 27 сентября.

24. Порфирио да Силва, З. Изобретатель; Сироп, содержащий рифампицин, прополис и мед для лечения туберкулеза. Патент Бразилии BR 20013 A2. 2011 Apr 19.

25. Ваг, В. Д. Прополис: чудо-пчелиный продукт и его фармакологические возможности. Расширенный . Pharmacol . Sci . 2013 , 308249 (2013). [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 26. Valcic S, et al. Фитохимические, морфологические и биологические исследования прополиса из Центрального Чили.Z. Naturforsch. С. 1999; 54: 406–416. DOI: 10.1515 / znc-1999-5-617. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. Scheller S, et al. Синергизм этанольного экстракта прополиса (EEP) и противотуберкулезных препаратов в отношении роста микобактерий. Z. Naturforsch. С. 1999; 54: 549–553. DOI: 10.1515 / znc-1999-7-814. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 28. Йилдирим З. и др. Влияние водного экстракта турецкого прополиса на туберкулезную инфекцию морских свинок. Pharmacol. Res. 2004. 49: 287–292. DOI: 10.1016 / j.phrs.2003.10.007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 29. Lou Z, Zhang X. Белковые мишени для открытия лекарственного средства против Mycobacterium tuberculosis на основе структуры. Белковая клетка. 2010; 1: 435–442. DOI: 10.1007 / s13238-010-0057-3. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Джексон М., Макнил М.Р., Бреннан П.Дж. Прогресс в нацеливании на биогенез клеточной оболочки у Mycobacterium tuberculosis . Future Microbiol. 2013; 8: 855–875. DOI: 10.2217 / fmb.13.52. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 31.Мдлули К., Канеко Т., Аптон А. Открытие лекарств от туберкулеза и новые цели. Анна. Акад. Sci. 2014; 1323: 56–75. DOI: 10.1111 / nyas.12459. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 33. Bjorkelid C, et al. Структурная и биохимическая характеристика соединений, ингибирующих пантотенаткиназу Mycobacterium tuberculosis . J. Biol. Chem. 2013; 288: 18260–18270. DOI: 10.1074 / jbc.M113.476473. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34. Батт С.М. и др. Структурные основы ингибирования Mycobacterium tuberculosis DprE1 ингибиторами бензотиазинона.Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 2012; 109: 11354–11359. DOI: 10.1073 / pnas.1205735109. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 35. Wehenkel A, et al. Структура PknB в комплексе с митоксантроном, АТФ-конкурентным ингибитором, предполагает способ регуляции протеинкиназы у микобактерий. FEBS lett. 2006; 580: 3018–3022. DOI: 10.1016 / j.febslet.2006.04.046. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 36. Luckner SR, Machutta CA, Tonge PJ, Kisker C. Кристаллические структуры Mycobacterium tuberculosis KasA демонстрируют механизм действия в рамках биосинтеза клеточной стенки и его ингибирование тиолактомицином.Состав. 2009. 17: 1004–1013. DOI: 10.1016 / j.str.2009.04.012. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37. Мэн XY, Чжан Х.Х., Мезей М., Цуй М. Молекулярный докинг: мощный подход к открытию лекарств на основе структуры. Curr. Comput. Aided Drug Des. 2011; 7: 146–157. DOI: 10,2174 / 1573405677602. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 38. Сейеди С.С. и др. Вычислительный подход к изучению потенциальной активности выбранных флавоноидов против чикунгуньи. Sci. Отчет 2016; 6: 24027.DOI: 10,1038 / srep24027. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 39. Сундарраджан С., Лулу С., Арумугам М. Вычислительная оценка фитосоединений для борьбы с лекарственно-устойчивым туберкулезом с помощью многоцелевой терапии. J. Mol. Модель. 2015; 21: 247. DOI: 10.1007 / s00894-015-2785-z. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 40. Сингх С., Баджпай Ю., Линн А.М. Виртуальный скрининг на основе структуры для выявления ингибиторов фермента MurE Mycobacterium tuberculosis с использованием AutoDock Vina. Биоинформация.2014; 10: 697–702. DOI: 10.6026 / 97320630010697. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 41. Ядав А.К. и др. Скрининг флавоноидов на противотуберкулезную активность и взаимосвязь между их структурой и активностью. Med. Chem. Res. 2013; 22: 2706–2716. DOI: 10.1007 / s00044-012-0268-7. [CrossRef] [Google Scholar] 43. Brecik M, et al. DprE1 является уязвимой мишенью для противотуберкулезного препарата из-за его локализации в клеточной стенке. ACS Chem. Биол. 2015; 10: 1631–1636. DOI: 10.1021 / acschembio.5b00237. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 44.Чен Дж.Дж., Ву Х.М., Пэн К.Ф., Чен И.С., Чу С.Д. seco -Дитерпеноиды абиетана, производное фенилэтаноида и противотуберкулезные компоненты из Callicarpa pilosissima . J. Nat. Prod. 2009. 72: 223–228. DOI: 10.1021 / np800721f. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 45. Чен Л.В., Ченг М.Дж., Пэн К.Ф., Чен И.С. Вторичные метаболиты и антимикобактериальная активность корней Ficus nervosa . Chem. Биодайверы. 2010; 7: 1814–1821. DOI: 10.1002 / cbdv.2007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 46.Camacho-Corona MdR и др. Оценка некоторых вторичных метаболитов растительного происхождения в отношении чувствительной и множественной лекарственной устойчивости Mycobacterium tuberculosis . J. Mex. Chem. Soc. 2009; 53: 71–75. [Google Scholar] 47. Gua JQ, Wang Y, Franzblau SG, Montenegro G, Timmermann BN. Составляющие Quinchamalium majus с потенциальной противотуберкулезной активностью. Z. Naturforsch. С. 2004; 59: 797–802. DOI: 10.1515 / znc-2004-11-1206. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 48. Чжоу Т.Х., Чен Дж.Дж., Пэн К.Ф., Ченг М.Дж., Чен И.С.Новые флаваноны из листьев Cryptocarya chinensis и их противотуберкулезная активность. Chem. Биодайверы. 2011; 8: 2015–2024. DOI: 10.1002 / cbdv.201000367. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 49. Куэте V и др. Противомикробная активность сырых экстрактов и соединений из Ficus chlamydocarpa и Ficus cordata (Moraceae) J Ethnopharmacol. 2008; 120: 17–24. DOI: 10.1016 / j.jep.2008.07.026. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 50. Gaur R, et al. Синтез, противотуберкулезная активность и исследования на молекулярном моделировании аналогов изоликвиритигенина и ликвиритигенина, биоактивных компонентов из Glycyrrhiza glabra .Med. Chem. Res. 2015; 24: 3494–3503. DOI: 10.1007 / s00044-015-1401-1. [CrossRef] [Google Scholar] 51. Saludes JP, Гарсон MJ, Franzblau SG, Aguinaldo AM. Противотуберкулезные компоненты из гексановой фракции Morinda citrifolia Linn. (Rubiaceae) Phytother. Res. 2002. 16: 683–685. DOI: 10.1002 / ptr.1003. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 52. Акихиса Т. и др. Противотуберкулезная активность тритерпеноидов цветков сложноцветных. Биол. Pharm. Бык. 2005. 28: 158–160. DOI: 10.1248 / bpb.28.158. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 53.Биби Н. и др. In vitro противотуберкулезная активность компонентов, выделенных из Haloxylon salicornicum . Биоорг. Med. Chem. Lett. 2010. 20: 4173–4176. DOI: 10.1016 / j.bmcl.2010.05.061. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 54. Лекфром Р., Канокмедхакул С., Канокмедхакул К. Биоактивные дитерпены из надземных частей Anisochilus damageandii . Planta Med. 2010. 76: 726–728. DOI: 10.1055 / с-0029-1240656. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 55. Balachandran C, et al.Антимикробная и антимикобактериальная активность метилкофеата, выделенного из Solanum torvum Swartz. фрукты. Indian J. Microbiol. 2012; 52: 676–681. DOI: 10.1007 / s12088-012-0313-8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 56. Чжао Дж., Эвангелопулос Д., Бхакта С., Грей А.И., Зайдель В. Противотуберкулезная активность экстрактов и компонентов Arctium lappa и Tussilago farfara . J Ethnopharmacol. 2014; 155: 796–800. DOI: 10.1016 / j.jep.2014.06.034. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 57.Guzman JD, et al. 2-Гидроксизамещенные коричные кислоты и ацетанилиды являются селективными ингибиторами роста Mycobacterium tuberculosis . Med. Chem. Comm. 2014; 5: 47–50. DOI: 10.1039 / C3MD00251A. [CrossRef] [Google Scholar] 58. Хасан Н. и др. Химические компоненты корня Sesbania grandiflora и их противотуберкулезная активность. Фармацевтика. 2012; 5: 882–889. DOI: 10.3390 / ph5080882. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 59. Sun D и др. Оценка химических библиотек флавоноидов и ресвератрола показала, что абиссинон II является многообещающим антибактериальным средством.Chem. Med. Chem. 2012; 7: 1541–1545. DOI: 10.1002 / cmdc.201200253. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 60. Риверо-Круз I и др. Антимикобактериальные агенты из избранных мексиканских лекарственных растений. J. Pharm. Pharmacol. 2005; 57: 1117–1126. DOI: 10.1211 / JPP.57.9.0007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 61. Нанда Б., Наргунд Л.Г., Наргунд С.Л., Бхат К. Дизайн и синтез некоторых новых фторбензимидазолов, замещенных структурными мотивами, присутствующими в физиологически активных натуральных продуктах для противотуберкулезной активности.Iran J. Pharm. Res. 2017; 16: 929–942. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 62. Капилашрами К. и др. Ингибиторы β-кетоацил-AcpM-синтазы A (KasA) на основе тиолактомицина: открытие ингибиторов на основе фрагментов с использованием транзиторной одномерной ядерной ЯМР-спектроскопии. J. Biol. Chem. 2013; 288: 6045–6052. DOI: 10.1074 / jbc.M112.414516. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 64. Магнит и др. Выводы для противотуберкулезных соединений из библиотек ингибиторов киназ.Туберкулез (ред.) 2010; 90: 354–360. DOI: 10.1016 / j.tube.2010.09.001. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 65. Хьюз Дж. П., Рис С., Калинджян С. Б., Филпотт К. Л.. Принципы раннего открытия лекарств. Br. J. Pharmacol. 2011; 162: 1239–1249. DOI: 10.1111 / j.1476-5381.2010.01127.x. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 66. Segueni N, et al. Ингибирование стромелизина-1 производными кофейной кислоты из образца прополиса из Алжира. Planta Med. 2011; 77: 999–1004. DOI: 10.1055 / с-0030-1270713.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 67. Segueni N, Zellagui A, Moussaoui F, Lahouel M, Rhouati S. Флавоноиды из алжирского прополиса. Arabian J. Chem. 2016; 9: S425 – S428. DOI: 10.1016 / j.arabjc.2011.05.013. [CrossRef] [Google Scholar] 68. Piccinelli AL, et al. Химический состав и антиоксидантная активность алжирского прополиса. J. Agric. Food Chem. 2013; 61: 5080–5088. DOI: 10.1021 / jf400779w. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 69. Буфади Ю.М. и др. Характеристика и антиоксидантные свойства шести экстрактов алжирского прополиса: этилацетатные экстракты подавляют активность миелопероксидазы.Int. J. Mol. Sci. 2014; 15: 2327–2345. DOI: 10.3390 / ijms15022327. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 70. Эль-Бассуони А.А. Новое пренилированное соединение из египетского прополиса с антимикробной активностью. Преподобный Latinoamer. Quím. 2009; 37: 85–90. [Google Scholar] 71. Эль-Бассуони А., Абузид С. Новый пренилированный флаваноид с антибактериальной активностью из прополиса, собранного в Египте. Nat. Prod. Commun. 2010; 5: 43–45. [PubMed] [Google Scholar] 72. Абд Эль-Хади Ф.К. и др. Биоактивные метаболиты прополиса ингибируют супероксид-анион-радикал, ацетилхолинэстеразу и фосфодиэстеразу (PDE4) Int.J. Pharm. Sci. Rev. Res. 2013; 21: 338–344. [Google Scholar] 73. Ибрагим Р. и др. Выделение одиннадцати фенольных соединений из прополиса (пчелиный клей), собранного в Александрии, Египет. Planta Med. 2014; 80: PE5. [Google Scholar] 74. Мартос I, Коссентини М., Ферререс Ф., Томас-Барберан Ф.А. Флавоноидный состав тунисского меда и прополиса. J. Agric. Food Chem. 1997; 45: 2824–2829. DOI: 10,1021 / jf9609284. [CrossRef] [Google Scholar] 75. Siheri W, et al. Выделение противопротозойных соединений из ливийского прополиса.Фитотэр. Res. 2014; 28: 1756–1760. DOI: 10.1002 / ptr.5194. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 76. Папахрони Д. и др. Фитохимический анализ и биологическая оценка отобранных образцов африканского прополиса из Камеруна и Конго. Nat. Prod. Commun. 2015; 10: 67–70. [PubMed] [Google Scholar] 77. Almutairi S, et al. Новые активные пренилированные соединения против трипаносом из африканского прополиса. Фитохим. Lett. 2014; 10: 35–39. DOI: 10.1016 / j.phytol.2014.07.002. [CrossRef] [Google Scholar] 78. Петрова А, и др.Новые биологически активные соединения из кенийского прополиса. Фитотерапия. 2010. 81: 509–514. DOI: 10.1016 / j.fitote.2010.01.007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 79. Омар Р.М. и др. Химическая характеристика нигерийского красного прополиса и его биологическая активность против Trypanosoma Brucei . Фитохим. Анальный. 2016; 27: 107–115. DOI: 10.1002 / PCA.2605. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 80. Аллингер Н.Л. Конформационный анализ. 130. ММ2. Углеводородное силовое поле с использованием скручивающих членов V1 и V2.Варенье. Chem. Soc. 1977; 99: 8127–8134. DOI: 10.1021 / ja00467a001. [CrossRef] [Google Scholar] 81. Тротт О., Олсон А.Дж. AutoDock Vina: повышение скорости и точности стыковки за счет новой функции подсчета очков, эффективной оптимизации и многопоточности. J. Comput. Chem. 2010. 31: 455–461. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 82. Гастайгер Дж., Марсили М. Итерационное частичное выравнивание орбитальной электроотрицательности - быстрый доступ к атомным зарядам. Тетраэдр. 1980; 36: 3219–3228. DOI: 10.1016 / 0040-4020 (80) 80168-2.[CrossRef] [Google Scholar] 84. Моррис GM и др. AutoDock4 и AutoDockTools4: автоматическая стыковка с гибкостью выборочного рецептора. J. Comput. Chem. 2009. 30: 2785–2791. DOI: 10.1002 / jcc.21256. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 85. Шитяков С., Форстер С. Прогностическая модель In silico для определения векторно-опосредованных транспортных свойств для транспортера холина через гематоэнцефалический барьер. Adv. Прил. Биоинформа. Chem. 2014; 7: 1–14. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

Исследование противотуберкулезного потенциала выбранных компонентов прополиса с использованием подхода молекулярной стыковки

, # 1 , # 2, 5 , 3 и 4

Мохаммад Тухин Али

1 Кафедра биохимии и молекулярной биологии, Университет Дакки, Дакка, Бангладеш

Наталия Бличарска

2 Колледж Виктории, Университет Торонто

5 Текущий адрес: Департамент фармацевтической и биологической химии, Школа фармацевтики UCL, Лондон, Великобритания

Jamil A.Шилпи

3 Фармацевтическая дисциплина, Школа естественных наук, Университет Кхулна, Кхулна, Бангладеш

Вероник Зайдель

4 Исследовательская группа по открытию лекарств из натуральных продуктов, Институт фармацевтики и биомедицинских наук Стратклайд, Университет Стратклайда, Глазго, Великобритания

1 Кафедра биохимии и молекулярной биологии, Университет Дакки, Дакка, Бангладеш

2 Колледж Виктории, Университет Торонто, Торонто, Канада

3 Фармацевтическая дисциплина, Школа естественных наук, Университет Хулна, Кхулна , Бангладеш

4 Natural Products Drug Discovery Research Group, Strathclyde Institute of Pharmacy and Biomedical Sciences, Strathclyde Institute of Pharmacy and Biomedical Sciences, University of Strathclyde, Glasgow, UK

5 Нынешний адрес: Департамент фармацевтической и биологической химии, Школа фармацевтики UCL, Лондон , UK

Автор, ответственный за переписку.

# Распространяется поровну.

Поступило 26.01.2018 г .; Принято 26 июня 2018 г.

Открытый доступ Эта статья находится под международной лицензией Creative Commons Attribution 4.0, которая разрешает использование, совместное использование, адаптацию, распространение и воспроизведение на любом носителе или любом формате при условии, что вы надлежащим образом укажете оригинал Автор (ы) и источник предоставляют ссылку на лицензию Creative Commons и указывают, были ли внесены изменения. Изображения или другие материалы третьих лиц в этой статье включены в лицензию Creative Commons для статьи, если иное не указано в кредитной линии для материала.Если материал не включен в лицензию Creative Commons для статьи и ваше предполагаемое использование не разрешено законодательными актами или превышает разрешенное использование, вам необходимо получить разрешение непосредственно от правообладателя. Чтобы просмотреть копию этой лицензии, посетите http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/. Эта статья цитируется в других статьях PMC.
Дополнительные материалы

Дополнительная информация

GUID: AD7FA194-9DCF-4BDA-A733-7D779A37975E

Таблица S1

GUID: 35342553-6519-4B70-86B3-77619F27F804

Таблица E

Таблица E

GUID -42B3-A145-1E11E33C121A

Таблица S3

GUID: 55D79DF2-7D6E-4581-8580-06DF853939CA

Резюме

Туберкулез человека (ТБ), вызываемый микобактериями туберкулеза, ведущая бактериальная болезнь во всем мире и срочно необходимы новые противотуберкулезные препараты.Природные средства правовой защиты уже давно играют важную роль в медицине и продолжают служить вдохновляющими моделями для разработки лекарств. Прополис, вещество, вырабатываемое пчелами естественным путем при сборе растительных смол, используется в народной медицине из-за его полезного противотуберкулезного действия. В этом исследовании мы использовали подход молекулярной стыковки для изучения взаимодействия между выбранными составляющими прополиса и четырьмя «лекарственными» белками, участвующими в жизненно важных физиологических функциях в M . tuberculosis , а именно Mt PanK, Mt DprE1, Mt PknB и Mt KasA.Оценка стыковки лигандов по отношению к каждому белку была рассчитана для оценки свободной энергии связывания, причем наилучшая оценка стыковки (наименьшее значение энергии) указывает на наивысшее предсказанное сродство лиганд / белок. Также были изучены специфические взаимодействия, чтобы понять природу межмолекулярных связей между наиболее активными лигандами и остатками сайта связывания белка. Лигнан (+) - сезамин показал лучший результат стыковки с Mt, DprE1 (-10,7 ккал / моль), в то время как пренилированный флавоноид изонимфаеол D сильно стыковался с Mt KasA (-9.7 ккал / моль). Оба соединения продемонстрировали более высокие показатели стыковки, чем контрольные ингибиторы, и представляют собой потенциально интересную основу для дальнейшей биологической оценки in vitro и разработки противотуберкулезных препаратов.

Введение

Туберкулез человека (ТБ), вызываемый Mycobacterium tuberculosis , является основной причиной смерти во всем мире от одного инфекционного агента. По оценкам, в 2016 году 10,4 миллиона человек заболели активной формой туберкулеза, что привело к 1.7 миллионов смертей. Заболеваемость туберкулезом особенно высока в развивающихся странах, где ВИЧ / СПИД и малярия ложатся тяжелым бременем на системы здравоохранения. Лечение туберкулеза - длительный процесс, включающий сложные схемы приема лекарств, с побочными эффектами и взаимодействием, и связанный с плохим соблюдением пациентом режима лечения. Это привело к появлению штаммов с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ-ТБ) и широкой лекарственной устойчивости (ШЛУ). Для лечения МЛУ-ТБ требуются дорогостоящие лекарства, а ШЛУ-ТБ часто неизлечим. Рост заболеваемости устойчивым туберкулезом за последнее десятилетие стал сегодня чрезвычайной ситуацией во всем мире 1 .Хотя в последние годы усилия по разработке лекарств активизировались: были лицензированы два новых противотуберкулезных препарата (бедаквилин и деламанид), а несколько других в настоящее время проходят клинические испытания, текущих разработок лекарств все еще недостаточно для решения такой глобальной проблемы здравоохранения. По-прежнему существует острая необходимость в открытии и разработке новых противотуберкулезных препаратов, особенно для нацеливания на лекарственно-устойчивые и неактивные штаммы M . tuberculosis , а также обеспечивает более эффективное и короткое лечение 2 .

Природные лечебные средства, полученные из растений, микробов и продуктов животного происхождения, на протяжении веков играли важную роль в медицине. Они представляют собой уникальный пул самых разнообразных химических веществ, которые эволюционировали для специфического взаимодействия с биологическими мишенями и продолжают предоставлять новые и вдохновляющие шаблоны для разработки фармацевтических препаратов 3 . В последние годы возобновился интерес к исследованию природных источников для идентификации новых противотуберкулезных агентов 4 - 8 .Прополис, также известный как пчелиный клей, представляет собой натуральное вещество, вырабатываемое пчелами в основном при сборе выделений растений, таких как смолы и липкие экссудаты на почках листьев и ранах растений. Слово прополис происходит от греческого языка, где про означает «у входа», а полис означает «община» или «город». Пчелы используют прополис в качестве строительного и ремонтного материала для заделки зазоров, сглаживания внутренних стенок в ульях и в качестве антисептического покрытия для защиты от внешнего загрязнения. Прополис имеет очень изменчивый химический состав в зависимости от географического положения, в котором он собирается.Например, прополис из регионов с умеренным климатом богат фенольными соединениями, полученными из экссудатов тополей, тогда как пчелы в тропических странах имеют в своем распоряжении различные растительные источники, что приводит к типам прополиса, богатым другими фитохимическими веществами, такими как пренилированные флавоноиды и бензофеноны, лигнаны, терпеноиды. и фенольные липиды 9 - 13 . Прополис давно используется в качестве народного средства для лечения различных заболеваний 14 .Были проведены многочисленные научные исследования его лечебных свойств, в том числе противовоспалительное 15 , иммуностимулятор 16 , антиоксидант 17 , противоопухолевый 18 , нейропротекторный 1 и антимикробная активность 12 , 20 , 21 . Интересно, что прополис использовался в качестве ингредиента в традиционных лекарствах от туберкулеза 22 - 25 .Предыдущие исследования in vitro продемонстрировали, что экстракты прополиса могут подавлять рост M . tuberculosis , а также синергетический эффект известных противотуберкулезных препаратов, таких как изониазид, рифампицин и стрептомицин 26 , 27 . Также было замечено, что прополис ингибирует развитие туберкулеза, снижая образование некроза в гранулемах M . туберкулез -инфицированные животные 28 .

Несколько ферментов, участвующих в жизненно важных физиологических функциях в M . tuberculosis были определены как новые привлекательные молекулярные мишени для разработки противотуберкулезных препаратов 29 - 32 . Здесь мы использовали управляемую стыковку с AutoDock Vina для прогнозирования взаимодействий между выбранными составляющими прополиса и четырьмя из этих основных микобактериальных ферментов, а именно пантотенаткиназой ( Mt PanK, тип 1) 33 , декапренилфосфорил-β-D -рибоза 2'-эпимераза 1 ( Mt DprE1) 34 , протеинкиназа B ( Mt PknB) 35 и β-кетоацилацил-носитель белка-синтаза I ( Mt 9 9 KasA2) 36 .Молекулярный докинг - популярный инструмент, используемый для виртуального скрининга малых молекул (лигандов) против белков (мишеней), и в нескольких исследованиях AutoDock Vina успешно использовался для изучения взаимодействия натуральных продуктов с конкретными белками-мишенями, включая микобактериальные ферменты 37 - 41 . Однако о стыковке компонентов прополиса с Mt PanK, Mt DprE1, Mt PknB и Mt KasA никогда не сообщалось.

Результаты

Составляющие прополиса, исследованные в этом исследовании, представляют собой некоторые структурно разнородные соединения, которые мы сгруппировали в четыре основные категории, а именно флавоноиды, терпеноиды, простые фенолы и разные вещества, включая птерокарпан, производное фенилэтаноида, пять стильбенов и четыре лигнана. Известные молекулы, о которых ранее сообщалось в литературе как ингибиторы целевых ферментов и для которых природа и роль остатков сайта связывания были известны из их доступных комплексов с белками, использовали в качестве контролей.Чтобы проверить условия стыковки перед виртуальным скринингом составляющих прополиса, каждый контрольный ингибитор извлекали из его совместно кристаллизованного комплекса и повторно стыковали с соответствующей мишенью с помощью программного обеспечения AutoDock Vina. Затем была рассчитана оценка стыковки для каждого соединения прополиса для оценки его свободной энергии связывания с Mt PanK, Mt DprE1, Mt PknB и Mt KasA (таблица S1 ). Значения оценки стыковки, полученные для соединений в пределах каждого фитохимического класса, сравнивали с оценками контрольных ингибиторов для каждой мишени, чтобы выбрать молекулы с наименьшими значениями энергии, которые оказались выше, чем выбранные контрольные ингибиторы по сравнению с целевыми белками.Мы наблюдали, что ни один из компонентов прополиса не показал лучших результатов, чем контрольные образцы, ни по сравнению с Mt PanK, ни с Mt PknB. Вместо этого только стыковка с Mt KasA и Mt DprE1 дала полезные оценки. Таким образом, пренилированные флаваноны изонимфеол D, изонимфеол C и изонимфеол B показали высокие показатели стыковки с Mt KasA (-9,7, -9,6 и -9,5 ккал / моль соответственно), превосходящие контрольный ингибитор тиолактомицин (-7,9 ккал / моль). .Ki изонимфеола D для Mt KasA был оценен как 0,07 мкМ (контроль - 1,62 мкМ). Изонимфеол D также показал сильное предсказанное связывание с Mt, DprE1 (-10,1 ккал / моль) по сравнению с контрольным ингибитором 0T4 (-9,2 ккал / моль). Среди терпеноидов мы наблюдали, что ацетат тритерпена β-амирина олеананового типа проявляет некоторое сродство к Mt DprE1 (-9,9 ккал / моль) и оценивается лучше, чем 0T4 (-9,2 ккал / моль). В группе простых фенольных соединений (+) - хикоровая кислота показала высокий балл связывания (-9.5 ккал / моль) для Mt KasA по сравнению с тиолактомицином (-7,9 ккал / моль). Стильбен 5 - (( E ) -3,5-дигидроксистирил) -3 - (( E ) -3,7-диметилокта-2,6-диен-1-ил) бензол-1,2-диол показал стыковочный балл с Mt KasA (-9,4 ккал / моль), который также оказался лучше, чем тиолактомицин, в то время как лигнан (+) - сезамин сильно состыковался с Mt DprE1 с баллом (-10,7 ккал / моль) и предсказал Ki (0,01 мкМ) лучше, чем 0T4 (-9,2 ккал / моль и Ki 0,18 мкМ) (таблица).

Таблица 1

Прогнозируемая аффинность связывания (оценка стыковки в ккал / моль) и константа ингибирования (Ki в мкМ) выбранных компонентов прополиса и повторно докированных контрольных ингибиторов против Mt DprE1 и Mt KasA a .

903 9034 9034 9034 9034 9034 Ki 2 9034 9034 9034
Mt DprE1 Mt KasA
Показатель стыковки Ki Показатель стыковки Ki
0,18
Контрольный ингибитор, тиолактомицин −7,9 1,62
Изонимфеол-C
Изонимфаеол D −10,1 0,04 −9 . 7 0,07
Изонимфаеол B −9,5 0.11 −9,5 0,11
β-амирина ацетат −9,9 0,05 −2 > 1,10 4 9034 9034 9034 Chicicor 0,21 −9,5 0,11
5 - (( E ) -3,5-дигидроксистирил) -3 - (( E ) -3,7-диметилокта-2,6-диен-1 -ил) бензол-1,2-диол -9,2 0,18 -9,4 0,13
(+) - Сезамин -10 . 7 0,01 −8,7 0,42

Были дополнительно изучены специфические взаимодействия, чтобы понять природу межмолекулярных связей, образованных между выбранными соединениями и остатками сайтов связывания для четырех изученных ферментов (Таблица S2 ). Позы связывания, полученные для лигандов наилучшего связывания изонимфеола D и (+) - сезамина, проверяли визуально и отображены на фиг. Мы наблюдали, что изонимфеол D показал некоторые ключевые молекулярные взаимодействия с ключевыми остатками Pro280, Phe402 и His311 из Mt KasA (рис.) и (+) - сезамин взаимодействовал с ключевыми остатками Cys387, Ser59 и Gly117 Mt DprE1 (рис.). Наилучший результат по отношению к Mt PanK наблюдался для флавоноида пинобанксин-3- ( E ) -кафеат (-10,0 ккал / моль), но взаимодействия белок-лиганд для этого соединения не исследовались, так как его рейтинг ниже, чем полученный балл. для контрольного ингибитора ZVT (-10,9 ккал / моль). Наибольшее сродство к Mt PknB наблюдалось для флавоноидов пахиподола и пинобанксин-3- ( E ) -кафеат (-9.1 ккал / моль), но этот показатель снова оказался ниже, чем оценка, полученная для контрольного ингибитора митоксантрона (-10,8 ккал / моль), и больше не исследовалась.

Молекулярные взаимодействия между изонимфеолом D и Mt KasA. Пристыкованная поза изонимфеола D в сайте связывания Mt KasA (a) , взаимодействия между изонимфеолом D и Mt KasA, показывающие ключевые водородные связи (зеленые пунктирные линии), гидрофобные связи (темно-розовые пунктирные линии) и соответствующие амино кислотные остатки (b) , 2D-график взаимодействий между изонимфеолом D и ключевыми остатками Mt KasA (c) , созданный визуализатором BIOVIA Discovery Studio.

Молекулярные взаимодействия между (+) - сезамином и Mt DprE1. Пристыкованная поза (+) - сезамина в сайте связывания Mt DprE1 (a) , взаимодействия между (+) - сезамином и Mt DprE1 показывают ключевые водородные связи (зеленые пунктирные линии), гидрофобные связи (темно-розовые пунктирные линии) и соответствующие аминокислотные остатки (b) , 2D-график взаимодействий между (+) - сезамином и ключевыми остатками Mt DprE1 (c) , созданный визуализатором BIOVIA Discovery Studio.

Обсуждение

В этом исследовании мы исследовали противотуберкулезный потенциал ряда соединений прополиса с использованием подхода управляемого молекулярного докинга с целью определения их сродства к четырем микобактериальным ферментам: Mt PanK, Mt DprE1 , Mt PknB и Mt KasA. Обоснованием выбора этих конкретных белков было то, что они являются ключевыми ферментами, необходимыми для M . tuberculosis для роста и выживания в эукариотическом хозяине.Они также участвуют во множестве основных микобактериальных путей, таких как биогенез клеточной стенки, биосинтез кофактора и передача сигнала. Они отсутствуют в клетках млекопитающих, что делает их высокоселективными и привлекательными "лекарственными" мишенями для микобактериальных заболеваний, и они представляют собой некоторые недавно утвержденные новые мишени, против которых в настоящее время нет доступных на рынке лекарств 33 - 36 . Пантотенаткиназа типа I из M . tuberculosis ( Mt, PanK) - это фермент, который катализирует первую стадию биосинтеза кофактора Коэнзима А (КоА) путем превращения пантотената (витамин B 5 ) в 4'-фосфопантотенат 33 .Серин / треониновые протеинкиназы, такие как протеинкиназа B ( Mt, PknB), которая участвует в регуляции морфологии микобактериальных клеток, играют важную роль в путях передачи сигналов и позволяют M . tuberculosis для успешного роста и выживания в пределах хозяина 35 , 42 . Поскольку клеточная стенка микобактерий представляет собой сложную структуру, состоящую из слоев пептидогликана, арабиногалактана, липоарабиноманнана и некоторых миколиновых кислот, двух ключевых белков-мишеней в M . tuberculosis биосинтез клеточной стенки, синтаза I белка-носителя β-кетоацилацила ( Mt KasA) и декапренилфосфорил-β-D-рибоза 2'-эпимераза 1 ( Mt DprE1) также были включены в это исследование 34 , 36 . Наличие миколиновых кислот - уникальная особенность клеточной стенки микобактерий. Эти жирные кислоты с очень длинной цепью, которые связаны со способностью микобактерий выживать в организме хозяина и противостоять многим антибиотикам, продуцируются благодаря активности ряда синтаз жирных кислот (FAS). Mt KasA - один из ферментов пути FAS микобактерий II типа, который встречается только у бактерий 36 . Более пристальный взгляд на взаимодействия между изонимфеолом D и Mt KasA показывает, что пренилированный хвост этого флавоноида связывается с гидрофобным карманом Mt KasA, который содержит Pro280 и Phe402. Кроме того, сильная водородная связь (расстояние контакта 2,77 Å) наблюдалась между фенольным кислородом C-4 'изонимфеола D и азотом остатка His311 в активном центре, что очень похоже на то, что ранее описывалось как режим привязка управления TLM 36 .Фермент микобактериальной клеточной стенки декапренилфосфорил-β-D-рибоза 2'-эпимераза 1 ( Mt DprE1) участвует в биосинтезе двух основных компонентов микобактериальной клеточной стенки, а именно арабиногалактана и липоарабиноманнана 43 . Cys387 в активном центре Mt DprE1 был идентифицирован как критический остаток для связывания через ковалентную связь контрольного ингибитора 0T4 (также называемого CT325) 34 . В случае (+) - сезамина наблюдаемые взаимодействия происходили не через ковалентные связи, а включали взаимодействие π-серы с Cys387 и сильные водородные связи между атомами кислорода метилендиокси и тетрагидрофурановой составляющей и Ser59 и Gly117 (расстояние контакта 3.08 и 2,94 Å соответственно).

В предыдущих исследованиях сообщалось о противотуберкулезной активности некоторых из исследуемых здесь компонентов прополиса, включая акацетин, апигенин, кверцетин, пиностробин, пиноцембрин, нарингенин, ликвиритигенин, генистеин, циклоартенол, β-амиринацетат, пимаровую кислоту, метилкофеат. , p -куаровая кислота, метилкумарат, коричная кислота, медикарпин, ресвератрол и сезамин 44 - 61 . Среди выбранных соединений, показывающих лучшие показатели стыковки, только ацетат β-амирина и сезамин ранее проявляли умеренную активность против M . tuberculosis h47Rv со значениями минимальной ингибирующей концентрации (МИК) 100 и 50 мкг / мл (213 и 141 мкМ) соответственно 53 , 61 . Насколько нам известно, не было опубликованных отчетов о противотуберкулезной активности изонимфеола D. Для контрольных ингибиторов экспериментальные данные показали значения МИК> 64 мкг / мл (эквивалент> 150 мкМ) для ZVT и 62,5 мкМ для тиолактомицина. против М . туберкулез h47Rv 33 , 62 .Активность митоксантрона (MIX) против M . туберкулез h47Rv, M . smegmatis mc 2 155 и M . aurum A + обнаружил значения МИК в диапазоне 25–400 мкМ 35 , в то время как активность 0T4 была представлена ​​в виде значений IC 50 10,4 и 4,6 мкг / мл против M . смегматис и M . bovis BCG, соответственно 34 .В дополнение к этому, ферментативные исследования также показали, что контрольные соединения ZVT и MIX ингибируют Mt PanK и Mt PknB со значениями IC 50 1,13 мкМ и 0,8 мкМ, соответственно 33 , 35 .

Целью молекулярного стыковки является использование алгоритмов оценки для оценки вероятности связывания данного соединения с белком-мишенью. Мы идентифицировали лигнан (+) - сезамин и пренилированный флавоноид изонимфаеол D из прополиса как наиболее предсказуемые лиганды связывания для Mt DprE1 и Mt KasA, соответственно.Интересно, что изонимфеол D продемонстрировал сильное предсказанное связывание с обоими ферментами, что позволяет предположить, что это особенно многообещающий агент, поскольку было продемонстрировано, что шансы на успешное обнаружение активных соединений с использованием методологий виртуального скрининга на основе структуры выше, когда одно соединение может нацеливаться на множественные белки 63 . И (+) - сезамин, и изонимфеол D показали более высокие баллы стыковки, чем те, которые были получены для известных контрольных ингибиторов целевых белков, и имели прогнозируемую активность на целевых сайтах ниже 0.1 мкМ. Однако отсутствовала корреляция между сильным предсказанным сродством (+) - сезамина к Mt DprE1 (оценка -10,7 ккал / моль и Ki 0,01 мкМ) и его наблюдаемой (умеренной) активностью в отношении целых бактериальных клеток. (МИК 141 мкМ). Ранее сообщалось, что не всегда может быть установлено прямое соответствие между результатами молекулярного докинга in silico и биологическими параметрами in vitro . Это может быть связано с тем, что некоторые соединения не способны проходить через сложную клеточную стенку микобактерий, или характеристики сайта связывания, где происходит ингибирование, отличаются in vivo 64 .Изонимфеол D и (+) - сезамин нельзя использовать как таковые в клинических условиях. Однако, как большинство биоактивных натуральных продуктов, они представляют собой некоторые потенциально интересные «хиты» 65 , которые могут быть в дальнейшем структурно оптимизированы для разработки новых противотуберкулезных препаратов, и они требуют дальнейшей биологической оценки in vitro .

Методы

Выбор лиганда

Лиганды, выбранные для этого исследования, представляли собой 78 хорошо охарактеризованных фитохимических веществ, ранее выделенных из Алжира 66 - 69 , Египта 70 - 73 , Туниса 74 , ливийский 75 , конголезский 76 , ганский 77 , кенийский 78 и нигерийский 79 прополис.Все химические структуры были получены из базы данных соединений PubChem (NCBI) (http://www.pubchem.ncbi.nlm.nih.gov).

Препарат лиганда и белка

Структура каждого лиганда была нарисована с использованием ChemOffice v.15.1 и оптимизирована геометрия с использованием минимизации энергии MM2 80 . Все вращающиеся связи, присутствующие на лигандах, считались невращающимися. Это позволило нам выполнить жесткую стыковку и минимизировать стандартные ошибки (обычно 2,85 ккал / моль), вероятно, из-за лигандов с большим количеством активных вращающихся связей 81 .Был использован метод расчета заряда Гастайгера, и частичные заряды были добавлены к атомам лиганда перед стыковкой 82 . Кристаллические структуры Mt PanK типа 1 (PDB ID: 4BFT), Mt DprE1 (PDB ID: 4FF6), Mt PknB (PDB ID: 2FUM) и Mt KasA (PDB ID: 2WGE) были получено из базы данных RCSB Protein Data Bank (PDB) (http://www.pdb.org). Структуры ингибиторов лигандов 2-хлор-N- [1- (5 - {[2- (4-фторфенокси) этил] сульфанил} -4-метил-4h-1,2,4-триазол-3-ил) этил] бензамид (ZVT) для Mt PanK, 3- (гидроксиамино) -N - [(1r) -1-фенилэтил] -5- (трифторметил) бензамид (0T4) для Mt DprE1, митоксантрон (MIX) для Mt PknB и тиолактомицин (TLM) для Mt KasA были получены из соответствующих записей PDB (http: // www.ebi.ac.uk/thornton-srv/databases/cgi-bin/pdbsum/GetPage.pl?pdbcode=index.html). Каждый белок использовался как жесткая структура, и все молекулы воды и гетероатомы были удалены с помощью BIOVIA Discovery Studio Visualizer v.4.5 (Accelrys).

Идентификация остатков сайта связывания

Предыдущие исследования были использованы для определения природы и роли остатков сайта связывания для Mt PanK типа 1 33 , Mt DprE1 34 , Mt PknB 35 и Mt KasA 36 .Конкретные аминокислоты, участвующие во взаимодействиях лиганд / белок, также были подтверждены после анализа кристаллических структур PDB, доступных для каждого целевого белка в комплексе либо с природными субстратами, либо с контрольными ингибиторами (таблица S3 ).

Подготовка и стыковка блока сетки

Все преобразования файлов, необходимые для исследования стыковки, были выполнены с использованием химического инструментария с открытым исходным кодом Open Babel v. 2.3.2 83 . Параметры сетки (таблица) были установлены таким образом, чтобы обеспечить пространство полости подходящего размера, достаточно большое для размещения каждого соединения в пределах сайта связывания каждого белка, и были определены с помощью AutoDock Tools v.1.5.6rc3 84 . Расчеты молекулярного докинга для всех соединений с каждым из белков были выполнены с использованием AutoDock Vina v. 1.1.2 81 . Чтобы проверить точность стыковки и позволить сравнение оценок стыковки, все сокристаллизованные ингибирующие лиганды повторно стыковались с соответствующими белковыми структурами. Различные ориентации лигандов были исследованы и ранжированы на основе их энергетических баллов. Наш протокол стыковки позволил создать аналогичную позу стыковки для каждого контрольного лиганда в отношении его биологической конформации в совместно кристаллизованном комплексе белок-лиганд.Мы дополнительно визуально проверили все позы связывания для данного лиганда, и только позы с наименьшим значением RMSD (просто среднеквадратичное отклонение) (порог <1,00 Å) считались для получения более высокой точности стыковки. Генетический алгоритм Ламарка использовался во время процесса стыковки, чтобы исследовать лучшее конформационное пространство для каждого лиганда с размером популяции 150 человек. Максимальное количество генерации и оценки было установлено на уровне 27 000 и 2 500 000, соответственно. Все остальные параметры были установлены по умолчанию.Поскольку активные сайты связывания и некоторые контрольные ингибиторы для наших четырех выбранных микобактериальных ферментов были хорошо охарактеризованы в предыдущих исследованиях 33 - 36 , мы решили использовать управляемый метод стыковки для повышения эффективности стыковки 37 путем отбора проб каждой конформации лиганда (включая повторную стыковку контрольных ингибиторов) в каждом сайте связывания белка и последующего ранжирования этих конформаций с использованием функции подсчета баллов для прогнозирования наилучшего сродства связывания белок-лиганд (рассчитанного как прогнозируемая свободная энергия связывания ΔG bind в ккал / моль) (Таблица S1 ).Самая низкая свободная энергия связывания (т.е. лучший результат позы стыковки с наименьшим среднеквадратичным отклонением) указывает на наивысшее предсказанное сродство лиганд / белок. Оценки стыковки Auto Dock Vina для этих выбранных компонентов прополиса, которые имеют более высокий рейтинг, чем контрольный ингибитор, в дальнейшем использовали для расчета прогнозируемых констант ингибирования (значения Ki) ​​выбранных соединений по отношению к заданной цели (таблица) 85 . Специфические межмолекулярные взаимодействия с мишенями (Таблица S2 и Рис. -) были дополнительно визуализированы с помощью BIOVIA Discovery Studio Visualizer v.4.5 (Accelrys).

Таблица 2

Параметры сетки, выбранные для целевых ферментов, на основе остатков сайтов связывания a .

Целевой белок (PDB ID) Создание сетки рецептора остатков сайта связывания Центральная сетка (точки на оси X, Y, Z) Размер (точки на оси X, Y, Z)
Mt PanK (4BFT) Gly 97, Ser 98, Val 99, Ala 100, Val 101, Gly 102, Lys 103, Ser 104, His 179, Tyr 235, Arg 238, Met 242 , Asn 277 −18.742 × −13,919 × 11,679 20 × 20 × 20
Mt DprE1 (4FF6) Gly 117, Trp 230, Val 265, Glu 336, Asn 385, Ile 386, Cys 387 14,99 −20,507 × 37,226 20 × 20 × 20
Mt PknB (2FUM) Leu 17, Gly 18, Val 25, Ala 38, Met 92, Tyr 94, Val 95, Lys 140, Met 145 , Asn 143, Met 155 61,518 × 2,429 × −25,588 21 × 20 × 20
Mt KasA (2WGE) Cys 171, Phe 237, Ala 279, Pro 280, His 311, Gly 318, His 345, Phe 402, Gly 403, Phe 404 38.342 × −1,206 × −7,033 20 × 20 × 20

Дополнительные электронные материалы

Вклад авторов

M.T.A. и В. разработал исследование. M.T.A. и Дж. проводил эксперименты. N.B., M.T.A. и В. собраны литературные данные. M.T.A. и В. проанализировали экспериментальные данные. N.B. и В. написал оригинальный текст рукописи. M.T.A. подготовил все цифры. M.T.A. и В. подготовил все таблицы. Все авторы рецензировали рукопись.

Примечания

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Сноски

Примечание издателя: Springer Nature сохраняет нейтралитет в отношении юрисдикционных претензий на опубликованных картах и ​​принадлежности к учреждениям.

Мохаммад Тухин Али и Наталья Бличарска внесли равный вклад в эту работу.

Электронный дополнительный материал

Дополнительная информация сопровождает этот документ на 10.1038 / s41598-018-30209-у.

Ссылки

2. Zumla A, et al. Лечение и ведение туберкулеза - обновленная информация о схемах лечения, испытаниях, новых лекарствах и дополнительных методах лечения. Ланцет Респир. Med. 2015; 3: 220–234. DOI: 10.1016 / S2213-2600 (15) 00063-6. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 3. Ньюман DJ, Крэгг GM. Натуральные продукты как источники новых лекарств с 1981 по 2014 год. J. Nat. Prod. 2016; 79: 629–661. DOI: 10.1021 / acs.jnatprod.5b01055. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 4. Salomon CE, Schmidt LE.Натуральные продукты, ведущие к разработке лекарств от туберкулеза. Curr. Верхний. Med. Chem. 2012; 12: 735–765. DOI: 10,2174 / 156802612799984526. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 5. Гусман Дж. Д., Гупта А., Букар Ф., Гиббонс С., Бхакта С. Антимикобактериальные препараты из природных источников: древние времена, эра антибиотиков и новые основы. Передний. Biosci. 2012; 17: 1861–1881. DOI: 10,2741 / 4024. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Дашти Ю., Гркович Т., Куинн Р.Дж. Прогнозирование ценности натуральных продуктов, исследование возможностей противотуберкулезных препаратов.Nat. Prod. Отчет 2014; 31: 990–998. DOI: 10.1039 / C4NP00021H. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 7. Сантош Р.С., Сурьянараянан Б. Растения: источник новых антимикобактериальных препаратов. Planta Med. 2014; 80: 9–21. [PubMed] [Google Scholar] 8. Chinsembu KC. Туберкулез и природная аптека предполагаемых противотуберкулезных средств. Acta Trop. 2016; 153: 46–56. DOI: 10.1016 / j.actatropica.2015.10.004. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 9. Маркучи М., Банкова В. Химический состав, растительное происхождение и биологическая активность бразильского прополиса.Curr. Верхний. Фитохим. 1999; 2: 115–123. [Google Scholar] 10. Куэста-Рубио О, Фронтана-Урибе Б.А., Рамирес-Апан Т., Карденас Дж. Полиизопренилированные бензофеноны в кубинском прополисе; биологическая активность неморосона. Z. Naturforsch. 2002. 57: 372–378. DOI: 10.1515 / znc-2002-3-429. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Рагхукумар Р., Вали Л., Уотсон Д., Фернли Дж., Зайдель В. Устойчивый к антиметициллину Staphylococcus aureus (MRSA), активность «тихоокеанского прополиса» и выделенных пренилфлаванонов. Фитотэр.Res. 2010; 24: 1181–1187. [PubMed] [Google Scholar] 13. Кардар М.Н. и др. Характеристика тритерпенов и новых фенольных липидов в камерунском прополисе. Фитохимия. 2014; 106: 156–163. DOI: 10.1016 / j.phytochem.2014.07.016. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15. Паулино Н. и др. Противовоспалительное действие биодоступного соединения артепиллина С в бразильском прополисе. Евро. J. Pharmacol. 2008. 587: 296–301. DOI: 10.1016 / j.ejphar.2008.02.067. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 16. Нассар С.А., Мохамед А.Х., Суфи Х., Наср С.М., Махран К.М.Иммуностимулирующее действие египетского прополиса на кроликов. Sci. Мир J. 2012; 2012: 6. DOI: 10.1100 / 2012/6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 17. Грегорис Э., Стеванато Р. Корреляция между полифенольным составом и антиоксидантной активностью венецианского прополиса. Food Chem. Toxicol. 2010. 48: 76–82. DOI: 10.1016 / j.fct.2009.09.018. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Teerasripreecha D, et al. In vitro Антипролиферативная / цитотоксическая активность карданола и кардола, обогащенного прополисом тайского происхождения Apis mellifera , в отношении линий раковых клеток.BMC Дополнение. Альтерн. Med. 2012; 12:27. DOI: 10.1186 / 1472-6882-12-27. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 19. Фаруки, Т. и Фаруки, А.А. Благотворное влияние прополиса на здоровье человека и неврологические заболевания. Передний . Биоски . (Elite Ed) 4 , 779–793 (2012). [PubMed] 20. Зайдель В., Пейфун Э., Уотсон Д.Г., Фернли Дж. Сравнительное исследование антибактериальной активности прополиса из разных географических и климатических зон. Фитотэр.Res. 2008; 22: 1256–1263. DOI: 10.1002 / ptr.2480. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21. Сфорцин Ю.М., Банкова В. Прополис: есть ли потенциал для разработки новых лекарств? J. Ethnopharmacol. 2011; 133: 253–260. DOI: 10.1016 / j.jep.2010.10.032. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

22. Чжан, Х. Изобретатель; Китайский лекарственный состав для лечения туберкулеза легких. Патент Китая CN 1879668 A. 2006. 20 декабря.

23. Бураев М.Е. и др. . Изобретатель; Метод комплексного лечения туберкулеза легких.Патент России RU 2429866 С1. 2011 27 сентября.

24. Порфирио да Силва, З. Изобретатель; Сироп, содержащий рифампицин, прополис и мед для лечения туберкулеза. Патент Бразилии BR 20013 A2. 2011 Apr 19.

25. Ваг, В. Д. Прополис: чудо-пчелиный продукт и его фармакологические возможности. Расширенный . Pharmacol . Sci . 2013 , 308249 (2013). [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 26. Valcic S, et al. Фитохимические, морфологические и биологические исследования прополиса из Центрального Чили.Z. Naturforsch. С. 1999; 54: 406–416. DOI: 10.1515 / znc-1999-5-617. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. Scheller S, et al. Синергизм этанольного экстракта прополиса (EEP) и противотуберкулезных препаратов в отношении роста микобактерий. Z. Naturforsch. С. 1999; 54: 549–553. DOI: 10.1515 / znc-1999-7-814. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 28. Йилдирим З. и др. Влияние водного экстракта турецкого прополиса на туберкулезную инфекцию морских свинок. Pharmacol. Res. 2004. 49: 287–292. DOI: 10.1016 / j.phrs.2003.10.007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 29. Lou Z, Zhang X. Белковые мишени для открытия лекарственного средства против Mycobacterium tuberculosis на основе структуры. Белковая клетка. 2010; 1: 435–442. DOI: 10.1007 / s13238-010-0057-3. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Джексон М., Макнил М.Р., Бреннан П.Дж. Прогресс в нацеливании на биогенез клеточной оболочки у Mycobacterium tuberculosis . Future Microbiol. 2013; 8: 855–875. DOI: 10.2217 / fmb.13.52. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 31.Мдлули К., Канеко Т., Аптон А. Открытие лекарств от туберкулеза и новые цели. Анна. Акад. Sci. 2014; 1323: 56–75. DOI: 10.1111 / nyas.12459. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 33. Bjorkelid C, et al. Структурная и биохимическая характеристика соединений, ингибирующих пантотенаткиназу Mycobacterium tuberculosis . J. Biol. Chem. 2013; 288: 18260–18270. DOI: 10.1074 / jbc.M113.476473. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34. Батт С.М. и др. Структурные основы ингибирования Mycobacterium tuberculosis DprE1 ингибиторами бензотиазинона.Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 2012; 109: 11354–11359. DOI: 10.1073 / pnas.1205735109. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 35. Wehenkel A, et al. Структура PknB в комплексе с митоксантроном, АТФ-конкурентным ингибитором, предполагает способ регуляции протеинкиназы у микобактерий. FEBS lett. 2006; 580: 3018–3022. DOI: 10.1016 / j.febslet.2006.04.046. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 36. Luckner SR, Machutta CA, Tonge PJ, Kisker C. Кристаллические структуры Mycobacterium tuberculosis KasA демонстрируют механизм действия в рамках биосинтеза клеточной стенки и его ингибирование тиолактомицином.Состав. 2009. 17: 1004–1013. DOI: 10.1016 / j.str.2009.04.012. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37. Мэн XY, Чжан Х.Х., Мезей М., Цуй М. Молекулярный докинг: мощный подход к открытию лекарств на основе структуры. Curr. Comput. Aided Drug Des. 2011; 7: 146–157. DOI: 10,2174 / 1573405677602. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 38. Сейеди С.С. и др. Вычислительный подход к изучению потенциальной активности выбранных флавоноидов против чикунгуньи. Sci. Отчет 2016; 6: 24027.DOI: 10,1038 / srep24027. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 39. Сундарраджан С., Лулу С., Арумугам М. Вычислительная оценка фитосоединений для борьбы с лекарственно-устойчивым туберкулезом с помощью многоцелевой терапии. J. Mol. Модель. 2015; 21: 247. DOI: 10.1007 / s00894-015-2785-z. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 40. Сингх С., Баджпай Ю., Линн А.М. Виртуальный скрининг на основе структуры для выявления ингибиторов фермента MurE Mycobacterium tuberculosis с использованием AutoDock Vina. Биоинформация.2014; 10: 697–702. DOI: 10.6026 / 97320630010697. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 41. Ядав А.К. и др. Скрининг флавоноидов на противотуберкулезную активность и взаимосвязь между их структурой и активностью. Med. Chem. Res. 2013; 22: 2706–2716. DOI: 10.1007 / s00044-012-0268-7. [CrossRef] [Google Scholar] 43. Brecik M, et al. DprE1 является уязвимой мишенью для противотуберкулезного препарата из-за его локализации в клеточной стенке. ACS Chem. Биол. 2015; 10: 1631–1636. DOI: 10.1021 / acschembio.5b00237. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 44.Чен Дж.Дж., Ву Х.М., Пэн К.Ф., Чен И.С., Чу С.Д. seco -Дитерпеноиды абиетана, производное фенилэтаноида и противотуберкулезные компоненты из Callicarpa pilosissima . J. Nat. Prod. 2009. 72: 223–228. DOI: 10.1021 / np800721f. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 45. Чен Л.В., Ченг М.Дж., Пэн К.Ф., Чен И.С. Вторичные метаболиты и антимикобактериальная активность корней Ficus nervosa . Chem. Биодайверы. 2010; 7: 1814–1821. DOI: 10.1002 / cbdv.2007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 46.Camacho-Corona MdR и др. Оценка некоторых вторичных метаболитов растительного происхождения в отношении чувствительной и множественной лекарственной устойчивости Mycobacterium tuberculosis . J. Mex. Chem. Soc. 2009; 53: 71–75. [Google Scholar] 47. Gua JQ, Wang Y, Franzblau SG, Montenegro G, Timmermann BN. Составляющие Quinchamalium majus с потенциальной противотуберкулезной активностью. Z. Naturforsch. С. 2004; 59: 797–802. DOI: 10.1515 / znc-2004-11-1206. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 48. Чжоу Т.Х., Чен Дж.Дж., Пэн К.Ф., Ченг М.Дж., Чен И.С.Новые флаваноны из листьев Cryptocarya chinensis и их противотуберкулезная активность. Chem. Биодайверы. 2011; 8: 2015–2024. DOI: 10.1002 / cbdv.201000367. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 49. Куэте V и др. Противомикробная активность сырых экстрактов и соединений из Ficus chlamydocarpa и Ficus cordata (Moraceae) J Ethnopharmacol. 2008; 120: 17–24. DOI: 10.1016 / j.jep.2008.07.026. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 50. Gaur R, et al. Синтез, противотуберкулезная активность и исследования на молекулярном моделировании аналогов изоликвиритигенина и ликвиритигенина, биоактивных компонентов из Glycyrrhiza glabra .Med. Chem. Res. 2015; 24: 3494–3503. DOI: 10.1007 / s00044-015-1401-1. [CrossRef] [Google Scholar] 51. Saludes JP, Гарсон MJ, Franzblau SG, Aguinaldo AM. Противотуберкулезные компоненты из гексановой фракции Morinda citrifolia Linn. (Rubiaceae) Phytother. Res. 2002. 16: 683–685. DOI: 10.1002 / ptr.1003. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 52. Акихиса Т. и др. Противотуберкулезная активность тритерпеноидов цветков сложноцветных. Биол. Pharm. Бык. 2005. 28: 158–160. DOI: 10.1248 / bpb.28.158. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 53.Биби Н. и др. In vitro противотуберкулезная активность компонентов, выделенных из Haloxylon salicornicum . Биоорг. Med. Chem. Lett. 2010. 20: 4173–4176. DOI: 10.1016 / j.bmcl.2010.05.061. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 54. Лекфром Р., Канокмедхакул С., Канокмедхакул К. Биоактивные дитерпены из надземных частей Anisochilus damageandii . Planta Med. 2010. 76: 726–728. DOI: 10.1055 / с-0029-1240656. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 55. Balachandran C, et al.Антимикробная и антимикобактериальная активность метилкофеата, выделенного из Solanum torvum Swartz. фрукты. Indian J. Microbiol. 2012; 52: 676–681. DOI: 10.1007 / s12088-012-0313-8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 56. Чжао Дж., Эвангелопулос Д., Бхакта С., Грей А.И., Зайдель В. Противотуберкулезная активность экстрактов и компонентов Arctium lappa и Tussilago farfara . J Ethnopharmacol. 2014; 155: 796–800. DOI: 10.1016 / j.jep.2014.06.034. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 57.Guzman JD, et al. 2-Гидроксизамещенные коричные кислоты и ацетанилиды являются селективными ингибиторами роста Mycobacterium tuberculosis . Med. Chem. Comm. 2014; 5: 47–50. DOI: 10.1039 / C3MD00251A. [CrossRef] [Google Scholar] 58. Хасан Н. и др. Химические компоненты корня Sesbania grandiflora и их противотуберкулезная активность. Фармацевтика. 2012; 5: 882–889. DOI: 10.3390 / ph5080882. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 59. Sun D и др. Оценка химических библиотек флавоноидов и ресвератрола показала, что абиссинон II является многообещающим антибактериальным средством.Chem. Med. Chem. 2012; 7: 1541–1545. DOI: 10.1002 / cmdc.201200253. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 60. Риверо-Круз I и др. Антимикобактериальные агенты из избранных мексиканских лекарственных растений. J. Pharm. Pharmacol. 2005; 57: 1117–1126. DOI: 10.1211 / JPP.57.9.0007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 61. Нанда Б., Наргунд Л.Г., Наргунд С.Л., Бхат К. Дизайн и синтез некоторых новых фторбензимидазолов, замещенных структурными мотивами, присутствующими в физиологически активных натуральных продуктах для противотуберкулезной активности.Iran J. Pharm. Res. 2017; 16: 929–942. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 62. Капилашрами К. и др. Ингибиторы β-кетоацил-AcpM-синтазы A (KasA) на основе тиолактомицина: открытие ингибиторов на основе фрагментов с использованием транзиторной одномерной ядерной ЯМР-спектроскопии. J. Biol. Chem. 2013; 288: 6045–6052. DOI: 10.1074 / jbc.M112.414516. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 64. Магнит и др. Выводы для противотуберкулезных соединений из библиотек ингибиторов киназ.Туберкулез (ред.) 2010; 90: 354–360. DOI: 10.1016 / j.tube.2010.09.001. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 65. Хьюз Дж. П., Рис С., Калинджян С. Б., Филпотт К. Л.. Принципы раннего открытия лекарств. Br. J. Pharmacol. 2011; 162: 1239–1249. DOI: 10.1111 / j.1476-5381.2010.01127.x. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 66. Segueni N, et al. Ингибирование стромелизина-1 производными кофейной кислоты из образца прополиса из Алжира. Planta Med. 2011; 77: 999–1004. DOI: 10.1055 / с-0030-1270713.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 67. Segueni N, Zellagui A, Moussaoui F, Lahouel M, Rhouati S. Флавоноиды из алжирского прополиса. Arabian J. Chem. 2016; 9: S425 – S428. DOI: 10.1016 / j.arabjc.2011.05.013. [CrossRef] [Google Scholar] 68. Piccinelli AL, et al. Химический состав и антиоксидантная активность алжирского прополиса. J. Agric. Food Chem. 2013; 61: 5080–5088. DOI: 10.1021 / jf400779w. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 69. Буфади Ю.М. и др. Характеристика и антиоксидантные свойства шести экстрактов алжирского прополиса: этилацетатные экстракты подавляют активность миелопероксидазы.Int. J. Mol. Sci. 2014; 15: 2327–2345. DOI: 10.3390 / ijms15022327. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 70. Эль-Бассуони А.А. Новое пренилированное соединение из египетского прополиса с антимикробной активностью. Преподобный Latinoamer. Quím. 2009; 37: 85–90. [Google Scholar] 71. Эль-Бассуони А., Абузид С. Новый пренилированный флаваноид с антибактериальной активностью из прополиса, собранного в Египте. Nat. Prod. Commun. 2010; 5: 43–45. [PubMed] [Google Scholar] 72. Абд Эль-Хади Ф.К. и др. Биоактивные метаболиты прополиса ингибируют супероксид-анион-радикал, ацетилхолинэстеразу и фосфодиэстеразу (PDE4) Int.J. Pharm. Sci. Rev. Res. 2013; 21: 338–344. [Google Scholar] 73. Ибрагим Р. и др. Выделение одиннадцати фенольных соединений из прополиса (пчелиный клей), собранного в Александрии, Египет. Planta Med. 2014; 80: PE5. [Google Scholar] 74. Мартос I, Коссентини М., Ферререс Ф., Томас-Барберан Ф.А. Флавоноидный состав тунисского меда и прополиса. J. Agric. Food Chem. 1997; 45: 2824–2829. DOI: 10,1021 / jf9609284. [CrossRef] [Google Scholar] 75. Siheri W, et al. Выделение противопротозойных соединений из ливийского прополиса.Фитотэр. Res. 2014; 28: 1756–1760. DOI: 10.1002 / ptr.5194. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 76. Папахрони Д. и др. Фитохимический анализ и биологическая оценка отобранных образцов африканского прополиса из Камеруна и Конго. Nat. Prod. Commun. 2015; 10: 67–70. [PubMed] [Google Scholar] 77. Almutairi S, et al. Новые активные пренилированные соединения против трипаносом из африканского прополиса. Фитохим. Lett. 2014; 10: 35–39. DOI: 10.1016 / j.phytol.2014.07.002. [CrossRef] [Google Scholar] 78. Петрова А, и др.Новые биологически активные соединения из кенийского прополиса. Фитотерапия. 2010. 81: 509–514. DOI: 10.1016 / j.fitote.2010.01.007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 79. Омар Р.М. и др. Химическая характеристика нигерийского красного прополиса и его биологическая активность против Trypanosoma Brucei . Фитохим. Анальный. 2016; 27: 107–115. DOI: 10.1002 / PCA.2605. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 80. Аллингер Н.Л. Конформационный анализ. 130. ММ2. Углеводородное силовое поле с использованием скручивающих членов V1 и V2.Варенье. Chem. Soc. 1977; 99: 8127–8134. DOI: 10.1021 / ja00467a001. [CrossRef] [Google Scholar] 81. Тротт О., Олсон А.Дж. AutoDock Vina: повышение скорости и точности стыковки за счет новой функции подсчета очков, эффективной оптимизации и многопоточности. J. Comput. Chem. 2010. 31: 455–461. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 82. Гастайгер Дж., Марсили М. Итерационное частичное выравнивание орбитальной электроотрицательности - быстрый доступ к атомным зарядам. Тетраэдр. 1980; 36: 3219–3228. DOI: 10.1016 / 0040-4020 (80) 80168-2.[CrossRef] [Google Scholar] 84. Моррис GM и др. AutoDock4 и AutoDockTools4: автоматическая стыковка с гибкостью выборочного рецептора. J. Comput. Chem. 2009. 30: 2785–2791. DOI: 10.1002 / jcc.21256. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 85. Шитяков С., Форстер С. Прогностическая модель In silico для определения векторно-опосредованных транспортных свойств для транспортера холина через гематоэнцефалический барьер. Adv. Прил. Биоинформа. Chem. 2014; 7: 1–14. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

Журнал апитерапии и природы

Bibtex @conference paper {jan488565, journal = {Журнал апитерапии и природы}, issn = {}, eissn = {2667-4734}, адрес = {}, publisher = {Oktay YILDIZ}, год = {2018}, объем = {1}, pages = {10–10}, doi = {}, title = {Гепатопротекторная активность индонезийского прополиса пчел без жала в отношении токсичности противотуберкулезного препарата у пациентов с туберкулезом легких}, ключ = {cite}, author = {Сулаеман, Ахмад и Махани, М. и Хардинсиах, ХАРДИНСЬЯ и Дарма, Э. и Мубарока, С.Р. и Нурджана, N} }
APA Сулаеман, А. , Махани, М., Хардинсьях, Х. , Дарма, Э. , Мубароках, С.Р. И Нурджана, Н. (2018). Гепатопротекторная активность индонезийского прополиса пчел без жала в отношении токсичности противотуберкулезного препарата у пациентов с туберкулезом легких .Журнал апитерапии и природы , Специальный выпуск 2-й конференции по прополису, 10-10. Получено с https://dergipark.org.tr/en/pub/jan/issue/40577/488565
MLA Сулаеман, А., Махани, М. , Хардинсьях, Х. , Дарма, Э. , Мубароках, С.Р. , Нурджанах, Н. «Гепатопротекторная активность индонезийского прополиса пчел без жала в отношении токсичности противотуберкулезного препарата у пациентов с туберкулезом легких» . Журнал апитерапии и природы 1 (2018 г. ): 10-10
Чикаго Сулаеман, А. , Махани, М., Хардинсьях, Х. , Дарма, Э. , Мубароках, С. , Нурджанах, Н.«Гепатопротекторная активность индонезийского прополиса пчел без жала в отношении токсичности противотуберкулезного препарата у пациентов с туберкулезом легких». Журнал апитерапии и природы 1 (2018 г. ): 10-10
RIS TY - JOUR T1 - Гепатопротекторная активность индонезийского прополиса пчел без жала в отношении токсичности противотуберкулезного препарата у пациентов с туберкулезом легких AU - Ахмад Сулаеман , M Mahanı , HARDINSYAH Hardınsyah , Э Дарма , С.Р. Мубароках , Нурджанах 1-й год - 2018 г. PY - 2018 N1 - ДЕЛАТЬ - T2 - Журнал апитерапии и природы JF - Журнал JO - JOR СП - 10 EP - 10 ВЛ - 1 ИС - 3 СН - -2667-4734 M3 - UR - 2 год - 2021 г. ER -
EndNote % 0 Журнал апитерапии и природы гепатопротекторной активности индонезийского прополиса пчел без жала в отношении токсичности противотуберкулезного препарата у пациентов с туберкулезом легких % A Ахмад Сулейман , M Mahanı , HARDINSYAH Hardınsyah , Э Дарма , С.Р. Мубароках , Нурджанах % T Гепатопротекторная активность индонезийского пчелиного прополиса без жала в отношении токсичности противотуберкулезного препарата у пациентов с туберкулезом легких % D 2018 % J Журнал апитерапии и природы % P -2667-4734 % V 1 % N 3 % R% U
ISNAD Сулаеман, Ахмад , Махани, М , Hardınsyah, HARDINSYAH , Дарма, E , Мубароках, С.Р. , Нурджана, N . «Гепатопротекторная активность индонезийского прополиса пчел без жала в отношении токсичности противотуберкулезного препарата у пациентов с туберкулезом легких». Журнал апитерапии и природы 1 / 3 (Декабрь 2018 г.): 10-10 .
АМА Сулаеман А. , Махани М. , Хардинсьях Х. , Дарма Э., Мубарок С. Р. , Нурджана Н. Гепатопротекторная активность индонезийского прополиса пчел без жала в отношении токсичности противотуберкулезного препарата у пациентов с туберкулезом легких. Дж.Апит.Нат .. 2018; 1 (3): 10-10.
Ванкувер Сулаеман А., Махани М. , Хардинсьях Х. , Дарма Э. , Мубарок С. Р. , Нурджана Н.Гепатопротекторная активность индонезийского прополиса пчел без жала в отношении токсичности противотуберкулезного препарата у пациентов с туберкулезом легких. Журнал апитерапии и природы. 2018; 1 (3): 10-10.
IEEE А. Сулаеман , М. Махани , H.Hardınsyah , Э. Дарма , С. Р. Мубароках и Н. Нурджанах , «Гепатопротекторная активность индонезийского прополиса пчел без жала в отношении токсичности противотуберкулезного препарата у пациентов с туберкулезом легких», Журнал апитерапии и природы , т.1, нет. 3, стр. 10-10 декабря 2018 г.

Каковы преимущества пчелиного прополиса?

  1. Дом
  2. Здоровье и благополучие
  3. Сбалансированная жизнь
  4. Оздоровительные процедуры

Я недавно читал про пчелиный прополис.Кажется интересным. Есть предположения?

Эндрю Вейл, доктор медицины | 11 января 2008 г.

Пчелы производят прополис, который они используют для склеивания материалов своих ульев, смешивая пчелиный воск и другие выделения со смолами из почек хвойных деревьев и тополей. Эти смолы обладают естественными бактерицидными свойствами. На протяжении веков люди использовали прополис для лечения ран и как средство от различных недугов, от прыщей до рака, остеопороза, зуда и туберкулеза. Сегодня прополис используется в производстве жевательной резинки, косметики, кремов, пастилок и мазей и исследуется в качестве зубного герметика и отвердителя зубной эмали.В ряде исследований была проверена его эффективность на людях и животных в качестве лечения ожогов, мелких ран, инфекций, воспалительных заболеваний, зубной боли и генитального герпеса. Хотя результаты этих исследований многообещающие, они являются предварительными. (Некоторые исследования были слишком маленькими и плохо спланированными, чтобы дать значимые результаты.)

Однако прополис действительно обладает доказанными антибиотическими и антисептическими свойствами, а также может оказывать противовирусное и противовоспалительное действие. Считаю его безопасным и полезным в качестве домашнего средства.Вы можете найти его в различных формах в магазинах здорового питания или получить сырье у пчеловодов. Я рекомендую его как хорошее средство для местного лечения неосложненных ран, а при использовании в виде полоскания или в виде спрея - как средство от язв и раздражений во рту. Я использую прополис в виде настойки для лечения язвы и боли в горле.

Если у вас была аллергическая реакция или реакция гиперчувствительности на укусы пчел или продукты пчеловодства (включая мед), вы можете отреагировать на прополис точно так же. История реакций на черный тополь, бутоны тополя или перуанский бальзам также может указывать на риск реакции на прополис.У некоторых людей частое употребление прополиса также может вызывать такие реакции, как отек, скопление жидкости, покраснение, жжение, экзема и лихорадка.

Эндрю Вейл, доктор медицины

Прополис имеет массу преимуществ

[Observer] Прополис, полученный из ульев, рекламируется как средство от множества недугов - простуды, язвенной болезни, кашля, туберкулеза, зубной боли, герпеса (тех ран, которые обычно «растут» в уголках рта, и мы связываем их с малярией) , генитальный герпес, а также рак носа и горла.

Ссылки по теме:

Позитронно-эмиссионная томография (ПЭТ) - это чрезвычайно чувствительный метод молекулярной визуализации, широко применяемый в диагностике и мониторинге рака. Было разработано множество лигандов, меченных изотопами, излучающими позитроны, которые представляют интерес в области визуализации рака. Этот обзор призван предоставить обзор и перспективы ПЭТ в области онкологии с использованием радиоиндикаторов, помимо широко распространенной в настоящее время 2-дезокси-2- [18F] -фтор-D-глюкозы (18F-FDG).Особое внимание уделяется роли ПЭТ в понимании и мониторинге микросреды опухоли (TME) в ответ на химиолучевую терапию.

Источник: Клиническая радиология - Категория: Радиология Авторы: Дэвид М.Л. Лилберн, Эшли М. Гровс Тип источника: исследование

Вывод: В нашем исследовании сообщается о высокой распространенности субклинической криптококковой антигенемии и подтверждается важность туберкулеза и положительного sCrAg как факторов риска смертности при запущенной стадии ВИЧ-инфекции (AHD).Таким образом, скрининг на туберкулез и sCrAg остается важным компонентом пакета AHD, поэтому он всегда должен быть частью комплексной клинической оценки пациентов с AHD.

Источник: СПИД - Категория: Инфекционные болезни Теги: КЛИНИЧЕСКИЕ НАУКИ Тип источника: исследования

Введение: Анальные кондиломы связаны с инфекцией вируса папилломы человека (ВПЧ) и являются фактором риска плоскоклеточного рака заднего прохода (SCC).Задача: Провести метаанализ для оценки распространенности анального ВПЧ высокого риска, плоскоклеточных интраэпителиальных поражений высокой степени (HSIL) и SCC у пациентов с кондиломами. Также были рассчитаны стандартизованный коэффициент заболеваемости (SIR) и частота анального SCC. Методы: До апреля 2020 года был проведен поиск в трех электронных базах данных. Мета-анализ проводился с использованием моделей случайных эффектов. Полученные результаты: Общая оценка распространенности ВПЧ высокого риска (HR-HP...

Источник: СПИД - Категория: Инфекционные болезни Теги: КЛИНИЧЕСКИЕ НАУКИ Тип источника: исследования

Цели: Гепатоцеллюлярная карцинома (ГЦК) стала серьезной проблемой у пациентов с коинфекцией ВИЧ / ВГС с циррозом печени. Мы стремились определить частоту возникновения ГЦК после лечения противовирусными препаратами прямого действия (ПППД) и оценить факторы, связанные с риском ГЦК в этой популяции.Дизайн: В период с октября 2014 г. по январь 2017 г. мы провели ретроспективное многоцентровое обсервационное исследование с участием пациентов с коинфекцией ВИЧ / ВГС с циррозом печени, получавших ПППД. Методы: Мы собрали демографические характеристики, данные относительно инфекций ВИЧ и ВГС и лечения с помощью ПППД. Мы исследовали скорость ...

Источник: СПИД - Категория: Инфекционные заболевания Теги: КЛИНИЧЕСКИЕ НАУКИ: КОНКУРЕНТАЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ Тип источника: исследования Выводы.

Выводы В этом клиническом опыте из реальной жизни ленватиниб показал интересные результаты в качестве спасательной терапии у пациентов с прогрессирующими метастатическими МРК. Его полезность может быть эффективной у пациентов без какого-либо другого доступного лечения, потому что ранее использовалась или непригодна, особенно с отрицательным статусом RET без доступа к новым высокоселективным целевым методам лечения.

Заключение Трабекулярная микроархитектура, оцененная с помощью TBS, была сходной у женщин, получавших длительную супрессивную терапию в DTC, и у женщин, получавших заместительную терапию LT4, направленную на достижение уровня ТТГ в пределах низко-нормального референсного диапазона.Низкие значения TBS наблюдались у женщин в постменопаузе обеих групп, что позволяет предположить, что не только подавленный уровень ТТГ, но также низкий-нормальный ТТГ связан с ухудшением микроархитектуры кости у женщин в постменопаузе после тотальной тиреоидэктомии.

Выводы Мы разработали и проверили модель трех иммунных генов для PTC, которая включает HSPA1A, NOX5 и FGF23. Эта модель может использоваться в качестве проверенного инструмента для прогнозирования результатов в PTC.

Мы сообщаем о трех пациентах, у которых метастазы в печень, вызванные некожной меланомой, лечили с помощью гепатэктомии в сочетании с терапией ICI, которая применялась в различных условиях.Один пациент получил лечение ICI по поводу рецидива меланомы и выжил 107 месяцев после первой гепатэктомии, один пациент получил как предоперационное, так и адъювантное лечение ICI и не болел в течение 27 месяцев, а другой пациент получил послеоперационное лечение ICI после редукционной гепатэктомии и был жив с болезнью 47 мес. Поскольку возможно длительное выживание, гепатэктомия в сочетании с ...

Mahasiswa UMY Kemukakan Propolis Sebagai Obat TBC - Universitas Muhammadiyah Yogyakarta

Туберкулез (TBC) merupakan salah satu dari penyakit yang berbahaya bagi manusia.Penyakit yang menyerang paru- paru dapat menyebabkan korban batuk berdahak disertai bintik darah dan bisa berakibat pada kematian. Obat Untuk penyakit TBC ini sangat sedikit, sehingga ini yang menjadikan alasan bagi mahasiswa FKIK UMY untuk mengembangkan obat alternatif bagi pasien TBC yaitu propolis .

Mahasiswa Fakultas Kedokteran дан Ilmu Kesehatan UMY, Herlambang Pranandaru mengatakan bahwa obat Untuk TBC yang ada sekarang sangat minim, yaitu Obat Anti Tuberkulosis ombat () ()«Awalnya lomba karya ilmiah, terus kita menemukan bahwa propolis dapatmbantu dalam penyembuhan TBC. Maka kita sepakat Untuk melakukan penelitian lebih lanjut, mengingat belum ada penelitan tentang efektifitas propolis dalam menghambat Mycobacterium tuberculosis pada tubuh manusia ”, jelas Herlangi, 910, 910, Jelas Herlambang di.

Herlambang mengatakan bahwa propolis dapat memberu penyembuhan dari penyakit tuberkulosis karena di dalam propolis terdapat zat yang sangat kuat untuk menolak bakteri, sehingga dapkat menyembuh. прополис ini juga members lebah untuk mempertahankan sarangnya dari gangguan bakteri. « прополис digunakan lebah untuk menolak bakteri, maka kami mancoba untuk manusia. Kita ketahui bahwa TBC янь berasal дари bakteri jahat, ternyata dapat dikalahkan dengan propolis ini », jelas mahasiswa FKIK UMY angkatan 2009 ini.

Sedangkan Adi Sembedo yang juga anggota kelompok penelitian propolis untuk TBC, mengatakan bahwa propolis ini dapat meningkatkan imunitas dalam tubuh manusia.Личинка Sebagaimana lebah yang terlindung dari bakteri karena dijaga oleh zat propolis . «Kita mencoba pada 30 responseden, terbukti propolis dapat menyembuhkan TBC, meski mungkin ada juga faktor lain yang mendukung kesembuhanya», уджарня.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *